CN108587929A - 一种快速分离田间稻瘟病斑上稻瘟菌单孢的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种快速分离田间稻瘟病斑上稻瘟菌单孢的方法。本发明提供的方法,1)将含典型稻瘟病单病斑的水稻叶片涂布在水琼脂培养基表面,得到带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板;2)培养所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板,再于体视显微镜下寻找单个且已萌发的稻瘟菌分生孢子,再分离该稻瘟菌单孢,得到含有稻瘟菌单孢的琼脂块;3)将所述含有稻瘟菌单孢的琼脂块转移至番茄燕麦培养基培养,得到小菌落,在所述菌落周围贴灭菌滤纸片,继续培育至菌落长满培养皿;收集带菌的灭菌滤纸片,得到稻瘟菌单孢菌。本发明极大地缩短从田间稻瘟病斑上分离、保存稻瘟菌单孢的时间,对研究稻瘟菌群体无毒基因型的时空动态有重大的意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种快速分离田间稻瘟病斑上稻瘟菌单孢的方法,属于植物保护领域。
背景技术
由稻瘟菌Magnaporthe oryzae引起的稻瘟病是世界各水稻生产区内广泛发生、且危害极大的一种真菌性病害。每年由稻瘟病造成的水稻产量损失约占其总产量的5%;在极端条件下,稻瘟病会造成水稻绝产。稻瘟菌可以侵染水稻的根、叶、穗等各个部位,在水稻整个生育期内均可侵染。此外,稻瘟菌寄主范围非常广泛,还可侵染大麦、小麦等禾本科植物。
目前防治水稻稻瘟病的主要措施有栽培抗稻瘟病品种和使用杀菌剂。一方面,国家在大力提倡绿色植保工程,需要减少杀菌剂的用量,采用环保的措施进行病害的防控。另一方面,由于田间稻瘟菌无毒基因的快速变异,能导致抗病水稻品种在推广几年后就失去抗性。因此,了解并掌握田间稻瘟菌无毒基因型的组成、分布及其变异规律,才能为抗病水稻品种的合理布局提供基础,进而对稻瘟病进行绿色防控。为此,科研人员需要从田间分离大量的稻瘟菌单孢菌株,以便检测不同稻瘟菌菌株的致病力、致病型和杀菌剂抗性等性状。目前,现有的稻瘟菌单孢分离方法操作周期长、操作过程复杂、易受其它杂菌的污染,这些因素极大地制约了科研人员研究稻瘟菌群体无毒基因型时空动态的进度和水平。因此,急需要一种能快速地从田间稻瘟病斑上分离稻瘟菌单孢的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种从田间稻瘟病斑上分离稻瘟菌单孢的方法。
本发明提供的方法,包括如下步骤:
1)将含典型稻瘟病单病斑的水稻叶片(或者用剪刀剪下的含典型单病斑的适宜大小叶片)涂布(涂布采用的力道适中,避免孢子收集过密或过稀)在水琼脂培养基表面,得到带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板;该步骤可以直接田间操作。
2)培养所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板,再于体视显微镜下寻找单个且已萌发的稻瘟菌分生孢子,再分离该稻瘟菌单孢,得到含有稻瘟菌单孢的琼脂块;
3)将所述含有稻瘟菌单孢的琼脂块转移至番茄燕麦培养基培养,得到小菌落,在所述菌落周围贴灭菌滤纸片,继续培育至菌落长满培养皿;收集带菌的灭菌滤纸片,得到稻瘟菌单孢菌。
上述方法中,步骤1)中所述水琼脂培养基还包含以下成分:50微克/毫升盐酸四环素、20微克/毫升卡那霉素、50微克/毫升硫酸链霉素和20微克/毫升氯霉素。
上述方法中,步骤2)中所述体视显微镜的最大放大倍数不低于100倍。
上述方法中,所述体视显微镜的放大倍数为160倍。
上述方法中,步骤2)中,所述培养所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板的时间为2-3小时、培养温度为26度,光照度为15000勒克斯;
或,所述分离稻瘟菌单孢的方式为划“方形”琼脂块的方式,一般可在拖划区域边缘寻找到可供挑取的单个稻瘟菌孢子;且挑针划线形成的“方形”琼脂块体积应越小越好,可降低杂菌污染概率。
上述方法中,步骤2),若不能及时地进行分离稻瘟菌单孢,则将所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板置于4度冰箱中保存,可于一周内进行稻瘟菌单孢分离实验。
上述方法中,步骤3)中,所述将所述含有稻瘟菌单孢的琼脂块转移至番茄燕麦培养基培养时间为2-3天、培养温度为26度、光照度为15000勒克斯;
