CN108771690A

CN108771690A - 一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN108771690A
Application number: CN201810965844.8A
Authority: CN
Inventors: 张声源; 庄远杯; 聂华; 丘波; 林大都; 李云霞
Original assignee: MEDICAL COLLEGE OF JIAYING UNIVERSITY
Current assignee: Jiaying University
Priority date: 2018-08-23
Filing date: 2018-08-23
Publication date: 2018-11-09
Anticipated expiration: 2038-08-23
Also published as: CN108771690B

Abstract

本发明涉及天然药物化学技术领域，具体涉及一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法和应用。所述的制备方法包含如下步骤：S1.取干燥的红冬蛇菰粉碎后用醇提取，浓缩提取液，去除溶剂后得红冬蛇菰醇提物；S2.将红冬蛇菰醇提物加水混悬，然后用有机溶剂萃取1～3次，得红冬蛇菰萃取物，即所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物。由本发明所述的制备方法制备得到的红冬蛇菰提取物具有优异的降血糖或降血脂作用以及α‑葡萄糖苷酶抑制活性。

Description

一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及天然药物化学技术领域，具体涉及一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法和应用。

背景技术

糖尿病是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病患者体内糖、脂肪、蛋白质的代谢紊乱可导致高血压、肾脏病变、血管病变等一系列慢性并发症，糖尿病已成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。国际糖尿病联合会(IDF)最新发布的第8版《糖尿病概览》(Diabetes Atlas)指出，2017年全球约4.25亿成人患糖尿病，预计到2045年，糖尿病患者可能达到6.29亿，每6秒即有1位糖尿病患者死亡，全球每年死于糖尿病的人数超过了疟疾、肺结核与艾滋病的致死人数总和。我国糖尿病患者已超1亿，成人糖尿病和糖尿病前期患病率分别为11.6％和50.1％，呈高度流行态势。

在临床上，糖尿病主要分为1型和2型，其中2型糖尿病患者的比例约为全部糖尿病患者的90％。目前，临床上主要采用化学药物治疗糖尿病，其具有降血糖作用强、起效快的特点，但往往缺乏整体的协调性，同时存在疗效有限、长期用药后毒副作用较大、可能引发和加重并发症等缺点。

现已明确，波动性高血糖比持续性高血糖更能促进糖尿病慢性血管并发症的发生与发展，餐后血糖波动和日内最大血糖波动是造成II型糖尿病患者血管内皮损伤的重要因素，因此，将餐后血糖水平保持接近正常范围，是控制血糖波动、预防心脑血管疾病的发生、降低心脑血管疾病死亡率的重要途径之一。α-葡萄糖苷酶(α-glycosidase)是一类主要分布于小肠上皮绒毛膜刷状沿上，可降解包括蔗糖、麦芽糖、乳糖在内的一系列低聚糖的糖苷酶，主要断裂低聚糖非还原末端的α-1，4糖苷键。α-葡萄糖苷酶抑制剂作为一种作用独特的口服降糖药物，能够严格控制餐后血糖的升高，减轻糖尿病患者高糖环境对机体组织、器官的刺激，延缓糖耐量异常患者向2型糖尿病转化的进程，能克服传统降糖药物的一些缺点，在调节糖脂代谢、提高胰岛素敏感性、保护胰岛细胞功能及改善多种糖尿病并发症等方面具有广泛的应用前景，已经成为单纯饮食控制不佳的2型糖尿病患者的首选药物及1型糖尿病患者使用胰岛素治疗的首选辅助药物。因此，α-葡萄糖苷酶是调控餐后血糖药物的有效靶标，α-葡萄糖苷酶抑制剂(α-glucosidase inhibitor，AGI)是控制餐后血糖的对症治疗药物。目前市售的α-葡萄糖苷酶抑制剂品种少，主要有阿卡波糖(Acarbose，卡博平、拜糖平)、伏格列波糖(Voglibose，倍欣)和米格列醇(Miglitol)，主要是通过竞争性抑制小肠α-葡萄糖苷酶的活性，使淀粉类分解为葡萄糖的速度减缓，从而减缓机体从食物中吸取葡萄糖的速率，降低餐后高血糖水平。然而，以上这些α-葡萄糖苷酶抑制剂均为合成药物，口服时会出现恶心、呕吐等胃肠道不良反应，且其制备工艺繁琐成本高，合成研究进展缓慢，远不能满足临床上的需要。

