CN108902184A - 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：该微生物杀虫剂是由绿僵菌菌株YYZ‑17孢子悬浮液、绿僵菌菌株Qin‑29孢子悬浮液、十二烷苯磺酸钙、农用链霉素、羧甲基纤维素钠和水配制而成。本发明利用昆虫病原真菌配制制剂，能够有效感染成虫和虫道内幼虫，达到高效防治钻蛀性甲虫的效果。本发明的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂属于生物制剂，对环境无污染、无农药残留，是防治钻蛀性甲虫的新型高效杀虫剂。
Description
技术领域
本发明属于微生物杀虫剂领域，涉及一种钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法。应用致病性强的微生物喷施树干与枝条，感染和杀死成虫、幼虫与卵，阻断害虫繁殖过程，有效控制钻蛀性害虫的危害。
背景技术
钻蛀性害虫对林木的危害非常大，例如天牛、吉丁虫、木蠹蛾等害虫，由于这些害虫危害部位在树木的木质部，属于隐蔽性害虫。用化学农药防治钻蛀性害虫，药物无法有效进入树体木质部，在树体表面的药物经过雨淋、日晒后浓度降低，也达不到杀虫效果。长期以来，钻蛀性害虫防治是一个难题，例如，国家三北防护林就被光肩星天牛所毁。目前针对钻蛀性害虫多采用化学农药防治，浓度过大容易对树体造成伤害、浓度过小达不到防治效果，对于果树、城市绿化树木还存在严重的农药残留和环境污染问题。应用微生物制剂防治钻蛀性害虫，微生物在树体表面可以有效感染成虫和卵；由于害虫蛀孔通常湿润并开口树体表面，微生物通过害虫在树干上的蛀孔，可以传播到虫道中感染木质部的幼虫，从而杀死幼虫。本发明采用高致病力菌株和保湿增效物质配制，形成的杀虫剂组合能够有效感染暴露在树体外的成虫和卵，也可以感染虫道中的幼虫，从而阻断害虫繁殖过程，达到持续防效。由于该发明利用自然界中存在的微生物作为主要成分，不存在农药残留和污染问题，特别适合于果树、城市园林和绿地树木的钻蛀性害虫防治。
发明内容
本发明的目的是提供一种钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，适合于果树、城市园林和绿地树木的钻蛀性害虫防治的，以便有效控制钻蛀性害虫的危害，克服传统化学农药防治无法有效杀死钻蛀性甲虫的缺陷。
本发明的技术方案是：钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：钻蛀性甲虫微生物杀虫剂包括绿僵菌菌株YYZ-17孢子、绿僵菌菌株Qin-29孢子、十二烷苯磺酸钙、农用链霉素、 羧甲基纤维素钠；配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂按下述步骤配制：
1）用蒸馏水溶解十二烷苯磺酸钙，作为母液备用；
2）用无菌水溶解农用链霉素，作为母液备用；
3）用蒸馏水溶解羧甲基纤维素钠，作为母液备用；
4）用无菌水配制绿僵菌菌株YYZ-17孢子形成悬浮液母液，绿僵菌菌株YYZ-17悬浮液母液的孢子含量1╳106-20╳106个/L；
5）用无菌水配制绿僵菌菌株Qin-29孢子形成悬浮液母液，绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液孢子含量1╳106-20╳106个/L；
6）依次将上述配方量的绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液、十二烷苯磺酸钙母液混合均匀，然后再依次添加配方量的农用链霉素母液、 羧甲基纤维素钠母液和水，充分混合均匀装瓶即可。
所述的十二烷苯磺酸钙的母液，其中十二烷苯磺酸钙的浓度在1-1000mg/L 之间。
所述的农用链霉素母液，其中农用链霉素的浓度为2-200mg/mL之间。
所述的羧甲基纤维素钠母液，其中其羧甲基纤维素钠的浓度是5-5000mg/L之间。
所述的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂在钻蛀性害虫危害的树体枝干部位喷施，在害虫成虫期和产卵期施用，每间隔1周喷施1次，一共喷施3次。
所述的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂开瓶前用力震荡摇匀，开启后用自来水稀释1000倍施用。
本发明的优点是：（1）无污染高效杀虫：本发明利用高效杀虫微生物组合增效剂，能够有效感染并杀死成虫及幼虫，由于杀虫活性成分是自然界中存在的微生物，不造成农药残留和环境污染。（2）施用方便：采用常规喷雾即可。
具体实施方式
实施例1
配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂：
取绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液各0.1mL，加入无菌水100mL，再加入十二烷苯磺酸钙母液0.1mL，充分混匀。在混合液中加入农用链霉素母液40µL，再加入羧甲基纤维素钠母液0.1mL，再补水至1L。充分混合均匀装瓶即可。
（终浓度分别为：绿僵菌菌株YYZ-17孢子含量1╳106个/L、绿僵菌菌株Qin-29孢子含量5╳106个/L、十二烷苯磺酸钙含量1 mg/L、农用链霉素含量2 mg/L、羧甲基纤维素钠5mg/L）。
实施例2
