CN108774600B - 一种内镜清洗保湿剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种内镜清洗保湿剂,以重量份数计,包括:多羟基化合物4‑14份、硼酸酯化合物0.1‑2份、生物水解酶0.5‑5份、表面活性剂0.1‑2.0份、水50‑200份,其中,表面活性剂为至少一种阳离子型表面活性剂和至少一种非离子型表面活性剂的混合物。本发明的内镜清洗保湿剂具有对内镜活检管道的清洁、保湿、消毒预处理的能力,能够使内镜活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物在未干涸前快速有效分解,预防细菌生物膜生成,并且能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭大部分病原微生物,缩短内镜清洗消毒时间,提高内镜的周转使用率,降低医疗成本。
Description
技术领域
本发明属于医疗器械清洗用品领域,涉及一种清洗保湿剂,具体涉及一种内镜清洗保湿剂及其制备方法。
背景技术
据报道临床上有65%的细菌性感染是由细菌生物膜所引起。随着对内镜细菌生物膜基础研究的逐渐深入,人们更注重临床上如何预防及清除内镜生物膜为重要的研究发展方向。现代观点认为生物膜是由微生物及与其周围不可逆结合的细胞外多聚体所共同构成的生态群落,它往往可根据微生物的生长速度及基因转录表现出不同的表现型。生物膜引起的生物材料相关性感染广泛分布于临床各科,内镜手术感染、留置导尿管相关感染、静脉留置针相关感染、人工股骨头相关感染等,且由于生物膜的庇护作用,这些感染往往不能由抗生素的应用所克服。内镜生物膜引起的相关感染己多次见诸报道,生物膜对于内镜的危害目前也渐渐得到大家的重视。目前导致内镜清洗消毒失败的主要原因是内镜管路内腔生物膜的形成,即便很好的按照感染控制原则清洗消毒内镜仍然有2-5%内镜手术导致患者细菌感染,最终原因就是内镜管腔内壁形成生物膜,临床上使用中的内镜内管壁生物膜生长的现象十分普遍,可见内镜管路中生物膜容易发生存在,必须有效清除生物膜。导致内镜生物膜难以完全清除的主要原因有:
1、由于内镜的结构复杂,材质昂贵,无法做高温高压灭菌处理,内镜的频繁使用,导致化学消毒时间太短,无法有效全部杀死官腔内的致病微生物。
2、许多人为因素使内镜清洗、消毒流程操作不规范,导致内镜洗消失败,其中重要的因素是内镜未能及时清洗,导致活检管道内所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物极干涸,极易使各种细菌在此生长、繁殖,形成细菌囊袋,导致细菌生物膜生长。一旦生物膜形成可降低消毒剂对细菌和病毒的穿透力和灭活作用,导致消毒失败。
目前在内镜检查或内镜下手术后,在内镜与光源或视频处理器拆离之前,会立即使用含有清洗液的湿巾或湿纱布擦去内镜外表面的污染物,活检管道反复送气、送水10秒以完成对内镜的预清洁,然后再送至清洗消毒室进行清洁消毒。在此过程中,内镜活检管道内所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物,器械上粘附的人体分泌物变性后产生纤维膜状粘附在其表面,导致清洗困难,尤其是各类缝隙处。各种细菌在此生长、繁殖,形成细菌囊袋,导致内镜的管道表面就会形成细菌生物膜,而一旦生物膜形成后,用常规的清洗方法几乎无法彻底清除生物膜,从而造成消毒或灭菌的失败,进而导致交叉感染的发生,由内镜清洗和消毒不彻底而造成医院感染已成为当前一个重要的临床问题。同时使得在清洗消毒操作时间,清洗剂的用量增加,这些操作将可能导致在清洗时划伤内镜,腐蚀内镜,降低内镜使用寿命。而大量采用清洗剂与内镜更换导致的高昂价格都将导致广大患者医疗费用的提高。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种内镜清洗保湿剂及其制备方法,将其用于内镜活检管道的清洁、保湿、消毒预处理,可使内镜活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物在未干涸前快速有效分解,预防细菌生物膜生成,并且能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭大部分病原微生物,缩短内镜清洗消毒时间,提高内镜的周转使用率,降低医疗成本。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种内镜清洗保湿剂,以重量份数计,包括:多羟基化合物4-14份、硼酸酯化合物0.1-2份、生物水解酶0.5-5份、表面活性剂0.1-2.0份、水50-200份,优选为多羟基化合物8-14份、硼酸酯化合物0.1-0.5份、生物水解酶1-3份、表面活性剂0.1-0.5份、水80-160份;
