CN108653316A - 银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用 - Google Patents

银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用，属于生物医学技术领域。银耳多糖能够防止肝组织脂质累积和脂肪细胞肥大，进而能够防治肥胖，而且能够提高葡萄糖和胰岛素的耐受性，具有降血脂、降胆固醇和降低脂质沉积的作用。

Description

银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用
技术领域
本发明属于生物医学技术领域，具体涉及银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用。
背景技术
肥胖症是指受遗传和生活方式等因素影响，导致能量代谢异常，体内脂肪积累过多和分布异常的一种代谢性综合征，其与胰岛素抵抗、糖尿病、高血脂、高血压、脂肪肝与心血管疾病等密切相关。目前大多数减肥方法都存在副作用大与复发率高等缺点，尤其是大量减肥药物因安全性问题而退市，如西布曲明、芬氟拉明、右旋芬氟拉明、芬特明、苯丙醇胺、脂联素等。面对全球愈发严重的肥胖症及其由肥胖引起的代谢性疾病的发病率的升高，探寻安全、有效的新的预防和治疗策略，对于干预肥胖相关的健康疾患，降低肥胖的发病率具有重要意义。
银耳又被称为银耳子、白木耳、雪耳等，属于真菌类银耳科银耳属，是门担子菌门真菌银耳的子实体，有“菌中之冠”的美称。银耳子实体呈纯白至乳白色，直径5～10厘米，柔软洁白，半透明，富有弹性。银耳自古便作为一种珍贵的食用菌与滋补良药，具有强精、补肾、润肠、益胃、补气、和血、强心、壮身、补脑、提神、美容、嫩肤、延年益寿之功效。
银耳多糖作为银耳的主要活性成分，主要存在于子实体、孢子、发酵液和细胞壁中。现代医学实验证明银耳多糖具有广泛的生物学活性，研究表明它具有促进机体免疫功能、抗衰老抗氧化、抗肿瘤、改善肠道有益菌群等功效，但是现有技术中并未有关于银耳多糖具有其它作用的报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用，能够防治肥胖。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用。
优选的，所述药物包括防治肝组织脂质累积的药物。
优选的，所述药物包括防治脂肪细胞肥大的药物。
优选的，所述药物包括提高葡萄糖耐受性的药物。
优选的，所述药物包括提高胰岛素耐受性的药物。
优选的，所述药物的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂。
优选的，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
本发明提供了银耳多糖在制备防治肥胖药物的应用，在本发明中，所述银耳多糖能够有效减少肝组织中脂质累积，抑制脂肪细胞肥大，进而能够防治肥胖，达到减肥的技术效果。在本发明中，所述银耳多糖能够提高葡萄糖和胰岛素的耐受性。
本发明实施例的结果显示：银耳多糖能够防止肝组织脂质累积和脂肪细胞肥大，进而能够防治肥胖，而且能够提高葡萄糖和胰岛素的耐受性，具有降血脂、降胆固醇和降低脂质沉积的作用。
附图说明
图1为银耳多糖对小鼠体重的影响；
图2为银耳多糖降低肝脏组织中甘油三酯含量(#p<0.05,与control组相比；*p<0.05与HFD组相比)；
图3为银耳多糖对小鼠肝脏组织形态影响的病理学切片(x200)照片；
图4为银耳多糖对小鼠肾周脂肪组织形态影响的病理学切片(x200)照片；
图5为银耳多糖对小鼠附睾脂肪组织脂肪形态影响的病理学切片(x200)照片；
图6为银耳多糖对小鼠口服葡萄糖耐量(OGTT)影响；
图7为银耳多糖对小鼠腹腔注射胰岛素耐受实验(IPITT)影响。
具体实施方式
本发明提供了银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用。
在本发明中，所述银耳多糖能够防止肝组织累积和脂肪细胞肥大，进而能够防治肥胖。在本发明中，所述银耳多糖能够防止肝组织脂质的积累，能够防止脂肪细胞肥大，能够提高葡萄糖和胰岛素的耐受性，具有降血脂、降胆固醇和降低脂质沉积的作用。
本发明将所述银耳多糖制备成防治肥胖的药物，所述药物中银耳多糖的质量百分含量优选为40～60％，更优选为50～55％；所述药物的服用方法优选为口服，所述银耳多糖每天摄入的推荐剂量为16～32mg/kg，所述银耳多糖每天服用的次数优选为1～2次。当每天服用的次数为1次时，本发明对服用的时间没有特殊限定；当每天服用的次数为2时，优选在早晚各服用一次。在本发明中，所述药物的剂型优选包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
本发明对所述银耳多糖的制备方法没有特殊限定，采用本领域技术人员常规制备银耳多糖的制备方法即可，如采用常规的热水浸提法、醇提取法、碱浸提法和酶解提法从银耳中提取。
