CN108802228A - 一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于农药残留的筛查与检测技术领域，具体涉及一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法。包括以下步骤：1)样品处理：采用甲醇‑乙腈‑正己烷的混合溶液对样品进行前处理；2)配制保留时间校准工作溶液；3)保留时间的校准：在设定色谱和质谱条件下，测定保留时间校准工作溶液，如所有组份的保留时间偏差均在2.5％以内，则确定方法及数据库信息可用，可以进行样品的筛查；4)筛查判定：将步骤1)处理好的样品后注入三重四级杆气相色谱质谱联用仪，测定样品与自建的保留时间和化合物信息数据库进行对比。本发明采用气相色谱‑质谱联用的方法检测化妆品中多种农残的方法，具有灵敏度高、准确、可靠的优点。

Description

一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法

技术领域

本发明属于农药残留的筛查与检测技术领域，具体涉及一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法。

背景技术

我国是一个农业大国，农药残留在农业生产中有着举足轻重的作用，从开始运用农药残留的上世纪中期到目前为止大约有上千种农药残留被广泛使用于农业病虫害防治。虽然目前各国都致力于研究高效、低毒的农药残留，但是农药残留过度使用的情况仍然十分普遍。

化妆品是人们生活中必不可少的必需品，近年来化妆品中的农药残留也越来越受到广泛关注。但现有的检测方法存在耗时费力，检测效率低下等技术缺陷，

因此，如何研发一种可实现化妆品中多种农药残留的同时检测，特别是样品中多种农药残留的筛查、确证就显得尤为必要。

本发明采用气相色谱-质谱联用的方法检测化妆品中多种农残的方法，该方法灵敏度高、准确、可靠。通过本发明的检测方法可以更加严格的控制产品质量，确保产品的品质和提高安全性。

发明内容

本发明提供一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，通过保留时间和数据库(自建)信息比对快速筛查化妆品及其原料中137种农药组份，从而解决现有技术中存在的耗时费力、检测效率低下的问题。

本发明的方法如下：一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于包括以下步骤：1)样品处理：称取样品1g于50mL离心管中，加30mL甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液涡旋震荡2min，再超声提取15min后，冷却至室温，加入甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液定容至刻度，摇匀，经0.22μm有机相滤膜过滤，滤液作为待测样液备用；2)保留时间校准工作溶液的配置：选择极性不同，保留时间涵盖整个检测范围的农残组份作为保留时间校准工作溶液，分别称取上述10种农药标准品20mg精确到0.0001g于10mL容量瓶中，以甲醇-乙腈-正己烷-混合溶液溶解并定容至10mL，配成2g/L的单标溶液；吸取适量的标准储备溶液，至100mL容量瓶用甲醇-乙腈-正己烷混合溶液定容，得到1.0mg/L的混合保留时间校准工作溶液；3)保留时间的校准：在设定色谱和质谱条件下，测定保留时间校准工作溶液，如所有组份的保留时间偏差均在2.5％以内，则确定方法及数据库信息可用，可以进行样品的筛查；如有一个以上组份的保留时间偏差超过2.5％，则需更新方法和数据库保留时间信息，更新后再进行样品的筛查；4)筛查判定：将步骤1)处理好的样品后注入三重四级杆气相色谱质谱联用仪，测定样品与自建的保留时间和化合物信息数据库进行对比；若样品待测组分保留时间和化合物信息均不在数据库范围内的，则判定该物质为阴性；若样品待测组分保留时间和化合物信息均在数据库范围内的，则判定该物质为阳性；若样品待测组分保留时间和数据库信息有偏差，但化合物信息在数据库范围内的，则判定该物质为疑是阳性；结果为阳性或者疑是阳性，则使用标准品再进行确证和定量计算。

所述的甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液中甲醇：乙腈：正己烷的体积比为3:1:1。

色谱条件为40℃保持1min，25℃/min升至90℃，保持2min，25℃/min升至180℃，保持0min，5℃/min升至280℃，保持0min，10℃/min升至300℃，保持5min，流量为1.2mL/min，进样口温度为270℃，进样量为1μL，进样方式采用不分流进样。

