CN108552225A - 一种生物农药的制备方法 - Google Patents

一种生物农药的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108552225A
CN108552225A CN201810543245.7A CN201810543245A CN108552225A CN 108552225 A CN108552225 A CN 108552225A CN 201810543245 A CN201810543245 A CN 201810543245A CN 108552225 A CN108552225 A CN 108552225A
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
obtains
take
mass ratio
stirred
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201810543245.7A
Other languages
English (en)
Inventor
胡丽春
庄文琴
李莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Foshan Mausoleum Environmental Protection Technology Co Ltd
Original Assignee
Foshan Mausoleum Environmental Protection Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Foshan Mausoleum Environmental Protection Technology Co Ltd filed Critical Foshan Mausoleum Environmental Protection Technology Co Ltd
Priority to CN201810543245.7A priority Critical patent/CN108552225A/zh
Publication of CN108552225A publication Critical patent/CN108552225A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
    • A01N25/26—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests in coated particulate form
    • A01N25/28—Microcapsules or nanocapsules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/44—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
    • A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
    • A01N47/42—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=CX2 groups, e.g. isothiourea
    • A01N47/44—Guanidine; Derivatives thereof

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明公开了一种生物农药及其制备方法，属于农药生产技术领域。本发明以委内瑞拉链霉菌为原料，其可作为天然型氨基糖苷类的农用抗生素物质使用，但因为其产抗生素的效率较低，经活化培养后经紫外诱变和加入氯化锂联合诱变，达到提高产抗生素的效果，氯化锂作为无机诱变剂，可做为转录阻滞剂参与蛋白质的合成，在作用于农田时，产生的活性物质和病菌的核蛋白亚基相结合，抑制fMet‑tRNA与亚基相结合，阻碍起始复合物的形成，从而抑制蛋白质的生物合成，达到杀灭植物真菌和细菌病害的目的。本发明解决了目前微生物农药储存时间短，微生物容易死亡失活，导致防治效果变差的问题，提供一种生物农药的制备方法。

