CN108430987A - Pi3k抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用 - Google Patents

Pi3k抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种PI3K抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用。具体地，本发明提供了4‑氯‑5‑(6‑(1‑(甲基磺酰基)环丙基)‑2‑吗啉代嘧啶‑4‑基)吡啶‑2‑胺的多晶型物及其药学上可接受的盐、或其盐的多晶型物。此外，本发明还公开了含该抑制剂的药物组合物及其应用。

Description

PI3K抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用
发明内容
本发明属于医药技术领域，具体地说，本发明涉及一种PI3K抑制剂及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用，该抑制剂为4-氯-5-(6-(1-(甲基磺酰基)环丙基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)吡啶-2-胺。
背景技术
随着对肿瘤基因学和生物学研究的不断深入，多个细胞内肿瘤相关的关键信号通路被发现。肿瘤细胞依赖这些通路实现胞外信号的胞内转导，调节自身持续增殖、浸润转移和抗凋亡等活动，一方面维持其恶性表型特征，另一方面通过调节特定基因及其蛋白产物对治疗产生耐受。研究发现，由磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-AKT-哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)介导的传导途径在一些细胞过程，包括增殖和存活中起重要作用，并且这些途径的失调是广泛种类的人类癌症和其它疾病谱的致病因素(Katso等，Annual Rev.Cell Dev.BioL,2001,17:615-617)。
磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositide 3-kinase,PI3K)，属于脂激酶家族，依照其结构特征和底物选择性可以将其划分为3类。其中对1类PI3K研究最为深入，该类PI3K为异二聚体蛋白，分别由具有催化功能的亚基(ρ110α、ρ110β、ρ110δ和ρ110γ)和具有调节功能的亚基(ρ85α、ρ85β、ρ50α、ρ55α和ρ55γ)构成。la型PI3K酶亚基ρ100α和ρ100β均共同表达于各种细胞类型中，而ρ110δ表达更是受到白细胞群落和某些上皮细胞的限制。lb型PI3K酶由与ρl0l调节亚基相互作用的ρ110γ催化亚基组成，主要分布在白细胞、血小板和心肌细胞中。其中ρ85调节亚基通过与受体酪氨酸激酶的相互作用而被磷酸化激活，其氨基端含有SH3结构域和能与SH3结构域结合的脯氨酸富集区，其羧基端含有2个SH2结构域及1个ρ110结合的区域，ρ110亚基与蛋白激酶具有同源性，本身既具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的活性，又具有磷脂酰肌醇激酶的活性，可以将磷脂酰肌醇二磷酸(PI2P)转化为磷脂酰肌醇三磷酸(PI3P)，后者则可以进一步激活多个下游信号分子，完成胞外信号的继续传导。
研究表明，la型PI3K酶可以直接或间接地促使人类癌症发生(Vivanco和Sawyers，Nature Reviews Cancer，2002，2，489-501)。例如，基因PIK3CA在各种癌症中广泛被放大或发生突变，其编码的ρ110α亚型的催化位点中的激活突变与各种其它的肿瘤如结肠直肠部位和乳腺和肺的肿瘤有关。ρ110β在严重的上皮卵巢癌、乳腺癌以及ΡΤΕΝ缺失的肿瘤细胞系中的表达均有近5％的放大，ρ110δ与免疫抑制有关，常用于移植排斥和自身免疫性疾病当中。除了直接的作用外，la型PI3K可间接地导致由各种下游信号传导事件从而引发肿瘤。比如通过激活Akt，PI3K介导的信号传导事件的作用增加导致各种癌症。大量研究表明，不同PI3K亚型的分工不同，抑制恶性细胞的生长最好的方法是选择对 某种ρ110亚型特异性更高的抑制剂而不是广泛抑制所有I型PI3K酶(Susan和Kenneth，Cancer Treatment Reviews，2013Aug 26.pii:S0305-7372(13)00171-0)。目前临床上非选择性PI3K抑制剂已经观察到了不可避免的副作用，包括PI3K抑制剂常见的恶心、呕吐、腹泻、疲惫、转氨酶升高、高血糖症等。在选择性PI3K抑制剂中，由于PIK3CA/ρ110α是最常见的PI3K突变亚型，所以PI3Kα选择性抑制剂也是最有潜在抑瘤效果的抑制剂。同时，ΡΙ3Κα选择性抑制剂也可以最大程度的避免了临床上由于对ΡΙ3Κβ及PI3Kδ抑制剂所带来的肺炎、嗜中性白血球减少症、血小板减少、贫血、转氨酶升高等副作用(Brana和Siu，BMC Medicine，2012，10:161)。
PI3K作为细胞功能的关键调节通路，其异常信号与原癌基因的活化有着密切的联系，对肿瘤的发生、发展过程均有着关键性的影响。因此可以预期，通过开发小分子化合物实现对PI3K的抑制作为肿瘤治疗药物具有良好的开发前景。
对于PI3K信号通路而言，目前已经有多个单独抑制PI3K活性的化合物处于开发和临床试验阶段。如由Novartis公司开发的PI3K抑制剂BKM-120，现处于针对乳腺癌的临床ΠΙ期实验阶段。另一个PI3K抑制剂BYL-719，由Novartis公司开发用于治疗实体瘤、头颈癌，现也已处于临床ΠΙ期阶段。
因此开发活性更高、选择性更好、毒性更低的针对PI3K的药物具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可有效抑制PI3K的抑制剂、及其药学上可接受的盐和多晶型物及其应用。
在本发明的第一方面，提供了一种结构如式X所示的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物:
在另一优选例中，所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、L-乳酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、L-苹果酸盐、己二酸盐、L-酒石酸盐、马尿酸盐、柠檬酸盐、粘酸盐、乙醇酸盐、D-葡萄糖醛酸盐、苯甲酸盐、龙胆酸盐、烟酸盐、乙二磺酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐和氢溴酸盐。
在另一优选例中，所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、磷酸 盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐。
在另一优选例中，所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、马来酸盐、富马酸盐。
在另一优选例中，所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物为无水形式、水合物形式或溶剂合物形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物的多晶型物。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物药学上可接受的盐的多晶型物，且所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物药学上可接受的盐的多晶型物，且所述的药学上可接受盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、马来酸盐、富马酸盐。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为盐酸盐，其中，盐酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为硫酸盐，其中，硫酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为甲磺酸盐，其中，甲磺酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为马来酸盐，其中，马来酸与式X化合物的摩尔比为(0.7-1.3)：1，较佳地(0.8-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为L-酒石酸盐，其中，L-酒石酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为富马酸盐，其中，富马酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为氢溴酸盐，其中，氢溴酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为磷酸盐，其中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的药学上可接受盐为柠檬酸盐，其中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物盐酸盐的A型结晶，即晶型A，其X射线粉末衍射图包含下组A1的衍射角2θ(°)值：5.57±0.10、8.87±0.10、20.77±0.10、22.09±0.10、24.15±0.10、28.27±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型A的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组A2的衍射角2θ(°)值：25.19±0.10、30.88±0.10、31.37±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型A的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组A3 的衍射角2θ(°)值：16.55±0.10、17.01±0.10、22.84±0.10、25.55±0.10、26.70±0.10、37.90±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型A的X射线粉末衍射图包含选自组A1、A2和A3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型A的X射线粉末衍射图具有下表A-1所示2θ(°)值：
