CN108434073A - 一种假牙清洁剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种假牙清洁剂及其制备方法，属药物制剂领域。本发明以浒苔、海泥、海鱼等为原料，添加右旋糖酐20000加入筛选培养基，从中筛选一株具有产酶功效的海洋菌株，对其进行发酵培养，增强其产酶活性，筛选出右旋糖苷酶类物质，同时右旋糖苷酶其在假牙粘附的牙垢等一些物质的防治过程中可以起到脱粘附的作用，右旋糖苷酶通过作用于牙菌斑生物膜胞外多糖中的水溶性葡聚糖，使得假牙表面的菌斑脱落，达到清洗杀菌的效果，同时可以有效的防止牙菌斑对假牙的粘附腐蚀，使用过程中对假牙基托不会产生腐蚀作用，利用天然的降解过程去除牙垢。本发明解决了目前假牙清洁剂的清除污垢能力、灭菌能力较差的问题。

Description

一种假牙清洁剂及其制备方法
技术领域
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种假牙清洁剂及其制备方法。
背景技术
假牙清洁剂，药物制剂产品之一。假牙及假牙基托是用聚甲基丙烯酸甲酯制成的。由于口腔的特殊环境，其表面易沉积食物蛋白和色素等污垢。而且假牙及基托的表面并非十分致密，存在许多微孔，易嵌入污垢。一般难以用牙膏或普通洗涤剂清除。尤其是抽烟、饮茶引起的烟垢和茶垢，颜色深，附着牢固，更不易清除。
假牙清洁剂是佩戴假牙者日常生活用品，清洗假牙的目的是保持口腔卫生。假牙表面结垢是碱性结构，同时每天还要沾垢污物，故清洁假牙很是必要。
清洁假牙有医疗清洗、牙膏清洗和假牙专用清洁剂清洗，综合清洗效果还是假牙专用清洁剂清洗好一点。但是目前假牙清洁剂存在清除污垢能力、灭菌能力较差的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对目前假牙清洁剂的清除污垢能力、灭菌能力较差的问题，提供一种假牙清洁剂及其制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
一种假牙清洁剂，其特征在于，按重量份数计包括如下组分，2~5份牙菌斑杀菌酶基料、30~50份洁牙表面活性剂；
所述牙菌斑杀菌酶基料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按2~5%的接种量接种至液体培养基中，富集培养，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于20~25℃培养，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于25~30℃培养，离心，取上清液过滤，取滤液，冷冻干燥，即得牙菌斑杀菌酶基料；
所述洁牙表面活性剂的制备方法，包括如下步骤：
A.取粗鱼油按质量比100：1~3加入磷酸，于60~70℃搅拌混合，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于70~75℃搅拌混合，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于35~40℃保温，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于65~70℃搅拌混合，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比80~90：1：2加入氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
所述步骤（1）中液体培养基为按质量份数计，取2~4份酵母粉、5~9份蛋白胨、1000份海水，pH8.0、121℃灭菌20min，即得。
所述步骤（2）中初筛培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、8~10份右旋糖酐20000、2~5份蓝色葡聚糖、20~25份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得；发酵培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、10~15份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
该制备方法包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于40~50℃搅拌混合，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量2~4倍的十六烷基酰氯，于25~30℃搅拌混合，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-5~-3℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取2~5份牙菌斑杀菌酶基料、30~50份洁牙表面活性剂、20~30份混合物、2~5份烷基糖苷、1~5份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、60~80份水，于50~60℃搅拌混合，即得假牙清洁剂。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明以浒苔、海泥、海鱼等为原料，添加右旋糖酐20000加入筛选培养基，从中筛选一株具有产酶功效的海洋菌株，对其进行发酵培养，增强其产酶活性，筛选出右旋糖苷酶类物质，其作为一种内切酶，可随意切割右旋糖酐内部或外部的α-1,6糖苷键，抑制变异链球菌在牙面的粘附及水不溶性葡聚糖的产生，减慢牙菌斑在牙面的沉积速度，同时右旋糖苷酶其在假牙粘附的牙垢等一些物质的防治过程中可以起到脱粘附的作用，右旋糖苷酶通过作用于牙菌斑生物膜胞外多糖中的水溶性葡聚糖，最终促进生物膜结构崩解，细菌脱粘附，使得假牙表面的菌斑脱落，达到清洗杀菌的效果，同时可以有效的防止牙菌斑对假牙的粘附腐蚀，使用过程中对假牙基托不会产生腐蚀作用，利用天然的降解过程去除牙垢；