表面活性剂为至少一种阳离子型表面活性剂和至少一种非离子型表面活性剂的混合物。
本发明的内镜清洗保湿剂具有对内镜活检管道的清洁、保湿、消毒预处理的能力,能够使内镜活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物在未干涸前快速有效分解,预防细菌生物膜生成,并且能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭大部分病原微生物,缩短内镜清洗消毒时间,提高内镜的周转使用率,降低医疗成本。
出乎意料地,发明人发现包含多羟基化合物、硼酸酯化合物、生物水解酶、非离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的内镜清洗保湿剂能够有效有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭大部分病原微生物,并且预防新的生物膜的形成,缩短内镜清洗消毒时间。尤其令人惊讶的是,本发明中硼酸酯化合物能够有效提高生物水解酶的稳定性,并且还能促进蛋白酶对蛋白质污染物的分解作用。
本发明的内镜清洗保湿剂具有以下优点:
(1)本发明提供的内镜清洗保湿剂具有对内镜活检管道保持湿润的功能,能够使内镜活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物在进行清洗前保持湿润,缩短清洗时间。
(2)本发明提供的内镜清洗保湿剂能够快速分解活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物,预防细菌生物膜生成,并且能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭病原微生物,缩短内镜消毒时间,提高内镜的周转使用率。降低医疗成本。
(3)本发明提供的内镜清洗保湿剂具有保持生物水解酶活性的优点,使生物水解酶在常温下不容易失去活性,在储存过程中不容易出现混浊、变色等现象,储存周期长达两年以上。
(4)本发明提供的内镜清洗保湿剂具有良好的生物相容性,对医疗器械具腐蚀性小,尤其是是不容易造成内镜的损伤,对内镜的各种组件都具有良好的相容性,尤其是内镜活检管道,还包括手柄、手柄连接部、按钮、密封圈、弯曲橡皮、插入管外套、导光缆插入部、塑料管都有良好的材料相容性,同时还对其他器械材料,例如碳钢、铜、铝、不锈钢、塑料、橡胶、硅胶、乳胶、玻璃等均有良好的材料相容性。
(5)本发明提供的内镜清洗保湿剂具有使用方便,直接使用不需要进行稀释等繁琐的劳动,能够降低医护人员的劳动强度,还能通过监测溶液颜色的变化,避免因清洗时的温度过高,导致蛋白酶的变性,生物水解酶活力丧失,而导致清洗消毒失败。同时本发明提供的内镜清洗保湿剂还具有制备工艺简单,生产成本低廉的优点,能够有效降低医疗成本。
进一步,多羟基化合物为丙三醇和1,2-丙二醇以质量比3:1混合的混合物。
丙三醇和1,2-丙二醇均为小分子多羟基化合物,具有无毒、无刺激的特性,具有良好的亲水性,主要保湿原理是结构中含有数个羟基,依赖氢键,能帮助锁住细菌生物膜、血液、胃肠道粘液及其他有机物中的水分,保持内镜活检管道内壁的湿润,防止内镜活检管道中所残留的细菌生物膜、血液、胃肠道粘液及其他有机物在清洗前干涸。
发明人发现内镜清洗保湿剂中丙三醇和1,2-丙二醇的质量比为3:1时,能够有效抑制由水分子作为氢键的供体,和生物水解酶分子骨架及侧链上的化学键竞争形成氢键,而导致蛋白酶分子骨架的解题,从而提高生物水解酶活力地稳定。
进一步,生物水解酶为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶或纤维素酶的一种或几种的混合,优选为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶以质量比6:2:1:1混合的混合物。
当细菌附着到内镜活检管道内壁上残存的污染物表面上后,含水聚合物结构将自发生成并结集到一起,从而形成由蛋白质、细胞外多糖类等胞外产物而吸附于固体表面的微生物集落构成的生物膜,并能结合有机和无机成分,形成包含复杂的理化过程和生物群落的相互作用。这些生物膜的组成成分和结构相似,结构和功能密切相关,表现着协调统一性。细菌生物膜具有很强的结合力,消毒剂很难渗透到细菌生物膜的内部,能够有效抵御消毒剂的作用,是内镜消毒灭菌失败的最重要的原因。
生物水解酶虽然无法直接杀灭细菌生物膜中病原微生物,但是本发明提供的生物水解酶组合物,能够有效将蛋白质、细胞外多糖类等胞外产物分解为小分子化合物,使生物膜内部的病原微生物直接暴露于内镜清洗保湿剂的作用之下,促进生物膜的瓦解。