表A-1
在另一优选例中，所述的晶型A的X射线粉末衍射图谱基本如图1所表征。
在另一优选例中，所述的晶型A中，盐酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的晶型A还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图2B所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图2B所表征。
在另一优选例中，所述的晶型A为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物硫酸盐的B-1型结晶，即晶型B-1，其X射线粉末衍射图包含下组B1的衍射角2θ(°)值：9.83±0.10、18.51±0.10、21.11±0.10、21.75±0.10、27.29±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型B-1的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组B2的衍射角2θ(°)值：5.43±0.10、23.54±0.10、24.44±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型B-1的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组B3的衍射角2θ(°)值：7.94±0.10、14.52±0.10、15.07±0.10、16.66±0.10、28.73±0.10、29.08±0.10、30.07±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型B-1的X射线粉末衍射图包含选自组B1、B2和B3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型B-1的X射线粉末衍射图具有下表B-1所示2θ(°)值：
表B-1
在另一优选例中，所述的晶型B-1的X射线粉末衍射图谱基本如图3所表征。
在另一优选例中，所述的晶型B-1中，硫酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的晶型B-1具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图4B所表征；
(ii)其热重分析图谱基本如图4B所表征。
在另一优选例中，所述的晶型B-1为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物硫酸盐的B-2型结晶，即晶型B-2，其X射线粉末衍射图包含下组B1’的衍射角2θ(°)值：16.42±0.10、20.17±0.10、22.25±0.10、23.00±0.10、23.97±0.10、25.30±0.10、27.98±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型B-2的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组B2’的衍射角2θ(°)值：21.08±0.10、25.89±0.10、32.14±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型B-2的X射线粉末衍射图包含选自组B1’、B2’中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型B-2的X射线粉末衍射图具有下表B-2所示2θ(°)值：
表B-2
在另一优选例中，所述的晶型B-2的X射线粉末衍射图谱基本如图5所表征。
在另一优选例中，所述的晶型B-2中，硫酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的晶型B-2为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物马来酸盐的C型结晶，即晶型C，其X射线粉末衍射图包含下组C1的衍射角2θ(°)值：8.35±0.10、8.92±0.10、16.91±0.10、20.35±0.10、21.40±0.10、23.70±0.10、24.98±0.10、25.47±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型C的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组C2的衍射角2θ(°)值：15.96±0.10、16.61±0.10、17.87±0.10、18.86±0.10、28.59±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型C的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组C3的衍射角2θ(°)值：31.38±0.10、33.52±0.10、34.16±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型C的X射线粉末衍射图包含选自组C1、C2和C3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型C的X射线粉末衍射图具有下表C-1所示2θ(°)值：
表C-1
在另一优选例中，所述的晶型C的X射线粉末衍射图谱基本如图6所表征。
在另一优选例中，所述的晶型C中，马来酸与式X化合物的摩尔比为(0.7-1.3)：1，较佳地(0.8-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的晶型C还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图7B所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图7B所表征；
(iii)所述的晶型C的熔点为198℃-208℃，较佳地为200℃-206℃。
在另一优选例中，所述的晶型C为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物富马酸盐的D-1型结晶，即晶型D-1，其X射线粉末衍射图包含下组D1的衍射角2θ(°)值：9.07±0.10、12.48±0.10、16.85±0.10、18.93±0.10、20.07±0.10、21.21±0.10、22.96±0.10、25.56±0.10、27.50±0.10、30.72±0.10、31.45±0.10、32.69±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型D-1的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组 D2的衍射角2θ(°)值：15.31±0.10、17.52±0.10、18.28±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型D-1的X射线粉末衍射图包含选自组D1、D2中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型D-1的X射线粉末衍射图具有下表D-1所示2θ(°)值：
表D-1
在另一优选例中，所述的晶型D-1的X射线粉末衍射图谱基本如图8所表征。
在另一优选例中，所述的晶型D-1中，富马酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物富马酸盐的D-2型结晶，即晶型D-2，其X射线粉末衍射图包含下组D1’的衍射角2θ(°)值：14.76±0.10、19.74±0.10、26.69±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型D-2的X射线粉末衍射图还包含下组D2’的衍射角2θ(°)值：26.34±0.10、29.82±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型D-2的X射线粉末衍射图还包含下组D3’的衍射角2θ(°)值：21.68±0.10、22.29±0.10、25.34±0.10、34.96±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型D-2的X射线粉末衍射图包含选自组D1’、D2’和D3’中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型D-2的X射线粉末衍射图具有下表D-2所示2θ(°)值：
