CN109096204B - 一种染料化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

一种染料化合物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种化合物，即2‑苯乙酰‑苯并咪唑‑7‑羧酸，结构如式I所示，本发明的2‑苯乙酰‑苯并咪唑‑7‑羧酸是利用工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)合成的，2‑苯乙酰‑苯并咪唑‑7‑羧酸具有疏水疏油性质，是一种黄色素，用于制备的染料，色牢度较好，不易因为与水、油的接触而掉色。并且合成方法及其提取工艺染料产量高，不受来源限制，操作过程易控制，生产成本低。

Description

一种染料化合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及染料化合物领域，具体涉及一种染料化合物及其制备方法和用途。
背景技术
近些年来，随着技术的进步和人民生活水平的提高，染料的应用越来越广泛，尤其是对于无毒环保染料的需求越来越大，这对染料工业的发展提出了更高的要求。目前的染料按其来源，主要可分为两大类：天然染料及合成染料。天然染料应用较早，且大多无毒环保，但存在着在自然界中含量有限、提取工艺复杂、生产成本高等局限性。合成染料与天然染料相比具有色泽鲜艳、不受原料来源限制、生产成本低等优点，但缺点在于合成染料大多结构复杂，生物毒性高，在自然界中很难降解或降解成本很高，对生态环境破坏较大。天然染料与合成染料的上述缺点严重制约了染料工业的迅速发展及其应用领域的进一步拓展。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种染料化合物及其制备方法和用途。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种化合物，所述化合物的结构式如式I所示：
Figure BDA0001751321230000011
化合物的名称为2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸(2-(Phenylacetyl)benzimidazole-7-carboxylic acid)，分子量280，分子式C16H12N2O3，特征紫外吸收波长为242nm，280nm，376nm，387nm。
本发明还提供一种2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI的重组菌在培养基上发酵，使2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶表达；
(2)回收并纯化2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸。
优选的，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI的碱基序列如SEQ IDNo.1所示。
优选的，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI的制备方法为：以纯化的玉蜀黍赤霉(Fusarium graminearum PH-1)ATCC MYA-4620的基因组DNA作为模板，使用引物A1：5’-CGGGATCCCTCAGCGCCTGTACAAAGACAC-3’和引物A2：5’-CGGAATTCCTAGTCATCCTGTAAGCTGATGGTC-3’通过聚合酶链式反应扩增得到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI。
优选的，所述纯化的玉蜀黍赤霉(Fusarium graminearum PH-1)的方法为：用真菌基因组DNA提取试剂盒纯化菌株编号ATCC MYA-4620的玉蜀黍赤霉Fusarium graminearumPH-1的基因组DNA。
优选的，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
优选的，所述重组菌的制备方法包括以下步骤：将碱基序列如SEQ ID No.1所示的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI插入到质粒pYES2上的BamHI和EcoRI限制性酶切位点之间，得到重组质粒pYES2-STBI；重组质粒pYES2-StBI转化进入酿酒酵母工程菌INVSc1中，得到的重组菌，命名为工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，该菌于2018年7月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼，保藏编号：GDMCCNO：60415。
优选的，重组菌在培养基上发酵方法包括以下步骤：
(1)吸取重组菌，即工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)的种子培养液加入到培养基之中，于25-30℃，摇床发酵培养；
(2)发酵过程中，检测600nm波长下发酵液的吸光度，待发酵液600nm波长下吸光度达到0.4-1.0时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨至发酵液中，并将发酵液置于25-30℃，摇床中发酵培养。
优选的，加入添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨后，摇床发酵培养12-120小时。
优选的，待发酵液600nm波长下吸光度达到0.8时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨至发酵液中。
优选的，发酵培养的温度为28℃。
优选的，加入添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨后，发酵培养的时间为72小时。
优选的，所述培养基为SC培养基，所述SC培养基组分包括：占SC培养基质量的选择性氨基酸混合物(-Ura)0.062％、无氨基酸酵母氮源基础6.4％、葡萄糖2％，所述SC培养基的pH5.5。
优选的，发酵过程中摇床的频率为200rpm。
优选的，制备工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)的种子培养液的方法为：从保存有工程菌S的固体培养基上挑取单个菌落于5mL的SC培养基之中，于28℃，200rpm摇床中培养24小时，即得工程菌S的种子培养液。
优选的，回收并纯化2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的方法包括以下步骤：(1)用氯仿萃取发酵后除去重组菌细胞的发酵液，得到包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的粗提物；(2)将包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的粗提物干燥至恒重；(3)干燥后的粗提物过硅胶柱，用氯仿洗脱并收集馏分；(4)将氯仿馏分干燥，将干燥得到的固体依次用甲醇、乙酸乙酯、正己烷采用洗涤、离心、弃上清液的方法除去有机杂质得到纯净的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸。
更优选的，洗涤、离心、弃上清液的离心的方法为21000×g离心10分钟。
优选的，发酵后除去重组菌细胞的发酵液的方法是：850×g离心5分钟。
优选的，优选的回收纯化过程中干燥的温度范围为37～45℃。
