CN108836956B - 甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 - Google Patents
甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108836956B CN108836956B CN201810494877.9A CN201810494877A CN108836956B CN 108836956 B CN108836956 B CN 108836956B CN 201810494877 A CN201810494877 A CN 201810494877A CN 108836956 B CN108836956 B CN 108836956B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- licochalcone
- necrotic enteritis
- clostridium perfringens
- chickens
- chicken
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/12—Ketones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了甘草查耳酮A在治疗鸡坏死性肠炎中的用途,通过产气荚膜梭菌滑动运动抑制试验、生物被膜形成抑制试验以及雏鸡坏死性肠炎模型试验证甘草查耳酮A对产气荚膜梭菌感染所致的鸡坏死性肠炎具有保护作用。由于传统抗生素的滥用和细菌耐药性的不断加强,甘草查耳酮A具有治愈率高,无耐药性及药物残留的特点,因此甘草查耳酮A用于治疗鸡坏死性肠炎可以增加使用药物的选择性,对开发新药和有着重要意义。
Description
技术领域
本发明公开了甘草查耳酮 A在治疗鸡坏死性肠炎中的用途,涉及甘草查耳酮 A在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的应用,属于医药技术领域。
背景技术
产气荚膜梭菌是一种厌氧性革兰氏阳性芽孢杆菌,广泛存在于自然界的土壤、水体、食物、人畜粪便、家畜饲料及动物肠道中,是人和动物的正常肠道菌群,属条件致病菌。目前根据其分泌的外毒素不同,将其分为A-E 共个5血清型,家禽主要感染A型及C型产气荚膜梭菌,尤以A型为主。产气荚膜梭菌感染家禽后,主要引起坏死性肠炎,其症状表现为鸡只精神委靡、羽毛松乱、食欲减少或废绝,排血便,生产性能严重下降。病变主要集中在小肠部位,表现为肠壁变薄,有局灶性或成片的肠粘膜坏死脱落。据有关研究统计,全球家禽行业因坏死性肠炎造成的经济损失高达数十亿美元,严重危害了家禽养殖业的发展。
产气荚膜梭菌在肠道内的粘附定植主要是通过其四型菌毛(Type IV pili,TFP)介导的。TFP是一种存在于细菌细胞膜上的一种运动器官,TFP使得产气荚膜梭菌具有在其自然生境和软硬琼脂等半固体的介质表面运动的能力,这种特殊的运动方式被称作滑动运动(Gliding motility)。据研究表明,包括产气荚膜梭菌在肠道的粘附定植、滑动运动、生物被膜的形成等细菌功能都与TFP具有一定的联系。通过抑制产气荚膜梭菌TFP的功能,能够干扰细菌在肠道内的粘附定植,从而达到抗产气荚膜梭菌感染的目的。
通过在饲料中添加抗生素是预防并治疗家禽感染坏死性肠炎的主要手段,然而,由于抗生素大量使用所致的细菌耐药性问题及抗生素残留问题对公众健康造成了严重威胁,因此,开发安全有效的抗生素替代物正日益成为研究的热点。天然化合物具有毒性较低、来源丰富、安全范围广等优点,是筛选抗生素替代物的重要资源。
甘草查尔酮 A是从中药甘草中提取得到的一种查尔酮类化合物,主要存在于豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根茎。目前的研究表明,甘草查耳酮 A具有包括抗炎、抗菌、抗肿瘤及抗寄生虫等多种生物学活性。然而,截至目前国内外尚无甘草查耳酮 A用于治疗产气荚膜梭菌所致鸡坏死性肠炎的相关研究。
发明内容
本发明提供了甘草查耳酮 A在治疗鸡坏死性肠炎中的医用用途,对产气荚膜梭菌所致的鸡坏死性肠炎具有良好的治疗效果。
本发明所述的甘草查耳酮 A的分子结构如下所示:
分子式为:C21H22O4 ;分子量:338.39698。
本发明通过产气荚膜梭菌滑动运动抑制试验、生物被膜形成抑制试验以及雏鸡坏死性肠炎模型试验证甘草查耳酮 A对产气荚膜梭菌感染所致的鸡坏死性肠炎具有保护作用:
一、滑动运动抑制试验:
产气荚膜梭菌标准株ATCC13124于液体BHI培养基37 ℃厌氧培养12 h,之后取300μl该培养物继续培养于液体BHI中,37 ℃厌氧培养5 h。取1 ml培养物,10000 g离心弃上清,菌体重悬于500 μl BHI液体培养基中,使之二倍浓缩。之后取5 μl浓缩的菌液分别滴加于预先制备并于37 ℃烘箱干燥1 h的含8 μg/ml、32 μg/ml甘草查耳酮 A的0.7% BHIA的平板上,37 ℃厌氧培养48 h,采集图像(参见图1)。结果表明,8μg/ml及32μg/ml甘草查耳酮 A均能显著抑制产气荚膜梭菌在BHIA上的滑动运动,且32μg/ml甘草查耳酮 A作用效果更为明显。
二、生物被膜形成抑制试验
产气荚膜梭菌于液体BHI中37℃厌氧培养12h,离心弃上清,用灭菌PBS洗涤一次,之后用TSB液体培养基重悬并调整至OD600nm=0.1,取400μl调整后的细菌培养物,加至24孔板中,之后与细菌培养物内分别加入不同浓度的甘草查耳酮 A,使得24孔板内甘草查耳酮 A的终浓度分别为4 μg/ml、8 μg/ml、/16μg/ml及32μg/ml,另设立加入0.4μl过滤灭菌的DMSO(不加入甘草查耳酮 A)的阳性对照组以及400 μl液体TSB培养基的阴性对照组,24孔板置于30 ℃厌氧培养5d。之后吸弃上清,灭菌PBS洗两次,室温干燥30 min,加入过滤灭菌的1%结晶紫400μl,室温孵育30min,弃结晶紫,再次用灭菌PBS洗两次。向每孔中加入33%乙酸溶解结晶紫,吹打混匀后取300 μl分别加入96孔板的3个独立孔中,每孔100μl,于酶标仪570nm测定吸光值,根据结晶紫吸光值计算生物被膜形成率。结果表明,甘草查耳酮 A能够有效抑制产气荚膜梭菌生物被膜的形成(参见图2)。
三、雏鸡坏死性肠炎模型试验的治疗学研究
1、雏鸡坏死性肠炎模型
取17日龄的雄性爱拔益加(Arbor Acre)肉仔鸡经口给予0.5 ml(1×109CFUs)重悬于灭菌PBS的产气荚膜梭菌ATCC13124培养物,次日(18日龄)再次给予相同菌量的菌液以攻菌,建立雏鸡坏死性肠炎模型,健康组鸡只经口给予0.5 ml灭菌PBS作为对照。
2、肠道病变评分试验
雏鸡经口攻菌感染前4 h(17日龄)按鸡只体重经口给予25 mg/kg的甘草查耳酮 A(溶解于灭菌PBS),每12h给药一次。另设立不给药治疗的阳性对照组及不攻菌感染的健康对照组,阳性对照组与健康对照组鸡只同样称重并按体重经口给予相应体积的灭菌PBS。上述三组每组10只鸡,治疗组共给药治疗5天(治疗至21日龄)。21日龄颈椎脱臼处死全部鸡只,剖检,取十二指肠至空肠,肉眼观察肠道病理变化,根据肠道损伤程度进行肠道损伤评分(参见图3)。肠道损伤评分采用0-6分制:0分(没有明显损伤)、1分(肠壁变薄、变脆)、2分(出现1-5个坏死灶)、3分(出现6-15个坏死灶)、4分(出现16个或16个以上坏死灶)、5分(出现2-3 cm长的片状坏死)、6分(出现大片的弥漫性坏死)。另将上述小肠采集病料,HE染色制作病理切片,镜下观察病理组织学变化(参见图4)。
攻菌期间每日对全部肉鸡称重,计算平均体重及日增重,以考察甘草查耳酮 A治疗后对患坏死性肠炎肉鸡日增重的影响(参见图5)。
肠道病变评分结果表明,经甘草查耳酮 A治疗后,显著降低了坏死性肠炎鸡只肠道的病理变化程度。病理组织学观察结果表明,健康组肉鸡小肠肠绒毛结构完整,无出血及炎性渗出;对照组肉鸡小肠绒毛坏死溶解,结构不完整,伴有大量出血;经甘草查耳酮 A治疗后,上述病理组织学损伤明显缓解。日增重结果表明,治疗组肉鸡日增重与健康组肉鸡相近,显著高于感染组肉鸡。
综合以上结果,说明甘草查耳酮 A对产气荚膜梭菌所致的鸡坏死性肠炎具有良好的保护作用。
本发明的积极效果在于:提供了甘草查耳酮 A的一种新医用用途,用于治疗鸡坏死性肠炎,可显著降低坏死性肠炎鸡只肠道的病理变化程度,对产气荚膜梭菌所致的鸡坏死性肠炎具有良好的治疗效果。
附图说明
图1为甘草查耳酮 A均能显著抑制产气荚膜梭菌在BHIA上的滑动运动图片;
图2为甘草查耳酮 A能够有效抑制产气荚膜梭菌生物被膜的形成图;
图3为根据肠道损伤程度进行肠道损伤评分图;
图4为镜下观察病理组织学变化照片;
图5为甘草查耳酮 A治疗后对患坏死性肠炎肉鸡日增重的影响图。
具体实施方式
实施例1
甘草查耳酮 A在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的应用,以甘草查耳酮 A为活性制成药学上可接受任何剂型。
实施例2
甘草查耳酮 A所述的治疗鸡坏死性肠炎指由细菌引起的坏死性肠炎。
实施例3
甘草查耳酮 A所述的治疗鸡坏死性肠炎是指由产气荚膜梭菌引起的坏死性肠炎。
Claims (1)
