CN108456725B - Tm9sf1基因作为靶点在血管性疾病中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用，涉及生物技术领域。本发明利用RNA干扰策略发现干扰内源性TM9SF1基因后，与HUVEC炎症相关的两个重要基因IL1β、IL8和与血管收缩密切相关的基因ACE1表达明显下调，提示TM9SF1基因与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达具有正向调节作用，通过抑制或沉默TM9SF1基因的表达，进而可抑制或沉默IL1β、IL8以及ACE1基因的表达，进而可实现对与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达水平相关的血管性疾病的治疗或预防目的。

Description

TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用
本申请是申请日为2017年07月26日、发明名称为“TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用”、申请号为201710622579.9的中国发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用。
背景技术
内皮细胞是位于血管内壁的单层细胞，对血管正常功能的发挥起着关键作用，其功能失调往往与血管性疾病密切相关。
九次跨膜超家族蛋白1(TM9SF1，transmembrane 9superfamily protein member1)是进化保守的九次跨膜蛋白，在人体组织和多种细胞系中表达。TM9SF1蛋白由TM9SF1基因表达，目前关于TM9SF1蛋白和TM9SF1基因的研究尤其是功能研究还很少。至于，内皮细胞功能与TM9SF1基因之间的研究更是罕见有报道。
发明内容
本发明的第一目的在于提供TM9SF1基因在筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中的应用。
本发明的第二目的在于提供TM9SF1基因在筛选用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
本发明的第三目的在于提供TM9SF1基因在筛选用于治疗高血压的药物中的应用。
本发明的第四目的在于提供抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备与血管内皮细胞炎症、血管生成、高血压相关药物中的应用。
本发明是这样实现的：
TM9SF1基因作为靶点在筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中的应用。
抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中的应用。
TM9SF1基因作为靶点在筛选用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
TM9SF1基因作为靶点在筛选用于治疗高血压的药物中的应用。
抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于治疗高血压的药物中的应用。
本发明的有益效果包括：
本发明以脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)作为研究对象，利用RNA干扰策略发现干扰内源性TM9SF1基因后，与HUVEC炎症相关的两个重要基因IL1β、IL8和与血管收缩密切相关的基因ACE1表达明显下调，提示TM9SF1基因与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达具有正向调节作用，通过抑制或沉默TM9SF1基因的表达，进而可抑制或沉默IL1β、IL8以及ACE1基因的表达，进而可实现对与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达水平相关的血管性疾病的治疗或预防目的。
基于此，TM9SF1基因可以作为一种新的靶点，将其应用于筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症(与IL1β基因表达相关)的药物、用于抑制肿瘤组织血管生成(与IL8基因表达相关)的药物、用于治疗高血压(与ACE1基因表达相关)的药物等领域中；
此外，抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂可用于制备用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物、用于抑制肿瘤组织血管生成的药物以及用于治疗高血压的药物等领域中。
本发明提供的TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病方面的新用途，为治疗和预防血管性疾病提供了一种新的思路和手段。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例提供的HUVEC细胞培养鉴定结果；
图2为本发明实施例提供的TM9SF1特异性siRNA扰效果验证结果；
图3为本发明实施例提供的转染特异性siRNA后的HUVEC中炎症基因IL1、IL8和ACE1的相对表达量结果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用进行具体说明。
TM9SF1基因于1997年被初次克隆，截至目前关于该基因的报道非常少，且以表达性研究为主，关于其功能研究的文献目前能搜索的文献很少，有报道其可以诱导HeLa细胞发生自噬，然而并未揭示相关机制。TM9SF1基因对除HeLa以外其它细胞的生物学功能尚无报道。
