CN109111419B - 7,8-含取代基香豆素衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属化学制药领域,涉及7,8‑含取代基香豆素衍生物及其制备方法和用途,尤其是香豆素母核上含7‑烷氧基和8‑芳酸或芳烃酸甲醇酯取代的衍生物。本发明实验显示该类衍生物对于正常细胞和耐药肿瘤细胞几乎没有毒性,与紫杉醇以及长春新碱联合用药,可以显著逆转P‑gp过表达的A2780/T和KB‑V对于药物的耐药活性,对于非P‑gp依赖的耐药肿瘤细胞则没有增加药物敏感性的作用。本发明的化合物将为深入研制能恢复P‑gp过表达导致的MDR肿瘤对于药物敏感性的增敏剂,为克服P‑gp过表达导致的肿瘤MDR奠定基础。
Description
技术领域
本发明属化学制药领域,涉及7,8-含取代基香豆素衍生物及其制备方法和用途,所述的香豆素母核上含7-烷氧基和8-芳酸或芳烃酸甲醇酯取代的衍生物及其通过逆转P-gp过表达导致肿瘤多药耐药(MDR)的活性。
背景技术
鉴于肿瘤已是影响全球人类健康的严重疾病之一,几十年来,人类已发现包括分子靶向药物在内的100多种有效的抗肿瘤药物,但是肿瘤对于传统细胞毒化疗药物以及分子靶向药物的耐药问题,渐成为临床上药物根治肿瘤的重要障碍。资料公开了药物耐药包括原发性耐药和获得性耐药两种;研究显示,导致耐药的因素很多,如:药物外泵的增加,药物代谢的改变,药物靶点的突变,肿瘤生存信号通路的激活和下游致死信号通路的失活,表观基金的改变和肿瘤微环境的影响,肿瘤干细胞以及异质性现象等。
有研究显示,一些膜转运蛋白通过增加外泵对临床使用的大部分化疗药物产生耐药,其中ABC(the ATP-binding cassette)转运蛋白超家族的三个蛋白:多药耐药蛋白1(multi-drug resistance protein 1,MDR1,即P-糖蛋白(P-gp)和ABCB1),MDR-相关蛋白1(MRP1,ABCC1)以及乳腺癌耐药蛋白(BCRP,ABCG2)与多药耐药(MDR)密切相关[Pharmacogenomics 2008,9,105-127],所述的三种蛋白具有较广泛的重叠底物,并主要外泵疏水性化合物以达到清除目的,其中,国内外对P-gp的研究相对较多,研究显示,肿瘤细胞通过高表达的P-gp,转运结构和性质多样性的药物,从而引起多药耐药现象,导致癌症治疗的失败[Nat.Rev.Drug Discov.2006,5,219-234]。因此通过寻找合适的抑制剂以阻碍P-gp对药物的泵出作用,提高肿瘤细胞内药物的蓄积浓度,克服肿瘤细胞的多药耐药性,提高疗效,是目前研究的重要策略之一。
目前,根据P-gp抑制剂的特异性、亲和力和毒性将其分为三代,其中,第一代抑制剂以维拉帕米、环孢素A为代表的钙离子拮抗剂、免疫抑制剂等药物,由于其在逆转耐药有效剂量内的明显毒性,限制了其临床应用;第二代抑制剂主要为第一代的类似物和一些具有新型结构的化合物,如环孢霉素A的氧化产物伐司扑达(valspodar),虽表现出良好药代动力学性质,但因抑制CYP3A4、降低胆汁排出及选择性不佳等问题,使得抑制剂与化疗药物之间的药代动力学变化不可预知,无法给出安全可靠的临床剂量;第三代抑制剂属于非竞争性抑制剂,以tariquidar和zosuquidar等化合物为代表,活性和选择性均优于第二代,能与P-gp结合使其丧失外排能力;并且不是CYP3A4的底物,不会改变与其联用的抗癌药物的药动学性质,也不影响ABC家族中其他蛋白的功能,但由于其临床试验结果不理想,最具前景的tariquidar等第三代抑制剂也未能成功上市。最近,如式(I)所示结构(显示了第三代P-gp抑制剂tariquidar和HM30181的化学结构式),另一个新的第三代P-gp抑制剂HM-30181[Eur.J.Pharmacol.2010,627,92-98],与拓扑异构酶抑制剂topotecan联合使用,用于治疗肺癌、结肠直肠癌、晚期实体瘤以及脑瘤,目前处在临床I期试验;2015年12月启动与紫杉醇联合使用治疗胃癌、乳腺癌、实体瘤的临床III期试验。
此外,国内外有较多文献报道,对于毒性小、来源丰富的天然产物结构改造,寻找低毒、高效P-gp抑制剂成为新的研究热点,如通过对黄酮衍生物儿茶素和杨梅素、黄体酮衍生物、海洋生物碱Ningalin B衍生物、青蒿素衍生物等天然产物修饰,获得了结构丰富的P-gp抑制剂。另有文献报道[Bioorg.Med.Chem.2008,16(7),3694–3703.],如式(II)所示(显示了吡喃环并香豆素三环天然产物PA及其衍生物DMDCK结构式),从白花前胡中提取分离得到吡喃环并香豆素三环天然产物praeruptorin A(白花前胡甲素A,PA),具有一定的多药耐药逆转活性,分子中的酯基对活性的维持有着重要的作用。通过对其进行进一步结构修饰,研究者得到了一系列(±)-3’-O,4’-O-dimethoxycinnamoyl-cis-khellactone(DCK)化合物,为非竞争性P-gp抑制剂,其中,(±)-3′-O,4′-O-dimethoxycinnamoyl-cis-khellactone(DMDCK)具有最好的活性,在耐阿霉素的肝癌细胞(HepG2/Dox)上,加药浓度为4μM时,对长春新碱、阿霉素、嘌呤霉素和紫杉醇达到110~167倍的逆转耐药活性。
基于现有技术的现状,本申请的发明人拟提供7,8-含取代基香豆素衍生物及其制备方法和用途,尤其涉及香豆素母核上含7-烷氧基和8-芳酸或芳烃酸甲醇酯取代的衍生物及其通过逆转P-gp过表达导致肿瘤多药耐药(MDR)的活性。
发明内容
本发明的目的是基于现有技术的现状,提供活性明确,尤其对P-gp依赖的MDR肿瘤耐药株有增敏作用的新型抗肿瘤药效化合物。具体涉及7,8-含取代基香豆素衍生物及其制备方法和用途,本发明的化合物(7-乙氧基-4-甲基-2-氧基-2H-色烯-8-基)甲基(E)-3-(4-甲氧基苯基)丙烯酸酯(CY-11S-2B49,4k)及其衍生物,能够用于增加紫杉醇对耐紫杉醇的卵巢癌细胞(A2780/T)和长春新碱对耐长春新碱的鼻咽癌表皮细胞(KB-V)敏感性,即分别逆转A2780/T和KB-V肿瘤细胞对紫杉醇和长春新碱的耐药。
本发明利用剖裂减环修饰手段,切开上述吡喃环并香豆素三环天然产物的吡喃环,简化三环骨架为二环香豆素母核,合成7-位烷氧基和8-位不同芳酸或者芳烃羧酸甲醇酯取代的香豆素衍生物,通过逆转多药耐药活性测试,获得合成简便、结构简化的逆转P-gp依赖的肿瘤多药耐药活性的香豆素8-位芳甲酸以及芳烃酸甲醇酯取代衍生物。
具体的,本发明对现有技术的具有逆转肿瘤耐药活性的吡喃环并香豆素三环化合物(DMDCK),进行吡喃环切除设计合成如式(III)(显示了8-芳甲酸或芳烃酸甲醇酯取代香豆素结构示意图)所示的二环香豆素衍生物,保留了耐药卵巢癌细胞(A2780/T)和鼻咽癌表皮细胞(KB-V)对紫杉醇和长春新碱的细胞毒性活性,显示了逆转肿瘤多药耐药,恢复对药物敏感性的作用。
本发明所述的化合物是7-位烷氧基取代和8-位芳酸或芳烃酸甲醇酯取代的香豆素母核衍生物。
本发明中,优选的香豆素衍生物具有式(IV)(本发明化合物I结构特征示意图)的结构,所述的衍生物为香豆素母核7-位连接烷氧基,8-位芳酸或芳烃酸甲醇酯基衍生物的I类型化合物,
其中:
n为0、1或2
R1为烷基
R2为氢原子、卤素、烷基、烷氧基、含氮基团
本发明中,更优选的式(IV)结构的香豆素衍生物中:n=0、1或2;R1为乙基和异丙基;R2为氢原子、氟原子、氯原子、甲基、叔丁基、甲氧基、硝基和氨基
本发明提供了所述的7,8-取代的香豆素母核衍生物的制备方法,其包括:
市售7-羟基香豆素在醋酸溶剂中,95℃下与六亚甲基四胺(乌洛托品)反应5小时得到7-羟基-8-醛基香豆素,然后在对甲苯磺酸催化下,苯回流分水用乙二醇对甲醛保护得到缩醛香豆素1,然后碳酸钾和碘化钾丙酮溶液中,卤代烷与7-羟基醚化反应后,用2N盐酸酸化脱除乙二醇恢复8-甲醛基,得到中间产物2a-b,进一步在甲醇中用硼氢化钠(NaBH4)还原甲醛基得到8-羟甲基产物3a-b,最后在二氯甲烷溶剂中,二甲氨基吡啶(DMAP)催化下,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)为缩合剂,与各种芳酸或芳烃酸成酯,获得目标产物4a-y;化学反应如下通式一:
通式一,
本发明所述的7-烷氧基以及8-芳酸或芳烃酸甲醇酯取代的香豆素衍生物4a-y,进行了体外逆转多药耐药抗肿瘤活性筛选试验。在体外药理实验中,以维拉帕米和顺铂为阳性对照,检验长春新碱和紫杉醇对耐长春新碱的鼻咽癌上皮细胞(KB-V)和耐紫杉醇的卵巢癌(A2780/T)的敏感增加作用。结果显示,10μM浓度下,绝大部分本发明化合物4a-y对人卵巢上皮细胞(HOSE)、脐静脉内皮细胞(HUVEC)以及永生化人类卵巢表面上皮细胞(T29)的毒性与维拉帕米相当,具有较好安全性;同时对耐药的A2780/T细胞增殖也几乎没有独立的抑制活性,但是与紫杉醇联合用药后,可以显著提高紫杉醇对耐药A2780的敏感性,耐药逆转倍数在5-733倍之间,其中化合物CY-11S-2A53(4f)、CY-11S-3A44(4p)、CY-11S-2B49(4k)和CY-11S-3B51(4w)的逆转倍数较高,分别为224、354、733和498倍,均高于阳性对照维拉帕米的逆转倍数211;
所述的四个化合物4f、4p、4k和4w对耐长春新碱KB-V细胞以及耐顺铂A2780/CDDP细胞增殖抑制实验显示,在10μM浓度下,除了化合物4p对A2780/CDDP细胞显示一定毒性外,其他均没有表现出细胞毒性;但是4f、4p、4k和4w可以增加长春新碱对KB-V的细胞增殖抑制敏感性,逆转倍数分别达到314、133、793和1257,其中4k和4w高于维拉帕米的508逆转倍数;然后,这些化合物对于耐顺铂的A2780/CDDP几乎没有逆转耐药的活性,逆转倍数分别为0.83、0.86、0.76以及0.78,维拉帕米逆转倍数只有1.07。
本发明中,用Western blot(免疫印迹法)分析,显示耐药能够被本发明化合物所逆转的A2780/T和KB-V中的P-gp为过表达,而耐药不被逆转的A2780/CDDP则为非P-gp过表达。因此,本发明所述的7-烷氧基以及8-芳基羧酸或芳基烃酸甲醇酯取代的香豆素衍生物4a-y,对于P-gp依赖的肿瘤MDR具有耐药逆转的活性,最好活性化合物的逆转倍数远高于对照的维拉帕米。
本发明中通过下述方法检测所述的化合物抑制受试细胞增殖的作用和耐药逆转活性。
1、采用MTT法检测本发明化合物抑制受试正常和肿瘤细胞增殖的活性,将对数生长期的受试细胞接种于96孔板中,分为空白对照组、阳性药对照组(顺铂、长春新碱)和不同浓度的本发明化合物处理组,37℃培养48h后进行MTT检测,计算细胞增殖抑制率及IC50;
2、应用Western blot(免疫印迹法)分析,检测本发明化合物作用的耐药肿瘤株内的P-gp表达,受试敏感和耐药细胞,培养后进行处理,收集细胞用冷PBS洗涤1次,用RIPA裂解液冰上裂解细胞30分钟,4℃、12000rpm离心15分钟,总蛋白用BCA法定量,每道30μg的上样量,经SDS-PAGE电泳后转印到聚偏二乙烯的氟化物PVDF膜上,封闭于10%脱脂奶中,依次进行一抗、二抗反应,曝光显色;
3、本发明化合物联合紫杉醇、长春新碱以及顺铂分别对A2780/T、KB-V以及A2780/CDDP细胞耐药逆转效果评价,在10μM浓度下,以维拉帕米为阳性对照,本发明化合物与不同浓度紫杉醇、长春新碱以及顺铂进行联合用药,采用方法MTT法,测试紫杉醇、长春新碱以及顺铂对A2780/T、KB-V以及A2780/CDDP细胞增殖抑制的IC50值,与单独使用紫杉醇、长春新碱以及顺铂的IC50进行对照,计算耐药逆转倍数。
本发明所述的7-烷氧基和8-芳酸或芳烃酸甲醇酯取代香豆素衍生物结构简单,对正常细胞几乎没有毒性,单独使用对肿瘤细胞增殖几乎没有抑制作用,而与紫杉醇以及长春新碱联用,可以显著逆转P-gp过表达的耐药肿瘤细胞A2780/T和KB-V耐药作用,明显增加对紫杉醇以及长春新碱的敏感性;而对于P-gp非过表达的耐顺铂的A2780/CDDP则没有耐药逆转的活性。
本发明得化合物结构不同于目前临床研究的P-gp抑制剂结构,将为提供新的具有逆转P-gp过表达MDR功能的抗肿瘤药物奠定基础。
附图说明
图1显示了耐药株及其对应敏感株中P-gp表达情况。
具体实施方式
通过以下实施方法将有助于理解本发明,但并不限制于本发明的内容。
实施例1
通式(IV)中化合物8-醛基-7-羟基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-2-酮的合成
在2L的圆底烧瓶中,加入7-羟基香豆素(40g,228mmol)和六亚甲基四胺(80g),再加入300mL冰醋酸。搅拌加热到90℃,反应5h后;加入600mL盐酸(conc.HCl:H2O=84:100v/v),70℃下继续反应1h;倾入3L水中,乙酸乙酯萃取三次,合并有机相,无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩得到黄色固体;再用2N盐酸洗三次,过滤得淡黄色固体产物(10.3g),收率22.1%,熔点120-123℃。
实施例2
通式(IV)中化合物8-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-羟基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-2-酮的合成(1)
在500mL三口瓶中加入7-羟基-8-醛基香豆素(5g,25mmol)、乙二醇(3.1g,50mmol)以及对甲苯磺酸(150mg),溶解于200mL苯中,回流分水反应2h;停止加热,加入三乙胺调节pH至7~8,反应液用饱和食盐水洗,过滤、浓缩得黄色固体用乙醇重结晶得到淡黄色固体1(4.1g),收率48.2%,熔点214~218℃。MS(EI)m/z 249.1 1H NMR(400MHz,CDCl3)。δ9.15(s,1H,7-OH),7.52(d,1H,ArH,J=8.6Hz),6.85(d,1H,ArH,J=8.6Hz),6.40(m,1H,O2CH-),6.13(s,1H,-CH=),4.14~4.26(m,4H,2×-CH2),2.39(s,3H,-CH3)。
实施例3
通式(IV)中化合物8-醛基-7-乙氧基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-2-酮的合成(2a)
在250mL的三口瓶中加入化合物1(1g,4.04mmol)、K2CO3(1.67g,12.1mmol)、KI(100mg)然后在80mL丙酮中加热至回流,然后,将溴乙烷(590mg,4.82mmol)溶解在20mL丙酮中用恒压滴液漏斗缓慢滴入反应液。反应5h后,过滤,真空除去溶剂,乙酸乙酯重结晶得黄褐色颗粒状晶体(850mg),取该晶化合物500mg放入100mL圆底烧瓶中,加入50mL 2N盐酸室温下搅拌2h后,乙酸乙酯萃取三次,合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤、浓缩得到白色固体2a,产率85.1%,熔点180-183℃。所得产物直接投下一步。
实施例4
通式(IV)中化合物8-羟甲基-7-乙氧基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-2-酮的合成(3a)
