CN109258303A - 灵芝菌液的制备方法、灵芝菌液及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种灵芝菌液的制备方法,其包括如下步骤:S1、将灵芝液体菌种接种到马铃薯葡萄糖水中;S2、将接种有灵芝液体菌种的马铃薯葡萄糖水置于摇床上培养3‑6天,以获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且所述摇床温度为25‑30℃,转速为80‑120r/min;以及S3、对得到的灵芝菌液中的灵芝菌丝体进行种属鉴定。其可提高灵芝增殖效率,降低其生产成本,同时,制备获得的灵芝菌液可显著改善啮齿类经济动物的肉品质和营养物质沉积状况,可有效达到提高养殖啮齿类经济动物经济效益的目的。
Description
技术领域
本发明涉及畜牧养殖领域,尤其涉及一种灵芝菌液的制备方法、灵芝菌液及其应用。
背景技术
迄今已有多项研究表明灵芝具有多种功效,如保肝解毒,降低血胆固醇、脂蛋白和提高免疫力等,其中无柄灵芝与赤芝、紫芝等有柄灵芝相似,也含有丰富的三萜类和生物碱,其具有安神定志、补肺益肾、和胃健脾等作用。但综合目前研究报道,研究重心多聚焦于赤芝、紫芝,而对于分布最为广泛的无柄灵芝却罕见于报道,且国家药典也无收录。
另一方面,伴随着灵芝快速液体培养技术的成熟,灵芝的生产效率显著提高,生产成本显著降低,使得其在养殖业中应用的想法变成了现实。而灵芝在养殖领域的应用研究主要集中在对抗氧化及调节免疫等方向,但尚无对动物肉品质和营养物质沉积的影响从而增加经济效益的相关研究。
此外,竹鼠和海狸鼠等啮齿类特种经济动物具有较高的经济、食用和药用价值。其中有研究表明,竹鼠肉中营养物质丰富,特别是氨基酸种类齐全,包含人体所需的多种必需氨基酸,且蛋白含量高于多种动物,是一种味道鲜美的保健食品。但当前啮齿类经济动物的养殖仍尚于初级阶段,对于其营养需求,乃至营养添加剂、性状改善剂等研究仍处于空白状态。故如何通过添加剂的运用,进而提高特种经济动物的经济附加值值得深入研究(如:改善肉品质、改善皮毛表观性状等);此外,灵芝作为一种名贵的真菌,要大量投入到养殖业的生产一线上具有一定的局限性,高昂的价格必然会导致养殖成本的增加。因此,如何通过高效的培养方式降低灵芝的应用成本,是亟待解决的问题。
发明内容
本发明针对现有技术的上述缺陷,提供一种灵芝菌液的制备方法、灵芝菌液及其应用,该制备方法可提高灵芝增殖效率,降低其生产成本,同时,制备获得的灵芝菌液可显著改善啮齿类经济动物的肉品质和营养物质沉积状况,可有效达到提高养殖啮齿类经济动物经济效益的目的。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
提供一种灵芝菌液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、将灵芝液体菌种接种到马铃薯葡萄糖水中;
S2、将接种有灵芝液体菌种的马铃薯葡萄糖水置于摇床上培养3-6天,以获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且所述摇床温度为25-30℃,转速为80-120r/min;
以及S3、对得到的灵芝菌液中的灵芝菌丝体进行种属鉴定。
优选的,所述步骤S1中,所述灵芝为无柄灵芝。
优选的,所述步骤S1中,所述马铃薯葡萄糖水的制备过程包括:
S11、按照马铃薯:水:葡萄糖=(180-220)g:1L:(12-18)g的比例准备所述马铃薯、水以及葡萄糖;
S12、将所述马铃薯以及水的混合物煮沸20-40mim;
以及S13、对经步骤S12煮沸的所述马铃薯以及水的混合物进行过滤,并在过滤之后的液体部分中添加所述比例的葡萄糖,然后高压灭菌,即得到所述马铃薯葡萄糖水。
优选的,所述步骤S1中,所述灵芝液体菌种的制备包括如下步骤:
S11’、选取健康幼嫩的灵芝子实体进行组织分离,且将分离出的子实体放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,在25-30℃条件下培养4-6天;
