CN108841728A - 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法 - Google Patents

细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108841728A
CN108841728A CN201810615456.7A CN201810615456A CN108841728A CN 108841728 A CN108841728 A CN 108841728A CN 201810615456 A CN201810615456 A CN 201810615456A CN 108841728 A CN108841728 A CN 108841728A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culturing room
cell culture
cell
hole
main part
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810615456.7A
Other languages
English (en)
Inventor
藤山阳
藤山阳一
田川阳
田川阳一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shimadzu Corp
Tokyo Institute of Technology NUC
Original Assignee
Shimadzu Corp
Tokyo Institute of Technology NUC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shimadzu Corp, Tokyo Institute of Technology NUC filed Critical Shimadzu Corp
Priority to CN201810615456.7A priority Critical patent/CN108841728A/zh
Publication of CN108841728A publication Critical patent/CN108841728A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/04—Filters; Permeable or porous membranes or plates, e.g. dialysis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34—Internal compartments or partitions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/58—Reaction vessels connected in series or in parallel
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/14—Scaffolds; Matrices
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/08—Chemical, biochemical or biological means, e.g. plasma jet, co-culture
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/069—Vascular Endothelial cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/14—Coculture with; Conditioned medium produced by hepatocytes

Abstract

本发明的细胞培养用设备包括：第1培养室；第1导入流路及第1排出流路，它们连接于该第1培养室；第2培养室，其经由第1多孔膜而连接于第1导入流路的中途；以及第2导入流路及第2排出流路，它们连接于第2培养室。第1排出流路经由第2多孔膜而连接于第1培养室。第1导入流路在第1培养室与第2培养室之间配备有液体提取部。液体提取部其壁面的至少一部分由弹性构件构成，所述弹性构件能够被尖端锐利的吸引器具贯穿，并且，在贯穿后，当拔出吸引器具时，可通过弹性将该贯穿孔闭合。细胞培养用设备具有主体部分以及可拆装地安装于主体部分的盖部分。所述第1培养室形成于主体部分，并且在主体部分的与盖部分的接触面具有开口。第2培养室形成于盖部分。

