CN108732094A - 面向细胞形态重构的三维图像信息获取方法与装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开面向细胞形态重构的三维图像信息获取方法与装置，载物台固定连接四个垂直布置的微型伸缩杆，微型伸缩杆的上端螺杆依序地固定连接于载玻片架子的四个边角处，微型伸缩杆中的电机经控制线连接电机控制模块，电机控制模块经MCU系统23连接上位机；摄像头位于载物台的正上方，摄像头外套有集光器，集光器由卤素灯、有机玻璃板、微型伸缩杆和微型伸缩杆固定底座组成，微型伸缩杆中的电机均经控制线连接电机控制模块，电机控制模块经MCU系统连接上位机；通过调节载物台上相邻2个微型伸缩杆高度，改变细胞载玻片倾斜度，实现对载玻片小角度旋转以及改变旋转面方向，获取非相关的三维形态信息，从而提高其形态重构的精确性。

Description

面向细胞形态重构的三维图像信息获取方法与装置

技术领域

本发明涉及细胞形态特征分析技术，特别是一种细胞形态重构的三维图像信息获取方法与装置。

背景技术

细胞形态特征分析一直是研究生物细胞学和病理学最主要的方法，广范应用在医疗医药、临床诊断、保健行业和预防疾病等领域。细胞形态的三维图像信息获取对重构结果具有直接的影响。目前，常用的细胞三维图像信息的获取方法主要有以下几种：1、透镜阵列光学获取三维信息：其原理是对二维物体图像识别转化为对三维物体的识别，但是对于小角度旋转的物体不容易实现，并且该方法需要专用设备，成本太高；2、透镜板三维显示：该方法具有电光透过率高，电控可调的优点，但是其有效折射率低，响应速度慢，分辨率低，重构精度不高。中国专利公开号为CN105184853A、名称为“一种基于光流分析的单细胞三维图像生成方法”文献中公开的是通过入射光照射在制作的光诱导介电泳芯片上产生非均匀电场，然后改变输入电极交流信号频率和大小，以控制细胞所受到介电泳力的大小和方向，以此达到细胞旋转来获取其三维图像形态的目的，但是该方法存在以下缺点：第一，在细胞旋转过程中，由于受流体运动影响较大，使细胞定向转动较难实现；第二，获取其形态图像过程中，较难实现精确的旋转，容易造成相近面与面之间的图像信息相关。

发明内容

为了克服上述缺点，本发明提出一种面向细胞形态重构的三维图像信息获取方法与装置，能够精确获得与细胞形态有关的倾斜角度阈值，实现高精度的形态重构。

本发明所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置采用的技术方案是：物镜转换台上方是物镜，物镜正上方是水平布置的载物台，载物台上开有上下贯通的通光孔，通光孔上表面是置放有载玻片的载玻片架子，载物台固定连接四个垂直布置的微型伸缩杆A、B、C、D，微型伸缩杆A、B、C、D的上端螺杆依序地固定连接于载玻片架子的四个边角处；载物台固定连接在镜柱，镜柱连接垂直布置的调节杆的底部，调节杆的顶部连接垂直布置的摄像筒，摄像筒的底部同轴连接摄像头，摄像头位于载物台的正上方，与通光孔同轴心；摄像头外套有集光器，集光器由卤素灯、有机玻璃板、微型伸缩杆E和微型伸缩杆固定底座组成，卤素灯有间隙地套在摄像头外，卤素灯的侧壁固定连接有机玻璃板的上段，有机玻璃板的下段内部是一个微型伸缩杆E，微型伸缩杆E经微型伸缩杆固定底座E与摄像头固定连接；五个所述的微型伸缩杆A、B、C、D、E中的电机均经控制线连接电机控制模块，电机控制模块经MCU系统连接上位机。

上述三维图像信息获取装置的信息获取方法采用的技术方案是具有以下步骤：

A、上位机24制集光器中的微型伸缩杆E向下移动高度L₁，上位机仅控制微型伸缩杆A、B上升设定高度h1，图像采集器获取载玻片上的细胞图像并发送给上位机，上位机计算出细胞图像清晰度评价值；

B、上位机控制微型伸缩杆A、B回到初始位置，再控制微型伸缩杆B、C上升到设定高度h1，获得此时的图像清晰度评价值；以此类推地完成4个微型伸缩杆A、B、C、D一个周期的图像获取并获得对应的图像清晰度评价值；