表D-2
在另一优选例中，所述的晶型D-2的X射线粉末衍射图谱基本如图9所表征。
在另一优选例中，所述的晶型D-2中，富马酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，所述的晶型D-2还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图10B所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图10B所表征；
(iii)所述的晶型D-2的熔点为231℃-241℃，较佳地为233℃-239℃。
在另一优选例中，所述的晶型D-2为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物甲磺酸盐E型结晶，即晶型E，其X射线粉末衍射图包含下组E1的衍射角2θ(°)值：7.92±0.10、16.07±0.10、18.74±0.10、20.25±0.10、20.61±0.10、22.08±0.10、24.30±0.10、31.04±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型E的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组E2的衍射角2θ(°)值：7.60±0.10、10.17±0.10、15.05±0.10、15.41±0.10、30.25±0.10、30.58±0.10、33.08±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型E的X射线粉末衍射图包含选自组E1、E2中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型E的X射线粉末衍射图具有下表E-1所示2θ(°)值：
表E-1
在另一优选例中，所述的晶型E的X射线粉末衍射图谱基本如图11所表征。
在另一优选例中，所述的晶型E中，甲磺酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的晶型E还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图12B所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图12B所表征；
(iii)所述的晶型E的熔点为243℃-253℃，较佳地为245℃-251℃。
在另一优选例中，所述的晶型E为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物L-酒石酸盐F型结晶，即晶型F，其X射线粉末衍射图包含下组F1的衍射角2θ(°)值：11.22±0.10、19.80±0.10、20.35±0.10、20.66±0.10、23.44±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型F的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组F2的衍射角2θ(°)值：15.42±0.10、17.42±0.10、19.11±0.10、22.69±0.10、27.21±0.10、27.63±0.10、31.02±0.10、31.28±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型F的X射线粉末衍射图包含选自组F1、F2中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型F的X射线粉末衍射图具有下表F-1所示2θ(°)值：
表F-1
在另一优选例中，所述的晶型F的X射线粉末衍射图谱基本如图13所表征。
在另一优选例中，所述的晶型F中，L-酒石酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的晶型F还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图14B所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图14B所表征；
(iii)所述的晶型F的熔点为192℃-202℃，较佳地为194℃-200℃。
在另一优选例中，所述的晶型F为无水形式。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物磷酸盐G-1型结晶，即晶型G-1，其X射线粉末衍射图包含下组G1的衍射角2θ(°)值：9.43±0.10、17.30±0.10、18.82±0.10、19.41±0.10、20.91±0.10、22.40±0.10、27.44±0.10、29.43±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-1的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组G2的衍射角2θ(°)值：15.32±0.10、23.85±0.10、24.35±0.10、30.61±0.10、31.07±0.10、33.41±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-1的X射线粉末衍射图包含选自组G1、G2中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型G-1的X射线粉末衍射图具有下表G-1所示2θ(°)值：
表G-1
在另一优选例中，所述的晶型G-1的X射线粉末衍射图谱基本如图15所表征。
在另一优选例中，所述的晶型G-1中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物磷酸盐G-2型结晶，即晶型G-2，其X射线粉末衍射图包含下组G1’的衍射角2θ(°)值：19.26±0.10、21.00±0.10、24.15±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-2的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组G2’的衍射角2θ(°)值：16.00±0.10、16.44±0.10、21.89±0.10、23.70±0.10、27.19±0.10、27.58±0.10、30.38±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-2的X射线粉末衍射图具有选自组G1’、G2’中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型G-2的X射线粉末衍射图具有下表G-2所示2θ(°)值：
表G-2
在另一优选例中，所述的晶型G-2的X射线粉末衍射图谱基本如图16所表征。
在另一优选例中，所述的晶型G-2中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物磷酸盐G-3型结晶，即晶型G-3，其X射线粉末衍射图包含下组G1”的衍射角2θ(°)值：15.11±0.10、16.16±0.10、18.84±0.10、19.90±0.10、21.32±0.10、23.40±0.10、24.21±0.10、24.75±0.10、26.16±0.10、30.55±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-3的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组G2”的衍射角2θ(°)值：11.62±0.10、21.70±0.10、25.89±0.10、27.75±0.10、29.09±0.10、30.99±0.10、31.86±0.10、32.48±0.10、38.41±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型G-3的X射线粉末衍射图具有选自组G1”、G2”中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型G-3的X射线粉末衍射图具有下表G-3所示2θ(°)值：
表G-3
在另一优选例中，所述的晶型G-3的X射线粉末衍射图谱基本如图17所表征。
在另一优选例中，所述的晶型G-3中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-1型结晶，即晶型H-1，其X射线粉末衍射图包含下组H1的衍射角2θ(°)值：14.01±0.10、21.04±0.10、28.26±0.10、35.54±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-1的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组H2的衍射角2θ(°)值：16.14±0.10、18.64±0.10、29.78±0.10、31.81±0.10、32.10±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-1的X射线粉末衍射图具有选自组H1、H2中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型H-1的X射线粉末衍射图具有下表H-1所示2θ(°)值：
