CN108445063A - 一种生物分子的电化学检测方法 - Google Patents

一种生物分子的电化学检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种生物分子的电化学检测方法，属于生物分子检测技术领域。所述方法首先合成出具有电活性的二茂铁酪胺分子，然后通过还原法制备出石墨烯/血红素复合纳米材料，所述材料在H2O2的存在下能触发二茂铁修饰酪氨在电极表面的催化沉积反应，导致具有电活性的二茂铁分子在电极表面大量聚集，而产生增强的氧化还原电流。在生物分子检测过程中，检测到的氧化还原电流与生物分子的量在一定范围内成线性关系。通过电化学工作站检测所产生的氧化还原电流的大小，即可实现对生物分子的电化学检测。本发明建立的生物分子的电化学检测方法具有灵敏、操作简单、检测时间短等优点。

Description

一种生物分子的电化学检测方法
技术领域
本发明属于生物分子检测技术领域，具体涉及一种基于石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料电化学高灵敏检测p53等蛋白的方法。
背景技术
电化学生物传感技术是采用固体电极作基础电极，将生物敏感分子固定在电极表面，然后通过生物分子间的特异性识别作用，生物敏感分子能选择性地识别目标分子并将目标分子捕获到电极表面，基础电极作为信号传导器将电
极表面发生的识别反应信号导出，变成可以测量的电信号，从面实现对分析目标物进行定量或定性分析的目的，其由于所需仪器简单、选择性好、分析速度快、检测成本低、易于实现微型化等优点，在生物医学、环境监测、食品和医药等领域具有广泛的应用前景。
基于HRP酶催化酪胺沉积的信号放大技术，其主要原理是辣根过氧化物酶（HRP）H2O2存在下催化酪胺盐，形成共价键结合位点，在15 min内大量的标记物沉积在要放大的信号位点上，使原始信号得到几何级的放大。
生物酶是从生物体中产生的，具有特殊的催化功能的蛋白质，由氨基酸长链组成。在受到紫外线、热、射线、表面活性剂、金属盐、强酸、强碱及其它化学试剂如氧化剂、还原剂等因素影响时，酶蛋白的二级、三级结构有所改变，使其酶活性降低，甚至失活。
本发明利用基于纳米材料的拟酶代替生物酶，开发了一种利用基于石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料催化二茂铁酪胺沉积信号放大原理的电化学生物传感技术，用于生物分子的高灵敏检测。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种二茂铁酪胺电活性物质及制备方法，并利用该物质来对生物分子进行电化学检测。为实现本发明目的所使用的技术方案为：
一种生物分子的电化学检测方法，包括制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料、制备二茂铁酪胺、制备适配体功能化复合材料、电极修饰和生物分子检测；
所述制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料的步骤为：按质量比为1:15的比例分别称取石墨烯和血红素后，将石墨烯配置成石墨烯溶液，将血红素配置成血红素溶液，将两份溶液混合后，加入NH2-NH2，涡旋10-15 min后，60-65℃水浴3-5 h，15000-20000 r/min离心25-35 min，所得沉淀用超纯水洗涤，冻干，即得到石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料；
所述制备二茂铁酪胺的步骤为：取二茂铁甲酸于无水CH2Cl2溶解，0ºC下缓缓滴加Et3N，再依次加入HBTU和HOBt，0ºC反应10-15 h，溶液由黄色变为红色，旋转蒸干，层析纯化，得到红褐色活化物，将其溶于THF后，取酪胺溶于硼酸缓冲溶液，0ºC混合上述两种溶液并调pH至9-10，反应8-10 h后，室温反应20-24 h，旋转蒸发除去THF，余下水相用EtOAc萃取一次后，将水相调pH至1-2，EtOAc再次萃取；将所得两次萃取液合并，过滤、无水Na2SO4除水、再次过滤后旋转蒸发，所得产物用展开剂溶解，柱层析进行纯化，最后于35-40ºC水浴锅中干燥即可得到二茂铁酪胺；
所述制备适配体功能化复合材料的步骤为：将石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料与核酸链混合均匀，超声10-15min后室温孵育24h，缓慢加入NaCl溶液；13000-15000 r/min离心30-40min取上清，洗涤3次后，重新分散在Tris-EDTA缓冲液中，去除游离的适配体，即得适配体功能化复合材料；
所述电极修饰的步骤为：将巯基丙酸与DNA1链合滴到处理好的金电极表面，0-4ºC自组装10-12h，PBS洗涤3次，用EDC/NHS室温活化30 min，PBS洗涤3次后，将电极浸泡在10 mM酪胺溶液30 min，用PBS洗涤3次，用1% BSA封闭非特异性位点，PBS洗涤3次，得修饰电极；