C、上位机分别控制微型伸缩杆A、B、C、D上升第二个、第三个、第四个设定高度h2、h3、h4，得到相应高度状态时的图像清晰度评价值；

D、上位机先后控制微型伸缩杆E向下移动位置高度L₂、L₃处，分别在位置高度L₂、L₃处完成第一、第二、第三、第四个周期的图像获取并获得对应的图像清晰度评价值；

E、上位机选取所有图像清晰度评价值中的最大值，该最大值对应的图像即为最优细胞形态图像。

本发明与已有方法和技术相比，具有如下优点：

1、本发明通过调节相邻2个微型伸缩杆高度，可以改变固定在微型伸缩杆上的细胞载玻片倾斜度，实现对载玻片小角度旋转以及改变旋转面方向，获取倾斜阈值角度和不同倾斜角度下的非相关的三维形态信息，能解决物体无法小角度旋转的问题，进而确保获取图像信息不相关，实现细胞形态获取过程中图像信息的有效性，提高获取细胞形态信息智能化水平并且减小获取误差，从而提高了其形态重构的精确性。

2、在获取细胞图像信息的过程中，由于强光线通过细胞从显微镜目镜中看起来几乎处于半透明状态，所以无法准确获取其二维图像边缘或轮廓线，这容易造成提取坐标信息和灰度信息不够完整；但通过细胞光线不足又容易造成暗影，获取的坐标信息和灰度信息带来误差。针对于传统的基于阴影恢复形状方法的三维重构局限性和运用单幅图像带来的分辨率差问题，本发明自动调节光强，建立起其形态面积和图像信息熵后，比较倾斜某个角度获取细胞形态图像信息是否相关，只选择不相关的图像作为重构的信息源，以及选取不在同一个平面上的两幅图片，可以提高分辨率差问题。

3、通过MCU系统控制控制载物台上的四个微型伸缩杆，获取大量细胞形态图像，能自动筛选出用于细胞形态重构的最清晰图像，提高了细胞形态的三维图像信息获取智能化水平。

4、通过转动旋钮带动螺杆上柔性钢丝松散变化，能实现调节调节杆和载物台高度，装置体积较小，结构简单，能有效减少在三维图像信息获取过程中的复杂性，方便修理维护。

附图说明

图1本发明所述的面向细胞形态重构的三维图像信息装置的整体示意图；

图2是图1中的调节杆与载物台高度调节旋钮的内部结构关系放大示意图；

图3是图1中集光器与摄像头的内部结构关系放大示意图；

图4是图1中载物台、载玻片架子以及四个微型伸缩杆的装配结构放大示意图；

图5是图4中载玻片架子在倾斜状态的放大示意图；

附图中各部件的序号和名称：1、镜座；2、物镜转换台；2a、物镜转换旋钮；2b、物镜转换台板；3、镜柱；3a、镜柱连接板；4、载物台高度调节旋钮；4a、镜柱螺栓；5、镜臂；6、镜筒；7、摄像座台；8、摄像数据传输接口；9、目镜；10、调节杆；101、弹簧；102、柔性钢丝；103、螺杆；11、固定夹；12、大支撑杆；13、小支撑杆；14、支撑夹；15、导线；16、摄像电路单元；16a、摄像筒；16b、摄像头；17、集光器；171、卤素灯；172、移动隙缝；173、有机玻璃板；A、微型伸缩杆；A1、螺杆；18、载玻片架子；19、通光孔；20、载物台；21、物镜；22、电机控制模块；23、MCU控制模块；24、上位机；25、图像采集器。

具体实施方式

参见图1，本发明面向细胞形态重构的三维图像信息装置最底部是镜座1，镜座1上表面固定连接物镜转换台板2b，物镜转换台板2b上表面是物镜转换台2，物镜转换台2倾斜布置，物镜转换台2上表面布置了三个不同放大倍数的物镜21。物镜21的正上方是载物台20，载物台20水平布置且固定连接在镜柱3上。载物台20上开有上下贯通的通光孔19，通光孔19上表面置放载玻片架子18。物镜转换台板2b连接物镜转换台旋钮2a，通过物镜转换台旋钮2a能调节物镜转换台2的上下高度，使其中一个物镜21位于通光孔19的正下方。载玻片架子18上放置了载玻片，载玻片的中心与通光孔19的中心同轴心。

