CN108633739A

CN108633739A - 蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂及生根方法

Info

Publication number: CN108633739A
Application number: CN201810475554.5A
Authority: CN
Inventors: 赵恒田; 范丽莉; 邵玲玲; 臧丹丹
Original assignee: Northeast Institute of Geography and Agroecology of CAS
Current assignee: Northeast Institute of Geography and Agroecology of CAS
Priority date: 2018-05-17
Filing date: 2018-05-17
Publication date: 2018-10-12
Anticipated expiration: 2038-05-17
Also published as: CN108633739B

Abstract

蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂及生根方法，本发明属于组培生物技术领域，它要解决蓝靛果忍冬试管外生根率较低的问题。本发明蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA 90～110mg，NAA 50～70mg，GA₃ 40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。生根方法：一、将蓝靛果组培苗剪成枝条段，多个枝条段捆绑成枝条段束；二、将枝条段束的基部浸入生根剂中1.5～2.5h，移栽到浇水的苔藓基质上。本发明所述的培养方法操作简便，试管苗生根率高，最高可达100％，生根速度快，10～15天即可生根。

Description

蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂及生根方法

技术领域

本发明属于组培生物技术领域，具体涉及一种蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂及生根方法。

背景技术

蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)，又称蓝果忍冬、蓝靛果、蓝果，俗称山茄子、羊奶子、草甸子果、黑瞎子果等，为多年生落叶灌木类小浆果。其分布区域主要在俄罗斯远东地区与新西伯利亚地区、朝鲜北部、日本和中国东北的大小兴安岭、长白山、张广才岭等林区，在西北、华南等地高海拔山区也有分布。主要生长在林中湿地或林缘、沼泽草甸，上部枝条耐零下40℃以上低温，对土壤要求不严，适应性较强。

蓝靛果忍冬果实具有较高的营养保健价值，富含糖类、有机酸、矿物质、维生素等成分，所含17种氨基酸的总量高于普通水果，其中必需氨基酸占总量40％左右；矿质元素中锌、硒、铁、钙含量较高；尤其花青素等生物活性物质含量是一般水果的几倍至几十倍。果实可鲜食，也可加工成干果、饮料、果酱、果糕和果酒等；另外，茎叶和果实又可提取天然紫红色素。

近年来随着蓝靛果忍冬市场需求不断增长，其鲜果价格也不断增高，近3年来由每公斤10元涨到每公斤20～25元，浓缩汁国际市场价格为6.0～8.0万元/吨，饮品销售价为5～10元/每瓶，市场供不应求。

随着野生蓝靛果饮料、果酒、色素等产品开发，掠夺式采收导致野生资源锐减，加之资源分布有限，难以满足日益增长的市场需求，因此开展人工抚育与栽培十分必要。制约蓝靛果忍冬人工栽培的主要问题是种苗繁殖困难，目前生产上主要采用扦插与分根、种子实生苗繁殖，前者繁殖系数低，成活率不高，且破坏野生资源；后者种苗变异性较大，影响果实的品质与产量，且因种子粒小，成苗困难，育苗技术难度大。通过组织培养快速繁殖可以解决上述问题，但蓝靛果忍冬组培苗生根一般均在试管内进行，导致成本升高，且操作难度较大，如能实现试管外生根，将大大降低组培苗成本，且有利于快速大量繁殖种苗。有关利用植物枝条扦插繁殖及相关生根剂研究报道较多。

如屠娟丽等报道用1 500mg/L的NAA将下江忍冬插穗基部浸30s,其生根率高达82％，耿芳等研究发现IBA浓度对插条生根也有显著影响，先快蘸液态KIBA(8 000mg/L)再迅速蘸取粉状IBA(8000mg/L)的插条生根率最高为84.4％，这些报使用的激素浓度都较高，且未见关于蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂的研究。

又如中国专利公报公开了“高效生根剂(CN1353934公开日2002.06.19)”，“一种棉花枝条扦插方法及其专用扦插生根剂(CN1907031公开日2007.02.07)”，“一种高效缓释牡丹移栽生根剂及使用方法(CN101507440公开日2009.08.19)”；但关于蓝靛果组培苗试管外生根的研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是要解决蓝靛果忍冬试管外生根率较低的问题，而提供一种蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂及生根方法。

本发明蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA90～110mg，NAA50～70mg，GA₃ 40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

本发明蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法按下列步骤实现：

一、在无菌条件下将蓝靛果组培苗剪成枝条段，多个枝条段捆绑成枝条段束；

二、将枝条段束的基部浸入生根剂中1.5～2.5h，取出移栽到浇水的苔藓基质上；

其中所述的生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA90～110mg，NAA50～70mg，GA₃40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

本发明在蓝靛果优良品种培育过程中，为加速新品种繁殖，进行了组培技术研究，在试管外生根研究方面取得了重要成果，试管外组培无根苗生根率可达95％以上，且在生产上得到了应用。

本发明所述的培养方法操作简便，材料成本低，设备要求低，试管苗生根率高，最高可达100％，生根速度快，一般10～15天都可生根，而试管苗用生根培养基试管内生根一般需要30天，本发明解决了试管苗试管外快速生根的难题，可快速扩繁蓝靛果苗，以达到生产的要求。

具体实施方法

具体实施方式一：本实施方式蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA90～110mg，NAA50～70mg，GA₃ 40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

本实施方式蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂中植物激素的组成为：IBA90～110mg/L+NAA50～70mg/L+GA₃ 40～60mg/L+VB₁₂0.7～0.9mg/L。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA100mg，NAA 60mg，GA₃ 50mg，VB₁₂ 0.8mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