在100mL圆底烧瓶中,加入化合物2a(1g,4.4mmol)以及NaBH4(230mg,6.1mmol)在甲醇(50mL)溶剂中室温下反应2h后,加入2N盐酸调节pH至2~4。乙酸乙酯萃取三遍,无水硫酸钠干燥,过滤、浓缩得白色固体3a(1g)。产率99.0%。熔点161-164℃。m/z 249.1 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.87(d,1H,ArH,J=8.8Hz),6.16(s,1H,-CH=),4.90(s,2H,-OCH2OH),4.20(q,2H,J=6.9Hz,CH3CH2-),2.39(s,3H,-CH3),1.50(t,3H,J=6.9Hz,CH3CH2-)。
实施例5
取4-正丙基苯甲酸(62mg,0.38mmol)加入含有20mL二氯甲烷的50mL圆底烧瓶中,然后加入EDC(78mg,0.41mmol)以及DMAP(23mg,0.19mmol),0℃下反应0.5h后,加入3a(80mg,0.34mmol)并升高至室温反应5h后用2N盐酸洗一次,水洗三次,无水硫酸钠干燥。过滤、浓缩得固体,再用乙酸乙酯重结晶得白色晶体4d(70mg),产率54.2%,熔点123-125℃。ESI-MS(EI)m/z 381.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(d,2H,2×ArH,J=8.2Hz),7.58(d,ArH,1H,J=8.9Hz),7.18(d,2H,2×ArH,J=8.2Hz),6.88(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.15(s,1H,=CHCOO),5.63(s,2H,ArCHO),4.14(q,CH3CH2O,2H,J=7.0Hz),2.60(t,2H,ArCH2,J=7.60Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.62(dd,2H,CH3CH2,J=15.0,7.5Hz),1.39(t,3H,CH3CH2,J=7.0Hz),0.91(t,3H,CH3CH2,J=7.3Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.59,160.73,160.62,153.64,152.37,147.95,129.67,128.31,127.89,126.03,113.69,112.18,111.92,107.97,64.69,55.25,38.00,29.68,24.23,18.73,14.62,13.71。
实施例6
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和3,4,5,-三甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下在二氯甲烷中反应制得4a,收率55.5%,熔点217-220℃。ESI-MS(EI)m/z 429.1[M+H]+1,H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.59(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.28–7.23(m,2H,ArH),6.89(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.17(s,1H,=CHCOO),5.65(s,2H,ArCH2O),4.16(q,2H,CH3CH2,J=6.5Hz),3.87(m,9H,3×CH3O),2.42(s,3H,CH3C=),1.42(t,3H,CH3CH2,J=6.4Hz).13CNMR(101MHz,CDCl3)δ166.06,160.71,160.53,153.65,152.77,152.44,141.88,126.07,125.48,113.70,112.15,111.76,107.96,106.82,64.69,60.85,56.22,55.62,18.77,14.66。
实施例7
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和3,4-二甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4b,收率65.7%,熔点171-175℃。ESI-MS(EI)m/z 399.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62(dd,1H,ArH,J=8.4,1.9Hz),7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.53(d,1H,ArH,J=1.9Hz),6.89(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.82(d,1H,ArH,J=8.5Hz),6.16(d,1H,CH3C=CHCOO,J=1.0Hz),5.63(s,2H,ArCH2O),4.15(q,2H,CH3CH2,J=7.0Hz),3.89(d,6H,2×CH3,J=3.1Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.40(t,3H,CH3CH2,J=7.0Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.26,160.77,160.57,153.62,152.71,152.44,148.42,126.02,123.62,122.91,113.68,112.15,112.03,111.92,110.04,107.97,64.68,56.00,55.94,55.33,18.76,14.64。
实施例8
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和对甲基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4c,收率65.1%,熔点167-169℃。ESI-MS(EI)m/z 369.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(d,2H,ArH,J=8.2Hz),7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.17(d,1H,ArH,J=8.0Hz),6.88(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.16(d,1H,-CH=,J=1.1Hz),5.63(s,2H,-CH2O-),4.14(q,2H,CH3CH2-,J=7.0Hz),2.44–2.34(m,6H,2×-CH3),1.39(t,3H,CH3CH2-,J=7.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.55,160.72,160.60,153.60,152.38,143.25,129.65,128.88,127.62,126.03,113.66,112.16,111.84,107.93,64.66,55.25,21.61,18.75,14.61。
实施例9