（2）本发明利用采集的粗鱼油为原料，经磷酸脱胶，白土脱色等过程，得到纯净鱼油产物，再经过甲酯化，最终形成有长链脂肪酸构成的脂肪酸皂，得到表面活性清洁剂，牙垢会发生定向吸附，其疏水基一端吸附在污垢表面并伸入其内部，同时又在其表面置换细孔中的空气，进一步渗透到污垢与假牙载体之间，减弱污垢在载体上的附着力，使载体和污垢都被洗涤液润湿、渗透而膨胀，减弱它们之间的引力，污垢脱落，容易被水清洗，使得除垢能力得到提高；
（3）本发明以壳聚糖为原料，其化学反应中心为氨基葡萄糖单元上的6位或3位羟基以及2位氨基，由于氨基的活性远高于羟基的活性，故多数反应都在氨基上进行，为保留分子链上的氨基及其生物活性，加入甲磺酸与氨基形成盐，在羟基上引入脂肪长链，制备出两亲性的壳聚糖衍生物，其具有较好的成膜性能，并且具有较好的生物相容性，一方面将假牙清洗剂的有效成分固定传送至假牙表面进行有效清洗，另一方面在其表面形成保护膜，防止假牙基材的磨损和腐蚀。
具体实施方式
浒苔、海泥、海鱼、海虾：取自连云港海域。
粗鱼油：取自青岛奥丰源饲料有限公司，鱼粉加工副产物。
液体培养基：按质量份数计，取2~4份酵母粉、5~9份蛋白胨、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
初筛培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、8~10份右旋糖酐20000、2~5份蓝色葡聚糖、20~25份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 发酵培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、10~15份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 牙菌斑杀菌酶基料：（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合1~2h，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按2~5%的接种量接种至液体培养基中，于20~25℃、180r/min富集培养1~3天，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于20~25℃培养2~3天，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于25~30℃培养18~24h，离心，取上清液过0.45μm滤膜过滤，取滤液，冷冻干燥，得牙菌斑杀菌酶基料。
洁牙表面活性剂：
A.取粗鱼油按质量比100：1~3加入质量分数为70%的磷酸，于60~70℃搅拌混合2~4h，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于70~75℃搅拌混合30~40min，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于35~40℃保温30~40min，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、浓度为1mol/L的硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于65~70℃搅拌混合2~3h，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比80~90：1：2加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
一种假牙清洁剂的制备方法，包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于40~50℃搅拌混合1~2h，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量2~4倍的十六烷基酰氯，于25~30℃搅拌混合4~5h，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-5~-3℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取2~5份牙菌斑杀菌酶基料、30~50份洁牙表面活性剂、20~30份混合物、2~5份烷基糖苷、1~5份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、60~80份水，于50~60℃搅拌混合2~3h，即得假牙清洁剂。
实施例1
浒苔、海泥、海鱼、海虾：取自连云港海域。
粗鱼油：取自青岛奥丰源饲料有限公司，鱼粉加工副产物。
液体培养基：按质量份数计，取2份酵母粉、5份蛋白胨、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
初筛培养基：按质量份数计，取1份酵母粉、5份蛋白胨、8份右旋糖酐20000、2份蓝色葡聚糖、20份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 发酵培养基：按质量份数计，取1份酵母粉、5份蛋白胨、10份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 牙菌斑杀菌酶基料：（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合1h，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按2%的接种量接种至液体培养基中，于20℃、180r/min富集培养1天，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于20℃培养2~3天，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于25℃培养18h，离心，取上清液过0.45μm滤膜过滤，取滤液，冷冻干燥，得牙菌斑杀菌酶基料。
洁牙表面活性剂：