具体实施方式三：本实施方式蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法按下列步骤实现：

其中所述的生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA 90～110mg，NAA 50～70mg，GA₃40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式三不同的是步骤一中枝条段的长度为2～4cm。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式三不同的是步骤一中枝条段束的底部对齐。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式三至五之一不同的是步骤一中每100个枝条段捆绑成枝条段束。

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式六不同的是每100个枝条段浸入9～11mL的生根剂中。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式三至七之一不同的是步骤二从生根剂中取出枝条段束，用水冲洗后移栽到浇水的苔藓基质上。

本实施方式为蓝靛果忍冬组培快繁育苗的方法，可有效提高蓝靛果忍冬试管外生根率及种苗成活率，降低育苗成本。不仅能够减少了一次无菌操作的步骤，提高了培养空间，而且简化了组培程序，提高了繁殖系数，降低了生产成本。

实施例：根据植物激素促进器官形成的作用原理，IBA、NAA、GA₃、VB₁₂等都可促进插条不定根形成，设计正交试验，以选择适宜蓝靛果组培苗试管外生根的最佳激素组合。本实施例主要以浸泡时间、激素种类和浓度为主要因素设计正交试验，设置梯度研究蓝靛果组培苗试管外生根的最佳培养液和浸泡时间，正交试验表设计如下：

表1蓝靛果组培苗试管外生根的最佳培养液和浸泡时间正交试验表

本实验利用蓝靛果组培苗1800株，每个处理做100株苗，每株2节左右，约4个叶片，高约3cm，在超净工作台中将组培苗基部的愈伤和第二节的叶片剪掉，将枝条放入装有水的小烧杯中，都剪完后，每100个枝条底部对齐用塑料(绳)轻捆在一起，共18捆。

每个激素组合配制100ml，按每个组合配制好溶液后装入小烧杯中，依次将捆好的蓝靛果组培苗基部浸泡在溶液中，待到规定的时间后将其取出并用自来水冲洗10s，后移栽到苔藓基质上，测定其在苔藓基质上的生根率、平均根长和最大根长。之后分别在第5、10、15、20天调查一次，观察其生根情况。实验结果表2所示：

表2蓝靛果组培苗试管外生根情况表

从以上数据可以看出，每个组合在第五天都有生根的植株，其中组合14的生根率最高，且生根时间较快。之后，以ABT1号生根剂作为对照实验，配制ABT1号常用生根浓度100mg/L溶液，分别浸泡蓝靛果组培苗1h、2h和3h，每个处理做100株苗，调查结果如表3所示。

表3ABT1号生根剂生根率

ABT1号生根剂对蓝靛果组培苗生根率整体低于本发明的组合实验结果，浸泡同样时间，ABT1号的生根率明显低于实验中浸泡同样时间的组合。最优组合14在第20天时的生根率可达到98％，而ABT1号生根剂到第20天时生根率最高才到51％，另外，其生根量和根长都较差。

最优组合14的制备过程如下：以配制100mL蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂为例，5ml体积分数95％的乙醇分别溶解10mg IBA，6mg NAA，5mg GA₃，0.08mg VB₁₂，后加水定容至100ml即可，约可浸泡1000枝蓝靛果组培苗枝条。

本发明通过将蓝靛果忍冬试管苗移栽到苔藓天然培养基上进行生根诱导试验，分析了外源激素种类及浓度、移栽前激素浸泡时间对生根的影响，并对试管苗瓶外生根剂与瓶内生根剂进行了比较，指明了蓝靛果忍冬试管苗瓶外生根剂的优势，该方法可有效提高设施条件下寒区蓝靛果促成栽培产量，对促进设施蓝靛果产业形成具有重要意义。

通过三年的反复试验，本发明发现采用组合14：IBA 100mg/L+NAA 60mg/L+GA₃50mg/L+VB₁₂ 0.8mg/L浸泡蓝靛果组培苗2h，获得的生根效果最好，5天左右就有生根现象，20天左右生根率高达100％。

本发明培养方法操作简便，材料成本低，设备要求低，试管苗生根率高，可达100％，生根速度快，一般10～15天都可生根，而试管苗用生根培养基试管内生根一般需要30天，本发明解决了试管苗试管外快速生根的难题，可快速扩繁蓝靛果苗，以达到生产的要求。

Claims

1.蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂，其特征在于该蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA 90～110mg，NAA 50～70mg，GA₃ 40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

2.根据权利要求1所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂，其特征在于蓝靛果忍冬组培苗试管外生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA 100mg，NAA 60mg，GA₃ 50mg，VB₁₂ 0.8mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

3.蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于该方法按以下步骤实现：

其中所述的生根剂是每1000mL该生根剂含有：IBA 90～110mg，NAA 50～70mg，GA₃ 40～60mg，VB₁₂ 0.7～0.9mg，用体积分数为95％的乙醇10～15mL溶解，水定容至1000mL。

4.根据权利要求3所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于步骤一中枝条段的长度为2～4cm。

5.根据权利要求3所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于是步骤一中枝条段束的底部对齐。

6.根据权利要求3所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于步骤一中每100个枝条段捆绑成枝条段束。

7.根据权利要求6所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于每100个枝条段浸入9～11mL的生根剂中。

8.根据权利要求3所述的蓝靛果忍冬组培苗试管外生根方法，其特征在于步骤二从生根剂中取出枝条段束，用水冲洗后移栽到浇水的苔藓基质上。