所述继续培育的时间为5-7天、温度为26度,光照度为15000勒克斯;
或,所述收集带菌的灭菌滤纸片为在超净工作台中进行;
或,所述方法还包括如下步骤:将所述收集带菌的灭菌滤纸片风干后至于-20度保存。
上述方法中,若步骤3)中已分离的稻瘟菌培养皿中如有其它真菌污染,则重复步骤2)进行单孢分离。
本发明解决了现有的稻瘟菌单孢分离方法中操作周期长、操作过程复杂、易受其它杂菌污染等问题。通过水琼脂培养基直接从田间单个稻瘟病斑上收集稻瘟菌的分生孢子,极大地缩短了稻瘟菌单孢分离前分生孢子收集的时间,且在很大程度上避免了其它杂菌的污染。利用高分辨率的体视显微镜进行稻瘟菌单孢的分离,能更容易地识别和挑取稻瘟菌的单个分生孢子,提高了稻瘟菌单孢挑取的准确率;直接在单孢小菌落边缘贴纸片的方法也缩短了稻瘟菌菌株保存的时间。通过以上技术方案,科研人员可极大地缩短从田间稻瘟病斑上分离、保存稻瘟菌单孢的时间,对研究稻瘟菌群体无毒基因型的时空动态有重大的意义。
附图说明
图1为在水稻叶瘟高发时期,于田间收集水稻叶片单病斑上的稻瘟菌分生孢子。图示说明:A图,田间水稻叶瘟;B图,含单个、典型稻瘟病斑的水稻叶片;C图,水琼脂培养基收集单个稻瘟病斑上的分生孢子。
图2为在体视显微镜下用挑针进行稻瘟菌单孢分离的过程。图示说明:A图,将挑针烧红灭菌并置于挑针架上冷却;B图,萌发的单个稻瘟菌分生孢子;C图,用挑针在目标单孢边缘划线,呈“方形”;D图,将单孢转移至番茄燕麦培养基上。
图3为单孢稻瘟菌菌株保存过程。A图,在单孢小菌落边缘贴灭菌滤纸片约40片;B图,稻瘟菌菌落长满培养皿;C图,将带菌滤纸片转移至灭菌硫酸纸袋中。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、仪器、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
下述实施例中所用的水琼脂培养基制作方法:称取琼脂粉4克,加水定容至200毫升,混匀,121度高压灭菌20分钟。
含抗生素的水琼脂培养基为在水琼脂培养基中添加如下终浓度的组分得到的培养基:盐酸四环素,50微克/毫升;卡那霉素,20微克/毫升;硫酸链霉素,50微克/毫升;氯霉素,20微克/毫升。
下述实施例中所用的番茄燕麦培养基制作方法:称取40克燕麦片,800毫升水煮沸留滤液;加入150毫升番茄汁、15克琼脂粉,加水定容至1升,混匀,121度高压灭菌20分钟。
实施例1、快速分离田间稻瘟病斑上稻瘟菌单孢的方法
1、收集稻瘟菌分生孢子
在水稻叶瘟高发时期,于田间寻找含典型稻瘟病单病斑的水稻叶片,或者用剪刀剪下含典型单病斑的适宜大小叶片;将叶片上的单病斑在含抗生素的水琼脂培养基表面上轻按(力道适中,以避免孢子收集过密或过稀),并拖划2至3次,使病斑上的稻瘟菌分生孢子涂布到含抗生素的水琼脂培养基表面,即可得到带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板(图1)。
2、单个稻瘟菌分生孢子分离
将上述1中得到的带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板置于低温保存箱中,回到实验室后放置于26度恒温光照培养箱(光照度为15000勒克斯)中培养2-3小时后进行单孢分离;
点燃酒精灯,将挑针烧红灭菌,放置在挑针架上冷却,在放大倍数为160倍的体视显微镜下寻找水琼脂培养基表面上已萌发的、易挑取的单个稻瘟菌分生孢子;在目标单孢周边用挑针划开水琼脂培养基,每次划线前需重新烧红挑针灭菌;一般四次后即在目标单孢周边形成一个“方形”,即可得到含有稻瘟菌单孢的“方形”琼脂块(“方形”琼脂块体积越小越好,可降低杂菌污染概率);用挑针将得到的含有稻瘟菌单孢的“方形”琼脂块转移至番茄燕麦培养基表面,编号标记,置于26度恒温光照培养箱(光照度为15000勒克斯)中培养,2-3天后即可观察到稻瘟菌单孢形成的小菌落(图2)。
3、稻瘟菌单孢的保存
选取待保存的、已形成菌落的稻瘟菌单孢菌株,在超净工作台中围绕菌落边缘贴灭菌滤纸片约40片。将番茄燕麦培养板置于26度恒温光照培养箱(光照度为15000勒克斯)中继续培养5至7天,稻瘟菌即可长满培养皿。若在已分离的稻瘟菌培养皿中如有其它真菌污染,则需在原始的采样水琼脂培养板上重新进行单孢分离,或者丢弃该样品。
在超净工作台中,用灭菌的镊子扣取培养皿中带有稻瘟菌的滤纸片,并转移至灭菌的硫酸纸袋中,编号标记。将装有稻瘟菌的硫酸纸袋装入灭菌大信封中,编号标记,于装有变色硅胶粒的干燥器中处理一周左右。将装有稻瘟菌滤纸片的信封放置在低温保存塑料盒中,加入适量的变色硅胶粒,密封,编号标记,于-20度冰箱中长期保存稻瘟菌(图3)。
