CN108834902A - 一种小果印加果的组织培养快繁方法 - Google Patents

一种小果印加果的组织培养快繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108834902A
CN108834902A CN201810878336.6A CN201810878336A CN108834902A CN 108834902 A CN108834902 A CN 108834902A CN 201810878336 A CN201810878336 A CN 201810878336A CN 108834902 A CN108834902 A CN 108834902A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
fruitlet
bud
print
fruit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810878336.6A
Other languages
English (en)
Inventor
陈鸿鹏
王建忠
谢耀坚
彭彦
詹妮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CHINA EUCALYPT RESEARCH CENTER
Original Assignee
CHINA EUCALYPT RESEARCH CENTER
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CHINA EUCALYPT RESEARCH CENTER filed Critical CHINA EUCALYPT RESEARCH CENTER
Priority to CN201810878336.6A priority Critical patent/CN108834902A/zh
Publication of CN108834902A publication Critical patent/CN108834902A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明提供一种小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株。本发明的小果印加果的组培快繁方法操作难度低、生产成本低，生根率高达95％以上，生产的组培苗移栽成活率高，易于在大范围内推广使用。

Description

一种小果印加果的组织培养快繁方法
技术领域
本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种小果印加果的组织培育快繁方法。
背景技术
小果印加果(Plukenetia volubilis)为大戟科(Euphorbiaceae)多年木质生藤本植物，天然分布在南美洲的秘鲁热带森林。小果印加果当年种植，当年开花挂果，2～3年后即可进入盛果期，果实为蒴果，具4～6 个棱角，每个棱角内含1粒种子。种子长22～35mm，宽18～26mm，厚12～15mm，重3.01～3.95g。种子主要成分为油脂(35～60％)、蛋白质(27％)、维生素以及甾醇等生物活性物质，以及生物碱和香豆素等次生代谢物，其中多元不饱和脂肪酸总量高达92％以上，明显高于其它油料植物，可用于食品、保健品、制药、化妆品等，具有调整血脂、预防心血管疾病、保养肌肤等显著功效，凭借组成成分优良、营养品种高，被认为是世界上最好的植物油之一。
小果印加果是我国最新引进的藤本食用油植物，主要在云南、广西、广东、海南地区种植。目前苗木繁殖主要通过种子播种、扦插及嫁接繁殖方式。种子播种，一般2～3年进入盛果期才可产生明显的经济效益，周期较长，而且分化严重，难以保持优良亲本的优良性状，同时利用种子进行繁殖，会占用一部分的榨油原料。扦插和嫁接繁殖，操作繁琐，需要大量母株枝条，效率较低，在一定程度上制约效果印加果的规模化生产。而组织培育快繁方法，具有繁殖系数高、繁殖速度快，保持优良母株的优良性状等特点，对小果印加果规模、产业化发展具有促进作用。
发明内容
本发明公开了一种小果印加果的组培快繁方法，该方法选择长势旺盛、无病虫害的小果印加果单株作为取材母株，采用茎尖作为外殖体，以带有潜伏芽的茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽进行继代增殖培养、生根培养和生根苗移栽，获得再生植株。本发明的印加果组培快繁方法，操作难度较低、无菌芽繁殖体系生长稳定，重复性良好，可反复多代规模扩繁，剪切芽苗生根培养后，生根率高，移植后能成活，苗木生长正常，并能保持原株的优良遗传性状。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种小果印加果的组织培养快繁方法，选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株；该方法包括以下步骤:
(1)无菌芽诱导:选取小果印加果当年生带节茎段为外植体,剪去嫩梢段和叶片，切成长2～3cm的半木质化茎段，用纯净水清洗干净；经70％酒精消毒5～10秒种后，用无菌水冲洗3～5次，洗去残留酒精，再用1.5％次氯酸钠浸泡并搅拌8～12分钟，然后用无菌水冲洗 5～6次，经无菌滤纸吸干水分后，切去叶柄和茎段的两端，接种到诱导培养基上，在温度26±2℃条件下全暗培养8～12天，直至诱导形成无菌芽。