质谱条件为采用电子轰击源EI作为离子源，碰撞能量为70eV，离子源温度300℃，传输线温度300℃。

所述步骤2)中农残组分包括敌敌畏、灭克磷、乙烯菌核利、毒死蜱、杀扑磷、苯嗪草酮、克瘟散、甲氰菊酯、蝇毒磷、溴氰菊酯。

本发明的计算结果采用如下方程式计算：

式中：ω——化妆品中农残组分的含量，μg/g；

ρ——从曲线待测样液中组份的浓度，μg/mL；

V——样品定容体积，mL；

m——样品用量，g。

D——稀释倍数

该方法对137种农药残留的回收率为87.6％-103.5％，精密度为1.6％-5.8％。

在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10％。

本发明提供的化妆品中农药残留的筛查及定量方法具有简单快速、重现性好、灵敏度高、检测精确等优点；采用自制的甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液对样品进行前处理，精密度高；采用三重四级杆气相色谱-质谱联用技术，能够对化妆品中137中常见农药残留同时提取、净化、筛查，填补了领域空白，高效、快速、精确、灵敏。

附图说明

图1为本发明方法的技术路线示意图。

图2为化妆品中137种农药残留的总离子流图。

具体实施方式

本方法为化妆品及其原材料中农药残留的快速筛查、定性和定量提供方法，本方法为137种常用农药残留的三重四级杆气相色谱-质谱联用测定方法，适用于化妆品中137种农药残留鉴别和定量。

本方法选择在化妆品及其原材料中常见的137种农药残留作为研究对象，建立了化妆品中农药残留快速筛查方法和定量方法。快速筛查方法是通过保留时间和数据库(自建)信息比对快速筛查化妆品及其原料中137种农药组份。使用标准品对疑是阳性的组分进行确证，以外标法对阳性组分定量。

试验所用试剂包括：乙腈，色谱纯；甲醇，色谱纯；正己烷，色谱纯。

仪器包括：气相色谱-串联四级杆质谱仪，配有电子轰击离子源；电子天平；涡旋混合仪；超声波水浴。

分析步骤包括：样品处理称取样品约1g(精确至1mg)于50mL离心管中，加30mL甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液涡旋震荡2min，再超声提取15min后，冷却至室温，加入甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液定容至刻度，摇匀，经0.22μm有机相滤膜过滤，滤液作为待测样液备用。

仪器条件：

色谱参考条件：色谱柱：Thermo TG-5MS UI，30m×0.25mm×0.25μm；

升温程序：40℃保持1min，25℃/min升至90℃，保持2min，25℃/min升至180℃，保持0min，5℃/min升至280℃，保持0min，10℃/min升至300℃，保持5min。

流量：1.2mL/min；

进样口温度：270℃；

进样量：1μL。

进样方式：不分流进样；

质谱参考条件

离子源：电子轰击源(EI)；

碰撞能量70eV；

离子源温度300℃；

传输线温度300℃；

监测方式：多反应监测(MRM)，定性离子对、定量离子对和碰撞能量参见表2。

样品筛查

保留时间校准工作溶液的配置

选择极性不同，保留时间涵盖整个检测范围的农残组份(敌敌畏、灭克磷、乙烯菌核利、毒死蜱、杀扑磷、苯嗪草酮、克瘟散、甲氰菊酯、蝇毒磷、溴氰菊酯)作为保留时间校准工作溶液，分别称取上述10种农药标准品20mg(精确到0.0001g)于10mL容量瓶中，以甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液溶解并定容至10mL，配成约2g/L的单标溶液。分别0.05mL吸取适量的标准储备溶液，至100mL容量瓶用甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液定容，得到1.0mg/L的混合保留时间校准工作溶液。

保留时间的校准

在设定色谱和质谱条件下，测定保留时间校准工作溶液。如所有组份的保留时间偏差均在2.5％以内，则确定方法及数据库信息可用，可以进行样品的筛查。如有一个以上组份的保留时间偏差超过2.5％，则需更新方法和数据库保留时间信息，更新后再进行样品的筛查。

筛查判定

将处理好样品注入三重四级杆气相色谱质谱联用仪，测定样品，与自建的保留时间和化合物信息数据库进行对比。若样品待测组分保留时间和化合物信息均不在数据库范围内的，则判定该物质为阴性。若样品待测组分保留时间和化合物信息均在数据库范围内的，则判定该物质为阳性。若样品待测组分保留时间和数据库信息有偏差，但化合物信息在数据库范围内的，则判定该物质为疑是阳性。结果为阳性或者疑是阳性，则使用标准品再进行确证和定量计算。样品的确证与定量测定