S12’、待所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基上长出菌丝后,选择健康的菌丝进行液体培养基培养,并不断纯化,纱布过滤后获得纯种灵芝菌丝体;
S13’、将所述纯种灵芝菌丝体用清水冲洗数次,称重后研磨成糊状,再按照体积比糊状纯种灵芝菌丝体:马铃薯葡萄糖水=(0.5-1):100的比例配制获得所述灵芝液体菌种。
一方面,提供一种灵芝菌液,所述灵芝菌液由上述制备方法制备得到。
一方面,提供一种动物饲料,所述动物饲料中添加有上述灵芝菌液。
一方面,还提供一种动物养殖方法,在动物饲养过程中使用上述动物饲料和/或在饮水中添加上述灵芝菌液。
另一方面,还提供一种改善肉品质的啮齿动物模型制备方法,其包括如下步骤:
S100、通过上述制备方法获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且对所述灵芝菌液进行固态分离,以获得其中包含的灵芝菌丝体以及不含所述灵芝菌丝体的灵芝菌液;
S200、对啮齿动物进行分组,分为马铃薯葡萄糖培养液对照组、灵芝菌液组和灵芝菌丝体组,每组4个重复,每个重复3只啮齿动物;
S300、采用马铃薯葡萄糖水对马铃薯葡萄糖培养液对照组的啮齿动物进行灌胃,采用不含灵芝菌丝体的灵芝菌液对所述灵芝菌液组的啮齿动物进行灌胃,采用灵芝菌丝体对所述灵芝菌丝体组的啮齿动物进行灌胃;且上述三项灌胃过程均持续4周,灌胃标准均为10ml/kg.bw,且均为每天上午9:00灌胃一次;
以及S400、灌胃结束后,各组啮齿动物禁食12h,进行全屠宰试验,采集样本,并进行指标测试。
优选的,所述啮齿动物为SD大鼠或竹鼠或海狸鼠,每只体重约60g。
优选的,采用灵芝菌丝体对所述灵芝菌丝体组的啮齿动物进行灌胃前,要对所述灵芝菌丝体进行预处理,所述预处理过程包括:用蒸馏水对经过固液分离得到的灵芝菌丝体进行冲洗,且冲洗后进行研磨,以获得流质状的灵芝菌丝体。
本发明技术方案的有益效果在于:
本发明的灵芝菌液制备方法步骤简单,成本低,且可促进灵芝菌种的扩增繁殖;此外,灌胃无柄灵芝培养物均可提高动物肉质品质,可为竹鼠、海狸鼠等特种经济啮齿类动物的养殖提供数据参考。
附图说明
下面将结合附图及实施例对本发明作进一步说明,附图中:
图1是本发明的实施例一中灵芝菌液的制备方法的步骤流程图;
图2是本发明的实施例四中动物肉中总蛋白的含量数据;
图3是本发明的实施例四中动物肉中肌苷酸的含量数据。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案以及优点更加清楚明白,以下结合附图和实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例一:
图1示出了本实施例中灵芝菌液的制备方法,其包括如下步骤:
S1、将灵芝液体菌种接种到马铃薯葡萄糖水中;其中,所述灵芝优选为无柄灵芝,接种比例为:每100ml马铃薯葡萄糖水中接种3-8ml(优选为5ml)灵芝液体菌种;所述马铃薯葡萄糖水的制备包括如下步骤:
S11、按照马铃薯:水:葡萄糖=(180-220)g:1L:(12-18)g的比例准备所述马铃薯、水以及葡萄糖;优选的,所述马铃薯、葡糖糖以及水的比例为200g:1L:15g;
S12、将所述马铃薯以及水的混合物煮沸20-40mim(优选为30min);
以及S13、对经步骤S12煮沸的所述马铃薯以及水的混合物进行过滤,并在过滤之后的液体部分中添加所述比例的葡萄糖,然后高压灭菌,即得到所述马铃薯葡萄糖水;
S2、将接种有灵芝液体菌种的马铃薯葡萄糖水置于摇床上培养3-6天(优选为4天),以获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且所述摇床温度为25-30℃(优选为28℃),转速为80-120r/min(优选为100r/min);
S3、对得到的灵芝菌液中的灵芝菌丝体进行种属鉴定,确定灵芝菌液中的菌种与无柄灵芝的相似度为99%。
进一步的,所述灵芝液体菌种的制备包括如下步骤:
S11’、选取健康幼嫩的灵芝子实体进行组织分离,且将分离出的子实体放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,在25-30℃(优选为28℃)条件下培养4-6天(优选为5天);
S12’、待所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基上长出菌丝后,选择健康的菌丝进行液体培养基(如马铃薯葡萄糖水)培养,并不断纯化,纱布过滤后获得纯种灵芝菌丝体,并进行保种处理;
S13’、将所述纯种灵芝菌丝体用清水冲洗数次,称重后研磨成糊状,再按照体积比糊状纯种灵芝菌丝体:马铃薯葡萄糖水=(0.5-1):100(v/v)的比例配制获得所述灵芝液体菌种。
本实施例中用马铃薯葡萄糖水代替传统的马铃薯葡萄糖琼脂培养基,一方面,其省略了传统马铃薯葡萄糖琼脂培养基制备中添加的琼脂的步骤,减少了制备时间(如省略了琼脂融化、冷却凝固步骤)和生产成本(不需要添加琼脂),但其营养组成基本相同,不影响菌种繁殖,进一步的,相对于固态的马铃薯葡萄糖琼脂培养基而言,液态的马铃薯葡萄糖水可使菌种完全浸泡在培养基中,与培养基中营养物质充分接触,从而促进灵芝对影响物质进行全方位、高效、快速的吸收,使其快速高效的繁殖扩增,由此提高了繁殖效率。
实施例二:
本实施例提供了一种通过上述实施例一的方法制备获得的灵芝菌液。
实施例三:
本实施例主要涉及实施例二中的灵芝菌液的应用,其具体包括提供一种添加有实施例二中的灵芝菌液的动物饲料;以及提供一种动物养殖方法,其包括在动物饲养过程中使用上述动物饲料和/或在饮水中添加实施例二中的灵芝菌液。优选的,所述动物包括啮齿动物,且所述啮齿动物为特种经济类啮齿动物,具体包括大鼠、小鼠、竹鼠以及海狸鼠中的一种或多种。
实施例四:
本实施例提供了一种改善肉品质的啮齿动物模型制备方法,其包括如下步骤:
S100、通过如实施例一所述的制备方法获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且对所述灵芝菌液进行固液分离(如过滤),以获得灵芝菌丝体以及不含灵芝菌丝体的灵芝菌液;本实施例中,所述啮齿动物优选为从广东省医学实验动物中心购买的36只健康3周龄雄性SD大鼠或竹鼠或海狸鼠,每只体重约60g;
S200、对啮齿动物进行分组,分为马铃薯葡萄糖培养液对照组、灵芝菌液组和灵芝菌丝体组,每组4个重复,每个重复3只啮齿动物;
S300、将各组的啮齿动物均饲养在28±2℃,相对湿度为50-70%的金属笼中,饲养环境噪音小,自由采食、饮水,饲养3天后开始试验,试验前清空料槽中饲料;
所述实验过程包括:将啮齿动物饲料分为3袋,马铃薯葡萄糖培养液对照组、灵芝菌液组和灵芝菌丝体组各配备一袋饲料,采用实施例一中的马铃薯葡萄糖水对马铃薯葡萄糖培养液对照组的啮齿动物进行灌胃,采用不含灵芝菌丝体的灵芝菌液对所述灵芝液组的啮齿动物进行灌胃,采用灵芝菌丝体对所述灵芝菌丝体组的啮齿动物进行灌胃;优选的,采用灵芝菌丝体进行灌胃前,要对所述灵芝菌丝体进行预处理,所述预处理过程包括:用蒸馏水对经过固液分离得到的灵芝菌丝体进行冲洗,且冲洗后进行研磨,以获得流质状的灵芝菌丝体;且上述三项灌胃过程均持续4周,每组每周称一次剩余饲料重量,灌胃标准均为10ml/kg.bw,且均为每天上午9:00灌胃一次;
以及S400、灌胃结束后,各组啮齿动物禁食12h,进行全屠宰试验,采集样本,并进行指标测试;其具体包括:称重后乙醚麻醉,腹腔静脉采血5ml,4000r/min离心5min分离血清,编号后于-80℃保存备用;解剖动物,取肝脏、心脏、肾脏、脾脏和肺并称重,取背肌备用,取盲肠食糜于2ml离心管中备用;样品采集后放-80℃冰箱保存待用。
表1示出了灵芝对啮齿动物肉品质表观性状的改善结果:
表1无柄灵芝对啮齿动物肉品质表观性状的改善
注:表中数据为平均值±标准误(n=12),同行肩注不同字母表示差异显著(P<0.05),含相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。