1.甘草查耳酮 A在制备产气荚膜梭菌ATCC13124感染所致的鸡坏死性肠炎药物中的应用,其特征在于:甘草查耳酮 A通过抑制产气荚膜梭菌ATCC13124的滑动运动以及生物被膜形成,从而抑制产气荚膜梭菌ATCC13124感染。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810494877.9A CN108836956B (zh) | 2018-05-22 | 2018-05-22 | 甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810494877.9A CN108836956B (zh) | 2018-05-22 | 2018-05-22 | 甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108836956A CN108836956A (zh) | 2018-11-20 |
CN108836956B true CN108836956B (zh) | 2021-09-03 |
Family
ID=64213177
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810494877.9A Active CN108836956B (zh) | 2018-05-22 | 2018-05-22 | 甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108836956B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109718227B (zh) * | 2018-12-13 | 2021-02-26 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 补骨脂查尔酮和异补骨脂查尔酮的用途 |
CN110037997B (zh) * | 2019-06-20 | 2022-09-23 | 山西省农业科学院饲料兽药研究所 | 甘草查尔酮a在制备抗副猪嗜血杆菌药物中的应用 |
CN113499328B (zh) * | 2021-08-06 | 2022-12-30 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 甘草查尔酮a在制备抗艰难梭菌感染药物中的应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104337799A (zh) * | 2013-07-25 | 2015-02-11 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 甘草查尔酮a的抗菌用途 |
-
2018
- 2018-05-22 CN CN201810494877.9A patent/CN108836956B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104337799A (zh) * | 2013-07-25 | 2015-02-11 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 甘草查尔酮a的抗菌用途 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
Inflammatory responses to a Clostridium perfringens type A strain and α-toxin in primary intestinal epithelial cells of chicken embryos;Shuangshuang Guo, et al.;《Avian Pathology》;20150305;第44卷(第2期);81–91 * |
Licochalcone A Inhibits Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Response in Vitro and in Vivo;Xiao Chu, et al.;《J. Agric. Food Chem.》;20120308;第60卷;3947-3954 * |
含查尔酮结构(E)-4-[3-(取代苯基)丙烯酰基]苯甲酸钠的制备及抑菌活性研究;郭沂涛等;《动物医学进展》;20151231;第36卷(第12期);36-40 * |
甘草查尔酮A对THP-1巨噬细胞促炎因子表达的影响——依赖于TLR-4/NF-κB炎症信号通路;龙小琴等;《中国动脉硬化杂志》;20171231;第25卷(第12期);1212-1218 * |