Description

细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法
本申请为下述申请的分案申请，
原申请的申请日(国际申请日)：2014年4月14日，
原申请的申请号：201480076730.8(国际申请号：PCT/JP2014/060572)
原申请的发明名称：细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法。
技术领域
本发明涉及一种细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法。
背景技术
业界进行有大量关于人工肝脏的研究等。但尚无法实现仅肝实质细胞的长期培养。本申请的发明人报道过通过支架材料的选择而在形成网络构造的内皮细胞与肝实质细胞的共培养系中短期地表达较高的肝功能这一内容(参考非专利文献1)。适于该培养系的设备构造例如在专利文献1中有揭示。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2011-244713号公报
非专利文献
非专利文献1：藤山阳一，田川阳一，其他5人，《使用管化内皮肝细胞培养用系统的与肝实质细胞的共培养中的肝功能的解析》，第30届日本分子生物学会年会预备稿集，2007年(藤山陽一，田川陽一，他5名，「管化内皮肝细胞培养用系统を用いた肝実質细胞との共培養における肝機能の解析」，第30回日本分子生物学会年会予稿集，2007年)
发明内容
发明要解决的问题
在药物动态评价中，为了使用肝组织中的评价，研究有各种方法。另外，也进行有使用共培养系的细胞培养用设备及系统的开发。
然而，在生物体内，药物未必会直接被肝脏吸收，在口服给药的情况下，优选考虑成分在肠内被吸收的影响。
本发明的目的在于提供一种能够培养2种细胞并且能够将一种细胞的代谢物导入至另一种细胞的细胞培养用设备、以及使用该设备的细胞培养用系统及细胞培养方法。
解决问题的技术手段
本发明所涉及的细胞培养用设备包括：第1培养室；第1导入流路及第1排出流路，它们连接于上述第1培养室；第2培养室，其经由第1多孔膜而连接于上述第1导入流路的中途；以及第2导入流路及第2排出流路，它们连接于上述第2培养室。
本发明所涉及的细胞培养用系统包括：本发明的细胞培养用设备；以及培养基供给部，其通过将泵连接至上述细胞培养设备而将培养基供给至上述第1培养室内。
本发明所涉及的细胞培养方法使用本发明的细胞培养用设备，在上述第1培养室内和上述第2培养室内分别培养细胞，并将上述第2培养室内的液体经由上述第1多孔膜和上述第1导入流路而导入至上述第1培养室。
发明的效果
本发明的细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法能够培养2种细胞，并且能够将一种细胞的代谢物导入至另一种细胞。
附图说明
图1为用于说明细胞培养用设备的一实施例的概略俯视图及截面图。
图2为将该实施例的细胞培养用设备分解表示的俯视图。
图3为用于说明细胞培养用系统的一实施例的概略图。
图4为用于说明细胞培养用系统的另一实施例的概略图。
图5为用于说明细胞培养用系统又一实施例的概略图。
图6为用于说明细胞培养用系统又一实施例的概略图。
图7为用于说明细胞培养用系统又一实施例的概略图。
图8为用于说明细胞培养用系统又一实施例的概略图。
图9为用于说明细胞培养用设备的另一实施例的概略俯视图及截面图。
图10为将图9所示的细胞培养用设备分解表示的俯视图。
具体实施方式
在本发明的细胞培养用设备中，能够列举出如下例子：上述第1排出流路经由第2多孔膜而连接于上述第1培养室。由此，能够防止例如细胞或支架材料(凝胶)等第1培养室内的物质流入至第1排出流路所导致的第1排出流路的堵塞。但在本发明的细胞培养用设备中，也可不配置上述第2多孔膜。
在本发明的细胞培养用设备中，能够列举出如下例子：上述第1导入流路在上述第1培养室与上述第2培养室之间配备有液体提取部，上述液体提取部其壁面的至少一部分由弹性构件构成，所述弹性构件能够被尖端锐利的吸引器具贯穿，并且，在贯穿后，当拔出上述吸引器具时，能够通过弹性将该贯穿孔闭合。由此，对于通过第2培养室之后的液体例如含有第2培养室内所培养的细胞的代谢物的液体，可在该液体被导入至第1培养室之前加以提取。但在本发明的细胞培养用设备中，上述第1导入流路也可不配备上述液体提取部。
在本发明的细胞培养用设备中，能够列举出如下例子：细胞培养用设备具有主体部分以及可拆装地安装于上述主体部分的盖部分，上述第1培养室形成于上述主体部分，并且在上述主体部分的与上述盖部分的接触面具有开口。由此，在使主体部分与盖部分分离后的状态下，能够不经由第1导入流路及第1排出流路而向第1培养室配置例如细胞、支架材料、培养基等物质。但本发明的细胞培养用设备也可为不配备可拆装的主体部分和盖部分的构造。
进而，能够列举出上述主体部分及上述盖部分的接触面的材料为PDMS(聚二甲基硅氧烷)或硅系橡胶的例子。由此，无须使用例如螺钉、粘结剂等特殊固定手段，即可通过自吸附性将盖部分稳定地固定于主体部分。进而，能够根据需要容易地拆装主体部分与盖部分。但上述主体部分及上述盖部分的接触面的材料不限于PDMS及硅系橡胶，也可为其他材料。
另外，能够列举出如下例子：上述主体部分及上述盖部分的接触面中的至少任一面形成为凸形状，上述主体部分与上述盖部分的接触面的平面尺寸小于该设备的平面尺寸。通过减小主体部分与盖部分的接触面，能够抑制力朝不需要的部分的分散，从而可提高主体部分与盖部分的密接性。但在本发明的细胞培养用设备中，上述主体部分及上述盖部分的接触面也可均为平坦面。
另外，能够列举出如下例子：上述第2培养室形成于上述盖部分。由此，可将形成有第1培养室的主体部分与形成有第2培养室的盖部分分离，从而在第1培养室内和第2培养室内在互不相同的条件及环境下分别培养细胞。但在本发明的细胞培养用设备中，第2培养室也可形成于上述主体部分，并且，也能以跨越上述主体部分和上述盖部分的方式形成。
在本发明的细胞培养用设备中，能够列举出如下例子：在上述第1培养室内共同培养有至少包含内皮细胞和肝实质细胞的共培养系，在上述第2培养室内培养有来源于肠的细胞。由此，能够将来源于肠的细胞的代谢物供给至包含内皮细胞和肝实质细胞的共培养系，从而可实现更接近生物体内的环境。但在本发明的细胞培养用设备中，第1培养室内及第2培养室内所培养的细胞并不限定于这些细胞。
进而，在本发明的细胞培养用设备中，能够列举出如下例子：在上述第1培养室中容纳有作为细胞的支架材料的凝胶，且具有管状构造的上述共培养系以网络构造形成于上述凝胶上。
在本发明的细胞培养用系统中，能够列举出如下例子：上述培养基供给部使培养基循环供给至上述第1培养室内，且在上述培养基供给部的培养基循环线路的中途还配备有透析部。由此，可在通过透析部来去除不需要的物质的情况下以循环方式将培养基供给至第1培养室内。在上述第1培养室内共同培养有至少包含内皮细胞和肝实质细胞的共培养系、在上述第2培养室内培养有来源于肠的细胞的情况下，该构成尤为有用。但本发明的细胞培养用系统也可不配备透析部。
在本发明的细胞培养方法中，能够列举出如下例子：使用第2培养室形成于盖部分的本发明的细胞培养用设备，在将上述主体部分与上述盖部分已相互分离的状态下，在上述第1培养室的上述主体部分和形成于上述盖部分的上述第2培养室内分别培养细胞，之后将上述主体部分与上述盖部分接合。由此，能够在第1培养室内和第2培养室内在互不相同的条件及环境下分别培养细胞。但本发明的细胞培养方法也可在细胞培养用设备的上述主体部分与上述盖部分已接合的状态下在第1培养室内及第2培养室内分别培养细胞。