肉品质物理指标包括pH值、肉色、剪切力、失水率和蒸煮损失等。肌肉pH值作为评价肉品质的重要指标,不仅可以直观表现肌肉的酸度,反映机体在屠宰后肌肉中糖原酵解的速度,也是肉质正常与否的重要判断依据,因而成为评定肉品质的最重要参考指标之一,且它对肌肉的肉色、嫩度、滴水损失等指标也有直接影响。
动物屠宰后肌肉仍在进行新陈代谢,由于没有氧气的供应,肌糖原代谢的主要方式由有氧氧化转变为无氧酵解,因此肌肉中的乳酸沉积下来,最终导致了肌肉中pH值的变化。动物屠宰时肌肉中肌糖原的含量直接决定了在屠宰后pH值的下降趋势,因此动物屠宰时,肌肉中糖原含量越高,屠宰后肌肉的最终pH值就越低。本实施例中,与对照组比较,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组的动物宰后45min的pH值显著低于对照组(P<0.05),其原因是由于灵芝菌液组和灵芝菌丝体组的动物屠宰后,肉中的肌糖原无氧氧化产生乳酸,进而导致其比对照组的pH值低,进一步的,大量乳酸被分解为二氧化碳、水、酒精,大分子三磷酸腺苷在酶的作用下生成鲜味物质,由此增加灵芝菌液组和灵芝菌丝体组的动物屠宰后肉的口感。
肌肉本身的微生物学、生理学和生物化学的变化由肉色从外部表现,作为比较直观的肉质性状,是评价肌肉的一个重要指标,虽然肉色与肉的营养价值及风味没有直接必然关系,但它对人的感官由一定的影响,即消费者的认同程度取决于肉色的好坏。肌肉中的肌红蛋白和血红蛋白含量及其存在形式决定了肌肉的颜色,其次反射和氧化作用也会影响肉的色泽,越高含量的肌红蛋白,肌肉的颜色越红,其中反映肉色的3个指标分别是亮度(L*)、红度(a*)以及黄度(b*)。本实施例中,对照组和灵芝菌丝体组的大鼠肌肉L*值均显著低于灵芝菌液组,对照组和灵芝菌液组的a*值显著高于菌丝体组,灵芝菌液组的b*值显著低于菌丝体组,其表明灌胃灵芝菌液组的大鼠肉具有较好色泽,能得到消费者的认可。
图2中示出了灵芝对啮齿动物肉中总蛋白含量的改善结果,其中,图2数据为平均值±标准误(n=12),同行肩注不同字母表示差异显著(P<0.05),含相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。从图2中可以看出,从鼠肉中总蛋白含量分析,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组均高于对照组,灵芝菌液组的总蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),而灵芝菌丝体组肉总蛋白高于对照组,但无显著性差异(P>0.05),表明灌胃灵芝液体培养物可以提高动物肉的营养价值。
表2为灵芝对SD大鼠肉中氨基酸含量的改善结果:
表2灵芝对啮齿动物肉中氨基酸含量的改善
注:表中数据为平均值±标准误(n=12),同行肩注不同字母表示差异显著(P<0.05),含相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。氨基酸是肌肉中重要的鲜味和香味的前体物质,其中氨基酸的种类、含量及组成比例都决定着肉品味的优劣。许多研究表明,畜禽肌肉鲜味主要基本成分是谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly),其中对鲜味贡献最为显著的是谷氨酸,谷氨酸和天冬氨酸为呈鲜味的氨基酸,与咸味有关,有缓冲碱、酸等不良味道,呈现出鲜美肉味的作用,而甘氨酸是呈甘味的氨基酸。
本实施例中,由表3可知,测定的17种氨基酸的含量比较,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组各氨基酸基本都高于对照组,其中灵芝菌液组在天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸等12种氨基酸含量显著高于对照组(P<0.05),灵芝菌丝体组与对照组相比均无显著性差异(0.05<P<0.10),但有显著提高的趋势。试验结果显示,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组的鼠肉具有较高风味,而且营养价值高于一般鼠肉。在啮齿动物肉检测出的各种氨基酸,表明大鼠肉中氨基酸种类丰富,其中含有7中人体必需的氨基酸(Lys、Ile、Leu、Val、Thr、Phe)。
