CN108998397B - 一种复合微生物制剂及其制备方法 - Google Patents

一种复合微生物制剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种复合微生物制剂及其制备方法，采用嗜酸乳杆菌，产朊假丝酵母，枯草芽胞杆菌，多量毛霉制备菌种；该复合微生物制剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液0.5‑2.5份、产朊假丝酵母菌液0.5‑1.5份、枯草芽胞杆菌菌液0.7‑1.3份、多量毛霉菌液0.5‑3.5份。其制备方法包括：S1，扩培；S2,发酵；S3，灌装成品。该复合微生物制剂具有分解土壤中的有机物、充分利用促进土壤中的元素循环、改善土壤结构、增强土壤保水性、改善土壤理化性质及抑制土壤中有害微生物提高作物抗病能力的优点；该复合微生物制剂的制备方法简单、适于广泛推广、过程简单易控。

Description

一种复合微生物制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及农业技术领域，具体为一种复合微生物制剂及其制备方法。
背景技术
当今农田土地的管理方法主要是根据土壤类型进行管理，而土壤类型的划分主要依据也是它们的物理和化学性质，而忽略了突然的生物性质。而实际上，土壤中碳、氮、磷、钾、硫等物质转化循环主要取决于生活在土壤中的微生物，因此，土壤的生物性质具有至关重要的作用；土壤的生物性质主要与其中的微生物系统有密切关系，特别是土传病虫害，与土壤中的微生物群落息息相关，有害微生物群落占优势则病会严重，有益微生物群落占优势即可抑制病虫害的发生。例如自然森林土壤是强抑病型土壤，一旦森林被砍伐，开荒成农田，最初几年当土壤抑病能力有效时，作物生长良好，获得丰收，然而，若干年后当有机质含量减少，土壤肥力降低，作物就会经常遭到病虫害的袭击，土壤生态系统的微生物系统发生了变化，有益微生物衰退，有害微生物占优势，则土壤变成致病型土壤。
随着人口的激增，经济的发展，在土地资源有限的情况下，化肥和农药是提高粮食产量的有效手段，由于使用不当和施用量太多，对土壤功能产生决定性影响，造成土壤板结、保水能力下降、土壤肥力降低、化肥和农药的利用率低等缺陷，另外，施用的化肥和农药随雨水流失后，污染河流湖泊，成为富营养水体的主要污染源；同时，随着化学品使用越多，阳离子积累越多，健康土壤就会变成致病的环境，病虫害也随之经常发生，并且病虫的抗药性不断出现，又需要新的化学农药，形成了恶性循环，也就演变成致病性土壤。
发明内容
鉴于此，本发明提供了一种复合微生物制剂及其制备方法，具体为一种可为土壤提供有益微生物菌群的复合微生物制剂。该复合微生物制剂具有分解土壤中的有机物、充分利用促进土壤中的元素循环、改善土壤结构、增强土壤保水性、改善土壤理化性质及抑制土壤中有害微生物提高作物抗病能力的优点；该复合微生物制剂的制备方法简单、适于广泛推广、过程简单易控。
本发明的技术方案如下：
一种复合微生物制剂，采用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)，产朊假丝酵母(Candida utilis)，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)，多量毛霉(Mucor abundans)制备菌种，所述的嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽胞杆菌和多量毛霉均购自韩国一志微生物研究所；该复合微生物制剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液0.5-2.5份、产朊假丝酵母菌液0.5-1.5份、枯草芽胞杆菌菌液0.7-1.3份、多量毛霉菌液0.5-3.5份。
优选的，上述复合微生物制剂包括下述重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液1份、产朊假丝酵母菌液1份、枯草芽胞杆菌菌液1份、多量毛霉菌液1份。
上述复合微生物制剂的制备方法，步骤如下：
S1，扩培：
嗜酸乳杆菌扩培：将嗜酸乳杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养4-5d，备用；其中，嗜酸乳杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.5-2.5:1:100；
产朊假丝酵母扩培：将产朊假丝酵母菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5-5.5d，备用；其中，产朊假丝酵母菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.4-2.0:1:100；
枯草芽胞杆菌扩培：将枯草芽胞杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5-5.5d，备用；其中，枯草芽胞杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.8-2.6:1:100；
多量毛霉扩培：将多量毛霉菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5-5.5d，备用；其中，多量毛霉菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.5-3.5:1:100；
S2，发酵：采用四个发酵罐分别对嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽胞杆菌和多量毛霉进行发酵,控制发酵温度、发酵时间和发酵过程中发酵液的pH；
S3，发酵结束后，将嗜酸乳杆菌菌液、产朊假丝酵母菌液、枯草芽胞杆菌菌液和多量毛霉菌液冷却至室温，灌装，获得成品。
