CN108853464A - 一种银杏叶口服液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物制备方法领域，为解决现有银杏叶口服液的制备方法存在的活性物质含量较低或成本较高的问题，本发明提供了一种银杏叶提取物的制备方法，采用银杏叶粗粉进行制备，但通过预处理的方式极大地提高了活性物质含量并控制了成本。其包括：1)银杏叶粗粉预处理；2)银杏叶粗粉提取；3)配制；4)过滤；5)灌封；6)杀菌。相较于常规制备方法，本发明对于银杏叶中活性物质的提取率更高；与直接采用银杏叶提取物的制备方法相比，本发明方法成本更低。
Description
技术领域
本发明涉及药物制备方法领域，尤其涉及一种银杏叶口服液的制备方法。
背景技术
银杏是世界上残存的最古老的植物之一，现仅存一科一属一种，有“活化石”的美誉。我国是世界上银杏种植最广泛的国家，资源量位居世界首位，江苏、山东、湖北、浙江、云南、四川等省为主产区。银杏叶为银杏科植物银杏GinkgobilobaL.的干燥叶。秋季叶尚绿时采收，及时干燥。银杏叶提取物及制剂广泛应用于临床，具有扩张心脑血管、改善微循环、抗血小板激活因子、抗氧化、抗病毒、抗菌消炎等药理作用。临床上主要用于老年性痴呆、高血脂症、冠心病、慢性支气管炎、脑外伤后遗症、脑栓塞、脑血管痉挛、震颤麻痹、下肢动脉炎等。
银杏叶提取物中主要活性物质为银杏黄酮类和银杏内酯。已证实，银杏黄酮类具有扩张冠状血管、改善血管末梢和脑血管循环、降低胆固醇、抗氧化等作用；银杏内酯是血小板活化因子-PAF的强拮抗物，对心肌缺血、脑缺血缺氧有保护作用。银杏叶口服液以银杏叶提取物为原料，有活血化瘀通络之功效。用于瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂、舌强语謇；冠心病稳定型心绞痛、脑梗死见上述证候者。
通常银杏叶口服液采用银杏叶或银杏叶粗粉等作为原料进行制备时，其需要对银杏叶中的活性物质成分进行提取。现有的提取工艺包括水提法、有机溶剂提取法、细胞组织培养合成法、水提-树脂法、超临界CO2提取法、高速逆流色谱技术提取法、树脂吸附法和酶提取法等。但以上方法均存在着或提取效率低、效果较差，或对设备要求高、成本高、制备难度大等问题。
中国专利局于2016年2月23日公开了一种银杏叶口服液的制备方法的发明专利申请，申请公告号为CN105685998A，其方法包括以下步骤，提取银杏叶，得银杏叶提取物；将橘子剥皮、去籽，榨取橘子汁；将橘子汁加入银杏叶提取物中，混合搅拌均匀，再用水定容，调节pH，灭菌，即得银杏叶口服液。该发明的有益效果为：本发明所述的银杏叶口服液的制备方法仅采用食用乙醇提取银杏叶中的有益成分，将银杏叶中的有益成分提取出的同时，不会加入其它有害的化学成分。此外，该发明所述的银杏叶口服液中加有橘子汁，橘子汁的加入可以掩盖银杏叶提取物的苦涩味道，本发明所述的银杏叶口服液包含的橘子汁为碱性食物，即经常服用该发明所述的口服液具有预防癌症的功效。但是通过该发明制备出来的银杏叶口服液中的黄酮类化合物、含萜类内酯较少，其药效相应的就会变差，而银杏叶中的主要活性物质为银杏黄酮类和银杏内酯，通过乙醇提取出来的银杏叶中的主要活性物质量较少，提取率低。
而中国专利局还于2018年6月29日公开了一种银杏叶口服液的制备方法的发明专利申请，申请公告号为CN108210528A，其包括如下步骤：步骤1，称取8g银杏叶提取物；步骤2，将称取的银杏叶提取物加至质量浓度为60～65％的乙醇中，搅拌使银杏叶提取物溶解在乙醇中；步骤3，加入糖150g、桔子香精5ml，加水混匀制成1000ml溶液；步骤4，过滤，步骤5，灌封，步骤6，灭菌得到银杏叶口服液。本发明对银杏叶中的银杏黄酮类和银杏内酯提取率高，制备出来的口服液中银杏黄酮类和银杏内酯含量高，对瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂、舌强语謇；冠心病稳定型心绞痛、脑梗死等病痛治疗效果明显。其相较于CN105685998A专利的制备方法，其直接采用银杏叶提取物确实能够提高活性物质含量，但是其成本也同样较高，且采用银杏叶提取物进行制备相较于采用银杏叶粗粉提取后直接制备，其活性物质在储藏运输后可能发生氧化等问题。
发明内容
为解决现有银杏叶口服液的制备方法存在的活性物质含量较低或成本较高的问题，本发明提供了一种银杏叶提取物的制备方法。其采用银杏叶粗粉进行制备，但通过预处理的方式极大地提高了活性物质含量并控制了成本。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其3～7倍重量份的水中，通过搅拌或超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置10～12h，静置后对其进行急冷，并在急冷后使其处于低温环境中进行超声波破壁处理；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其5～6倍重量份的乙醇混合，在60～65℃条件下热浸1～1.5h后过滤，将滤液浓缩至原体积的3～5％，静置6～8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.15～1.20的流浸膏，将流浸膏与其6～8倍重量份的水混合，40～55℃条件下静置6～8h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取230～250重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，并调节pH值至6.0～7.0；
4)过滤：对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品进行灭菌处理，得到银杏叶口服液。