本发明还提供一种2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸在制备色素中的应用。
本发明还提供一种2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸在制备染料的应用。由于2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸具有疏水疏油的特性，其用于制备的染料，色牢度较好，不易因为与水、油的接触而掉色。
本发明的有益效果在于：本发明利用工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)合成了2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸具有疏水疏油性质，是一种黄色素，用于制备的染料，色牢度较好，不易因为与水、油的接触而掉色。并且合成方法及其提取工艺染料产量高，不受来源限制，操作过程易控制，生产成本低。
附图说明
图1为化合物2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的结构图。
图2为本发明利用工程菌S合成的黄色素天然染料2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的DMSO溶液；左侧为DMSO溶剂空白对照图。
图3为2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的紫外吸收谱。
图4为2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的质谱检测图[M-H]-。
图5为实施例2结果图。
图6为实施例3结果图。
图7为实施例4结果图。
图8为实施例5结果图。
图9为实施例6结果图。
图10为实施例7结果图。
图11为实施例8结果图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行具体说明，但不限于此。
实施例1
2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法。
(一)实验材料
玉蜀黍赤霉(Fusarium graminearum PH-1)购自美国标准生物品收藏中心(ATCC)，其编号为ATCC MYA-4620；真菌基因组DNA提取试剂盒及pYES2质粒载体购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司；限制性核酸内切酶BamHI和EcoRI购自宝生物工程(大连)有限公司；引物A1和A2订购自生工生物工程(上海)股份有限公司。
(二)工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)的制备。
(1)用真菌基因组DNA提取试剂盒纯化菌株编号ATCC MYA-4620的玉蜀黍赤霉Fusarium graminearum PH-1的基因组DNA；
(2)以纯化的玉蜀黍赤霉基因组DNA作为模板，使用引物A1：5’-CGGGATCCCTCAGCGCCTGTACAAAGACAC-3’和引物A2：5’-CGGAATTCCTAGTCATCCTGTAAGCTGATGGTC-3’通过聚合酶链式反应扩增得到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI，扩增得到的StBI基因序列为：SEQ ID No.1；
(3)扩增得到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI翻译后得到的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶，命名为StBI，其序列为SEQ ID No.2；
(4)扩增得到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因StBI通过限制性核酸内切酶BamHI和EcoRI连接到pYES2质粒载体中，即得到重组质粒pYES2-StBI；
(5)参照《分子生物学实验指导》(第二版)介绍的方法，将得到的重组质粒pYES2-StBI转化进入酿酒酵母工程菌INVSc1中，得到工程菌为S(Saccharomyces cerevisiae)。
(三)2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备。
A.从保存有工程菌S的固体培养基上挑取单个菌落于5mL的SC培养基之中，于28℃，200rpm摇床中培养24小时，即得工程菌S的种子培养液；所述SC培养基中各组分用量占SC培养基质量用量的百分比分别为：选择性氨基酸混合物(-Ura)0.062％；无氨基酸酵母氮源基础6.4％；葡萄糖2％；pH5.5；
B.吸取工程菌S的种子培养液加入到SC培养基之中，于28℃，摇床发酵培养，用分光光度计与600nm波长下检测上述发酵液的吸光度，待发酵液600nm波长下吸光度达到0.8时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨至上述发酵液中，将发酵液置于28℃，200rpm摇床中发酵培养72小时；
C.取200mL上述发酵液于离心机中850×g离心5分钟去除工程菌S的细胞；将去除细胞后的发酵液用200mL的氯仿萃取，此过程重复2次用于完全提取发酵液中的粗提物；将粗提物通过硅胶(200-300目)柱层析，收取100％氯仿洗脱的组分，并通过旋转蒸发干燥该组分；将干燥的组分用10mL甲醇振荡悬浮，然后21000×g离心10分钟，弃上清，此过程重复2次用于去除有机物杂质；之后采用同样的方法用乙酸乙酯和正己烷分别清洗2次该组分，从而得到纯净化合物。
(四)化合物的鉴定
1、进行UV波普扫描检测。UV吸收响应如图3所示，特征紫外吸收波长为242nm，280nm，376nm，387nm。
2、进行液相色谱、质谱检测。
用甲醇溶解化合物；用高效液相色谱于380nm波长下检测，高效液相色谱洗脱方法为梯度洗脱35min，30-90％(乙腈：水)，目标峰在20.13min被检测到，如图5(Ⅱ)所示。
质谱图[M-H]-如图4所示，可知其分子量为280。
3、进行核磁共振(NMR)鉴定。碳谱和氢谱如表1、表2所示。
表1制备的化合物在DMSO-d6中的13C NMR数据(100MHz)
Figure BDA0001751321230000061
表2制备的化合物在DMSO-d6中的1H NMR数据(400MHz)
Figure BDA0001751321230000062
根据核磁共振(NMR)碳谱和氢谱确定此纯净化合物的结构为：
Figure BDA0001751321230000071
为2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸。
(4)化合物溶解度的测试
在25℃下，分别称取100mL溶液：乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、氯仿、甘油、油脂和DMSO放入烧杯中。分别称取20g的黄色素固体粉末，并分别加入盛有溶液乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、氯仿、甘油、油脂和DMSO的烧杯中。逐步加入黄色素固体粉末的溶质，不断搅拌，充分溶解。保证溶液过饱和，过滤取出未溶解的固体黄色素，并在55℃烘干24小时，保证溶剂完全挥发。分别称量未溶解的固体总质量，通过公式(20g-未溶解色素质量＝已溶解色素质量)，求出100mL溶剂中已经溶解的固体质量，即为该温度下该固体的溶解度。在DMSO的溶液及空白对照如图2所示。