在S2的发酵过程中，嗜乳酸杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至35.5-36.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉和糖稀，搅拌至溶解，备用，其中水、脱脂奶粉和糖稀的重量比为1000:4-5:7-8；
(2)将扩培后的嗜酸乳杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05-0.1％，控制发酵温度为35-37℃，发酵时间为4.5-5.5d，pH为4.5-5.5；当发酵液中菌数达到3.8×106-4.6×106个/ml时，停止发酵，获得嗜酸乳杆菌菌液。
在S2的发酵过程中，产朊假丝酵母的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至25.5-26.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉的重量比为1000:1-2:4-5:1-2:1-2；
(2)将扩培后的产朊假丝酵母接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05-0.1％，控制发酵温度为25-27℃，发酵时间为4-6d，pH为5-6；当发酵液中菌数达到3.0×106-3.6×106个/m l时，停止发酵，获得产朊假丝酵母菌液。
在S2的发酵过程中，枯草芽胞杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至35.5-36.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:1-2:4-5:2-4；
(2)将扩培后的枯草芽胞杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05-0.1％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为4.5-5.5d，pH为5.5-6；当发酵液中菌数达到5.3×106-5.9×106个/ml时，停止发酵，获得枯草芽胞杆菌菌液。
在S2的发酵过程中，多量毛霉的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至25-27℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:0.5-2.5:4-5:2-4；
(2)将扩培后的多量毛霉接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05-0.1％，控制发酵温度为25.8-26.2℃，发酵时间为5-7d，pH为6-7；当发酵液中菌数达到6.2×106-7.4×106个/ml时，停止发酵，获得多量毛霉菌液。
上述复合微生物制剂在使用过程中，复合微生物制剂与水的体积比为1:300-700。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
1、本发明提供的复合微生物制剂具有成本低、生物活性高、使用范围广、安全无污染的优点，其可广泛应用于大棚作物、花卉、水稻田等经济作物。
2、将本发明提供的复合微生物制剂施入土壤中，微生物菌群会将施入土壤中的有机物转化成氨基酸和碳水化合物，为作物的生长提供易于吸收的营养物质，促进作物的根系生长、提高作物产量。
3、将本发明提供的复合微生物制剂施入土壤后，微生物菌群有效抑制大部分病原菌对作物产生病害，同时，微生物在分解有机物的过程中，还能产生多种生物活性物质和抗病物质，可促进作物生长、提高作物的抗病能力、提高作物的质量。
4、将本发明提供的复合微生物制剂施入土壤后，不仅能使土壤中有机物得到充分利用，增加土壤本身的肥力，同时，还能改善土壤的物理性质和化学性质，如改善土壤容量、土壤耕性、土壤通透性和土壤保水能力等。
5、本发明提供的复合微生物制剂的制备方法简单、制备成本低、适于广泛推广、过程简单易控。
附图说明
为更加清楚地展示使用本发明提供的复合微生物制剂后作物根系的生长状态，本发明提供了以下附图：
图1是水稻田试验水稻根系生长对比图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
本发明的实施例1-3及对比例1中，嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、多量毛霉(Mucorabundans)均购自韩国一志微生物研究所，批号为8320170721；蛋白胨购自韩国一志微生物研究所；脱脂奶粉购自奥芙康食品经营部；糖稀购自济南德闻化工有限公司；赖氨酸购自广优生物科技有限公司；大麦粉购自齐鲁鲜生网店；琼脂、酵母膏和甘露醇均购自天津市科密欧化学试剂有限公司。
实施例1
一种复合微生物制剂，采用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)，产朊假丝酵母(Candida utilis)，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)，多量毛霉(Mucor abundans)制备菌种，其中，嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽胞杆菌和多量毛霉均购自韩国一志微生物研究所；该复合微生物制剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液1份、产朊假丝酵母菌液1份、枯草芽胞杆菌菌液1份、多量毛霉菌液1份。
上述复合微生物制剂的制备方法，步骤如下：
S1，扩培：
嗜酸乳杆菌扩培：将嗜酸乳杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养4.5d，备用；其中，嗜酸乳杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为2:1:100；
产朊假丝酵母扩培：将产朊假丝酵母菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养5d，备用；其中，产朊假丝酵母菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.7:1:100；
枯草芽胞杆菌扩培：将枯草芽胞杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5d，备用；其中，枯草芽胞杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.2:1:100；
多量毛霉扩培：将多量毛霉菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养5d，备用；其中，多量毛霉菌粉、蛋白胨和水的重量比为3:1:100；
S2，发酵：
嗜乳酸杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉和糖稀，搅拌至溶解，备用，其中水、脱脂奶粉和糖稀的重量比为1000:4.5:7.5；
(2)将扩培后的嗜酸乳杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.75％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为5d，pH为5；当发酵液中菌数达到4.2×106个/ml时，停止发酵，获得嗜酸乳杆菌菌液；
产朊假丝酵母的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至26℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉的重量比为1000:1.5:4.5:1.5:1.5；
(2)将扩培后的产朊假丝酵母接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.75％，控制发酵温度为26℃，发酵时间为5d，pH为5.5；当发酵液中菌数达到3.3×106个/ml时，停止发酵，获得产朊假丝酵母菌液；
枯草芽胞杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:1.5:4.5:3；
(2)将扩培后的枯草芽胞杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.75％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为5d，pH为5.7；当发酵液中菌数达到5.6×106个/ml时，停止发酵，获得枯草芽胞杆菌菌液；
多量毛霉的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至26℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:1.5:4.5:3；
(2)将扩培后的多量毛霉接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.75％，控制发酵温度为26℃，发酵时间为6d，pH为6.5；当发酵液中菌数达到6.7×106个/ml时，停止发酵，获得多量毛霉菌液；
S3，将S2中发酵结束的嗜酸乳杆菌菌液、产朊假丝酵母菌液、枯草芽胞杆菌菌液和多量毛霉菌液冷却至室温，并按照1:1:1:1的体积比例灌装，获得成品。
实施例2
一种复合微生物制剂，采用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)，产朊假丝酵母(Candida utilis)，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)，多量毛霉(Mucor abundans)制备菌种，其中，嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽胞杆菌和多量毛霉均购自韩国一志微生物研究所；该复合微生物制剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液2.5份、产朊假丝酵母菌液0.5份、枯草芽胞杆菌菌液1.3份、多量毛霉菌液0.5份。
上述复合微生物制剂的制备方法，步骤如下：
S1，扩培：
嗜酸乳杆菌扩培：将嗜酸乳杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5d，备用；其中，嗜酸乳杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.5:1:100；
产朊假丝酵母扩培：将产朊假丝酵母菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养5.5d，备用；其中，产朊假丝酵母菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.4:1:100；
枯草芽胞杆菌扩培：将枯草芽胞杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5.5d，备用；其中，枯草芽胞杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.8:1:100；
多量毛霉扩培：将多量毛霉菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养5.5d，备用；其中，多量毛霉菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.5:1:100；
S2，发酵：
嗜乳酸杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉和糖稀，搅拌至溶解，备用，其中水、脱脂奶粉和糖稀的重量比为1000:4:7；
(2)将扩培后的嗜酸乳杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.1％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为4.5d，pH为4.5；当发酵液中菌数达到3.8×106个/ml时，停止发酵，获得嗜酸乳杆菌菌液；
产朊假丝酵母的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至25.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉的重量比为1000:1:4:1:1；
(2)将扩培后的产朊假丝酵母接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05％，控制发酵温度为25℃，发酵时间为4d，pH为5；当发酵液中菌数达到3.0×106个/ml时，停止发酵，获得产朊假丝酵母菌液；
枯草芽胞杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:1:4:2；
(2)将扩培后的枯草芽胞杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为4.5d，pH为5.5；当发酵液中菌数达到5.3×106个/ml时，停止发酵，获得枯草芽胞杆菌菌液；
多量毛霉的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至25℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:0.5:4:2；
(2)将扩培后的多量毛霉接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.05％，控制发酵温度为25.8℃，发酵时间为5d，pH为6；当发酵液中菌数达到6.2×106个/ml时，停止发酵，获得多量毛霉菌液；
S3，将S2中发酵结束后的嗜酸乳杆菌菌液、产朊假丝酵母菌液、枯草芽胞杆菌菌液和多量毛霉菌液冷却至室温，并按照2.5:0.5:1.3:0.5的体积比例灌装，获得成品。
实施例3
一种复合微生物制剂，采用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)，产朊假丝酵母(Candida utilis)，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)，多量毛霉(Mucor abundans)制备菌种，其中，嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽胞杆菌和多量毛霉均购自韩国一志微生物研究所；该复合微生物制剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液0.5份、产朊假丝酵母菌液1.5份、枯草芽胞杆菌菌液0.7份、多量毛霉菌液3.5份。
上述复合微生物制剂的制备方法，步骤如下：
S1，扩培：
嗜酸乳杆菌扩培：将嗜酸乳杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养4d，备用；其中，嗜酸乳杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.5:1:100；
产朊假丝酵母扩培：将产朊假丝酵母菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5d，备用；其中，产朊假丝酵母菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.0:1:100；
枯草芽胞杆菌扩培：将枯草芽胞杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5d，备用；其中，枯草芽胞杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.6:1:100；
多量毛霉扩培：将多量毛霉菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5d，备用；其中，多量毛霉菌粉、蛋白胨和水的重量比为3.5:1:100；
S2，发酵：
嗜乳酸杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉和糖稀，搅拌至溶解，备用，其中水、脱脂奶粉和糖稀的重量比为1000:5:8；
(2)将扩培后的嗜酸乳杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.1％，控制发酵温度为37℃，发酵时间为5.5d，pH为5.5；当发酵液中菌数达到4.6×106个/ml时，停止发酵，获得嗜酸乳杆菌菌液；
产朊假丝酵母的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至26.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉的重量比为1000:2:5:2:2；
(2)将扩培后的产朊假丝酵母接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.1％，控制发酵温度为27℃，发酵时间为6d，pH为6；当发酵液中菌数达到3.6×106个/ml时，停止发酵，获得产朊假丝酵母菌液；
枯草芽胞杆菌的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至36℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:2:5:4；
(2)将扩培后的枯草芽胞杆菌接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.1％，控制发酵温度为36℃，发酵时间为5.5d，pH为6；当发酵液中菌数达到5.9×106个/ml时，停止发酵，获得枯草芽胞杆菌菌液；
多量毛霉的发酵步骤如下：
(1)向发酵罐内加水，并升温至27℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:2.5:5:4；
(2)将扩培后的多量毛霉接种至步骤(1)的发酵罐中，接种量为0.1％，控制发酵温度为26.2℃，发酵时间为7d，pH为7；当发酵液中菌数达到7.4×106个/ml时，停止发酵，获得多量毛霉菌液；
S3，将S2中发酵结束后的嗜酸乳杆菌菌液、产朊假丝酵母菌液、枯草芽胞杆菌菌液和多量毛霉菌液冷却至室温，并按照0.5:1.5:0.7:3.5的体积比例灌装，获得成品。
对比例1
采用公告号CN101914447B，名称为“一种微生物复合菌剂707”的专利文件中提供的微生物复合菌剂的制备方法制备微生物复合菌剂707。
大田实验
将实施例1-3获得的复合微生物制剂、对比例1获得的微生物复合菌剂707应用于大田试验中，对作物的根系、作物产品的质量、作物产品的产量进行对比。
(一)复合微生物制剂对土壤板结的试验
选取一个大棚的板结土壤分别装在编号为A、B、C、D、E的五个桶里，在土里插入筷子，进行土壤板结试验，试验过程如下：
桶A：使用实施例1提供的复合微生物制剂与水的混合溶液对桶A内的土壤进行浇灌，其中，实施例1提供的复合微生物制剂与水的体积比为1:500；
桶B:使用实施例2提供的复合微生物制剂与水的混合溶液对桶B内的土壤进行浇灌，其中，复合微生物制剂与水的体积比为1:300：
桶C：使用实施例3提供的复合微生物制剂与水的混合溶液对桶C内的土壤进行浇灌，其中，复合微生物制剂与水的体积比为1:700：
桶D:使用对比例1提供的微生物复合菌剂707与水的混合溶液对桶D内的土壤进行浇灌，其中，微生物复合菌剂707与水的体积比为1:300：
桶E：使用水对桶E内的土壤进行浇灌；
浇灌过程为：插入筷子，分别在第0天、第3天、第6天进行浇灌，每个桶每次的浇灌量相同；在第7天时，将桶A、桶B、桶C、桶D和桶E内的筷子直接向外拔出，并总结如下；
表1
组别 筷子拔起状态
桶A 轻松拔起
桶B 轻松拔起
桶C 轻松拔起
桶D 松动，但拔不出来
桶E 拔不动
从表1可以看出，使用本发明提供的复合微生物制剂施用于板结土壤后，可有效提高土壤的蓬松度，能够解决土壤板结问题，且对于土壤板结问题的改善明显优于桶D(对比例1提供的微生物复合菌剂707)和桶E，具有用时最短、效果最好的优点。
(二)复合微生物制剂对水稻根系发育的影响
图1示出了水稻田试验水稻根系生长对比图，
图中，左一展示了不使用任何菌剂和肥料的水稻根系状况：
左二展示了使用对比例1提供的微生物复合菌剂707的水稻根系状况；
左三展示了使用实施例1提供的复合微生物制剂的水稻根系状况；
左四展示了使用实施例1提供的复合微生物制剂配合有机肥的水稻根系状况；
在左二展示的水稻根系试验中，微生物复合菌剂707的使用量为5L/亩，微生物复合菌剂707与水的体积比为1:500，在翻地时，按照5L/亩的量直接喷洒于地面上；栽苗后，按照5L/亩的量每间隔一个月喷洒一次；
在左三展示的水稻根系试验中，复合微生物制剂的使用量为5L/亩，复合微生物制剂与水的体积比为1:500，在翻地时，按照5L/亩的量直接喷洒于地面上；栽苗后，按照5L/亩的量每间隔一个月喷洒一次；
在左四展示的水稻根系试验中，复合微生物制剂的使用量为5L/亩，复合微生物制剂与水的体积比为1:500，将有机肥投入复合微生物制剂的水溶液中，在翻地时，按照5L/亩的量直接喷洒于地面上；栽苗后，按照5L/亩的量每间隔一个月喷洒一次。
通过图1可以看出，左三和左四展示的水稻根系明显优势于左一和左二所展示的水稻根系，这表明，本发明提供的复合微生物制剂可促进有机肥发酵，分解成利于根系吸收的无机营养，且具有强化生根养根的作用。
对图1展示的四组水稻的产量进行统计，结果如下：
表2
项目 左一 左二 左三 左四
产量(kg/亩) 417 481 627 726
由表2可以看出，左四的产量明显高于左一和左二的产量，略高于左三的产量；左三的产量明显高于左一和左二的产量；这表明，本发明提供的复合微生物制剂与有机肥配合使用，会提高水稻的产量；单独使用本发明提供的复合微生物制剂相对于不使用微生物菌剂和肥料及单独使用对比例1提供的微生物复合菌剂707会提高作物的产量，且左三相对于左二，产率提高了30.35％，左三相对于左一，产率提高了50.36％。
(三)复合微生物制剂对黄瓜质量及产量的影响
试验包括试验①、试验②和试验③。在试验①中，使用实施例1提供的复合微生物制剂，使用量为5L/亩，复合微生物制剂与水的体积比为1:500；在试验②中，使用对比例1提供的微生物复合菌剂707，使用量为5L/亩，微生物复合菌剂707与水的体积比为1:500；在试验③中，使用水；
施肥过程：在黄瓜苗种植后，每个半个月浇灌一次，五组试验每次的浇灌量相同，在黄瓜的收获期内，持续监测黄瓜的质量和产量，结果如下：
表3
Figure GDA0001802326700000171
从表3可以看出，试验①获得的黄瓜从外观、口感上，明显优于试验②和试验③，且收获期也明显延长；试验①的产量相对于试验②和试验③的产量，产率分别提高了9.14％和18.13％，这表明，使用本发明提供的复合微生物制剂能够有效提高黄瓜的产量。
(四)复合微生物制剂防治黄瓜病害试验
黄瓜病害发生后，具有传播快的特点，严重时，会给黄瓜造成毁灭性的损失。黄瓜病害主要是叶片病害，因此，本试验通过对叶片观察并进行以下试验：
试验包括试验①、试验②和试验③。在试验①中，使用实施例1提供的复合微生物制剂，复合微生物制剂与水的体积比为1:700；在试验②中，使用对比例1提供的微生物复合菌剂707，微生物复合菌剂707与水的体积比为1:300；在试验③中，使用水；采用定期喷施的方法进行试验，喷施过程为：根据上述描述，配置好的①溶液、②溶液和③溶液，分别对不同区域的叶片表面进行喷施，每周喷施一次，①溶液、②溶液和③溶液每次喷施的量相同，从幼苗期开始至收获期结束，对植株和叶片进行观察，结果如下：
表4
Figure GDA0001802326700000181
从表4可以看出，使用本发明提供的复合微生物制剂的黄瓜植株旺盛、叶片外观优良，而使用微生物复合菌剂707和水的叶片均产生了不同程度的病害；另外，在试验①中使用的复合微生物制剂的量明显少于在试验②中使用的微生物复合菌剂707的量，因此，使用本申请提供的复合微生物制剂具有用量少、防治黄瓜病害效果明显的优点。

Claims (6)

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，采用嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus），产朊假丝酵母（Candida utilis），枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），多量毛霉（Mucor abundans）制备菌种，所述的嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌和多量毛霉均购自韩国一志微生物研究所；
所述复合微生物菌剂包括以下重量份数的组分：嗜酸乳杆菌菌液1份、产朊假丝酵母菌液1份、枯草芽孢杆菌菌液1份、多量毛霉菌液1份；
在复合微生物菌剂的使用过程中，复合微生物菌剂与水的体积比为1:300-700。
2.如权利要求1所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：
S1，扩培：
嗜酸乳杆菌扩培：将嗜酸乳杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养4-5d，备用；其中，嗜酸乳杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.5-2.5:1:100；
产朊假丝酵母扩培：将产朊假丝酵母菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5-5.5d，备用；其中，产朊假丝酵母菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.4-2.0:1:100；
枯草芽孢杆菌扩培：将枯草芽孢杆菌菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于36℃恒温箱内，培养5-5.5d，备用；其中，枯草芽孢杆菌菌粉、蛋白胨和水的重量比为1.8-2.6:1:100；
多量毛霉扩培：将多量毛霉菌粉和蛋白胨置于水中，搅拌均匀，置于26℃恒温箱内，培养4.5-5.5d，备用；其中，多量毛霉菌粉、蛋白胨和水的重量比为2.5-3.5:1:100；
S2，发酵：采用四个发酵罐分别对嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌和多量毛霉进行发酵，控制发酵温度、发酵时间和发酵过程中发酵液的pH；
S3，发酵结束后，将嗜酸乳杆菌菌液、产朊假丝酵母菌液、枯草芽孢杆菌菌液和多量毛霉菌液冷却至室温，灌装，获得复合微生物菌剂。
3.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在S2的发酵过程中，嗜酸乳杆菌的发酵步骤如下：
（1）向发酵罐内加水，并升温至35.5-36.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉和糖稀，搅拌至溶解，备用，其中水、脱脂奶粉和糖稀的重量比为1000:4-5:7-8；
（2）将扩培后的嗜酸乳杆菌接种至步骤（1）的发酵罐中，接种量为0.05-0.1%，控制发酵温度为35-37℃，发酵时间为4.5-5.5d，pH为4.5-5.5；当发酵液中菌数达到3.8×106-4.6×106个/ml时，停止发酵，获得嗜酸乳杆菌菌液。
4.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在S2的发酵过程中，产朊假丝酵母的发酵步骤如下：
（1）向发酵罐内加水，并升温至25.5-26.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀、赖氨酸和大麦粉的重量比为1000:1-2:4-5:1-2:1-2；
（2）将扩培后的产朊假丝酵母接种至步骤（1）的发酵罐中，接种量为0.05-0.1%，控制发酵温度为25-27℃，发酵时间为4-6d，pH为5-6；当发酵液中菌数达到3.0×106-3.6×106个/ml时，停止发酵，获得产朊假丝酵母菌液。
5.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在S2的发酵过程中，枯草芽孢杆菌的发酵步骤如下：
（1）向发酵罐内加水，并升温至35.5-36.5℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:1-2:4-5:2-4；
（2）将扩培后的枯草芽孢杆菌接种至步骤（1）的发酵罐中，接种量为0.05-0.1%，控制发酵温度为36℃，发酵时间为4.5-5.5d，pH为5.5-6；当发酵液中菌数达到5.3×106-5.9×106个/ml时，停止发酵，获得枯草芽孢杆菌菌液。
6.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在S2的发酵过程中，多量毛霉的发酵步骤如下：
（1）向发酵罐内加水，并升温至25-27℃，保持恒温，然后向水中加入脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸，搅拌，备用，其中，水、脱脂奶粉、糖稀和赖氨酸的重量比为1000:0.5-2.5:4-5:2-4；
（2）将扩培后的多量毛霉接种至步骤（1）的发酵罐中，接种量为0.05-0.1%，控制发酵温度为25.8-26.2℃，发酵时间为5-7d，pH为6-7；当发酵液中菌数达到6.2×106-7.4×106个/ml时，停止发酵，获得多量毛霉菌液。
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