CN109097404A - 一种枇杷干复合发酵提取物的制备及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于烟用香料技术领域,具体涉及一种枇杷干复合发酵提取物的制备方法及应用。以野生枇杷干为主要提取物,将芽孢杆菌BA‑01活化后,在28‑30℃摇床培养24‑48h发酵,再进行回流提取、过滤、浓缩,得到烟用香料。该方法制得的烟用香精能够显著地提高卷烟的香气质量,降低刺激性,增加了甜润感和生津感,可明显改善卷烟品质。
Description
技术领域
本发明属于烟用香料技术领域,尤其涉及一种野生枇杷干复合发酵提取物。同时,本发明还涉及所述烟用香料的制备方法和在卷烟中的应用。
背景技术
微生物发酵技术可以制备香料或进行香料的转化,节约能源、降低成本。从烟叶中筛选的芽孢杆菌产香性能好,以适当的天然植物为底物,可制备天然香料添加剂,用于卷烟加香。
CN201710343989.X公开了一种芽孢杆菌BA-01在烟草方面的应用,其通过提取的BA-01以提高晾晒烟的人工陈化效果,但其制取工艺复杂,需要在发酵后离心,并在菌液中加入海藻糖保护剂,后冷冻干燥成粉剂,喷洒于晾晒烟丝,进行人工陈化。
野枇杷产自湖南衡阳,当地人又称“毛枣子”,阴历七月结果,果子成熟后呈黄色,有五角星形状的果蒂,食用起来清凉甜润。野生枇杷干是采用野枇杷自然晾晒而成,最大限度的保留了野枇杷的营养,复水后风味和鲜果无异,具有止咳化痰、润肺清火之功效。CN201710431065.5公开了一种高静压协同酶解制备枇杷花烟用香料的方法和应用,其公开了预处理,酶解处理,丙二醇、水复合提取,高静压法二次提取,过滤封装等步骤。但其为了提纯,增加了工艺的复杂度。目前,野枇杷干常用于本地人泡水喝,在工业上还未见应用。本发明第一次将野枇杷干进行复配提取和发酵,并作为烟用香精应用到卷烟生产中。
发明内容
本发明提供了一种利用微生物发酵技术制备的枇杷干复合提取物及其在卷烟中的应用,通过本发明制得的香精与卷烟吸味相谐调,可显著增强卷烟抽吸的甜润感,降低抽吸过程中口腔和喉部出现的灼热感和刺辣感,具有降低杂气,提升烟香等功效,从而达到增加烟气的浸润性,改善卷烟抽吸品质的目的。
为实现上述目的,本发明的技术方案为:
一种枇杷干复合发酵提取物的制备方法,其特征在于:以野生枇杷干为主料先进行复配,利用芽孢杆菌对复配物进行发酵,再对发酵液进行香味物质的提取和浓缩即得所需产品。
进一步地,所述芽孢杆菌分离筛选自烟叶表面;保藏日期2016年8月19日,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No.60064。
进一步地,按照以下步骤制备得到:
(1)原料复配:野生枇杷晒制成的枇杷干,泡煮复水后取出枇杷,将枇杷与红枣、枸杞、甘草进行复配混合,得到第一复配产物;
(2)菌种活化:将芽孢杆菌BA-01接种于斜面培养基上28℃,活化培养2-3d;所述斜面培养基为:胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g,琼脂糖15g,蒸馏水1000mL,调pH至7.0;
(3)扩大培养:将菌种从斜面培养基上挑1-2环接种于固体培养基上纯化1-2次,确定无杂菌污染后,将其接种于LB液体培养基中,28℃摇瓶培养48h;
(4)发酵:将所述第一复配产物粉碎后,加入灭菌水,混合均匀,按5-15%的比例接种芽孢杆菌活化菌液,28-30℃摇床震荡培养48-72h,得到发酵液;
(5)香料提取:取步骤(4)所得发酵液,回流提取2-3h,真空抽滤,取续滤液,减压浓缩,即得所需烟用香料。
进一步地,枇杷与红枣、枸杞、甘草的复配比例为:85~90:3:3:4~9。
进一步地,所述烟用香料在烟丝中用量为0.1-0.5%。
一种如上述所述的制备方法的应用,应用于烤烟、白肋烟、晒烟和香料烟。
与现有研究相比,本发明具有以下优点:
1、本发明提供了一种特定比例的枇杷与红枣、枸杞、甘草的复配比例,显著改善了烟的刺激性气味及味道。
2、首创地将野枇杷干为主要原料,利用分离自烟叶表面增香性能优良的芽孢杆菌进行发酵,制备烟用香精香料,并以底料形式添加到卷烟中;
3、原料复配可综合发挥天然植物的生津甜润感,使其风味协调丰富;
4、经发酵后的香料与未经处理的对照组相比,既保留了原料原有的生津甜润感,同时还增加了酸香,香韵丰富协调;
5、微生物发酵后显著地提高了香料产品的香气质量,降低刺激性;同时,所用微生物分离自烟叶表面,添加到烟丝中后还可继续进行后发酵,能对烟丝进行进一步醇化和增香,特别是在香气上更加充足了,减少了刺激性,在杂气上也得到了减弱。
6、本发明反应条件温和,设备要求简单,成本较低,便于实现大规模工业化生产,具有较强的实用性和良好的开发应用前景。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
为了更详细说明本发明,下面结合具体实施例来对本发明提供的一种野生枇杷干复合发酵提取物的制备方法及应用进行具体地描述。
实施例1
(1)原料复配:原料主要采用野生枇杷晒制成的枇杷干,泡煮复水后,加入少量红枣、枸杞、甘草,按照枇杷与红枣、枸杞、甘草的复配比例为:90:3:3:4进行复配,得到第一复配产物。