生物水解酶易变性失活,在受到紫外线、热、射线、表面活性剂、金属盐、强酸、强碱及其它化学试剂如氧化剂、还原剂等因素影响时,酶蛋白的二级、三级结构有所改变,易于形成沉淀或立即发生不可逆的变性。
生物水解酶是具一类具有催化活性和高度专一性的特殊蛋白质,一种酶只能催化一类物质的化学反应,即酶是仅能促进特定化合物、特定化学键、特定化学变化的催化剂,其作用特点是极高的催化效率,比化学催化反应活性高107-1018倍。酶催化反应不象一般催化剂需要高温、高压、强酸、强碱等剧烈条件,而可在较温和的常温、常压下进行,另外,酶需要在特定条件下催化效率达最大值,适合的pH与温度。
本发明的蛋白酶由枯草芽孢杆菌发酵生成,枯草芽孢杆菌发酵生成的蛋白酶,其活性中心含丝氨酸,故称丝氨酸蛋白酶,采用蛋白酶可将蛋白污渍水解成肽和氨基酸以有效地除去血液、组织液、各种腔道的分泌液等蛋白类污染物;脂肪酶能将大分子油脂类污染物水解成小分子的单酸甘油酯、甘油二酯、脂肪酸和甘油等,以便于能清洗掉;淀粉酶能将黏多糖、食物残渣等大分子多糖类污染物水解成小分子的葡萄糖等化合物;纤维素酶能将食物残渣等大分子纤维类污染物水解成小分子成寡糖或单糖。
进一步,硼酸酯化合物的化学式为CXHYNZBO3;
其中X为2-20的整数,Y为6-30的整数、Z为0-4的整数,优选为X为2-6的整数,Y为8-12的整数、Z为1-2的整数。
发明人发现化学式为CXHYNZBO3的硼酸酯化合物,能有效有效提高提高生物水解酶的稳定性,硼酸酯化合物能够与由氨基酸长链组成,通过特定折叠方式连接起来提高生物水解酶的活性中心结合,使提高生物水解酶有活性的三维结构空间稳定,牢牢将提高生物水解酶的肽链结合在一起,增强生物水解酶的稳定性。
本发明添加硼酸酯化合物的内镜清洗保湿剂能够有效提高蛋白酶对蛋白质类污染物的分解能力,提高对内镜活检管道地清洗能力,缩短清洗时间。
进一步,非离子表面活性剂为封端异构醇醚共聚物、烷基乙基氧化物或脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚化合物的一种或几种。
非离子表面活性剂选自封端异构醇醚共聚物、烷基乙基氧化物,脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚化合物以及它们的组合物。
非离子表面活性剂是指在水溶液中不产生离子的表面活性剂,因为在溶液中不是离子状态,所以稳定性高,不易受强电解质无机盐类存在的影响,也不易受PH值的影响,具有良好的材料、环境相容性。
非离子表面活性剂选自封端异构醇醚共聚物、烷基乙基氧化物,脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚化合物以及它们的组合物,具有很强的渗透力和去污力,能够渗透到血液、胃肠道粘液及其他有机物内部,有助于与生物水解酶协同对污染物的分解,提高清洗能力。同时其具有强大渗透力还可以将生物水解酶、阳离子表面活性剂共同带到细菌生物膜的内部,在其协同作用之下,将细菌生物膜牢固的保护层瓦解,并最终杀灭生物膜内部的病原微生物。
众所周知表面活性剂具有清洁,洗涤、分散、乳化、起泡、润湿、等作用,可以清洁能力,因为它们趋于具有发泡特性,而过量泡沫可导致清洁功效降低。
因此本发明提供的封端异构醇醚共聚物、烷基乙基氧化物,脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚化合物以及它们的组合物,还具有低泡、抑泡的特性,即使经过剧烈的震荡也不会产生大量的泡沫,还能有效抑制其他发泡物质产生的泡沫,这有助于提高洗消能力。
进一步,非离子表面活性剂的浊点在40-55℃,优选42-45℃的范围内。
温度是影响生物水解酶活力最重要的因素之一,在一定温度范围内,生物水解酶活力随着温度的上升而增加,当温度上升到一定程度,生物水解酶活力开始急剧下降,无法有效分解污染物。目前临床上为了提高清洗效率,缩短清洗时间,通常会采取加温的方法来提高生物水解酶的活力,然而在实际的操作中,由工作人员的操作失误、仪器故障及其他外界因素经常导致清洗时的温度过高,导致蛋白酶的变性,生物水解酶活力丧失,导致清洗消毒失败。
当溶液的温度超过45℃时,生物水解酶的活力会急剧下降,而此时溶液中非离子表面活性剂由于的亲水性因氢键的改变,溶液从最初的透明溶液变为白色浑浊溶液,从而可以有效来通过这一变化来监督溶液的温度是否超过最佳温度范围,简便、直观,具有临床应用价值。
进一步,阳离子表面活性剂的结构式为:
其中R1和R2分别为具有2-20个碳原子的直链或支链的烷基基团,x、y和z分别为1-15独立的整数,W为Cl或Br。