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和对叔丁基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4e,收率79.2%,熔点148-150℃。ESI-MS(EI)m/z 395.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.93(d,2H,ArH,J=8.4Hz),7.58(d,1H,ArH,J=8.8Hz),7.39(d,2H,J=8.4Hz),6.88(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.16(s,1H,-CH=),5.64(s,2H,-CH2O-),4.14(q,2H,CH3CH2-,J=7.0Hz),2.42(s,3H,-CH3),1.40(t,3H,CH3CH2-,J=7.0Hz),1.30(s,9H,-C(CH3)3)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.49,160.72,160.58,156.20,153.62,152.36,129.47,127.59,126.01,125.14,113.66,112.16,111.89,107.92,64.66,55.22,34.98,31.07,18.75,14.63。
实施例10
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和间N,N-二甲氨基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4f,收率49.1%,熔点118-120℃。ESI-MS(EI)m/z 382.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(d,1H,ArH,J=8.8Hz),7.39(s,1H,ArH),7.31(d,1H,ArH,J=7.6Hz),7.21(t,1H,ArH,J=7.9Hz),6.87(t,2H,ArH,J=7.9Hz),6.16(s,1H,-CH=),5.64(s,2H,-CH2O-),4.13(m,2H,CH3CH2-),2.95(s,6H,N(CH3)2,2.41(s,3H,-CH3),1.40(t,3H,CH3CH2-,J=7.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ167.14,160.74,160.62,153.58,152.38,150.33,131.04,128.77,125.98,117.63,116.53,113.65,113.36,112.13,111.93,107.93,64.65,55.32,40.55,18.75,14.63。
实施例11
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和间2,4,5-三甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4g,收率59.5%,熔点163-167℃。ESI-MS(EI)m/z429.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,1H,ArH,J=8.6Hz),7.35(s,1H,ArH),6.87(d,1H,ArH,J=8.7Hz),6.47(d,1H,ArH,J=13.2Hz),6.14(s,1H,=CHCOO),5.60(s,2H,ArCHO),4.15(d,2H,CH3CH2O,J=6.3Hz),3.94–3.72(m,9H,3×CH3O),2.40(s,3H,CH3C=),1.43(t,3H,CH3CH2O,J=6.3Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ165.39,160.75,160.49,155.50,153.76,153.23,152.43,142.47,125.90,114.50,113.69,112.07,111.33,107.98,98.00,64.70,57.24,56.46,55.96,55.24,29.67,18.72,14.66。
实施例12
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和间2,6-二氟苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4h,收率39.2%,熔点147-151℃。ESI-MS(EI)m/z 375.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.35(dq,1H,ArH,J=8.4,6.2Hz),6.89(t,3H,ArH,J=8.5Hz),6.15(s,1H,-CH=),5.69(s,2H,-CH2O-),4.21–4.12(m,3H,CH3CH2-),2.40(d,3H,-CH3,J=1.0Hz),1.46(t,3H,-CH2CH3,J=7.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ161.37,160.64,160.56,153.53,152.32,132.42,126.39,125.07,113.61,112.14,111.97,111.72,110.75,107.79,64.70,56.29,18.71,14.51。
实施例13
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和间对氟苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4i,收率51.2%,熔点159-161℃。ESI-MS(EI)m/z 356.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(dd,2H,ArH,J=8.2,5.8Hz),7.59(d,1H,ArH,J=8.8Hz),7.05(t,2H,ArH,J=8.5Hz),6.89(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.17(s,1H,-CH=),5.64(s,2H,-CH2O-),4.15(q,2H,CH3CH2-,J=6.9Hz),2.42(s,3H,-CH3),1.40(t,3H,CH3CH2-,J=6.9Hz)。13CNMR(101MHz,CDCl3)δ166.83,165.51,164.31,160.67,160.53,153.62,152.39,132.20,132.11,126.60,126.16,115.41,115.20,113.69,112.19,111.54,107.93,64.68,55.56,18.75,14.62。
实施例14
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和肉桂酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4j,收率74.4%,熔点175-177℃。ESI-MS(EI)m/z 365.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(d,1H,ArH,J=16.0Hz),7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.49(dd,2H,ArH,J=6.2,3.1Hz),7.40–7.29(m,3H,ArH and=CH-),6.89(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.43(d,1H,-CH=,J=16.0Hz),6.16(s,1H,=CHCOO),5.54(s,2H,ArCH2O),4.16(q,2H,CH3CH2,J=7.0Hz,2H),2.41(s,3H,CH3C=),1.44(t,3H,CH3CH2,J=7.0Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.83,160.71,160.53,153.59,152.39,144.70,134.43,130.12,128.77,128.01,126.13,118.00,113.69,112.16,111.60,107.96,64.70,55.01,18.75,14.65。