Claims (10)
1.一种从田间稻瘟病斑上分离稻瘟菌单孢的方法,包括如下步骤:
1)将含典型稻瘟病单病斑的水稻叶片涂布在含抗生素的水琼脂培养基表面,得到带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板;
2)培养所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板,再于体视显微镜下寻找单个且已萌发的稻瘟菌分生孢子,再分离该稻瘟菌单孢,得到含有稻瘟菌单孢的琼脂块;
3)将所述含有稻瘟菌单孢的琼脂块转移至番茄燕麦培养基培养,得到小菌落,在所述菌落周围贴灭菌滤纸片,继续培育至菌落长满培养皿;收集带菌的灭菌滤纸片,得到稻瘟菌单孢菌。
2.根据权利要求1中所述的方法,其特征在于:
步骤1)中,所述含抗生素的水琼脂培养基为在水琼脂培养基中添加如下终浓度的组分得到:50微克/毫升盐酸四环素、20微克/毫升卡那霉素、50微克/毫升硫酸链霉素和20微克/毫升氯霉素。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤2)中所述体视显微镜的最大放大倍数不低于100倍。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述体视显微镜的放大倍数为160倍。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:
步骤2)中,所述培养带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板的时间为2-3小时、培养的温度为26度,培养的光照度为15000勒克斯。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:
所述分离稻瘟菌单孢的方式为划“方形”琼脂块的方式。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:
步骤2),若不能及时分离稻瘟菌单孢,则将所述带有稻瘟菌分生孢子的水琼脂板置于4度保存。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:
步骤3)中,所述将含有稻瘟菌单孢的琼脂块转移至番茄燕麦培养基培养的时间为2-3天、培养的温度为26度、培养所需光照度为15000勒克斯;
所述继续培育的时间为5-7天、温度为26度,光照度为15000勒克斯。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法,其特征在于:
所述方法还包括如下步骤:将所述收集带菌的灭菌滤纸片风干后至于-20度保存。
10.根据权利要求1-9中任一所述的方法,其特征在于:
若步骤3)中已分离的稻瘟菌培养皿中如有其它真菌污染,则重复步骤2)进行单孢分离。
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---|---|
CN (1) | CN108587929A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112592831A (zh) * | 2021-01-06 | 2021-04-02 | 云南农业大学 | 一种快速分离三七圆斑病菌单个分生孢子的方法 |
CN113234606A (zh) * | 2021-06-28 | 2021-08-10 | 广东省农业科学院水稻研究所 | 一种快速分离水稻穗颈瘟单孢的方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5264569A (en) * | 1990-06-12 | 1993-11-23 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Purified fungal spore tip mucilage |
CN1778895A (zh) * | 2005-10-12 | 2006-05-31 | 云南大学 | 一种筛选抗稻瘟病放线菌的方法 |
KR100835677B1 (ko) * | 2007-01-11 | 2008-06-09 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 히포스폰지아로부터 분리된 할리설페이트 화합물을함유하는 살진균용 조성물 |