所述生物分子检测的步骤为：将修饰电极表面滴加生物分子、生物识别分子及石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料，35-37ºC孵育1 -2h后，PBS洗涤3次，最后在电极表面滴加酪胺、二茂铁酪胺、H2O2，50-55ºC水浴30 min ，用PBS洗3次；以金电极为工作电极，铂电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，在NaClO4电解液中利用电化学工作站进行DPV扫描，扫描范围-0.2~0.6V，扫描速率100-150 mV/s，通过电化学工作站检测到的氧化还原电流的大小，即可实现对电化学检测。
优选的，所述制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料的步骤中，所述石墨烯溶液配置方法为将石墨烯用适量超纯水超声分散均匀，3000 -4000r/min 10 -15min离心,取其上清液，即得；所述血红素溶液配置方法为将血红素用适量超纯水分散均匀后,加入NH3·H2O，所述添加是超纯水和NH3·H2O体积比为1000：5-20。
优选的，所述制备二茂铁酪胺的步骤中，所述层析纯化使用的试剂为二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇，其比例为二氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇=9:3:1，所述的展开剂为二氯甲烷、甲醇，其比例为二氯甲烷:甲醇=10:1。
优选的，所述制备二茂铁酪胺的步骤中，所述的酪胺溶于硼酸缓冲溶液的时间为12-14h，pH值为2-4。
优选的，所述制备适配体功能化复合材料的步骤中，加入NaCl溶液至终浓度10mM。
优选的，所述电极修饰的步骤中，所述DNA1链为P1和P4杂交链，所述的P1：
TTTTTTTTTTGCATCGGTCACAGACA，所述的P4：TGTCTAGGCATGTCTGTGACCGATGC。
优选的，所述电极修饰的步骤中，所述EDC/NHS的浓度为10 mM。
优选的，所述生物分子检测的步骤中，所述生物分子包括蛋白质、核酸、细胞，所述的生物识别分子包括抗体、适配体、核酸；特别的，所述的生物识别分子为DNA2，所述的DNA2由P2与P3杂交，所述的P2：TGCCTAGACATGCCTTGCAGTCTCGA，
P3：GAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGATTTTTCGAGACTGCAAGGCA。
优选的，所述巯基丙酸与生物分子的比例为3:1。
优选的，所述的生物分子为p53蛋白。
本发明突出的实质性进步和显著的特点是：
1.石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料具有催化H2O2的作用，且具有高效的的电子传递性能、大的比表面积、与单链DNA碱基π-π作用紧密结合等优点，使得石墨烯血红素复合纳米材料能够快速应用到传感器中。
2.二茂铁酪胺是一种高效的电活性物质，同时可以利用酪胺盐的催化信号放大原理大量沉积目标物。
3.通过碱基互补配对及抗原抗体的特异性识别原理，可有效提高检测生物分子（蛋白质、核酸、细胞）的特性性和灵敏性。
4.在催化沉积过程中利用石墨烯/血红类过氧化酶素复合纳米材料在H2O2存在下催化Fc-Tyr（二茂铁酪胺），形成共价键结合位点，使大量的二茂铁酪胺沉积，信号得到几何级的放大，可有效提高生物分子（蛋白质、核酸、细胞）的检测限。
5.本发明的检测过程安全、简单、快速，为以后的便携式实时检测提供了思路。
附图说明
图1 基于石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料电化学高灵敏检测p53蛋白的方法原理图。
图2 石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料紫外表征图。
图3 二茂铁酪胺核磁共振氢谱表征图。
图4 二茂铁酪胺催化H2O2沉积反应图。
图5 基于石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料电化学高灵敏检测p53蛋白的方法对不同浓度p53蛋白的响应曲线。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明方案做进一步详细描述，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。
实施例1
本发明检测p53蛋白的步骤如下（方法原理如图1所示）：
1．石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料的制备：称取1 mg石墨烯用1 ml H2O超声分散均匀，3000 r/min 10 min离心，取其上清液，取15 mg血红素加入1 ml H2O，200 µlNH3.H2O，将上述的石墨烯上清液加入其中，再加入8 µl NH2-NH2，涡旋10 min后，60℃水浴4h，20000 r/min 30 min 离心，沉淀用H2O洗涤两次，冻干，即得到石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料；
