CN108939025B - 小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按比例混合后得到的混合物，分别用乙醇和水提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并加入金钱白花蛇水解液，用培养基配制成溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。本发明的有益效果为：本发明提供的应用，所制备的药物在体外抑制肿瘤的实验中与小艾飞蜜膏、5‑氟脲嘧啶及华蟾素片相同条件下测得的抑制率进行比较，对多种肿瘤细胞均表现出不同程度的抑制作用，且对AGS细胞，SW480细胞抑制作用显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。

Description

小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用
技术领域
本发明涉及维药应用技术领域，具体涉及小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用。
背景技术
肿瘤(tumour)是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物(neogrowth)，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物(neoplasm)。根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类，而癌症即为恶性肿瘤的总称。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，再分别按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为0.2-1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。
进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，用95％乙醇提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。
进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述金钱白花蛇水解液的制备方法为：取金钱白花蛇，称重，粉碎，按照每g体重加20ml的比例加入磷酸盐缓冲液PBS，0℃水解2h，4℃放置24h后，再加磷酸盐缓冲液PBS至磷酸盐缓冲液PBS比例为20ml/g体重,水解2h，过滤，滤液用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。
进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述肿瘤细胞为：对数生长期的人胃癌细胞AGS，人胃癌细胞NCI-N87，人大肠癌细胞HT-29,人结肠癌细胞SW480，人结肠癌细胞SW620，人宫颈癌细胞hela，人宫颈癌细胞Siha和/或人宫颈癌细胞C-33A。
进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述肿瘤细胞的体外培养方法为：在5％CO2,37℃的培养箱中用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基分别培养人胃癌细胞AGS、人宫颈癌细胞hela、人宫颈癌细胞Siha、人大肠癌细胞HT-29和人宫颈癌细胞C-33A，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基分别培养人结肠癌细胞SW480、人结肠癌细胞SW620和人胃癌细胞NCI-N87，2～3d传代一次至对数生长期。
小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，在本发明中分别以WY20160801，WY20160802，WY20160803，WY20160804，WY20160805进行表示。
本发明的有益效果为：本发明提供的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所制备的药物在体外抑制肿瘤的实验中与小艾飞蜜膏、5-氟脲嘧啶及华蟾素片相同条件下测得的抑制率进行比较，系列浓度(0.2mg/ml,0.4mg/ml,0.6mg/ml,0.8mg/ml,1.0mg/ml)各样品溶液除了对MCF-7细胞，对其余细胞均表现出不同程度的抑制作用其中样品WY20160801对各细胞的抑制率均高于其余样品对各细胞的抑制率，且对AGS细胞，SW480细胞抑制作用显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。各样品抑制作用均呈现浓度依赖性。
1mg/ml的样品WY20160801和金钱白花蛇水解液混合物与1mg/ml的小艾飞蜜膏、1mg/ml的5-氟脲嘧啶及1mg/ml的华蟾素片分别作用24h,48h,72h进行比较。与1mg/ml的小艾飞蜜膏相比样品对AGS细胞、HT-29细胞、SW480细胞、SW620细胞、Siha细胞及C-33A细胞在24h,48h,72h均表现出显著性差异，对NCI-N87细胞在72h表现出显著性差异，对Hela细胞在48h,72h表现出显著性差异。与1mg/ml的5-氟脲嘧啶相比样品对AGS细胞和C-33A细胞在24h,48h,72h表现出显著性差异，对NCI-N87细胞、SW480细胞、Siha细胞在24h,48h表现出显著性差异。与1mg/ml的华蟾素片相比样品对AGS细胞和SW480细胞在48h,72h表现出显著性差异。且各药物溶液抑制作用均呈时间依赖性。
附图说明
图1显示为系列浓度的各样品对人胃癌AGS细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图2显示为系列浓度的各样品对人胃癌NCI-N87细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图3显示为系列浓度的各样品对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图4显示为系列浓度的各样品对人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图5显示为系列浓度的各样品对人结肠癌SW620细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图6显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌hela细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图7显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌Siha细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图8显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌C-33A细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图9显示为系列浓度的各样品对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率(n＝4)。
图10显示为1mg/ml各药物溶液对AGS细胞的增值抑制率。
图11显示为1mg/ml各药物溶液对SW480细胞的增值抑制率。
具体实施方式
实施例1：
1材料与方法：
1.1材料：
供试样品维药复方小艾飞蜜膏药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇不同浓度乙醇提取物及水提物WY20160801，WY20160802，WY20160803，WY20160804，WY20160805及金钱白花蛇由新疆维吾尔药业公司提供，小艾飞蜜膏，中药对照华蟾素片，西药对照5-氟脲嘧啶。
供试瘤株为人胃癌细胞株AGS、人胃癌细胞株NCI-N87、人大肠癌细胞株HT-29、人结肠癌细胞SW480、人结肠癌细胞SW620、人宫颈癌细胞株hela、人宫颈癌细胞株Siha、人宫颈癌细胞株C-33A及人乳腺癌细胞MCF-7。
试剂主要有培养基DMEM高糖、培养基RPMI-1640、胎牛血清、胰酶与EDTA消化液、MTT、DMSO(二甲基亚砜)等。
供试仪器有荧光倒置显微镜、离心机、冰箱、培养瓶、96孔培养板、超净工作台、CO2培养箱和酶标仪等。
1.2方法：
1.2.1金钱白花蛇的水解：
取一条金钱白花蛇，称重，粉碎，加20mlPBS(磷酸盐缓冲液)低温水解两个小时，在4℃冰箱放置24小时，再水解两个小时，过滤，滤液用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。
1.2.2药物溶液的配制：
1.2.2.1系列浓度样品溶液的配制：
样品WY20160801，WY20160802，WY20160803，WY20160804，WY20160805用DMSO(二甲基亚砜)溶解，并按照原药材比1:1的比例加入蛇的水解液，用培养基配制成浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存备用。
1.2.2.2对照药物溶液的配制：
5-氟脲嘧啶为液体药物因此直接用培养基稀释至1mg/ml。华蟾素片去掉糖衣片，碾碎，取适量用DMSO溶解，配制母液；小艾飞蜜膏取适量用DMSO溶解，配制母液。再各取母液用培养基稀释至1mg/ml，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存备用。
1.2.3细胞培养方法：
在5％CO2,37℃培养箱中用含胎牛血清的DMEM高糖培养基分别培养AGS、hela、Siha、HT-29、C-33A、MCF-7细胞，用含胎牛血清的RPMI-1640培养基分别培养SW480、SW620、NCI-N87细胞，2～3d传代一次至对数生长期。
1.2.4系列浓度各样品对不同细胞增值抑制活性的检测：
将处于对数生长期的人胃癌细胞(AGS)，人胃癌细胞(NCI-N87)，人大肠癌细胞(HT-29),人结肠癌细胞(SW480)，人结肠癌细胞(SW620)，人宫颈癌细胞(hela)，人宫颈癌细胞(Siha)，人宫颈癌细胞(C-33A),人乳腺癌细胞(MCF-7)消化吹打稀释成一定浓度的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每孔加入100μl的细胞悬液，放置在37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养，待细胞贴壁之后，弃掉上清液，加入200μl的系列浓度(0.2mg/ml,0.4mg/ml,0.6mg/ml,0.8mg/ml,1.0mg/ml)的各样品溶液做为样品组，另设对照组(加完全培养液与细胞，但不加受试物)，共培养48h后，每孔加入20μl的MTT溶液(其浓度为5mg/ml)，放置在37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养4h，拿出培养板，小心弃去上清液，每孔加入150μl的二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)，在震荡仪上振荡5-10min，用酶标检测仪在490nm处测定其吸光度(Opticaldensity,OD)值。实验应重复3次，并利用公式计算出各种肿瘤细胞的增殖抑制率。
计算公式：肿瘤细胞增殖抑制率(％)＝(1-(样品组的OD值/对照组的OD值))×100％。1.2.5 1mg/ml的样品WY20160801与1mg/ml的小艾飞蜜膏，华蟾素片，5-氟脲嘧啶对各肿瘤细胞的抑制作用的比较：
将处于对数生长期的人胃癌细胞(AGS)，人胃癌细胞(NCI-N87)，人大肠癌细胞(HT-29),人结肠癌细胞(SW480)，人结肠癌细胞(SW620)，人宫颈癌细胞(hela)，人宫颈癌细胞(Siha)，人宫颈癌细胞(C-33A),人乳腺癌细胞(MCF-7)消化吹打稀释成一定浓度的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每孔加入100μl的细胞悬液，放置在37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养，待细胞贴壁之后，弃掉上清液，加入200μl的1mg/ml各药物溶液,另设空白对照组(加完全培养液与细胞，但不加受试物)，共培养24h,48h,72h后，每孔加入20μl的MTT溶液(其浓度为5mg/ml)，放置在37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养4h，拿出培养板，小心弃去上清液，每孔加入150μl的二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)，在震荡仪上振荡5-10min，用酶标检测仪在490nm处测定其吸光度(Opticaldensity,OD)值。实验应重复3次，并利用公式计算出各肿瘤细胞的增殖抑制率。
计算公式：肿瘤细胞增殖抑制率(％)＝(1-(药物组的OD值/空白对照组的OD值))×100％。
2结果与分析：
2.1系列浓度各样品对9种肿瘤细胞生长的影响：
浓度为0.2mg/ml,0.4mg/ml,0.6mg/ml,0.8mg/ml,1.0mg/ml的各样品溶液对9种肿瘤细胞的抑制作用如图1-9所示。由图可知各样品除了人乳腺癌MCF-7细胞以外的其余8种细胞均有不同程度的抑制作用。样品WY20160801抑制作用最好，高浓度时各细胞抑制率均有显著性差异，且呈时间依赖性。另外由表1可知，样品WY20160801对人胃癌细胞AGS，人大肠癌细胞SW480的抑制作用最显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。表1显示为各样品对各细胞的50％抑制浓度(mg/ml)。
表1
Figure DEST_PATH_GDA0001839357060000051
2.2样品WY20160801与对照药对各肿瘤细胞增值抑制作用的比较：
样品WY20160801，小艾飞蜜膏、5-氟脲嘧啶及华蟾素片对各样品有抑制作用的八种肿瘤细胞AGS、NCI-N87、HT-29、SW480、SW620、hela、Siha和C-33A的增殖抑制作用比较如表2所示。由表可知各药物溶液对八种细胞有不同程度的抑制作用，其中对AGS细胞和SW480细胞抑制率较好。由表3，图10可知1mg/ml的样品WY20160801作用于AGS细胞24h,48h,72h后，表现出显著的抑制作用且呈时间依赖性。样品WY20160801与同样处理的1mg/ml的小艾飞蜜膏与1mg/ml的5-氟脲嘧啶相比，24h，48h，72h的抑制率均有显著差异。与同样处理的1mg/ml的华蟾素片相比，48h,72h的抑制率有显著差异。由表4，图11可知1mg/ml的样品WY20160801作用于SW480细胞24h,48h,72h后，表现出显著的抑制作用且呈时间依赖性。样品WY20160801与同样处理的1mg/ml的小艾飞蜜膏相比，24h,48h,72h的抑制率有显著差异，与1mg/ml的5-氟脲嘧啶相比，24h，48h的抑制率有显著差异，与1mg/ml的华蟾素片相比，48h,72h的抑制率有显著差异。表2显示为1mg/ml的样品WY20160801与各对照药比较。表3显示为1mg/ml各药物溶液对AGS细胞的增值抑制率。表4显示为1mg/ml各药物溶液对SW480细胞的增值抑制率。
表2
Figure DEST_PATH_GDA0001839357060000061
其中，“+”：有显著性差异“－”：无显著性差异。
表3
Figure DEST_PATH_GDA0001839357060000062
Figure DEST_PATH_GDA0001839357060000071
其中，*P<0.5,**P<0.01vs小艾飞蜜膏组；#P<0.5,##P<0.01vs 5-氟脲嘧啶组；△P<0.5,△△P<0.01vs华蟾素片组。
表4
Figure DEST_PATH_GDA0001839357060000072
其中，*P<0.5,**P<0.01vs小艾飞蜜膏组；#P<0.5,##P<0.01vs 5-氟脲嘧啶组；△P<0.5,△△P<0.01vs华蟾素片组。
3.结果分析：
该实验用维药复方小艾飞蜜膏药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇不同浓度乙醇提取物及水提物WY20160801、WY20160802、WY20160803、WY20160804、WY20160805与金钱白花蛇水解液的混合物对9种肿瘤细胞AGS、NCI-N87、HT-29、SW480、SW620、hela、Siha、C-33A和MCF-7进行体外实验，用MTT法测定细胞的增殖抑制率，并分别与小艾飞蜜膏、5-氟脲嘧啶及华蟾素片相同条件下测得的抑制率进行比较。
系列浓度(0.2mg/ml,0.4mg/ml,0.6mg/ml,0.8mg/ml,1.0mg/ml)各样品溶液除了对MCF-7细胞，对其余细胞均表现出不同程度的抑制作用。其中样品WY20160801对各细胞的抑制率均高于其余样品对各细胞的抑制率，且对AGS细胞，SW480细胞抑制作用显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。各样品抑制作用均呈现浓度依赖性。
1mg/ml的样品WY20160801和金钱白花蛇水解液混合物与1mg/ml的小艾飞蜜膏、1mg/ml的5-氟脲嘧啶及1mg/ml的华蟾素片分别作用24h,48h,72h进行比较。与1mg/ml的小艾飞蜜膏相比样品对AGS细胞、HT-29细胞、SW480细胞、SW620细胞、Siha细胞及C-33A细胞在24h,48h,72h均表现出显著性差异，对NCI-N87细胞在72h表现出显著性差异，对Hela细胞在48h,72h表现出显著性差异。与1mg/ml的5-氟脲嘧啶相比样品对AGS细胞和C-33A细胞在24h,48h,72h表现出显著性差异，对NCI-N87细胞、SW480细胞、Siha细胞在24h,48h表现出显著性差异。与1mg/ml的华蟾素片相比样品对AGS细胞和SW480细胞在48h,72h表现出显著性差异。且各药物溶液抑制作用均呈时间依赖性。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，用95％乙醇提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物；
所述金钱白花蛇水解液的制备方法为：取金钱白花蛇，称重，粉碎，按照每g体重加20ml的比例加入磷酸盐缓冲液PBS，0℃水解2h，4℃放置24h后，再加磷酸盐缓冲液PBS至磷酸盐缓冲液PBS比例为20ml/g体重,水解2h，过滤，滤液用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量；
所述肿瘤细胞为：对数生长期的人胃癌细胞AGS，人胃癌细胞NCI-N87，人大肠癌细胞HT-29 ,人结肠癌细胞SW480，人结肠癌细胞SW620，人宫颈癌细胞hela，人宫颈癌细胞Siha和/或人宫颈癌细胞C-33A。
2.根据权利要求1所述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞的体外培养方法为：在5％CO2 ,37℃的培养箱中用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基分别培养人胃癌细胞AGS、人宫颈癌细胞hela、人宫颈癌细胞Siha、人大肠癌细胞HT-29和人宫颈癌细胞C-33A，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基分别培养人结肠癌细胞SW480、人结肠癌细胞SW620和人胃癌细胞NCI-N87，2～3d传代一次至对数生长期。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DCE-MRI评价结肠癌裸鼠药物治疗的实验研究;古丽巴哈·耐买提等;《中国医学计算机成像杂志》;20161231;第22卷(第02期);第182-186页 *
动物组织蛋白质提纯方法的研究进展;孟琳等;《食品与药品》;20091231;第11卷(第05期);第53-55页 *
复方小艾飞的提取工艺研究;米仁莎•牙库甫等;《西北药学杂志》;20140531;第29卷(第3期);第222-225页 *

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