细菌感染肠上皮细胞时的细胞因子表达水平与坏死性肠炎的关系;杜兴等;《中国现代医学杂志》;20021231;第12卷(第23期);23-25 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108836956A (zh) | 2018-11-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108836956B (zh) | 甘草查耳酮a在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途 | |
CN111909904B (zh) | 一株巴氏杆菌噬菌体、其噬菌体组合物及其应用 | |
CN115607577B (zh) | 一种具有缓解口腔炎症功效的益生菌剂及其制备方法和应用 | |
WO2020149647A1 (ko) | 페디오코쿠스 이노피나투스를 포함하는 퇴행성 뇌질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
CN116076736B (zh) | 一种抗幽养胃组合物及其应用 | |
CN105287790A (zh) | 一种鸡矢藤提取物及其应用 | |
CN115216423B (zh) | 一种动物双歧杆菌sf及其在医药和食品中的应用 | |
CN116942706B (zh) | Akkermansia muciniphila在制备预防、治疗和/或辅助治疗肠炎的产品中的应用 | |
CN108309969B (zh) | 鸢尾黄素在治疗鸡坏死性肠炎中的医用用途 | |
DK1587913T3 (da) | Nye stammer af Bifidobacterium, som har evnen til at producere glutamin | |
CN116790402B (zh) | 一株具有抗炎特性的单形拟杆菌菌株、培养方法及应用 | |
CN115517367B (zh) | 副干酪乳杆菌smn-lbk在制备促进肠道健康产品中的应用 | |
CN108853081B (zh) | 穗花杉双黄酮在制备治疗鸡坏死性肠炎的药物中的用途 | |
CN102813910B (zh) | 一种用于防治禽类气囊炎的药物组合物及其制备方法 | |
CN109700833B (zh) | 一种用于治疗便秘的药物组合物及其制备方法和应用 | |
CN116172997A (zh) | 苯基乳酸在抑制幽门螺杆菌感染中的应用 | |
CN101780064B (zh) | 对羟基肉桂酸的用途 | |
CN111617203B (zh) | 组合物在预防或治疗因感染大肠杆菌所引发的疾病中的应用 | |
JP2023504887A (ja) | サルモネラ菌iii型分泌系阻害剤の製造におけるミリセチンの使用 | |
CN101780266A (zh) | 防治畜禽呼吸道疾病的复方制剂 | |
CN111714557A (zh) | 一种治疗仔猪腹泻的中药组合物 | |
CN106924229A (zh) | 根皮素在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的应用 | |
CN114748484B (zh) | 熊去氧胆酸在制备大肠杆菌性腹泻病防治药物中的应用 | |
CN113425713B (zh) | 一种治疗十二指肠溃疡的药物组合物 | |
CN116211896B (zh) | 嗜黏蛋白阿克曼菌jf3在干预放射性直肠病中改善组织纤维化和修复黏膜破损的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20221226 Address after: 442100 No.2 Yingbin Avenue, Chengguan Town, Fang County, Shiyan City, Hubei Province Patentee after: HUBEI WUDANG ANIMAL PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Address before: 442100 No.2 Yingbin Avenue, Chengguan Town, Fang County, Shiyan City, Hubei Province Patentee before: Chen Guoming |
|
TR01 | Transfer of patent right |