表H-1
在另一优选例中，所述的晶型H-1的X射线粉末衍射图谱基本如图18所表征。
在另一优选例中，所述的晶型H-1中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-2型结晶，即晶型H-2，其X射线粉末衍射图包含下组H1’的衍射角2θ(°)值：17.75±0.10、20.15±0.10、22.25±0.10、26.28±0.10、30.04±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-2的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组H2’的衍射角2θ(°)值：10.36±0.10、22.75±0.10、23.15±0.10、24.01±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-2的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组H3’的衍射角2θ(°)值：21.65±0.10、25.34±0.10、27.00±0.10、27.99±0.10、34.09±0.10、34.51±0.10、35.01±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-2的X射线粉末衍射图具有选自组H1’、H2’和H3’中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型H-2的X射线粉末衍射图具有下表H-2所示2θ(°)值：
表H-2
在另一优选例中，所述的晶型H-2的X射线粉末衍射图谱基本如图19所表征。
在另一优选例中，所述的晶型H-2中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-3型结晶，即晶型H-3，其X射线粉末衍射图包含下组H1”的衍射角2θ(°)值：15.62±0.10、19.67±0.10、20.01±0.10、23.01±0.10、26.82±0.10、27.65±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-3的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组H2”的衍射角2θ(°)值：16.29±0.10、17.15±0.10、18.11±0.10、19.13±0.10、28.48±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-3的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组H3”的衍射角2θ(°)值：21.44±0.10、24.50±0.10、29.10±0.10、30.20±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型H-3的X射线粉末衍射图包含选自组H1”、H2”和H3”中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型H-3的X射线粉末衍射图具有下表H-3所示2θ(°)值：
表H-3
在另一优选例中，所述的晶型H-3的X射线粉末衍射图谱基本如图20所表征。
在另一优选例中，所述的晶型H-3中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物氢溴酸盐J型结晶，即晶型J，其X射线粉末衍射图包含下组J1的衍射角2θ(°)值：20.71±0.10、22.07±0.10、22.84±0.10、24.13±0.10、25.00±0.10、26.85±0.10、28.26±0.10、31.38±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型J的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组J2的衍射角2θ(°)值：8.85±0.10、16.90±0.10、17.65±0.10、18.60±0.10、30.95±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型J的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组J3的衍射角2θ(°)值：19.65±0.10、25.59±0.10、27.95±0.10、29.13±0.10、34.77±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型J的X射线粉末衍射图具有选自组J1、J2和J3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型J的X射线粉末衍射图具有下表J-1所示2θ(°)值：
表J-1
在另一优选例中，所述的晶型J的X射线粉末衍射图谱基本如图21所表征。
在另一优选例中，所述的晶型J中，氢溴酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物游离碱的I型结晶，即晶型I，其X射线粉末衍射图包含下组I1的衍射角2θ(°)值：12.37±0.10、14.99±0.10、16.11±0.10、21.03±0.10、22.65±0.10、24.30±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型I的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组I2的衍射角2θ(°)值：17.77±0.10、18.59±0.10、19.50±0.10、21.50±0.10、23.35±0.10、25.30±0.10、 27.97±0.10、29.73±0.10、31.81±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型I的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组I3的衍射角2θ(°)值：10.36±0.10、25.03±0.10、26.00±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型I的X射线粉末衍射图具有选自组I1、I2和I3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型I的X射线粉末衍射图具有下表I-1所示2θ(°)值：
表I-1
在另一优选例中，所述的晶型I的X射线粉末衍射图谱基本如图22所表征。
在另一优选例中，所述的晶型I还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图23A所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图23A所表征；
(iii)所述的晶型I的熔点为165℃-175℃，较佳地为167℃-173℃。
在另一优选例中，所述的多晶型物为式X化合物游离碱的Ⅱ型结晶，即晶型Ⅱ，其X射线粉末衍射图包含下组Ⅱ1的衍射角2θ(°)值：15.34±0.10、16.57±0.10、16.86±0.10、17.33±0.10、22.68±0.10、24.36±0.10、24.95±0.10、25.51±0.10、26.53±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组Ⅱ2的衍射角2θ(°)值：18.13±0.10、18.41±0.10、19.21±0.10、20.38±0.10、21.24±0.10、23.45±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图还包含2个或2个以上选自下组Ⅱ3的衍射角2θ(°)值：11.00±0.10、11.77±0.10、22.13±0.10、25.97±0.10、28.95±0.10、30.25±0.10、30.97±0.10、32.43±0.10。
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图包含选自组Ⅱ1、Ⅱ2和Ⅱ3中的6个或更多个或全部(如6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、 23等)的2θ(°)值。
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图具有下表Ⅱ-1所示2θ(°)值：
表Ⅱ-1
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图谱基本如图24所表征。
在另一优选例中，所述的晶型Ⅱ还具有选自下组的一个或多个特征：
(i)差示扫描量热法分析图谱基本如图25A所表征；
(ii)热重分析图谱基本如图25A所表征；
(iii)所述的晶型Ⅱ的熔点为169℃-179℃，较佳地为171℃-177℃。
在本发明的第二方面，提供了一种制备本发明第一方面所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物的方法，包括步骤：
(1)在惰性溶剂中，将化合物X-e与化合物X-f进行反应，从而形成式X化合物；
(2)任选地将式X化合物与酸进行成盐反应，从而形成式X化合物药学上可接受的盐；和