溶解度表(25℃，单位：g/100mL溶剂)
Figure BDA0001751321230000072
实施例2
2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成StBI基因酶的验证。
1、将没有插入酶基因StBI的空白质粒pYES2转入酿酒酵母工程菌INVSc1，如实施例1相同的方法培养72小时，取发酵液备用。
2、取实施例1的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)的发酵液和上述发酵液，进行液相检测，380nm波长，洗脱方法为梯度洗脱35min，30-90％(乙腈：水)。
结果如图4所示，没有插入酶基因StBI的空白质粒pYES2转入酿酒酵母工程菌INVSc1的发酵液如(I)所示，表明未检测到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸；带有重组质粒pYES2-StBI质粒的酿酒酵母工程菌INVSc1，即工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)的发酵液如(II)所示，表明检测到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸；证明StBI基因酶是合成2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的关键酶。
实施例3
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)分别发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.31g～1.98g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图6所示。
实施例4
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)发酵培养。区别在于发酵液600nm波长下吸光度达到0.4时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨。
发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.11g～1.29g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图7所示。
实施例5
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)发酵培养。区别在于发酵液600nm波长下吸光度达到0.6时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨。
发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.26g～1.52g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图8所示。
实施例6
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)发酵培养。区别在于发酵液600nm波长下吸光度达到1.0时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨。
发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.32g～1.79g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图9所示。
实施例7
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)发酵培养。区别在于培养温度为25℃。
发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.27g～1.61g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图10所示。
实施例8
如实施例1的方法制备的工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)，如实施例1的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的制备方法，将工程菌S(Saccharomyces cerevisiae)发酵培养。区别在于培养温度为30℃。
发酵培养12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时、84小时、96小时、108小时、120小时，结果从重组工程菌S的1L培养物中分别分离得到0.35g～1.87g的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸，如图11所示。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 广州中医药大学
<120> 一种染料化合物及其制备方法和用途
<130> 20180720
<160> 4
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1381
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 1
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agctaagaac ttggacacgc aattgcaatc tcaaggtttt ccacagccat catttgaagc 180
tgatggtcca acatacgttg ttcccaagga tgcccccaaa gcagcccacg aagcccgtgt 240
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g 1381
<210> 2
<211> 439
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 2
Met Gly Ser Ile Ser Ser Pro Ser Leu Ile Ile Asp Leu Ala Asn Ala
1 5 10 15
Val Ser Ser Ala Ala Lys Asn Leu Asp Thr Gln Leu Gln Ser Gln Gly
20 25 30
Phe Pro Gln Pro Ser Phe Glu Ala Asp Gly Pro Thr Tyr Val Val Pro
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Lys Asp Ala Pro Lys Ala Ala His Glu Ala Arg Val Ala Thr Ala Glu
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Ala Ala Leu Lys Leu Phe Asn Leu Val Ser Gly Pro Ser Glu Leu Leu
65 70 75 80
Pro Asn Met Thr Ala Ser Tyr His Thr Ile Phe Ala Leu Gln Trp Leu
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His His Phe Asp Val Phe Ser His Ile Pro Leu Asp Gly Ser Leu Ser
