CN109069614A - 用改进的制剂使甲病毒稳定的组合物和方法 - Google Patents
用改进的制剂使甲病毒稳定的组合物和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109069614A CN109069614A CN201780026126.8A CN201780026126A CN109069614A CN 109069614 A CN109069614 A CN 109069614A CN 201780026126 A CN201780026126 A CN 201780026126A CN 109069614 A CN109069614 A CN 109069614A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- alphavirus
- composition
- concentration
- living
- virus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 title claims abstract description 285
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 255
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 80
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 146
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims abstract description 117
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 27
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 11
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 110
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 108
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 claims description 105
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 95
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 95
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 94
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 71
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 68
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 68
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 68
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 68
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 64
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 56
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 35
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 34
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 32
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 32
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 30
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 30
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 30
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 28
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 25
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 24
- 201000009182 Chikungunya Diseases 0.000 claims description 18
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 18
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 18
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 18
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 18
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 17
- 208000004293 Chikungunya Fever Diseases 0.000 claims description 16
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 15
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 15
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 15
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 15
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 15
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 14
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 claims description 14
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims description 12
- 239000002574 poison Substances 0.000 claims description 12
- -1 galactolipin Chemical compound 0.000 claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 206010066919 Epidemic polyarthritis Diseases 0.000 claims description 8
- 241000710942 Ross River virus Species 0.000 claims description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 8
- 208000006825 Eastern Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 7
- 201000005804 Eastern equine encephalitis Diseases 0.000 claims description 7
- 206010014587 Encephalitis eastern equine Diseases 0.000 claims description 7
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims description 7
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 206010014614 Encephalitis western equine Diseases 0.000 claims description 6
- 241000710944 O'nyong-nyong virus Species 0.000 claims description 6
- 241000710961 Semliki Forest virus Species 0.000 claims description 6
- 208000005466 Western Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005806 Western equine encephalitis Diseases 0.000 claims description 6
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 5
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 5
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 5
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 4
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 claims description 4
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N (2s)-4-hydroxy-2-(propylamino)butanoic acid Chemical compound CCCN[C@H](C(O)=O)CCO DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- 208000007887 Alphavirus Infections Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 5
- FRYDSOYOHWGSMD-UHFFFAOYSA-N [C].O Chemical class [C].O FRYDSOYOHWGSMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims 2
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 claims 2
- 208000000832 Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- VUZPPFZMUPKLLV-UHFFFAOYSA-N methane;hydrate Chemical compound C.O VUZPPFZMUPKLLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract description 17
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract description 17
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 30
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 26
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 23
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 21
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 13
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 13
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 11
- 238000011160 research Methods 0.000 description 11
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 11
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 11
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 11
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 10
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 9
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 9
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 9
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 9