近年来，为了给临床防治糖尿病及其并发症提供更多的选择，越来越多的学者青睐于从天然产物资源中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂，以期寻找到新的安全、有效的药物，现已发现黄酮类、生物碱类、多糖类、酚类等具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。因此，从天然产物中开发高效、低毒的新型α-葡萄糖苷酶抑制剂亦成为国内外研究抗糖尿病药物和辅助降血糖保健食品的热点之一。

红冬蛇菰(Balanophora harlandii)为蛇菰科(Balanophoraceae)蛇菰属多年生肉质寄生植物，又名红冬菰、石莲花、观音坐莲，具活血化瘀、清热解毒等功效。我国是把蛇菰入药最早的一个国家，历代本草也有记述。《本草纲目》指出“诸名山皆有之，惟太和山采取，云乃葛之精华也。秋霜浮空，如芝、菌涌生地，其色赤脆，盖罩类也”。红冬蛇菰在岭南地区资源较为丰富，常被当地群众作为植物汤料制作药膳用于防治糖尿病和风湿类疾病；此外，由于其外形独特，与肉苁蓉较为相似，民间根据“以形补形”中医养生理念以红冬蛇菰作为原料将其制作补肾药酒。发明人前期对红冬蛇菰进行了体外抗氧化和抑制亚硝化作用研究，实验结果表明，红冬蛇菰提取物具有显著的抗氧化活性和抑制亚硝化作用(张声源，庄远杯，罗铝铿，等，红冬蛇菰提取物抗氧化及抑制亚硝化作用研究，天然产物研究与开发，2017，2081-2086.)。我国红冬蛇菰的资源较为丰富，民间药用食用基础深厚，但由于红冬蛇菰无人工种植，生长环境特殊，采摘周期短，加之宣传不足，红冬蛇菰一直未得到深入研究与开发，对红冬蛇菰种质资源、物质基础、质量评价、生物活性等方面的现代研究均处于起步阶段，导致其民间药用的科学内涵不明确，也限制了对红冬蛇菰的进一步开发利用(庄远杯，林大都，张声源等，红冬蛇菰的研究进展，中国民族民间医药,2017，26(8)：60-62.)。特别是至今未见有红冬蛇菰在降糖和降脂方面的应用研究或用于制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品的公开报道或专利。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中对天然降血糖和降血脂药物的开发不足，提供一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法和应用。

本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：

一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备方法，其包含如下步骤：

S1.取干燥的红冬蛇菰粉碎后用醇提取，浓缩提取液，去除溶剂后得红冬蛇菰醇提物；

S2.将红冬蛇菰醇提物加水混悬，然后用有机溶剂萃取1～3次，得红冬蛇菰萃取物，即所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物。

优选地，步骤S1中所述的醇为体积分数为70％～100％的乙醇。

进一步优选地，步骤S1中所述的醇为体积分数为90％～95％的乙醇。

优选地，步骤S1中所述的红冬蛇菰与醇的用量比为1g：4～8mL。

进一步优选地，步骤S1中所述的红冬蛇菰与醇的用量比为1g：5～6mL。

优选地，步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇中的一种或两种的混合。

进一步优选地，步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇的混合，其中乙酸乙酯和正丁醇的体积比为3～5:1。

最优选地，步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇的混合，其中乙酸乙酯和正丁醇的体积比为4:1。

优选地，步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：10～30mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的0.5～2倍。

进一步优选地，步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：20～30mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的0.5～1倍。

优选地，还包括ODS柱层析步骤；所述ODS柱层析步骤的具体方法为：

S3.将经步骤S2制备得到得红冬蛇菰萃取物上ODS层析柱，先用4～6倍柱体积的体积分数为15％～20％的甲醇洗脱，然后用7～10倍柱体积的体积分数为22％～25％的甲醇洗脱；收集体积分数为22％～25％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物。

ODS层析柱是指装有ODS填料的层析柱；ODS层析柱中ODS填料的重量用量为红冬蛇菰萃取物重量的30～50倍。

进一步优选地，ODS层析柱中ODS填料的重量用量为红冬蛇菰萃取物重量的30～40倍。

进一步优选地，所述ODS柱层析步骤的具体方法为：

S3.将经步骤S2制备得到得红冬蛇菰萃取物上ODS层析柱，先用5倍柱体积的体积分数为18％的甲醇洗脱，然后用8倍柱体积的体积分数为23％的甲醇洗脱；收集体积分数为23％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物。

所述的柱体积是指用ODS填料装柱后，从柱的底板到ODS填料沉积表面的体积。

本发明还提供一种红冬蛇菰提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂或制备增强机体糖耐量的药物中的应用，所述的红冬蛇菰提取物通过上述制备方法制备得到。