(3)任选地将步骤(1)所形成的式X化合物或步骤(2)所形成的式X化合物药学上可接受的盐进行结晶处理，从而获得式X化合物的多晶型物或式X化合物药学上可接受的盐的多晶型物。
在另一优选例中，所述方法包括以下子方法(A)-(O)中任一子方法：
(A)所述多晶型物为式X化合物盐酸盐的A型结晶，即晶型A，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在盐酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型A。
在另一优选例中，子方法(A)中，所述有机溶剂选自下组：甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈，或其混合物，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(A)中，盐酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，子方法(A)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(A)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。。
在另一优选例中，子方法(A)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(B)所述多晶型物为式X化合物硫酸盐的B-1型结晶，即晶型B-1，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在硫酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型B-1。
在另一优选例中，子方法(B)中，所述有机溶剂选自下组：甲醇、丙酮、乙腈，或其混合物，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(B)中，硫酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，子方法(B)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(B)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。。
在另一优选例中，子方法(B)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(C)所述多晶型物为式X化合物硫酸盐的B-2型结晶，即晶型B-2，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在硫酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型B-2。
在另一优选例中，子方法(C)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯。
在另一优选例中，子方法(C)中，硫酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，子方法(C)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(C)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(C)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(D)所述多晶型物为式X化合物马来酸盐的C型结晶，即晶型C，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在马来酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型C。
在另一优选例中，子方法(D)中，所述有机溶剂选自下组：甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈，或其混合物，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(D)中，马来酸与式X化合物的摩尔比为(0.7-1.3)：1，较佳地(0.8-1.1)：1。
在另一优选例中，子方法(D)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(D)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(D)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(E)所述多晶型物为式X化合物富马酸盐的D-1型结晶，即晶型D-1，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在富马酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型D-1。
在另一优选例中，子方法(E)中，所述有机溶剂为甲醇或乙酸乙酯，较佳地，所述有机溶剂为甲醇。
在另一优选例中，子方法(E)中，富马酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，子方法(E)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(E)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(E)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(F)所述多晶型物为式X化合物富马酸盐的D-2型结晶，即晶型D-2，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在富马酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型D-2。
在另一优选例中，子方法(F)中，所述有机溶剂为乙腈或丙酮，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(F)中，富马酸与式X化合物的摩尔比为(0.2-1.1)：1，较佳地(0.3-0.8)：1。
在另一优选例中，子方法(F)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(F)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(F)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(G)所述多晶型物为式X化合物甲磺酸盐的E型结晶，即晶型E，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在甲磺酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型E。
在另一优选例中，子方法(G)中，所述有机溶剂选自下组：甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈，或其混合物，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(G)中，甲磺酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，子方法(G)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(G)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(G)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(H)所述多晶型物为式X化合物L-酒石酸盐F型结晶，即晶型F，并且在步骤(3)中包括： 在有机溶剂中，在L-酒石酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型F。
在另一优选例中，子方法(H)中，所述有机溶剂选自下组：甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈，或其混合物，较佳地，所述有机溶剂为丙酮。
在另一优选例中，子方法(H)中，L-酒石酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，子方法(H)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(H)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(H)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(I)所述多晶型物为式X化合物磷酸盐G-1型结晶，即晶型G-1，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在磷酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型G-1。
在另一优选例中，子方法(I)中，所述有机溶剂为甲醇。