在本发明的细胞培养方法中，能够列举出如下例子：在上述第1培养室内共同培养至少包含内皮细胞和肝实质细胞的共培养系，在上述第2培养室内培养来源于肠的细胞。由此，能够将来源于肠的细胞的代谢物供给至包含内皮细胞和肝实质细胞的共培养系，从而可实现更接近生物体内的环境。但在本发明的细胞培养方法中，第1培养室内及第2培养室内所培养的细胞并不限定于这些细胞。
进而，在本发明的细胞培养方法中，能够列举出如下例子：在上述第1培养室中容纳成为细胞的支架材料的凝胶，并在上述凝胶上形成具有管状构造的上述共培养系的网络构造。
进而，在本发明的细胞培养方法中，能够列举出如下例子：将试剂从上述第2导入流路导入至培养有上述来源于肠的细胞的上述第2培养室，并将由此获得的上述来源于肠的细胞的代谢物经由上述第1多孔膜和上述第1导入流路而导入至上述第1培养室。
进而，在本发明的细胞培养方法中，能够列举出如下例子：将从上述第1培养室排出的培养基透析并循环供给至上述第1培养室内。由此，能够实现更接近生物体内的环境。
本发明为用于细胞培养的技术，是一种用于例如人工肝脏等人工脏器或药物代谢试验等而较为有用的技术。
本发明的细胞培养设备例如包括第2培养室，所述第2培养室经由第1多孔膜而连接于被导入至培养有肝组织的第1培养室的培养液的流路(第1导入流路)的中途。在第2培养室内培养例如来源于肠的细胞，并在该培养基中投放想试验的药剂。
图1为用于说明细胞培养用设备的一实施例的概略俯视图及截面图。图2为将该实施例的细胞培养用设备分解显示的俯视图。
该实施例的细胞培养用设备1大体上由主体部分3和盖部分5形成。主体部分3为用于培养例如肝组织的部分。盖部分5为用于培养例如肠上皮细胞的部分。盖部分5可在主体部分3上进行拆装。
主体部分3包括底板7、PDMS块9及PDMS块11。
主体部分3的底板7例如由合成石英形成。另外，底板7并不限定于平板形状。底板7只要可供PDMS块9吸附即可。例如，底板7也可为培养用皿。
PDMS块9及PDMS块11例如由SILPOT184(东丽道康宁公司(東レダウコーニング社)制造)形成。PDMS块9、11的平面尺寸例如为25mm×25mm(毫米)。PDMS块9的厚度例如为2.0mm。PDMS块11的厚度例如为1.0mm。
PDMS块9例如具有直径10mm的通孔9a。
PDMS块11具有通孔11a、凹部11b、凸部11c及通孔11d。
通孔11a形成于在PDMS块9与PDMS块11已贴合时与通孔9a重叠的位置。通孔11a的直径例如为10mm。
凹部11b形成于与PDMS块9的接触面。凹部11b的深度例如为0.2mm左右。凹部11b具有通孔11a的周围部分以及自该周围部分突出的突起部分。通孔11a的周围部分处的凹部11b的宽度例如为1.0mm左右。凹部11b的突起部分的尺寸例如为宽2.0mm左右、长2.0mm左右。
凸部11c形成于与PDMS块9的接触面相反一侧的表面，且形成为自该表面突出的凸形状。凸部11c的高度例如为0.5mm左右。凸部11c的上表面构成与盖部分5的接触面。凸部11c形成于包含通孔11a的形成位置的位置。另外，PDMS块11的厚度为包含凸部11c的厚度。
通孔11d形成于与凹部11b的突起部分重叠的位置。通孔11d的直径例如为1.5mm。
对主体部分3的形成工序进行简单说明。
准备形成有凹部11b和凸部11c的PDMS块11。凹部11b具有直径为12mm左右的圆形部分以及自圆形部分突出的突起部分。在与该突起部分重叠的位置开设有直径为1.5mm的通孔11d。
将未形成通孔11a的PDMS块11与未形成通孔9a的PDMS块9贴合。此时，优选在贴合之前对PDMS块9与PDMS块11的接触面实施氧等离子体处理。PDMS块11的与PDMS块9的接触面为形成有凹部11b的面。
在贴合后的PDMS块9、11上以与凹部11b的圆形部分的中央重叠的方式形成直径为10mm的通孔。由此，在PDMS块9上形成通孔9a，在PDMS块11上形成通孔11a。
将PDMS块9的与PDMS块11相反一侧的表面贴合至底板7，完成主体部分3。此时，优选对PDMS块9的与底板7的接触面实施氧等离子体处理。另外，即使不实施氧等离子体处理，也能够利用PDMS块9的自吸附性将PDMS块9贴附至底板7或细胞培养用皿。
接着，对盖部分5进行说明。
盖部分5包括硅橡胶片13、过滤片15(第1多孔膜)、过滤片17(第2多孔膜)、硅橡胶片19、PDMS块21、硅橡胶片23、PDMS块25及PDMS块27。
硅橡胶片13、19、23以及PDMS块21、25、27的平面尺寸例如为25mm×25mm。
硅橡胶片13、19、23例如为Silius(シリウス)极薄硅橡胶片(扶桑橡胶产业株式会社的产品)。
PDMS块21、25、27例如由SILPOT184(东丽道康宁公司(東レダウコーニング社)制造)形成。
硅橡胶片13和硅橡胶片19用于夹持并保持过滤片15、17。硅橡胶片13、19的厚度分别例如为0.1mm。
硅橡胶片13具有例如通过冲孔等方法形成的长孔13a、通孔13b、长孔13c、通孔13d及通孔13e。
长孔13a的宽度尺寸例如为2.0mm。长孔13a的一端与通孔13b相连。
通孔13b的直径例如为4.0mm。
长孔13c的宽度尺寸例如为2.0mm。长孔13c的一端在不同于长孔13a的位置与通孔13b相连。长孔13c的另一端形成于与PDMS块11的通孔11d重叠的位置。
通孔13d形成于与主体部分3的通孔11d重叠的位置。通孔13d的直径例如为1.5mm。
通孔13e形成于与主体部分3的肝组织培养室29重叠的位置。通孔13e的直径例如为5.0mm。
硅橡胶片19具有例如通过冲孔等方法形成的通孔19a、19b、19c、19d。
通孔19a形成于与硅橡胶片13的长孔13a的端部重叠的位置。通孔19a的直径例如为1.5mm。
通孔19b形成于与硅橡胶片13的通孔13b重叠的位置。通孔19b的直径例如为4.0mm。
通孔19c形成于与硅橡胶片13的长孔13c的端部重叠的位置。通孔19c的直径例如为1.5mm。
通孔19d形成于与硅橡胶片13的通孔13d重叠的位置。通孔19d的直径例如为1.5mm。
通孔19e形成于与硅橡胶片13的通孔13e重叠的位置。通孔19e的直径例如为5.0mm。
过滤片15例如为孔径1μm的PET径迹蚀刻膜(it4ip公司的产品)。过滤片15的直径例如为5mm。过滤片15以与通孔13b及通孔19b重叠的方式配置于硅橡胶片13、19之间。
过滤片17例如为孔径5μm的PC径迹蚀刻膜(it4ip公司的产品)。过滤片17的直径例如为6mm。过滤片17以与通孔13e、19e重叠的方式配置于硅橡胶片13、19之间。
例如，在对硅橡胶片13、19的供相互贴合的表面实施氧离子体处理之后，以夹持着两个过滤片15、17的状态贴合硅橡胶片13、19。过滤片15构成例如肠上皮细胞的培养面。过滤片17构成肝组织培养室29的培养基排出部过滤片。
PDMS块21的厚度例如为1.0mm。PDMS块21具有通孔21a、21b、21c、21d、凹部槽21e及通孔21f。例如，凹部槽21e是在PDMS块21的成型时形成。通孔21a、21b、21c、21d、21f是在PDMS块21的成型后形成。
通孔21a形成于与硅橡胶片19的通孔19a重叠的位置。通孔21a的直径例如为1.5mm。