本发明还一种红冬蛇菰提取物在制备具有降血糖或降血脂作用的药物中的应用，所述的红冬蛇菰提取物通过上述制备方法制备得到。

有益效果：本发明提供了一种全新的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物及其制备方法，由本发明所述的制备方法制备得到的红冬蛇菰提取物具有优异的降血糖或降血脂作用以及α-葡萄糖苷酶抑制活性；进一步的所述的制备方法采用本发明所述的ODS柱层析后能够富集效果更显著的降血糖或降血脂作用以及α-葡萄糖苷酶抑制活性的有效成分，其降血糖或降血脂作用接近甚至优于阳性对照药二甲双胍，α-葡萄糖苷酶抑制活性要强于阳性对照药阿卡波糖。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。

实施例1 具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备

S2.将红冬蛇菰醇提物加水混悬，然后用有机溶剂萃取2次，合并萃取液浓缩去除溶剂、干燥后得红冬蛇菰萃取物，即所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；

其中，步骤S1中所述的醇为体积分数为95％的乙醇；步骤S1中所述的红冬蛇菰与醇的用量比为1g：5mL；所述的提取为加热回流提取，提取时间为2h；

步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯；步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：20mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的1倍。

实施例2 具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备

S2.将红冬蛇菰醇提物加水混悬，然后用有机溶剂萃取3次，合并萃取液浓缩去除溶剂、干燥后得红冬蛇菰萃取物，即所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；

其中，步骤S1中所述的醇为体积分数为70％的乙醇；步骤S1中所述的红冬蛇菰与醇的用量比为1g：8mL；所述的提取为渗漉提取，提取次数为3次；

步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯；步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：30mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的0.5倍。

实施例3 具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备

步骤S2中所述的有机溶剂选自正丁醇；步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：20mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的1倍。

实施例4 具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备

步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇的混合，其中乙酸乙酯和正丁醇的体积比为4:1；步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：20mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的1倍。

实施例5 具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备

S2.将红冬蛇菰醇提物加水混悬，然后用有机溶剂萃取2次，合并萃取液浓缩去除溶剂、干燥后得红冬蛇菰萃取物；

S3.将经步骤S2制备得到得红冬蛇菰萃取物上ODS层析柱，先用5倍柱体积的体积分数为18％的甲醇洗脱，然后用8倍柱体积的体积分数为23％的甲醇洗脱；收集体积分数为23％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；

步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇的混合，其中乙酸乙酯和正丁醇的体积比为4:1；步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：20mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的1倍；步骤S3中ODS层析柱中ODS填料的重量用量为红冬蛇菰萃取物重量的40倍。

实施例6 红冬蛇菰提取物的降血糖降血脂效果评价

取昆明种雄性小鼠(KM)，SPE级，体质量(20±2)g，购自广东省实验动物中心。适应性喂养1周后，随机抽取10只作为空白组，喂养常规饲料，其余小鼠喂养高糖高脂饲料(饲料中含20％的猪油、20％的蛋黄粉、10％的蔗糖、2％的胆固醇、1％的胆酸盐和47％常规饲料)。4周后，禁食8h，空白组小鼠给予pH 4.4柠檬酸缓冲液40mg/kg腹腔注射4次，高糖高脂饮食组小鼠给予STZ溶液(pH 4.4柠檬酸缓冲液配制)40mg/kg腹腔注射4次，每天1次，继续用同样的饲料喂养各组小鼠。STZ注射1周后，小鼠尾静脉取血，测定血糖值，将血糖值在11.1mmol/L以上的定为实验性糖尿病模型小鼠。

取上述实验性糖尿病模型小鼠进行随机分组，分为模型组与实验组具体分组情况见表1和表2，每组各10只；同时设正常的小鼠做正常组以及阳性对照药二甲双胍组做对照。实验组进行灌胃给药，给药剂量为200mg/(kg·d)；模型组和正常组灌胃生理盐水；阳性对照药二甲双胍组给予阳性对照药二甲双胍，剂量为200mg/(kg·d)。每天灌胃给药1次，连续4周。每周末称量体重1次，根据体重调整给药剂量。于实验结束前1天，大鼠禁食12h，取血测空腹血糖值以及TG，TC，LDL-C，HDL-C值；具体结果见表1和表2。

所述实验组分别给药情况如下：实验组1给予实施例1制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；实验组2给予实施例2制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；实验组3给予实施例3制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；实验组4给予实施例4制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物；实验组5给予实施例5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物。