实施例15
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和对甲氧基肉桂酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4k,收率77.1%,熔点130-132℃。ESI-MS(EI)m/z 395.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.64(d,1H,-CH=CH-,J=15.9Hz),7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.44(d,2H,ArH,J=8.8Hz),6.88(dd,3H,ArH,J=8.8,6.9Hz),6.30(d,1H,-CH=CH-,J=15.9Hz),6.16(d,1H,-CH=,J=1.0Hz),5.52(s,2H,-CH2O-),4.16(q,2H,CH3CH2-,J=7.0Hz),3.82(s,3H,CH3O-),2.41(d,3H,-CH3,J=1.0Hz),1.44(t,3H,CH3CH2-,J=7.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ167.17,161.19,160.74,160.53,153.60,152.37,144.37,129.65,127.19,126.06,115.48,114.19,113.69,112.17,111.77,107.97,64.70,55.32,54.85,18.74,14.65。
实施例16
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和对甲氧基苯丙酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4l,收率67.0%,熔点126-129℃。ESI-MS(EI)m/z 399.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,1H,ArH,J=8.8Hz),7.09(d,2H,ArH,J=8.5Hz),6.86(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.79(d,2H,ArH,J=8.5Hz),6.15(s,1H,-CH=),5.40(s,2H,-CH2O-),4.13(q,2H,CH3CH2-,J=7.0Hz),3.77(s,3H,--CH3),2.89(t,2H,-CH2CH2-,J=7.8Hz),2.59(t,2H,-CH2CH2-,J=7.8Hz),2.40(s,3H,-CH3),1.41(t,3H,CH3CH2-,J=7.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.76,160.66,160.41,157.87,153.52,152.37,132.64,129.18,126.08,113.74,113.65,112.14,111.50,107.89,64.63,55.18,54.94,36.09,30.06,18.73,14.63。
实施例17
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和对氯肉桂酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4m,收率60.8%,熔点162-163℃。ESI-MS(EI)m/z 395.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(m,2H,ArH and=CH=),7.41(d,2H,ArH,J=8.2Hz),7.32(d,2H,ArH,J=7.6Hz),6.89(d,2H,ArH,J=8.8Hz),6.39(d,1H,=CH=,J=16.0Hz),6.16(s,1H,=CHCO),5.53(s,2H,ArCH2),4.16(q,2H,CH3CH2O,J=7.0Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.44(t,3H,CH3CH2O,J=6.9Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.58,160.72,160.50,153.61,152.41,143.26,135.98,132.93,129.17,129.06,126.18,118.60,113.70,112.19,111.51,107.97,64.72,55.12,18.75,14.65。
实施例18
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和3-硝基-4-氯苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4n,收率40.1%,熔点224-226℃。ESI-MS(EI)m/z 418.0[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(d,1H,ArH,J=1.9Hz,),8.15(dd,1H,ArH,J=8.4,2.0Hz,),7.61(dd,2H,ArH,J=8.6,7.5Hz,),6.91(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.18(d,1H,CH3C=CHCOO,J=1.1Hz),5.68(s,2H,ArCH2O),4.17(q,2H,CH3CH2O J=7.0Hz),2.43(s,3H,CH3C=),1.41(t,3H,J=7.0Hz,CH3CH2).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ163.62,160.56,160.51,153.61,152.46,147.76,133.77,132.03,131.43,130.27,126.59,126.56,113.77,112.26,110.69,107.94,64.72,56.50,18.77,14.64。
实施例19
实验操作过程同化合物4d,中间体3a和3-甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4o,收率40.2%,熔点133-135℃。ESI-MS(EI)m/z 369.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(d,2H,ArH,J=8.8Hz),7.53(s,1H,ArH),7.29(d,1H,ArH,J=8.0Hz),7.05(dd,1H,ArH,J=8.0,2.3Hz),6.88(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.16(d,1H,CH3C=CHCOO,J=0.9Hz),5.64(s,2H,ArCH2O),4.14(q,2H,CH3CH2,J=7.0Hz),3.81(s,3H,CH3O),2.41(d,3H,CH3C=),1.40(t,3H,CH3,J=7.0Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.35,160.73,160.59,159.36,153.59,152.43,131.68,129.20,126.11,122.06,119.18,114.07,113.67,112.15,111.67,107.94,64.68,55.53,55.41,18.75,14.63。