在另一优选例中，子方法(I)中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(I)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(I)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(I)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(J)所述多晶型物为式X化合物磷酸盐G-2型结晶，即晶型G-2，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在磷酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型G-2。
在另一优选例中，子方法(J)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯。
在另一优选例中，子方法(J)中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(J)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(J)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(J)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(K)所述多晶型物为式X化合物磷酸盐G-3型结晶，即晶型G-3，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在磷酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型G-3。
在另一优选例中，子方法(K)中，所述有机溶剂为乙腈或丙酮。
在另一优选例中，子方法(K)中，磷酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(K)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(K)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(K)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(L)所述多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-1型结晶，即晶型H-1，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在柠檬酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型H-1。
在另一优选例中，子方法(L)中，所述有机溶剂为甲醇。
在另一优选例中，子方法(L)中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(L)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(L)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(L)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(M)所述多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-2型结晶，即晶型H-2，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在柠檬酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型H-2。
在另一优选例中，子方法(M)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯。
在另一优选例中，子方法(M)中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(M)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(M)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(M)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(N)所述多晶型物为式X化合物柠檬酸盐H-3型结晶，即晶型H-3，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在柠檬酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型H-3。
在另一优选例中，子方法(N)中，所述有机溶剂为乙腈或丙酮。
在另一优选例中，子方法(N)中，柠檬酸与式X化合物的摩尔比为1：(0.9-2.1)，较佳地1：(1.1-2.1)。
在另一优选例中，子方法(N)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(N)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(N)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(O)所述多晶型物为式X化合物氢溴酸盐J型结晶，即晶型J，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，在氢溴酸存在下，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型J。
在另一优选例中，子方法(O)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯、乙腈或丙酮。
在另一优选例中，子方法(O)中，氢溴酸与式X化合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1，较佳地(0.9-1.1)：1。
在另一优选例中，子方法(O)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在另一优选例中，子方法(O)中，所述结晶处理的温度为0-50℃，较佳地为0-20℃。
在另一优选例中，子方法(O)中，所述结晶处理的时间为1-72小时，较佳地为2-50小时。
(P)所述多晶型物为式X化合物游离碱的I型结晶，即晶型I，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型I；
在另一优选例中，子方法(P)中，所述有机溶剂为甲醇、乙酸乙酯、乙腈、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、异丙醇或丙酮。
在另一优选例中，子方法(P)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温、缓慢挥发或悬浮搅拌。
(Q)所述多晶型物为式X化合物游离碱的Ⅱ型结晶，即晶型Ⅱ，并且在步骤(3)中包括：在有机溶剂中，对式X化合物进行结晶处理，从而形成晶型Ⅱ；
在另一优选例中，子方法(Q)中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚或异丙醇。
在另一优选例中，子方法(Q)中，所述结晶处理为缓慢降温、缓慢挥发、悬浮搅拌、反溶剂添加或其组合，优选缓慢降温或悬浮搅拌。
在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：
(a)本发明第一方面中任一所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物；以及(b)药学可接受的载体。
本发明的第四方面提供了本发明第一方面中任一所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物，或第三方面所述药物组合物的用途，用于制备治疗蛋白酪氨酸激酶介导的疾病的药物。
较佳地，所述的蛋白酪氨酸激酶介导的疾病为PI3K激酶介导的疾病。
本发明第五方面提供了本发明第一方面中任一所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物，或第三方面所述药物组合物在制备治疗癌症或组织增生类疾病的药物中的应用。
较佳地，所述的癌症选自黑素瘤、乳头状甲状腺肿瘤、胆管癌、结肠癌、卵巢癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、肺癌、食道癌、脑癌、恶性淋巴肿瘤、肝、胃、肾、膀胱、前列腺、乳腺、胰腺的癌或肉瘤、以及皮肤、结肠、甲状腺、肺、卵巢的原发或复发性实体瘤、白血病、头颈癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了晶型A的XRPD图。
图2A显示了晶型A的HPLC图。
图2B显示了晶型A的TGA/DSC图。
图3显示了晶型B-1的XRPD图。
图4A显示了晶型B-1的HPLC图。
图4B显示了晶型B-1的TGA/DSC图。
图5显示了晶型B-2的XRPD图。
图6显示了晶型C的XRPD图。
图7A显示了晶型C的HPLC图。
图7B显示了晶型C的TGA/DSC谱图
图7C显示了晶型C的1HNMR谱图。
图8显示了晶型D-1的XRPD图。
图9显示了晶型D-2的XRPD图。
图10A显示了晶型D-2的HPLC图。