图3示出了灵芝对啮齿动物肌肉中肌苷酸含量的改善结果,肌苷酸是一种白色晶体,易溶于水,在水和碱溶液中稳定的芳香族化合物,空间结构具有专一性,重要的定位基是核糖骨架及磷酸骨架。根据目前的研究结果,氨基酸和肌苷酸(IMP)对鲜味的贡献最大,其中肌苷酸是对肌肉鲜味有主要影响的成分,肌苷酸含量已经成为国际公认的衡量肉鲜味优劣的重要指标。肌肉中的肌苷酸能抑制酸味和苦味,起到缓冲味觉的作用,还可以和谷氨酸钠等风味物质结合,达到协同效应,进而增加肉的鲜味。肌苷酸是由肌肉收缩过程中肌细胞内三磷酸腺苷(ATP)分解产生的,肌肉中的ATP在ATP酶的作用下分解产生二磷酸腺苷(ADP),ADP再分解产生一磷酸腺苷(AMP),最终AMP在腺苷脱氢酶的作用下形成肌苷酸。从图3可知,与对照组相比,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组鲜肉中肌苷酸含量差异不显著(0.05<P<0.10),但有明显的增长趋势,表明给大鼠灌胃灵芝液体培养物可以提高肉中肌苷酸的含量,提高肉品风味。
表3示出了不同处理组中啮齿动物增重的变化情况:
表3不同处理组对啮齿动物增重的影响
注:表中数据为平均值±标准误(n=12),同行肩注不同字母表示差异显著(P<0.05),含相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。
通过对饲养动物的平均日增重和饲料转化率的计算,可以直观的反映添加剂有效性。本试验中,灵芝菌液组和灵芝菌丝体组的平均日增重、平均日采食量和饲料转化率,与对照组比较差异不显著(P>0.05),但试验组的饲料转化率都下降,表明无柄灵芝具有作为营养物质的作用,其中含有动物生长发育所必需的营养物质,如多糖、蛋白质、氨基酸等;还有可能是灵芝中含有一些活性成分,如多糖、多肽、生物碱、三萜类、有机锗等。综上所述,灵芝可以增强动物体质,减少动物患病,而且可以平衡大鼠的日粮,起到提高饲料报酬的作用,降低畜牧生产中的养殖成本。
表5示出了灵芝对啮齿动物内脏器官指数的影响:
表5无柄灵芝对啮齿动物内脏器官指数的影响
在一定程度上,动物机体的健康程度可以由内脏器官指数反映,肝脏和肾脏是机体新陈代谢的主要器官,其中肝脏是重要的消化腺,脾脏是免疫系统中最大的器官,其功能正常与否可以间接反映机体的健康状况。从表5可知,菌液组和菌丝体组与对照组相比,内脏器官心、肝、脾、肾、胸腺指数均无显著性差异(P>0.05),表明无柄灵芝培养后的菌液或菌丝体都对机体器官和系统无明显的毒害或损伤作用,可以放心的应用在鼠类的日粮中。
综上所述,从肉品的表观性状比较,与对照组相比,灌胃无柄灵芝菌液组和菌丝体组的啮齿动物肉的45minpH分别降低5.6%、3.8%,肉色亮度分别提高15.0%、7.3%。从营养物质沉积和风味物质含量方面考虑,与对照组相比,灌胃无柄灵芝菌液组和菌丝体组的大鼠肉中总蛋白含量分别提高26.0%、7.7%,其中灌胃无柄灵芝菌液组显著提高天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸含量,分别提高了21.8%、23.8%、22.1%、22.1%、22.6%、21.7%、40.9%、22.4%、28.3%、24.1%、25.7%、23.4%,肌苷酸含量分别提高4.0%、0.5%。从无柄灵芝饲用的安全性进行评估,试验组的生长性能和脏器指数与对照组之间无显著差异,可在养殖业中投入使用。
需要说明的是,上述实施例一至四中的技术特征可进行任意组合,组合而成的技术方案均属于本发明的保护范围。
综上所述,本发明的灵芝菌液制备方法步骤简单,成本低,且可促进灵芝菌种的扩增繁殖;此外,灌胃无柄灵芝培养物均可提高肉质表观性状、总蛋白、氨基酸及肌苷酸的含量,其中灵芝菌液组显著提高肉中总蛋白和部分氨基酸的含量,因此无柄灵芝液体培养物可以提高鼠类肉品质量和增加营养物质沉积,且无柄灵芝菌液的效果更佳。此外,无柄灵芝菌液和菌丝体对啮齿动物的生产性能、器官指数无显著影响,从安全方面考虑,无柄灵芝培养物对鼠类正常的生长发育无损害作用,可为竹鼠、海狸鼠等特种经济啮齿类动物的养殖提供数据参考。