实施例20
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和3,4,5-三甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4p,收率70.4%,熔点174-176℃。ESI-MS(EI)m/z 443.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(d,1H,ArH,J=8.9Hz),δ,7.28–7.23(m,2H,ArH),6.90(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.16(d,1H,-CH=,J=0.9Hz),5.63(s,2H,-CH2O-),4.70(dt,1H,-CH(CH3)2,J=12.1,6.0Hz),3.87(m,9H,3×CH3O),2.41(d,J=0.9Hz,3H),1.34(d,6H,3×-OCH3,J=6.0Hz)。13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.04,160.76,159.77,153.82,152.79,152.47,125.94,125.53,113.48,112.63,112.09,109.18,106.83,71.31,60.87,56.23,55.71,21.95,18.77。
实施例21
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和3,4-二甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4q,收率66.5%,熔点143-145℃。ESI-MS(EI)m/z 427.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62(dd,1H,ArH,J=8.4,1.8Hz,),7.57(d,1H,ArH,J=8.9Hz,),7.53(d,1H,ArH,J=1.7Hz,),6.90(d,1H,ArH,J=8.9Hz,),6.82(d,1H,ArH,J=8.5Hz,),6.15(s,1H,CH3C=CHCOO),5.62(s,2H,ArCH2O),4.73–4.62(m,1H,(CH3)2CH)),3.89(d,6H,CH3O,J=4.6Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.32(d,J=6.0Hz,6H,CH(CH3)2).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.22,160.79,159.81,153.80,152.71,152.44,148.44,125.87,123.62,122.97,113.46,112.80,112.09,112.04,110.07,109.19,71.30,56.00,55.94,55.41,21.93,18.75。
实施例22
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和3-甲基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4r,收率74.4%,熔点147-149℃。ESI-MS(EI)m/z 397.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(d,2H,2×ArH,J=8.1Hz),7.57(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.17(d,2×ArH,J=8.0Hz),6.90(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.15(s,1H,=CHCOO),5.62(s,2H,ArCH2O),4.68(dt,1H,(CH3)2CH,J=12.1,6.0Hz,1H),2.41(s,3H,CH3C=),2.37(s,3H,ArCH3),1.31(d,6H,(CH3)2CH,J=6.0Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.52,160.77,159.84,153.77,152.42,143.24,129.65,128.89,127.67,125.89,113.44,112.72,112.09,109.17,71.30,55.33,21.91,21.61,18.74。
实施例23
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和4-丙基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4s,收率79.7%,熔点119-121℃。ESI-MS(EI)m/z 395.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(d,2H,2×ArH,J=8.1Hz),7.57(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.17(d,2H,,2×ArH,J=8.0Hz),6.89(d,1H,ArH,J=8.9Hz,1H),6.15(s,1H,CH3C=CHCOO),5.62(s,2H,ArCH2O),4.68(dt,1H,(CH3)2CH,J=12.0,6.0Hz),2.60(t,2H,-CH2Ar,J=7.6Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.62(dd,CH3CH2,J=15.0,7.5Hz,2H),1.32(d,6H,(CH3)2CH,J=6.0Hz),0.91(t,CH3CH2,J=7.3Hz,3H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.55,160.76,159.83,153.79,152.40,147.92,129.64,128.31,127.90,125.87,113.44,112.74,112.09,109.18,71.32,55.32,37.99,24.22,21.91,18.73,13.72。
实施例24
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和4-叔丁基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4t,收率71.2%,熔点90-93℃。ESI-MS(EI)m/z 409.2[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,2H,ArH,J=8.3Hz),7.57(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.39(d,2H,ArH,J=8.3Hz),6.90(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.15(s,1H,=CHCOO),5.62(s,2H,ArCH2O),4.68(dt,1H,(CH3)2CH,J=11.9,5.9Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.38–1.26(m,15H,5×CH3).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.48,160.76,159.82,156.20,153.81,152.38,129.47,127.64,125.86,125.14,113.44,112.78,112.10,109.18,77.32,77.00,76.69,71.33,55.31,34.99,31.09,21.93,18.73。