表1本发明红冬蛇菰提取物对糖尿病小鼠空腹血糖的影响

由表1数据可以看出实施例1～5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物具有很好的具有降血糖作用，其在用药4周后能明显降低小鼠的空腹血糖。

此外，从表1中我们还可以发现，实施例4所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物是采用乙酸乙酯和正丁醇作为混合溶剂萃取得到的，其与实施例1～3单独采用乙酸乙酯或正丁醇作为溶剂萃取得到的红冬蛇菰提取物相比，其降血糖效果更为明显；试验数据表明，用药4周后，实施例4所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物其对小鼠的空腹血糖值降低为11.32mmol/L，与阳性药二甲双胍对小鼠的空腹血糖值10.87mmol/L接近。这说明采用乙酸乙酯和正丁醇作为混合溶剂萃取得到的红冬蛇菰提取物，其降血糖作用更强。

更进一步地，实施例5所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物是在萃取的基础上进一步通过ODS柱层析获得的，从表1数据中可以看出，用药4周后，实施例5所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物其对小鼠的空腹血糖值降低为7.12mmol/L，要小于阳性药二甲双胍对小鼠的空腹血糖值10.87mmol/L，其接近正常值小鼠的空腹血糖值6.39mmol/L。这说明，在萃取的基础上按本发明所述的ODS柱层析方法获得的红冬蛇菰提取物富集了降血糖效果更明显的有效成分；实施例5制备得到的红冬蛇菰提取物降血糖效果显著，其降血糖作用强于阳性对照药二甲双胍。

表2.红冬蛇菰提取物对血清TG，TC，LDL-C，HDL-C的影响

由表2数据可以看出实施例1～5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物具有很好的降血脂作用，其在用药4周后能明显改善血清中TG，TC，LDL-C，HDL-C的含量。其中实施例4和5制备得到的红冬蛇菰提取物的降血脂作用要优于实施例1～3制备得到的红冬蛇菰提取物。尤其是实施例5制备得到的红冬蛇菰提取物，其降血脂作用甚至优于阳性对照药二甲双胍。

实施例7 红冬蛇菰提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶活性测试

(1)α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定

将0.067mol/L pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液500μL、待测样品100μL、0.1U/mLα-葡萄糖苷酶600μL，振荡混匀，37℃恒温孵育20min，加入4.0mmol/L pNPG 400μL，振荡混匀，37℃恒温反应30min后，加入甲醇1600μL终止反应，经0.45μm膜过滤后，用HPLC检测，求得α-葡萄糖苷酶的抑制活性。

(2)检测方法

本实验利用HPLC对酶解生成的pNP进行检测，按照下列公式(1)计算抑制率。

抑制率(％)＝(A0-Ai+Aj)/A0×100％……(1)

式中：A0为缓冲液+酶液+底物反应后的pNP浓度；Ai:样品+酶液+底物反应后的pNP浓度；Aj:样品+缓冲液+底物反应后的pNP浓度。同时设阳性对照组(Acarbose)。

色谱条件：色谱柱：XBridge Peptide BEH C18柱(5μm，4.6mm×250mm)；流动相：A为乙腈，B为0.1％甲酸的水溶液。梯度洗脱条件为：0～8min，20％～30％A；8～13min，30％～80％A；13～15min，80％～20％A；15～25min，20％A；流速：1.0mL/min；进样量：10μL；柱温：35℃；检测波长为315nm。

pNP标准曲线

根据采用的反应体系，精确称取0.0111g pNP标准品，用PBS(磷酸盐缓冲溶液，0.067mol/L，pH 6.8)溶液超声溶解，定容至100mL容量瓶中，得浓度为0.8mmol/L的pNP母液，将其稀释成一系列浓度为0.8、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625mmol/L的溶液。按上述色谱条件进行检测。以pNP浓度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制pNP标准曲线。

按照上述方法绘制pNP标准曲线，得回归方程Y＝5265474X-9704.9，R²＝0.999，说明pNP在0.00625～0.8mmol/L浓度范围内具有良好的线性关系。

(3)待测样品的制备

待测样品采用实施例1～5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物以及阳性对照药阿卡波糖；所述的实施例1～5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物采用甲醇溶解；所述的阿卡波糖采用水溶解。

本实施例所述的抑制α-葡萄糖苷酶活性测试结果见表3。

表3红冬蛇菰不同提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性

由表3数据可以看出实施例1～5制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物具有很好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。其中实施例1～3制备得到的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物在用量为20mg/L的情况下对α-葡萄糖苷酶的抑制率大于80％，IC₅₀值小于15mg/L；其抑制率大于常用的α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖的69.48％。