具有上述结构的阳离子表面活性剂,分子中拥有双季铵盐结构,具有更强大的杀菌能力,比传统季铵盐的杀菌能力高10倍以上,杀菌能力不受有机污染物的影响,具有较高的表面活性,降低溶液表面张力的能力和效率更加突出,能够与细菌生物膜的结合更紧密,与生物水解酶,非离子表面活性剂协同作用,高效杀灭隐藏在生物膜中的病原微生物,将细菌生物膜完全瓦解,有效降低因细菌生物膜引起的交叉感染。同时还具有良好的洗涤能力,其刺激性小,使用量较低,能够降低生产成本。
本发明采用具有上述结构的阳离子表面活性剂与生物水解酶具有良好的生物相容性,并不像传统的季铵盐会造成生物水解酶结构的破坏。
本发明还提供了一种内镜清洗保湿剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一,按上述重量份数称取各原料;
步骤二,将硼酸酯化合物加入到自重10倍的水中搅拌溶解,然后加入生物酶搅拌溶解,静置得到A液;
步骤三,将多羟基化合物、表面活性剂依次加入到剩余的水中,搅拌溶解,得到B液;
步骤四,将A液加入到B液中搅拌溶解即得所述内镜清洗保湿剂。
进一步,步骤二中所述溶解的温度为10-30℃,静置的时间为30-60分钟。
进一步,步骤四中所述搅拌溶解的时间为20分钟。
进一步,搅拌的速率为100-200转/分钟。
本发明的制备方法简单易操作,条件温和,过程可控,制备过程无三废产生,绿色环保,所制备的清洗保湿剂具有对内镜活检管道较好的清洁、保湿、消毒预处理的能力。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1
步骤一,将硼酸三丁酯0.1kg加入到1.0kg水中,100转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶0.3kg、脂肪酶0.1kg、淀粉酶0.05kg、纤维素酶0.05kg,100转/分钟搅拌溶解10分钟,静止30分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇3.0kg和1、2-丙二醇1.0kg、封端异构醇醚共聚物0.05kg、乙撑基双(十二烷基聚氧乙烯基溴化铵)0.05kg依次加入到199kg水中,100转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中100转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例2:
步骤一,将硼酸三乙酯2.0kg加入到20.0kg水中,120转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶3kg、脂肪酶1kg、淀粉酶0.5kg、纤维素酶0.5kg,120转/分钟搅拌溶解10分钟,静止60分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇10.5kg和1、2-丙二醇3.5kg、封端异构醇醚共聚物1.0kg、乙撑基双(十六烷基聚氧乙烯基氯化铵)1.0kg依次加入到100kg水中,120转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中120转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例3:
步骤一,将硼酸三异丙酯0.5kg加入到5.0kg水中,100转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶1.2kg、脂肪酶0.4kg、淀粉酶0.2kg、纤维素酶0.2kg,100转/分钟搅拌溶解10分钟,静止40分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇9.0kg和1、2-丙二醇3.0kg、烷基乙基氧化物0.2kg、乙撑基双(十八烷基聚氧乙烯基氯化铵)0.5kg依次加入到45kg水中,100转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中100转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例4:
步骤一,将单乙醇胺硼酸酯1.0kg加入到10kg水中,150转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶0.6kg、脂肪酶0.2kg、淀粉酶0.1kg、纤维素酶0.1kg,150转/分钟搅拌溶解10分钟,静止40分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇6.0kg和1、2-丙二醇2.0kg、烷基乙基氧化物0.5kg、丙撑基双(十二烷基聚氧乙烯基氯化铵)1.3kg依次加入到150kg水中,150转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中150转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例5:
步骤一,将二乙醇胺硼酸酯1.5kg加入到15kg水中,180转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶2.4kg、脂肪酶0.8kg、淀粉酶0.4kg、纤维素酶0.4kg,180转/分钟搅拌溶解10分钟,静止50分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇4.5kg和1、2-丙二醇1.5kg、脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚1.2kg、丙撑基双(十六烷基聚氧乙烯基溴化铵)0.5kg依次加入到90kg水中,180转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中180转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例6:
步骤一,将三乙醇胺硼酸酯0.2kg加入到2.0kg水中,200转/分钟搅拌溶解10分钟,然后依次加入蛋白酶0.6kg、脂肪酶0.2kg、淀粉酶0.1kg、纤维素酶0.1kg,200转/分钟搅拌溶解10分钟,静止30分钟,得到A液;
步骤二,将丙三醇9.0kg和1、2-丙二醇3.0kg、脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚0.3kg、丙撑基双(十八烷基聚氧乙烯基溴化铵)0.2kg依次加入到100kg水中,200转/分钟搅拌溶解10分钟,得到B液;
步骤三,将A液加入到B液中200转/分钟搅拌溶解20分钟。
实施例7
以实施例1制备的内镜清洗保湿剂为实验组;以纯化水为对照组;进行内镜清洗保湿剂保湿效果测试,测试方法为:在25℃,相对湿度为50%的条件下分别将4g实验组样品和对照组样品均匀喷撒在装有40cm2洁净干燥的桌面上,记录0h,0.5h和2h桌面的湿润程度。
实验结果表明,本发明实施例1制备的内镜清洗保湿剂具有良好的保湿能力,在2个小时内能保持桌面湿润,而以纯化水为对照组在2小时内完全干涸,可见,本发明提供的内镜清洗保湿剂能够具有对内镜活检管道保持湿润的功能,能够使内镜活检管道中所残留的血液、胃肠道粘液及其他有机物在进行清洗前保持湿润,缩短清洗时间。
实施例8
以实施例1-6制备的内镜清洗保湿剂为实验组1-6,分别以0.1%十二烷基硫酸钠、0.1%十二烷基苯磺酸钠、0.1%脂肪醇聚氧乙烯醚,0.1%壬基酚聚氧乙烯醚,0.1%十二烷基二甲基苄基氯化铵、0.1%十六烷基二甲基溴化铵水溶液为对照组1-6,进行内镜清洗保湿剂泡沫性能测试,测试方法为:分别将50ml实验组样品和对照组样品置于100ml具塞量筒中,剧烈摇晃20次,30s后记录泡沫高度,结果如表1。
表1内镜清洗保湿剂泡沫性能测试结果
结果表明,本发明实施例1-6提供的内镜清洗保湿剂具有极低的气泡性,泡沫高度在0.2cm以下,接近无泡的水平。而以十二烷基硫酸钠和十二烷基苯磺酸钠为代表的阴离子表面活性剂30秒后泡沫高度分别为28cm和35cm;以脂肪醇聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚为代表的非离子表面活性剂30秒后泡沫高度分别为33cm和21cm;以十二烷基二甲基苄基氯化铵和十六烷基二甲基溴化铵为代表的阳离子表面活性剂30秒后泡沫高度分别为24cm和29cm。充分证明本发明提供的内镜清洗保湿剂具有低泡、抑泡的特性,即使经过剧烈的震荡也不会产生大量的泡沫,这有助于提高洗消能力,避免因大量泡沫的存在而导致清洗消毒失败。
实施例9
以实施例1制备的内镜清洗保湿剂为实验组;以多酶清洗剂1:400的稀释液为对照组,进行内镜清洗保湿剂与金属和非金属材料生物相容性实验,实验材料为:不锈钢GB1220-75、碳钢GB700-65、铜GB2060-80、塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃;实验方法为在37℃的温度下分解将不锈钢GB1220-75、碳钢GB700-65、铜GB2060-80、塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃各约4.0g置于400ml实验组和对照组中,浸泡72小时后取出,冲洗干净后称量,计算腐蚀率,结果如表2。