通孔21b形成于与硅橡胶片19的通孔19b重叠的位置。通孔21b的直径例如为4.5mm。
通孔21c形成于与硅橡胶片19的通孔19c重叠的位置。通孔21c的直径例如为1.5mm。
通孔21d形成于与硅橡胶片19的通孔19d重叠的位置。通孔21d的直径例如为1.5mm。
凹部槽21e形成于与硅橡胶片19贴合那一面。凹部槽21e的深度例如为0.2mm。凹部槽21e是以从与肝组织培养室29以及硅橡胶片19的通孔19e重叠的位置跨越至与肝组织培养室29不重叠的位置的方式形成。凹部槽21e的深度例如为0.2mm。在与通孔19e重叠的位置的凹部槽21e内形成有多个突起。这些突起用于防止过滤片17贴附至凹部槽21e的底面。
通孔21f形成于与肝组织培养室29不重叠但与凹部槽21e重叠的位置。通孔21f的直径例如为1.5mm。
硅橡胶片23的厚度例如为0.2mm。硅橡胶片23具有通孔23a、23b、23c、23d、长孔23e及通孔23f。
通孔23a形成于与PDMS块21的通孔21a重叠的位置。通孔23a的直径例如为1.5mm。
通孔23b形成于与PDMS块21的通孔21b重叠的位置。通孔23b的直径例如为4.5mm。
通孔23c形成于与PDMS块21的通孔21c重叠的位置。通孔23c的直径例如为1.5mm。
通孔23d形成于与PDMS块21的通孔21d重叠的位置。通孔23d的直径例如为1.5mm。
长孔23e的宽度尺寸例如为2.0mm。长孔23e的一端与通孔23b相连。
通孔23f形成于与PDMS块21的通孔21f重叠的位置。通孔23f的直径例如为1.5mm。
PDMS块25的厚度例如为1.0mm。PDMS块25具有通孔25a、25b、25c、25d、25e、25f以及凹部槽25g、25h。例如，凹部槽25g、25h是在PDMS块25的成型时形成。通孔25a、25b、25c、25d、25e、25f是在PDMS块25的成型后形成。
通孔25a形成于与硅橡胶片23的通孔23a重叠的位置。通孔25a的直径例如为1.5mm。
通孔25b形成于与硅橡胶片23的通孔23b重叠的位置。通孔25b的直径例如为4.5mm。
通孔25c形成于与硅橡胶片23的通孔23c重叠的位置。通孔25c的直径例如为1.5mm。
通孔25d形成于与硅橡胶片23的通孔23d重叠的位置。通孔25d的直径例如为1.5mm。
通孔25e形成于与硅橡胶片23的通孔23e重叠的位置。通孔25e的直径例如为1.5mm。
通孔25f形成于与硅橡胶片23的通孔23f重叠的位置。通孔25f的直径例如为1.5mm。
凹部槽25g、25h形成于与贴合硅橡胶片23那一面相反一侧的表面(贴合PDMS块27那一面)。凹部槽25g的深度例如为0.6mm。凹部槽25g的宽度尺寸例如为2.0mm。凹部槽25h的深度例如为0.2mm。凹部槽25h的宽度尺寸例如为1.7mm。
凹部槽25g的一端连接着通孔25b。
凹部槽25g的一端形成于与贯通槽25c重叠的位置。凹部槽25g的另一端形成于与贯通槽25d重叠的位置。
PDMS块27的厚度例如为1.0mm。PDMS块27具有通孔27a、27b、27c、27d。例如，通孔27a、27b、27c、27d是在PDMS块27的成型后形成。
通孔27a形成于与PDMS块25的通孔25a重叠的位置。通孔27b形成于与PDMS块25的通孔25f重叠的位置。通孔27c形成于与PDMS块25的凹部槽25g的顶端部分重叠的位置。通孔27d形成于与PDMS块25的通孔25e重叠的位置。
通孔27a、27b、27c、27d的直径例如为1.5mm。
对盖部分5的形成工序进行简单说明。
准备形成有凹部槽25g、25h的PDMS块25。另外，准备形成有长孔23e的硅橡胶片23。在与形成有凹部槽25g、25h那一面相反一侧的PDMS块25的表面贴附硅橡胶片23。此时，优选在贴合之前对PDMS块25的贴附硅橡胶片23那一面实施氧等离子体处理。
在贴合后的PDMS块25及硅橡胶片23上形成直径为1.5mm的通孔25e。
准备形成有凹部槽21e的PDMS块21。将与形成有凹部槽21e那一面相反一侧的PDMS块21的表面与硅橡胶片23的与PDMS块25相反一侧的表面贴合。此时，优选在贴合之前对PDMS块21的贴合硅橡胶片23那一面实施氧等离子体处理。
对贴合后的PDMS块21、硅橡胶片23及PDMS块25形成通孔21a、23a、25a、通孔21b、23b、25b、通孔21c、23c、25c、通孔21d、23d、25d以及通孔21f、23f、25f。此时，通孔21b、23b、25b的直径扩大至5mm。通孔21a、23a、25a、通孔21c、23c、25c、通孔21d、23d、25d以及通孔21f、23f、25f的直径为1.5mm。
准备夹持有2个过滤片15、17的硅橡胶片13、19。针对贴合后的PDMS块21、硅橡胶片23及PDMS块25，将硅橡胶片19贴合至PDMS块21的形成有凹部槽21e那一面。
准备形成有通孔27a、27b、27c、27d的PDMS块27。针对贴合后的硅橡胶片13、19、PDMS块21、硅橡胶片23及PDMS块25，将PDMS块27贴合至硅橡胶片13。由此，完成盖部分5。
在细胞培养用设备1中，主体部分3与盖部分5例如通过PDMS块11与硅橡胶片13的自吸附性而接合。由此，主体部分3与盖部分5在不使用例如螺钉、粘结剂等特殊固定手段的情况下得以稳定地固定。进而，能够根据需要容易地拆装主体部分3与盖部分5。
在细胞培养用设备1中，主体部分3的通孔9a、11a构成了肝组织培养室29(第1培养室)。另外，盖部分5的硅橡胶片13的通孔13e构成了肝组织培养室29的一部分。肝组织培养室29的底面由底板7构成。肝组织培养室29的上表面由过滤片17构成。
盖部分5的通孔19b、21b、23b、25b构成了肠上皮细胞培养室31(第2培养室)。肠上皮细胞培养室31的下表面由过滤片15构成。肠上皮细胞培养室31的上表面由PDMS块27构成。
盖部分5的通孔27a、25a、23a、21a、长孔13a、通孔13b、长孔13c、通孔19c、21c、23c、25c、凹部槽25h以及通孔25d、23d、21d、19d、13d构成了培养基供给通道33(第1导入流路)。另外，主体部分3的通孔11d及凹部11b也构成了培养基供给通道33的一部分。通孔27a的端部成为培养基导入口33a。
盖部分5的通孔19e、凹部槽21b以及通孔21f、25f、27b构成了培养基排出通道35(第1排出流路)。通孔27b的端部成为培养基排出口35a。
盖部分5的通孔27c、25i及凹部槽25g构成了试剂导入通道37(第2导入流路)。通孔27c的端部成为试剂导入口37a。
盖部分5的通孔27d、25e及长孔23e构成了试剂排出通道39(第2排出流路)。通孔27d的端部成为试剂排出口39a。
构成试剂导入通道37的凹部槽25g的深度例如为0.6mm。另外，构成试剂排出通道39的长孔23e的深度即硅橡胶片23的厚度例如为0.2mm。试剂导入通道37的流路的高度大于试剂排出通道39的流路高度是为了使朝肠上皮细胞培养室31的细胞导入变得容易。
另外，在培养基供给通道33中，例如长孔13c以及通孔19c、21c、23c、25c的部分和通孔25d、23d、21d、19d、13d的部分分别构成了液体提取部41。液体提取部41在培养基供给通道33中设置于肝组织培养室29与肠上皮细胞培养室31之间。