100 105 110
Tyr Glu Lys Leu Ala Thr Lys Ala Asn Val Pro Glu Ser Leu Leu Lys
115 120 125
Ser Val Ala Arg Met Ala Met Thr Ser Asn Ile Leu Ala Glu Pro Thr
130 135 140
Thr Gly Gln Val Ala His Ser Ala Asn Ser Ala Met Phe Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Asn Met Arg Asp Trp Ala Ser Tyr Met Phe Thr Ala Ser Ile Pro
165 170 175
Thr Ala Ala Ala Met Val Gln Ala Thr Glu Lys Trp Pro Gly Ser Val
180 185 190
Lys Lys Thr Glu Thr Ala Tyr Asn Ile Ala Phe Asn His Asp Leu Pro
195 200 205
Phe Phe Asp His Leu Ser Gln Ser Pro Val Met Thr Lys Gln Phe Ser
210 215 220
Gly Tyr Met Arg Ser Val Thr Asp Gly Gln Gly Met Asp Leu Ser His
225 230 235 240
Leu Val Asn Gly Phe Asp Trp Ala Ser Leu Pro Asp Lys Ser Leu Ile
245 250 255
Val Asp Ile Gly Gly Ser Ala Gly His Ala Ser Tyr Ala Leu Ala Ala
260 265 270
Ala Tyr Pro His Leu Arg Phe Glu Val Gln Asp Leu Asp Thr Val Val
275 280 285
Asn Gly Glu Lys Ala Ala Lys Glu His Glu Glu Ala Val Ser Lys His
290 295 300
Val Ile Gly Thr Asp Asn Arg Val Thr Phe Lys Ala His Asn Phe Phe
305 310 315 320
Glu Ala Gln Pro Thr Lys Asp Ala Thr Val Tyr Met Leu Arg Met Ile
325 330 335
Ile His Asp Trp Pro Asp Ala Glu Ala Lys Thr Ile Leu Gly Asn Leu
340 345 350
Val Pro Ala Leu Glu Ser Ala Lys Ala Thr Leu Leu Ile Met Asp Thr
355 360 365
Val Leu Pro Ser Pro Gly Ser Ile Pro Ser Val Arg Glu Arg Val Ile
370 375 380
Arg Thr Arg Asp Leu Thr Met Arg Gln Val Phe Asn Ala Lys Glu Arg
385 390 395 400
Gly Val Asp Asp Trp Glu Ala Ile Leu Arg Glu Thr Asp Ser Arg Leu
405 410 415
Thr Leu Lys Asn Leu Arg Gln Pro Glu Gly Ser Asn Met Cys Leu Leu
420 425 430
Thr Ile Ser Leu Gln Asp Asp
435
<210> 3
<211> 30
<212> DNA
<213> 未知
<400> 3
cgggatccct cagcgcctgt acaaagacac 30
<210> 4
<211> 33
<212> DNA
<213> 未知
<400> 4
cggaattcct agtcatcctg taagctgatg gtc 33

Claims (9)

1.一种化合物，其特征在于，所述化合物的结构式如式I所示：
Figure FDA0003043154930000011
2.一种如权利要求1所述的化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因的重组菌在培养基上发酵，使2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶表达，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因的碱基序列如SEQ ID No.1所示，其中，所述重组菌的制备方法包括以下步骤：将碱基序列如SEQ IDNo.1所示的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因插入到质粒pYES2上的BamHI和EcoRI限制性酶切位点之间，得到重组质粒；重组质粒转化进入酿酒酵母工程菌INVSc1中，得到的重组菌；
(2)回收并纯化2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因的制备方法为：以纯化的玉蜀黍赤霉的基因组DNA作为模板，使用引物A1：5’-CGGGATCCCTCAGCGCCTGTACAAAGACAC-3’和引物A2：5’-CGGAATTCCTAGTCATCCTGTAAGCTGATGGTC-3’通过聚合酶链式反应扩增得到2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶基因。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸合成酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，重组菌在培养基上发酵方法包括以下步骤：
(1)吸取如权利要求2所述的重组菌的种子培养液加入到培养基之中，于25-30℃摇床发酵培养；
(2)发酵过程中，检测600nm波长下发酵液的吸光度，待发酵液600nm波长下吸光度达到0.4-1.0时，添加终浓度为1％的酵母浸膏和2％的蛋白胨至发酵液中，并将发酵液置于25-30℃，摇床中发酵培养。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述培养基组分包括：占培养基质量的选择性氨基酸混合物0.062％、无氨基酸酵母氮源基础6.4％、葡萄糖2％，所述培养基的pH5.5。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，回收并纯化2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的方法包括以下步骤：(1)用氯仿萃取发酵后除去重组菌细胞的发酵液，得到包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的粗提物；(2)将包含2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸的粗提物干燥至恒重；(3)干燥后的粗提物过硅胶柱，用氯仿洗脱并收集馏分；(4)将氯仿馏分干燥，将干燥得到的固体依次用甲醇、乙酸乙酯、正己烷采用洗涤、离心、弃上清液的方法除去有机杂质，得到纯净的2-苯乙酰-苯并咪唑-7-羧酸。
8.一种如权利要求1所述化合物在制备色素中的应用。
9.一种如权利要求1所述化合物在制备黄色染料中的应用。
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