镜柱3通过镜柱螺栓4a固定连接镜柱连接板3a，镜柱连接板3a垂直于镜座1，且与镜臂5固定连接在一起。镜柱3连接调节杆10的底部，调节杆10垂直布置。镜臂5垂直于镜座1，镜臂5顶部支撑着镜筒6，镜筒6上方连接摄像座台7，摄像座台7上支撑着目镜9，摄像座台7上还开有摄像数据传输接口8。

调节杆10的下端连接载物台高度调节旋钮4，载物台高度调节旋钮水平布置，伸进镜柱连接板3a中，能升降调节杆10高度。

调节杆10的顶部通过固定夹11连接大支撑杆12，大支撑杆12水平布置，大支撑杆12同轴套接小支撑杆13，大支撑杆12和小支撑杆13之间通过螺纹旋接，小支撑杆13通过支撑夹14固定连接摄像筒16a，摄像筒16a垂直布置，摄像筒16a的底部同轴连接摄像头16b，摄像头16b位于载物台20的正上方，与通光孔19同轴心。摄像头16b外套有集光器17。

通过旋转小支撑杆13可以收缩或伸长摄像筒16a与调节杆10之间的水平距离，使得摄像头16b平移，靠近或远离调节杆10，从而调节摄像头16b的水平位置。通过旋转载物台高度调节旋钮4，可以调节调节杆10的上下高度，从而调节摄像头16b与载物台20之间的上下垂直距离。

摄像头16b的电路控制部分通过导线15连接摄像数据传输接口8，摄像数据传输接口8通过USB数据线连接图像采集器25，图像采集器25连接上位机24，上位机24的输出端经MCU系统23连接电机控制模块22。摄像头16b将拍摄到的细胞形态图像经图像采集器25上传到上位机24，上位机24处理和保存获取的细胞形态图像，并将处理结果发出指令控制MCU系统23。

参见图2，镜柱3与调节杆10同轴心，镜柱3上段中间开有盲孔，盲孔内径稍微大于调节杆10外径。盲孔内部安装弹簧101和柔性钢丝102，弹簧101上端支撑着调节杆10底部，弹簧101下端支撑在盲孔底部。柔性钢丝102上端固定连接调节杆10底部，柔性钢丝102下端固定连接载物台高度调节旋钮4，载物台高度调节旋钮4伸入在镜柱连接板3a内，载物台高度调节旋钮4具有水平的螺杆103，螺杆103由螺纹段和螺旋槽段组成，螺纹段同轴延伸螺旋槽段，螺杆103通过螺纹段连接镜柱连接板3a，螺杆103通过螺旋槽段连接固定连接柔性钢丝102下端。所以当顺时针旋转载物台高度调节旋钮4时，柔性细钢丝102收紧，缠绕在螺杆103的螺旋槽段上，从而使得调节杆10向下运动伸入镜柱3中，反之，逆时针旋转载物台高度调节旋钮4时，柔性细钢丝102松开，在弹簧101的推动下，调节杆10向上运动，实现调节杆10的高度变化。

同理，图1中物镜转换台旋钮2a用来调节物镜转换台2高度变化的结构和原理与图2雷同，即：在物镜转换台板2b上开盲孔，内部安装弹簧和柔性钢丝，弹簧和柔性钢丝上端连接物镜转换台2的底部，柔性钢丝下端连接物镜转换旋钮2a，通过旋转物镜转换台旋钮2a，降低或升高物镜转换台2。

参见图3和图1，集光器17由卤素灯171、有机玻璃板173、微型伸缩杆E和微型伸缩杆固定底座E3组成。其中，卤素灯171有间隙地套在摄像头16b外，之间留有移动隙缝172以方便卤素灯171上下移动。卤素灯171的光照射在其正下方的载玻片上。卤素灯171的侧壁固定连接有机玻璃板173的上段，有机玻璃板173的下段内部开一个可以恰好能容纳下微型伸缩杆E的孔，微型伸缩杆E的下端固定连接微型伸缩杆固定底座E3，微型伸缩杆固定底座E3通过螺丝174与摄像头16b固定连接。微型伸缩杆E中的电机经控制线连接电机控制模块22，电机控制模块22连接MCU系统23。