Description

一种生物农药的制备方法
技术领域
本发明属于农药生产技术领域，特别涉及一种生物农药及其使用方法。
背景技术
病虫害每年给农业生产造成巨大损失，为了实现稳产高产，人们一直主要采用化学农药给予控制。化学农药具有防效高、速度快、杀虫抗菌谱广、成本低、使用简单等优点，因而得到了迅速发展，并成为防治病虫害夺取农业生产丰收的一个重要手段。但由于化学农药的长期、大量和反复使用，带来了对土壤、水体和大气的污染；农副产品中农药残留增加，也直接危害了人类的健康及生存。对于人地关系非常紧张的地区，其唯一出路是大力发展生物农药。
生物农药是指利用生物活体（真菌，细菌，昆虫病毒，转基因生物，天敌等）或其代谢产物（信息素，生长素，萘乙酸钠，2，4-D等）针对农业有害生物进行杀灭或抑制的制剂。又称天然农药，系指非化学合成，来自天然的化学物质或生命体，而具有杀菌农药和杀虫农药的作用。根据国内外专家较为一致的看法，今后10年内，生物农药将取代20%以上的化学农药。因此，生物农药发展潜力是巨大的。目前已有利用盾壳霉、芽孢杆菌、武夷菌素、井冈霉素等为主体制备生物农药，有一定的防治效果，但是在使用时也存在着一些问题：
（1）现有生物农药药效见效慢，一般药后好几天才会起效果，容易造成防护效率低的问题。
（2）现有微生物农药储存时间短，其中的微生物容易死亡，导致农药保质期短。
因此，需要开发一种防治病害效果好的生物新农药，能够有效的改善微生物储存时间短、容易死亡失活，导致防治效果变差的这一问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对目前微生物农药储存时间短，微生物容易死亡失活，导致防治效果变差的问题，提供一种生物农药的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
（1）取委内瑞拉链霉菌按2~5%的接种量接种至活化培养基中，于25~28℃培养培养，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、25~28℃培养，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：6~8加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按2~4%的接种量接种至诱变培养基中，于25~28℃避光培养，得种子菌种，取种子菌种按3~6%的接种量接种至发酵培养基中发酵，得发酵液，去发酵液按质量比10：1~3加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置15~18h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取30~40份干燥物、0.6~0.8份菊糖、0.3~0.5份低聚木糖、0.2~0.5份碳酸氢钠、0.5~0.8份硫酸镁、18~20份乳糖、3~5份谷氨酸钠、3~6份精氨酸、5~10份6-苄基腺嘌呤、3~5份阿维菌素、3~5份二甲基聚硅氧烷、4~7份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、15~20份海藻酸钠搅拌混合20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：5~8加入去离子水，于20~30℃搅拌混合，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至140~150℃保温5~10min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量10~20%的微晶纤维素，于150~160℃搅拌混合，再于90~100℃保温20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比10~15：2~4加入水合氯化锂，于90~100℃搅拌混合，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：5~7加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合20~30min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量4~7%的甲苯二异氰酸酯，于25~30℃搅拌混合，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于25~35℃搅拌混合，静置，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明以委内瑞拉链霉菌为原料，其可作为天然型氨基糖苷类的农用抗生素物质使用，但因为其产抗生素的效率较低，经活化培养后经紫外诱变和加入氯化锂联合诱变，达到提高产抗生素的效果，氯化锂作为无机诱变剂，可做为转录阻滞剂参与蛋白质的合成，通过顺式作用元件作用于DNA，使之形成基因增强子或者启动多拷贝基因，和紫外线一起对菌株进行复合诱变能增强紫外线的诱变效果，菌株在双重诱变的条件下更易于发生正突变或正突变基因的积累，在作用于农田时，产生的活性物质和病菌的核蛋白亚基相结合，抑制fMet-tRNA与亚基相结合，阻碍起始复合物的形成，从而抑制蛋白质的生物合成，达到杀灭植物真菌和细菌病害的目的；
（2）本发明加入结构相似的大环内脂类抗生素，尤其对螨虫类有很高的杀虫活性，同时对许多危害作物的昆虫也有杀虫活性，具有广谱的杀虫活性，将其与得到的高效生物农药基料进行复配，加入6-苄基腺嘌呤促进植物细胞活性，促进细胞分裂，抑制植物叶内叶绿素、蛋白质等的分解，保绿防老，将氨基酸、生长素等向处理部位调运，同时将生物农药活性成分更快的转运至植物体内，进行生物防治，提高了生物防治效率，同时加入二甲基聚硅氧烷为消泡剂、聚甲氧基聚氧 乙烯甲基丙烯酸酯为稳定剂、海藻酸钠助悬剂，形成分散和稳定性较好的乳液，可生物降解，同时提高了生物农药的缓释性能，加入菊糖、低聚木糖作为益生元，刺激生物农药活性菌的生物活性，促进菌丝分裂生长，添加精氨酸，增加活菌数和菌体干重，对菌体形成保护，提高防治效果；
（3）本发明以氯化锂、N,N-二甲基乙酰胺溶解微晶纤维素，以4,4’-二羟基苯甲酮为紫外吸收剂、甲苯二异氰酸酯为交联剂，将生物农药颗粒经制成的膜进行包裹，具有抗紫外效果，控制了紫外线对活性菌的影响，防止菌种在紫外光照射下失活，苯甲酮基团在紫外光的激发下，羰基受到激发生成自由基，这种新自由基可以引发烯烃类物质聚合，没有供氢物质时，苯甲酮会在氧气作用下消除自由基，紫外线能量倍转化成热能散发出来，同时在膜的保护下，生物农药降解率降低，达到延长微生物农药储存时间，进行缓慢释放的效果。
具体实施方式
委内瑞拉链霉菌：于实验室4℃斜面保藏。
伊维菌素：购于周口市金石化工有限公司。
活化培养基：按质量份数计，取20~25份可溶性淀粉、1~4份硝酸钾、0.3~0.6份、0.3~0.6份硫酸镁、0.008~0.01份硫酸亚铁、1000份水，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min，即得。
诱变培养基：按质量份数计，取20~25份可溶性淀粉、1~4份硝酸钾、0.3~0.6份、0.3~0.6份硫酸镁、0.008~0.01份硫酸亚铁、3~5份氯化锂、20~25份琼脂、1000份水，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min，即得。