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 6
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 5
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 5
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 4
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 4
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 4
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 4
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 4
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 3
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 description 3
- 241000710924 Togaviridae Species 0.000 description 3
- 241000710959 Venezuelan equine encephalitis virus Species 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 2
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000763097 Me Tri virus Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N (2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-methyl-5-[[(1S,4R,5S,6S)-4,5,6-trihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1-cyclohex-2-enyl]amino]-2-oxanyl]oxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-oxanyl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound O([C@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O)N[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1)O)C)[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N 0.000 description 1
- LGQKSQQRKHFMLI-SJYYZXOBSA-N (2s,3r,4s,5r)-2-[(3r,4r,5r,6r)-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)OC1 LGQKSQQRKHFMLI-SJYYZXOBSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 1-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- QIGJYVCQYDKYDW-UHFFFAOYSA-N 3-O-alpha-D-mannopyranosyl-D-mannopyranose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(CO)OC(O)C1O QIGJYVCQYDKYDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGQKSQQRKHFMLI-UHFFFAOYSA-N 4-O-beta-D-xylopyranosyl-beta-D-xylopyranose Natural products OC1C(O)C(O)COC1OC1C(O)C(O)C(O)OC1 LGQKSQQRKHFMLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PZPXDAEZSA-N 4β-mannobiose Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PZPXDAEZSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-WHZQZERISA-N D-aldose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-WHZQZERISA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-IVMDWMLBSA-N D-allopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- ZCLAHGAZPPEVDX-UHFFFAOYSA-N D-panose Natural products OC1C(O)C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC1COC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 ZCLAHGAZPPEVDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- SQNRKWHRVIAKLP-UHFFFAOYSA-N D-xylobiose Natural products O=CC(O)C(O)C(CO)OC1OCC(O)C(O)C1O SQNRKWHRVIAKLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 229920001908 Hydrogenated starch hydrolysate Polymers 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N Isomaltose Natural products OC[C@H]1O[C@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N O6-alpha-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OCC1OC(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)C(O)C(O)C1O AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101800001758 RNA-directed RNA polymerase nsP4 Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002632 acarbose Drugs 0.000 description 1
- XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N acarviostatin I01 Natural products OC1C(O)C(NC2C(C(O)C(O)C(CO)=C2)O)C(C)OC1OC(C(C1O)O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-ZWSAEMDYSA-N cellotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-ZWSAEMDYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- WDRWZVWLVBXVOI-QTNFYWBSSA-L dipotassium;(2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O WDRWZVWLVBXVOI-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000012537 formulation buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N gentiobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 229920000550 glycopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000905 isomalt Substances 0.000 description 1
- 235000010439 isomalt Nutrition 0.000 description 1
- HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N isomaltol Natural products CC(=O)C=1OC=CC=1O HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N isomaltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- QIGJYVCQYDKYDW-LCOYTZNXSA-N laminarabiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1O QIGJYVCQYDKYDW-LCOYTZNXSA-N 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000002991 molded plastic Substances 0.000 description 1
- 235000013919 monopotassium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 230000002969 morbid Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- ZCLAHGAZPPEVDX-MQHGYYCBSA-N panose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@@H]1CO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZCLAHGAZPPEVDX-MQHGYYCBSA-N 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920006316 polyvinylpyrrolidine Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/36011—Togaviridae
- C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
- C12N2770/36134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本文的实施方案涉及用于使活甲病毒稳定的组合物和方法。其他实施方案涉及用于降低减毒活甲病毒的降解的组合物和方法。某些实施方案涉及通过提供改进的制剂来提供稳定组合物,同时减少受试者中对赋形剂的免疫反应,所述赋形剂使所述活甲病毒稳定。其他实施方案涉及本文公开的组合物在用于便携式应用和方法的药盒中的用途,其中所述组合物降低所述活甲病毒的降解。
Description
优先权
本PCT申请根据35USC§119(e)要求2016年3月31日提交的临时美国专利申请序列号62/316,262的权益,所述临时美国专利申请以引用的方式整体并入本文。
政府资助
本发明是在政府支持下根据美国国立卫生研究院授予的许可R01AI093491进行。政府享有本发明的某些权利。
技术领域
本文的实施方案涉及用于使甲病毒稳定的组合物和方法。在某些实施方案中,本文公开的组合物和方法涉及使活甲病毒稳定或使减毒活甲病毒稳定。其他实施方案涉及用于降低甲病毒的降解的组合物和方法。其他实施方案涉及通过提供用于使本文公开的组合物稳定且将本文公开的组合物递送至受试者的改进的制剂来提供针对减毒活甲病毒或活甲病毒的制剂,所述制剂在受试者中对用于所述减毒活甲病毒或活甲病毒的赋形剂具有降低的免疫反应。其他实施方案涉及针对不含人或其他哺乳动物来源的副产物如蛋白质的HEPES缓冲液中的甘露糖醇、组氨酸和蔗糖的制剂。其他实施方案涉及在用于便携式应用和方法的药盒中使用的甲病毒制剂。
背景技术
用于保护免受病毒感染的疫苗已被有效地用于降低人或动物病毒性疾病的发病率。用于病毒疫苗的最成功的技术之一是用目标病毒的弱化或减毒株(“减毒活病毒”)使动物或人免疫。由于受试者免疫后的复制有限,减毒株不会引起病毒相关疾病,因为它不能复制并传递给宿主。然而,减毒病毒仍然能够表达病毒抗原,并且可对暴露的受试者中的病毒产生有效且持久的免疫应答。因此,在随后暴露于病毒时,免疫的个体发展与病毒感染有关的疾病的机会减少。为了使减毒活病毒在疫苗中有效,所述减毒活病毒必须能够在免疫后复制,并且所述病毒本身必须被保护免于降解以便被有效且准确地使用。一些疫苗对温度极限敏感;过热或意外冷冻会使病毒失活。在发展中国家或在偏远地区治疗患者时,在整个分配过程中维持有效且受保护的环境尤其困难。
发明内容