A.取粗鱼油按质量比100：1加入质量分数为70%的磷酸，于60℃搅拌混合2h，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于70℃搅拌混合30min，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于35℃保温30min，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、浓度为1mol/L的硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于65℃搅拌混合2h，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比80：1：2加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
一种假牙清洁剂的制备方法，包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于40℃搅拌混合1h，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量2倍的十六烷基酰氯，于25℃搅拌混合4h，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-5℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取2份牙菌斑杀菌酶基料、30份洁牙表面活性剂、20份混合物、2份烷基糖苷、1份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、60份水，于50℃搅拌混合2h，即得假牙清洁剂。
实施例2
浒苔、海泥、海鱼、海虾：取自连云港海域。
粗鱼油：取自青岛奥丰源饲料有限公司，鱼粉加工副产物。
液体培养基：按质量份数计，取4份酵母粉、9份蛋白胨、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
初筛培养基：按质量份数计，取5份酵母粉、9份蛋白胨、10份右旋糖酐20000、5份蓝色葡聚糖、25份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 发酵培养基：按质量份数计，取5份酵母粉、9份蛋白胨、15份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 牙菌斑杀菌酶基料：（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合2h，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按5%的接种量接种至液体培养基中，于25℃、180r/min富集培养3天，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于25℃培养3天，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于30℃培养24h，离心，取上清液过0.45μm滤膜过滤，取滤液，冷冻干燥，得牙菌斑杀菌酶基料。
洁牙表面活性剂：
A.取粗鱼油按质量比100：3加入质量分数为70%的磷酸，于70℃搅拌混合4h，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于75℃搅拌混合40min，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于40℃保温40min，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、浓度为1mol/L的硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于70℃搅拌混合3h，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比90：1：2加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
一种假牙清洁剂的制备方法，包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于50℃搅拌混合2h，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量4倍的十六烷基酰氯，于30℃搅拌混合5h，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-3℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取5份牙菌斑杀菌酶基料、50份洁牙表面活性剂、30份混合物、5份烷基糖苷、5份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、80份水，于60℃搅拌混合3h，即得假牙清洁剂。
实施例3
浒苔、海泥、海鱼、海虾：取自连云港海域。
粗鱼油：取自青岛奥丰源饲料有限公司，鱼粉加工副产物。
液体培养基：按质量份数计，取3份酵母粉、7份蛋白胨、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
初筛培养基：按质量份数计，取3份酵母粉、7份蛋白胨、9份右旋糖酐20000、3.5份蓝色葡聚糖、22.5份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 发酵培养基：按质量份数计，取3份酵母粉、7份蛋白胨、12.5份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。 牙菌斑杀菌酶基料：（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合1.5h，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按2~5%的接种量接种至液体培养基中，于22.5℃、180r/min富集培养2天，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于22.5℃培养2.5天，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于27.5℃培养21h，离心，取上清液过0.45μm滤膜过滤，取滤液，冷冻干燥，得牙菌斑杀菌酶基料。