本发明方法从有机溶剂提取法的基础上进行了改进，在进行有机溶剂提取前，对银杏叶粗粉进行预处理。首先，银杏叶提取物提取困难的问题在于其倍包覆在银杏叶上植物细胞厚实的细胞壁内，细胞壁如一层坚实的“盔甲”保护着植物细胞内的营养成分和遗传物质，而在提取过程中，细胞壁则阻碍着提取的进行。而在本发明方法的预处理过程中，首先将银杏叶粗粉浸渍于过量水中，利用细胞内外溶液体系的浓度差使其充分吸水，细胞充分吸水膨大而细胞壁被拉伸，随后通过急冷的方式使得细胞壁内外产生温差，产生如冻溶法类似的内外力作用，即在急冷过程中细胞壁外表面随着温度的下降而收缩、但此时内部还是热的，故细胞壁收缩受到约束而产生了拉伸应力，内表面则相反，受压缩应力作用，并且由于细胞充分吸水胀大，进一步增大了细胞壁外表面产生的拉伸应力和内表面受到的压缩应力差，相当于对细胞壁产生了极强的拉扯力，使细胞壁处于一种十分脆弱、不稳定的状态，而在此基础上再利用超声波进行破壁处理，超声波在一定程度上刺激细胞活性，其内部产生极微小的气泡并在超声波空化效应下产生流动，能够产生一定的热效应和机械作用，使得细胞壁内壁进一步胀大并向细胞壁产生更大的作用力，以使得细胞壁破裂实现破壁效果。细胞壁破裂后在后续的提取过程中可极为方便地提取出制备银杏叶口服液所需的活性物质，并且在本方法中所添加的物质仅为水，水在后续处理过程中可方便地除去，因此不存在引入杂质的问题。
作为优选，步骤1)所用的水为纯化水。
纯化水的离子浓度更低，浸渍浸泡效果更好。
作为优选，步骤1)所述急冷过程的降温速率≥10℃/min。
所述急冷为以10℃/min以上的速度进行降温，能够形成更明显的细胞壁内外温差。
作为优选，步骤1)所述急冷过程为将悬浊液急冷至-10～-5℃，所述低温环境为-10～-5℃。
在该低温条件下能够实现良好的破壁效果。
作为优选，步骤1)所述超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次。
超声破壁分次进行相较于持续进行30min，其产生的破壁效果更优。
作为优选，步骤3)中桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200。
常规的以银杏叶粗粉作为制备原料的方法中，每1000g的银杏叶粗粉所加的桔子香精的体积为5ml，而本方法中由于经过预处理后活性物质的提取率得到大幅度的提升，因此所需桔子香精所用比例增大，同样所用水的比例也更大。
作为优选，步骤4)所述过滤采用PP膜过滤。
PP膜具有良好的过滤效果和较高的过滤效率。
作为优选，步骤6)所述灭菌条件为在100℃环境中灭菌30min。
在该条件下常见菌种均能实现杀除，且不影响活性物质。
本发明的有益效果是：
1)相较于常规制备方法，本发明对于银杏叶中活性物质的提取率更高；
2)与直接采用银杏叶提取物的制备方法相比，本发明方法成本更低。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作出进一步清楚详细的描述说明。本领域普通技术人员在基于这些说明的情况下将能够实现本发明。此外，下述说明中涉及到的本发明的实施例通常仅是本发明一分部的实施例，而不是全部的实施例。因此，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
实施例1
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其3倍重量份的水中，通过搅拌的方式使其分散形成悬浊液，随后静置12h，静置后以10℃/min的降温速率对其进行急冷至-5℃，并在急冷后使其处于-5℃低温环境中进行超声波破壁处理，超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其5倍重量份的乙醇混合，在60℃条件下热浸1.5h后过滤，将滤液浓缩至原体积的3％，静置6h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.15的流浸膏，将流浸膏与其6倍重量份的水混合，40℃条件下静置6h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取230重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200，并以20wt％的碳酸钠溶液调节pH值至6.0～7.0；
4)过滤：采用PP膜对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品置于100℃环境中灭菌30min，得到银杏叶口服液。
实施例2
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其7倍重量份的水中，通过超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置10h，静置后以20℃/min的降温速率对其进行急冷至-10℃，并在急冷后使其处于-10℃低温环境中进行超声波破壁处理，超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其6倍重量份的乙醇混合，在65℃条件下热浸1h后过滤，将滤液浓缩至原体积的5％，静置8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.20的流浸膏，将流浸膏与其8倍重量份的水混合，55℃条件下静置8h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取230重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200，并以20wt％的碳酸钠溶液调节pH值至7.0；
4)过滤：采用PP膜对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品置于100℃环境中灭菌30min，得到银杏叶口服液。
实施例3
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其5倍重量份的水中，通过超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置12h，静置后以10℃/min的降温速率对其进行急冷至-5℃，并在急冷后使其处于-5℃低温环境中进行超声波破壁处理，超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其6倍重量份的乙醇混合，在65℃条件下热浸1.5h后过滤，将滤液浓缩至原体积的3.5％，静置8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.20的流浸膏，将流浸膏与其8倍重量份的水混合，55℃条件下静置6h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取240重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200，并以20wt％的碳酸钠溶液调节pH值至7.0；