本文的实施方案涉及用于使活甲病毒稳定的组合物和方法。其他实施方案涉及用于降低在免疫原性组合物中使用的减毒活甲病毒的降解和/或使在免疫原性组合物中使用的减毒活甲病毒稳定的组合物和方法,所述免疫原性组合物用于使受试者免疫以抵抗由所述甲病毒引起的感染。其他实施方案涉及提供不含人或其他哺乳动物副产物的稳定组合物,以便减少受试者对使所述减毒活甲病毒稳定的赋形剂的免疫反应。根据这些实施方案,当用作针对受试者的甲病毒感染的免疫原性组合物时,稳定制剂不含动物副产物。其他实施方案涉及本文公开的稳定组合物在用于便携式应用和方法的药盒中的用途。
在一些实施方案中,本文公开的某些组合物可包括降低减毒活甲病毒的降解、同时提供当施用于受试者时所述受试者具有降低的过敏反应的制剂的组分的组合。通过考虑用于使在免疫原性甲病毒制剂中使用的甲病毒稳定的原料的纯度,设计了本文公开的某些制剂以提供免疫原性甲病毒制剂的更高水平的安全性。过去的一些制剂使用动物来源的赋形剂来使病毒和其他剂稳定。在某些情况下,这些动物来源的赋形剂和蛋白质中的一些可携带外来剂(例如BSE或过敏原),当暴露于这些剂时,它们会引起受试者的不良反应。不含人或其他哺乳动物来源的赋形剂的制剂降低了向受试者引入未知或不安全的剂的风险(例如与这些剂相关的杂质)。本文提供了与含有动物来源的剂的制剂一样稳定或更好的不含动物来源的剂的制剂。本文公开的其他实施方案涉及极大地增强减毒活甲病毒的稳定性的赋形剂的组合。实施方案还涉及用于在所有储存温度范围内增强病毒制剂的稳定性和用于降低对较低温度(例如冷藏或冷冻储存)的需要以促进病毒制剂稳定转移至偏远地区的其他组合物和方法。在其他实施方案中,与不含这些组合物的其他制剂相比,本文公开的组合物和方法涉及减少组合物的重悬浮时间和/或改善水性和/或重构的活甲病毒的生理学性质以及增加其保质期。
在某些实施方案中,本文公开的制剂能够赋予稳定效应以免于在液体、冷冻、冻干和再水合制剂中损失病毒滴度。在其他实施方案中,本文公开的组合物涉及活甲病毒或减毒活甲病毒组合物,所述组合物包含但不限于一种或多种活甲病毒、HEPES缓冲液、一种或多种氨基酸和一种或多种碳水化合物剂。在其他实施方案中,本文公开的稳定组合物可包含HEPES缓冲液中的活甲病毒、包括组氨酸的氨基酸以及一种或多种包括蔗糖和甘露糖醇中的一种或多种的碳水化合物剂。在其他实施方案中,活甲病毒制剂可包含基于HEPES的缓冲液中的活甲病毒,所述缓冲液具有组氨酸、甘露糖醇和蔗糖。
在一些实施方案中,甲病毒制剂可包含但不限于一种或多种减毒活甲病毒。根据这些实施方案,可将一种或多种减毒活甲病毒组合在具有甘露糖醇、组氨酸和/或蔗糖的缓冲液中。在某些实施方案中,缓冲液如碱性缓冲液可包括HEPES缓冲液。根据这些实施方案,在所述减毒活甲病毒组合物中,缓冲的HEPES可以是约pH 6.0至约pH 10.0,浓度为约1.0至约200.0mM HEPES,组氨酸的浓度可以是约0.1%至约5.0%(w/v)(约1至约50mg/ml),蔗糖可以是约0.1%至约20%(w/v)(约1至约200mg/mL),并且甘露糖醇可以是约1.0%至约15%(w/v)(约1至约150mg/mL)。在其他实施方案中,HEPES缓冲液浓度可以是约5.0mM至约50.0mM、约10.0mM至约30mM或约10.0mM至约20mM。
在某些实施方案中,在所述减毒活甲病毒组合物中,甲病毒制剂缓冲液可以是pH为约6.5至约8.0、约7.0至约7.5或约7.2的约15mM HEPES缓冲液,而组氨酸可以是约5.0mg/ml至约20.0mg/ml,蔗糖可以是约35.0mg/ml至约50.0mg/ml,并且甘露糖醇可以是约25.0mg/ml至约40.0mg/ml。在其他实施方案中,本文公开的制剂可包含浓度为约15.0mM溶液的HEPES缓冲液(pH 7.2),而组氨酸可以是约5.0mg/mL至约12.5mg/mL,蔗糖可以是约35.0mg/mL至约50.0mg/mL,并且甘露糖醇可以是约25.0mg/mL至约40.0mg/mL,以便使活甲病毒或减毒活甲病毒稳定。
在其他实施方案中,一种或多种减毒活甲病毒可与一种或多种剂组合,所述剂包括但不限于蔗糖、氯化钠、谷氨酸一钠、磷酸钠、磷酸钾和氯化钾,以便使所述减毒活甲病毒在各种条件下稳定。根据这些实施方案,HEPES缓冲液可包括但不限于与活甲病毒或减毒活甲病毒组合的以下中的一种或多种:浓度为约1.0%至约10.0%(w/v)的蔗糖;浓度为约0.05%至约1.5%(w/v)的氯化钠;浓度为约0.05%至约0.5%(w/v)的谷氨酸一钠;浓度为约0.01至约0.15%(w/v)的磷酸钠;浓度为约0.01%至约0.05%(w/v)的磷酸钾;以及浓度为约0.005%至约0.05%(w/v)的氯化钾,其中使所述甲病毒稳定并且降低所述甲病毒的降解。
在另一个实施方案中,与活甲病毒组合的蔗糖的浓度可以是约5.0%(w/v);氯化钠的浓度可以是约0.64%(w/v);谷氨酸一钠的浓度可以是约0.1%(w/v);磷酸钠的浓度可以是约0.09%(w/v);磷酸钾的浓度可以是约0.016%(w/v);并且氯化钾的浓度可以是约0.016%(w/v),其中使所述活甲病毒稳定并且降低降解且延长保质期。本文公开的一些实施方案涉及用于降低活甲病毒的失活的方法。根据这些实施方案,方法可包括但不限于将活甲病毒与组合物组合,所述组合物包含但不限于0.1mM至200.0mM HEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂(例如单糖、糖醇等)和一种或多种氨基酸。根据这些实施方案,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是约pH 6.0至pH 9.0,浓度为约1.0mM至约200mM,组氨酸可以是约0.1%至约5.0%(w/v),蔗糖可以是约0.1%至约20%(w/v),并且甘露糖醇可以是约1.0%至约10%(w/v)。
本文公开的一些实施方案可涉及用于降低活甲病毒的失活的方法。根据这些实施方案,可将一种或多种活甲病毒与组合物组合,所述组合物包含但不限于0.1至200mMHEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂和一种或多种盐剂。根据这些实施方案,当与活甲病毒组合以便降低所述甲病毒的降解时,蔗糖的浓度可以是约1.0%至约10.0%(w/v);氯化钠的浓度可以是约0.1%至约1.5%(w/v);谷氨酸一钠的浓度可以是约0.05%至约0.5%(w/v);磷酸钠的浓度可以是约0.01至约0.15%(w/v);磷酸钾的浓度可以是约0.01%至约0.05%(w/v);并且氯化钾的浓度可以是约0.01%至约0.05%(w/v)。在另一个实施方案中,当与活甲病毒或减毒活甲病毒组合时,蔗糖的浓度可以是约5.0%(w/v);氯化钠的浓度可以是约0.64%(w/v);谷氨酸一钠的浓度可以是约0.1%(w/v);磷酸钠的浓度可以是约0.09%(w/v);磷酸钾的浓度可以是约0.016%(w/v);并且氯化钾的浓度可以是约0.016%(w/v)。
在某些实施方案中,本文公开的组合物可用于重构或再水合已冻干的活甲病毒。例如,在从冷冻至室温等各种温度下运输脱水或冻干或冷冻的活甲病毒之后。本文使用的组合物可在各种储存温度和冻融循环期间增加活甲病毒或减毒活甲病毒的稳定和/或降低活甲病毒或减毒活甲病毒的失活和/或降解。
在某些实施方案中,可受益于本文公开的组合物的活甲病毒或减毒活甲病毒可包括但不限于冠状病毒科和披膜病毒科家族中的基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、东方马脑炎、委内瑞拉马脑炎病毒和西方马脑炎或其他甲病毒。其他塞姆利基森林病毒复合物包括但不限于比巴鲁(Bebaru)病毒,马雅罗(Mayaro)病毒,亚型:乌纳(Una)病毒,阿尼昂尼昂(O’Nyong Nyong)病毒:亚型:伊博-奥拉(Igbo-Ora)病毒,罗斯河病毒:亚型:比巴鲁病毒;亚型:盖塔(Getah)病毒;亚型:鹭山(Sagiyama)病毒,以及塞姆利基森林病毒:亚型:Me Tri病毒。
本文公开的其他实施方案涉及减毒活甲病毒组合物和方法,其涉及产生能够减少或预防由本文考虑的一种或多种甲病毒引起的医学病状的发作的疫苗或免疫原性组合物。在某些实施方案中,本文考虑的组合物的一种或多种减毒活病毒可以是药物组合物的一部分并且包括药学上可接受的赋形剂。当将所述药物组合物施用于受试者时,本文公开的药物组合物可用于减少甲病毒感染和由甲病毒感染引起的病状的发作。受试者可以是哺乳动物,例如家畜、宠物、牲畜、其他动物或人受试者(成人或儿童)。
其他实施方案涉及用于降低减毒活病毒的失活的药盒,所述药盒包括但不限于容器;以及本文公开的组合物。
附图说明
以下附图构成本说明书的一部分,并且被包括以进一步说明本文特定实施方案的某些方面。可通过参考这些附图中的一个或多个与本文呈现的具体实施方式来更好地理解所述实施方案。
图1是表示在本文公开的一个实施方案中使用各种液体和冻干组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性直方图。
图2是表示在冻融处理后在本文公开的一个实施方案中使用各种液体组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性直方图。
图3是表示在约40℃下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图4是表示在约25℃下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图5是表示在约4℃下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图6是表示在各种温度下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性活甲病毒的稳定性的实验的累积综述的直方图。
图7是表示在本文公开的一个实施方案中使用的各种剂的浓度范围的直方图,其中在用于使活甲病毒稳定的这些示例性组合物中包含的剂是甘露糖醇、组氨酸和蔗糖。
图8是表示在本文公开的一个实施方案中使用本文公开的呈液体和冻干状态的各种组合物来测试对活甲病毒的作用的实验的直方图。
图9是表示在本文公开的一个实施方案中在冻融条件下使用本文公开的各种组合物来测试对活甲病毒的作用的实验的直方图。
图10是表示在约40℃下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图11是表示在约25℃下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图12是表示在约4℃或约冷藏温度下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图13是表示在各种温度下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性减毒活甲病毒的稳定性的实验的累积综述的直方图。
图14是在本文公开的一个实施方案中,与剂本身和用于预测减毒活甲病毒的所希望稳定组合物的其他剂相比,在不同条件下的各种剂的图。
图15是表示在本文公开的一个实施方案中使用的各种剂的浓度范围的直方图,其中在用于使活甲病毒稳定的这些示例性组合物中包含的剂是甘露糖醇、组氨酸和蔗糖。
图16是表示在本文公开的一个实施方案中使用本文公开的呈液体和冻干状态的各种组合物来测试对活甲病毒的作用的实验的直方图。
图17是表示在约40℃下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图18是表示在约25℃下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图19是表示在约4℃或约冷藏温度下在本文公开的一个实施方案中用于测试各种制剂中的示例性活甲病毒的稳定性的实验的示例性图。
图20是表示在各种温度下在本文公开的一个实施方案中使用各种组合物来测试示例性减毒活甲病毒的稳定性的实验的累积综述的直方图。
说明性实施方案的描述
定义
如本文所用,“一个/种(a/an)”可表示一个/种或多于一个/种项目。
如本文所用,“约”可表示达到并且包括加或减百分之五,例如,约100可表示95和达到105。
如本文所用,CHIKV可指基孔肯雅热病毒。
如本文所用,TCID50可指50%组织培养感染剂量。
如本文所用,HB可指HEPES缓冲盐水。
如本文所用,HBS可指HEPES缓冲盐水+蔗糖。
如本文所用,DMEM可指杜氏改良的最低必需培养基。
如本文所用,PBS可指磷酸盐缓冲盐水。
如本文所用,FBS可指胎牛血清。
如本文所用,Lyo可指冻干的或脱水的,这取决于所提及的制剂。
如本文所用,“减毒甲病毒”或“减毒活甲病毒”可指当施用于受试者(例如动物或人)时表现出疾病临床征象减轻或无临床征象的甲病毒。
具体实施方式
在以下章节中,描述了各种示例性组合物和方法以详述各种实施方案。对于本领域技术人员显而易见的是,实践各种实施方案不需要使用本文概述的所有或甚至一些具体细节,而是可通过常规实验来修改浓度、时间和其他具体细节。在一些情况下,众所周知的方法或组分未包括在说明书中。
在某些实施方案中,已经在本文公开的各种制剂中观察到在免疫原性或疫苗制剂中使用的减毒活甲病毒的稳定性。在一些实施方案中,已经证明了通过降低液体、冷冻、冻干和重构或再水合的减毒活甲病毒中的滴度损失来增加甲病毒稳定性的制剂。在某些实施方案中,活甲病毒制剂可包含但不限于一种或多种活甲病毒或减毒活甲病毒、HEPES缓冲液、一种或多种氨基酸以及一种或多种碳水化合物剂。在某些实施方案中,本文公开的组合物可包含HEPES缓冲液中的甲病毒、一种或多种包括组氨酸的氨基酸和一种或多种包括蔗糖和/或甘露糖醇中的至少一种的碳水化合物剂。本文公开的某些组合物可包含盐或盐溶液。根据这些实施方案,本文公开的制剂可用于活甲病毒或减毒活甲病毒的约-80℃至约40℃或更高的液体、冷冻或冻干储存,而无组合物中的甲病毒滴度的显著损失。在一些实施方案中,例如,可使用本文公开的制剂实现4℃下的长期储存。在某些实施方案中,本文考虑的组合物可部分或完全脱水或水合。