发酵培养基：按质量份数计，取20~25份黄豆饼粉、8~12份葡萄糖、10~15份淀粉、0.3~0.6份磷酸氢二钾、2~4份碳酸钙、1000份蒸馏水，pH 8.0，121℃灭菌20min，即得。
一种生物农药的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）取委内瑞拉链霉菌按2~5%的接种量接种至活化培养基中，于25~28℃培养5~7天，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、25~28℃培养2~3h，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：6~8加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射40~45s，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按2~4%的接种量接种至诱变培养基中，于25~28℃避光培养3~5天，得种子菌种，取种子菌种按3~6%的接种量接种至发酵培养基中，于150r/min、25~28℃发酵2~3天，得发酵液，去发酵液按质量比10：1~3加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置15~18h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取30~40份干燥物、0.6~0.8份菊糖、0.3~0.5份低聚木糖、0.2~0.5份碳酸氢钠、0.5~0.8份硫酸镁、18~20份乳糖、3~5份谷氨酸钠、3~6份精氨酸、5~10份6-苄基腺嘌呤、3~5份伊维菌素、3~5份二甲基聚硅氧烷、4~7份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、15~20份海藻酸钠搅拌混合20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：5~8加入去离子水，于20~30℃搅拌混合1~2h，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至140~150℃保温5~10min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量10~20%的微晶纤维素，于150~160℃搅拌混合20~30min，再于90~100℃保温20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比10~15：2~4加入水合氯化锂，于90~100℃搅拌混合30~40min，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：5~7加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合20~30min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量4~7%的甲苯二异氰酸酯，于25~30℃搅拌混合1~2h，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于25~35℃搅拌混合5~10min，静置5~6h，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
实施例1
委内瑞拉链霉菌：于实验室4℃斜面保藏。
伊维菌素：购于周口市金石化工有限公司。
活化培养基：按质量份数计，取20份可溶性淀粉、1份硝酸钾、0.3份、0.3份硫酸镁、0.008份硫酸亚铁、1000份水，pH7.2，121℃灭菌20min，即得。
诱变培养基：按质量份数计，取20份可溶性淀粉、1份硝酸钾、0.3份、0.3份硫酸镁、0.008份硫酸亚铁、3份氯化锂、20份琼脂、1000份水，pH7.2，121℃灭菌20min，即得。
发酵培养基：按质量份数计，取20份黄豆饼粉、8份葡萄糖、10份淀粉、0.3份磷酸氢二钾、2份碳酸钙、1000份蒸馏水，pH 8.0，121℃灭菌20min，即得。
一种生物农药的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）取委内瑞拉链霉菌按2%的接种量接种至活化培养基中，于25℃培养5天，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、25℃培养2h，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：6加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射40s，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按2%的接种量接种至诱变培养基中，于25℃避光培养3天，得种子菌种，取种子菌种按3%的接种量接种至发酵培养基中，于150r/min、25℃发酵2天，得发酵液，去发酵液按质量比10：1加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置15h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取30份干燥物、0.6份菊糖、0.3份低聚木糖、0.2份碳酸氢钠、0.5份硫酸镁、18份乳糖、3份谷氨酸钠、3份精氨酸、5份6-苄基腺嘌呤、3份伊维菌素、3份二甲基聚硅氧烷、4份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、15份海藻酸钠搅拌混合20min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：5加入去离子水，于20℃搅拌混合1h，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至140℃保温5min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量10%的微晶纤维素，于150℃搅拌混合20min，再于90℃保温20min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比10：2加入水合氯化锂，于90℃搅拌混合30min，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：5加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合20min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量4~7%的甲苯二异氰酸酯，于25℃搅拌混合1h，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于25℃搅拌混合5min，静置5h，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
实施例2
委内瑞拉链霉菌：于实验室4℃斜面保藏。
伊维菌素：购于周口市金石化工有限公司。
活化培养基：按质量份数计，取23份可溶性淀粉、2份硝酸钾、0.4份、0.4份硫酸镁、0.009份硫酸亚铁、1000份水，pH7.3，121℃灭菌20min，即得。
