CN108680735A - 一种吖啶酯标识抗体稀释液及其制备方法 - Google Patents

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凌云
凌天阳
金可心
夏戊君
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    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials

Abstract

本发明公开了一种吖啶酯标识抗体稀释液及其制备方法，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠40～77份，乙二胺四乙酸17～45份，柠檬酸25～55份，葡萄糖9～21份，氯化钠19～31份，2‑吗啉乙磺酸16～31份，脂肪酸甘油酯14～21份，酪蛋白2～4份，小鼠血清1～5份，硫柳汞3～6份，去离子水100～200份。本发明利用各组分之间的协同作用，制备获得吖啶酯标识抗体稀释液，该稀释液能有效保持抗体活性，且在长期保存过程不会增加非特异性结合而导致试剂性能降低，特别是最低检出限的升高。

Description

一种吖啶酯标识抗体稀释液及其制备方法
技术领域
本发明涉及体外诊断试剂领域，尤其涉及一种吖啶酯标识抗体稀释液及其制备方法。
背景技术
化学发光是伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。化学发光免疫分析是把化学发光物质与免疫学反应结合起来，用光反应间接反映被测标志物浓度。在第一篇化学发光免疫分析方法报道以来，化学发光免疫分析方法已在生物学很多领域内得到应用，特别是基于抗体-抗原反应的免疫检测。化学发光免疫分析具有反应时间短、不需终止剂、对生物样本的活性无影响等优势，使其逐步成为主流检测手段。可是，在吖啶酯标识抗体后将其配制成工作液，易出现试剂不稳定情况，试剂在长期保存过程中出现空白反应升高，由于保护剂效果不够持久，长期储存下，保护性降低，非特异性结合升高。因此，配制一种合适的稀释液尤为的重要。
发明内容
本发明解决的技术问题：为了获得一种吖啶酯标识抗体稀释液，适用于吖啶酯标识抗体稀释后长期保存，保存过程中保持稳定，封闭效果不会因长时间的保持而降低，从而导致非特异性结合升高，本发明提供了一种吖啶酯标识抗体稀释液及其制备方法。
技术方案：一种吖啶酯标识抗体稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠40～77份，乙二胺四乙酸17～45份，柠檬酸25～55份，葡萄糖9～21份，氯化钠19～31份，2-吗啉乙磺酸16～31份，脂肪酸甘油酯14～21份，酪蛋白2～4份，小鼠血清1～5份，硫柳汞3～6份，去离子水100～200份。
优选的一种吖啶酯标识抗体稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠67份，乙二胺四乙酸33份，柠檬酸36份，葡萄糖16份，氯化钠27份，2-吗啉乙磺酸28份，脂肪酸甘油酯17份，酪蛋白3份，小鼠血清2份，硫柳汞4份，去离子水150份。
一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白加入去离子水中，在8～15℃下以60～100rpm的搅拌速度搅拌20～40h，制得溶液A；
第2步、将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以100～200rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至6.8～7.6，制得溶液B；
第3步、将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以50～100rpm的搅拌速度搅拌60～120min，用0.22μm或0.45μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
优选的，第1步中将酪蛋白加入去离子水中，在12℃下以80rpm的搅拌速度搅拌30h，制得溶液A。
优选的，第2步中将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以160rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至7.2，制得溶液B。
优选的，第3步中将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以80rpm的搅拌速度搅拌100min，用0.22μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
有益效果：本发明利用各组分之间的协同作用，制备获得吖啶酯标识抗体稀释液，该稀释液能有效保持抗体活性，且在长期保存过程不会增加非特异性结合而导致试剂性能降低，特别是最低检出限的升高。
具体实施方式
实施例1
一种吖啶酯标识抗体稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠67份，乙二胺四乙酸33份，柠檬酸36份，葡萄糖16份，氯化钠27份，2-吗啉乙磺酸28份，脂肪酸甘油酯17份，酪蛋白3份，小鼠血清2份，硫柳汞4份，去离子水150份。
一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白加入去离子水中，在12℃下以80rpm的搅拌速度搅拌30h，制得溶液A；
第2步、将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以160rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至7.2，制得溶液B；
第3步、将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以80rpm的搅拌速度搅拌100min，用0.22μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
实施例2
一种吖啶酯标识抗体稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠67份，乙二胺四乙酸35份，柠檬酸45份，葡萄糖17份，氯化钠21份，2-吗啉乙磺酸21份，脂肪酸甘油酯18份，酪蛋白3份，小鼠血清3份，硫柳汞4份，去离子水190份。
一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白加入去离子水中，在11℃下以70rpm的搅拌速度搅拌35h，制得溶液A；
第2步、将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以190rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至6.9，制得溶液B；
第3步、将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以70rpm的搅拌速度搅拌110min，用0.45μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
实施例3
一种吖啶酯标识抗体稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠57份，乙二胺四乙酸35份，柠檬酸35份，葡萄糖16份，氯化钠25份，2-吗啉乙磺酸26份，脂肪酸甘油酯18份，酪蛋白2份，小鼠血清1份，硫柳汞4份，去离子水140份。
一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白加入去离子水中，在8～15℃下以70rpm的搅拌速度搅拌30h，制得溶液A；
第2步、将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以160rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至7.1，制得溶液B；
第3步、将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以70rpm的搅拌速度搅拌90min，用0.22μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
实施例4
将实施例1～3制备获得的吖啶酯标识抗体稀释液用于稀释标识吖啶酯的抗体母液，以制成工作液，将其与配对组合的抗体共同进行加速试验、实时稳定性试验，结果如下：

Claims (6)

1.一种吖啶酯标识抗体稀释液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠40～77份，乙二胺四乙酸17～45份，柠檬酸25～55份，葡萄糖9～21份，氯化钠19～31份，2-吗啉乙磺酸16～31份，脂肪酸甘油酯14～21份，酪蛋白2～4份，小鼠血清1～5份，硫柳汞3～6份，去离子水100～200份。
2.根据权利要求1所述一种吖啶酯标识抗体稀释液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：碳酸钠67份，乙二胺四乙酸33份，柠檬酸36份，葡萄糖16份，氯化钠27份，2-吗啉乙磺酸28份，脂肪酸甘油酯17份，酪蛋白3份，小鼠血清2份，硫柳汞4份，去离子水150份。
3.权利要求1所述一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白加入去离子水中，在8～15℃下以60～100rpm的搅拌速度搅拌20～40h，制得溶液A；
第2步、将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以100～200rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至6.8～7.6，制得溶液B；
第3步、将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以50～100rpm的搅拌速度搅拌60～120min，用0.22μm或0.45μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
4.根据权利要求3所述一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，其特征在于，第1步中将酪蛋白加入去离子水中，在12℃下以80rpm的搅拌速度搅拌30h，制得溶液A。
5.根据权利要求3所述一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，其特征在于，第2步中将碳酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、葡萄糖、氯化钠、2-吗啉乙磺酸依次加入去离子水中，并以160rpm的搅拌速度搅拌至液体澄清，调节pH至7.2，制得溶液B。
6.根据权利要求3所述一种吖啶酯标识抗体稀释液的制备方法，其特征在于，第3步中将脂肪酸甘油酯、小鼠血清、溶液A、硫柳汞依次加入溶液B内，并以80rpm的搅拌速度搅拌100min，用0.22μm的膜进行过滤，即可制得吖啶酯标识抗体稀释液。
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