实施例25
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和间-N,N-二甲氨基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4u,收率82.1%,熔点159-162℃。ESI-MS(EI)m/z 396.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.40(s,1H,ArH),7.32(d,1H,ArH,J=7.6Hz),7.21(t,1H,ArH,J=7.9Hz),6.88(t,2H,ArH,J=7.4Hz),6.15(s,1H,=CHCOO),5.63(s,2H,ArCH2O),4.68(dt,1H,(CH3)2CH,J=12.0,6.1Hz),2.95(s,6H,N(CH3)2),2.41(s,3H,CH3C=),1.32(d,6H,(CH3)2CH J=6.0Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ167.10,160.77,159.87,153.78,152.39,150.34,131.10,128.78,125.82,117.74,116.58,113.44,112.83,112.08,109.17,71.30,55.40,40.58,29.67,21.93,18.73。
实施例26
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和2,4,5,-三甲氧基苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4v,收率62.1%,熔点161-164℃。ESI-MS(EI)m/z 443.1[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(d,1H,ArH,J=8.8Hz),7.34(s,1H,ArH),6.88(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.49(s,1H,ArH),6.14(s,1H,CH3C=CHCOO),5.58(s,2H,ArCH2O),4.69(d,1H,(CH3)2CH),3.90(s,3H,CH3O),3.84(s,3H CH3O,),3.80(s,3H,CH3O),2.40(s,3H,CH3C=),1.35(d,6H,CH(CH3)2,J=5.7Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ165.32,160.81,159.71,155.49,153.94,153.18,152.45,142.43,125.74,114.46,113.46,112.89,112.01,111.30,109.21,97.91,71.36,57.21,56.45,55.96,55.29,29.67,22.07,21.96,18.73。
实施例27
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和对甲氧基肉桂酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4w,收率77.5%,熔点136-138℃。ESI-MS(EI)m/z 409.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.60(dd,2H,J=28.5,12.4Hz),7.43(d,J=7.8Hz,2H),6.88(d,1H,-CH=,J=16.0Hz),6.88(s,1H,ArH),6.29(d,1H,-CH=,J=15.9Hz),6.15(s,1H,CH3C=CHCOO),5.51(s,2H,ArCH2O),4.90–4.65(m,1H,(CH3)2CH),3.81(s,3H,CH3O),2.41(s,3H,CH3C=),1.40–1.28(m,6H,(CH3)2CH).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ167.11,161.21,160.76,159.78,153.80,152.38,144.31,129.64,127.23,125.89,115.55,114.22,113.48,112.71,112.10,109.27,71.44,55.33,54.92,21.96,18.73。
实施例28
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和对氟苯甲酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4x,收率51.0%,熔点118-120℃。ESI-MS(EI)m/z 371.1[M+H]+,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.05–7.97(m,2H,2×ArH),7.58(d,1H,ArH,J=8.9Hz),7.05(t,2H,2×ArH,J=8.7Hz),6.90(d,1H,ArH,J=9.0Hz),6.16(s,1H,CH3C=CHCOO),5.63(s,2H,ArCH2O),4.69(dt,1H,(CH3)2CH,J=12.1,6.0Hz)2.41(s,3H,CH3C=),1.32(d,6H,(CH3)2CH,J=6.1Hz).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.84,165.48,164.33,160.72,159.78,153.79,152.42,132.19,132.10,126.66,126.00,115.43,115.21,113.46,112.44,112.13,109.15,71.33,55.64,21.91,18.75。
实施例29
实验操作过程同化合物4d,中间体3b和肉桂酸在EDC和DMAP的催化下室温下在二氯甲烷中反应制得4y,收率72.1%,熔点130-133℃。ESI-MS(EI)m/z 379.1[M+H]+1,H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(d,1H,=CHCOO,J=16.0Hz),7.57(d,1H,J=8.9Hz),7.49(dd,2H,2×ArH,J=6.3,3.0Hz),7.39–7.29(m,3H,ArH),6.90(d,1H,ArH,J=8.9Hz),6.43(d,1H,ArCH=,J=16.0Hz),6.16(s,1H,CH3C=CHCOO),5.53(s,2H,ArCH2O),4.70(dt,1H,(CH3)2CH,J=12.1,6.1Hz),2.41(s,3H,CH3C=),1.36(d,6H,(CH3)2CH,J=6.0Hz,).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ166.78,160.75,159.78,153.80,152.39,144.67,134.48,130.11,128.79,128.01,125.95,118.08,113.48,112.57,112.13,109.25,71.44,55.08,21.96,18.73。
实施例30体外安全性评价和对肿瘤MDR逆转活性筛选试验
