CN109105250A - 一种高效绿豆杂交育种方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于绿豆杂交方法或设备技术领域，公开了一种高效绿豆杂交育种方法，在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；母本去雄：授粉前一天下午，选取合适的母本花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，从花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的荚全部去掉，将牌挂在花梗上。授粉：移液器吸取绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10‑20微升绿豆花粉悬混液于母本柱头上；在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。本发明工作效率提高225％，杂交成功率提高17.4％。

Description

一种高效绿豆杂交育种方法

技术领域

本发明属于杂交的方法或设备技术领域，尤其涉及一种高效绿豆杂交育种方法。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：绿豆是闭花授粉作物，其花柄细短，受外力作用时容易脱落；其花柱弯曲细长，人工授粉时容易折断，杂交难度大。关于绿豆杂交方法，国内外许多学者一直在不断探索。目前国内常用刘玉平、田静等于1997年公布的绿豆杂交方法，该方法杂交成功率较1991年以前公布的方法提高了5倍左右，但该方法需要一朵雄花专门为一朵雌花授粉，所需的父本花数量较大，取花用时较长；另外，该方法采用套龙骨瓣的方法授粉，操作难度较大，杂交速度较慢，经实际操作，采用刘玉平法在上午8：00至10：00绿豆最佳授粉时间内，平均每小时杂交26.5朵花，还容易对母本花柱造成2次损伤。近年来花粉液在猕猴桃、梨树等果树的杂交中得到推广应用，极大的提高了果树杂交授粉效率，但有关花粉液在豆类杂交利用却鲜有研究，尤其是在绿豆的研究中尚未见报道。豆类一般都是闭花受粉作物，花粉量较少，杂交一般都是为了科学研究，没有进行商业化开发，因此，很少有人去专门研究它。

综上所述，现有技术存在的问题是：

(1)传统采用“一朵雄花为一朵雌花授粉”的方法，父本花数量较大，取花用时较长；采用套龙骨瓣的方法授粉，操作难度较大，导致在绿豆最佳授粉时间内，杂交速度较慢。

(2)现有技术的绿豆杂交成功率较低，套龙骨瓣的操作容易对母本花柱和柱头造成危害易，对母本花柱造成2次损伤，降低杂交成功率。

解决上述技术问题的难度和意义：

技术难度：如何进一步提高杂交工作速率和杂交成功率。

意义：高杂交工作速率的提高和杂交成功率的提高，就意味着能得到更多的F₁世代杂交种子，只有F₁世代杂交种子数量足够庞大，它的分离世代才能使亲本优良的基因性状得到充分的表达，育种家才有可能从中选育出优良的绿豆新品种。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种高效绿豆杂交育种方法。

本发明是这样实现的，一种高效绿豆杂交育种方法，所述高效绿豆杂交育种方法包括以下步骤：

步骤一：母本前期处理：在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；

步骤二：母本去雄：授粉前一天下午，选取合适的母本花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，从花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的英全部去掉，将牌挂在花梗上；

步骤三：授粉：移液器吸取刚刚配制完成的绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10微升至20微升绿豆花粉悬混液于母本柱头上，完成授粉；

步骤四：在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。

进一步，所述步骤三中移液器的量程为10微升至200微升。

进一步，所述步骤三中绿豆花粉悬混液的配制所用的绿豆专用花粉悬浮营养液：营养液以蒸馏水为溶剂，由碳源—蔗糖3500毫克/升、MS培养基、植物激素—赤霉素10毫克/升、吲哚乙酸5毫克/升、玉米素10毫克/升、二氯苯氧乙酸2毫克/升、悬混液稳定剂—海藻酸钠1000毫克/升组成；绿豆专用花粉悬浮营养液配制完成后，取容量为2毫升的离心管，装入绿豆专用花粉悬浮营养液1毫升，分装备用。

进一步，所述步骤三中绿豆花粉悬混液的配制方法为：

(1)在上午8：00左右，绿豆开花最旺盛的时间，取刚刚开花散粉的父本花朵20个；

(2)用镊子夹住龙骨瓣中央，将雌蕊、雄蕊和龙骨瓣一次性从花朵中夹出后，放入装有绿豆专用花粉悬浮营养液的离心管中，搅拌30秒，使花粉充分均匀的散开后，得绿豆花粉悬混液。