诱变培养基：按质量份数计，取23份可溶性淀粉、2份硝酸钾、0.4份、0.4份硫酸镁、0.009份硫酸亚铁、4份氯化锂、23份琼脂、1000份水，pH7.3，121℃灭菌20min，即得。
发酵培养基：按质量份数计，取23份黄豆饼粉、10份葡萄糖、13份淀粉、0.4份磷酸氢二钾、3份碳酸钙、1000份蒸馏水，pH 8.0，121℃灭菌20min，即得。
一种生物农药的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）取委内瑞拉链霉菌按4%的接种量接种至活化培养基中，于26℃培养6天，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、26℃培养2.5h，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：7加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射43s，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按3%的接种量接种至诱变培养基中，于26℃避光培养4天，得种子菌种，取种子菌种按5%的接种量接种至发酵培养基中，于150r/min、26℃发酵2.5天，得发酵液，去发酵液按质量比10：2加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置16h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取35份干燥物、0.7份菊糖、0.4份低聚木糖、0.3份碳酸氢钠、0.6份硫酸镁、19份乳糖、4份谷氨酸钠、5份精氨酸、7份6-苄基腺嘌呤、4份伊维菌素、4份二甲基聚硅氧烷、6份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、17份海藻酸钠搅拌混合25min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：6加入去离子水，于25℃搅拌混合1.5，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至145℃保温8min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量15%的微晶纤维素，于155℃搅拌混合25min，再于95℃保温25min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比13：3加入水合氯化锂，于95℃搅拌混合45min，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：6加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合25min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量6%的甲苯二异氰酸酯，于27℃搅拌混合1.5h，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于30℃搅拌混合8min，静置5.5h，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
实施例3
委内瑞拉链霉菌：于实验室4℃斜面保藏。
伊维菌素：购于周口市金石化工有限公司。
活化培养基：按质量份数计，取25份可溶性淀粉、4份硝酸钾、0.6份、0.6份硫酸镁、0.01份硫酸亚铁、1000份水，pH7.4，121℃灭菌20min，即得。
诱变培养基：按质量份数计，取25份可溶性淀粉、4份硝酸钾、0.6份、0.6份硫酸镁、0.01份硫酸亚铁、5份氯化锂、25份琼脂、1000份水，pH7.4，121℃灭菌20min，即得。
发酵培养基：按质量份数计，取25份黄豆饼粉、12份葡萄糖、15份淀粉、0.6份磷酸氢二钾、4份碳酸钙、1000份蒸馏水，pH 8.0，121℃灭菌20min，即得。
一种生物农药的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）取委内瑞拉链霉菌按5%的接种量接种至活化培养基中，于8℃培养7天，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、28℃培养3h，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：8加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射45s，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按4%的接种量接种至诱变培养基中，于28℃避光培养5天，得种子菌种，取种子菌种按6%的接种量接种至发酵培养基中，于150r/min、28℃发酵3天，得发酵液，去发酵液按质量比10：3加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置18h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取40份干燥物、0.8份菊糖、0.5份低聚木糖、0.5份碳酸氢钠、0.8份硫酸镁、20份乳糖、5份谷氨酸钠、6份精氨酸、10份6-苄基腺嘌呤、5份伊维菌素、5份二甲基聚硅氧烷、7份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、20份海藻酸钠搅拌混合30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：8加入去离子水，于30℃搅拌混合2h，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至150℃保温10min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量20%的微晶纤维素，于160℃搅拌混合30min，再于100℃保温30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比15：3加入水合氯化锂，于100℃搅拌混合40min，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：7加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合25min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量7%的甲苯二异氰酸酯，于30℃搅拌混合2h，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于35℃搅拌混合10min，静置6h，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
对比例：山东省潍坊市某公司生产的生物农药。
将上述方法制备的实施例1、2、3样品和对比例在进行生物农药检测。其测试结果记录于表1。
表1：
由表1可知，本发明的生物农药在防治效果上有显著的提高，且杀灭率较高，
因此本发明有效的有效改善了防治效果差的问题，值得大力推广使用。