RNA干扰技术是近年来得到广泛应用的分子生物学技术，其在探索基因功能和基因治疗方面具有重要意义。相比较于另一种研究基因功能常用的策略基因过表达而言，RNA干扰更能反映机体真实的生理状态。siRNA是实现RNA干扰最常用的工具，它具有高效性和特异性等优点。
本发明以脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)作为研究对象，利用RNA干扰策略发现干扰内源性TM9SF1基因后，与HUVEC炎症相关的两个重要基因IL1β、IL8和与血管收缩密切相关的基因ACE1表达明显下调，提示TM9SF1基因与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达具有正向调节作用，通过抑制或沉默TM9SF1基因的表达，进而可抑制或沉默IL1β、IL8以及ACE1基因的表达，进而可实现对与IL1β、IL8以及ACE1基因的表达水平相关的血管性疾病的治疗或预防目的。
基于此，本发明提供了TM9SF1基因作为靶点在以下方面中的应用。
第一方面，本发明提供了TM9SF1基因作为靶点在筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中的应用。
进一步地，上述药物以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达。
血管内皮细胞位于血浆与血管组织之间，它不仅能完成血浆和组织液的代谢交换，并且能合成和分泌多种生物活性物质，以保证血管正常的收缩和舒张。目前已知内皮细胞是一种炎症细胞，其炎症状态对多种疾病的病理生理过程如动脉粥样硬化、动脉瘤和糖尿病血管病变等发生发展具有重要影响。在炎症过程中内皮细胞可以产生多种致炎细胞因子，对炎症进一步发展起到至关重要的作用。例如，细胞外的IL1β可以活化内皮细胞(NHEKS,CLANCY R,LEE K A,et al.Activated Platelets Induce Endothelial CellActivation via an Interleukin-1beta Pathway in Systemic Lupus Erythematosus[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2017,37(4):707-716.NYMO S,GUSTAVSEN A,NILSSON P H,et al.Human Endothelial Cell Activation by Escherichia coli andStaphylococcus aureus Is Mediated by TNF and IL-1beta Secondarily toActivation of C5and CD14in Whole Blood[J].J Immunol,2016,196(5):2293-2299.DuL,DONG F,GUO L,et al.Interleukin-1beta increases permeability and upregulatesthe expression of vascular endothelial-cadherin in human renal glomerularendothelial cells[J].Mol Med Rep,2015,11(5):3708-3714.)，内皮细胞受到某些刺激以后也可以产生IL1β，在内皮细胞炎症应答过程中发挥重要作用(XIA X,SHI Q,SONG X,etal.Tetrachlorobenzoquinone Stimulates NLRP3Inflammasome-Mediated Post-Translational Activation and Secretion of IL-1beta in the HUVEC EndothelialCell Line[J].Chem Res Toxicol,2016,29(3):421-429)，因此设法抑制内皮细胞IL1β的表达对于抑制内皮细胞炎症反应具有重要的意义。
本发明研究发现干扰内源性TM9SF1基因后，明显抑制HUVEC IL1β表达水平，提示TM9SF1在内皮细胞炎症过程中可能发挥了正向调节作用。
因此，TM9SF1基因可以作为靶点在筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中进行应用。所筛选出的药物通过以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达，间接地实现对IL1β基因表达水平的抑制，起到治疗或抑制血管内皮细胞炎症的作用。
进一步地，上述应用包括：
将含有TM9SF1基因的生物样品在存在候选试剂的情况下培养；
将含有TM9SF1基因的生物样品在不存在所述候选试剂的情况下培养；
确定上述生物样品在存在所述候选试剂和不存在所述候选试剂的情况下的IL1β表达水平，其中存在所述候选试剂情况下，所述IL1β表达水平低于不存在所述候选试剂情况下的IL1β表达水平，是所述候选试剂作为治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物的指示。
其中，候选试剂是以TM9SF1基因为靶点，抑制或沉默其表达水平。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，该候选试剂可以是针对TM9SF1基因的siRNA；也可以是针对TM9SF1蛋白的抗体，其可在蛋白水平上抑制TM9SF1蛋白的活性或数量。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，上述生物样品可以是人脐静脉内皮细胞，也可以是鼠脐静脉内皮细胞。