配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂：
取绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液各0.5mL，加入无菌水100mL，再加入十二烷苯磺酸钙母液0.5mL，充分混匀。在混合液中加入农用链霉素母液200µL，再加入羧甲基纤维素钠母液0.5mL，再补水至1L。充分混合均匀装瓶即可。
（终浓度分别为：绿僵菌菌株YYZ-17孢子含量5╳106个/L、绿僵菌菌株Qin-29孢子含量5╳106个/L、十二烷苯磺酸钙含量5 mg/L、农用链霉素含量10 mg/L、羧甲基纤维素钠25 mg/L）。
实施例3
配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂：
取绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液各1mL，加入无菌水100mL，再加入十二烷苯磺酸钙母液1mL，充分混匀。在混合液中加入农用链霉素母液0.4mL，再加入羧甲基纤维素钠母液1mL，再补水至1L。充分混合均匀装瓶即可。
（终浓度分别为：绿僵菌菌株YYZ-17孢子含量1╳107个/L、绿僵菌菌株Qin-29孢子含量1╳107个/L、十二烷苯磺酸钙含量10mg/L、农用链霉素含量20 mg/L、羧甲基纤维素钠50 mg/L）。
实施例4
配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂：
取绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液各2mL，加入无菌水100mL，再加入十二烷苯磺酸钙母液2mL，充分混匀。在混合液中加入农用链霉素母液0.8mL，再加入羧甲基纤维素钠母液2mL，再补水至1L。充分混合均匀装瓶即可。
（终浓度分别为：绿僵菌菌株YYZ-17孢子含量2╳107个/L、绿僵菌菌株Qin-29孢子含量2╳107个/L、十二烷苯磺酸钙含量20mg/L、农用链霉素含量40 mg/L、羧甲基纤维素钠100 mg/L）。
上述实施例中的原料，绿僵菌菌株为本研究室自行分离培养获得外，其它材料均可以直接从市场购得。
杀虫活性测定
本发明钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的实施例1-4，以发生钻蛀性害虫光肩星天牛的杨树周边健康树木，及发生苹小吉丁虫的野苹果树周边健康树木为材料，自来水稀释100倍后在树枝、干部位喷施，在害虫成虫期和产卵期施用，每间隔1周喷施1次，一共喷施3次。最后一次施药完成3个月后，统计树体上发生蛀孔数量，并剪取受害枝条、剖开虫道检查受感染死亡幼虫数量，以确定防治效果。
（1）本发明钻蛀性甲虫微生物杀虫剂工作液配制：
供试药剂：钻蛀性甲虫微生物杀虫剂
用自来水稀释100倍，按以下处理，每组10棵树1个重复，每种处理3个重复：
a) 对照组：在傍晚只喷施等量的自来水。
b) 防治组：在傍晚喷施稀释过的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂，均匀喷施树干和枝条表面即可。（防治组为4组，依次分别为实施例1－4的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂）。
c) 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂施用3月后，统计树体上发生蛀孔数量，剪取受害枝条、剖开虫道检查死亡幼虫数量。
（2）本发明钻蛀性甲虫微生物杀虫剂防治效果：
1.）对杨树天牛的控制作用
钻蛀性甲虫微生物杀虫剂施用3月后，统计树体上发生蛀孔数量，剪取受害枝条、检查树体中钻蛀性甲虫幼虫数量和致死率，结果如表1-2。可以看出，实施例1－4都对天牛产生了很好的控制作用，显著减少了被害木周边健康树木上新发生蛀孔的数量，相比自来水对照，降低了10倍。同时，对天牛幼虫产生了很强的杀虫效果，田间致死率均在60%以上，最高达91.4%。
表1 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂对杨树新蛀孔数量的影响
| 处理方式 | 平均每棵树蛀孔数 / 个 |
| 实施例１钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 19.1 |
| 实施例2钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 11 |
| 实施例３钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 8.2 |
| 实施例4钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 3.3 |
| 对照(自来水) | 33.2 |
表2 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂对杨树虫道内幼虫的防治效果
| 处理方式 | 幼虫感染发病死亡率 / % |
| 实施例１钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 62.1 |
