CN108659948B - 一种提取蛇油的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提取蛇油的方法，涉及提取蛇油技术领域，该提取方法包括如下步骤：预处理，将蛇脂肪进行冷冻并高速粉碎成脂肪浆，超声‑乙醇提取，对脂肪浆采用超声‑乙醇提取方法进行初步的油脂提取，然后将提取的油脂进行减压蒸馏纯化，然后将超声‑乙醇提取后的脂肪渣再进行超声‑酶提取，提取后的油脂进行减压蒸馏，最后将两次提取的油脂混合均匀，本发明的提取方法在整个提取过程操作简单，能耗低，设备简单，并在N2的保护下进行蛇油的提取，并采用减压蒸馏对提取的蛇油进行纯化，有利于防止蛇油中有效成分的氧化，最大程度的保持蛇油的药用成分，且出油率和提取率高。
Description
技术领域
本发明属于蛇油提取技术领域，具体涉及一种提取蛇油的方法。
背景技术
蛇油是蛇科动物的脂肪经炼制提取而成，蛇油的应用在我国有悠久的历史。蛇油中以不饱和脂肪酸为主，其对皮肤粘膜有较强的亲和渗透性易被皮肤吸收。民间常用蛇油治疗冻疮、皲裂、湿疹及水火烫伤，研究发现蛇油中含有多种人体必需的微量元素。这些元素参与体内酶的组成，并为酶的活性所必需。通过酶系统发挥对机体代谢的调节和控制作用，它们对核酸、蛋白质的合成，细胞繁殖，免疫过程等都有直接或间接作用，同时蛇油还具有镇痛抗炎的作用，蛇油经皮肤和胃肠道吸收，无刺激性和过敏反应性，是安全无毒的。
蛇油的优点吸引越来越多的人对其的提取方法进行研究，以得到纯度高的蛇油，同时提升蛇油的提取率，目前对蛇油的提取方法多是采用多种方法相结合的进行提取蛇油，如中国专利申请号201610104126.2公布了一种低温提取蛇油并对蛇油进行去腥、脱色的方法，先将蛇油进行物理打浆，然后采用热水萃取后，再将萃取液进行脱色、多次有机溶剂浸取减压蒸馏得到纯度高的蛇油，最大限度的保留了蛇油中有效成分。但目前的提取方法多是存在耗时长，出油率低，采用的溶剂浸取法工艺繁琐，且有机溶剂的残留破坏了蛇油的质量。
发明内容
根据以上现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提出一种提取率高耗时少的提取蛇油的方法，为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种提取蛇油的方法，具体步骤如下：
1)预处理：提取蛇脂肪，除去脂肪中的杂质，并用清水清洗2-3遍，然后将蛇脂肪冷冻4-5h，再将冷冻的蛇脂肪进行破壁处理，打成浆；
2)超声-乙醇提取：向脂肪浆中加入无水乙醇溶液，保持料液比为1:3-5，将混合液在N2的保护下进行超声处理50-60min，将超声处理后的溶液进行离心过滤，滤液进行减压蒸馏1-2次，得蛇油A；
3)超声-酶提取：将步骤(2)中的滤渣加入到温度40-50℃的去离子水中，并加入混合酶，在N2的保护下超声酶解30-40min，将超声处理后的溶液进行离心过滤，滤液进行减压蒸馏1-2次，得蛇油B；
4)将蛇油A和蛇油B混合均匀，得提取的蛇油。
优选的，所述冷冻的温度为-10-4℃。
优选的，所述破壁处理的转速为25000-35000r/min，时间为5-10min，温度为4-10℃。
优选的，所述超声的功率为300-400w，频率为30-50Hz，温度为50-60℃。
优选的，所述离心的转速为4000-5000r/min，时间8-12min。
优选的，所述减压蒸馏的压力为-0.05-0.05Mpa，温度为55-65℃。
优选的，所述混合酶为质量比为1:0.2-0.3的蛋白酶和磷脂酶，添加量为滤渣质量的2-4％，添加顺序是先添加磷脂酶，间隔10-15min后添加蛋白酶。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
1.本发明先采用冷冻打浆，有利于脂肪细胞结构的破碎，然后采用乙醇-超声提取，超声的空化作用和能量冲击更进一步的提高脂肪细胞的破碎，提高出油率和提取效率，使用的易除去，无残留，绿色环保无污染，且经过减压蒸馏处理后的乙醇可以重复利用，具有提高原料利用率，降低生产成本的作用。
2.本发明采用磷脂酶和蛋白酶相结合对脂肪滤渣进行处理，并辅助超声进行蛇油的提取，具有提取效率高，提高出油率，增加原料的率用率，整个提取过程操作简单，能耗低，设备简单，并在N2的保护下进行蛇油的提取，并采用减压蒸馏对提取的蛇油进行纯化，有利于防止蛇油中有效成分的氧化，最大程度的保持蛇油的药用成分，且部分原料可循环使用。
具体实施方式
下面通过对实施例的描述，作进一步详细的说明，以帮助本领域技术人员对本发明的发明构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。
实施例1
本实施例中提取蛇油的方法，具体步骤如下：
1)预处理：提取蛇脂肪，除去脂肪中皮屑和杂质，并用清水清洗2遍，将清洗后的蛇脂肪吹干表面水分，然后将蛇脂肪置于温度-7℃的冷冻室内，冷冻4.5h，至完全被冷冻，然后将将冷冻的蛇脂肪置于高速破碎机中，并在温度4℃，转速30000r/min下进行高速破壁处理8min，打成脂肪浆；