第二方面，本发明提供了抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中的应用。
基于上述发现，抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂可以在制备用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物中进行应用，作为一种新的用途。为治疗或抑制血管内皮细胞炎症提供一种新的思路和手段。
进一步地，上述试剂是TM9SF1基因的siRNA。
进一步地，上述siRNA的碱基序列如下所示：
5’-GGUUACGACCUGACGAGUUTT-3’(SEQ ID NO.1)。
其3’端的两个“TT”碱基(下划线)用于提高siRNA稳定性，第1-19位用于与靶基因作用。
具有SEQ ID NO.1所示序列的siRNA能够有效地抑制TM9SF1基因表达，转染该siRNA的细胞，TM9SF1基因的相对表达量为(0.11±0.04)，P<0.005)，远低于对照组，其干扰效率大于50％。与此同时，IL1β基因的表达量为(0.30±0.09，(P<0.001))，明显低于对照组。说明该siRNA的具有较高的干扰效率，且还可作为一种全新的用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物。
第三方面，本发明提供了TM9SF1基因作为靶点在筛选用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
进一步地，上述药物以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达。
IL8的重要来源细胞之一是内皮细胞，其本身也是内皮细胞炎症的重要参与者之一(BORGES L E,BLOISE E,DELA C C,et al.Urocortin 1 expression and secretion byhuman umbilical vein endothelial cells:In vitro effects of interleukin 8,interferon gamma,lipopolysaccharide,endothelin 1,prostaglandin F-2alpha,estradiol,progesterone and dexamethasone[J].Peptides,2015,74:64-69.)，对内皮细胞迁移(JU L,ZHOU Z,JIANG B,et al.Autocrine VEGF and IL-8Promote Migration viaSrc/Vav2/Rac1/PAK1 Signaling in Human Umbilical Vein Endothelial Cells[J].Cell Physiol Biochem,2017,41(4):1346-1359.)和肿瘤组织血管生成具有促进作用，抑制IL8的表达可以抑制肿瘤组织血管生成(AALINKEEL R,NAIR B,CHEN C K,etal.Nanotherapy silencing the interleukin-8gene produces regression ofprostate cancer by inhibition of angiogenesis[J].Immunology,2016,148(4):387-406.MATSUO Y,OCHI N,SAWAI H,et al.CXCL8/IL-8and CXCL12/SDF-1alpha co-operatively promote invasiveness and angiogenesis in pancreatic cancer[J].IntJ Cancer,2009,124(4):853-861.)。
本发明研究发现干扰内源性TM9SF1后HUVEC IL8表达水平明显下降，从反面说明TM9SF1可以促进HUVEC细胞IL8的表达。因此，TM9SF1基因可以作为靶点在筛选用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中进行应用。所筛选出的药物通过以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达，间接地实现对IL8基因表达水平的抑制，起到抑制肿瘤组织血管生成的作用。
进一步地，该应用包括：
将含有TM9SF1基因的生物样品在存在候选试剂的情况下培养；
将含有TM9SF1基因的生物样品在不存在所述候选试剂的情况下培养；
确定上述生物样品在存在所述候选试剂和不存在所述候选试剂的情况下的IL8表达水平，其中存在所述候选试剂情况下，所述IL8表达水平低于不存在所述候选试剂情况下的IL8表达水平，是所述候选试剂作为抑制肿瘤组织血管生成的药物的指示。
其中，候选试剂是以TM9SF1基因为靶点，抑制或沉默其表达水平。
TM9SF1基因的cDNA序列如SEQ ID NO.2所示。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，该候选试剂可以是针对TM9SF1基因的siRNA；也可以是针对TM9SF1蛋白的抗体，其可在蛋白水平上抑制TM9SF1蛋白的活性或数量。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，上述生物样品可以是人脐静脉内皮细胞，也可以是鼠脐静脉内皮细胞。
第四方面，本发明提供了抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
基于上述发现，抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂可以在制备用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中进行应用，作为一种新的用途，为抑制肿瘤组织血管生成提供一种新的思路和手段。