1)采用MTT法检测本发明化合物对人卵巢上皮细胞(HOSE)、脐静脉内皮细胞(HUVEC)以及永生化人类卵巢表面上皮细胞(T29)、耐紫杉醇、耐顺铂的卵巢癌细胞(A2780/T,A2780/CDDP)以及耐长春新碱的人口腔表皮癌细胞(KB-V)细胞增殖抑制的活性,将对数生长期的癌细胞接种于96孔板中,分为空白对照组、阳性对照组和不同浓度的本发明化合物、阳性药处理组,以及本发明化合物和紫杉醇、长春新碱和顺铂联合用药组,37℃培养48h后进行MTT检测,计算细胞增殖抑制率、IC50和耐药逆转倍数;
2)应用Western blot(免疫印迹法)分析,检测本发明化合物作用的耐药肿瘤株及其相对应的敏感肿瘤株内的P-gp表达,受试敏感和耐药细胞,培养后进行处理。收集细胞用冷PBS洗涤1次,用RIPA裂解液冰上裂解细胞30分钟,4℃、12000rpm离心15分钟,总蛋白用BCA法定量,每道30μg的上样量,经SDS-PAGE电泳后转印到聚偏二乙烯的氟化物PVDF膜上,封闭于10%脱脂奶中,依次进行一抗、二抗反应,曝光显色;
结果显示,所述本发明的化合物对受试细胞增殖没有或者很弱的抑制活性。安全性实验结果如表1所示,10μM浓度的化合物对于HOSE、HUVEC、T29以及A2780/T的抑制率都比较低,如化合物4f、4k、4p以及4w对上述细胞增殖抑制率在61.73%-100%之间;进一步测试对KB-V以及A2780/CDDP两株耐药细胞增殖抑制率,除了化合物4p对A2780\CDDP抑制率为65.55%,显示一定的毒性外,4f、4k以及4w化合物对受试细胞几乎没有毒性,抑制率为94.51-131.10%。耐药逆转实验结果如表2,表3和表4所示,以维拉帕米为耐药逆转阳性对照,选择4f、4k、4p以及4w四个化合物为代表,在10μM浓度下分别与紫杉醇、长春新碱以及顺铂联合用药,测试对耐药株A2780/T、KB-V以及A2780/CDDP耐药逆转活性。结果显示4f对三株细胞的耐药逆转倍数分别为224.9、314.4和0.83;4p为354.6、133.4和0.86;4k为733.4、793.2和0.76;4w为498.5、1257.2和0.78;维拉帕米为211.4、508.6和1.07。上述数据说明四个化合物对A2780/T和KB-V具有显著的耐药逆转活性,对于A2780/T的逆转活性均高于维拉帕米,其中化合物4k和4w对于KB-V的逆转活性793.2和1257.2远高于阳性对照维拉帕米508.6的逆转倍数。而对于耐药株A2780/CDDP,无论维拉帕米还是本发明化合物则均没有显示逆转耐药的活性。
如图1蛋白印迹显示,耐药性能够被本发明化合物逆转的肿瘤细胞株A2780/T和KB-V,具有P-gp过表达特征;而不显示耐药逆转活性的A2780/CDDP肿瘤细胞则没有P-gp过表达现象。上述实验说明,这类化合物具有选择性对于P-gp过表达耐药肿瘤细胞耐药逆转的作用。
表1是10μM本发明化合物对HOSE\HUVEC\T29\A2780/T\KB-V\A2780/CDDP细胞增殖抑制结果。
表2是10μM本发明化合物与紫杉醇(PTX)联用对A2780/T逆转耐药结果。
表3是10μM本发明化合物与长春新碱(VIN)联用对KB-V逆转耐药结果。
表4是10μM本发明化合物与顺铂联用对A2780/CDDP逆转耐药结果。
表1
注:空白为未测定。
表2
表3
表4
注:耐药逆转倍数计算为:对于耐药肿瘤细胞,单独用药的IC50值与联合用药的IC50值的比值。
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Citations (5)
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---|---|---|---|---|
AU2007252947A1 (en) * | 2006-05-19 | 2007-11-29 | Mcgill University | Flavonoid dimers and methods of making and using such |
WO2010064817A2 (ko) * | 2008-12-01 | 2010-06-10 | 한국생명공학연구원 | 신규 쿠마린계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 다약제내성 억제용 약학적 조성물 |
CN102603692A (zh) * | 2011-03-04 | 2012-07-25 | 中国海洋大学 | 一种抗肿瘤多药耐药抑制剂色满和色烯衍生物及其制备方法和应用 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2007252947A1 (en) * | 2006-05-19 | 2007-11-29 | Mcgill University | Flavonoid dimers and methods of making and using such |
WO2010064817A2 (ko) * | 2008-12-01 | 2010-06-10 | 한국생명공학연구원 | 신규 쿠마린계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 다약제내성 억제용 약학적 조성물 |
CN102603692A (zh) * | 2011-03-04 | 2012-07-25 | 中国海洋大学 | 一种抗肿瘤多药耐药抑制剂色满和色烯衍生物及其制备方法和应用 |
FR2973703A1 (fr) * | 2011-04-08 | 2012-10-12 | Univ Provence Aix Marseille 1 | Derives de 4-arylcoumarine et de 4-arylquinoleine, leurs utilisations therapeutiques et leur procede de synthese |
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Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Methoxylation of 30,40-aromatic side chains improves P-glycoprotein inhibitory and multidrug resistance reversal activities of 7,8-pyranocoumarin against cancer cells;Wang-Fun Fong 等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry》;20080213;第16卷;第3694-3703页 * |
Seco-4-methyl-DCK derivatives as potent chemosensitizers;Yalan Guo 等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》;20181112;第29卷;第28-31页 * |
Study of hyaluronan synthase inhibitor, 4-methylumbelliferone derivatives on human pancreatic cancer cell (KP1-NL);Hajime Morohashi 等;《Biochemical and Biophysical Research Communications》;20060515;第345卷;第1454-1459页 * |
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