由于获得细胞形态图片清晰度受到多个因素的影响，照射在载玻片上的光线是其中一个重要的影响因素，光照强弱是利用位置距离和光强度成正相关性，即：卤素灯171越靠近载玻片，透过细胞的光照越强，反之卤素灯171越远离载玻片，透过细胞的光照越弱。MCU系统23控制电机驱动微型伸缩杆E正转，微型伸缩杆E向上推动有机玻璃板173，带动卤素灯171向上运动远离载玻片，反之，卤素灯171向下运动靠近载玻片，进而间接改变获得细胞形态图片清晰度。

上位机24控制集光器17中的微型伸缩杆E向下移动高度L_r：L_r＝L₀+(r-1)ΔL,r＝1,2,3，r为初始位置向下移动集光器17的次数，L₀为集光器17的初始位置高度，ΔL为移动步长，此时照在载玻片架子18上的载玻片上的光最弱；在结束位置L₃＝L₀+2ΔL位置，此时照在载玻片上的光最强。

参见图4和图1，载玻片架子18是方形结构。在载物台20的下方固定连接四个微型伸缩杆A、B、C、D，这四个微型伸缩杆A、B、C、D垂直布置，四个微型伸缩杆A、B、C、D的上端螺杆A1均向上伸在载物台20上方，并且四个螺杆A1依序地分别固定连接于载玻片架子18的四个边角处，即四个微型伸缩杆A、B、C、D按顺时针或逆顺时针依序地地布置。微型伸缩杆A、B、C、D中的电机经控制线连接电机控制模块22，电机控制模块22连接MCU系统23。通过四个微型伸缩杆A、B、C、D能调节载玻片架子18的倾斜方向和倾斜程度。

参见图5、图4和图1，载玻片架子18的倾斜角β、微型伸缩杆A、B、C、D的伸长高度h与载玻片架子18对应边的边长构成直角三角关系：因此，可以通过控制微型伸缩杆A、B、C、D的伸长高度h(例如高度h为0mm、4.88mm、9.84mm、14.8mm、20mm)来控制载玻片架子18的倾斜角β(对应地倾斜角β分别为0°、3.5°、7°、10.5°、14°)。

当移动载物台20上的四个微型伸缩杆A、B、C、D，可以得到载玻片倾斜角θ_i＝3.5(i-1),r＝1,2,…,5；i为移动载物台20上微型伸缩杆的次数；θ_i为倾斜角度，θ₁＝0°，为初始位置；θ₅＝20°为结束位置。

移动载物台20上相邻的两个微型伸缩杆，保持载玻片架子18同一边上相邻两个伸缩杆的同步倾斜，对面的其余两个静止不动，便可得到一个倾斜面，故移动4个伸缩杆共可得4个面，载玻片架子18得到四个不同方位的倾斜位置。

参见图1-5所示，本发明三维图像信息获取装置工作时，调节物镜转换台旋钮2a，让物镜转换台2上的物镜21正对通光孔19中央，使得物镜21与载玻片之间距离在大于一位焦距且小于2倍焦距之间，呈现清晰图像，则为满足细胞图像信息获取的条件。开启卤素灯光171和摄像关16b，旋转小支撑杆13，使得摄像头16b对准通光孔19以便能得到清晰的视野。

光照亮度、载玻片的倾斜角和不同倾斜面都会影响获取到的细胞形态图像，因此通过调节集光器17到载物台20之间的距离，可以改变投影在载玻片上的光照亮度，以获取细胞形态图像的最佳亮度；在光的照射下，在不同的角度，其表现出的形态各异，因此通过改变载物台20上载玻片的倾斜角度，以获取不同位置的形态图像，通过图像清晰度评价，以获得最佳图像；改变不同的倾斜面可以确保得到不相关的图像信息。因此本发明通过改变集光器17的3个运动位置(L₁、L₂、L₃)和在载玻片的4个倾斜角度参数(3.5°、7°、10.5°、14°)以及改变4个倾斜面所获取的图像，通过图像清晰度评价算法，找出每个面的最大评价值，由此获得4幅图像用于细胞形态重构。具体如下：

集光器17初始位置在摄像筒16a上端，集光器17终止位置在摄相筒16a下端位置。上位机24控制MCU系统23工作，MCU系统23控制集光器17中的微型伸缩杆E向下移动高度L₁处，安装在载物台20上的微型伸缩杆A、B、C、D在初始位置时，上端螺杆A1均处于收缩状态，载玻片架子18处于水平状态。