2．二茂铁酪胺的制备：取二茂铁甲酸0.66 g于200 ml无水CH2Cl2溶解，0ºC下缓缓滴加2 ml Et3N (三乙胺)，依次加入2.28 g HBTU (6 mmol)（苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯）和0.81 g HOBt (6 mmol)（1-烃基苯并三唑），0ºC反应12 h，溶液由黄色变为红色，旋转蒸干至100 ml，层析纯化，得到红褐色活化物，将其溶于50 ml THF。取0.2 g酪胺溶于50 ml硼酸缓冲溶液，0ºC混合上述两种溶液并调pH至9，反应8 h后，室温反应24 h，旋转蒸发，去除THF，余下水相用EtOAc萃取，将水相调pH至2，再次EtOAc萃取，过滤，用无水Na2SO4除水，再次过滤，旋转蒸发，加入少量的展开剂溶解，用柱层析纯化，于40ºC水浴锅中干燥即可得到二茂铁酪胺。
:3．电极的修饰：将15 µl 10 µM的巯基丙酸与5 µl 10 µM DNA1链(P1与P4杂交链，P1：TTTTTTTTTTGCATCGGTCACAGACA， P4：TGTCTAGGCATGTCTGTGACCGATGC)混合滴到处理好的金电极表面，4ºC自组装12h，PBS洗涤3次，用EDC/NHS（10 mM）室温活化30 min，PBS洗涤3次后，将电极浸泡在10 mM酪胺溶液30 min，用PBS洗涤3次，用1% BSA封闭非特异性位点，PBS洗涤3次。
4．检测p53蛋白的标准曲线在上述电极表面滴加1µl不同浓度的 p53蛋白、10 µlDNA2 (P2与P3杂交，P2：TGCCTAGACATGCCTTGCAGTCTCGA，P3：GAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGATTTTTCGAGACTGCAAGGCA)及9 µl 1mg/ml石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料，超声10-15min后室温孵育24h，缓慢加入NaCl溶液；13000-15000 r/min离心30-40min取上清，洗涤3次后，重新分散在Tris-EDTA缓冲液中，去除游离的适配体，37ºC孵育1 h ，PBS洗涤3次，最后在电极表面滴加10 µl 1 mg/ml Fc-Tyr (二茂铁甲酸与酪胺的交联物)、5 µl 1 mg/ml （Tyr）酪胺及10 µl 100 mM H2O2，55ºC水浴30 min ，用PBS洗3次，以金电极为工作电极，铂电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，在电化学工作站上以0.2 M NaClO4电解液进行DPV扫描，扫描范围-0.2~0.6V，扫描速率100 mV/s，通过得到的电流的信号即可检测p53蛋白。
实施例2
将实施例1制备的石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料进行紫外表征（如图2）。图中石墨烯（曲线3）在280 nm处有吸收峰，血红素（曲线2）在320 nm处产生明显的吸收峰，而石墨烯/血红素复合纳米材料（曲线1）在280 nm、320 nm都有明显的特征吸收峰。因此，说明该复合纳米材料制备成功。
实施例3
将实施例1制备的二茂铁酪胺进行共振氢谱表征（如图3）。二茂铁基团上的质子化学位移一般在 4-5 ppm之间，化合物 Fc-Tyr 在4.23-4.90 ppm之间出现 Fc基团上质子的化学位移。化学位移 8.32，8.28，8.01 ppm 可指认为Fc 与Tyr 所结合的酰胺键以及Tyr分子氨基的质子峰。化学位移为12.54 ppm 的单峰可指认为羧基的质子峰。
实施例4
将实施例1制备的二茂铁酪胺催化H2O2，其沉积反应如图4所示，H2O2的浓度从1 mM~100 mM，二茂铁酪胺催化H2O2的响应电流。随着H2O2浓度增加，响应电流的强度越强，说明氧化还原生物分子的量越大。
实施例5
将石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料电化学高灵敏检测不同浓度p53蛋白的反应曲线如图5所示，p53蛋白的浓度范围从0 ng/ml~1ug/ml，传感器的响应电流，说明该传感器的具有良好的检测灵敏度。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的包含范围之内。

Claims (10)

1.一种生物分子的电化学检测方法，其特征在于，包括制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料、制备二茂铁酪胺、制备适配体功能化复合材料、电极修饰和生物分子检测；
所述制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料的步骤为：按质量比为1:15的比例分别称取石墨烯和血红素后，将石墨烯配置成石墨烯溶液，将血红素配置成血红素溶液，将两份溶液混合后，加入NH2-NH2，涡旋10-15 min后，60-65℃水浴3-5 h，15000-20000 r/min离心25-35 min，所得沉淀用超纯水洗涤，冻干，即得到石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料；