进一步地，上述试剂是TM9SF1基因的siRNA。
进一步地，上述siRNA的碱基序列如下所示：
5’-GGUUACGACCUGACGAGUUTT-3’(SEQ ID NO.1)。
具有SEQ ID NO.1所示序列的siRNA能够有效地抑制TM9SF1基因表达，转染该siRNA的细胞，TM9SF1基因的相对表达量为(0.11±0.04)，P<0.005)，远低于对照组，其干扰效率大于50％。与此同时，IL8基因的表达量为((0.23±0.17，(P<0.005))，明显低于对照组。说明该siRNA的具有较高的干扰效率，且还可作为一种全新的用于抑制肿瘤组织血管生成的药物。
第五方面，本发明提供了TM9SF1基因作为靶点在筛选用于治疗高血压的药物中的应用。
进一步地，上述药物以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达。
ACE1又称为CD143，是导致血管收缩、血压升高的重要分子，因此临床上将血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)作为治疗高血压的一线药物(CHIEN S C,OU S M,SHIH C J,etal.Comparative Effectiveness of Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors andAngiotensin II Receptor Blockers in Terms of Major Cardiovascular DiseaseOutcomes in Elderly Patients:A Nationwide Population-Based Cohort Study[J].Medicine(Baltimore),2015,94(43):e1751.KANDA D,TAKUMI T,MIYATA M,etal.Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitor Prevents the Worsening of RenalFunction in the Late Phase after Percutaneous Coronary Intervention[J].JAtheroscler Thromb,2016,23(2):233-240.SHIH C J,CHEN H T,CHAO P W,etal.Angiotensin-converting enzyme inhibitors,angiotensin II receptor blockersand the risk of major adverse cardiac events in patients with diabetes andprior stroke:a nationwide study[J].J Hypertens,2016,34(3):567-574,575.)。本研究结果提示，干扰内源性TM9SF1后HUVEC ACE1的表达量下降了90％以上，说明TM9SF1对内皮细胞ACE1的表达具有重要的促进作用。
因此，TM9SF1基因可以作为靶点在筛选用于治疗高血压的药物中进行应用。所筛选出的药物通过以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达，间接地实现对ACE1基因表达水平的抑制，起到治疗高血压即降血压的作用。
进一步地，该应用包括：
将含有TM9SF1基因的生物样品在存在候选试剂的情况下培养；
将含有TM9SF1基因的生物样品在不存在所述候选试剂的情况下培养；
确定上述生物样品在存在所述候选试剂和不存在所述候选试剂的情况下的ACE1表达水平，其中存在所述候选试剂情况下，所述ACE1表达水平低于不存在所述候选试剂情况下的ACE1表达水平，是所述候选试剂作为降血压的药物的指示。
其中，候选试剂是以TM9SF1基因为靶点，抑制或沉默其表达水平。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，该候选试剂可以是针对TM9SF1基因的siRNA；也可以是针对TM9SF1蛋白的抗体，其可在蛋白水平上抑制TM9SF1蛋白的活性或数量。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，上述生物样品可以是人脐静脉内皮细胞，也可以是鼠脐静脉内皮细胞。
第六方面，本发明提供了抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于治疗高血压的药物中的应用。
基于上述发现，抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂可以在制备用于治疗高血压的药物中进行应用，作为一种新的用途，为治疗高血压提供一种新的思路和手段。
进一步地，所述试剂是TM9SF1基因的siRNA。
进一步地，上述siRNA的碱基序列如下所示：
5’-GGUUACGACCUGACGAGUUTT-3’(SEQ ID NO.1)。
具有SEQ ID NO.1所示序列的siRNA能够有效地抑制TM9SF1基因表达，转染该siRNA的细胞，TM9SF1基因的相对表达量为(0.11±0.04)，P<0.005)，远低于对照组，其干扰效率大于50％。与此同时，ACE1基因的表达量为(0.07±0.01，(P<0.001))，明显低于对照组。说明该siRNA的具有较高的干扰效率，且还可作为一种全新的用于降血压的药物。
综上，本发明提供的TM9SF1基因作为靶点以及抑制TM9SF1基因的试剂在血管性疾病方面的新用途，为治疗和预防血管性疾病提供了一种新的思路和手段。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