上位机24控制MCU系统23工作，MCU系统23通过电机控制模块22仅控制载物台20上的微型伸缩杆A、B上升设定的高度h1(例如：h1＝4.88mm)，而对面的微型伸缩杆C、D保持不动。当载物台20上的载玻片倾斜时，上位机24通过发送信号给图像采集器25，图像采集器25获取载玻片上的细胞图像，并将图像发送给上位机24。

上位机24接收到细胞图像后，对细胞图像进行清晰度计算，按照清晰度评价函数公式计算出清晰度评价值，清晰度评价函数表达式如下：

式中，F_i(I)是第i幅图像的清晰度评价值，G_x(x,y)，G_y(x,y)为图像在点(x，y)上的水平和垂直方向的梯度幅值。G_x(x,y)，G_y(x,y)分别用Sobel算子表示成模板形式分别如下：

在此模板下：

G_x(x,y)＝I(x-1,y+1)+2I(x,y+1)+I(x+1,y+1)-I(x-1,y-1)-I(x+1,y-1)-2I(x,y-1)，

G_y(x,y)＝I(x-1,y+1)+I(x-1,y-1)+2I(x-1,y+1)-I(x+1,y-1)-2I(x+1,y)-I(x+1,y+1)，

其中I(x,y)为图像在点(x,y)的灰度值，对于评价函数来说，F_i(I)越大，则该图像越清晰，将F_i(I)保存上位机24中。

然后，上位机24控制微型伸缩杆A、B回到初始位置，再控制微型伸缩杆B、C上升到同一个设定高度h1(h1＝4.88mm)，使载玻片倾斜发生不同面和不同角度的。图像采集器25获取该状态时载玻片上的细胞图像，并发送给上位机24，上位机25计算出图像清晰度评价值F_i(I)。

上位机24继续先控制微型伸缩杆B、C回到初始位置，再控制微型伸缩杆C、D上升到设定高度，得到该状态时载玻片上的细胞图像清晰度评价值F_i(I)。

以此类推地用同样的方法，得到微型伸缩杆D、A上升到设定高度时细胞图像清晰度评价值F_i(I)。

如此，则4个微型伸缩杆A、B、C、D完成一个周期的图像获取，得到四个图像清晰度评价值F_i(I)。

当4个微型伸缩杆A、B、C、D完成一个周期的图像获取，再分别循环第二、第三、第四个周期的图像获取，微型伸缩杆A、B、C、D分别上升第二个、第三个、第四个设定的高度h2＝9.84mm、h3＝14.8mm、h4＝20mm，得到相应高度状态时的图像清晰度评价值F_i(I)。

在完成所有的图像获取之后，MCU系统23控制集光器17上的微型伸缩杆E向下移动ΔL步长，移动到位置高度L₂处，此时照射在载玻片细胞上的光强度增大，然后重复第一、第二、第三、第四个周期的图像获取，获取对应周期内的图像和图像清晰度评价值F_i(I)，并保存在上位机24中。

然后，MCU系统23控制集光器17上的微型伸缩杆E再向下移动ΔL步长，移动到位置高度L₃处，此时照射在载玻片细胞上的光强度最大，再重复第一、第二、第三、第四个周期的图像获取，获取对应周期内的图像和图像清晰度评价值F_i(I)，并保存在上位机24中。

由此，上位机24中已获得载玻片细胞在3个不同光强度和4个不同倾斜面上的图像清晰度评价值F_i(I)，上位机24选取最大图像清晰度评价值maxF_i(I)，该maxF_i(I)值对应的图像即为最优细胞形态图像。

Claims (9)

1.一种面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，物镜转换台(2)上方是物镜(21)，物镜(21)正上方是水平布置的载物台(20)，载物台(20)上开有上下贯通的通光孔(19)，通光孔(19)上表面是置放有载玻片的载玻片架子(18)，其特征是：载物台(20)固定连接四个垂直布置的微型伸缩杆A、B、C、D，微型伸缩杆A、B、C、D的上端螺杆A1依序地固定连接于载玻片架子(18)的四个边角处；载物台(200固定连接在镜柱(3)，镜柱(3)连接垂直布置的调节杆(10)的底部，调节杆(10)的顶部连接垂直布置的摄像筒(16a)，摄像筒(16a)的底部同轴连接摄像头(16b)，摄像头(16b)位于载物台(20)的正上方，与通光孔(19)同轴心；摄像头(16b)外套有集光器(17)，集光器(17)由卤素灯(171)、有机玻璃板(173)、微型伸缩杆E和微型伸缩杆固定底座组成，卤素灯(171)有间隙地套在摄像头(16b)外，卤素灯(171)的侧壁固定连接有机玻璃板(173)的上段，有机玻璃板(173)的下段内部是一个微型伸缩杆E，微型伸缩杆E经微型伸缩杆固定底座与摄像头(16b)固定连接；五个所述的微型伸缩杆A、B、C、D、E中的电机均经控制线连接电机控制模块(22)，电机控制模块(22)经MCU系统(23)连接上位机(24)。