Claims (10)
1.一种灵芝菌液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、将灵芝液体菌种接种到马铃薯葡萄糖水中;
S2、将接种有灵芝液体菌种的马铃薯葡萄糖水置于摇床上培养3-6天,以获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且所述摇床温度为25-30℃,转速为80-120r/min;
以及S3、对得到的灵芝菌液中的灵芝菌丝体进行种属鉴定。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述灵芝为无柄灵芝。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述马铃薯葡萄糖水的制备过程包括:
S11、按照马铃薯:水:葡萄糖=(180-220)g:1L:(12-18)g的比例准备所述马铃薯、水以及葡萄糖;
S12、将所述马铃薯以及水的混合物煮沸20-40mim;
以及S13、对经步骤S12煮沸的所述马铃薯以及水的混合物进行过滤,并在过滤之后的液体部分中添加所述比例的葡萄糖,然后高压灭菌,即得到所述马铃薯葡萄糖水。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述灵芝液体菌种的制备包括如下步骤:
S11’、选取健康幼嫩的灵芝子实体进行组织分离,且将分离出的子实体放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,在25-30℃条件下培养4-6天;
S12’、待所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基上长出菌丝后,选择健康的菌丝进行液体培养基培养,并不断纯化,纱布过滤后获得纯种灵芝菌丝体;
S13’、将所述纯种灵芝菌丝体用清水冲洗数次,称重后研磨成糊状,再按照体积比糊状纯种灵芝菌丝体:马铃薯葡萄糖水=(0.5-1):100的比例配制获得所述灵芝液体菌种。
5.一种灵芝菌液,其特征在于,所述灵芝菌液由如权利要求1-4任一项所述的制备方法制备得到。
6.一种动物饲料,其特征在于,所述动物饲料中添加有如权利要求5所述的灵芝菌液。
7.一种动物养殖方法,其特征在于,在动物饲养过程中使用如权利要求6所述的动物饲料和/或在饮水中添加如权利要求5所述的灵芝菌液。
8.一种改善肉品质的啮齿动物模型制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S100、通过权利要求1-4任一项所述的制备方法获得具有灵芝菌丝体的灵芝菌液,且对所述灵芝菌液进行固态分离,以获得其中包含的灵芝菌丝体以及不含所述灵芝菌丝体的灵芝菌液;
S200、对啮齿动物进行分组,分为马铃薯葡萄糖培养液对照组、灵芝菌液组和灵芝菌丝体组,每组4个重复,每个重复3只啮齿动物;
S300、采用马铃薯葡萄糖水对马铃薯葡萄糖培养液对照组的啮齿动物进行灌胃,采用不含灵芝菌丝体的灵芝菌液对所述灵芝菌液组的啮齿动物进行灌胃,采用灵芝菌丝体对所述灵芝菌丝体组的啮齿动物进行灌胃;且上述三项灌胃过程均持续4周,灌胃标准均为10ml/kg.bw,且均为每天上午9:00灌胃一次;
以及S400、灌胃结束后,各组啮齿动物禁食12h,进行全屠宰试验,采集样本,并进行指标测试。
9.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述啮齿动物为SD大鼠或竹鼠或海狸鼠,每只体重约60g。