1材料与方法
1.1细胞及主要试剂
HUVEC购自中科院上海细胞库。TM9SF1特异性siRNA(SEQ ID NO.1)由吉玛公司设计并合成。内皮细胞专用培养基EGM由瑞士LONZA公司生产；胰酶(含EDTA)、胎牛血清(FBS)、磷酸盐缓冲液(PBS)等由美国Hyclone公司生产；转染试剂Lipofectamine 3000购自美国Thermo公司；CD31抗体购买自美国Immunoway公司；免疫细胞化学显色试剂盒购买自北京中杉金桥公司；CYBR Green Mix购自北京康为世纪生物科技有限公司；CCK8购自翊圣公司。
1.2HUVEC细胞培养与鉴定
HUVEC培养于内皮细胞专用培养基EGM中，在37.5℃、5％CO2、饱和湿度的培养箱中培养，隔天换液，细胞汇合度达到80％时进行传代，用0.25％胰酶消化，待细胞变圆且部分细胞脱离培养皿时用FBS终止消化，吹打混匀，1 200r/min离心5min，沉淀用培养基重悬，计数，接种至新的培养皿。采用免疫细胞化学方法对细胞进行鉴定，HUVEC细胞爬片汇合度至80％时，用4％多聚甲醛固定30min，PBS洗涤后用0.1％TritonX-100打孔30min。山羊血清封闭30min后，兔抗CD31(Immunoway公司，YT0752，1:200稀释)4℃孵育过夜。PBS洗涤后二抗工作液37℃孵育30min，PBS充分洗涤，DAB显色1min，苏木素复染1min，自来水返蓝，中性树胶封片。正置显微镜下观察拍照，CD31主要定位于细胞膜表面，表达阳性细胞呈棕褐色染色。
1.3HUVEC分组及TM9SF1基因干扰
细胞接种至6孔板(5×105个细胞/孔)，待第2天细胞贴壁后分为阴性对照组和干扰组进行转染。Lipofectamin 3000转染过程如下：2.5μL Lipofectamin 3000加入50μLPBS中稀释混匀，2.5μL siRNA(SEQ ID NO.1)(20μM)加入50μL PBS中稀释混匀，两种稀释液轻轻混合，室温放置5min，然后将混合液轻轻滴入培养基，混匀。转染后4～6h换液。
1.4实时荧光定量PCR(qPCR)
细胞转染TM9SF1特异性siRNA(SEQ ID NO.1)后，于48h用Trizol裂解细胞，提取总RNA，取1-3μg逆转录成cDNA，以此为模板，用SBRY Green染料法实时定量PCR检测相关基因的表达水平。qPCR扩增条件：95℃10min，95℃15s，60℃1min，共40个循环。以GAPDH作为内参。基因上下游引物序列分别如下：
1.5统计学方法
应用GraphPad Prism 5软件分析处理数据，计量资料以均数±标准差表示，两组间比较采用非配对t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1脐静脉内皮细胞鉴定
相差显微镜下观察HUVEC生长状态良好，如图1所示(图中：A为相差显微镜下观察HUVEC生长情况；B为免疫细胞化学检测CD31表达情况，箭头所示为典型表达强阳性细胞)，细胞呈多边形，有的有少量突起(图1-A)。由于CD31为内皮细胞标志性分子，主要表达于细胞膜，应用免疫细胞化学方法检测了HUVEC细胞CD31的表达情况，结果显示几乎所有细胞均为棕褐色，只是染色深浅不同，提示绝大部分细胞CD31表达阳性，为典型内皮细胞(图1-B)。
2.2TM9SF1特异性siRNA干扰效果验证
利用qPCR技术检测转染TM9SF1特异性siRNA(SEQ ID NO.1)后TM9SF1基因的相对表达量，结果如图2所示(图中：si-NC为阴性对照组，si-TM9SF1为转染siRNA的干扰组，**表示P<0.005)。转染48h后，以阴性对照组(si-NC)为参照标准1，si-TM9SF1组TM9SF1基因的相对表达量为(0.11±0.04)，P<0.005)，干扰效率大于50％，说明该siRNA有效。
2.3干扰TM9SF1抑制HUVEC炎症相关基因的表达
结果如图3所示(图中：A为IL1β基因相对表达量；B为IL8基因相对表达量；C为ACE1基因相对表达量；**P<0.005或***P<0.001)，以阴性对照组为参照标准1，干扰组IL1β、IL8和ACE1相对表达量分别为(0.30±0.09，(P<0.001))，(0.23±0.17，(P<0.005))和(0.07±0.01，(P<0.001))，表达水平受到明显抑制。
本发明利用TM9SF1特异性siRNA干扰该基因内源性表达，通过实时定量PCR技术对其干扰效果进行了验证，并发现与内皮细胞功能密切相关的基因IL1、IL8和ACE1表达明显下降(P<0.005)，上述结果提示TM9SF1基因可能对内皮细胞功能具有重要调节作用。
这就说明，TM9SF1基因可以作为一种新的靶点，可将其应用于筛选用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症(与IL1β基因表达相关)的药物、用于抑制肿瘤组织血管生成(与IL8基因表达相关)的药物、用于治疗高血压(与ACE1基因表达相关)的药物等领域中；
此外，抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂(例如具有SEQ ID NO.1所示的siRNA)可用于制备用于治疗或抑制血管内皮细胞炎症的药物、用于抑制肿瘤组织血管生成的药物以及用于治疗高血压的药物等领域中。
总之，TM9SF1基因可以作为靶点在血管性疾病方面的新用途，为治疗和预防血管性疾病提供了一种新的思路和手段。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 湖北文理学院
<120> TM9SF1基因作为靶点在血管性疾病中的应用