所述制备二茂铁酪胺的步骤为：取二茂铁甲酸于无水CH2Cl2溶解，0ºC下缓缓滴加Et3N，再依次加入HBTU和HOBt，0ºC反应10-15 h，溶液由黄色变为红色，旋转蒸干，层析纯化，得到红褐色活化物，将其溶于THF后，取酪胺溶于硼酸缓冲溶液，0ºC混合上述两种溶液并调pH至9-10，反应8-10 h后，室温反应20-24 h，旋转蒸发除去THF，余下水相用EtOAc萃取一次后，将水相调pH至1-2，EtOAc再次萃取；将所得两次萃取液合并，过滤、无水Na2SO4除水、再次过滤后旋转蒸发，所得产物用展开剂溶解，柱层析进行纯化，最后于35-40ºC水浴锅中干燥即可得到二茂铁酪胺；
所述制备适配体功能化复合材料的步骤为：将石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料与核酸链混合均匀，超声10-15min后室温孵育24h，缓慢加入NaCl溶液；13000-15000 r/min离心30-40min取上清，洗涤3次后，重新分散在Tris-EDTA缓冲液中，去除游离的适配体，即得适配体功能化复合材料；
所述电极修饰的步骤为：将巯基丙酸与DNA1链合滴到处理好的金电极表面，0-4ºC自组装10-12h，PBS洗涤3次，用EDC/NHS室温活化30 min，PBS洗涤3次后，将电极浸泡在10 mM酪胺溶液30 min，用PBS洗涤3次，用1% BSA封闭非特异性位点，PBS洗涤3次，得修饰电极；
所述生物分子检测的步骤为：将修饰电极表面滴加生物分子、生物识别分子及石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料，35-37ºC孵育1 -2h后，PBS洗涤3次，最后在电极表面滴加酪胺、二茂铁酪胺、H2O2，50-55ºC水浴30 min ，用PBS洗3次；以金电极为工作电极，铂电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，在NaClO4电解液中利用电化学工作站进行DPV扫描，扫描范围-0.2~0.6V，扫描速率100-150 mV/s，通过电化学工作站检测到的氧化还原电流的大小，即可实现对电化学检测。
2.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述制备石墨烯/血红素类过氧化酶复合纳米材料的步骤中，所述石墨烯溶液配置方法为将石墨烯用适量超纯水超声分散均匀，3000 -4000r/min 10 -15min离心,取其上清液，即得；所述血红素溶液配置方法为将血红素用适量超纯水分散均匀后,加入NH3•H2O，所述添加是超纯水和NH3•H2O体积比为1000：5-20。
3.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述制备二茂铁酪胺的步骤中，所述层析纯化使用的试剂为二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇，其比例为二氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇=9:3:1，所述的展开剂为二氯甲烷、甲醇，其比例为二氯甲烷:甲醇=10:1。
4.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述制备二茂铁酪胺的步骤中，所述的酪胺溶于硼酸缓冲溶液的时间为12-14h，pH值为2-4。
5.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述制备适配体功能化复合材料的步骤中，加入NaCl溶液至终浓度10 mM。
6.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述电极修饰的步骤中，所述DNA1链为P1和P4杂交链，所述的P1：TTTTTTTTTTGCATCGGTCACAGACA，所述的P4：TGTCTAGGCATGTCTGTGACCGATGC。
7.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述电极修饰的步骤中，所述EDC/NHS的浓度为10 mM。
8.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述生物分子检测的步骤中，所述生物分子包括蛋白质、核酸、细胞，所述的生物识别分子包括抗体、适配体、核酸；所述的生物识别分子为DNA2，所述的DNA2 由P2与P3杂交，
所述的P2：TGCCTAGACATGCCTTGCAGTCTCGA，
P3：GAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGATTTTTCGAGACTGCAAGGCA。
9.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述巯基丙酸与生物分子的比例为3:1。