洁牙表面活性剂：
A.取粗鱼油按质量比100：2加入质量分数为70%的磷酸，于65℃搅拌混合23h，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于72.5℃搅拌混合35min，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于37.5℃保温35min，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、浓度为1mol/L的硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于67.5℃搅拌混合2.5h，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比85：1：2加入质量分数为0.9%的氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
一种假牙清洁剂的制备方法，包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于45℃搅拌混合1.5h，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量3倍的十六烷基酰氯，于27.5℃搅拌混合4.5h，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-4℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取3.5份牙菌斑杀菌酶基料、40份洁牙表面活性剂、25份混合物、3.5份烷基糖苷、3份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、70份水，于55℃搅拌混合2.5h，即得假牙清洁剂。
对比例1
与实施例2的制备方法基本相同，唯有不同的是缺少牙菌斑杀菌酶基料。
对比例2
与实施例2的制备方法基本相同，唯有不同的是缺少牙菌斑杀菌酶基料和洁牙表面活性剂。
对比例3：武汉市某公司生产的一种假牙清洁剂
将实施例1~3制备的本发明的假牙清洁剂样品和对比例的假牙清洁剂样品按同等用量分别涂覆于6组相同状态的假牙表面，对比涂覆前后的除垢率及灭菌效果，测试结果如下表1：
表1
综上所述，本发明中所制备的假牙清洁剂的应用效果完全符合要求，值得大力推广与使用。

Claims (4)

1.一种假牙清洁剂，其特征在于，按重量份数计包括如下组分，2~5份牙菌斑杀菌酶基料、30~50份洁牙表面活性剂；
所述牙菌斑杀菌酶基料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取浒苔、海泥按质量比1：2：10加入无菌海水，搅拌混合，得混合液，取海鱼、海虾取出内脏，按质量比2：3：10加入无菌海水，匀浆，得匀浆液，取混合液按质量比2：1加入匀浆液混合，得培养物，取培养物按2~5%的接种量接种至液体培养基中，富集培养，得富集培养物；
（2）取富集培养物按质量比1：9加入氯化钠溶液，并稀释至10-6的稀释级，得稀释液，取稀释液涂布于初筛培养基中，于20~25℃培养，得初级培养物，挑取产生透明圈且菌径最大的菌落按3%的接种量接种至发酵培养基，于25~30℃培养，离心，取上清液过滤，取滤液，冷冻干燥，即得牙菌斑杀菌酶基料；
所述洁牙表面活性剂的制备方法，包括如下步骤：
A.取粗鱼油按质量比100：1~3加入磷酸，于60~70℃搅拌混合，离心，取上清液，取上清液按质量比3：2加入白土，于70~75℃搅拌混合，得搅拌混合物，取酵母粉按3%的重量添加量添加至搅拌混合物中，于35~40℃保温，得混合物；
B.取混合物按质量比1：10加入甲苯、硫酸甲醇溶液，通入氮气保护，于65~70℃搅拌混合，得搅拌混合物A，取搅拌混合物A按质量比80~90：1：2加入氯化钠溶液、正己烷混合，离心，取上层液，旋转蒸发，即得洁牙表面活性剂。
2.根据权利要求1所述的假牙清洁剂，其特征在于，所述步骤（1）中液体培养基为按质量份数计，取2~4份酵母粉、5~9份蛋白胨、1000份海水，pH8.0、121℃灭菌20min，即得。
3.根据权利要求1所述的假牙清洁剂，其特征在于，所述步骤（2）中初筛培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、8~10份右旋糖酐20000、2~5份蓝色葡聚糖、20~25份琼脂、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得；发酵培养基：按质量份数计，取1~5份酵母粉、5~9份蛋白胨、10~15份右旋糖酐20000、1000份海水，pH8.0，121℃灭菌20min，即得。
4.一种如权利要求1~3任意一项所述的假牙清洁剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
a.取壳聚糖按质量比1：20加入甲磺酸，于40~50℃搅拌混合，通入氮气保护，再加入壳聚糖质量2~4倍的十六烷基酰氯，于25~30℃搅拌混合，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：2加入-5~-3℃的蒸馏水，透析，取透析物按质量比5：1加入碳酸氢钠混合，得混合物；
b.按质量份数计，取2~5份牙菌斑杀菌酶基料、30~50份洁牙表面活性剂、20~30份混合物、2~5份烷基糖苷、1~5份脂肪醇聚氧乙烯醚-9、60~80份水，于50~60℃搅拌混合，即得假牙清洁剂。
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