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 19
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 1
gguuacgacc ugacgaguu 19
<210> 2
<211> 1620
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
tttccgccag gctgaggtcg ccgccggtga gggcggaagt ggtaagactg acgtgtcctg 60
ggccgcgctg ccgatcgccg ggaggacccc cgcctcgccg aagacgggcg gggcaagccg 120
agcctcacgg ggtccccgga gctgggccgg gcctccagat ggagaaggcg caacggggag 180
ttcttgagta agccagagcg gtgtccagcg cggtgtagcc gcagccgccg ctgtcaggcg 240
cagcaacggg caaccccgta gaagtcggtc ggcaggtcct ctccaacccg ccgctaccgc 300
gccgctgtgg gagagacccc agcaggagcc caaaggcagc tacgggggcg cgaaggccgc 360
tggcgccgcc tcggccagcc cttcccgcgc ggttccactg ccttaaggat gacagtcgta 420
gggaaccctc gaagttggag ctgccagtgg ttgccaatcc tgatactgtt gctgggcaca 480
ggccatgggc caggggtgga aggcgtgaca cactacaagg ccggcgaccc tgttattctg 540
tatgtcaaca aagtgggacc ctaccataac cctcaggaaa cttaccacta ctatcagctt 600
ccagtctgct gccctgagaa gatacgtcac aaaagcctta gcctgggtga agtgctggat 660
ggggaccgaa tggctgagtc tttgtatgag atccgctttc gggaaaacgt ggagaagaga 720
attctgtgcc acatgcagct cagttctgca caggtggagc agctgcgcca ggccattgaa 780
gaactgtact actttgaatt tgtggtagat gacttgccaa tccggggctt tgtgggctac 840
atggaggaga gtggtttcct gccacacagc cacaagatag gactctggac ccatttggac 900
ttccacctag aattccatgg agaccgaatt atatttgcca atgtttcagt gcgggacgtc 960
aagccccaca gcttggatgg gttacgacct gacgagttcc taggccttac ccacacttat 1020
agcgtgcgct ggtctgagac ttcagtggag cgtcggagtg acaggcgccg tggtgacgat 1080
ggtggtttct ttcctcgaac actggaaatc cattggttgt ccatcatcaa ctccatggtg 1140
cttgtgtttt tactggtggg ttttgtggct gtcattctaa tgcgtgtgct tcggaatgac 1200
ctggctcggt acaacttaga tgaggagacc acctctgcag gttctggtga tgactttgac 1260
cagggtgaca atggctggaa aattatccat acagatgtct tccgcttccc cccataccgt 1320
ggtctgctct gtgctgtgct tggcgtgggt gcccagttcc tggcccttgg cactggcatt 1380
attgtcatgg cactgctggg catgttcaat gtgcaccgtc atggggccat taactcagca 1440
gccatcttgt tgtatgccct gacctgctgc atctctggct acgtgtccag ccacttctac 1500
cggcagattg gaggcgagcg ttgggtgtgg aacatcattc tcaccaccag tctcttctct 1560
gtgcctttct tcctgacgtg gagtgtggtg aactcagtgc attgggccaa tggttcgaca 1620

Claims (5)

1.TM9SF1基因作为靶点在筛选用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用，其特征在于，所述药物以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达。
2.抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于抑制肿瘤组织血管生成的药物中的应用。
3.TM9SF1基因作为靶点在筛选用于治疗高血压的药物中的应用，其特征在于，所述药物以TM9SF1基因为靶点，抑制或者沉默TM9SF1基因的表达。
4.抑制或沉默TM9SF1基因表达的试剂在制备用于治疗高血压的药物中的应用。
5.根据权利要求2或4所述的应用，其特征在于，所述试剂是TM9SF1基因的siRNA。
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