10.根据权利要求1所述的生物分子的电化学检测方法，其特征在于，所述的生物分子为p53蛋白。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110823980A (zh) * 2019-11-26 2020-02-21 桂林电子科技大学 一种基于类过氧化酶催化银沉积检测gpc3的方法
CN113433189A (zh) * 2021-05-14 2021-09-24 苏州科技大学 一种石墨炔/血红素复合材料及其制备方法和应用
WO2024033604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-15 Oxford University Innovation Limited Electrochemical shotgun tagging assay with catalytic amplification

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102173378A (zh) * 2011-01-06 2011-09-07 中国科学院化学研究所 一种具有生物传感功能的纳米材料及其制备方法
CN103424449A (zh) * 2013-07-30 2013-12-04 浙江理工大学 二茂铁接枝壳聚糖-碳纳米管-酶复合膜修饰三维石墨烯复合材料及其制备方法
CN104597240A (zh) * 2015-02-02 2015-05-06 广西医科大学 石墨烯/类过氧化物酶双信号放大检测白血病的生物传感方法
CN104730134A (zh) * 2015-03-31 2015-06-24 曲阜师范大学 一种二茂铁/氧化石墨烯/溶胶-凝胶硅膜及其制备方法和葡萄糖生物传感器
CN104833712A (zh) * 2015-03-30 2015-08-12 南昌大学 基于双电信号和DNA循环放大技术的Dam甲基转移酶活性检测方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102173378A (zh) * 2011-01-06 2011-09-07 中国科学院化学研究所 一种具有生物传感功能的纳米材料及其制备方法
CN103424449A (zh) * 2013-07-30 2013-12-04 浙江理工大学 二茂铁接枝壳聚糖-碳纳米管-酶复合膜修饰三维石墨烯复合材料及其制备方法
CN104597240A (zh) * 2015-02-02 2015-05-06 广西医科大学 石墨烯/类过氧化物酶双信号放大检测白血病的生物传感方法
CN104833712A (zh) * 2015-03-30 2015-08-12 南昌大学 基于双电信号和DNA循环放大技术的Dam甲基转移酶活性检测方法
CN104730134A (zh) * 2015-03-31 2015-06-24 曲阜师范大学 一种二茂铁/氧化石墨烯/溶胶-凝胶硅膜及其制备方法和葡萄糖生物传感器

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BINBIN ZHOU等: "Syntheses and in vitro antitumor activities of ferrocene-conjugated Arg-Gly-Asp peptides", 《JOURNAL OF INORGANIC BIOCHEMISTRY》 *
YING LIANG等: "An ATP Aptasensor Based on the Peroxidase-like Activity of Hemin/Graphene Oxide Nanosheets", 《ANALYTICAL SCIENCES》 *
YONGKANG YE等: "Electrochemical gene sensor based on a glassy carbon electrode modified with hemin-functionalized reduced graphene oxide and gold nanoparticle-immobilized probe DNA", 《MICROCHIM ACTA》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110823980A (zh) * 2019-11-26 2020-02-21 桂林电子科技大学 一种基于类过氧化酶催化银沉积检测gpc3的方法
CN113433189A (zh) * 2021-05-14 2021-09-24 苏州科技大学 一种石墨炔/血红素复合材料及其制备方法和应用
WO2024033604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-15 Oxford University Innovation Limited Electrochemical shotgun tagging assay with catalytic amplification

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