| 实施例2钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 71.2 |
| 实施例３钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 85.9 |
| 实施例4钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 91.4 |
| 对照(自来水) | 0 |
2.）对苹小吉丁虫的控制作用
钻蛀性甲虫微生物杀虫剂施用3月后，统计苹果树上发生蛀孔数量，剪取受害枝条、检查树体中钻蛀性甲虫幼虫数量和致死率，结果如表3-4。可以看出，实施例1－4都对苹小吉丁虫产生了很好的控制作用，显著减少了被害木周边健康树木上新发生蛀孔的数量，相比自来水对照，降低了10倍以上。同时，对苹小吉丁虫幼虫产生了很强的杀虫效果，田间致死率均在63%以上，最高达93.6%。
表3 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂对苹果树新蛀孔数量的影响
| 处理方式 | 平均每棵树蛀孔数 / 个 |
| 实施例１钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 11.9 |
| 实施例2钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 8.6 |
| 实施例３钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 6.9 |
| 实施例4钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 2.1 |
| 对照(自来水) | 23.3 |
表4 钻蛀性甲虫微生物杀虫剂对苹果树虫道内幼虫的防治效果
| 处理方式 | 幼虫感染发病死亡率 / % |
| 实施例１钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 63.9 |
| 实施例2钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 69.3 |
| 实施例３钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 81.5 |
| 实施例4钻蛀性甲虫微生物杀虫剂 | 93.6 |
| 对照(自来水) | 0 |
本发明钻蛀性甲虫微生物杀虫剂，在钻蛀性害虫危害的树体枝干部位喷施，在害虫成虫期和产卵期施用，每间隔1周喷施1次，一共喷施3次。在使用开瓶前用力震荡摇匀，开启后用自来水稀释100倍施用。
本发明的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂，在田间防治钻蛀性甲虫效果显著。因为传统的化学农药防治钻蛀性甲虫只能杀死飞出树体的成虫，而无法杀死树体内部的幼虫，并且极易造成严重的农药残留和环境污染。本发明的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂，不仅能够有效感染树体虫道内的幼虫，同时可以显著减少环境污染，无农药残留。对实现蛀干害虫的高效、无害化防治具有非常重要的现实意义。
注：真菌孢子不能溶解，只能配制为悬浮液，孢子悬浮液母液指高浓度的真菌孢子悬浮液。
Claims (4)
1.钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：钻蛀性甲虫微生物杀虫剂包括绿僵菌菌株YYZ-17孢子、绿僵菌菌株Qin-29孢子、十二烷苯磺酸钙、农用链霉素、 羧甲基纤维素钠；配制1L的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂按下述步骤配制：
1）用蒸馏水溶解十二烷苯磺酸钙，作为母液备用；
2）用无菌水溶解农用链霉素，作为母液备用；
3）用蒸馏水溶解羧甲基纤维素钠，作为母液备用；
4）用无菌水配制绿僵菌菌株YYZ-17孢子形成悬浮液母液，绿僵菌菌株YYZ-17悬浮液母液的孢子含量1╳106-20╳106个/L；
5）用无菌水配制绿僵菌菌株Qin-29孢子形成悬浮液母液，绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液孢子含量1╳106-20╳106个/L；
6）依次将上述配方量的绿僵菌菌株YYZ-17孢子悬浮液母液、绿僵菌菌株Qin-29孢子悬浮液母液、十二烷苯磺酸钙母液混合均匀，然后再依次添加配方量的农用链霉素母液、 羧甲基纤维素钠母液和水，充分混合均匀装瓶即可。
2.根据权利要求1所述的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：所述的十二烷苯磺酸钙的母液，其中十二烷苯磺酸钙的浓度在1-1000mg/L 之间。
3.根据权利要求1所述的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：所述的农用链霉素母液，其中农用链霉素的浓度为2-200mg/mL之间。
4.根据权利要求1所述的钻蛀性甲虫微生物杀虫剂的制备方法，其特征是：所述的羧甲基纤维素钠母液，其中其羧甲基纤维素钠的浓度是5-5000mg/L之间。
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