(2)菌种活化:将芽孢杆菌BA-01接种于斜面培养基上28℃,活化培养2d;所述斜面培养基为:胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g,琼脂糖15g,蒸馏水1000mL,调pH至7.0。
(3)扩大培养:将菌种从斜面培养基上挑1-2环接种于固体培养基上纯化1-2次,确定无杂菌污染后,将其接种于LB液体培养基中,28℃摇瓶培养48h。
(4)发酵:将第一复配产物粉碎后,加入灭菌水,混合均匀,按5%的比例接种芽孢杆菌活化菌液,28℃摇床震荡培养48h。
(5)香料提取:取步骤(4)所得发酵液,回流提取2-3h,真空抽滤后,取续滤液,5000r/min离心10min,取上清液,60℃减压浓缩,即得所需烟用香料。
(6)卷烟加香:将制备得到的香料均匀地喷洒到烟丝上,添加量为0.1%。
实施例2
重复实施例1,有以下不同点:将以枇杷干为主的复配原料粉碎后,加入灭菌水,混合均匀,不进行接种发酵,放置48h后直接进行香料提取。将制备得到的香料均匀喷洒到烟丝上,添加量为0.2%。
实施例3
重复实施例1,有以下不同点:将以枇杷干为主的复配原料粉碎后,加入灭菌水,混合均匀,按10%的比例接种芽孢杆菌活化菌液,28℃摇床震荡培养72h。将制备得到的香料均匀喷洒到烟丝上,添加量为0.2%。
实施例4
重复实施例1,有以下不同点:原料不进行复配,全部采用野枇杷干,复水后进行粉碎,加入灭菌水,混合均匀,按8%的比例接种芽孢杆菌活化菌液,30℃摇床震荡培养72h。将制备得到的香料均匀喷洒到烟丝上,添加量为0.1%。
将实施例1-4制得的处理组烟丝和对照烟丝放入恒温恒湿箱中平衡24h后,进行卷烟,样品和对照组均随机编号,由评吸专家组成的评吸小组进行评吸。主要评价指标为协调性、香气质量、刺激性和余味等指标。100分为满分,其中协调性、香气质量分值越高表示香味和烟气的协调性越好,香气质量更纯正清新诱人,杂气味越少;刺激性分数越高表示烟气刺激性越低,口感柔软,分值低代表烟气呛鼻,对嗓子刺激大;余味分值越高代表烟气香味在口中的持久性较长,回味性增加。得到的评吸结果平均分见表1:
表1 评价结果平均分
对比产品1、3、4和空白样品可知,采用本发明所述的野生枇杷干香精的制备方法制作出的香料添加在卷烟烟丝中后,在吸食过程中可随烟气进入口腔,充分发挥香料的功效,显著地增加卷烟的协调性和香气质量,降低了香烟烟气的刺激性,提高了香烟的余味,改善卷烟品质;对比产品2和1、3可知,复配后的原料经过发酵后,能显著改善香料的香气质量;对比产品4和1可看出,枇杷干与红枣、枸杞、甘草进行复配后发酵所得的香料比单纯采用枇杷干进行发酵所得的香料香气质量要高,添加到卷烟中刺激性更低,协调性及余味更好。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种枇杷干复合发酵提取物的制备方法,其特征在于:以野生枇杷干为主料先进行复配,利用芽孢杆菌对复配物进行发酵,再对发酵液进行香味物质的提取和浓缩。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述芽孢杆菌分离筛选自烟叶表面;保藏日期2016年8月19日,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCCNo.60064。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:按照以下步骤制备得到:
(1)原料复配:野生枇杷晒制成的枇杷干,泡煮复水后取出枇杷,将枇杷与红枣、枸杞、甘草进行复配混合,得到第一复配产物;
(2)菌种活化:将芽孢杆菌BA-01接种于斜面培养基上28℃,活化培养2-3d;所述斜面培养基为:胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g,琼脂糖15g,蒸馏水1000mL,调pH至7.0;
(3)扩大培养:将菌种从斜面培养基上挑1-2环接种于固体培养基上纯化1-2次,确定无杂菌污染后,将其接种于LB液体培养基中,28℃摇瓶培养48h;
(4)发酵:将所述第一复配产物粉碎后,加入灭菌水,混合均匀,按5-15%的比例接种芽孢杆菌活化菌液,28-30℃摇床震荡培养48-72h,得到发酵液;
(5)香料提取:取步骤(4)所得发酵液,回流提取2-3h,真空抽滤,取续滤液,减压浓缩,即得所需烟用香料。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:枇杷与红枣、枸杞、甘草的复配比例为:85~90:3:3:4~9。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述烟用香料在烟丝中用量为0.1-0.5%。
6.一种如权利要求3所述的制备方法的应用,其特征在于:应用于烤烟、白肋烟、晒烟和香料烟。
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