10.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,采用灵芝菌丝体对所述灵芝菌丝体组的啮齿动物进行灌胃前。要对所述灵芝菌丝体进行预处理,所述预处理过程包括:用蒸馏水对经过固液分离得到的灵芝菌丝体进行冲洗,且冲洗后进行研磨,以获得流质状的灵芝菌丝体。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110862959A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-03-06 | 潘肖芬 | 诱导多潜能脂肪干细胞的方法 |
CN114176176A (zh) * | 2021-11-29 | 2022-03-15 | 无锡泛宁生物科技有限公司 | 一种水产动物用饲料添加剂及制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101455274A (zh) * | 2008-12-29 | 2009-06-17 | 江南大学 | 灵芝液体发酵液制备含灵芝活性成分的饲料和饲料添加剂的方法 |
CN101971912A (zh) * | 2010-10-19 | 2011-02-16 | 杨雄 | 一种灵芝饲料 |
CN101999335A (zh) * | 2010-10-19 | 2011-04-06 | 鹤山市新的生物制品有限公司 | 一种灵芝猪的养殖方法 |
CN105876143A (zh) * | 2016-04-14 | 2016-08-24 | 安徽省领航动物保健品有限责任公司 | 一种改善肉品质育肥阶段猪饲料 |
CN106619840A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-05-10 | 湖南中医药大学 | 灵芝菌在降解二苯乙烯苷中的应用 |
-
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101455274A (zh) * | 2008-12-29 | 2009-06-17 | 江南大学 | 灵芝液体发酵液制备含灵芝活性成分的饲料和饲料添加剂的方法 |
CN101971912A (zh) * | 2010-10-19 | 2011-02-16 | 杨雄 | 一种灵芝饲料 |
CN101999335A (zh) * | 2010-10-19 | 2011-04-06 | 鹤山市新的生物制品有限公司 | 一种灵芝猪的养殖方法 |
CN105876143A (zh) * | 2016-04-14 | 2016-08-24 | 安徽省领航动物保健品有限责任公司 | 一种改善肉品质育肥阶段猪饲料 |
CN106619840A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-05-10 | 湖南中医药大学 | 灵芝菌在降解二苯乙烯苷中的应用 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
丁延芹等主编: "《农业微生物学实验技术》", 30 April 2014, 北京:中国农业大学出版社 * |
包焜等: "灵芝活性组分在小鼠体内的降糖功效研究", 《中国兽药杂志》 * |
孔令武等主编: "《现代实用中药栽培养殖技术》", 31 December 2000, 北京:人民卫生出版社 * |
李敬盼等: "灵芝菌的液体培养研究及其在畜牧业的应用", 《饲料研究》 * |
黄善香主编: "《中国种植养殖技术百科全书第1卷》", 31 March 1999, 海口:南方出版社 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110862959A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-03-06 | 潘肖芬 | 诱导多潜能脂肪干细胞的方法 |
CN114176176A (zh) * | 2021-11-29 | 2022-03-15 | 无锡泛宁生物科技有限公司 | 一种水产动物用饲料添加剂及制备方法 |
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