构成液体提取部41的上壁面的PDMS块27为弹性材料，该弹性材料能够被尖端锐利的吸引器具贯穿，并且，在贯穿后，当拔出吸引器具时，可通过弹性将该贯穿孔闭合。视需要从液体提取部41提取液体例如培养基。
另外，在该实施例中，设置有两处液体提取部41，但液体提取部41也可为一处。另外，也可将凹部槽25h的部分用作液体提取部。
在细胞培养用设备1中，培养肝组织的主体部分3与培养肠上皮细胞的盖部分5可进行拆装。
从试剂导入口39a将来源于肠的细胞例如肠上皮细胞(此处为Caco2)与培养基一起导入至盖部分5的肠上皮细胞培养室31。肠上皮细胞在过滤片15上在形成紧密连接这样的条件下得到培养。例如，在主体部分3与盖部分5分离后的状态下，仅在盖部分5培养肠上皮细胞。
对肝组织的培养方法的例子进行说明。例如在主体部分3被冷却后的状态下，对肝组织培养室29导入凝胶作为支架。该凝胶例如为EHS-gel。EHS-gel是从EHS小鼠肉瘤细胞中分离出来的基底膜制备物，含有丰富的层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白及蛋白多糖。EHS-gel在低温下会液化，在常温下会成为固体状。因此，在细胞培养用设备1经冷却后的状态下，将EHS-gel注入至肝组织培养室29，并在例如37℃的恒温箱内或者室温下静置，由此可使EHS-gel固定在肝组织培养室29的底面。
在凝胶上播种内皮细胞(例如GH7)。在凝胶上形成内皮细胞的网络。向内皮细胞的网络播种肝实质细胞。在肝组织培养室29内，包含内皮细胞系细胞和肝细胞系细胞的共培养系以具有管状构造的方式在凝胶上得到共同培养。内皮细胞系细胞例如为血窦内皮细胞、人脐带静脉(动脉)内皮细胞、TD2、GH7等。肝细胞系细胞例如为肝实质细胞、HepaRG、Huh-7、Hep G2、TLR2、Hepa1-6、肝前体细胞等。另外，在包含内皮细胞系细胞和肝细胞系细胞的共培养系中，也可含有与内皮细胞系细胞及肝细胞系细胞不一样的细胞。
确认肠上皮细胞在盖部分5的肠上皮细胞培养室31内充分增殖而形成了紧密连接。将在肝组织培养室29内培养有肝组织的主体部分3与在肠上皮细胞培养室31内培养有肠
上皮细胞的盖部分5贴合。主体部分3与盖部分5的接合面均为硅橡胶系材料。因此，通过使用在主体部分3与盖部分5已贴合的状态下能保持适当的压力这样的简单的夹具，得以维持主体部分3与盖部分5之间的液密性。
另外，在主体部分3的PDMS块11的与盖部分5的接触面形成有凸形状的凸部11c。凸部11c的上表面与盖部分5的硅橡胶片材13接合。主体部分3与盖部分5的接触面的平面尺寸小于细胞培养用设备1的平面尺寸。该构造消除了主体部分3与盖部分5在与送液和培养无关的细胞培养用设备1的外周部的接触，能够抑制力朝不需要的部分的分散，起到防止漏液的效果。
例如通过注射泵等将培养基送入至培养基导入口33a。所送入的培养基经过通过培养有肠上皮细胞的肠上皮细胞培养室31的过滤片15下方的培养基供给通道33而流入至肝组织培养室29。该培养基经过过滤片17和培养基排出通道35而从培养基排出口35a排出。
可将培养基或试剂从试剂导入口37a经过试剂导入通道37而供给至肠上皮细胞培养室31。该培养基或试剂通过肠上皮细胞培养室31并经过试剂排出通道39而从试剂排出口39a排出。在试剂被供给到了肠上皮细胞培养室31时，试剂被肠上皮细胞吸收，之后代谢物通过培养面的过滤片15而供给至连接至肝组织培养室29的培养基供给通道33。因此，重要的是肠上皮细胞在过滤片15上形成紧密连接而得到密集培养。
已供给至培养基供给通道33的药物的代谢物经由培养基供给通道33及液体提取部41而到达至肝组织培养室29内所培养的肝组织。该构造能够以模拟方式形成从肠壁吸收的药物到达至肝脏的结构，使得接近生物体内的药物动态评价成为可能。
如此，细胞培养用设备1能够培养两种细胞，并且能够将一种细胞的代谢物导入至另一种细胞。
另外，细胞培养用设备1中，形成有肝组织培养室29的主体构件3与形成有肠上皮细胞培养室31的盖构件5可进行拆装。而且，能够在将主体构件3与盖构件5分离后的状态下分别在适当的条件下进行肝组织的培养和肠上皮细胞的培养，并在较佳时机将本体构件3与盖构件5组合。因此，细胞培养用设备1能够实现高效的测量。
图3为用于说明使用本实施例的细胞培养用设备1的细胞培养用系统的一实施例的概略图。
细胞培养用系统43是将细胞培养用设备1与对细胞培养用设备1供给培养基的培养基供给部组合而成。该培养基供给部包括培养基容纳部45、培养基供给管47、培养基排出管49、废液容纳部51、送液泵53及控制部55。
培养基供给管47的一端插入在培养基容纳部45中。培养基供给管47的另一端连接于细胞培养用设备1的培养基导入口33a。培养基排出管49的一端连接于细胞培养用设备1的培养基排出口35a。培养基排出管49的另一端插入在废液容纳部51中。送液泵53连接于培养基供给管47。控制部55控制送液泵53的动作。
培养基容纳部45中所容纳的培养基被送液泵53吸引而通过培养基供给管47从培养基导入口33a送至细胞培养用设备1。已从培养基导入口33a供给至细胞培养用设备1的培养基通过培养基供给通道33从肝组织培养室29的周面导入肝组织培养室29内(参考图1)。
随着培养基向肝组织培养室29的导入，肝组织培养室29内的培养基的一部分从肝组织培养室29经由过滤片17及培养基排出通道35而从培养基排出口35a排出至外部。从培养基排出口35a排出的培养基经由培养基排出管49而排出至废液容纳部51。
细胞培养用设备1在从培养基排出通道35排出肝组织培养室29内的培养基时会使其通过过滤片17，因此能够降低因剥离后的凝胶等而导致培养基排出通道35堵塞的概率。
通过以与生物体内相同的方式少量逐次供给培养基，细胞培养用系统43能够稳定细胞和组织的周边环境。因此，能够实现稳定的细胞培养。如此，细胞培养用设备1及细胞培养用系统43有利于细胞的长期培养。
另外，在试剂已供给至肠上皮细胞培养室31时，试剂被肠上皮细胞吸收，之后代谢物通过培养面的过滤片15而供给至连接至肝组织培养室29的培养基供给通道33。已供给至培养基供给通道33的代谢物与培养基一起供给至肝组织培养室29。如此，细胞培养用设备1及细胞培养用系统43能够在接近生物体内的环境下进行试剂的试验。
另外，细胞培养用设备1能够利用液体提取部41将从肠上皮细胞培养室31供给至培养基供给通道33的代谢物与培养基一起提取(参考图1)。该代谢物的提取例如通过如下操作来进行：使尖端锐利的吸引器具贯穿构成液体提取部41的上壁面的PDMS块27而插入至液体提取部41内，吸引代谢物及培养基。当从PDMS块27拔出吸引器具时，因吸引器具的贯穿而形成的贯穿孔在PDMS块27的弹力下闭合。因此，即使在利用液体提取部41提取代谢物等之后，也能够继续对肝组织培养室29供给培养基等。
图3所示的细胞培养用系统43在培养基供给管47上配备送液泵53而具备对肝组织培养室29内连续输送培养基的功能，但本发明的细胞培养用系统并不限定于此。
例如，如图4所示，本发明的实施例的细胞培养用系统57也可在培养基排出管49上配备送液泵53而具备从肝组织培养室29内连续吸引培养基的功能。另外，本发明的细胞培养用系统并不限定于图3或图4所示的构成。
通过以与生物体内相同的方式少量逐次供给培养基，本发明能够稳定细胞和组织的周边环境。因此，本发明能够实现稳定的细胞培养。
另外，在生物体内，体液一方面经肾脏加以透析，另一方面处于循环当中。在这个意义上，上述细胞培养用系统43、57无法评价微量的表达物质的积累这样的效果。