4)过滤：采用PP膜对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品置于100℃环境中灭菌30min，得到银杏叶口服液。
实施例4
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其5倍重量份的水中，通过超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置12h，静置后以10℃/min的降温速率对其进行急冷至-5℃，并在急冷后使其处于-5℃低温环境中进行超声波破壁处理，超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其5倍重量份的乙醇混合，在60℃条件下热浸1.5h后过滤，将滤液浓缩至原体积的5％，静置8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.20的流浸膏，将流浸膏与其8倍重量份的水混合，55℃条件下静置8h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取240重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200，并以20wt％的碳酸钠溶液调节pH值至7.0；
4)过滤：采用PP膜对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品置于100℃环境中灭菌30min，得到银杏叶口服液。
实施例5
一种银杏叶口服液的制备方法，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其6倍重量份的水中，通过超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置12h，静置后以10℃/min的降温速率对其进行急冷至-5℃，并在急冷后使其处于-5℃低温环境中进行超声波破壁处理，超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其6倍重量份的乙醇混合，在65℃条件下热浸1h后过滤，将滤液浓缩至原体积的5％，静置8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.15的流浸膏，将流浸膏与其6倍重量份的水混合，45℃条件下静置8h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)配制：取240重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200，并以20wt％的碳酸钠溶液调节pH值至7.0；
4)过滤：采用PP膜对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)灌封：对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)杀菌：将经步骤5)灌封的产品置于100℃环境中灭菌30min，得到银杏叶口服液。
Claims (7)
1.一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下制备步骤：
1)银杏叶粗粉预处理：取1000重量份的银杏叶粗粉，加入至其3～7倍重量份的水中，通过搅拌或超声震荡的方式使其分散形成悬浊液，随后静置10～12h，静置后对其进行急冷，并在急冷后使其处于低温环境中进行超声波破壁处理；
2)银杏叶粗粉提取：将经步骤1)预处理后的银杏叶粗粉与其5～6倍重量份的乙醇混合，在60～65℃条件下热浸1～1.5h后过滤，将滤液浓缩至原体积的3～5％，静置6～8h后过滤除去沉淀物，再将剩余的滤液浓缩至形成相对密度为1.15～1.20的流浸膏，将流浸膏与其6～8倍重量份的水混合，40～55℃条件下静置6～8h后，再进行过滤，将余下的滤液自然流过D101大孔树脂，以蒸馏水洗涤D101大孔树脂至水洗液密度≤1.01后弃去全部水洗液，以60wt％乙醇溶液进行洗脱，至洗脱液密度为0.874～0.884g/cm3后合停止并全部洗脱液，得到银杏提取物醇溶液；
3)取230～250重量份的蔗糖加入至步骤2)所得银杏提取物醇溶液中，再加入桔子香精和水混匀得到混合液，并调节pH值至6.0～7.0；
4)对步骤3)所得混合液进行过滤，除去杂质；
5)对经步骤4)过滤后的混合剂进行灌封；
6)将经步骤5)灌封的产品进行灭菌处理，得到银杏叶口服液。
2.根据权利要求1所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤1)所述急冷过程的降温速率≥10℃/min。
3.根据权利要求1或2所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤1)所述急冷过程为将悬浊液急冷至-10～-5℃，所述低温环境为-10～-5℃。
4.根据权利要求1所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤1)所述超声破壁处理的条件为每次超声破壁6min，重复进行5次。
5.根据权利要求1所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤3)中桔子香精以步骤1)每使用1000g银杏叶粗粉加入8ml的比例加入，所用桔子香精与水的体积比为1：200。
6.根据权利要求1所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤4)所述过滤采用PP膜过滤。
7.根据权利要求1所述的一种银杏叶口服液的制备方法，其特征在于，步骤6)所述灭菌条件为在100℃环境中灭菌30min。
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