进一步，所述步骤三中花粉悬混液保质期为30分钟。

综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明提高了绿豆杂交授粉工作效率，减少了父本花选取数量，节约了取花环节的时间，仅用20朵父本花即能完成50朵至100朵母本花的授粉；提高了授粉的速度，只需用移液器把花粉悬混液注入在母本柱头上即可，操作相对简单，工作效率较传统方法提高了225％左右；提高了绿豆杂交成功率，提高母了本柱头容受花粉能力，前期对母本喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸，提高母了本柱头容受花粉能力，进而提高了绿豆杂交成功率；避免了母本花柱2次损伤，使用移液器把花粉悬混液注入在母本柱头的操作不会对母本花柱和柱头造成危害，避免了花柱2次损伤，进而提高了绿豆杂交成功率。本发明绿豆专用花粉悬浮营养液具有促进花粉萌发及花粉管生长的积极效果。本发明工作效率提高225％，杂交成功率提高17.4％。

附图说明

图1是本发明实施例提供的高效绿豆杂交育种方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明旨在解决传统采用“一朵雄花为一朵雌花授粉”的方法，父本花数量较大，取花用时较长；采用套龙骨瓣的方法授粉，操作难度较大，导致在绿豆最佳授粉时间内，杂交速度较慢；现有技术的绿豆杂交成功率较低，套龙骨瓣的操作容易对母本花柱和柱头造成危害易，对母本花柱造成2次损伤，降低杂交成功率。本发明应用绿豆专用花粉悬浮营养液配制而成的绿豆花粉悬混液进行绿豆杂交授粉，工作效率较传统方法提高225％，杂交成功率提高17.4％。

下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。

如图1所示，本发明实施例提供的高效绿豆杂交育种方法包括以下步骤：

S101：母本前期处理：在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；

S102：母本去雄：授粉前一天下午，选取合适的母本花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，从花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的荚全部去掉，将牌挂在花梗上。

S103：授粉：移液器吸取刚刚配制完成的绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10微升至20微升绿豆花粉悬混液于母本柱头上，即完成授粉；

S104：在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。

在本发明的优选实施例中，步骤S101中，本发明提供的在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸，提高母本柱头容受花粉能力，提高结母本荚率；

在本发明的优选实施例中，步骤S102中，本发明提供的母本去雄应用的是刘玉平、田静等在1997年公布的绿豆杂交方法对母本去雄；

在本发明的优选实施例中，步骤S103中，本发明提供的移液器的量程为10微升至200微升；

在本发明的优选实施例中，步骤S103中，本发明提供的绿豆花粉悬混液的配制所用的绿豆专用花粉悬浮营养液：营养液以蒸馏水为溶剂，由碳源—蔗糖3500毫克/升、MS培养基、植物激素—赤霉素10毫克/升、吲哚乙酸5毫克/升、玉米素10毫克/升、二氯苯氧乙酸2毫克/升、悬混液稳定剂—海藻酸钠1000毫克/升组成；绿豆专用花粉悬浮营养液配制完成后，取容量为2毫升的离心管，装入绿豆专用花粉悬浮营养液1毫升，分装备用；

在本发明的优选实施例中，步骤S103中，本发明提供的绿豆花粉悬混液的配制方法为：

(1)在上午8：00左右，绿豆开花最旺盛的时间，取刚刚开花散粉的父本花朵20个；

(2)用镊子夹住龙骨瓣中央，将雌蕊、雄蕊和龙骨瓣一次性从花朵中夹出后，放入装有绿豆专用花粉悬浮营养液的离心管中，搅拌30秒，使花粉充分均匀的散开后，即得绿豆花粉悬混液；

在本发明的优选实施例中，步骤S103中，本发明提供的花粉悬混液保质期为30分钟，30分钟以后，悬混液中的花粉陆续萌发，若继续进行操作则会引起花粉管断裂，导致授粉失败。