在一些实施方案中,预期受益于本文公开的组合物的活甲病毒或减毒活甲病毒可包括但不限于冠状病毒科和披膜病毒科家族中的基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、东方马脑炎、委内瑞拉马脑炎病毒和西方马脑炎或其他甲病毒。其他塞姆利基森林病毒复合物包括但不限于比巴鲁(Bebaru)病毒,马雅罗(Mayaro)病毒,亚型:乌纳(Una)病毒,阿尼昂尼昂(O’Nyong Nyong)病毒:亚型:伊博-奥拉(Igbo-Ora)病毒,罗斯河病毒:亚型:比巴鲁病毒;亚型:盖塔(Getah)病毒;亚型:鹭山(Sagiyama)病毒,以及塞姆利基森林病毒:亚型:Me Tri病毒。
本文公开的某些实施方案涉及基孔肯雅热病毒。基孔肯雅热病毒是具有大约11.6kb的正义单链RNA基因组的甲病毒。它是塞姆利基森林病毒复合物的成员,并且与罗斯河病毒、阿尼昂尼昂病毒和塞姆利基森林病毒密切相关。本文公开的组合物可用于通过降低活甲病毒或减毒活甲病毒的降解来使塞姆利基森林病毒复合物变种的病毒稳定。
在某些实施方案中,本文考虑的减毒活甲病毒可包括嵌合甲病毒。在其他实施方案中,减毒活甲病毒可包括减毒活或嵌合基孔肯雅热病毒。根据这些实施方案,一种示例性嵌合甲病毒是能够在哺乳动物细胞中表达而不能在昆虫细胞中表达的嵌合甲病毒。在某些实施方案中,减毒活甲病毒可包括不能在蚊子和蚊子细胞中复制的减毒活甲病毒。在其他实施方案中,预期受益于本文公开的组合物的减毒活甲病毒可以是已被操作为在真核生物元件的真核生物控制下的减毒活甲病毒(例如插入真核生物元件如IRES序列和/或甲病毒的亚基因组启动子的失活)。在其他实施方案中,减毒活甲病毒可包括甲病毒核酸,其具有(i)在甲病毒的非结构蛋白4(nsP4)编码序列的末端与亚基因组RNA编码序列的起始AUG之间插入内部核糖体进入位点(IRES),和(ii)失活的亚基因组启动子,其中所述甲病毒被减毒。在某些实施方案中,所述IRES序列可以是脑脊髓炎病毒(EMCV)IRES或能够产生在疫苗组合物中使用的减毒活甲病毒构建体的其他类似IRES。
本文的实施方案涉及用于降低或防止减毒活甲病毒的降解和/或失活的方法和组合物。根据这些实施方案,某些组合物可包括降低减毒活甲病毒的降解和/或失活的组分的组合。本文的其他实施方案涉及能够增强减毒活甲病毒的稳定性的剂的组合。本文的其他组合物和方法涉及降低对较低温度(例如冷藏或冷冻储存)的需要,同时增加水性和/或重构的活甲病毒或减毒活甲病毒的保质期。
在一些实施方案中,一种或多种活甲病毒或减毒活甲病毒可与一种或多种氨基酸和一种或多种碳水化合物组合。在某些实施方案中,本文公开的甲病毒制剂可包含HEPES缓冲液、碳水化合物和氨基酸中的至少三种组分。在其他实施方案中,用于增加本文公开的活甲病毒的稳定的制剂可包括不含人或哺乳动物来源的剂如蛋白质(例如无血清或明胶)的组合物。在其他实施方案中,可将盐剂添加至这些组合物以增强制剂的缓冲能力或其他所需性质。
本文公开的其他实施方案涉及用于制备免疫原性或疫苗组合物的活甲病毒或减毒活甲病毒组合物,所述免疫原性或疫苗组合物能够在施用于受试者时减少或预防由一种或多种甲病毒引起的感染的发作或暴露的副作用。预期受益于这些免疫原性或疫苗组合物的受试者包括人(例如成人、青少年、儿童和婴儿)以及动物,如宠物、牲畜或其他家养或野生动物。
一些实施方案涉及用于降低活甲病毒或减毒活甲病毒的失活的方法,所述方法包括但不限于将一种或多种甲病毒或减毒活甲病毒与能够降低所述甲病毒的失活的组合物组合,所述组合物包括但不限于一种或多种蛋白质剂、一种或多种氨基酸、一种或多种碳水化合物、一种或多种糖或多元醇剂以及任选的HEPES缓冲液,其中所述组合物降低甲病毒的失活。根据这些实施方案,所述减毒活病毒可包括特定甲病毒,如与基孔肯雅热(例如塞姆利基森林复合病毒)具有相似特征的甲病毒以及与甲病毒基孔肯雅热病毒具有相似的遗传结构、结构和非结构蛋白质布局和/或二级结构等的其他甲病毒。
在一些实施方案中,在本文公开的制剂中使用的碳水化合物可以是糖或多元醇或糖醇。根据这些实施方案,糖可包括但不限于单糖(例如葡萄糖、半乳糖、核糖、甘露糖、鼠李糖、塔罗糖、木糖或阿洛糖阿拉伯糖)、二糖(例如海藻糖、蔗糖、麦芽糖、异麦芽糖、纤维二糖、龙胆二糖、昆布二糖、木二糖、甘露二糖、乳糖或果糖)、三糖(例如阿卡波糖、棉子糖、松三糖、潘糖或纤维三糖)或糖聚合物(例如葡聚糖、黄原胶、普鲁兰多糖、环糊精、直链淀粉、支链淀粉、淀粉、纤维寡糖、纤维素、低聚麦芽糖、糖原、壳聚糖或几丁质)。多元醇可包括但不限于糖醇,如甘露糖醇、山梨糖醇、阿拉伯糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、木糖醇、糖醇、乙二醇、聚糖醇、聚乙二醇、聚丙二醇、异麦芽酮糖醇、氢化淀粉水解物以及甘油。
在某些实施方案中,在本文公开的制剂中使用的其他碳水化合物剂可包括但不限于蔗糖、果糖、半乳糖、海藻糖、甘露糖醇、山梨糖醇、直链淀粉、支链淀粉、淀粉、纤维素、低聚麦芽糖、糖原、壳聚糖或几丁质。在其他实施方案中,预期在本文中使用的氨基酸至少包括组氨酸和任选的甘氨酸。
在一些实施方案中,在所述减毒活甲病毒组合物中,HEPES缓冲液可具有约pH 6.0至约pH 10的pH、约1.0mM至约200mM的浓度,一种或多种氨基酸的浓度可以是约1.0mg/ml至约40mg/ml,并且一种或多种碳水化合物剂的浓度可以是约1.0mg/ml至约100mg/ml。在其他实施方案中,在所述减毒活甲病毒组合物中,HEPES缓冲液的浓度可以是约pH 6.5至pH8.0,浓度为约1.0mM至约40mM的,一种或多种氨基酸的浓度可以是约1.0mg/ml至约30mg/ml,并且一种或多种碳水化合物剂的浓度可以是约10mg/ml至约50mg/ml。
在某些实施方案中,减毒活甲病毒组合物可包含但不限于HEPES缓冲液、甘露糖醇、组氨酸和蔗糖。根据这些实施方案,HEPES缓冲液可以是约pH 6.0至约pH 10.0的pH,浓度为约1.0mM至约200mM,组氨酸的浓度可以是约0.1%至约5.0%,蔗糖的浓度可以是约0.1%至20.0%,并且甘露糖醇的浓度可以是约1.0%至约10%,以及一种或多种减毒活甲病毒。在某些实施方案中,制剂还可包含10mM至150mM盐(例如氯化钠或其他合适的盐)。
针对用于降低减毒活甲病毒组合物的失活的组合物和方法的一些实施方案可包括但不限于将一种或多种减毒活甲病毒与组合物组合,所述组合物包含但不限于0.1mM至20mM HEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂和一种或多种氨基酸。根据这些实施方案,当与减毒活甲病毒组合时,缓冲的HEPES的浓度可以是在约1至约200mM下约pH 6.0至pH 10,组氨酸的浓度可以是约0.1%至约5.0%,蔗糖的浓度可以是约0.1%至约20%,并且甘露糖醇的浓度可以是约1.0%至约10%。在一些实施方案中,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是在约1至约40mM下约pH 6.0至pH 10,而组氨酸可以是约5mg/ml至约50mg/ml,蔗糖可以是约5mg/ml至约50mg/ml,并且甘露糖醇可以是约5mg/ml至约50mg/ml。在其他实施方案中,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是在约1至约30mM下约pH 6.5至pH7.5,而组氨酸可以是约5至约30mg/ml,蔗糖可以是约10至约50mg/ml,并且甘露糖醇可以是约5至约40mg/ml。在其他实施方案中,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是在约10至20mM下约pH 7.2,而组氨酸可以是约5mg/ml至约25mg/ml,蔗糖可以是约20mg/ml至约50mg/ml,并且甘露糖醇可以是约10mg/ml至约40mg/ml。在其他实施方案中,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是15mM溶液(pH 7.2),而组氨酸可以是约5mg/ml至约20mg/ml,蔗糖可以是约35mg/ml至约50mg/ml,并且甘露糖醇可以是约25mg/ml至约40mg/ml。在另一个实施方案中,当与减毒活甲病毒组合时,HEPES缓冲液可以是15mM溶液(pH 7.2),而组氨酸是约5.0mg/ml至12.5mg/mL,蔗糖是约35.0mg/ml至约50.0mg/mL,并且甘露糖醇是约25.0mg/ml至约40.0mg/mL。
本文公开的一些实施方案可涉及用于降低活甲病毒或减毒活甲病毒的失活的组合物,其中所述组合物和方法可包括但不限于将一种或多种甲病毒与组合物组合,所述组合物包含但不限于0.1mM至200mM HEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂和一种或多种盐剂。根据这些实施方案,为了降低甲病毒的降解,蔗糖的浓度可以是约1.0%至约10.0%(w/v);氯化钠的浓度可以是约0.1%至约1.5%(w/v);谷氨酸一钠的浓度可以是约0.05%至约0.5%(w/v);磷酸钠的浓度可以是约0.01至约0.15%(w/v);磷酸钾的浓度可以是约0.01%至约0.05%(w/v);并且氯化钾的浓度可以是约0.01%至约0.05%(w/v)。在另一个实施方案中,当与活甲病毒组合时,蔗糖的浓度可以是约5.0%(w/v);氯化钠的浓度可以是约0.64%(w/v);谷氨酸一钠的浓度可以是约0.1%(w/v);磷酸钠的浓度可以是约0.09%(w/v);磷酸钾的浓度可以是约0.016%(w/v);并且氯化钾的浓度可以是约0.016%(w/v)。
在某些实施方案中,本文公开的组合物可用于再水合已部分或完全冻干的活甲病毒或在来自多种温度的各种温度下运输活甲病毒。本文考虑的组合物可在各种储存温度下,在加工、制备或纯化期间,在运输、递送期间以及在冻融循环期间增加减毒活甲病毒的稳定和/或降低减毒活甲病毒的失活和/或降解。
在某些实施方案中,本文考虑的组合物可部分或完全脱水或水合。此外,本文公开的组合物可在活甲病毒冻干期间和之后使用。
根据这些实施方案,组合物可以是20%或更多;30%或更多;40%或更多;50%或更多;60%或更多;70%或更多;80%或更多;90%或更多;或95%或更多脱水的。本文描述的组合物能够增加水性或再水合的减毒活甲病毒的保质期。此外,本文公开的组合物在冻干或液体/冷冻条件下在诸如室温、零下温度、升高的温度(例如从-80℃至40℃和更高)的广泛温度范围下增加减毒活甲病毒的稳定性。在其他实施方案中,与未在HEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂和一种或多种氨基酸的组合物中配制的活甲病毒相比,本文公开的组合物可使活甲病毒的稳定性增加1.5倍、2倍、2.5倍、3倍、3.5倍、4倍或10倍或更多倍。
在其他实施方案中,本文公开的方法可包括冷冻干燥或其他脱水方法以将甲病毒保存在所公开的组合物中。根据这些实施方案,本文公开的组合物能够降低冷冻干燥的或部分或完全脱水的活甲病毒的失活。在其他方法中,用于降低活甲病毒的失活的组合物可包括水性组合物或可包括在脱水后再水合的组合物。在某些实施方案中,本文公开的组合物能够通过降低甲病毒的降解来增加水性或再水合的甲病毒制剂的保质期。
在某些实施方案中,本文考虑的组合物能够在室温(例如约20℃至约25℃或甚至高达40℃)或冷藏温度(例如约0°至约10℃或达20℃))下降低水合的减毒活甲病毒的失活和/或降解大于12小时至大于24小时。在一些实施方案中,本文公开的组合物能够维持90%或更多的减毒活甲病毒24小时或更长时间。此外,本文公开的组合物能够在至少2次、至少3次、至少4次、至少5次、至少6次和更多次冻融循环期间降低水合的活甲病毒的失活。其他实施方案涉及能够在冷藏温度(例如约0°至约10℃)下降低水合或水性活甲病毒的失活持续约24小时至大于26周的组合物。在这些方法中考虑的组合物可包含但不限于HEPES缓冲液、组氨酸、蔗糖和甘露糖醇。在某些实施方案中,活甲病毒组合物在大约40℃下大于24小时后维持约100%或约90%或约80%或约70%的病毒滴度,并且在约4℃的冷藏温度下4周后维持大于90%的病毒滴度。本文的其他实施方案可包括活甲病毒组合物,所述活甲病毒组合物在大约25℃下12周后维持约90%或约80%或约70%的病毒滴度并且在约4℃的冷藏温度下约26周后维持约90%或约80%或约70%的病毒滴度。本文考虑的其他实施方案包括与本领域已知的其他组合物相比,在大约40℃下数小时(例如20小时)后保持约3倍至约10倍的病毒滴度浓度的活甲病毒组合物。
在其他实施方案中,本文考虑的组合物可含有痕量二价阳离子或不含二价阳离子。例如,本文考虑的组合物可具有痕量钙/镁(Ca+2/Mg+2)或不含钙/镁(Ca+2/Mg+2)。
先前已经描述了用于其他减毒活病毒的制剂(参见例如Burke,Hsu等人1999)。一种常见的稳定剂(称为SPGA)是2%至10%蔗糖、磷酸盐、谷氨酸钾和0.5%至2%血清白蛋白的混合物(参见例如Bovarnick,Miller等人1950)。已经用不同的阳离子鉴定了这种碱性制剂的各种修改,用淀粉水解产物或葡聚糖代替蔗糖,并用酪蛋白水解产物或聚乙烯基吡咯烷酮代替血清白蛋白。其他制剂使用水解明胶而不是血清白蛋白作为蛋白质来源(Burke,Hsu等人1999)。然而,明胶可能在免疫的儿童和成人中引起过敏反应,并且可能是疫苗相关不良事件的原因。另外,明胶可源自牛或猪骨和脊柱材料。这些来源是外来剂(逆转录病毒和/或朊病毒-BSE)的来源并提供安全性问题。此外,白蛋白可从人体中收集-这也构成引入不安全的外来剂的潜在风险。因此,本文公开的一个目标是鉴定对减毒活甲病毒或活甲病毒具有相等至改善的稳定作用而在受试者中没有对诸如明胶和/或血清白蛋白的剂的不良过敏反应或可能的安全性问题的制剂。在某些实施方案中,可将本文公开的制剂与含有明胶的制剂进行比较,其中本发明制剂对甲病毒表现出相等至优异的稳定作用而没有含明胶制剂的副作用。