图10B显示了晶型D-2的TGA/DSC谱图。
图10C显示了晶型D-2的1HNMR谱图。
图11显示了晶型E的XRPD图。
图12A显示了晶型E的HPLC图。
图12B显示了晶型E的TGA/DSC谱图。
图12C显示了晶型E的1HNMR谱图。
图13显示了晶型F的XRPD图。
图14A显示了晶型F的HPLC图。
图14B显示了晶型F的TGA/DSC谱图。
图14C显示了晶型F的1HNMR谱图。
图15显示了晶型G-1的XRPD图。
图16显示了晶型G-2的XRPD图。
图17显示了晶型G-3的XRPD图。
图18显示了晶型H-1的XRPD图。
图19显示了晶型H-2的XRPD图。
图20显示了晶型H-3的XRPD图。
图21显示了晶型J的XRPD图。
图22显示了晶型I的XRPD图。
图23A显示了晶型I的TGA/DSC谱图。
图23B显示了晶型I的DVS图。
图24显示了晶型Ⅱ的XRPD图。
图25A显示了晶型Ⅱ的TGA/DSC谱图。
图25B显示了晶型Ⅱ的DVS图。
图26显示了晶型A的DVS图。
图27显示了晶型B-1的DVS图。
图28显示了晶型C的DVS图。
图29显示了晶型D-2的DVS图。
图30显示了晶型E的DVS图。
图31显示了晶型F的DVS图。
具体实施方式
发明人经过长期而深入的研究，发现了一系列式X化合物的游离碱多晶型物、盐以及盐的多晶型物。从体外酶、细胞生长抑制实验显示，式X化合物游离碱有显著的PI3K激酶抑制活性，其不仅在酶水平对ΡΙ3Κ，特别是ΡΙ3Κ-α激酶具有较高的抑制活性，而且对ΡΙΚ3CA突变型乳腺癌细胞株T47D和MCF-7也具有较高的抑制性，同时还具有低细胞毒性，此外，该化合物在正常细胞系(如NIH-3T3细胞)中具有较低的细胞毒性，从而大大降低了非特异性毒副作用。研究还发现，式X化合物的一系列游离碱多晶型物、其盐以及盐的多晶型物不仅具有较好的物理化学稳定性，还具有较好的体内、体外相关药理活性，因此具有进一步开发成为药物的可能。在此基础上，完成了本发明。
如本文所用，术语“本发明化合物”包括本发明的式X化合物，本发明的式X化合物药学上可接受的盐以及本发明的多晶型物。
式X化合物
本发明中，“式X化合物”或“式X所示的化合物”可以互换使用，除非特别说明，一般都是指游离碱形式。
本发明中，式X化合物为4-氯-5-(6-(1-(甲基磺酰基)环丙基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)吡啶-2-胺，其对ΡΙ3Κ，特别是ΡΙ3Κ-α激酶有较好的选择抑制活性和较低的细胞毒性，以及有利的代谢特征。
本发明中，“游离碱样品”或“游离碱”是指实施例1制备的式X化合物游离碱。
式X化合物药学上可接受的盐
本发明中，所述的药学上可接受的盐优选自下组：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、L-乳酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、L-苹果酸盐、己二酸盐、L-酒石酸盐、马尿酸盐、柠檬酸盐、粘酸盐、乙醇酸盐、D-葡萄糖醛酸盐、苯甲酸盐、龙胆酸盐、烟酸盐、乙二磺酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐和氢溴酸盐。
多晶型物
固体不是以无定形的形式就是以结晶的形式存在。在结晶形式的情况下，分子定位于三维晶格格位内。当化合物从溶液或浆液中结晶出来时，它可以不同的空间点阵排列结晶(这种性质被称作“多晶型现象”)，形成具有不同的结晶形式的晶体，这各种结晶形式被称作“多晶型物”。给定物质的不同多晶型物可在一个或多个物理属性方面(如溶解度和溶解速率、真比重、晶形、堆积方式、流动性和/或固态稳定性)彼此不同。
结晶
可以通过操作溶液，使得感兴趣化合物的溶解度极限被超过，从而完成生产规模的结晶。这可以通过多种方法来完成，例如，缓慢降温，通过在相对高的温度下溶解化合物，然后冷却溶液至饱和极限以下。或者通过沸腾、常压蒸发、真空干燥或通过其它的一些方法来减小液体体积。可通过加入抗溶剂或化合物在其中具有低的溶解度的溶剂或这样的溶剂的混合物，来降低感兴趣化合物的溶解度。另一种可选方法是调节pH值以降低溶解度。有关结晶方面的详细描述请参见Crystallization,第三版,J W MullFns,ButtFrworth-HFinFman Ltd.，1993,ISBN 0750611294。
本发明所述的“悬浮搅拌”是指将式X化合物和相应的酸或相应酸的溶液在合适的溶剂中混合形成浑浊液，或者将式X化合物与合适的溶剂混合形成浑浊液后搅拌得到晶体的一种方法。合适的溶剂可以为水或有机溶剂。
本发明所述的“缓慢挥发”是指将式X化合物的溶液或含式X化合物和相应酸的溶液置于一定温度下缓慢挥发掉溶剂，得到晶体的一种方法。
本发明所述的“反溶剂添加”是指向式X化合物的一种溶液中加入另一种合适溶剂后析出得到晶体的一种方法。
假如期望盐的形成与结晶同时发生，如果盐在反应介质中比原料溶解度小，那么加入适当的酸或碱可导致所需盐的直接结晶。同样，在最终想要的形式比反应物溶解度小的介质中，合成反应的完成可使最终产物直接结晶。
结晶的优化可包括用所需形式的晶体作为晶种接种于结晶介质中。另外，许多结晶方法使用上述策略的组合。一个实施例是在高温下将感兴趣的化合物溶解在溶剂中，随后通过受控方式加入适当体积的抗溶剂，以使体系正好在饱和水平之下。此时，可加入所需形式的晶种(并保持晶种的完整性)，将体系冷却以完成结晶。
如本文所用，术语“室温”一般指4-30℃，较佳地指20±5℃。
本发明的多晶型物
本发明中，“本发明的晶体”、“本发明的晶型”、“本发明的多晶型物”等可互换使用。
本发明中，“式X化合物的多晶型物”和“式X化合物游离碱的多晶型物”等可互换使用。
如本文所用，术语“本发明的多晶型物”包括式X化合物游离碱或式X化合物药学上可接 受的盐(如盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐)，或式X化合物各种溶剂合物的多晶型物，还包括相同的盐(如盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐)或溶剂合物的不同多晶型物。
优选的本发明多晶型物包括(但并不限于)：(i)晶型A、晶型B-1、晶型B-2、晶型C、晶型D-1、晶型D-2、晶型E、晶型F、晶型G-1、晶型G-2、晶型G-3、晶型H-1、晶型H-2、晶型H-3、晶型J(盐的晶型)；和(ii)晶型I和晶型Ⅱ(式X化合物的晶型)。
多晶型物的鉴定和性质
可采用已知的方法或仪器对式X化合物或药学上可接受盐的多晶型物进行表征，例如采用如下多种方式和仪器。
X射线粉末衍射
测定晶型的X射线粉末衍射的方法在本领域中是已知的。例如使X射线粉末衍射仪，以2°每分钟的扫描速度，采用铜辐射靶获取图谱。
本发明的式X化合物或其药学上可接受的盐的多晶型物，具有特定的晶型形态，在X-射线粉末衍射(XRPD)图中具有特定的特征峰。
示差扫描量热分析
又称“差示量热扫描分析”(DSC)，是在加热过程中，测量被测物质与参比物之间的能量差与温度之间关系的一种技术。DSC图谱上的峰位置、形状和峰数目与物质的性质有关，故可以定性地用来鉴定物质。本领域常用该方法来检测物质的相变温度、玻璃化转变温度、反应热等多种参数。
式X化合物的药物组合物及其应用
通常，本发明式X化合物或其药学可接受的盐可以与一种或多种药用载体形成适合的剂型施用。这些剂型适用于口服、直肠给药、局部给药、口内给药以及其他非胃肠道施用(例如，皮下、肌肉、静脉等)。例如，适合口服给药的剂型包括胶囊、片剂、颗粒剂以及糖浆等。这些制剂中包含的本发明的化合物可以是固体粉末或颗粒；水性或非水性液体中的溶液或是混悬液；油包水或水包油的乳剂等。上述剂型可由活性化合物与一种或多种载体或辅料经由通用的药剂学方法制成。上述的载体需要与活性化合物或其他辅料兼容。对于固体制剂，常用的无毒载体包括但不限于甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、纤维素、葡萄糖、蔗糖等。用于液体制剂的载体包括水、生理盐水、葡萄糖水溶液、乙二醇和聚乙二醇等。活性化合物可与上述载体形成溶液或是混悬液。
本发明的组合物以符合医学实践规范的方式配制，定量和给药。给予化合物的“有效量”由要治疗的具体病症、治疗的个体、病症的起因、药物的靶点以及给药方式等因素决定。
如本文所用，“治疗有效量”是指可对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所 接受的量。
本发明的药物组合物或所述药用组合物中含有的本发明化合物的治疗有效量优选为0.1mg-5g/kg(体重)。
本发明化合物或本发明的药用组合物可用于治疗蛋白酪氨酸激酶介导的疾病，或用于治疗癌症或组织增生类疾病。
作为优选，所述的蛋白酪氨酸激酶介导的疾病为PI3K激酶介导的疾病。
作为优选，所述的癌症选自黑素瘤、乳头状甲状腺肿瘤、胆管癌、结肠癌、卵巢癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、肺癌、食道癌、脑癌、恶性淋巴肿瘤、肝、胃、肾、膀胱、前列腺、乳腺、胰腺的癌或肉瘤、以及皮肤、结肠、甲状腺、肺、卵巢的原发或复发性实体瘤、白血病、头颈癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤。
本发明的化合物或本发明的药用组合物在某些疾病中可以与其它药物联合应用，以达到预期的治疗效果。
本发明的主要优点包括：
式X化合物或其药学上可接受的盐的多晶型物具有优异的物理化学稳定性和突出的相关药理活性，是理想的ΡΙ3Κ抑制剂。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