在本发明中，所述药物优选包括防治肝组织脂质累积的药物。在本发明中，所述药物中银耳多糖的含量优选为50～60％；所述药物的服用方法优选为口服，所述银耳多糖每天摄入的推荐剂量为16～32mg/kg，所述银耳多糖每天服用的次数优选为1～2次。当每天服用的次数为1次时，本发明对服用的时间没有特殊限定；当每天服用的次数为2时，优选在早晚各服用一次。在本发明中，所述药物的剂型优选包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
在本发明中，所述药物优选包括防治脂肪细胞肥大的药物。在本发明中，所述药物中银耳多糖的含量优选为50～60％，更优选为55％；所述药物的服用方法优选为口服，所述银耳多糖每天摄入的推荐剂量为16～32mg/kg，所述银耳多糖每天服用的次数优选为1～2次。当每天服用的次数为1次时，本发明对服用的时间没有特殊限定；当每天服用的次数为2时，优选在早晚各服用一次。在本发明中，所述药物的剂型优选包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
在本发明中，所述药物优选包括提高葡萄糖耐受性的药物。在本发明中，所述药物中银耳多糖的含量优选为50～60％，更优选为55％；所述药物的服用方法优选为口服，所述银耳多糖每天摄入的推荐剂量为16～32mg/kg，所述银耳多糖每天服用的次数优选为1～2次。当每天服用的次数为1次时，本发明对服用的时间没有特殊限定；当每天服用的次数为2时，优选在早晚各服用一次。在本发明中，所述药物的剂型优选包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
在本发明中，所述药物优选包括提高胰岛素耐受性的药物。在本发明中，所述药物中银耳多糖的含量优选为50～60％，更优选为55％；所述药物的服用方法优选为口服，所述银耳多糖每天摄入的推荐剂量为16～32mg/kg，所述银耳多糖每天服用的次数优选为1～2次。当每天服用的次数为1次时，本发明对服用的时间没有特殊限定；当每天服用的次数为2时，优选在早晚各服用一次。在本发明中，所述药物的剂型优选包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
下面结合实施例对本发明提供的银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
银耳多糖改善肥胖症及其相关代谢性疾病的药效学研究
一.实验方法
1.动物实验设计
C57BL/6小鼠在清华大学动物中心内喂养，饲养环境为12h光暗交替，温度为23±3℃，相对湿度为50％。小鼠适应性喂养1周后，将其随机分为5组(n＝10)，组别设计分别为：正常对照组(ND)，饲养正常饲料；高脂对照组(HFD)、膳食低剂量银耳多糖组(TP-L)、膳食中剂量银耳多糖组(TP-M)，膳食高剂量银耳多糖组(TP-H)，饲养高脂饲料。低中高剂量的银耳多糖提取物分别为100mg/kg，200mg/kg，400mg/kg，灌胃14周，ND和HFD组灌胃清水；每7天称量体重一次，实验期间小鼠自由进食和饮水；实验结束前将小鼠禁食12h,，称量体重，眼眶取血后将小鼠进行颈椎脱臼处死，取皮下及附睾周围脂肪，快速摘取心、肝、脾、肾、棕色脂肪，取部分白色脂肪、肝脏组织于福尔马林溶液中保存，其余组织置于-80℃冰箱中，血液样品2500g离心15min，取血清保存。
2.口服葡萄糖耐量实验(OGTT)与胰岛素耐受实验(ITT)
在实验的第12周，小鼠禁食12h，通过口腔给小鼠灌胃葡萄糖(2g/kg)。分别在时间点0、30、60,、90、120min时通过尾静脉取血，测定血糖水平。在实验的第13周，小鼠禁食4h，通过腹腔注射胰岛素(0.5U/kg)。分别在时间点0、30、60,、90、120min时通过尾静脉取血，测定血糖水平。
3.血清生化指标测定
血清中的葡萄糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的含量水平使用东芝全自动生化分析仪进行测定；游离脂肪酸(NEFA)通过市售检查试剂盒(Wako)测定。
4.病理学分析
HE染色分析：取各组动物的肝脏组织和白色和棕色脂肪组织，用福尔马林固定，石蜡包埋，切片，脱水、固定，用苏木精和伊红染色，显微镜下进行组织病理分析。
5.统计分析
实验数据采用SPSS 22.0统计软件进行方差分析与显著性分析，采用Duncan多重比较进行组间差异分析(p<0.05)，数据表示为mean±SD。
二.实验结果
1.银耳多糖对小鼠体重的影响，结果见表1和图1。
表1银耳多糖对小鼠体重及脏器指数的影响
注：a，b，c，d代表统计差异，标注字母不同代表组间具有统计学差异，p＜0.05
从表1和图1中可以得出，在为期15周的实验过程中实验小鼠没有发生异常临床症状，经过14周的高脂饮食诱导后，和正常对照组(ND)相比，高脂+清水组(HFD)小鼠发生明显的肥胖，银耳多糖中高浓度的处理组(TP-M，TP-H)中小鼠的体重增量均明显低于HFD组，且银耳多糖对高脂膳食小鼠的减重效果呈现剂量依赖效应(图1)，膳食银耳多糖可显著。减小小鼠体内的白色脂肪(肾周脂肪和附睾脂肪)重量(表1)。实验结果表明膳食银耳多糖可有效减缓由高脂饮食引起的小鼠体重增加，减重效果呈现剂量依赖性。
2.银耳多糖对小鼠脏器及血清生化指标的影响，结果见表2。
表2银耳多糖对小鼠血清生化指标的影响
LFD HFD TP-L TP-M TP-H