137种农药残留标准储备溶液：

分别称取农药标准品20mg(精确到0.0001g)于10mL容量瓶中，以甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液溶解并定容至10mL，配成约2g/L的单标溶液。

混合标准工作溶液：

根据需要分别吸取适量的标准储备溶液，至适宜容量瓶用甲醇-乙腈-正己烷(3+1+1)混合溶液定容，得到混合标准储备溶液。分别准确移取混合标准储备溶液0.25ml、0.5ml、1ml、2.5ml、5ml、10mL至10mL容量瓶，定容后得到混合标准系列溶液。

样品测定：

在设定色谱和质谱条件下，测定待测溶液。

样品的确证与定量测定：

按照上述条件测试样液和系列标准工作溶液，若样液中色谱法保留时间和标准溶液偏差范围在5％以内；且样液中目标化合物的各离子和保持和标准溶液的一致，相对丰度比偏差某种表1的规定，则可以判定样品中含有该目标化合物。最后根据标准曲线求出各种农药成分的含量。

表1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度(k)	k>50％	50％≥k>20％	20％≥k>10％	k≤10％
					允许的最大偏差	±20％	±25％	±30％	±50％

结果计算：

式中：ω——化妆品中农残组分的含量，μg/g；

ρ——从曲线待测样液中组份的浓度，μg/mL；

V——样品定容体积，mL；

m——样品用量，g。

D——稀释倍数

回收率精密度：

该方法对137种农药残留的回收率为87.6％-103.5％，精密度为1.6％-5.8％。

测定低限：当取样量为1.0g时，本方法测定低限为(0.2-1)ug/g，线性范围为4μg/L～1000μg/L。允许差：在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10％。

表2 137种农药的保留时间、离子对、碰撞能量和相对丰度

上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (5)

1.一种化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于，包括以下步骤：1)样品处理：称取样品1g于50mL离心管中，加30mL甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液涡旋震荡2min，再超声提取15min后，冷却至室温，加入甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液定容至刻度，摇匀，经0.22μm有机相滤膜过滤，滤液作为待测样液备用；2)保留时间校准工作溶液的配置：选择极性不同，保留时间涵盖整个检测范围的农残组份作为保留时间校准工作溶液，分别称取上述10种农药标准品20mg精确到0.0001g于10mL容量瓶中，以甲醇-乙腈-正己烷-混合溶液溶解并定容至10mL，配成2g/L的单标溶液；吸取适量的标准储备溶液，至100mL容量瓶用甲醇-乙腈-正己烷混合溶液定容，得到1.0mg/L的混合保留时间校准工作溶液；3)保留时间的校准：在设定色谱和质谱条件下，测定保留时间校准工作溶液，如所有组份的保留时间偏差均在2.5％以内，则确定方法及数据库信息可用，可以进行样品的筛查；如有一个以上组份的保留时间偏差超过2.5％，则需更新方法和数据库保留时间信息，更新后再进行样品的筛查；4)筛查判定：将步骤1)处理好的样品后注入三重四级杆气相色谱质谱联用仪，测定样品与自建的保留时间和化合物信息数据库进行对比；若样品待测组分保留时间和化合物信息均不在数据库范围内的，则判定该物质为阴性；若样品待测组分保留时间和化合物信息均在数据库范围内的，则判定该物质为阳性；若样品待测组分保留时间和数据库信息有偏差，但化合物信息在数据库范围内的，则判定该物质为疑是阳性；结果为阳性或者疑是阳性，则使用标准品再进行确证和定量计算。

2.如权利要求1所述的化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于：所述的甲醇-乙腈-正己烷的混合溶液中甲醇：乙腈：正己烷的体积比为3:1:1。

3.如权利要求1所述的化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于：色谱条件为40℃保持1min，25℃/min升至90℃，保持2min，25℃/min升至180℃，保持0min，5℃/min升至280℃，保持0min，10℃/min升至300℃，保持5min，流量为1.2mL/min，进样口温度为270℃，进样量为1μL，进样方式采用不分流进样。

4.如权利要求1所述的化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于：质谱条件为采用电子轰击源EI作为离子源，碰撞能量为70eV，离子源温度300℃，传输线温度300℃。

5.如权利要求1所述的化妆品及其原料中农药残留的筛查及定量方法，其特征在于：所述步骤2)中农残组分包括敌敌畏、灭克磷、乙烯菌核利、毒死蜱、杀扑磷、苯嗪草酮、克瘟散、甲氰菊酯、蝇毒磷、溴氰菊酯。