(2)继代增殖培养:选取步骤(1)形成的没有污染的无菌芽，剪切后转到增殖培养基上进行继代培养，在每天光照12～16小时，光照强度为2000～2500lx，温度26±2℃的条件下培养18～23天，以促进丛芽增殖和生长，依据继代苗质量，20～25天进行一次继代增殖培养。
(3)生根培养:将步骤(2)继代培养的长至2～3cm，并有2～4对叶片的芽苗切取并接种到生根培养基上进行培养，在温度26±2℃℃，光照强度1200～1500lx的弱光条件下培养培养5～10天，当切口冒出短根或根点，然后置于光照强度为2000～5000lx的自然光下，每天光照12～16小时，温度28～35℃的条件下培养20～25天。
(4)洗苗移栽:将步骤(3)生根培养的5～8cm且根系齐全的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用0.1％KMnO4消毒过的黄心土、椰糠和泥炭土做基质的育苗营养杯，培养25～40天，得到再生植株。
所述步骤(1)中的诱导培养基为：MS+0.05～0.2mg/L N6苄基腺嘌呤(6-BA)+0.0～0.1mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH 为5.7。
所述步骤(2)中的继代增殖培养基为：MS+0.05～0.2mg/L N6苄基腺嘌呤(6-BA)+0.0～0.1mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
所述步骤(3)中的生根培养基为：改良MS+0.2～0.8mg/L抗核抗体(ANA)+1.5～2.5mg/L吲哚丁酸(IBA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7；所述改良MS中硝酸铵和硝酸钾的浓度均为MS的一半。
所述步骤(4)中的育苗营养杯基质配比：黄心土、椰糠和泥炭土配比为1:2:1。
本发明的有益效果在于：
1、本发明采用小果印加果的组培快繁材料是经过栽培试验检测过的，组培原株的产果量和抗逆性是可靠的，所有培育的目标明确，而非随机和盲目。
2、本发明的组培快繁方法中，采用芽器官(带潜伏芽的茎段) 离体诱导丛生芽，不经过愈伤组织途径，无菌芽诱导过程中没有经过脱分化过程，培育的组培苗遗传性状稳定，能够完整保持小果印加果优良原株的遗传特性，不易发生变异。
3、本发明的小果印加果的组培快繁方法操作难度低、生产成本低，生根率高达95％以上，生产的组培苗移栽成活率高，易于在大范围内推广使用，采用本发明的小果印加果的组培快繁方法可以获得大量整齐一致，遗传性状稳定的再生植株，试验结果稳定，重复性良好，可应用于大规模商品化育苗，苗木能够保持原株的优良遗传性状，适合大面积区域种植。
附图说明
图1是印加果优良单株(2年生)；
图2是印加果带芽茎段作为外殖体，诱导萌生的无菌芽；
图3是印加果无菌芽继代增殖苗；
图4是印加果瓶内生根苗；
图5是印加果组培成苗。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围。在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动都将落入本发明的权利要求范围之内。
实施例1
一种小果印加果的组织培养快繁方法，选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株；该方法包括以下步骤:
(1)无菌芽诱导:选取小果印加果当年生带节茎段为外植体,剪去嫩梢段和叶片，切成长2-3cm的半木质化茎段，用纯净水清洗干净；经70％酒精消毒6秒种后，用无菌水冲洗4次，洗去残留酒精，再用 1.5％次氯酸钠浸泡并搅拌8分钟，然后用无菌水冲洗5次，经无菌滤纸吸干水分后，切去叶柄和茎段的两端，接种到诱导培养基上，在温度25℃条件下全暗培养15天，直至诱导形成无菌芽，诱导成功率 92％。所述诱导培养基为：MS+0.15mg/L N6苄基腺嘌呤 (6-BA)+0.05mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(2)继代增殖培养:选取步骤(1)形成的没有污染的无菌芽，剪切后转到增殖培养基上进行继代培养，在每天光照16小时，光照强度为2500lx，温度25℃的条件下培养22天，以促进丛芽增殖和生长， 25天进行一次继代增殖培养，增殖倍数达6.5。所述继代增殖培养基为：MS+0.15mg/L N6苄基腺嘌呤(6-BA)+0.10mg/L萘乙酸 (NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(3)生根培养:将步骤(2)继代培养的长至2～3cm，并有2～4对叶片的芽苗切取并接种到生根培养基上进行培养，在温度25℃，光照强度1500lx的弱光条件下培养培养7天，当切口冒出短根或根点，然后置于自然光下，每天光照14小时，温度26℃的条件下培养23天，生根率达到85％。所述生根培养基为：改良MS(硝酸铵/2和硝酸钾/2)+0.3mg/L萘乙酸(NAA)+2.5mg/L吲哚丁酸(IBA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(4)洗苗移栽:将步骤(3)生根培养的5～8cm且根系齐全的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用0.1％KMnO4消毒过的黄心土、椰糠和泥炭土做基质的育苗营养杯，培养30天，得到再生植株，移栽成活率达到95％。所述育苗营养杯基质配比：黄心土、椰糠和泥炭土配比为 1:2:1。