本文的实施方案公开了与现有技术相比,增强活甲病毒组合物的稳定性和/或降低活甲病毒组合物的劣化或降低活甲病毒组合物的过敏反应的可能性的组合物。本文公开的某些组合物在40℃或约40℃下提供水性病毒的稳定性达1天;达2天;达4天且大于6周。本文公开的某些组合物在室温或约室温(例如25℃)下提供水性病毒的稳定性达1天至约12周或更长时间。本文公开的实施方案增加了保护活病毒免于例如冷冻和/或解冻和/或升高的温度的影响。在某些实施方案中,本文公开的组合物可在室温条件(例如约25℃)下使脱水的减毒活病毒产品稳定,降低脱水的减毒活病毒产品的劣化和/或防止脱水的减毒活病毒产品的失活。在其他实施方案中,本文考虑的组合物可在约25℃或达40℃或约40℃或更高温度下使水性活病毒产品稳定,降低水性活病毒产品的劣化和/或防止水性活病毒产品的失活。本文公开的组合物可促进在发达和欠发达区域中甲病毒疫苗的储存、分配、递送和准确施用。
本领域技术人员将认识到,本文公开的组合物或配方涉及活的或活的且通过任何方法减毒的病毒,所述方法包括但不限于细胞培养传代/选择、重配、将突变并入感染性克隆中、反向遗传学、插入、缺失、嵌合构建体、其他重组DNA或RNA操作。此外,本领域技术人员将认识到,可受益于本文公开的制剂的保护作用的某些甲病毒可被工程化以表达其他蛋白质或RNA,包括但不限于重组甲病毒构建体。这些病毒可用作感染性疾病的疫苗,用于治疗肿瘤病状或减少肿瘤病状的发作的疫苗,或用于治疗或预防病状的用于表达蛋白质或RNA的甲病毒(例如,基因疗法、反义疗法、核酶疗法或小抑制性RNA疗法)。
在一些实施方案中,本文公开的组合物可含有一种或多种具有披膜病毒或冠状病毒的膜包膜的病毒(例如,包膜病毒),或披膜病毒科的任何甲病毒。在其他实施方案中,本文的组合物可含有披膜病毒或冠状病毒科的一种或多种包膜正链RNA病毒。在某些实施方案中,组合物可含有一种或多种减毒活甲病毒(例如基孔肯雅热病毒、VEEV、EEEV或类似物),所述减毒活甲病毒具有一个或多个插入、缺失或突变以诱导用于疫苗组合物中的病毒的减毒。
在某些实施方案中,活甲病毒组合物可包含2009年1月23日提交的名称为ATTENUATED RECOMBINANT ALPHAVIRUSES INCAPABLE OF REPLICATING IN MOSQUITOESAND USES THEREOF的美国申请号申请号PCT/US2009/000458和2010年7月23日提交的美国专利申请号12/804,535中描述的一种或多种减毒活甲病毒构建体或病毒,两个申请和延续及其分案均出于所有目的以引用的方式整体并入。
药物组合物
本文的一些实施方案涉及用于水性或冻干形式的减毒活病毒的药物组合物。本领域技术人员将认识到,改善病毒热稳定性并降低本文公开的药物组合物的冻融失活的制剂可改善呈水性形式、粉末状、冷冻干燥或冻干形式并通过本领域已知的方法制备的产品。在重构后,此类稳定的免疫原性组合物可通过多种途径施用,所述途径包括但不限于皮内施用、皮下施用、肌内施用、鼻内施用、肺部施用或口服施用。
在其他实施方案中,考虑了用于递送本文公开的任何药物组合物的装置。根据这些实施方案,本领域中已知多种装置用于递送疫苗或其他免疫原性组合物,所述装置包括但不限于注射器和针头注射、分叉针头施用、通过皮内贴剂或泵施用、皮内不含针头的射流递送(皮内等)、皮内颗粒递送或气溶胶粉末递送。
在某些实施方案中,本文公开的组合物通常包含生理学上可接受的缓冲液。在一些实施方案中,发现当与其他缓冲液相比时,HEPES缓冲液对甲病毒组合物具有出人意料的稳定作用。在某些实施方案中,考虑了pH大于6.0至约pH 10的缓冲介质;一些减毒活病毒或活病毒(例如甲病毒)在低pH下是不稳定的。
本文的实施方案提供了以适于体内药物施用的生物学上相容的形式向受试者施用组合物。“适于体内施用的生物学上相容的形式”可指待施用的一种形式的活性剂(例如某些实施方案的减毒活病毒),其中任何毒性作用都被活性剂的治疗益处所抵消。
本文公开的药物组合物的治疗活性量的施用可定义为在实现所需结果所需的剂量下和时间段内有效的量。例如,化合物的治疗有效量可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及制剂在个体中引发所需反应的能力的因素而变化。可调整剂量方案以提供特定个体的最佳治疗反应。
在一些实施方案中,组合物(例如药物)可通过任何已知的方式施用于受试者,例如,皮下、肌内、静脉内、皮内、通过口服施用、吸入、经皮施用、阴道内施用、局部施用、鼻内或直肠施用。在一个实施方案中,化合物可鼻内施用,如吸入。在某些实施方案中,本文公开的免疫原性组合物可皮下或皮内施用。
本文公开的化合物或活性剂(例如减毒活甲病毒)可在与组合物共同施用的合适的载体或稀释剂中施用于受试者。如本文所用的术语“药学上可接受的载体”意图包括稀释剂,如盐水和水性缓冲溶液。活性剂也可肠胃外或腹膜内施用。
适于注射使用的药物组合物可通过本领域已知的方式施用。例如,可使用无菌水溶液(可溶于水时)或分散液以及用于临时制备无菌注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下,所述组合物可以是无菌的并且是达到便于可注射性的流体。它可被进一步保持以免受微生物如细菌和真菌的污染作用。药学上可接受的载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)以及其合适的混合物的溶剂或分散介质。可例如通过使用包衣(如卵磷脂)、通过在分散情况下维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。
在配制后,溶液可以与剂量制剂相容的方式且以治疗有效的量施用。制剂易于以多种剂型,如上述可注射溶液的类型施用。在一些实施方案中,本文公开的制剂可在暴露于本发明的甲病毒之前、期间和/或之后施用。
药盒
其他实施方案涉及用于本文公开的组合物和方法的药盒。组合物和活病毒制剂可提供在用于科学研究或用于递送和/或用于施用于受试者的药盒中。根据这些实施方案,药盒可包括但不限于合适的容器、甲病毒或减毒活甲病毒组合物以及一种或多种另外的剂,如其他抗病毒剂、抗真菌剂或抗细菌剂。
在其他实施方案中,药盒还可包括本文公开的适当等分的甲病毒组合物。此外,本文的组合物可为部分或完全脱水或水性。本文考虑的药盒可取决于特定制剂在室温下或在本文公开的冷藏温度下储存。
在其他实施方案中,药盒通常可包括至少一个小瓶、试管、烧瓶、瓶子、注射器或其他容器,组合物可置于其中并适当地等分。在提供另外组分的情况下,药盒通常还可包括一个或多个可放置这种剂或组分的另外的容器。本文的药盒还可包括在容器中含有组合物和用于商业销售任何其他试剂。此类容器可包括注射或吹塑成型塑料容器,在所述容器中保持有所需的小瓶(例如免疫原性或疫苗组合物)。
实施列
包括以下实施例来说明本文提供的某些实施方案。本领域的技术人员应理解的是,在以下实施例中公开的技术代表发现在本文公开的实践中起良好作用的技术,并且因此可被认为构成本发明实践的优选模式。然而,根据本公开,本领域的技术人员应理解,在不脱离本文的精神和范围的情况下可在已公开并仍获得类似或相似结果的特定实施方案中做出许多改变。
实施列1
缓冲液筛选
在某些示例性方法中,鉴定了适用于临床前和临床测试以及甲病毒免疫原性组合物或疫苗的使用的液体组合物和可冻干组合物。
关于根据这些示例性组合物的液体组合物的一个考虑因素是一些甲病毒对pH敏感(例如对低pH敏感)。因此,本文公开的组合物的组分包括关于pH的仔细考虑。在某些示例性组合物中,制剂的pH是约pH 6.0至约10.0,其中几种制剂维持在约pH 6.5至7.5。
在一些方法中,减毒活基孔肯雅热病毒(CHIK)用作用于临床前和临床测试的甲病毒组合物的实例。提供了用于这些方法的组合物。在一个示例性实验中,使用预定量的CHIK-IRES疫苗(pMVS)(一种具有在插入的IRES控制下的结构基因的减毒活基孔肯雅热病毒)。预期任何减毒或活甲病毒可用于这些示例性组合物中以增加甲病毒的稳定性并降低降解。最初,测试了许多不同的缓冲液,如DMEM、PBS、HEPES等。
在其他示例性方法中,进行某些测试,如在40℃下孵育达6周以测试减毒活病毒的稳定性。取得样品以通过在Vero细胞上在96孔板中的TCID50滴定感染性病毒的存在。计算与输入(未孵育的)甲病毒组合物对照相比剩余病毒的百分比。例如,含有单独PBS、20%FBSDMEM或DMEM缓冲葡萄糖的活甲病毒的105TCID50的孵育证明了甲病毒(例如CHIK)的效力的快速丧失。某些示例性组合物被证明可有效使减毒活甲病毒,如减毒活甲病毒(例如CHIK),例如含有约1.0至约200mM HEPES的HEPES缓冲液(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)的组合物稳定(数据未示出)。在一个实例中,发现与对照相比时,含有15mM HEPES(HEPES缓冲盐水-HS)和150mM NaCl的组合物为减毒甲病毒疫苗提供增加的稳定性(数据未示出)。
实施列2
筛选不存在蛋白质过敏原的稳定制剂
在某些方法中,一些制剂使用水解明胶而不是血清白蛋白来作为蛋白质来源(Burke,Hsu等人1999)并且先前提出的发明与本发明有关。然而,明胶虽然为减毒活病毒提供稳定性,但当施用于受试者时可引起过敏反应,并且有时可能是疫苗相关不良事件的原因。本文公开的某些组合物可包含提供与含有明胶的那些组合物相当的结果的组分的组合,以降低减毒活甲病毒的劣化、同时提供当施用于受试者时具有降低的过敏反应的制剂。
在一些实施例中,描述了不含白蛋白或明胶的制剂,所述制剂可提供与活甲病毒或减毒活甲病毒相当或甚至增加的稳定性。这些制剂包含但不限于HEPES缓冲液、一种或多种碳水化合物剂、一种或多种氨基酸、一种或多种蛋白质剂和/或一种或多种盐剂。
以下提供示例性制剂(以下测试的所有制剂是约pH7.2+/-0.2):
I.150mM HEPES、5%蔗糖、1%明胶和0.9%氯化钠(阳性对照)。据证明对于使甲病毒稳定,15.0mM和150.0mM HEPES表现类似。
II.7%蔗糖、3%人血清白蛋白和1.5%甘露糖醇(含蛋白质,潜在过敏原)
III 2.5%蔗糖和3%组氨酸
IV 1.5%蔗糖和2%甘氨酸
V 1.5%蔗糖、2%甘氨酸、0.44%氯化钠
VI 2%蔗糖、4%甘露糖醇、0.5%组氨酸
VII 5%蔗糖、0.64%氯化钠、0.1%谷氨酸一钠、0.09%磷酸钠、0.016%磷酸钾和0.016%氯化钾
VIII 2.5%甘露糖醇和4.5%蛋白胨
表1:稳定性研究设计
周 | 0 | 1 | 2 | 4 | 8 | 12 | 26 |
4℃ | x | x | x | x | x | x | x |
25℃ | x | x | x | x | x | x | |
40℃ | x | x | x | x |
将在这些组合物中配制的减毒活甲病毒样品储存在受控温度下。
将每种制剂的18、15和9个样品分别在4℃、25℃和40℃中的每一个下储存。在表1和示例性图3-5中所示的时间点观察样品的效力评估。将在25℃和4℃下孵育的样品(分别图4-5)与在40℃下孵育的样品(图3)并行分析,以观察4至26周时间段内的稳定性趋势。
表2表示来自在第0周使用制剂I-VIII的实验的示例性结果的汇编。测量并记录了每种制剂的生理学特征,如平均再悬浮时间、pH、块外观评分、外观描述、预测的渗透和残留水分。制剂I、II和VIII含有蛋白质剂(例如,明胶、白蛋白和蛋白胨)并用作对照且与不含蛋白质剂的制剂进行比较。例如,制剂III、VI和VII不含蛋白质并且表现出高于3的块外观评分,并且具有介于约0.47%与约1.15%之间的残留水分百分比。
表2用于研究I的制剂的列表
实施列3
液体和冻干制剂
在其他示例性方法中,评估了冻干的减毒甲病毒制剂(例如CHIK)的稳定性。在第0周冻干后,没有一种制剂损失显著滴度。然而,制剂V和VIII在加工后损失显著滴度(参见图1)(一种液体稳定性指标)。此外,制剂V在液体制剂的冻融循环后表现出显著滴度损失(图2)。将冻干制剂I-VIII储存在40℃(图3)、25℃(图4)或4℃(图5)下。重构在指定时间点取得的样品并通过TCID50在Vero细胞中滴定。示例性甲病毒制剂(例如减毒活CHIK制剂)VI(2%蔗糖、4%甘露糖醇、0.5%组氨酸)和制剂VII(5%蔗糖、0.64%氯化钠、0.1%谷氨酸一钠、0.09%磷酸钠、0.016%磷酸钾和0.016%氯化钾)在40℃下展现与对照制剂I和II相当的稳定特征持续4周(图3)。这些制剂在25℃和4℃下也展现最小的病毒滴度损失超过12周(图4和5)。
图6是说明在加速和实时稳定性实验期间滴度的损失的直方图。所测试的所有制剂在4℃下从第1周至第26周为减毒活病毒提供稳定性,但是制剂IV、V和VIII在40℃下4周后损失显著滴度。制剂VI和VII在40℃、25℃和4℃下为减毒活病毒提供稳定组合物。选择制剂VI(2%蔗糖、4%甘露糖醇、0.5%组氨酸)作为用于另外评估和扩展的制剂候选物。
实施列4
使不含人和哺乳动物蛋白质剂的制剂稳定
在其他示例性方法中,进行40℃、25℃和4℃下的长期稳定性实验以基于观察结果,即具有一种或多种碳水化合物和一种或多种氨基酸的制剂对CHIK稳定性具有积极作用(参见上文)来分析碳水化合物(例如蔗糖和甘露糖醇)和氨基酸(例如组氨酸)的不同浓度对减毒活甲病毒稳定性的影响(例如,使用了减毒活CHIK)。使用上文提出的制剂VI作为基础制剂,将具有不同浓度的蔗糖、甘露糖醇和组氨酸的制剂配制在pH 7.2+/-0.2的15mMHEPES缓冲液中。
示例性制剂:
1.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
2.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和20.0mg/ml蔗糖
3.15.0mM HEPES、40.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
4.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、20.0mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
5.15.0mM HEPES、40.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和20.0mg/ml蔗糖(相当于上述制剂VI)
6.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
7.15.0mM HEPES、40.0mg/ml甘露糖醇、20.0mg/ml组氨酸和20.0mg/ml蔗糖