因此，本发明的细胞培养用系统将培养基设为进行循环一样的体系，并在其中途追加透析的功能，由此，可实现更接近实际的生物体的评价体系。
根据本发明，例如在进行药物动态试验时，能够进行考虑了肠内的吸收的影响的肝功能评价，从而可实现接近生物体的试验。另外，本发明的细胞培养系统使用了流体控制技术，可加入例如肾脏内的透析的效果，进而还可开展其他脏器的影响也考虑进去这样的综合性系统的构建。
图5为用于说明使用本实施例的细胞培养用设备1的细胞培养用系统的又一实施例的概略图。在图5中，对实现与图3及图4相同的功能的部分标注的是相同符号。
细胞培养用系统59的培养基供给部使培养基循环供给至细胞培养用设备1的肝组织培养室29内。该培养基供给部包括培养基容纳部45、培养基供给管47、培养基排出管49、送液泵53、控制部55及透析部61。
培养基排出管49的一端连接于细胞培养用设备1的培养基排出口35a。培养基排出管49的另一端连接于培养基容纳部45。在培养基排出管49的中途设置有透析部61。透析部61例如为小型透析器。透析部61具备对循环的培养基进行不需要的物质的过滤的功能。
细胞培养用系统59例如通过注射泵等送液泵53而从容纳有培养基的培养基容纳部45吸取培养基，并供给至细胞培养用设备1，之后经过透析部61而送回至原来的培养基容纳部45。由此，细胞培养用系统59能够在更接近实际的生物体的环境下进行试剂的评价等。
图6为用于说明使用本实施例的细胞培养用设备1的细胞培养用系统的又一实施例的概略图。在图6中，对实现与图5相同的功能的部分标注的是相同符号。
与图5所示的细胞培养用系统59相比，作为本发明的实施例的细胞培养用系统63的送液泵53的连接位置不一样。在细胞培养用系统63中，送液泵53是在细胞培养用设备1与透析部61之间连接于培养基排出管49。另外，送液泵53也可在透析部61与培养基容纳部45之间连接于培养基排出管49。
图7为用于说明使用本实施例的细胞培养用设备1的细胞培养用系统又一实施例的概略图。在图7中，对实现与图3相同的功能的部分标注的是相同符号。
与图3所示的细胞培养用系统43相比，作为本发明的实施例的细胞培养用系统65进而包括透析部67。透析部67由设置在培养基供给管47与培养基排出管49这两条流路之间的透析膜构成。该透析膜例如为Spectra系列(SPECTRUM公司的产品)。
本发明的实施例的细胞培养用设备1例如通过流速40μL/h(微升/小时)左右的培养基的供给便可在肝组织培养室29内培养细胞，因此需要的培养基的量较少。因此，作为本发明的实施例的细胞培养用系统65也能够使用透析膜作为透析部67。
另外，细胞培养用系统65也可将透析液代替培养基供给至细胞培养用设备1。
另外，送液泵53也可像图8所示的作为本发明的实施例的细胞培养用系统69那样在细胞培养用设备1与透析部61之间连接于培养基排出管49。另外，送液泵53也可在透析部61与废液容纳部51之间连接于培养基排出管49。另外，送液泵53也可在培养基容纳部45与透析部61之间连接于培养基供给管47。
另外，上述所说明的细胞培养用设备1配备有液体提取部41。相对于此，本发明的细胞培养用设备也可不配备液体提取部。
图9为用于说明细胞培养用设备的另一实施例的概略俯视图及剖视图。图10为将该实施例的细胞培养用设备分解显示的俯视图。在图9及图10中，对与图1及图2相同的部分标注的是相同符号。
与参考图1及图2而说明过的细胞培养用设备1相比，该实施例的细胞培养用设备71未配备液体提取部41。即，细胞培养用设备71未配备通孔19c、21c、23c、25c和通孔13d、19d、21d、23d、25d(参考图1及图2)。另外，细胞培养用设备71不配备凹部槽25h(参考图1及图2)。
在细胞培养用设备71的硅橡胶橡胶片13中，与通孔13b相反一侧的长孔13c的端部的顶端形成于与PDMS块11的通孔11d重叠的位置。
培养基供给通道33由通孔27a、25a、23a、21a、19a、长孔13a、通孔13b、长孔13c、通孔11d及凹部11b形成。
除了无法取得液体提取部41(参考图1及图2)的效果以外，细胞培养用设备71可取得与参考图1及图2而说明过的细胞培养用设备1相同的作用及效果。
另外，例如参考图3至图8而说明过的细胞培养系统能够使用细胞培养用设备71代替细胞培养用设备1。
以上，对本发明的实施例进行了说明，但实施例中的构成、配置、数值等为一例，本发明并不限定于此，能够在权利要求书中所记载的本发明的范围内进行各种变更。
例如，在本发明的细胞培养用设备的上述实施例中，第1培养室为肝组织培养室29，第2培养室为肠上皮细胞培养室31，但在本发明的细胞培养用设备中，第1培养室及第2培养室并不限定于这些。在第1培养室及第2培养室中培养的细胞可以是任何细胞。
另外，在细胞培养用设备的上述实施例中，培养基排出通道35(第1排出流路)经由过滤片17(第2多孔膜)而连接于肝组织培养室29(第1培养室)。由此，例如细胞、支架材料(凝胶)等肝组织培养室29内的物质流入至培养基排出通道35所引起的培养基排出通道35的堵塞得以防止。但在本发明的细胞培养用设备中，也可不配置过滤片17(第2多孔膜)。
另外，上述实施例的细胞培养用设备1、71具有主体部分3以及可拆装地安装于主体部分3的盖部分5。进而，肝组织培养室29(第1培养室)形成于主体部分3，并且在主体部分3的与盖部分5的接触面具有开口。由此，在使主体部分3与盖部分5分离后的状态下，能够不经由培养基供给通道33(第1导入流路)及培养基排出通道35(第1排出流路)而向肝组织培养室29配置例如细胞、支架材料、培养基等物质。但本发明的细胞培养用设备也可为不配备可拆装的主体部分与盖部分的构造。
进而，在上述实施例的细胞培养用设备1、71中，主体部分3及盖部分5的接触面的材料是由PDMS或硅橡胶形成。由此，无须使用例如螺钉、粘结剂等特殊固定手段，即可通过自吸附性将盖部分5稳定地固定于主体部分3。进而，可视需要轻易拆装主体部分3与盖部分5。但主体部分3及盖部分5的接触面的材料并不限定于PDMS及硅系橡胶，也可为其他材料。
另外，上述实施例的细胞培养用设备1、71具有主体部分3的与盖部分5的接触面形成为凸形状的凸部11c。由此，使得主体部分3与盖部分5的接触面的平面尺寸小于细胞培养用设备1、71的平面尺寸。通过减小主体部分3与盖部分5的接触面，力朝不需要的部分的分散得到抑制。由此，主体部分3与盖部分5的密接性得到提高。另外，也可仅在盖部分5的与主体部分3的接触面形成有凸形状，并且，也可在主体部分3和盖部分5两方的接触面形成有凸形状。另外，在本发明的细胞培养用设备中，主体部分3及盖部分5的接触面也可均为平坦面。
另外，在上述实施例的细胞培养用设备1、71中，肠上皮细胞培养室31(第2培养室)形成于盖部分5。由此，可将形成有第1培养室的主体部分与形成有第2培养室的盖部分分离，从而在第1培养室内和第2培养室内在互不相同的条件及环境下培养细胞。但在本发明的细胞培养用设备中，肠上皮细胞培养室31(第2培养室)也可形成于主体部分3，并且，也能以跨越主体部分3和盖部分5的方式形成。
符号说明
1 细胞培养用设备
3 主体部分
5 盖部分
15 过滤片(第1多孔膜)
17 过滤片(第2多孔膜)
29 肝组织培养室(第1培养室)
31 肠上皮细胞培养室(第2培养室)
33 培养基供给通道(第1导入流路)
35 培养基排出通道(第1排出流路)
37 试剂导入通道(第2导入流路)
39 试剂排出通道(第2排出流路)
41 液体提取部
53 送液泵
61 透析部。

Claims (10)

1.一种细胞培养用设备，其特征在于，包括：
第1培养室；
第1导入流路及第1排出流路，它们连接于所述第1培养室；
第2培养室，其经由第1多孔膜而连接于所述第1导入流路的中途；以及
第2导入流路及第2排出流路，它们连接于所述第2培养室。
2.根据权利要求1所述的细胞培养用设备，其特征在于，
所述第1排出流路经由第2多孔膜而连接于所述第1培养室。
3.根据权利要求1或2所述的细胞培养用设备，其特征在于，
所述第1导入流路在所述第1培养室与所述第2培养室之间配备有液体提取部，
所述液体提取部其壁面的至少一部分由弹性构件形成，所述弹性构件能够被尖端锐利的吸引器具贯穿，并且，在贯穿后，当拔出所述吸引器具时，可通过弹性将该贯穿孔闭合。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的细胞培养用设备，其特征在于，具有主体部分以及可拆装地安装于所述主体部分的盖部分，
所述第1培养室形成于所述主体部分，并且在所述主体部分的与所述盖部分的接触面具有开口。
5.根据权利要求4所述的细胞培养用设备，其特征在于，
所述主体部分及所述盖部分的接触面中的至少任一面形成为凸形状，
所述主体部分与所述盖部分的接触面的平面尺寸小于该设备的平面尺寸。
6.一种细胞培养用系统，其特征在于，包括：
根据权利要求1-5中任一项所述的细胞培养用设备；以及
培养基供给部，其通过将泵连接至所述细胞培养设备而将培养基供给至所述第1培养室内。
7.一种细胞培养方法，其特征在于，使用根据权利要求1-5中任一项所述的细胞培养用设备，且依序包括如下步骤：
在所述第1培养室内和所述第2培养室内分别培养细胞；以及
将所述第2培养室内的液体经由所述第1多孔膜和所述第1导入流路而导入至所述第1培养室。
8.根据权利要求7所述的细胞培养方法，其特征在于，使用根据权利要求4所述的细胞培养用设备，在将所述主体部分与所述盖部分相互分离后的状态下，在所述第1培养室的所述主体部分和形成于所述盖部分的所述第2培养室内分别培养细胞，之后将所述主体部分与所述盖部分接合。
9.根据权利要求8所述的细胞培养方法，其特征在于，
在所述第1培养室中容纳成为细胞的支架材料的凝胶，并在所述凝胶上形成具有管状构造的所述共培养系的网络构造。
10.根据权利要求8或9所述的细胞培养方法，其特征在于，
从所述第2导入流路将试剂导入至培养有所述来源于肠的细胞的所述第2培养室，并将由此获得的所述来源于肠的细胞的代谢物经由所述第1多孔膜和所述第1导入流路而导入至所述第1培养室。
CN201810615456.7A 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法 Pending CN108841728A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810615456.7A CN108841728A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810615456.7A CN108841728A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法
CN201480076730.8A CN106103691A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法
PCT/JP2014/060572 WO2015159333A1 (ja) 2014-04-14 2014-04-14 細胞培養用デバイス、細胞培養用システム及び細胞培養方法

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480076730.8A Division CN106103691A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108841728A true CN108841728A (zh) 2018-11-20

Family

ID=54323585

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810615456.7A Pending CN108841728A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法
CN201480076730.8A Pending CN106103691A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480076730.8A Pending CN106103691A (zh) 2014-04-14 2014-04-14 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法

Country Status (4)

Country Link
US (2) US10301586B2 (zh)
JP (1) JP6236522B2 (zh)
CN (2) CN108841728A (zh)
WO (1) WO2015159333A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7158679B2 (ja) * 2018-07-18 2022-10-24 株式会社島津製作所 細胞培養装置および細胞播種方法
WO2023026147A1 (en) * 2021-08-24 2023-03-02 Stellenbosch University A bioreactor for contactless co-culturing

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1460122A (zh) * 2000-07-19 2003-12-03 格米赛尔有限公司 细胞培养室与动物细胞体外培养用生物反应器
CN1875093A (zh) * 2003-11-10 2006-12-06 先进制药科学股份有限公司 细胞培养器材和使用方法
CN101962615A (zh) * 2009-07-22 2011-02-02 贝克顿·迪金森公司 多层组织培养容器
CN202658162U (zh) * 2012-06-28 2013-01-09 段为钢 一种多室共培养装置
CN103502426A (zh) * 2011-02-28 2014-01-08 哈佛大学校长及研究员协会 细胞培养系统

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3923279A1 (de) 1989-07-14 1990-01-18 Will W Prof Dr Minuth Minusheets ist ein neues produkt, um zellen in beliebigen behaeltnissen in hochdifferenzierter form auf einer moeglichst natuerlichen unterlage zu kultivieren
JPH1175821A (ja) 1997-09-01 1999-03-23 Res Dev Corp Of Japan 複数種の細胞を培養する生化学反応装置及び生化学反応方法
CA2479072A1 (en) * 2002-03-12 2003-12-18 Surface Logix, Inc. Assay device that analyzes the absorption, metabolism, permeability and/or toxicity of a candidate compound
US20060263873A1 (en) * 2005-05-21 2006-11-23 Levine Leanna M Controlled flow microfluidic device and method of fabrication
JP2009529888A (ja) 2006-03-14 2009-08-27 ユニバーシティ オブ ロチェスター 超薄多孔質メンブレンを有する細胞培養装置およびその使用
US9249383B2 (en) * 2008-10-08 2016-02-02 Agency For Science Technology & Research Apparatus for culturing anchorage dependent cells
JP5686310B2 (ja) 2010-05-25 2015-03-18 株式会社島津製作所 細胞培養デバイス、細胞培養システム、及び細胞培養方法
CN201853877U (zh) * 2010-09-09 2011-06-01 泰科电子(上海)有限公司 槽口隔离装置、线缆分布模块以及通信线路分布组件
JP5700460B2 (ja) * 2010-09-10 2015-04-15 株式会社島津製作所 細胞培養デバイス及び細胞培養方法
JP5731421B2 (ja) 2012-02-15 2015-06-10 株式会社島津製作所 細胞培養デバイス
CN202849409U (zh) 2012-10-23 2013-04-03 杭州赫贝科技有限公司 一种细胞共培养瓶

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1460122A (zh) * 2000-07-19 2003-12-03 格米赛尔有限公司 细胞培养室与动物细胞体外培养用生物反应器
CN1875093A (zh) * 2003-11-10 2006-12-06 先进制药科学股份有限公司 细胞培养器材和使用方法
CN101962615A (zh) * 2009-07-22 2011-02-02 贝克顿·迪金森公司 多层组织培养容器
CN103502426A (zh) * 2011-02-28 2014-01-08 哈佛大学校长及研究员协会 细胞培养系统
CN202658162U (zh) * 2012-06-28 2013-01-09 段为钢 一种多室共培养装置

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FEDERICO VOZZI ET AL: "《Connected Culture of Murine Hepatocytes and Human Umbilical Vein Endothelial Cells in a Multicompartmental Bioreactor》", 《TISSUE ENGINEERING: PART A》 *

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2015159333A1 (ja) 2017-04-13
CN106103691A (zh) 2016-11-09
WO2015159333A1 (ja) 2015-10-22
US10301586B2 (en) 2019-05-28
US20170029759A1 (en) 2017-02-02
US20190185802A1 (en) 2019-06-20
JP6236522B2 (ja) 2017-11-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Caplin et al. Microfluidic organ‐on‐a‐chip technology for advancement of drug development and toxicology
Duzagac et al. Microfluidic organoids-on-a-chip: Quantum leap in cancer research
JP7460832B2 (ja) 肉製品を成長させるための装置及び基材
JP5042235B2 (ja) 細胞および組織の培養のためのバイオリアクター
Moll et al. Tissue engineering of a human 3D in vitro tumor test system
US11566224B2 (en) Dendritic cell generator
JP2022130625A (ja) 細胞培養システム
CN113302276A (zh) 树突状细胞生成设备和方法
JP2016202180A (ja) 細胞培養器、及び、細胞培養システム
Ya et al. On-chip construction of liver lobules with self-assembled perfusable hepatic sinusoid networks
CN103789206B (zh) 基于微流控技术的成骨细胞电刺激系统的操作方法
Wang et al. A 3D construct of the intestinal canal with wrinkle morphology on a centrifugation configuring microfluidic chip
Yen et al. Efficient generation of hepatic cells from mesenchymal stromal cells by an innovative bio-microfluidic cell culture device
CN108841728A (zh) 细胞培养用设备、细胞培养用系统及细胞培养方法
ES2964374T3 (es) Aislamiento de células madre del tejido adiposo
CN103966093B (zh) 适用于胚胎细胞体外动态循环非接触共培养系统及方法
CN109906267B (zh) 微型生物反应器组件
CN108485973A (zh) 一种细胞共培养平板流动腔及其流体切应力刺激方法
JPWO2018155607A1 (ja) 細胞処理装置、浮遊培養器、及び幹細胞の誘導方法
Ingber Enabling out-of-body experiences for living organs
CN113811597A (zh) 细胞培养器及细胞培养装置
CN209243074U (zh) 一种用于培养肝癌切片的微流控芯片
CN205258447U (zh) 一种基于内含物和贯通孔道的细胞芯片
CN105838606B (zh) 一种高通量细胞联合培养芯片
WO2015068253A1 (ja) 肝組織培養用デバイス、肝組織培養用システム、肝組織培の培養方法及び肝機能の評価方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20181120