实施例2
一种小果印加果的组织培养快繁方法，选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株；该方法包括以下步骤:
(1)无菌芽诱导:选取小果印加果当年生带节茎段为外植体, 剪去嫩梢段和叶片，切成长2-3cm的半木质化茎段，用纯净水清洗干净；经70％酒精消毒8秒种后，用无菌水冲洗3次，洗去残留酒精，再用1.5％次氯酸钠浸泡并搅拌10分钟，然后用无菌水冲洗5次，经无菌滤纸吸干水分后，切去叶柄和茎段的两端，接种到诱导培养基上，在温度26℃条件下全暗培养12天，直至诱导形成无菌芽，诱导成功率95％。所述诱导培养基为：MS+0.1mg/L N6苄基腺嘌呤 (6-BA)+0.05mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(2)继代增殖培养:选取步骤(1)形成的没有污染的无菌芽，剪切后转到增殖培养基上进行继代培养，在每天光照16小时，光照强度为2000lx，温度25℃的条件下培养23天，以促进丛芽增殖和生长， 25天进行一次继代增殖培养，增殖倍数达8.5。所述继代增殖培养基为：MS+0.1mg/L N6苄基腺嘌呤(6-BA)+0.05mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L 蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(3)生根培养:将步骤(2)继代培养的长至2～3cm，并有2～4对叶片的芽苗切取并接种到生根培养基上进行培养，在温度25℃，光照强度1200lx的弱光条件下培养培养5天，当切口冒出短根或根点，然后置于自然光下，每天光照16小时，温度25℃的条件下培养25天，生根率达到97.5％。所述生根培养基为：改良MS(硝酸铵/2和硝酸钾/2)+0.5mg/L萘乙酸(NAA)+2.0mg/L吲哚丁酸(IBA)+30g/L蔗糖 +8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(4)洗苗移栽:将步骤(3)生根培养的5～8cm且根系齐全的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用0.1％KMnO4消毒过的黄心土、椰糠和泥炭土做基质的育苗营养杯，培养35天，得到再生植株，移栽成活率达到100％。所述育苗营养杯基质配比：黄心土、椰糠和泥炭土配比为1:2:1。
实施例3
一种小果印加果的组织培养快繁方法，选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株；该方法包括以下步骤:
(1)无菌芽诱导:选取小果印加果当年生带节茎段为外植体,剪去嫩梢段和叶片，切成长2～3cm的半木质化茎段，用纯净水清洗干净；经70％酒精消毒8秒种后，用无菌水冲洗3次，洗去残留酒精，再用1.5％次氯酸钠浸泡并搅拌10分钟，然后用无菌水冲洗5次，经无菌滤纸吸干水分后，切去叶柄和茎段的两端，接种到诱导培养基上，在温度26℃条件下全暗培养12天，直至诱导形成无菌芽，诱导成功率92.5％。所述诱导培养基为：MS+0.15mg/L N6苄基腺嘌呤 (6-BA)+0.1mg/L萘乙酸(NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(2)继代增殖培养:选取步骤(1)形成的没有污染的无菌芽，剪切后转到增殖培养基上进行继代培养，在每天光照14小时，光照强度为2200lx，温度27℃的条件下培养20天，以促进丛芽增殖和生长， 25天进行一次继代增殖培养，增殖倍数达8.0。所述继代增殖培养基为：MS+0.15mg/L N6苄基腺嘌呤(6-BA)+0.05mg/L萘乙酸 (NAA)+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(3)生根培养:将步骤(2)继代培养的长至2～3cm，并有2～4对叶片的芽苗切取并接种到生根培养基上进行培养，在温度25℃，光照强度1200lx的弱光条件下培养培养10天，当切口冒出短根或根点，然后置于自然光下，每天光照16小时，温度26℃的条件下培养25天，生根率达到95％。所述生根培养基为：改良MS(硝酸铵/2和硝酸钾/2)+0.8mg/L萘乙酸(NAA)+1.5mg/L吲哚丁酸(IBA)+30g/L蔗糖 +8.0g/L琼脂，pH为5.7。
(4)洗苗移栽:将步骤(3)生根培养的5～8cm且根系齐全的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用0.1％KMnO4消毒过的黄心土、椰糠和泥炭土做基质的育苗营养杯，培养40天，得到再生植株，移栽成活率达到100％。所述育苗营养杯基质配比：黄心土、椰糠和泥炭土配比为1:2:1。
对比例1
与实施例1相同，除了诱导培养基为MS。
对比例2
与实施例1相同，除了继代增殖培养基为MS。
对比例3
与实施例1相同，除了生根培养基为MS。
表1
序号 生根率 成活率
实施例1 97％ 95％
实施例2 96％ 94％
实施例3 96％ 93％
对比例1 92％ 89％
对比例2 91％ 87％
对比例3 87％ 84％
本发明的小果印加果的组培快繁方法操作难度低、生产成本低，生根率高达95％以上，生产的组培苗移栽成活率高，易于在大范围内推广使用，采用本发明的小果印加果的组培快繁方法可以获得大量整齐一致，遗传性状稳定的再生植株，试验结果稳定，重复性良好，可应用于大规模商品化育苗，苗木能够保持原株的优良遗传性状，适合大面积区域种植。

Claims (5)

1.一种小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：选取印加果优良单株，利用当年生带芽茎段为外植体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培养、生根培养和洗苗移栽，获得再生植株；该方法包括以下步骤:
(1)无菌芽诱导:选取小果印加果当年生带节茎段为外植体,剪去嫩梢段和叶片，切成长2～3cm的半木质化茎段，用纯净水清洗干净；经70％酒精消毒5～10秒种后，用纯净水冲洗3～5次，洗去残留酒精，再用1.5％次氯酸钠浸泡并搅拌8～12分钟，然后用无菌水冲洗5～6次，经无菌滤纸吸干水分后，切去叶柄和茎段的两端，接种到诱导培养基上，在温度26±2℃条件下全暗培养8～12天，直至诱导形成无菌芽；
(2)继代增殖培养:选取步骤(1)形成的没有污染的无菌芽，剪切后转到增殖培养基上进行继代培养，在每天光照12～16小时，光照强度为2000～2500lx，温度26±2℃的条件下培养18～23天，以促进丛芽增殖和生长，依据继代苗质量，20～25天进行一次继代增殖培养；
(3)生根培养:将步骤(2)继代培养的长至2～3cm，并有2～4对叶片的芽苗切取并接种到生根培养基上进行培养，在温度26±2℃，光照强度1200～1500lx的弱光条件下培养培养5～10天，当切口冒出短根或根点，然后置于光照强度为2000～5000lx的自然光下，每天光照12～16小时，温度26±2℃的条件下培养20～25天；
(4)洗苗移栽:将步骤(3)生根培养的5～8cm且根系齐全的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用0.1％KMnO4消毒过的黄心土、椰糠和泥炭土做基质的育苗营养杯，培养25～40天，得到再生植株。
2.根据权利要求1所述的小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：所述步骤(1)中的诱导培养基为：MS+0.05～0.2mg/L N6苄基腺嘌呤+0.0～0.1mg/L萘乙酸+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
3.根据权利要求1所述的小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：所述步骤(2)中的继代增殖培养基为：MS+0.05～0.2mg/L N6苄基腺嘌呤+0～0.1mg/L萘乙酸+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7。
4.根据权利要求1所述的小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：所述步骤(3)中的生根培养基为：改良MS+0.2～0.8mg/L萘乙酸+1.5～2.5mg/L吲哚丁酸+30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂，pH为5.7；所述改良MS中硝酸铵和硝酸钾的浓度均为MS的一半。
5.根据权利要求1所述的小果印加果的组织培养快繁方法，其特征在于：所述步骤(4)中的育苗营养杯基质配比：黄心土、椰糠和泥炭土配比为1:2:1。
CN201810878336.6A 2018-08-03 2018-08-03 一种小果印加果的组织培养快繁方法 Pending CN108834902A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810878336.6A CN108834902A (zh) 2018-08-03 2018-08-03 一种小果印加果的组织培养快繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810878336.6A CN108834902A (zh) 2018-08-03 2018-08-03 一种小果印加果的组织培养快繁方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108834902A true CN108834902A (zh) 2018-11-20

Family

ID=64192380

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810878336.6A Pending CN108834902A (zh) 2018-08-03 2018-08-03 一种小果印加果的组织培养快繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108834902A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114532228A (zh) * 2022-03-21 2022-05-27 玉林师范学院 一种星油藤六倍体植株的培育方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104488722A (zh) * 2014-12-24 2015-04-08 广西大学 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法
CN104737914A (zh) * 2015-04-16 2015-07-01 江西北辰德天然生物科技有限公司 一种龙脑樟组织培养方法
CN104798684A (zh) * 2015-04-25 2015-07-29 玉林师范学院 一种星油藤的组织培养快繁方法
CN105123521A (zh) * 2015-09-06 2015-12-09 湖南省林业科学院 一种金银花直接体胚发生和植株再生的培养基及方法
CN105340747A (zh) * 2015-11-27 2016-02-24 中国科学院华南植物园 一种甘草无性快速繁殖方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104488722A (zh) * 2014-12-24 2015-04-08 广西大学 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法
CN104737914A (zh) * 2015-04-16 2015-07-01 江西北辰德天然生物科技有限公司 一种龙脑樟组织培养方法
CN104798684A (zh) * 2015-04-25 2015-07-29 玉林师范学院 一种星油藤的组织培养快繁方法
CN105123521A (zh) * 2015-09-06 2015-12-09 湖南省林业科学院 一种金银花直接体胚发生和植株再生的培养基及方法
CN105340747A (zh) * 2015-11-27 2016-02-24 中国科学院华南植物园 一种甘草无性快速繁殖方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王振龙: "《植物组织培养》", 30 June 2007, 中国农业大学出版社 *
龙伟忠: "《园林苗木生产技术》", 30 September 2015, 苏州大学出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114532228A (zh) * 2022-03-21 2022-05-27 玉林师范学院 一种星油藤六倍体植株的培育方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101120653B (zh) 无籽罗汉果及其培育方法
CN103444552B (zh) 一种诱导茄子花药再生单倍体植株的方法
CN102845313A (zh) 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法
CN102715092B (zh) 利用原叶体增殖途径快速繁育鸟巢蕨种苗的方法
CN101595824B (zh) 用檀香树种子胚离体快速育苗的方法
CN103651111B (zh) 榨菜与紫甘蓝三基因组异源六倍体蔬菜种质及获取方法
CN112970585A (zh) 一种面包果种苗的高通量繁育方法
CN108077068A (zh) 一种猕猴桃无菌种苗的快速繁殖方法
CN109258469B (zh) 一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法
CN108353790A (zh) 一种花生高油品种的培育方法
CN108064699B (zh) 一种葛根植物的组织离体培养繁殖方法
CN116671438B (zh) 一种延长海伦兜兰茎干进行快速育苗的方法
CN116584381B (zh) 一种山苍子胚性愈伤组织诱导培养基及诱导方法
CN110800609B (zh) 一种利用胚性愈伤组织进行钻喙兰人工快繁的方法
CN104620993B (zh) 一种退化非洲菊更新复壮的方法
CN108834902A (zh) 一种小果印加果的组织培养快繁方法
CN105379621A (zh) 一种大岛樱成年优良单株“小乔”樱的高效离体植株再生方法
KR101887221B1 (ko) 기내배양에 의한 대나무 대량증식 방법
CN106605596B (zh) 一种通过体胚发生大量繁殖忽地笑的方法
CN109566417A (zh) 一种虫草参的组织培养方法
CN104429940A (zh) 一种获得草莓脱毒苗的方法
CN101743909B (zh) 八角科植物“孩儿莲”的组织培养繁殖方法
CN108719061B (zh) 一种诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法
JP2017176142A (ja) イチゴ無病苗の生産方法
CN101390495A (zh) 一种非基因型依赖橡胶树自根无性系离体繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20181120