2)超声-乙醇提取：向脂肪浆中加入无水乙醇溶液，保持料液比为1:4，将混合液在N2的保护下置于超声发射仪中，将超声发射仪的功率设定为350w，频率设定为40Hz，并加热混合液至温度55℃后，进行超声处理55min，超声结束后，在N2的保护下将超声处理后的溶液置于离心机中，并在转速5000r/min下进行离心处理10min，然后真空抽滤，将滤液置于减压蒸馏仪中，并将压力抽至0.01Mpa，温度加热至65℃下进行减压蒸馏2次，得蛇油A，并收集蒸馏过程中的无水乙醇，进行重复利用；
3)超声-酶提取：将步骤(2)中的滤渣加入到温度45℃的去离子水中，将混合液置于超声发射仪中，将超声发射仪的功率设定为400w，频率设定为45Hz，并加热混合液至温度60℃后，N2的保护下，并加入质量为滤渣质量的2.5％的由质量比为1:0.25的蛋白酶和磷脂酶，先加入磷脂酶，超声酶解处理10min后，再加入蛋白酶，继续超声酶解25min，超声结束后，在N2的保护下将超声处理后的溶液置于离心机中，并在转速5000r/min下进行离心处理10min，然后真空抽滤，将滤液置于减压蒸馏仪中，并将压力抽至-0.04Mpa，温度加热至60℃下进行减压蒸馏2次，得蛇油B；
4)将蛇油A和蛇油B混合均匀，得提取的蛇油。
称取2kg的蛇脂肪，制备的蛇油为1.78kg，出油率为89％。
实施例2
本实施例同实施例1，不同的是本实施例提取蛇油的方法中步骤(1)中破壁处理的转速为35000r/min，时间为5min，温度为10℃，步骤(2)中超声的功率为300w，频率为50Hz，温度为50℃。
称取2kg的蛇脂肪，制备的蛇油为1.64g，出油率为82％。
实施例3
本实施例同实施例1，不同的是本实施例提取蛇油的方法中步骤(2)中料液比为1:3，超声的功率为400w，频率为50Hz，温度为60℃，步骤(3)中混合酶为质量比为1:0.3的蛋白酶和磷脂酶，添加量为滤渣质量的2％，添加顺序是先添加磷脂酶，间隔15min后添加蛋白酶。
称取2kg的蛇脂肪，制备的蛇油为1.71g，出油率为85.5％。
蛇油主要指标的测定
外观和气味：感官判断酸值测定：参照GB/T-5530-2005。酸值：称取20g蛇油，用热乙醇溶解油脂，氢氧化钾标准溶液滴定，滴定过程中要充分摇动，至溶液颜色发生变化，并且保持15s不褪色，即为滴定终点。进行3次操作，取平均值，记录滴定终点时氢氧化钾标准溶液用量，计算酸值：
酸值＝56.1Vc/m，
其中：V为所用氢氧化钾标准溶液的体积(mL)；c为所用氢氧化钾标准溶液的准确浓度(mol/L)；m为试样的质量(g)；56.1为氢氧化钾的摩尔质量(g/mol)。
经测试，数据如下：制备的蛇油油脂品质满足标准和市场要求。
| 项目 | 外观 | 气味 | 酸值/(mg/g) |
| 实施例1 | 淡黄色 | 有蛇油特有的微腥味，无酸败味 | ≤0.08 |
| 实施例2 | 微黄色 | 有蛇油特有的微腥味，无酸败味 | ≤0.09 |
| 实施例3 | 淡黄色 | 有蛇油特有的微腥味，无酸败味 | ≤0.09 |
上面结合具体实施例对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。
Claims (6)
1.一种提取蛇油的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)预处理：提取蛇脂肪，除去脂肪中的杂质，并用清水清洗2-3遍，然后将蛇脂肪冷冻4-5h，再将冷冻的蛇脂肪进行破壁处理，打成浆；
(2)超声-乙醇提取：向脂肪浆中加入无水乙醇溶液，保持料液比为1:3-5，将混合液在N2的保护下进行超声处理50-60min，将超声处理后的溶液进行离心过滤，滤液进行减压蒸馏1-2次，得蛇油A；
(3)超声-酶提取：将步骤(2)中的滤渣加入到温度40-50℃的去离子水中，并加入混合酶，在N2的保护下超声酶解30-40min，将超声处理后的溶液进行离心过滤，滤液进行减压蒸馏1-2次，得蛇油B；
(4)将蛇油A和蛇油B混合均匀，得提取的蛇油；
所述混合酶为质量比为1:0.2-0.3的蛋白酶和磷脂酶，添加量为滤渣质量的2-4％，添加顺序是先添加磷脂酶，间隔10-15min后添加蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的提取蛇油的方法，其特征在于，所述冷冻的温度为-10-4℃。
3.根据权利要求1所述的提取蛇油的方法，其特征在于，所述破壁处理的转速为25000-35000r/min，时间为5-10min，温度为4-10℃。
4.根据权利要求1所述的提取蛇油的方法，其特征在于，所述超声的功率为300-400w，频率为30-50Hz，温度为50-60℃。
5.根据权利要求1所述的提取蛇油的方法，其特征在于，所述离心的转速为4000-5000r/min，时间8-12min。
6.根据权利要求1所述的提取蛇油的方法，其特征在于，所述减压蒸馏的压力为-0.05-0.05Mpa，温度为55-65℃。
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2018
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