2.根据权利要求1所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，其特征是：镜柱(3)通过镜柱连接板(3a)固定连接镜座(1)，调节杆(10)的下端连接载物台高度调节旋钮(4)，载物台高度调节旋钮(4)水平布置，能升降调节杆(10)高度。

3.根据权利要求2所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，其特征是：镜柱3上段中间开有内径大于调节杆(10)外径的盲孔，盲孔内部装有弹簧(101)和柔性钢丝(102)，弹簧(101)上端支撑着调节杆(10)底部、下端支撑在盲孔底部；柔性钢丝(102)上端固定连接调节杆(10)底部、下端固定连接载物台高度调节旋钮(4)，载物台高度调节旋钮(4)具有水平的螺杆(103)，螺杆(103)由螺纹段和螺旋槽段组成，螺杆(103)通过螺纹段连接镜柱连接板(3a)、通过螺旋槽段连接固定连接柔性钢丝(102)下端。

4.根据权利要求1所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，其特征是：物镜转换台(2)倾斜布置，物镜转换台(2)上表面设三个不同放大倍数的物镜(21)。

5.根据权利要求1所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，其特征是：调节杆(10)顶部通过固定夹(11)连接水平布置的大支撑杆(12)，大支撑杆(12)同轴套接小支撑杆(13)且两者通过螺纹旋接，小支撑杆(13)通过支撑夹(14)固定连接摄像筒(16a)。

6.根据权利要求1所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置，其特征是：物镜转换台(2)设在物镜转换台板(2b)的上表面，物镜转换台板(2b)上开盲孔，盲孔内部装有弹簧和柔性钢丝，弹簧和柔性钢丝上端连接物镜转换台(2)的底部，柔性钢丝下端连接物镜转换旋钮(2a)，旋转物镜转换台旋钮(2a)能降低或升高物镜转换台(2)。

7.一种如权利要求1所述的面向细胞形态重构的三维图像信息获取装置的三维图像信息获取方法，其特征是具有以下步骤：

A、上位机(24)控制集光器(17)中的微型伸缩杆E向下移动高度L₁，上位机(24)仅控制微型伸缩杆A、B上升设定高度h1，图像采集器(25)获取载玻片上的细胞图像并发送给上位机(24)，上位机(24)计算出细胞图像清晰度评价值；

B、上位机(24)控制微型伸缩杆A、B回到初始位置，再控制微型伸缩杆B、C上升到设定高度h1，获得此时的图像清晰度评价值；以此类推地完成4个微型伸缩杆A、B、C、D一个周期的图像获取并获得对应的图像清晰度评价值；

C、上位机(24)分别控制微型伸缩杆A、B、C、D上升第二个、第三个、第四个设定高度h2、h3、h4，得到相应高度状态时的图像清晰度评价值；

D、上位机(24)先后控制微型伸缩杆E向下移动位置高度L₂、L₃处，分别在位置高度L₂、L₃处完成第一、第二、第三、第四个周期的图像获取并获得对应的图像清晰度评价值；

E、上位机(24)选取所有图像清晰度评价值中的最大值，该最大值对应的图像即为最优细胞形态图像。

8.根据权利要求7所述的三维图像信息获取方法，其特征是：图像清晰度评价值G_x(x,y)，G_y(x,y)为图像在点(x，y)上的水平和垂直方向的梯度幅值。

9.根据权利要求8所述的三维图像信息获取方法，其特征是：

G_x(x,y)＝I(x-1,y+1)+2I(x,y+1)+I(x+1,y+1)-I(x-1,y-1)-I(x+1,y-1)-2I(x,y-1)，

G_y(x,y)＝I(x-1,y+1)+I(x-1,y-1)+2I(x-1,y+1)-I(x+1,y-1)-2I(x+1,y)-I(x+1,y+1)，

I(x,y)为图像在点(x,y)的灰度值。