8.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
9.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
10.15.0mM HEPES、40.0mg/ml甘露糖醇、20.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
11.15.0mM HEPES、10.0mg/ml甘露糖醇、20.0mg/ml组氨酸和20.0mg/ml蔗糖
12.15.0mM HEPES、10.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
13.15.0mM HEPES、10.0mg/ml甘露糖醇、20.0mg/ml组氨酸和40.0mg/ml蔗糖
14.15.0mM HEPES、10.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和20.0mg/ml蔗糖
15.15.0mM HEPES、40.0mg/ml甘露糖醇、12.5mg/ml组氨酸和35.0mg/ml蔗糖
16.15.0mM HEPES、10.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和40.0mg/ml蔗糖
17.(阳性对照)含有蔗糖和明胶(HSG)的15.0mM HEPES缓冲盐水,15.0mM HEPES、5%蔗糖、1%明胶和0.9%氯化钠。据证明对于使甲病毒稳定,15.0mM和150.0mM HEPES表现类似。
表3:稳定性设计
周 | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 12 |
4℃ | x | x | x | x | x | |
25℃ | x | x | x | x | x | |
40℃ | x | x | x | x |
储存在这些组合物中配制的减毒活甲病毒样品。将每种制剂15个样品在4℃、25℃或40℃下储存。在表3中所示的时间点研究了样品制剂的效力评估,并且示例性结果示于图10-12中。将在4℃和25℃下孵育的样品(图11-12)与在40℃下孵育的样品(图10)平行分析,以展示分别在12和6周时间段内剩余的滴度的趋势。
实施列5
液体和冻干制剂
在另一种示例性方法中,评估了冻干的活减毒甲病毒(例如CHIK)的稳定性。在第0周,分析所有组合物1-16的生理学特征并表现出高于3的块外观评分,并且残留水分百分比介于约0.46%与约1.46%之间(数据未示出)。
当在第0周冻干时,这些制剂中的一些表现出更高的剩余滴度(图8)。这些制剂中的一些在冻融循环后表现出更高的剩余滴度(图9)。在其他实验中,将冻干疫苗制剂1-16储存在40℃(图10)、25℃(图11)或4℃(图12)下并评估在各种温度下的总体滴度损失。重构在指定时间点取得的样品并使用指标在Vero细胞中滴定以计算TCID50。发现与阳性对照17相比,这一测试组的示例性活甲病毒(例如减毒活CHIK)制剂1、3、9和10在40℃下稳定达至少6周,回收>45%,而当与1、3、9、10和对照制剂17相比时,当在室温约40℃(图10)下储存时其他制剂2、5、7、11、12、13、14表现出至少至6周的回收降低。与阳性对照制剂17相比,制剂1、3、9和15在约25℃下储存时稳定至少12周,而制剂5、11和13在25℃下约8-12周后具有显著滴度损失(图11)。尽管在25℃下存在这种可比较的损失,但是当在约4℃的冷藏温度下储存时,所有测试的制剂(1-16)表现出最小的病毒滴度损失超过12周(图12)。
图13是说明在上述稳定性研究期间滴度损失的直方图。观察到所有制剂在约4℃的冷藏温度下维持稳定的活甲病毒滴度至少至第12周。在室温大约40℃下,制剂2、5、7、11、12、13和14到约6周时表现出显著损失。与制剂5(相当于上述实施例1中的制剂6)相比,制剂1、3、9、10和15在室温约40℃下表现出增强的稳定性持续比6周更长的时间段。
图14表示说明来自使用各种制剂的实验数据的输出,所述实验用于预测示例性活甲病毒的制剂中的所需性状。此数据提供了支持,即具有高浓度的某些碳水化合物剂和低浓度的某些氨基酸的制剂在约40℃的室温下表现出改善的稳定性持续数周。因此,可使用这些特定制剂以增加活甲病毒在运输、递送和最终施用于受试者期间的稳定性。此外,这些示例性制剂不含人或动物蛋白质剂,其可降低受体中的不良免疫和其他作用。
实施列6
使不含人或动物来源的蛋白质剂的制剂稳定
在其他示例性方法中,进行40℃、25℃和4℃下的长期稳定性实验以基于观察结果,即具有一种或多种碳水化合物和一种或多种氨基酸的制剂对CHIK稳定性具有积极作用(参见上文)来分析碳水化合物(例如蔗糖和甘露糖醇)和氨基酸(例如组氨酸)的另外不同浓度对活甲病毒稳定性的影响(例如,使用了减毒活CHIK病毒)。使用上文提出的制剂VI作为基础制剂,将具有不同浓度的蔗糖、甘露糖醇和组氨酸的制剂配制在pH 7.2+/-0.2的15.0mM HEPES缓冲液中。此外,这些目标剂(包括甘露糖醇、组氨酸和蔗糖的组合物)的扩展是基于上述17个样品研究中的观察结果。基于它们在17种制剂研究中的表现和它们的非动物来源,组合选择了甘露糖醇、蔗糖、组氨酸和HEPES。在此组10种制剂中为甘露糖醇和蔗糖选择的目标浓度是基于使用在先前实验中产生的数据的统计预测。
示例性制剂:
1.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
2.15.0mM HEPES、35.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和30.0mg/ml蔗糖
3.15.0mM HEPES、15.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和30.0mg/ml蔗糖
4.15.0mM HEPES、25mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
5.15.0mM HEPES、35.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和70.0mg/ml蔗糖
6.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和21.72mg/ml蔗糖
7.15.0mM HEPES、10.86mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
8.15.0mM HEPES、25.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和78.28mg/ml蔗糖
9.15.0mM HEPES、15.0mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和70.0mg/ml蔗糖
10.15.0mM HEPES、39.14mg/ml甘露糖醇、5.0mg/ml组氨酸和50.0mg/ml蔗糖
表4:稳定性设计
周 | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 12 |
4℃ | x | x | x | x | x | |
25℃ | x | x | x | x | x | |
40℃ | x | x | x | x |
实施列7
液体和冻干制剂
储存在这些组合物中配制的减毒活甲病毒样品。在此研究中,分析了基于上述17个样品研究的各种制剂中的减毒活基孔肯雅热病毒稳定性。选择上述研究中的样品17作为阳性对照。将每10种制剂的15个样品在4℃、25℃或40℃下储存。在表4中所示的时间点研究了样品制剂的效力评估,并且示例性结果示于图16-20中。将在4℃和25℃下孵育的样品(分别图19和18)与在40℃下孵育的样品(图17)平行分析,以展示在6-12周时间段内剩余的滴度的趋势。
实施列8
在另一种示例性方法中,评估了冻干的活减毒甲病毒(例如CHIK)的稳定性。在第0周,分析所有组合物1-10的生理学特征并表现出高于3的块外观评分,并且残留水分百分比<0.5%水分(数据未示出)。根据块美学,含有25mg/ml甘露糖醇和50mg/mL蔗糖的中点制剂(本研究中的Rx 1和4)符合阳性物理标准(数据未示出),同时仍然在运输期间在25℃和40℃(针对稳定性临界温度)下在制剂中实现更高的稳定性。在一个实施例中,复制这些样品以便在实验设计的赋形剂浓度中点左右产生更稳健的统计数据集。
当在第0周冻干时,这些制剂中的一些表现出更高的剩余滴度(图16)。例如,1、4、5、8和9在液体形式中表现出更高的滴度。而制剂5和8在冻干状态下表现出更高的滴度(图16)。这些制剂中的一些在冻融循环后表现出更高的剩余滴度(数据未示出)。在其他实验中,将冻干疫苗制剂1-10储存在40℃(图17)、25℃(图18)或4℃(图19)下并评估在指定时间段内在各种温度下的总体滴度损失。重构在指定时间点取得的样品并使用指标在Vero细胞中滴定以计算TCID50。发现此测试组的示例性活甲病毒(例如减毒活CHIK病毒)制剂1、3、4、5、8、9和10在40℃下稳定达至少6周,回收>60%,而当与制剂1、3、4、5、8、9和10相比时,当在约40℃的室温下储存时,其他制剂2、6和7表现出略微降低的回收至少至6周(图17)。在暴露于约40℃的室温持续此时间段后至少6周,所有测试的制剂具有至少50%的回收率。这是相对于本领域中并在本文进行测试的其他制剂的显著改善。
制剂1、2、4、5、8和10在约25℃下储存时表现出至少80%的回收率持续至少12周,而制剂3、6、7、9和13当与在25℃下约8-12周后的其他测试的制剂相比时具有轻微滴度损失(图18)。尽管在25℃下存在这种可比较的损失,但是当在约25℃下储存时所有测试的制剂(1-10)表现出至少70%的回收率持续至少12周(图18)。所有测试的制剂(1-10)仅显示轻微损失,并且当在约4℃的冷藏温度下储存至少12周时具有超过90%的回收率(图19)。
图20是说明在上述稳定性研究期间滴度损失的直方图。观察到所有制剂在约4℃的冷藏温度下维持稳定的活甲病毒滴度至少至第12周。在室温大约40℃下,制剂2、3、6和7到约6周时表现出显著损失。与制剂2相比,制剂1、8和9在室温约40℃下表现出增强的稳定性持续比6周更长的时间段。
表5.缩写列表
CHIKV | 基孔肯雅热病毒 |
TCID<sub>50</sub> | 50%组织培养感染剂量 |
HB | Hepes缓冲盐水 |
HBS | Hepes缓冲盐水+蔗糖 |
HSG | Hepes缓冲盐水+蔗糖+明胶 |
IRES | 内部核糖体进入位点 |
DMEM | 杜氏改良的最低必需培养基 |
MCT | 微量离心管 |
PBS | 磷酸盐缓冲盐水 |
FBS | 胎牛血清 |
Pre-MVS | 预母毒种 |
材料和方法
将预定剂量的CHIK-IRES疫苗(pre-MVS,母毒种)的各个等分部分配制在含有缓冲液的组合物中,所述缓冲液包括HEPES缓冲盐水(HB)、含有蔗糖的HEPES缓冲盐水(HBS)、含有蔗糖和明胶的HEPES缓冲盐水(HSG)。将配制的水合或液体疫苗在某些温度如室温25℃和40℃和冷藏温度4℃下孵育。在预定时间间隔从这些制剂中取出等分部分,并在例如具有Vero细胞的96孔板中通过TCID50滴定感染性甲病毒的存在。
细胞系和组织培养
准备来自申请人的cGMP工作细胞库的研究级Vero细胞库以进行这些实验。获得Vero细胞:Vero(WHO)工作细胞库传代:142(批号#INV-VERO-WCB-001;5x106)并储存在液氮中。将小瓶在水浴中快速解冻,并在T-75cm2烧瓶中直接接种到预热的约19毫升含有青霉素-链霉素、40mM L-谷氨酰胺和10%FBS的cDMEM(杜氏改良的最低必需培养基)中并在37℃、5%CO2下孵育。使细胞生长至汇合,并使用PBS、胰蛋白酶(HyClone,例如cat#SH30042.01)和cDMEM-10进行继代培养。将此烧瓶扩展至两个T-185cm2烧瓶并生长直至细胞达到100%汇合。通过胰蛋白酶消化收获细胞,以800x g离心10分钟,并以1x107个细胞/mL的浓度重新悬浮于含有20%FBS和10%DMSO的DMEM中。
将Vero生长并维持在含有青霉素-链霉素和10%FBS(HyClone)的杜氏改良的最低必需培养基(DMEM)(DMEM-10%-FBS)中。胰蛋白酶用于维持细胞。在病毒吸附前两天,将96孔板以每孔100uL的DMEM-FBS-10%中1.4x 105个细胞/mL接种。每天监测孵育箱以维持指示的温度。在cDMEM-FBS 2%中进行病毒稀释、吸附和TCID50测定。
CHIK-IRES:减毒活甲病毒
用于所描述的各种方法中减毒活CHIK病毒的分子产生命名为CHIK-002(先前描述)。CHIK-002通过IRES插入产生并在Vero细胞中繁殖。将预母毒种储备液以105TCID50/mL的浓度用于这些实验。简言之,在感染单层Vero细胞后产生CHIK pre-MVS。CHIK病毒分泌到上清液中,并且在澄清/除去死亡的Vero细胞后从培养基中收获病毒。将CHIK-pre-MVS在含有10%FBS的DMEM中稳定,并储存在-80℃。
测定方法
TCID50测定方法用于定量含病毒制剂中存在的感染性病毒的量(效力或稳定性)。TCID50被定义为96孔板中感染孔的一系列重复中的一半显示出如通过例如CPE(细胞病变效应)证明的病毒感染力的迹象时的病毒稀释水平。将Vero细胞生长并维持在含有青霉素-链霉素、L-谷氨酰胺和10%FBS(HyClone)的杜氏改良的最低必需培养基(DMEM)(DMEM 10%-FBS)中。将配制样品的等分部分在水浴中快速解冻并混合。进行pre-MVS初始稀释成工作浓度,并在例如96孔板中的cDMEM-2%FBS中制备这些样品的10倍稀释系列。在接种Vero细胞单层之前,将稀释的病毒维持在4℃。在测定时,从96孔板中吸出生长培养基,并向孔中加入100μL每种病毒稀释液。将板在37℃和5%CO2下孵育3-5天。使用Spearman-Karber方法计算滴度。疫苗制剂