甘油三酯(mmol/L) 0.79±0.03a 1.24±0.05c 1.1±0.09bc 1.1±0.07bc 0.91±0.07ab
总胆固醇(mmol/L) 3.15±0.18a 5.35±0.18d 4.84±0.2cd 4.6±0.25c 3.98±0.21b
高密度脂蛋白(mmol/L) 2.36±0.26a 4.52±0.36b 4.04±0.2b 4.23±0.28b 4.18±0.26b
低密度脂蛋白(mmol/L) 0.28±0.03a 0.54±0.03c 0.53±0.02c 0.46±0.02b 0.42±0.02b
游离脂肪酸(mEq/L) 0.61±0.04a 1.67±0.12b 1.60±0.13b 1.56±0.14b 1.41±0.09b
谷丙转氨酶(U/L) 51.67±3.58a 106.71±12.63c 83.02±3b 74.26±5.69b 79.95±6.28b
谷草转氨酶(U/L) 141.26±12.98a 194.11±9.93b 178.28±24.16a 163.92±12.03a 139.58±9.12a
葡萄糖(mmol/L) 7.02±0.5a 11.20±0.51c 9.5±0.46b 8.23±0.49ab 8.21±0.58ab
注：a，b，c，d代表统计差异，标注字母不同代表组间具有统计学差异，p＜0.05
从表2中可以得出，通过对小鼠脏器重量和血清中脂质相关生化指标的测定发现，与ND组小鼠相比，HFD组小鼠血清中的ALT、AST、TC、TG、LDL-C与HDL-C的含量水平显著升高，而膳食银耳多糖可有效降低因高脂饮食引起的血清TG、TC、LDL-C、ALT与AST的升高。实验结果表明银耳多糖具有明显的降血脂、降胆固醇及改善高脂膳食诱导的脂质沉积的作用。
3.银耳多糖减轻肥胖小鼠肝组织脂质累积和脂肪细胞肥大
肥胖的主要特征是脂质在内脏和脂肪组织的累积。通过对肝脏组织进行H&E染色发现NFD组小鼠肝脏脂质含量很少，HFD组小鼠的肝脏脂滴较多，脂质积累情况严重，肝细胞脂肪变性指数明显增大。与HFD组相比，膳食银耳多糖组(TP-L,TP-M,TP-H)小鼠的肝脏脂滴数量减少，脂质积累情况得到改善(结果见图2)。
通过观察病理切片发现ND组附睾脂肪(GWAT)和皮下脂肪(SWAT)组织的脂肪细胞体积较小，形态较为清晰，结构完整，HFD组小鼠白色脂肪的脂肪细胞体积明显增大，排列不规则，视野内细胞数减少；与HFD组相比，银耳多糖组(TP-L，TP-M，P-H)中小鼠脂肪细胞体积明显减小，在显微镜视野范围内细胞数目明显增多(结果见图3和图4，其中图3为附睾脂肪，图4为皮下脂肪)。实验结果表明银耳多糖能够抑制高脂膳食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中的脂质积累，改善脂肪细胞肥大情况。
4.膳食银耳多糖改善肥胖小鼠的葡萄糖和胰岛素耐受性
为探究膳食甜菜红素对高脂膳食小鼠的葡萄糖耐量的影响，在实验第12周和第13周分别对各实验组小鼠进行葡萄糖耐受实验(OGTT)的结果如图5和表3所示所示，进行胰岛素耐受实验(ITT)试验的结果如图6和表4所示。
表3葡萄糖耐受实验结果
从图5和表3中可以得出，HFD组小鼠的空腹血糖水平明显高于LFD组与膳食银耳多糖组(TP-L,TP-M,TP-H)。对小鼠进行灌胃葡萄糖溶液(2g/kg)后各膳食组小鼠血糖水平在30min后达到最高，随后趋于下降，到120min时HFD组血糖水平依然明显高于LFD、HFD+L、HFD+M与HFD+H组。
表4胰岛素耐受实验结果
从图6和表4中可以得出，对小鼠腹腔注射胰岛素后，膳食银耳多糖组(TP-L，TP-M，TP-H)小鼠的葡萄糖变化水平与恢复速度明显优于HFD组。实验数据表明表明HFD组小鼠与LFD组相比出现了明显的葡萄糖不耐受，而膳食银耳多糖提取物可以改善高脂膳食诱导产生的肥胖小鼠的葡萄糖不耐受性，且作用效果具有浓度依赖性。
由以上实施例可以得出，银耳多糖能够防止肝组织脂质的累积和脂肪细胞肥大，进而能够防治肥胖，而且能够提高葡萄糖和胰岛素的耐受性，具有降血脂、降胆固醇和降低脂质沉积的作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.银耳多糖在制备防治肥胖药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括防治肝组织脂质累积的药物。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括防治脂肪细胞肥大的药物。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括提高葡萄糖耐受性的药物。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括提高胰岛素耐受性的药物。
6.根据权利要求1～5任意一项所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂或膏剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述剂型需要的辅料为医学上可接受的辅料。
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