Claims (4)

1.一种生物农药的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
（1）取委内瑞拉链霉菌按2~5%的接种量接种至活化培养基中，于25~28℃培养培养，得培养物，取培养物按质量比1：8加入生理盐水，于200r/min、25~28℃培养，用无菌脱脂棉过滤，取滤液按质量比1：6~8加入无菌水混合，得混合液；
（2）取混合液置于距15W紫外灯30cm处照射，得预处理菌液，取预处理菌液，将预处理的菌液用生理盐水稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液按2~4%的接种量接种至诱变培养基中，于25~28℃避光培养，得种子菌种，取种子菌种按3~6%的接种量接种至发酵培养基中发酵，得发酵液，去发酵液按质量比10：1~3加入浓度为1mol/L的草酸混合，静置15~18h，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物；
（3）按质量份数计，取30~40份干燥物、0.6~0.8份菊糖、0.3~0.5份低聚木糖、0.2~0.5份碳酸氢钠、0.5~0.8份硫酸镁、18~20份乳糖、3~5份谷氨酸钠、3~6份精氨酸、5~10份6-苄基腺嘌呤、3~5份阿维菌素、3~5份二甲基聚硅氧烷、4~7份聚甲氧基聚氧乙烯甲基丙烯酸钠、15~20份海藻酸钠搅拌混合20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：5~8加入去离子水，于20~30℃搅拌混合，湿法研磨，得研磨颗粒，备用；
（4）取N,N-二甲基乙酰胺于氮气保护下，升温至140~150℃保温5~10min，再加入N,N-二甲基乙酰胺质量10~20%的微晶纤维素，于150~160℃搅拌混合，再于90~100℃保温20~30min，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比10~15：2~4加入水合氯化锂，于90~100℃搅拌混合，冷却至室温，得冷却物；
（5）取4,4’-二羟基苯甲酮按质量比1：5~7加入N,N-二甲基乙酰胺，搅拌混合20~30min，再加入4,4’-二羟基苯甲酮质量4~7%的甲苯二异氰酸酯，于25~30℃搅拌混合，得混合物，取冷却物按质量比2：3：5加入混合物、步骤（3）备用的研磨颗粒，于25~35℃搅拌混合，静置，挤压造粒，得颗粒物，颗粒物经去离子水洗涤，真空干燥，即得生物农药。
2.根据权利要求1所述的生物农药的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中活化培养基：按质量份数计，取20~25份可溶性淀粉、1~4份硝酸钾、0.3~0.6份、0.3~0.6份硫酸镁、0.008~0.01份硫酸亚铁、1000份水，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min，即得。
3.根据权利要求1所述的生物农药的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中诱变培养基：按质量份数计，取20~25份可溶性淀粉、1~4份硝酸钾、0.3~0.6份、0.3~0.6份硫酸镁、0.008~0.01份硫酸亚铁、3~5份氯化锂、20~25份琼脂、1000份水，pH7.2~7.4，121℃灭菌20min，即得。
4.根据权利要求1所述的生物农药的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中发酵培养基：按质量份数计，取20~25份黄豆饼粉、8~12份葡萄糖、10~15份淀粉、0.3~0.6份磷酸氢二钾、2~4份碳酸钙、1000份蒸馏水，pH 8.0，121℃灭菌20min，即得。
CN201810543245.7A 2018-05-31 2018-05-31 一种生物农药的制备方法 Withdrawn CN108552225A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810543245.7A CN108552225A (zh) 2018-05-31 2018-05-31 一种生物农药的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810543245.7A CN108552225A (zh) 2018-05-31 2018-05-31 一种生物农药的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108552225A true CN108552225A (zh) 2018-09-21

Family

ID=63540484

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810543245.7A Withdrawn CN108552225A (zh) 2018-05-31 2018-05-31 一种生物农药的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108552225A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115029268A (zh) * 2022-06-21 2022-09-09 安徽农业大学 一株委内瑞拉链霉菌及其在防治作物病害的应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115029268A (zh) * 2022-06-21 2022-09-09 安徽农业大学 一株委内瑞拉链霉菌及其在防治作物病害的应用
CN115029268B (zh) * 2022-06-21 2023-08-11 安徽农业大学 一株委内瑞拉链霉菌及其在防治作物病害的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106011022B (zh) 一种玫瑰黄链霉菌固体发酵培养基及其制备和发酵方法
CN105557757B (zh) 一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN102643148B (zh) 一种生物防病、防虫型花卉专用栽培基质及其制备方法
CN107022355A (zh) 一种生物酵素土壤改良剂及其制备方法
CN105347926A (zh) 一种微生物有机土壤杀菌杀虫增温调节剂的制备方法
CN101502271B (zh) 一种防治害虫的真菌颗粒剂的制造方法
CN108277177B (zh) 细黄链霉菌固体发酵培养基、制备方法及其发酵方法、发酵产物、生防产品和应用
CN105594698B (zh) 一种侧孢芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN105432668B (zh) 一种蜡质芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN105494441B (zh) 一种短小芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN110257292A (zh) 一种水产养殖用的微生物菌剂及其制备方法
CN105638744B (zh) 一种短短芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN105638651B (zh) 一种萎缩芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
CN111607526A (zh) 一种秸秆腐熟剂及其制备方法和应用
CN108130304A (zh) 一种芽孢杆菌复合菌液及其制备方法
CN102907458B (zh) 生物灭蚊剂及其制备方法
CN108041102B (zh) 一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法
CN105886430A (zh) 一种固态发酵生产解淀粉芽孢杆菌菌剂的方法
CN108552225A (zh) 一种生物农药的制备方法
CN107721629A (zh) 红薯专用高效生态生物有机肥的制备工艺
CN114467988B (zh) 一种农业病虫害防治用农药及其制备方法
CN105494440B (zh) 一种坚强芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法
RU2736340C9 (ru) Средство для стимуляции роста сельскохозяйственных культур
CN107915551A (zh) 种植红薯用中药渣生物有机肥
CN104604503B (zh) 一种生物防治抗红景天根腐病及促生的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20180921

WW01 Invention patent application withdrawn after publication