去雄过程中应用刘玉平、田静等在1997年公布的绿豆杂交方法对母本去雄。

下面结合具体实施例对本发明的应用效果做详细的描述。

1：绿豆专用花粉悬浮营养液配制：2017年7月1日，以蒸馏水为溶剂，由碳源—蔗糖3500毫克/升、MS培养基、植物激素—赤霉素10毫克/升、吲哚乙酸5毫克/升、玉米素10毫克/升、二氯苯氧乙酸2毫克/升、悬混液稳定剂—海藻酸钠1000毫克/升组成；绿豆专用花粉悬浮营养液配制完成后，取容量为2毫升的离心管，装入绿豆专用花粉悬浮营养液1毫升，分装备用；

2：母本前期处理：2017年7月2日，给母本渝城黑绿豆4号喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；

3：母本去雄：2017年7月5日下午，选取合适的渝城黑绿豆4号花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，从花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的荚全部去掉，将牌挂在花梗上。去雄数量100朵花。

4：绿豆花粉悬混液配制：2017年7月6日上午8：10-8：30，取刚刚开花散粉的父本中绿15号花朵20个，用镊子夹住龙骨瓣中央，将雌蕊、雄蕊和龙骨瓣一次性从花朵中夹出后，放入装有绿豆专用花粉悬浮营养液的离心管中，搅拌30秒，使花粉充分均匀的散开后，得到绿豆花粉悬混液；

5：授粉：2017年7月6日上午8：30-9：00，在绿豆花粉悬混液配制完成的30分钟以内，使用量程为10微升至200微升移液器吸取刚刚配制完成的绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10微升左右绿豆花粉悬混液于母本柱头上，即完成授粉；

6：待所有的授粉工作完成后，统一在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述高效绿豆杂交育种方法在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；母本去雄：授粉前一天下午，选取母本花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的荚全部去掉，将牌挂在花梗上；授粉：移液器吸取绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10-20微升绿豆花粉悬混液于母本柱头上；在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。

2.如权利要求1所述的高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述高效绿豆杂交育种方法包括以下步骤：

步骤一：母本前期处理：在杂交工作前3天，喷施浓度为50毫克/升的芸苔素内酯和1000毫克/升的硼酸；

步骤二：母本去雄：授粉前一天下午，选取合适的母本花蕾，用镊子尖分开旗瓣、典瓣，纵裂龙骨瓣，从花丝基部去掉10个雄蕊，将与去雄花同一花簇的其它大中花蕾及已结的荚全部去掉,将牌挂在花梗上；

步骤三：授粉：移液器吸取刚刚配制完成的绿豆花粉悬混液200微升，每次注入10微升至20微升绿豆花粉悬混液于母本柱头上，完成授粉；

步骤四：在花梗所挂的牌上，写明父本、母本、杂交时间。

3.如权利要求2所述的高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述步骤三中移液器的量程为10微升至200微升。

4.如权利要求2所述的高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述步骤三中绿豆花粉悬混液的配制所用的绿豆专用花粉悬浮营养液：营养液以蒸馏水为溶剂，由碳源—蔗糖3500毫克/升、MS培养基、植物激素—赤霉素10毫克/升、吲哚乙酸5毫克/升、玉米素10毫克/升、二氯苯氧乙酸2毫克/升、悬混液稳定剂—海藻酸钠1000毫克/升组成；绿豆专用花粉悬浮营养液配制完成后，取容量为2毫升的离心管，装入绿豆专用花粉悬浮营养液1毫升，分装备用。

5.如权利要求2所述的高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述步骤三中绿豆花粉悬混液的配制方法为：

(1)在上午8：00，绿豆开花最旺盛的时间，取刚刚开花散粉的父本花朵20个；

(2)用镊子夹住龙骨瓣中央，将雌蕊、雄蕊和龙骨瓣一次性从花朵中夹出后，放入装有绿豆专用花粉悬浮营养液的离心管中，搅拌30秒，使花粉充分均匀的散开后，得绿豆花粉悬混液。

6.如权利要求2所述的高效绿豆杂交育种方法，其特征在于，所述步骤三中花粉悬混液保质期为30分钟。