CN105002097A (zh) * | 2014-12-04 | 2015-10-28 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种大丽轮枝菌的单孢分离纯化方法 |
CN105191680A (zh) * | 2015-11-02 | 2015-12-30 | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 | 一种室内水稻品种稻瘟病抗性鉴定方法 |
CN107624796A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-01-26 | 安徽省中日农业环保科技有限公司 | 一种防治稻瘟病的微生物农药的制备方法 |
-
2018
- 2018-05-16 CN CN201810469205.2A patent/CN108587929A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5264569A (en) * | 1990-06-12 | 1993-11-23 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Purified fungal spore tip mucilage |
CN1778895A (zh) * | 2005-10-12 | 2006-05-31 | 云南大学 | 一种筛选抗稻瘟病放线菌的方法 |
KR100835677B1 (ko) * | 2007-01-11 | 2008-06-09 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 히포스폰지아로부터 분리된 할리설페이트 화합물을함유하는 살진균용 조성물 |
CN105002097A (zh) * | 2014-12-04 | 2015-10-28 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种大丽轮枝菌的单孢分离纯化方法 |
CN105191680A (zh) * | 2015-11-02 | 2015-12-30 | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 | 一种室内水稻品种稻瘟病抗性鉴定方法 |
CN107624796A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-01-26 | 安徽省中日农业环保科技有限公司 | 一种防治稻瘟病的微生物农药的制备方法 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
TAE HOON KANG等: "Antifungal Activities of Dimeric Sesquiterpenes, Shizukaols C and F,Isolated from Chloranthus japonicus Sieb.", 《J. MICROBIOL. BIOTECHNOL.》 * |
中国人民解放军兽医大学: "《兽医检验》", 31 August 1979, 北京:农业出版社 * |
唐利华等: "稻瘟菌群体中dsRNA的多样性及稻瘟菌菌株QSP5中病毒对寄主生物学性状影响的研究", 《植物病理学报》 * |
唐力琼等: "稻瘟病菌生物学特性及产孢条件研究", 《河南农业科学》 * |
杨军等: "水稻稻瘟病菌单孢分离技术及常见问题分析", 《山东农业科学》 * |
赵沙沙等: "稻瘟病菌孢子的分离和保存方法", 《湖北农业科学》 * |
郭梅等: "水稻稻瘟病菌分离技术研究", 《黑龙江农业科学》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112592831A (zh) * | 2021-01-06 | 2021-04-02 | 云南农业大学 | 一种快速分离三七圆斑病菌单个分生孢子的方法 |
CN113234606A (zh) * | 2021-06-28 | 2021-08-10 | 广东省农业科学院水稻研究所 | 一种快速分离水稻穗颈瘟单孢的方法 |
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