用疫苗准备稳定性实验,所述疫苗包括研究级疫苗制剂和内部来源的CHIK-IRESpMVS。为了使用本文提供的各种组合物筛选赋形剂和稳定性研究,制备了每个样品含有105TCID50/mL病毒的最终体积为500μL甲病毒制剂。在指定的缓冲液/制剂中批量制备样品,并在开始研究之前取得输入样品作为初始滴度的量度。将样品等分到MCT中并储存指定的时间和温度。制备了四种制剂中的每一种,最终500μL,每个样品含105TCID50/mL病毒。批量制备了每种制剂60个样品,并在将它们等分到1.5mL含500uL的MCT中之前取得输入样品。
配制的免疫原性构建体储存
将免疫原性病毒制剂储存在4℃(微型人工气候试验室;型号MCB-12-33-33-H/AC)和-80℃(REVCO Elite Plus;型号ULT2186-6-D43)。用Dickson Wizard2–900MHZ Logger(对于4℃型号WT-220且对于-80℃型号WT-240)监测两个系统。
****************************************************
按照本公开内容,不需要过度的实验就可制备并实行本文公开和要求保护的所有组合物和方法。虽然组合物和方法已经在优选实施方案方面描述,但是本领域技术人员显而易见的是,变化可应用于所述组合物和方法以及本文描述的方法的步骤或步骤顺序而不背离本文的概念、精神和范围。更具体地说,化学上和生理上相关的某些试剂可取代本文描述的试剂,同时将实现相同或类似的结果。对本领域技术人员来说显而易见的是所有此类相似的替代和修改被认为在如由随附权利要求限定的精神、范围和概念内。
Claims (62)
1.一种减毒活甲病毒组合物,所述组合物包含:
一种或多种活甲病毒;
一种或多种包括组氨酸的氨基酸;
两种或更多种碳水化合物剂;并且
其中所述组合物不包含血清或明胶,并且其中所述组合物使活甲病毒稳定。
2.根据权利要求1所述的甲病毒组合物,其还包含HEPES缓冲液,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0mM至200.0mM。
3.根据权利要求1或2所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种活甲病毒包括基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、东方马脑炎和西方马脑炎、其他塞姆利基森林病毒或其他披膜病毒以及它们的组合。
4.根据权利要求1或2所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种活甲病毒是基孔肯雅热(CHIK)病毒。
5.根据前述权利要求中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述活甲病毒包含减毒活甲病毒。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述组合物呈水性形式。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述组合物部分或完全脱水。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述两种或更多种碳水化合物剂选自由以下组成的组:海藻糖、半乳糖、果糖、蔗糖、壳聚糖、山梨糖醇、甘露糖醇以及它们的组合中的一种或多种。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述两种或更多种碳水化合物剂包含蔗糖和甘露糖醇。
10.根据权利要求2-9中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是10.0mM至150.0mM。
11.根据权利要求2-10中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是10.0mM至30.0mM;所述两种或更多种碳水化合物剂的浓度是10.0至100.0mg/ml;并且所述氨基酸的浓度是1.0mg/ml至20.0mg/ml。
12.根据权利要求2-11中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是15.0mM;所述两种或更多种碳水化合物剂各自的浓度是20.0mg/ml至70.0mg/ml;并且所述氨基酸的浓度是1.0mg/ml至10.0mg/ml。
13.根据权利要求2-12中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述甲病毒组合物包含HEPES缓冲液、组氨酸、蔗糖和甘露糖醇。
14.根据权利要求13所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是15.0mM,组氨酸的浓度是1.0mg/ml至20.0mg/ml;蔗糖的浓度是20.0mg/ml至90.0mg/ml;并且甘露糖醇的浓度是10.0mg/ml至50.0mg/ml。
15.根据权利要求13或14所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是15.0mM,组氨酸的浓度是5.0至20.0mg/ml;蔗糖的浓度是40.0至90.0mg/ml;并且甘露糖醇是15.0至40.0mg/ml。
16.根据权利要求15所述的甲病毒组合物,其中所述组氨酸的浓度是5.0至15.0mg/ml;蔗糖的浓度是40.0至80.0mg/ml;并且甘露糖醇的浓度是15.0至40.0mg/ml。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的甲病毒组合物,其还包含盐。
18.一种减毒活甲病毒组合物,所述组合物包含:
一种或多种活甲病毒;
一种或多种盐剂;以及
一种或多种包括蔗糖的碳水化合物剂;
其中所述组合物不包含血清或明胶或其他哺乳动物蛋白质产品,并且其中所述组合物使活甲病毒稳定。
19.根据权利要求18所述的甲病毒组合物,其还包含HEPES缓冲液,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0mM至200.0mM。
20.根据权利要求18或19所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种活甲病毒包括基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、东方马脑炎和西方马脑炎、其他塞姆利基森林病毒或其他披膜病毒以及它们的组合。
21.根据权利要求17或18所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种活甲病毒包含减毒活甲病毒。
22.根据权利要求18-21中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种活甲病毒包含活基孔肯雅热病毒(CHIKV)。
23.根据权利要求18-22中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述组合物呈水性形式。
24.根据权利要求18-23中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述组合物部分或完全脱水。
25.根据权利要求18-24中任一项所述的甲病毒组合物,其还包含至少一种选自由以下组成的组的另外的碳水化合物剂:海藻糖、半乳糖、果糖、壳聚糖、山梨糖醇、甘露糖醇以及它们的组合。
26.根据权利要求18-25中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述一种或多种盐剂选自由以下组成的组:氯化钠、谷氨酸一钠(MSG)、磷酸钠、磷酸钾、氯化钾以及它们的组合。
27.根据权利要求19-26中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES的浓度是1.0mM至40.0mM。
28.根据权利要求19-27中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0至30.0mM;所述一种或多种碳水化合物剂的浓度是1.0%至10.0%;并且所述一种或多种盐各自的浓度是0.001%至1.0%(w/v)。
29.根据权利要求18-26中任一项所述的甲病毒组合物,其中所述组合物包含HEPES、蔗糖、氯化钠、谷氨酸一钠、磷酸钠、磷酸钾以及氯化钾。
30.如权利要求29所述的甲病毒组合物,其中所述HEPES缓冲液的浓度是15mM,蔗糖的浓度是1.0%至15.0%(w/v);氯化钠的浓度是0.1%至1.5%(w/v);谷氨酸一钠的浓度是0.05%至0.5%(w/v);磷酸钠的浓度是0.01%至0.15%(w/v);磷酸钾的浓度是0.01%至0.1%(w/v);并且氯化钾的浓度是0.01%至0.1%(w/v)。
31.一种用于降低活甲病毒的失活的方法,所述方法包括将一种或多种活甲病毒与包含以下的组合物组合:两种或更多种碳水化合物剂;以及一种或多种包括组氨酸的氨基酸,其中所述组合物降低所述活甲病毒的失活。
32.根据权利要求31所述的方法,其还包括HEPES缓冲液,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0mM至200.0mM。
33.根据权利要求31或32所述的方法,其中所述活甲病毒包括基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、其他塞姆利基森林病毒复合物、东方马脑炎和西方马脑炎以及它们的组合。
34.根据权利要求31至33中任一项所述的方法,其还包括使所述组合部分或完全脱水。
35.根据权利要求31至33中任一项所述的方法,其还包括在施用之前使所述组合物部分或完全再水合。
36.根据权利要求31至35中任一项所述的方法,其中所述组合物增加水性病毒组合物的保质期。
37.根据权利要求31至36中任一项所述的方法,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0至30.0mM;所述两种或更多种碳水化合物剂各自的浓度是1.0至约100.0mg/ml;并且所述氨基酸的浓度是1.0至40.0mg/ml。
38.根据权利要求32至37中任一项所述的方法,其中所述组合物包含HEPES、组氨酸、蔗糖和甘露糖醇。
39.根据权利要求38所述的方法,其中所述HEPES缓冲液的浓度是15mM,所述组氨酸的浓度是5.0mg/ml至20.0mg/ml;所述蔗糖的浓度是20.0mg/ml至90.0mg/ml;并且所述甘露糖醇的浓度是10.0mg/ml至40.0mg/ml。
40.根据权利要求31至39中任一项所述的方法,其还包括盐剂。
41.根据权利要求31至40中任一项所述的方法,其中所述活甲病毒组合物被进一步配制用作药物,用于向受试者施用以减少甲病毒感染的发作或预防甲病毒感染。
42.一种用于降低活甲病毒的失活的方法,所述方法包括将一种或多种活甲病毒与包含以下的组合物组合:0.1mM至200mM HEPES缓冲液;一种或多种盐试剂以及两种或更多种包括蔗糖的碳水化合物剂,其中所述组合物降低所述活甲病毒的失活。
43.根据权利要求42所述的方法,其中所述活甲病毒包括基孔肯雅热病毒(CHIK)、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、其他塞姆利基森林病毒复合物、东方马脑炎和西方马脑炎以及它们的组合。
44.根据权利要求42或43所述的方法,其还包括使所述组合部分或完全脱水。
45.根据权利要求42或43所述的方法,其还包括在施用之前使所述组合物部分或完全再水合。
46.根据权利要求42至45中任一项所述的方法,其中所述组合物增加水性病毒组合物的保质期。
47.根据权利要求42至46中任一项所述的方法,其中所述两种或更多种碳水化合物剂还包含海藻糖、半乳糖、果糖、壳聚糖、山梨糖醇、甘露糖醇以及它们的组合中的至少一种。
48.根据权利要求42至47中任一项所述的方法,其中所述一种或多种盐剂包含氯化钠、谷氨酸一钠、磷酸钠、磷酸钾、氯化钾以及它们的组合中的一种或多种。
49.根据权利要求42至48中任一项所述的方法,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0mM至40.0mM。
50.根据权利要求42至49中任一项所述的方法,其中所述HEPES缓冲液的浓度是1.0至30.0mM;所述两种或更多种碳水化合物剂各自的浓度是1%至10%;并且所述盐剂的浓度是0.001%至0.2%(w/v)。
51.根据权利要求42至50中任一项所述的方法,其中所述组合物包含HEPES、蔗糖、氯化钠、谷氨酸一钠、磷酸钠、磷酸钾以及氯化钾。
52.一种用于降低活甲病毒的失活的药盒,所述药盒包括:
至少一个容器;
组合物,所述组合物包含0.1mM至40.0mM HEPES缓冲液、两种或更多种包括蔗糖的碳水化合物剂和一种或多种包括组氨酸的氨基酸;以及
一种或多种活甲病毒。
53.根据权利要求52所述的药盒,其中所述组合物包含HEPES、组氨酸、蔗糖和甘露糖醇。
54.根据权利要求52或53所述的药盒,其中所述组合物包含含有药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
55.一种用于降低活甲病毒的失活的药盒,所述药盒包括:
至少一个容器;
组合物,所述组合物包含0.1至40.0mM HEPES缓冲液、一种或多种包括蔗糖的碳水化合物剂、一种或多种至少包括谷氨酸一钠的盐剂,以及
活甲病毒。
56.根据权利要求55所述的药盒,其中所述组合物包含HEPES、蔗糖、氯化钠、谷氨酸一钠、磷酸钠、磷酸钾以及氯化钾。
57.根据权利要求52至56中任一项所述的药盒,其中所述活甲病毒包含减毒活甲病毒。
58.根据权利要求53至57中任一项所述的药盒,其中所述活甲病毒包括基孔肯雅热(CHIK)病毒、阿尼昂尼昂病毒、罗斯河病毒、塞姆利基森林病毒复合物、东方马脑炎和西方马脑炎以及它们的组合。
59.根据权利要求1-30中任一项所述的药物组合物,其中所述甲病毒组合物是减毒活甲病毒组合物,并且还包含药学上可接受的赋形剂。
60.根据权利要求59所述的药物组合物,其用于保护受试者免于由暴露于甲病毒所引起的感染的方法中。