从表3中我们还可以发现，实施例4所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物是采用乙酸乙酯和正丁醇作为混合溶剂萃取得到的，其与实施例1～3单独采用乙酸乙酯或正丁醇作为溶剂萃取得到的红冬蛇菰提取物相比；其对α-葡萄糖苷酶的抑制率进一步提升，抑制率大于90％。这说明采用乙酸乙酯和正丁醇作为混合溶剂萃取得到的红冬蛇菰提取物其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性进一步加强。

更进一步地，实施例5所述的具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物是在萃取的基础上进一步通过ODS柱层析获得的，从表3数据中可以看出，其能更进一步提升对α-葡萄糖苷酶的抑制率，用量在比实施例1～4减半的情况下，抑制率达98.28％。这说明，在萃取的基础上按本发明所述的ODS柱层析方法获得的红冬蛇菰提取物富集了效果更显著的α-葡萄糖苷酶抑制成分，其具有非常显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

实施例8红冬蛇菰提取物对小鼠耐糖量的影响

从尾静脉采血，用血糖仪测定小鼠的血糖值，取正常小鼠(血糖值4.0～9.0mmol/L)和糖尿病小鼠(按实施例6所述方法建模得到，血糖值17.0～21.0mmol/L)的各80只，按体重随机分成10小组，每组8只。适应性饲养一周后，禁食不禁水12h。分别用生理盐水(15mL/kg)，二甲双胍(100mg/kg)，实施例1、4和5制备得到的红冬蛇菰提取物(200mg/kg)给小鼠灌胃，每天1次，连续ig 4d；第5d分别用葡萄糖(2.0g/kg)、蔗糖(4.0g/kg)给小鼠负荷剂量，在0，15，30，60，120min时间点测量小鼠血糖值。具体实验结果见表4和表5所示。

表4红冬蛇菰提取物对正常小鼠糖耐量的影响

从表4数据可以看出，实施例1、4和5所制备得到的红冬蛇菰提取物可以明显增强正常小鼠的耐糖量。这说明本发明制备得到的红冬蛇菰提取物可以用于制备增强机体糖耐量能力的药物。从表4数据可以看出，实施例5制备得到的红冬蛇菰提取物对正常小鼠的耐糖量要好于实施例1和4制备得到的红冬蛇菰提取物且与阳性对照药二甲双胍的效果相近或更优于二甲双胍；这说明，在萃取的基础上按本发明所述的ODS柱层析方法获得的红冬蛇菰提取物富集了更多的耐糖的有效成分。

表5红冬蛇菰提取物对糖尿病小鼠糖耐量的影响

从表5数据可以看出，实施例1、4和5所制备得到的红冬蛇菰提取物可以明显增强糖尿病小鼠的耐糖量。这说明本发明制备得到的红冬蛇菰提取物可以用于制备增强机体糖耐量能力的药物。从表4数据可以看出，实施例5制备得到的红冬蛇菰提取物对正常小鼠的耐糖量要好于实施例1和4制备得到的红冬蛇菰提取物且优于阳性对照药二甲双胍；这说明，在萃取的基础上按本发明所述的ODS柱层析方法获得的红冬蛇菰提取物富集了更多的耐糖的有效成分。

Claims

1.一种具有降血糖或降血脂作用的红冬蛇菰提取物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述的醇为体积分数为70％～100％的乙醇。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述的红冬蛇菰与醇的用量比为1g：4～8mL。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇中的一种或两种的混合。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯和正丁醇的混合，其中乙酸乙酯和正丁醇的体积比为3～5:1。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中红冬蛇菰醇提物与水的用量比为1g：10～30mL；每次萃取过程中有机溶剂的体积用量为水的体积用量的0.5～2倍。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括ODS柱层析步骤；所述ODS柱层析步骤的具体方法为：

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，经步骤S2制备得到得红冬蛇菰萃取物后，还经ODS柱层析步骤；所述ODS柱层析步骤的具体方法为：

9.一种红冬蛇菰提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂或制备增强机体糖耐量的药物中的应用，其特征在于，所述的红冬蛇菰提取物通过权利要求1～8任一项所述的制备方法制备得到。

10.一种红冬蛇菰提取物在制备具有降血糖或降血脂作用的药物中的应用，其特征在于，所述的红冬蛇菰提取物通过权利要求1～8任一项所述的制备方法制备得到。