表2腐蚀率计算结果
结果表明:本发明提供的内镜清洗保湿剂具有极低的腐蚀性,对不锈钢GB1220-75、、塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃的腐蚀率均为0,而对碳钢、铜的腐蚀率分别为0.002mm/a和0.001mm/a,根据对腐蚀率的等级,对不锈钢、碳钢、铜、塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃均为基本无腐蚀。而对照组对不锈钢、碳钢、铜、塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃的腐蚀率分别为0.015mm/a、0.146mm/a、0.033mm/a、0.006mm/a、0.008mm/a、0.005mm/a和0.002mm/a,均为基本无腐蚀。根据对腐蚀率的等级,对照组对不锈钢基本无腐蚀、对碳钢中度腐蚀、对铜轻度腐蚀、对塑料(聚氯乙烯PVC)、硅胶、玻璃均为基本无腐蚀。
实施例10
按下表3称量各组分物质的含量,按照制备方法制备实验组1-8,多酶清洗剂为对照组,进行内镜清洗保湿剂生物水解酶活力稳定性实验,实验方法为:分别将实验组1-8和对照组的样品分别置于37℃的温度下12个月,根据QBT1803-1993工业酶制剂通用实验方法和QB2583-2003纤维素酶制剂中规定的方法分别测定蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶实验前后酶活力,计算12个月后酶活力剩余百分比,结果如表4。
表3实验组1-8各组分物质的含量
表4内镜清洗保湿剂生物水解酶活力稳定性实验结果
实验结果表明37℃的温度下12个月的条件下:
只包含蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶水溶液的实验组1中酶剩余活力只有25%-36%,说明生物水解酶性质十分不稳定,实验组2中添加了非离子表面活性剂烷基乙基氧化物和阳离子表面活性剂丙撑基双(十二烷基聚氧乙烯基氯化铵),对生物水解酶的活力没有影响,不会提高酶的活力,也没有造成酶活力的下降,说明本发明提供的表面活性剂与生物水解酶的生物相容性良好。
实验组3、实验组4和实验组5结果表明添加丙三醇和1、2-丙二醇对生物水解酶的活力会产生影响,实验组3、实验组4和实验组5中丙三醇和1、2-丙二醇的比例分别为1:1、1:3和3:1,实验组3和实验组4对生物水解酶的活力基本没有影响,而实验组5各种酶的活力提高了16%-25%,说明只用丙三醇和1、2-丙二醇的比例为3:1时,对生物水解酶的稳定性有积极的影响。
实验组6和实验组7结果表明硼酸酯化合物和多羟基化合物地组合能够协同作用,能够极大地提高各种生物水解酶地稳定性,只添加硼酸酯化合物地实验组6各种各生物水解酶地活力提高到93%-95%,通过硼酸酯化合物和多羟基化合物协同作用能够将各生物水解酶地活力进一步提高到96%-98%。
实验组8结果表明,传统地阳离子表面活性剂与生物水解酶地相容性较差,能够造成生物水解酶活力的下降。
实验组9结果表明,以市售多酶清洗剂中生物水解酶的活力虽然比实验组1稳定,但酶活力只有41%-63%,表明以市售多酶清洗剂中的酶活力稳定性较差。而本发明提供内镜清洗保湿剂生物水解酶非常稳定,比目前市面产品有很大优势。
实施例11
以实施例1-6制备的内镜清洗保湿剂为实验组1-6;以多酶清洗剂为对照组,进行清洗温度对内镜清洗保湿剂生物水解酶影响实验,实验方法:分别将实施例1-6和对照组的样品加温至41℃的温度和46℃的条件下放置60分钟,根据QBT1803-1993工业酶制剂通用实验方法和QB2583-2003纤维素酶制剂中规定的方法分别测定蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶实验前后酶活力,计算实验后酶活力剩余百分比,观察溶液是否出现混浊现象,记录结果如表5-6。
表5 41℃实验结果
表6 46℃实验结果
结果表明41℃的温度下放置60分钟的条件下:实验组1-6酶活力保持在98%-100%之间,对照组的酶活力保持在90%-94%之间,说明在41℃的温度下短时间内生物水解酶的稳定性良好,实验组1-6和对照组溶液均为澄清透明,未出现混浊现象。
实验结果表明46℃的温度下放置60分钟的条件下:实验组1-6酶活力迅速下降,酶活力只有原来的50%-63%,而对照组的酶活力仅剩下26%-39%之间,说明在超过45℃的温度下即使在较短时间内,生物水解酶也会被迅速破坏。同时实验组1-6溶液由澄清变为混浊,而对照组溶液仍为澄清透明,未出现混浊现象。
实验结果表明本发明提供的内镜清洗保湿剂温度超过45℃的条件下还能通过检测溶液颜色的变化,避免因清洗时的温度过高,导致蛋白酶的变性,生物水解酶活力丧失,而导的致清洗消毒失败。而市售多酶清洗剂的对照组则不具备此能力。
实施例12
以实施例1-6制备的内镜清洗保湿剂为实验组1-6;以多酶清洗剂为对照组1,以0.1%十二烷基硫酸钠溶液为对照组2,分别进行清洗效果实验,模拟污染物为:血液、蛋白、脂类、多糖、纤维素的混合物,实验方法:将含有模拟污染物的载体分别放入盛有300mL实验组1-6和对照组玻璃罐中,加盖。以60r/min的转动速度旋转洗涤10分钟,取下玻璃罐,取出模拟污染物,挂在晾架上,30℃存放4h后,称重。根据清洗前后污染物重量计算清除率,结果如表7。
表7实验组1-6和对照组清除率
实验结果表明,本发明提供的内镜清洗保湿剂对血液、蛋白、脂类、多糖、纤维素等多种污染物均具有极高的污染物清除能力,清除率在97%-99%之间,以市售多酶清洗剂为对照组1的清除率为92%,以0.1%十二烷基硫酸钠溶液为对照组2的清除率为仅为78%。在清除污染物方面本发明提供的内镜清洗保湿剂具有明显的优势。
实施例13
以实施例1-6制备的内镜清洗保湿剂为实验组1-6;以市售多酶清洗剂为对照组进行杀菌实验,实验菌株:大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)实验温度:20℃,杀菌时间:10min,检验依据:卫生部2002年版《消毒技术规范》,记录检验结果如表8.
表8杀菌实验检验结果
实验结果表明:本发明提供的内镜清洗保湿剂具有极强的杀灭微生物的能力,对大肠杆菌(8099)金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、对白色念珠菌(ATCC10231)的杀灭对数值为4.33-5.75。而以市售多酶清洗剂为对照组对大肠杆菌(8099)金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、对白色念珠菌(ATCC10231)的杀灭对数值仅为为0.03-0.26。在杀灭病原微生物方面本发明提供的内镜清洗保湿剂具有明显的优势。
实施例14内镜清洗保湿剂
按表9称量各组分物质的含量,按照制备方法制备实验组1-5,实施例1-6为实验组6-11;以市售多酶清洗剂为对照组,进行生物膜清除实验。
表9实验组1-5各组分物质的含量
生物膜培养模型搭建:
用带有通气孔(过滤层0.22mm)的塞子将烧瓶塞住,通过通气孔延伸到瓶底,另一个软管在TSB液面上。通过蠕动泵和软管子将内径2mm的聚四氟乙烯管相连接组成管道系统,保持在37℃的条件,用蠕动泵在10mL/min的流量下循环,4h/d。每日更换TSB,连续培养5d。第6d用500mL无菌生理盐水以10mL/min的流速冲洗管腔去除管腔内壁的浮游菌。
实验方法:将10cm长,内径2mm含有生物膜的聚四氟乙烯管分别用1000ml实验组1-6和对照组样品中以20mL/min的流速冲洗30分钟,用灭菌镊子将含生物膜的样本取出,用无菌毛刷来回刷洗10次后,放入含100mL洗脱液的试管中,在40KHz的超声波中清洗10min后,进行细菌计数和ATP含量测定,计算生物膜去除效果,结果如表10。
表10生物膜清除实验结果
细菌去除率(%) | ATP含量下降率(%) | |
实验组1 | 12.8 | 33.5 |
实验组2 | 47.6 | 25.3 |
实验组3 | 76.5 | 77.9 |
实验组4 | 78.4 | 80.4 |
实验组5 | 92.3 | 94.5 |
实验组6 | 93.5 | 95.2 |
实验组7 | 91.6 | 93.3 |
实验组8 | 94.7 | 94.1 |
实验组9 | 96.8 | 98.3 |
实验组10 | 95.4 | 95.6 |
实验组11 | 93.8 | 92.7 |
对照组 | 11.4 | 13.7 |
结果表明:只含有生物水解酶和多羟基化合物实验组1对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率只有12.8%,ATP含量下降率为33.5%,只含有表面活性剂和多羟基化合物实验组2对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率为47.6%ATP含量下降率为25.3%,同时含有生物水解酶、表面活性剂和多羟基化合物实验组3对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率升高至76.5%,ATP含量下降率为77.9%,同时含有硼酸酯化合物、生物水解酶、多羟基化合物、非离子表面活性剂和传统阳离子表面活性剂十二烷基二甲基苄基溴化铵的实验组4对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率升高至78.4%,ATP含量下降率为80.4%,而同时含有硼酸酯化合物、生物水解酶、多羟基化合物、非离子表面活性剂和本发明提供的阳离子表面活性剂丙撑基双(十六烷基聚氧乙烯基溴化铵)的实验组5对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率高达92.3%,ATP含量下降率高达94.5%。
实验结果充分证明生物水解酶无法杀灭细菌生物膜中的病原微生物,而阳离子表面活性剂在没有生物水解酶的协同帮助下无法渗透到细菌生物膜内部发挥作用,本发明提供的阳离子表面活性剂具有比传统阳离子表面活性剂更强的杀灭微生物的能力,硼酸酯化合物则能有助于本发明提供的阳离子表面活性剂和生物水解酶的协同效应,提高清除细菌生物膜的能力,彻底杀灭细菌生物膜内部的致病微生物。
实验组6-11对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率为91.6%-96.8%,ATP含量下降率为92.7%-98.3%,而对照组对污染细菌生物膜的聚四氟乙烯管上的细菌去除率仅为11.4%,ATP含量下降率仅为13.7%。充分证明本发明提供的内镜清洗保湿剂能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,对细菌生物膜具有杀灭和清除的作用能够避免交叉污染,降低医疗费用。
实施例15
以实施例6为实验组,以多酶清洗剂为对照组,进行内镜洗消中的应用实验,实验方法为:将待清洁胃镜20条,随机分组,实验组和对照组各10条,编号分别为实验组1-10和对照组1-10,分别将实验组和对照组各10ml填充于胃镜活检管道内30分钟,再按照软式内镜清洗消毒技术规范中规定的方法对胃镜进行清洗和消毒后对胃镜活检管道采样、培养,记录每条胃镜菌落数量,结果如表11。
表11胃镜菌落数量
实验结果表明:本发明提供的内镜清洗保湿剂预处理的内镜100%达到软式内镜清洗消毒技术规范中规定20cfu/条的规定,而使用市售多酶清洗剂为对照组处理的内镜的细菌合格率仅为60%。充分证明本发明提供的内镜清洗保湿剂具有对内镜活检管道保持湿润的功能,预防细菌生物膜生成,并且能够有效裂解内镜活检管道内已有细菌生物膜,杀灭病原微生物,缩短内镜消毒时间,提高内镜的周转使用率,降低医疗成本。
上述实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
Claims (8)
2.根据权利要求1所述的一种内镜清洗保湿剂,其特征在于,所述多羟基化合物为丙三醇和1,2-丙二醇以质量比3:1混合的混合物。
3.根据权利要求1所述的一种内镜清洗保湿剂,其特征在于,所述生物水解酶为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶或纤维素酶的一种或几种的混合。
4.根据权利要求1至3任一项所述的一种内镜清洗保湿剂,其特征在于,所述非离子表面活性剂为封端异构醇醚共聚物、烷基乙基氧化物或脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚化合物的一种或几种。
5.一种内镜清洗保湿剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一,按权利要求1至4任一项所述内镜清洗保湿剂的重量份数称取各原料;
步骤二,将硼酸酯化合物加入到自重10倍的水中搅拌溶解,然后加入生物酶搅拌溶解,静置得到A液;
步骤三,将多羟基化合物、表面活性剂依次加入到剩余的水中,搅拌溶解,得到B液;
步骤四,将A液加入到B液中搅拌溶解即得所述内镜清洗保湿剂。
6.根据权利要求5所述的一种内镜清洗保湿剂的制备方法,其特征在于,步骤二中所述溶解的温度为10-30℃,所述静置的时间为30-60分钟。
7.根据权利要求5所述的一种内镜清洗保湿剂的制备方法,其特征在于,步骤四中所述搅拌溶解的时间为20分钟。
8.根据权利要求5所述的一种内镜清洗保湿剂的制备方法,其特征在于,所述搅拌的速率为100-200转/分钟。
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GR01 | Patent grant | ||
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