61.根据权利要求59所述的药物组合物用于制造疫苗的用途,所述疫苗用于保护受试者免于由暴露于甲病毒所引起的感染。
62.用于如权利要求60所定义的用途和根据权利要求61所述的用途的药物组合物,其中所述受试者是人、牲畜或其他家畜。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662316262P | 2016-03-31 | 2016-03-31 | |
US62/316,262 | 2016-03-31 | ||
PCT/US2017/024365 WO2017172643A1 (en) | 2016-03-31 | 2017-03-27 | Compositions and methods for stabilizing alphaviruses with improved formulations |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109069614A true CN109069614A (zh) | 2018-12-21 |
Family
ID=58537071
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201780026126.8A Pending CN109069614A (zh) | 2016-03-31 | 2017-03-27 | 用改进的制剂使甲病毒稳定的组合物和方法 |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10632184B2 (zh) |
EP (1) | EP3436063A1 (zh) |
JP (1) | JP2019513138A (zh) |
KR (1) | KR20180135912A (zh) |
CN (1) | CN109069614A (zh) |
AU (1) | AU2017241590A1 (zh) |
BR (1) | BR112018069035A2 (zh) |
CA (1) | CA3019529A1 (zh) |
CO (1) | CO2018010357A2 (zh) |
CR (1) | CR20180456A (zh) |
DO (1) | DOP2018000211A (zh) |
EC (1) | ECSP18081486A (zh) |
MX (1) | MX2018011837A (zh) |
NI (1) | NI201800096A (zh) |
PE (1) | PE20190149A1 (zh) |
PH (1) | PH12018502119A1 (zh) |
SG (1) | SG11201808458QA (zh) |
SV (1) | SV2018005747A (zh) |
WO (1) | WO2017172643A1 (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10538785B2 (en) | 2013-12-23 | 2020-01-21 | Renaud Vaillant | Lyophilized lentiviral vector particles, compositions and methods |
CA3149932A1 (en) * | 2019-08-09 | 2021-02-18 | Valneva Se | Single shot chikungunya virus vaccine |
AU2020327602A1 (en) * | 2019-08-09 | 2022-01-27 | Valneva Se | Chikungunya vaccine formulations |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014151855A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Inviragen, Inc. | Compositions and methods for live, attenuated alphavirus formulations |
CN104640566A (zh) * | 2012-08-21 | 2015-05-20 | 英特维特国际股份有限公司 | 液体稳定的病毒疫苗 |
CN104797242A (zh) * | 2012-10-02 | 2015-07-22 | 特兰斯吉恩股份有限公司 | 含有病毒的配制物及其应用 |
CN104984357A (zh) * | 2015-06-02 | 2015-10-21 | 长春百克生物科技股份公司 | 不含明胶的疫苗保护剂组合物及流感减毒活疫苗 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5545555A (en) * | 1994-07-25 | 1996-08-13 | Microtest, Inc. | Microbial transport media |
WO2008026225A2 (en) * | 2006-09-01 | 2008-03-06 | Bharat Biotech International Limited | A vaccine for chikungunya virus infection |
-
2017
- 2017-03-27 US US16/088,816 patent/US10632184B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2017-03-27 JP JP2018550558A patent/JP2019513138A/ja not_active Withdrawn
- 2017-03-27 KR KR1020187031479A patent/KR20180135912A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-03-27 EP EP17717027.1A patent/EP3436063A1/en not_active Withdrawn
- 2017-03-27 CA CA3019529A patent/CA3019529A1/en not_active Abandoned
- 2017-03-27 CR CR20180456A patent/CR20180456A/es unknown
- 2017-03-27 CN CN201780026126.8A patent/CN109069614A/zh active Pending
- 2017-03-27 SG SG11201808458QA patent/SG11201808458QA/en unknown
- 2017-03-27 BR BR112018069035A patent/BR112018069035A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2017-03-27 WO PCT/US2017/024365 patent/WO2017172643A1/en active Application Filing
- 2017-03-27 PE PE2018001924A patent/PE20190149A1/es unknown
- 2017-03-27 MX MX2018011837A patent/MX2018011837A/es unknown
- 2017-03-27 AU AU2017241590A patent/AU2017241590A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-09-27 CO CONC2018/0010357A patent/CO2018010357A2/es unknown
- 2018-09-27 NI NI201800096A patent/NI201800096A/es unknown
- 2018-09-28 SV SV2018005747A patent/SV2018005747A/es unknown
- 2018-09-28 DO DO2018000211A patent/DOP2018000211A/es unknown
- 2018-10-01 PH PH12018502119A patent/PH12018502119A1/en unknown
- 2018-10-30 EC ECSENADI201881486A patent/ECSP18081486A/es unknown
-
2020
- 2020-04-08 US US16/843,439 patent/US20200306361A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104640566A (zh) * | 2012-08-21 | 2015-05-20 | 英特维特国际股份有限公司 | 液体稳定的病毒疫苗 |
CN104797242A (zh) * | 2012-10-02 | 2015-07-22 | 特兰斯吉恩股份有限公司 | 含有病毒的配制物及其应用 |
WO2014151855A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Inviragen, Inc. | Compositions and methods for live, attenuated alphavirus formulations |
CN104984357A (zh) * | 2015-06-02 | 2015-10-21 | 长春百克生物科技股份公司 | 不含明胶的疫苗保护剂组合物及流感减毒活疫苗 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NI201800096A (es) | 2019-02-01 |
KR20180135912A (ko) | 2018-12-21 |
CA3019529A1 (en) | 2017-10-05 |
JP2019513138A (ja) | 2019-05-23 |
EP3436063A1 (en) | 2019-02-06 |
BR112018069035A2 (pt) | 2019-01-29 |
PH12018502119A1 (en) | 2019-07-15 |
US20190111124A1 (en) | 2019-04-18 |
WO2017172643A1 (en) | 2017-10-05 |
SV2018005747A (es) | 2019-03-28 |
CR20180456A (es) | 2019-01-09 |
US10632184B2 (en) | 2020-04-28 |
AU2017241590A1 (en) | 2018-10-11 |
DOP2018000211A (es) | 2018-12-31 |
PE20190149A1 (es) | 2019-01-22 |
MX2018011837A (es) | 2019-02-13 |
CO2018010357A2 (es) | 2019-05-21 |
SG11201808458QA (en) | 2018-10-30 |
ECSP18081486A (es) | 2019-01-31 |
US20200306361A1 (en) | 2020-10-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9187729B2 (en) | Alphavirus and alphavirus replicon particle formulations and methods | |
CN102933230B (zh) | 用于鼻内递送的方法和组合物 | |
CN109789200A (zh) | 用改善的配制剂使黄病毒稳定化的组合物和方法 | |
US10806781B2 (en) | Compositions and methods for live, attenuated alphavirus formulations | |
CN101679954A (zh) | 用于活的减毒病毒的方法和组合物 | |
US20200306361A1 (en) | Compositions and methods for stabilizing alphaviruses with improved formulations | |
Nguyen et al. | Arthritogenic alphavirus vaccines: serogrouping versus cross-protection in mouse models | |
WO2022121917A1 (zh) | 一种药物组合物及其应用 | |
CN105636589A (zh) | 脱氧野尻霉素衍生物及其使用方法 | |
CN105233296B (zh) | 用于鸭病毒性肝炎活疫苗的耐热冻干保护剂及其制备方法和应用 | |
Kaushik et al. | Eco‐friendly materials for next‐generation vaccination: From concept to clinical reality | |
Orta et al. | Vaccines used in Echtyma disease and alternative treatment methods | |
Ogodo et al. | Microorganisms as potential source of drug for SARS-CoV-2 (COVID-19): antimicrobial drugs-ivermectin, azithromycin |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20181221 |
|
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |