CN108918897A - 一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法及其应用,涉及酒类药理研究技术领域。本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法是分别测量机体在饮酒后不同时间的血样本的血糖浓度或/和渗透压,根据血糖浓度或/和渗透压,判断血乙醇浓度,根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,判断乙醇吸收代谢程度,此方法可快速而有效的评价饮酒后的乙醇吸收代谢程度。本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用是用于检测对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,以获得酒引起的乙醇吸收代谢程度或者不同酒引起的乙醇吸收代谢程度差异。
Description
技术领域
本发明涉及酒类药理研究技术领域,且特别涉及一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法及其应用。
背景技术
酒类饮料的成分99%都是乙醇和水,乙醇经口腔摄入,再经胃和小肠等进入血液,其中2%-10%的乙醇会随汗液、呼吸和小便排出体外,剩余部分全部乙醇在肝脏中经各种酶的作用被氧化分解,最终变成二氧化碳和水,在这个过程中会发生一系列的生化反应,并且对机体造成影响。科学研究已经证实,过量饮酒会引起心脑血管、消化道、神经系统的多种病症。饮酒后会造成动作失常、思维判断能力下降,这也是禁止酒驾的主要原因,血液中乙醇含量是作为酒驾的重要判定标准。
目前测定血液中乙醇的常用方法主要有气相色谱法(GC)、电化学法、化学法和酶法等。其中化学法、酶法影响因素较多,结果不稳定,费用较高。直接气相色谱法因血液蛋白会阻塞色谱柱的小孔和加样气的针头,致使色谱柱的使用寿命缩短,因此应用受到一定的限制;顶空气相色谱法因进入色谱仪的是易挥发的有机化合物气体,背景相对简单,应用较多,但对检测的硬件条件要求较高。
临床前需要通过相关动物实验来研究机体对乙醇代谢作用影响的,一般是采用顶空气相色谱法检测小鼠的血清(或血浆)和尿液中乙醇浓度来考察乙醇的代谢程度。而小鼠总血量相对人体较少,气相色谱检测需要的血液样本量大,且对仪器设备和技术要求较高,价格也较昂贵。
因此,研发一种用于快速而有效的评价保健酒、白酒等酒品饮后乙醇代谢程度的检测方法具有非常重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,此方法可快速而有效的评价饮酒后的乙醇吸收代谢程度。
本发明的另一目的在于提供一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,用于检测对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,以获得酒引起的乙醇吸收代谢程度或者不同酒引起的乙醇吸收代谢程度差异。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提出一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其包括以下步骤:分别测量机体在饮酒后不同时间的血样本的血糖浓度或/和渗透压,根据血糖浓度或/和渗透压,判断血乙醇浓度,根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,判断乙醇吸收代谢程度。
进一步地,在本发明较佳实施例中,在血糖浓度升高或/和渗透压升高的过程中,血糖浓度的增大率或/和渗透压的增大率越大,表示机体对乙醇的吸收程度越高;在血糖浓度降低或/和渗透压降低的过程中,血糖浓度的降低率或/和渗透压的降低率越大,表示机体对乙醇的代谢程度越高。
进一步地,在本发明较佳实施例中,用于快速评价小鼠的乙醇吸收代谢程度,具体包括以下步骤:
将小鼠随机分成若干组,对所有小鼠灌酒、禁水;
在不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
根据小鼠灌酒后的血样品的血糖浓度变化率或/和渗透压变化率,判断小鼠的乙醇吸收代谢程度。
进一步地,在本发明较佳实施例中,小鼠选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12-16小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
进一步地,在本发明较佳实施例中,小鼠的灌酒体积为0.10-0.30mL/10g.bw。
进一步地,在本发明较佳实施例中,测量血样本的渗透压的方法是:对小鼠摘眼球取血后,先将血样本静置25-40min后,以3000-4000r/min离心10-15min,取上层清液,再测量上层清液的血糖浓度或/和渗透压。
一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,用于评价机体对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异。
进一步地,在本发明较佳实施例中,用于评价小鼠对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对剩余组的所有小鼠给予一种酒灌胃、禁水;
在灌酒后的不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠灌酒后的乙醇吸收代谢程度随时间的变化情况。
进一步地,在本发明较佳实施例中,将小鼠随机分成至少9组,在灌胃后的至少12小时内,每间隔至少0.5小时对一组小鼠取血。
进一步地,在本发明较佳实施例中,用于评价小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对不同组的小鼠给予不同酒灌胃、禁水;
在灌胃后的不同时间,分别对不同酒灌胃的各组小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异。
本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法及其应用的有益效果是:本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法是分别测量机体在饮酒后不同时间的血样本的血糖浓度或/和渗透压,根据血糖浓度或/和渗透压,判断血乙醇浓度,根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,判断乙醇吸收代谢程度,此方法可快速而有效的评价饮酒后的乙醇吸收代谢程度。本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用是用于检测对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,以获得酒引起的乙醇吸收代谢程度或者不同酒引起的乙醇吸收代谢程度差异。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法及其应用进行具体说明。
本发明实施例提供一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其包括以下步骤:分别测量机体在饮酒后不同时间的血样本的血糖浓度或/和渗透压,根据血糖浓度或/和渗透压,判断血乙醇浓度,根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,判断乙醇吸收代谢程度。
通常情况下,饮酒后机体的血糖浓度或/和渗透压先升高后降低,这是因为机体经口腔摄入乙醇,先经胃和小肠等进入血液,大部分乙醇通过血液运至肝脏中被氧化分解,因此根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,就可以判断乙醇吸收代谢程度。在血糖浓度升高或/和渗透压升高的过程中,血糖浓度的增大率或/和渗透压的增大率越大,表示机体对乙醇的吸收程度越高;在血糖浓度降低或/和渗透压降低的过程中,血糖浓度的降低率或/和渗透压的降低率越大,表示机体对乙醇的代谢程度越高。
本发明实施例采用血糖浓度或/和渗透压作为判断机体吸收代谢乙醇的指标,这是因为:电解质、尿素氮和血糖是构成血清生化的主要成分,饮酒后,乙醇通过口腔进入机体,再由胃和小肠进入血液,而乙醇等小分子化合物大量进入机体会使机会产生系列的生化变化,且血糖与小鼠实测血乙醇浓度具有良好的相关性,因此,本发明实施例通过检测血清的血糖值来判断对乙醇的吸收代谢程度。
渗透压反映溶解于溶剂中的分子数量,电解质、尿素氮和血糖是构成血清晶体渗透压的主要成分。饮酒后,乙醇通过口腔进入机体,再由胃和小肠进入血液,而乙醇等小分子化合物大量进入机体会使血清渗透压升高,且血清渗透压与小鼠实测血乙醇浓度具有良好的相关性,因此,本发明实施例通过检测血清的渗透压来判断对乙醇的吸收代谢程度。
本实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法可以用于检测包括人在内的机体对乙醇吸收代谢程度,一般是用在研究机体对乙醇吸收代谢作用影响的动物实验中,即用于快速评价小鼠的乙醇吸收代谢程度,具体包括以下步骤:
S1小鼠前处理:选用适应性喂养良好的小鼠,在灌胃前12-16小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
S2分组、灌胃:将小鼠随机分成若干组,对所有小鼠灌酒、禁水,小鼠的灌酒体积一般为0.10-0.30mL/10g.bw。
S3测量:在不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压。测量血样本的渗透压的方法是:对小鼠摘眼球取血后,先将血样本静置25-40min后,以3000-4000r/min离心10-15min,取上层清液(即血清),再测量所述上层清液的血糖浓度或/和渗透压。
S4数据处理:采用统计学软件分析每组小鼠的血糖浓度或/和渗透压,得到每组小鼠的血糖浓度或/和渗透压,以及血样品的血糖浓度变化率或/和渗透压变化率。
S5结果判断:根据小鼠灌酒后的血样品的血糖浓度变化率或/和渗透压变化率,判断小鼠的乙醇吸收代谢程度。
本发明实施例还提供一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,用于评价机体对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,以获得一种酒引起的乙醇代谢程度变化或者不同酒引起的乙醇代谢程度差异。
在实际应用中,快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法可以用于评价小鼠对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对剩余组的所有小鼠给予一种酒灌胃、禁水;
在灌酒后的不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠灌酒后的乙醇代谢程度随时间的变化情况。为了保证评价结果精度,将小鼠随机分成至少9组,在灌胃后的至少12小时内,每间隔至少0.5小时对一组小鼠取血。
在实际应用中,快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法还可以用于评价小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对不同组的小鼠给予不同酒灌胃、禁水;
在灌胃后的不同时间,分别同时对不同酒灌胃的各组的小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异。
本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法是从临床前药理研究方向出发,以动物实验(小鼠灌胃)为基础研究方法,利用血糖和/或渗透压与小鼠对乙醇吸收代谢程度的关系,判断小鼠对保健酒、白酒等酒中乙醇吸收代谢的影响,为保健酒、白酒等酒产品开发和优化升级提供技术支撑。该检测方法具有操作快速、简便,表达直观,检测灵敏度高、抗环境干扰能力强等特点,将该检测方法应用于保健酒和健康白酒等酒的开发中,可快速而有效的评价不同的保健酒及其基酒对乙醇的吸收代谢程度,从而进行不同产品合理饮用的对比分析,为保健酒、白酒基质酒等酒饮后乙醇吸收代谢研究开辟了一个新的方法。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种小鼠饮酒精后乙醇吸收代谢程度的检测方法,以35度酒精灌胃,其包括以下步骤:
(1)选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12-16小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
(2)将所有小鼠随机分成8组,每组10只,分别为:“酒精灌胃前0小时”组、“酒精灌胃后0.25小时”组、“酒精灌胃后0.5小时”组、“酒精灌胃后0.75小时”组、“酒精灌胃后1小时”组、“酒精灌胃后6小时”组、“酒精灌胃后10小时”、“酒精灌胃后12小时”。对“酒精灌胃前0小时”组的小鼠给予纯净水灌胃并禁水,其他组的小鼠给予35度酒精灌胃并禁水,做好灌胃时间记录,小鼠的灌胃体积为0.18mL/10g.bw。
(3)将“酒精灌胃”组的小鼠分别在对应的时间(酒精灌胃后0/0.25/0.5/0.75/1/6/10/12小时)摘眼球取血。
(4)将上述各组小鼠的血样本室温静置30min后,以3500r/min离心15min,取上层的血清样本冷冻保存;采用全自动生化分析仪检测血生化和血乙醇含量。
(5)采用统计学软件分析检测得到的各组小鼠的血生化和血乙醇含量数据,得到小鼠灌胃后不同时间的血糖和血乙醇含量的关系,实验结果见下表1。
表1小鼠酒精灌胃后不同时间血糖与血乙醇浓度的关系
注:“**”表示与“酒精灌胃前0小时”组比较,p<0.01;
从表1可以看出,与“酒精灌胃前0小时”组比较,0.25-12小时的灌胃酒精组血糖和血乙醇浓度均具有显著性差异,且灌胃酒精组的不同时间点的血糖与血乙醇浓度间的Pearson相关系数为0.929,说明血糖和血乙醇浓度具有极强的相关性。
由此可见:(1)在给予酒精灌胃后的不同时间内,各组小鼠的血糖均显著升高,即可推算出小鼠血乙醇浓度较高;(2)酒精灌胃后不同时间点,小鼠的血糖出现先升高后降低的现象,且与“酒精灌胃前0小时”组有统计学差异,表示在给予酒精灌胃后0小时至1小时,小鼠的血糖处于较高水平,在酒精灌胃后1小时左右达到峰值,即可推算出小鼠经酒精灌胃后血乙醇浓度明显升高,与小鼠经酒精灌胃后的血乙醇含量变化情况一致。因此,根据检测小鼠在给予酒精灌胃后一段时间内的血糖含量,可比分析小鼠在该段时间内血乙醇浓度的变化情况。
实施例2
本实施例提供一种小鼠饮不同酒精度产品后乙醇吸收代谢程度的检测方法,以不同酒度的产品灌胃,其包括以下步骤:
(1)选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
(2)将所有小鼠随机分成11组,每组10只,分别为:“产品灌胃前0小时”组、“15度产品灌胃后0.5小时”组、“15度产品灌胃后1小时”组、“15度产品灌胃后6小时”组、“15度产品灌胃后10小时”、“15度产品灌胃后12小时”、“50度产品灌胃后0.5小时”组、“50度产品灌胃后1小时”组、“50度产品灌胃后6小时”组、“50度产品灌胃后10小时”、“50度产品灌胃后12小时”。对“产品灌胃前0小时”组给予纯净水灌胃并禁水,对其他组的小鼠分别给予对应的受试物灌胃并禁水,做好灌胃时间记录,小鼠的灌胃体积分别为0.42mL/10g.bw和0.126mL/10g.bw。
(3)产品灌胃前0小时”组,灌胃后立即取血;将“15度产品灌胃后0.5小时”组和“50度产品灌胃后0.5小时”组的小鼠在灌胃0.5小时后摘眼球取血;将“15度产品灌胃后1小时”组和“50度产品灌胃后1小时”组的小鼠在灌胃1小时后摘眼球取血;将“15度产品灌胃后6小时”组和“50度产品灌胃后6小时”组的小鼠在灌胃6小时后摘眼球取血;将“15度产品灌胃后10小时”组“50度产品灌胃后10小时”组的小鼠在灌胃10小时后摘眼球取血;将“15度产品灌胃后12小时”组和“50度产品灌胃后12小时”组的小鼠在灌胃12小时后摘眼球取血。
(4)将上述各组小鼠的血样本室温静置30min后,以3500r/min离心15min,取上层的血清样本,冷冻保存;采用全自动生化分析仪检测血生化和血乙醇含量。
(5)采用统计学软件分析检测得到的各组小鼠的血生化和血乙醇含量数据,得到小鼠灌胃后不同时间的血生化和血乙醇含量的关系,实验结果见下表2
表2小鼠灌胃后不同时间血清渗透压与血乙醇浓度的关系
编号 | 小鼠数量(只) | 组别 | 血糖(mmol/L) | 乙醇浓度(mmol/L) |
1 | 10 | “产品灌胃前0小时”组 | 2.75±0.69 | 0 |
2 | 10 | “15度产品灌胃后0.5小时”组 | 8.03±1.03** | 118.43±6.70** |
3 | 10 | “15度产品灌胃后1小时”组 | 6.75±1.60** | 108.00±8.29** |
4 | 10 | “15度产品灌胃后6小时”组 | 4.85±0.33** | 62.00±5.04** |
5 | 10 | “15度产品灌胃后10小时”组 | 3.74±0.45* | 11.38±6.63** |
6 | 10 | “15度产品灌胃后12小时”组 | 4.58±0.89** | 3.00±1.66** |
7 | 10 | “50度产品灌胃后0.5小时”组 | 8.04±1.23** | 89.29±9.05** |
8 | 10 | “50度产品灌胃后1小时”组 | 9.28±1.72** | 91.38±12.83** |
9 | 10 | “50度产品灌胃后6小时”组 | 7.45±1.52** | 63.17±12.69** |
10 | 10 | “50度产品灌胃后10小时”组 | 3.85±0.44** | 18.50±9.91** |
11 | 10 | “50度产品灌胃后12小时”组 | 4.04±0.78** | 0.67±0.82** |
注:“*”表示与“产品灌胃前0小时”组比较,p<0.05;“**”表示与“产品灌胃前0小时”组比较,p<0.01。
从表2可以看出,与“产品灌胃前0小时”组比较,灌胃15度产品和50度产品在0.5-12小时间的血糖和血乙醇浓度均具有显著性差异,且灌胃15度产品和50度产品的不同时间点的血糖与血乙醇浓度间的Pearson相关系数为0.922,说明血糖和血乙醇浓度具有极强的相关性。
由此可见:(1)在给予含15度和50度酒精的产品灌胃后的不同时间内,各组小鼠的血糖均显著升高,即可推算出小鼠血乙醇浓度较高;(2)15度和50度产品灌胃后不同时间点,小鼠的血糖出现先升高后降低的现象,且与“产品灌胃前0小时”组有统计学差异,表示在给予15度和50度产品灌胃后0.5小时至12小时,小鼠的血糖处于较高水平,1小时达到峰值,即可推算出小鼠经15度和50度产品灌胃后血乙醇浓度明显升高,与小鼠15度和50度产品灌胃后的血糖变化情况一致。因此,根据检测小鼠在给予15度和50度产品灌胃后一段时间内的血糖,可比较分析小鼠在该段时间内血乙醇浓度的变化情况,从而为不同产品合理饮用提供数据支撑。
实施例3
本实施例提供一种小鼠饮酒精后乙醇代谢程度的检测方法,其包括以下步骤:
(1)选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12-16小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
(2)将所有小鼠随机分成9组,每组10只,分别为:“水灌胃后1小时”组、“酒精灌胃后1小时”组、“酒精灌胃后2小时”组、“酒精灌胃后3小时”、“酒精灌胃后4小时”、“酒精灌胃后6小时”组、“酒精灌胃后8小时”、“酒精灌胃后10小时”及“酒精灌胃后12小时”组。对“水灌胃后1小时”组的小鼠给予纯净水灌胃并禁水,其他组的小鼠给予酒精灌胃并禁水,做好灌胃时间记录,小鼠的灌胃体积为0.18mL/10g.bw。
(3)将“水灌胃”组和“酒精灌胃”组的小鼠分别在对应的时间(1/2/3/4/5/6/8/10/12小时)摘眼球取血。
(4)将上述各组小鼠的血样本室温静置30min后,以3500r/min离心15min,取上层的血清样本分2管冷冻保存;一部分样品采用全自动生化分析仪检测血清样品的血乙醇浓度,另外一部分样品采用冰点渗透压仪测量血清样本的渗透压。
(5)采用统计学软件分析检测得到的各组小鼠的渗透压数据,得到小鼠灌胃后不同时间的血清渗透压和血乙醇浓度的关系,实验结果见下表1。
表3小鼠灌胃后不同时间血清渗透压与血乙醇浓度的关系
注:“**”表示与“水灌胃后1小时”组比较,p<0.01;“*”表示与“水灌胃后1小时”组比较,p<0.05。
从表3可以看出,与“水灌胃后1小时”组比较,1-8小时的灌胃酒精组血清渗透压和血乙醇浓度均具有显著性差异,且灌胃酒精组的不同时间点的血清渗透压值与血乙醇浓度间的Pearson相关系数为0.989,说明血清渗透压和血乙醇浓度具有极强的相关性。
由此可见:(1)在给予酒精灌胃后的不同时间内,各组小鼠的血清渗透压均显著升高,即可推算出小鼠血乙醇浓度较高;(2)酒精灌胃后不同时间点,小鼠的血清渗透压出现先升高后降低的现象,且与“水灌胃后1小时”组有统计学差异,表示在给予酒精灌胃后1小时至8小时,小鼠的血清渗透压处于较高水平,在酒精灌胃后1-2小时达到峰值,即可推算出小鼠经酒精灌胃后血乙醇浓度明显升高,与小鼠经酒精灌胃后的血清渗透压变化情况一致。因此,根据检测小鼠在给予酒精灌胃后一段时间内的血清渗透压值,可比较分析小鼠在该段时间内血乙醇浓度的变化情况。
实施例4
本实施例提供一种小鼠饮酒精后乙醇代谢程度的检测方法,以某保健酒为例,其包括以下步骤:
(1)选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
(2)将所有小鼠随机分成9组,每组10只,分别为:“水灌胃后1小时”组、“某保健酒灌胃后1小时”组、“某保健酒灌胃后2小时”组、“某保健酒灌胃后3小时”组、“某保健酒灌胃后4小时”组、“某保健酒灌胃后6小时”组、“某保健酒灌胃后8小时”、“某保健酒灌胃后10小时”组及“某保健酒灌胃后12小时”组。对“水灌胃后1小时”组给予纯净水灌胃并禁水,对其他组的小鼠给予某保健酒灌胃并禁水,做好灌胃时间记录,小鼠的灌胃体积为0.18mL/10g.bw。
(3)将“水灌胃后1小时”组和“某保健酒灌胃后1小时”组的小鼠在灌胃1小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后2小时”组的小鼠在灌胃2小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后3小时”组的小鼠在灌胃3小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后4小时”组的小鼠在灌胃4小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后6小时”组的小鼠在灌胃6小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后8小时”组的小鼠在灌胃8小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后10小时”组的小鼠在灌胃10小时后摘眼球取血,将“某保健酒灌胃后12小时”组的小鼠在灌胃12小时后摘眼球取血。
(4)将上述各组小鼠的血样本室温静置30min后,以3500r/min离心15min,取上层的血清样本分2管冷冻保存;一部分样品采用全自动生化分析仪检测血清样品的血乙醇浓度,另外一部分样品采用冰点渗透压仪测量血清样本的渗透压。
(5)采用统计学软件分析检测得到的各组小鼠的渗透压数据,得到小鼠灌胃后不同时间的血清渗透压和血乙醇浓度的关系,实验结果见下表2。
表4小鼠灌胃后不同时间血清渗透压与血乙醇浓度的关系
编号 | 小鼠数量(只) | 组别 | 渗透压均值(mOsm) | 乙醇浓度(mmol/L) |
1 | 10 | “水灌胃后1小时”组 | 325.75±5.439 | 5.42±2.527 |
2 | 10 | “某保健酒灌胃后1小时”组 | 494.14±7.221** | 147.14±1.852** |
3 | 10 | “某保健酒灌胃后2小时”组 | 473.57±15.778** | 135.53±8.944** |
4 | 10 | “某保健酒灌胃后3小时”组 | 445.25±15.572** | 115.70±6.305** |
5 | 10 | “某保健酒灌胃后4小时”组 | 460.25±12.606** | 106.87±15.476** |
6 | 10 | “某保健酒灌胃后6小时”组 | 403.14±12.915** | 68.94±10.653** |
7 | 10 | “某保健酒灌胃后8小时”组 | 370.13±13.346* | 43.33±13.466** |
8 | 10 | “某保健酒灌胃后10小时”组 | 374.00±31.572 | 28.14±17.766** |
9 | 10 | “某保健酒灌胃后12小时”组 | 334.00±15.432 | 8±2.56* |
注:“**”表示与“水灌胃后1小时”组比较,p<0.01;“*”表示与“水灌胃后1小时”组比较,p<0.05。
从表4可以看出,与“水灌胃后1小时”组比较,灌胃某保健酒组1-8小时的血清渗透压和1-12小时的血乙醇浓度均具有显著性差异,且灌胃某保健酒组的不同时间点的血清渗透压值与血乙醇浓度间的Pearson相关系数为0.919,说明血清渗透压和血乙醇浓度具有极强的相关性。
由此可见:(1)在给予某保健酒灌胃后的不同时间内,各组小鼠的血清渗透压均显著升高,即可推算出小鼠血乙醇浓度较高;(2)某保健酒灌胃后不同时间点,小鼠的血清渗透压出现先升高后降低的现象,且与“水灌胃后1小时”组有统计学差异,表示在给予某保健酒灌胃后1小时至12小时,小鼠的血清渗透压处于较高水平,在某保健酒灌胃后1小时达到峰值,即可推算出小鼠经某保健酒灌胃后血乙醇浓度明显升高,与小鼠经酒精灌胃后的血清渗透压变化情况一致。因此,根据检测小鼠在给予某保健酒灌胃后一段时间内的血清渗透压值,可比较分析小鼠在该段时间内血乙醇浓度的变化情况,从而为某保健酒相关产品的品质升级提供数据支撑。
综上所述,本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法可快速而有效的评价饮酒后的乙醇吸收代谢程度;本发明实施例的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用是用于检测对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,以获得酒引起的乙醇吸收代谢程度或者不同酒引起的乙醇吸收代谢程度差异。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
Claims (10)
1.一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,其包括以下步骤:分别测量机体在饮酒后不同时间的血样本的血糖浓度或/和渗透压,根据血糖浓度或/和渗透压,判断血乙醇浓度,根据血糖浓度的变化率或/和渗透压的变化率,判断乙醇吸收代谢程度。
2.根据权利要求1所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,在血糖浓度升高或/和渗透压升高的过程中,血糖浓度的增大率或/和渗透压的增大率越大,表示机体对乙醇的吸收程度越高;在血糖浓度降低或/和渗透压降低的过程中,血糖浓度的降低率或/和渗透压的降低率越大,表示机体对乙醇的代谢程度越高。
3.根据权利要求1所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,用于快速评价小鼠的乙醇吸收代谢程度,具体包括以下步骤:
将小鼠随机分成若干组,对所有小鼠灌酒、禁水;
在不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
根据小鼠灌酒后的血样品的血糖浓度变化率或/和渗透压变化率,判断小鼠的乙醇吸收代谢程度。
4.根据权利要求3所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,所述小鼠选用适应性喂养良好的小鼠,于灌胃前12-16小时,对所有小鼠禁食、自由饮水。
5.根据权利要求3所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,所述小鼠的灌酒体积为0.10-0.30mL/10g.bw。
6.根据权利要求3所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法,其特征在于,测量血样本的渗透压的方法是:对小鼠摘眼球取血后,先将血样本静置25-40min后,以3000-4000r/min离心10-15min,取上层清液,再测量所述上层清液的血糖浓度或/和渗透压。
7.一种快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,其特征在于,用于评价机体对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化或者对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异。
8.根据权利要求7所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,其特征在于,用于评价小鼠对一种酒的乙醇吸收代谢程度变化,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对剩余组的所有小鼠给予一种酒灌胃、禁水;
在灌酒后的不同时间,分别对各组的小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠灌酒后的乙醇吸收代谢程度随时间的变化情况。
9.根据权利要求8所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,其特征在于,将小鼠随机分成至少9组,在灌胃后的至少12小时内,每间隔至少0.5小时对一组小鼠取血。
10.根据权利要求7所述的快速评价乙醇吸收代谢程度的检测方法的应用,其特征在于,用于评价小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异,具体检测方法如下:
将小鼠随机分成若干组,对其中一组的小鼠摘眼球取血,测量该组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压;
对不同组的小鼠给予不同酒灌胃、禁水;
在灌胃后的不同时间,分别对不同酒灌胃的各组小鼠摘眼球取血,并测量各组小鼠的血样本的血糖浓度或/和渗透压,判断小鼠对不同酒的乙醇吸收代谢程度差异。
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