CN108893542A - 一种运动潜质与保护基因检测试剂盒 - Google Patents

一种运动潜质与保护基因检测试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，该试剂盒包括运动潜质基因芯片和运动保护基因芯片，所述运动潜质基因芯片包含探针组A和多重PCR引物组1；所述运动保护基因芯片包含探针组B和多重PCR引物组2；所述多重PCR引物组1包括引物1‑8，所述探针组A包括探针1‑8，所述多重PCR引物组2包括引物9‑16，所述探针组B包括探针9‑16。该试剂盒采用基因芯片进行检测，能够快速对个体的运动潜质和运动易损部位保护能力进行检测，结合调查问卷和实际观察，检测结果灵敏度好，准确率高，实用性强，而且采样方便，利于推广使用。

Description

一种运动潜质与保护基因检测试剂盒
技术领域
本发明涉及基因检测技术领域，特别是一种运动潜质与保护基因检测试剂盒。
背景技术
基因检测是指通过血液、口腔黏膜细胞或其他组织细胞对基因组DNA进行检测的技术。提取细胞中的DNA并扩增相关基因后，通过特定仪器设备对细胞中的基因信息进行检测，分析它所含有的基因型信息，使人们从基因层面了解自身与他人的不同，从而利用针对性的手段来预防或改善相关基因可能会造成的影响。通过基因检测，可以明确个体的SNP分型，解读这些SNP位点，就可以判断该个体的遗传和健康状况。
基因影响了个体的运动特质和易损部位保护能力，不同的个体其耐力潜质和爆发力潜质有所差异，同时每个人对运动易损部位的保护能力也有所不同。
然而目前尚未发现一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，能够快速对个体的运动潜质和运动易损部位保护能力进行检测，有利于人们根据自己的运动潜能进行专业的训练，同时利于人们提前了解自身易受损伤的部位，针对性进行防护，在很大程度上避免发生运动损伤。
发明内容
为了克服现有技术的上述缺点，本发明的目的是提供一种灵敏度好、准确率高，实用性强，能够快速对个体的运动潜质和运动易损部位保护能力进行检测的运动潜质与保护基因检测试剂盒。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，该试剂盒包括运动潜质基因芯片和运动保护基因芯片，所述运动潜质基因芯片包含探针组A和多重PCR引物组1；所述运动保护基因芯片包含探针组B和多重PCR引物组2；
所述多重PCR引物组1用于对含HFE基因的c.187C>G位点、KCNJ11基因的c.67A>G位点、ACTN3基因的c.1729C>T位点和H1F1A基因的c.1744C>T位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组A用于对HFE基因的c.187C>G位点基因型、KCNJ11基因的c.67A>G位点基因型、ACTN3基因的c.1729C>T位点基因型和H1F1A基因的c.1744C>T位点基因型进行特异性检测；
所述多重PCR引物组2用于对含COL5A1基因的c.*267C>T位点、IL1B基因的c.-598T>C位点、FASLG基因的c.-844C>T位点和FAS基因的c.-1378G>A位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组B用于对COL5A1基因的c.*267C>T位点基因型、IL1B基因的c.-598T>C位点基因型、FASLG基因的c.-844C>T位点基因型和FAS基因的c.-1378G>A位点基因型进行特异性检测。
作为本发明的进一步改进：所述多重PCR引物组1包括引物1、引物2、引物3、引物4、引物5、引物6、引物7和引物8，上述引物的序列如下：
(1)所述引物1：5’-CTTGTTTGAAGCTTTGGGCT-3’；
(2)所述引物2：5’-GAAATTCTACTGGAAACCCA-3’；
(3)所述引物3：5’-GTGGGCCACGTTGCAGTTGC-3’；
(4)所述引物4：5’-TGTCCCGCAAGGGCATCATC-3’；
(5)所述引物5：5’-CCTGCCTGTCGTCCCCAGAG-3’；
(6)所述引物6：5’-TGGAGCAGGGCCGCAGCCCA-3’；
(7)所述引物7：5’-GATTTAGACTTGGAGATGTT-3’；
(8)所述引物8：5’-GTCTGCTGGAATACTGTAAC-3’。
作为本发明的进一步改进：所述探针组A包括探针1、探针2、探针3、探针4、探针5、探针6、探针7和探针8，上述探针的序列如下：
(1)所述探针1：5’-GCCATCATCCACCCCCTCA-3’；
(2)所述探针2：5’-GCCATCATCGACCCCCTCA-3’；
(3)所述探针3：5’-ACCTGGGCTTGGCAGGGTC-3’；
(4)所述探针4：5’-ACCTGGGCTCGGCAGGGTC-3’；
(5)所述探针5：5’-GAGGCTGACCGAGAGCGAG-3’；
(6)所述探针6：5’-GAGGCTGACTGAGAGCGAG-3’；
(7)所述探针7：5’-CAGTTGTCACCATTAGAAA-3’；
(8)所述探针8：5’-CAGTTGTCATCATTAGAAA-3’。
作为本发明的进一步改进：所述多重PCR引物组2包括引物9、引物10、引物11、引物12、引物13、引物14、引物15和引物16，上述引物的序列如下：
(1)所述引物9：5’-CACCTGGAGCTGAATCACAT-3’；
(2)所述引物10：5-AGACCTATTCACGAACAGGA-3’；
(3)所述引物11：5’-GAAGGGCCAATAGCCCTCCC-3’；
(4)所述引物12：5’-GTATGTTCTCTGCCCCAGCC-3’；
(5)所述引物13：5’-CTGGGCAAACAATGAAAATG-3’；
(6)所述引物14：5’-CGATCACCATAATTTACAGG-3’；
(7)所述引物15：5’-CATATACCATCCTCCTTATC-3’；
(8)所述引物16：5’-CACCAGTCTTGTAGGTGTTG-3’。
作为本发明的进一步改进：所述探针组B包括探针9、探针10、探针11、探针12、探针13、探针14、探针15和探针16，上述探针的序列如下：
(1)所述探针9：5’-CCACACCCACGCGCCCCGG-3’；
(2)所述探针10：5’-CCACACCCATGCGCCCCGG-3’；
(3)所述探针11：5’-CTCTGCCTCAGGAGCTCTC-3’；
(4)所述探针12：5’-CTCTGCCTCGGGAGCTCTC-3’；
(5)所述探针13：5’-AAAACATTGCGAAATACAA-3’；
(6)所述探针14：5’-AAAACATTGTGAAATACAA-3’；
(7)所述探针15：5’-GGCTGGCACGCCCAGGGTC-3’；
(8)所述探针16：5’-GGCTGGCACACCCAGGGTC-3’。
作为本发明的进一步改进：所述探针组A和探针组B均包括多种探针，每一种探针均固定在固相载体上。
作为本发明的进一步改进：所述固相载体为硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯中的至少一种。
作为本发明的进一步改进：该试剂盒还包括杂交液和洗脱液。
作为本发明的进一步改进：所述杂交液包含质量浓度百分比为50％的甲酰胺和质量浓度百分比为0.2％的十二烷基硫酸钠。
作为本发明的进一步改进：所述洗脱液为无水乙醇。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明的试剂盒能够快速对个体的运动潜质和运动易损部位保护能力进行检测，有利于人们根据自己的运动潜能进行专业的训练，同时利于人们提前了解自身易受损伤的部位，针对性进行防护，在很大程度上避免发生运动损伤。本发明的试剂盒采用基因芯片进行检测，结合调查问卷和实际观察，检测结果灵敏度好，准确率高，实用性强，而且采样方便，利于推广使用。
具体实施方式
现结合实施例对本发明进一步说明：
一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，该试剂盒包括运动潜质基因芯片和运动保护基因芯片，所述运动潜质基因芯片包含探针组A和多重PCR引物组1；所述运动保护基因芯片包含探针组B和多重PCR引物组2；
所述多重PCR引物组1用于对含HFE基因的c.187C>G位点、KCNJ11基因的c.67A>G位点、ACTN3基因的c.1729C>T位点和H1F1A基因的c.1744C>T位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组A用于对HFE基因的c.187C>G位点基因型、KCNJ11基因的c.67A>G位点基因型、ACTN3基因的c.1729C>T位点基因型和H1F1A基因的c.1744C>T位点基因型进行特异性检测；
所述多重PCR引物组2用于对含COL5A1基因的c.*267C>T位点、IL1B基因的c.-598T>C位点、FASLG基因的c.-844C>T位点和FAS基因的c.-1378G>A位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组B用于对COL5A1基因的c.*267C>T位点基因型、IL1B基因的c.-598T>C位点基因型、FASLG基因的c.-844C>T位点基因型和FAS基因的c.-1378G>A位点基因型进行特异性检测。
所述多重PCR引物组1包括引物1、引物2、引物3、引物4、引物5、引物6、引物7和引物8，上述引物的序列如下：
(1)所述引物1：5’-CTTGTTTGAAGCTTTGGGCT-3’；
(2)所述引物2：5’-GAAATTCTACTGGAAACCCA-3’；
(3)所述引物3：5’-GTGGGCCACGTTGCAGTTGC-3’；
(4)所述引物4：5’-TGTCCCGCAAGGGCATCATC-3’；
(5)所述引物5：5’-CCTGCCTGTCGTCCCCAGAG-3’；
(6)所述引物6：5’-TGGAGCAGGGCCGCAGCCCA-3’；
(7)所述引物7：5’-GATTTAGACTTGGAGATGTT-3’；
(8)所述引物8：5’-GTCTGCTGGAATACTGTAAC-3’。
所述探针组A包括探针1、探针2、探针3、探针4、探针5、探针6、探针7和探针8，上述探针的序列如下：
(1)所述探针1：5’-GCCATCATCCACCCCCTCA-3’；
(2)所述探针2：5’-GCCATCATCGACCCCCTCA-3’；
(3)所述探针3：5’-ACCTGGGCTTGGCAGGGTC-3’；
(4)所述探针4：5’-ACCTGGGCTCGGCAGGGTC-3’；
(5)所述探针5：5’-GAGGCTGACCGAGAGCGAG-3’；
(6)所述探针6：5’-GAGGCTGACTGAGAGCGAG-3’；
(7)所述探针7：5’-CAGTTGTCACCATTAGAAA-3’；
(8)所述探针8：5’-CAGTTGTCATCATTAGAAA-3’。
所述多重PCR引物组2包括引物9、引物10、引物11、引物12、引物13、引物14、引物15和引物16，上述引物的序列如下：
(1)所述引物9：5’-CACCTGGAGCTGAATCACAT-3’；
(2)所述引物10：5-AGACCTATTCACGAACAGGA-3’；
(3)所述引物11：5’-GAAGGGCCAATAGCCCTCCC-3’；
(4)所述引物12：5’-GTATGTTCTCTGCCCCAGCC-3’；
(5)所述引物13：5’-CTGGGCAAACAATGAAAATG-3’；
(6)所述引物14：5’-CGATCACCATAATTTACAGG-3’；
(7)所述引物15：5’-CATATACCATCCTCCTTATC-3’；
(8)所述引物16：5’-CACCAGTCTTGTAGGTGTTG-3’。
所述探针组B包括探针9、探针10、探针11、探针12、探针13、探针14、探针15和探针16，上述探针的序列如下：
(1)所述探针9：5’-CCACACCCACGCGCCCCGG-3’；
(2)所述探针10：5’-CCACACCCATGCGCCCCGG-3’；
(3)所述探针11：5’-CTCTGCCTCAGGAGCTCTC-3’；
(4)所述探针12：5’-CTCTGCCTCGGGAGCTCTC-3’；
(5)所述探针13：5’-AAAACATTGCGAAATACAA-3’；
(6)所述探针14：5’-AAAACATTGTGAAATACAA-3’；
(7)所述探针15：5’-GGCTGGCACGCCCAGGGTC-3’；
(8)所述探针16：5’-GGCTGGCACACCCAGGGTC-3’。
所述探针组A和探针组B均包括多种探针，每一种探针均固定在固相载体上。所述固相载体为硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯中的至少一种。
该试剂盒还包括杂交液和洗脱液。所述杂交液包含质量浓度百分比为50％的甲酰胺和质量浓度百分比为0.2％的十二烷基硫酸钠。所述洗脱液为无水乙醇。
实施例1：运动潜质基因芯片包含探针组A，能够用于检测人HFE基因的c.187C>G位点基因型、KCNJ11基因的c.67A>G位点基因型、ACTN3基因的c.1729C>T位点基因型和H1F1A基因的c.1744C>T位点基因型。在受检者中，拥有HFE基因c.187C>G位点GG基因型或KCNJ11基因c.67A>G位点GG基因型的受检者具有较强的耐力潜能，这些受检者经过实际观察与调查问卷发现确实耐力表现较好；拥有HFE基因c.187C>G位点GC基因型或KCNJ11基因c.67A>G位点AG基因型的受检者具有一般的耐力潜能，实际观察发现这类受检者的耐力水平一般；拥有HFE基因c.187C>G位点CC基因型或KCNJ11基因c.67A>G位点AA基因型的受检者具有较弱的耐力潜能，实际调查得知，这类受检者很少有人在耐力运动方面表现特别突出。
实施例2：在受检者中，拥有ACTN3基因c.1729C>T位点CC基因型或H1F1A基因c.1744C>T位点TT基因型的受检者具有较强的爆发力潜能，这些受检者经过实际观察与调查问卷发现确实爆发力表现较好；拥有ACTN3基因c.1729C>T位点CT基因型或H1F1A基因c.1744C>T位点CT基因型的受检者具有一般的爆发力潜能，实际观察发现这类受检者的爆发力水平一般；拥有ACTN3基因c.1729C>T位点TT基因型或H1F1A基因c.1744C>T位点CC基因型的受检者具有较弱的爆发力潜能，实际调查得知，这类受检者很少有人在爆发力运动方面表现特别突出。
实施例3：运动保护基因芯片包含探针组B，能够用于检测人COL5A1基因的c.*267C>T位点基因型、IL1B基因的c.-598T>C位点基因型、FASLG基因的c.-844C>T位点基因型和FAS基因的c.-1378G>A位点基因型。在受检者中，拥有COL5A1基因c.*267C>T位点CC或CT基因型或IL1B基因的c.-598T>C位点TC基因型的受检者具有较强的跟腱保护能力，这些受检者经过实际观察与调查问卷发现确实跟腱不容易受损；拥有IL1B基因c.-598T>C位点TT基因型的受检者具有一般的跟腱保护能力，实际观察与调查问卷这类受检者发现，其中有部分人常因不注意防护而发生跟腱损伤。拥有COL5A1基因c.*267C>T位点TT基因型或IL1B基因c.-598T>C位点CC基因型的受检者具有较弱的跟腱保护能力，实际调查得知，这类受检者在运动过程中很容易发生跟腱损伤。
实施例4：在受检者中，拥有FASLG基因c.-844C>T位点CC基因型或FAS基因c.-1378G>A位点GG基因型的受检者具有较强的腰椎间盘保护能力，这些受检者经过实际观察与调查问卷发现确实腰椎间盘不容易受损；拥有FASLG基因c.-844C>T位点CT基因型的受检者具有一般的腰椎间盘保护能力，实际观察与调查问卷这类受检者发现，其中有部分人常因不注意而发生腰椎间盘受损。拥有FASLG基因c.-844C>T位点TT基因型或FAS基因c.-1378G>A位点GA或AA基因型的受检者具有较弱的腰椎间盘保护能力，实际调查得知，这类受检者在运动过程中很容易发生腰椎间盘损伤。
综上所述，本领域的普通技术人员阅读本发明文件后，根据本发明的技术方案和技术构思无需创造性脑力劳动而作出其他各种相应的变换方案，均属于本发明所保护的范围。

Claims (10)

1.一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括运动潜质基因芯片和运动保护基因芯片，所述运动潜质基因芯片包含探针组A和多重PCR引物组1；所述运动保护基因芯片包含探针组B和多重PCR引物组2；
所述多重PCR引物组1用于对含HFE基因的c.187C>G位点、KCNJ11基因的c.67A>G位点、ACTN3基因的c.1729C>T位点和H1F1A基因的c.1744C>T位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组A用于对HFE基因的c.187C>G位点基因型、KCNJ11基因的c.67A>G位点基因型、ACTN3基因的c.1729C>T位点基因型和H1F1A基因的c.1744C>T位点基因型进行特异性检测；
所述多重PCR引物组2用于对含COL5A1基因的c.*267C>T位点、IL1B基因的c.-598T>C位点、FASLG基因的c.-844C>T位点和FAS基因的c.-1378G>A位点的核酸片段进行特异性扩增；
所述探针组B用于对COL5A1基因的c.*267C>T位点基因型、IL1B基因的c.-598T>C位点基因型、FASLG基因的c.-844C>T位点基因型和FAS基因的c.-1378G>A位点基因型进行特异性检测。
2.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述多重PCR引物组1包括引物1、引物2、引物3、引物4、引物5、引物6、引物7和引物8，上述引物的序列如下：
(1)所述引物1：5’-CTTGTTTGAAGCTTTGGGCT-3’；
(2)所述引物2：5’-GAAATTCTACTGGAAACCCA-3’；
(3)所述引物3：5’-GTGGGCCACGTTGCAGTTGC-3’；
(4)所述引物4：5’-TGTCCCGCAAGGGCATCATC-3’；
(5)所述引物5：5’-CCTGCCTGTCGTCCCCAGAG-3’；
(6)所述引物6：5’-TGGAGCAGGGCCGCAGCCCA-3’；
(7)所述引物7：5’-GATTTAGACTTGGAGATGTT-3’；
(8)所述引物8：5’-GTCTGCTGGAATACTGTAAC-3’。
3.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述探针组A包括探针1、探针2、探针3、探针4、探针5、探针6、探针7和探针8，上述探针的序列如下：
(1)所述探针1：5’-GCCATCATCCACCCCCTCA-3’；
(2)所述探针2：5’-GCCATCATCGACCCCCTCA-3’；
(3)所述探针3：5’-ACCTGGGCTTGGCAGGGTC-3’；
(4)所述探针4：5’-ACCTGGGCTCGGCAGGGTC-3’；
(5)所述探针5：5’-GAGGCTGACCGAGAGCGAG-3’；
(6)所述探针6：5’-GAGGCTGACTGAGAGCGAG-3’；
(7)所述探针7：5’-CAGTTGTCACCATTAGAAA-3’；
(8)所述探针8：5’-CAGTTGTCATCATTAGAAA-3’。
4.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述多重PCR引物组2包括引物9、引物10、引物11、引物12、引物13、引物14、引物15和引物16，上述引物的序列如下：
(1)所述引物9：5’-CACCTGGAGCTGAATCACAT-3’；
(2)所述引物10：5-AGACCTATTCACGAACAGGA-3’；
(3)所述引物11：5’-GAAGGGCCAATAGCCCTCCC-3’；
(4)所述引物12：5’-GTATGTTCTCTGCCCCAGCC-3’；
(5)所述引物13：5’-CTGGGCAAACAATGAAAATG-3’；
(6)所述引物14：5’-CGATCACCATAATTTACAGG-3’；
(7)所述引物15：5’-CATATACCATCCTCCTTATC-3’；
(8)所述引物16：5’-CACCAGTCTTGTAGGTGTTG-3’。
5.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述探针组B包括探针9、探针10、探针11、探针12、探针13、探针14、探针15和探针16，上述探针的序列如下：
(1)所述探针9：5’-CCACACCCACGCGCCCCGG-3’；
(2)所述探针10：5’-CCACACCCATGCGCCCCGG-3’；
(3)所述探针11：5’-CTCTGCCTCAGGAGCTCTC-3’；
(4)所述探针12：5’-CTCTGCCTCGGGAGCTCTC-3’；
(5)所述探针13：5’-AAAACATTGCGAAATACAA-3’；
(6)所述探针14：5’-AAAACATTGTGAAATACAA-3’；
(7)所述探针15：5’-GGCTGGCACGCCCAGGGTC-3’；
(8)所述探针16：5’-GGCTGGCACACCCAGGGTC-3’。
6.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述探针组A和探针组B均包括多种探针，每一种探针均固定在固相载体上。
7.根据权利要求6述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述固相载体为硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒还包括杂交液和洗脱液。
9.根据权利要求8述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述杂交液包含质量浓度百分比为50％的甲酰胺和质量浓度百分比为0.2％的十二烷基硫酸钠。
10.根据权利要求8述的一种运动潜质与保护基因检测试剂盒，其特征在于：所述洗脱液为无水乙醇。
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