试剂与仪器
化合物的结构和纯度通过核磁共振(1HNMR)和/或液质联用质谱(LC-MS)来确定。1HNMR：BrukFrAVANCF-400核磁仪，内标为四甲基硅烷(TMS)。LC-MS：AgilFnt 1200HPLC SystFm/6140 MS液质联用质谱仪(购自安捷伦)，柱子WatFrsX-BridgF,150×4.6mm,3.5μm。制备高效液相色谱(prF-HPLC)：用WatFrs PHW007，柱子XBridgF C18,4.6*150mm,3.5um。
采用ISCO Combiflash-Rf75或Rf200型自动过柱仪，AgFla 4g、12g、20g、40g、80g、120g一次性硅胶柱。
已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可以于ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich ChFmical Company，韶远化学科技(AccFla ChFmBio Inc)和达瑞化学品等公司处购买。
实施例中无特殊说明，反应均在氮气或氩气氛下进行。实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
如本文所用，DMF表示二甲基甲酰胺，DMSO表示二甲基亚砜，THF表示四氢呋喃，DIFA表示N,N-二异丙基乙胺，FA表示乙酸乙酯，PF表示石油醚。BINAP表示(2R,3S)-2,2’-双二苯 膦基-1,1’-联萘，NBS表示N-溴代丁二酰亚胺，NCS表示N-氯代丁二酰亚胺，Pd2(dba)3表示三(二亚苄基丙酮)二钯，Pd(dppf)Cl2表示[1,1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯。
通用方法
粉末X衍射图谱是通过本领域的已知方法，XRPD图谱在D8ADVANCE X射线粉末衍射分析仪上采集，XRPD测试参数如下表所示。
参数 XRPD
X射线源 Cu K(λ＝1.54056Angstrom)
光管设定 40千伏，40毫安
检测器 PSD
扫描范围(2θ(°)) 4°～40°
扫描步长(2θ(°)) 0.05
扫描速率 1秒/步
图中各峰的位置由2θ(°)确定。可以理解，不同的仪器和/或条件可导致产生的数据会略有不同，各峰的位置和相对强度会有变化。峰的强度划分仅仅反映了各位置上峰的近似大小。本发明各晶型均以其峰高最高的衍射峰作为基峰，定义其相对强度为100％，作为I0，其它各峰以其峰高与基峰峰高的比值作为其相对强度I/I0，各峰相对强度的划分定义如下表所示：
相对强度I/I0(％) 定义
50～100 VS(很强)
20～50 S(强)
10～20 M(中等)
0～10 W(弱)
本发明的盐或其晶型通过HPLC/IC或1H NMR确定酸碱摩尔比。
液态核磁谱图在Bruker 400M核磁共振仪上采集，DMSO-d6作为溶剂。
高效液相色谱在Agilent1260 HPLC上采集，具体仪器和测试参数见下表。
TGA和DSC图谱分别在TGA Q500 V20.10 Build 36热重分析仪和DSC Q2000 V24.4 Build 116差示扫描量热仪上采集，测试参数如下表所示。
参数 TGA DSC
方法 线性升温 线性升温
样品盘 铂金盘，敞开 铝盘，压盖
温度范围 25℃–设定温度 25℃–设定温度
扫描速率(℃/分钟) 10 10
保护气体 氮气 氮气
动态水分吸附(DVS)曲线在SMS(Surface Measurement Systems)的DVS Intrinsic上采集。DVS测试参数列于下表。
参数 设定值
温度 25℃
样品量 10～20毫克
保护气体 氮气，0.1M Pa
dm/dt 0.01％/分钟
最小dm/dt平衡时间 5分钟
最大平衡时间 120分钟
RH范围 0％RH～95％RH
RH梯度 5％RH
可以理解的是，使用与上述仪器作用相同的其他类型的仪器或使用不同与本发明中使用的测试条件时，可能会得到另外的数值，因此，所引用的数值不应视为绝对的数值。
由于仪器的误差或操作人员的区别，本领域技术人员能理解，以上用于表征晶体的物理性质的参数可能有微小的差别，所以上述的参数仅用于辅助表征本发明提供的多晶型物，而不能视为是对本发明的多晶型物的限制。
对比例1-3(参照PCT/CN2015/097739中的方法制备)
化合物X-f的制备方法：
步骤a：向化合物X-f-1(1.0g，7.75mmol)的三氯甲烷(100ml)溶液中加入化合物N-溴代 丁二酰亚胺(1.56g，8.76mmol)，室温搅拌2小时。反应结束，减压浓缩，二氯甲烷萃取，分离有机相，减压浓缩得到粗品，经Combi-flash柱层析纯化得到化合物X-f-2(1.2g)，纯度84％，MS m/z(ESI):207[M+H]+。
步骤b：向1,4-二氧六环(50ml)溶液中加入化合物X-f-2(1.2g，5.83mmol)，双(频哪醇合)二硼(1.63g，6.41mmol)，乙酸钾(1.71g，17.48mmol)，Pd(dppf)Cl2([1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯)(212mg，0.29mmol)，115℃微波搅拌过夜。反应结束。冷却至室温，过滤，加水和乙酸乙酯萃取，分离有机相，减压浓缩得到粗品，经Combi-flash柱层析纯化得到化合物X-f(100mg)，纯度82％，MS m/z(ESI):255[M+H]+。
实施例1 式X化合物的制备
步骤1:向吗啉(2.4g，27.5mmol)的5ml二氯甲烷溶液中，5～15℃逐滴加入化合物X-a(5.0g，27.5mmol)和三乙胺(3.0g，30mmol)的25ml二氯甲烷溶液，室温搅拌2小时。反应结束，二氯甲烷萃取，分离合并有机相，减压浓缩得到粗品，经Combi-flash柱层析纯化得到化合物X-b(1.4g)，纯度95％。MS m/z(ESI):234[M+H]+。
步骤2:化合物X-b(1.4g，6mmol)，2-(甲基磺酰基)乙酸甲酯(1.0g，6.6mmol)，钠氢(500mg，12mmol)，二甲基亚砜30毫升的混合物，加入密封管中，120℃微波搅拌15分钟。反应结束，冷却至室温，乙酸乙酯萃取，分离合并有机相，减压浓缩得到粗品，经Combi-flash柱层析纯化得到化合物X-c(500mg)，纯度95％。MS m/z(ESI):350[M+H]+。
步骤3:向甲醇/水(10ml/2.5ml)中加入化合物X-c(500mg，1.4mmol)，氢氧化钠(170mg，4.3mmol)，60℃搅拌1小时。反应结束，冷却至室温，乙酸乙酯萃取，水洗并分离有机相，减压浓缩得到粗品化合物X-d(500mg)，MS m/z(ESI):292[M+H]+。
步骤4:向化合物X-d(500mg，1.7mmol)的15ml二甲基甲酰胺溶液中加入1,2-二溴乙烷(1.3g，7mmol)，钠氢(300mg，7mmol)，室温搅拌1小时。反应结束，加入水，乙酸乙酯萃取，分离合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品化合物X-e(48mg)，MS m/z(ESI):318[M+H]+。
步骤5:化合物X-e(50mg，0.157mmol)，化合物X-f(120mg，0.47mmol)，Pd(dppf)Cl2([1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯)(11.52mg，0.016mmol)，碳酸钠(24mg，0.314mmol)，乙腈/水(5ml/1ml)的混合物加入密封管中，120℃微波搅拌10分钟。反应结束，冷却至室温，过滤，加水和乙酸乙酯萃取，分离有机相，无水硫酸钠干燥，分离有机相，减压浓缩得到粗品，经制备液相分离纯化得到化合物X(7.06mg)，纯度98.25％。MS m/z(ESI):410[M+H]+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),7.31(s,1H),6.58(s,1H),4.69(brs,2H),3.88–3.81(m,4H),3.80–3.76(m,4H),3.09(s,3H),1.86(q,J＝4.5Hz,2H),1.54–1.49(m,2H)。
实施例2 式X化合物游离碱晶型Ⅰ的制备
采用不同的溶剂体系设置5个缓慢挥发试验。分别称取约10mg的实施例1制备的式X化合物样品至玻璃小瓶中，分别加入适量的下表中的溶剂，得到近饱和溶液，经震荡后过滤后再向澄清溶剂中加入200uL相应溶剂，放置在室温下缓慢挥发。当溶剂完全挥发干后，收集所得固体并进行XRPD测试。试验结果下表所示，缓慢挥发试验中得到晶型Ⅰ。
溶剂 晶型 溶剂 晶型
甲醇 晶型Ⅰ 乙酸乙酯 晶型Ⅰ
乙腈 晶型Ⅰ 丙酮 晶型Ⅰ
四氢呋喃 晶型Ⅰ    
实施例3 式X化合物游离碱晶型Ⅰ的制备
采用不同的溶剂体系设置4个缓慢降温试验。分别称取约20mg的实施例1制备的式X化合物样品至玻璃小瓶中，在60℃水浴条件分别加入适量的下表中的溶剂，搅拌使其溶解得到近饱和溶液，过滤后向澄清溶液中再加入200uL相应溶剂，关闭加热按钮，使其缓慢降温，待降至室温后，置于冰浴条件下继续降温至4℃左右，收集混悬液于12000r/min条件下离心15min，倾倒上清液，将固体置于室温条件下缓慢挥发过夜，收集所得固体并进行XRPD测试，晶型I的X射线粉末衍射图谱基本如图22所表征，TGA/DSC谱图如图23A所表征。试验结果下表所示，缓慢挥发试验中得到晶型Ⅰ。
溶剂 晶型 溶剂 晶型
乙腈 晶型Ⅰ 甲基叔丁基醚 晶型Ⅰ
乙酸乙酯 晶型Ⅰ 异丙醇 晶型Ⅰ
实施例4 式X化合物游离碱晶型Ⅰ的制备
采用不同的溶剂体系设置6个25℃混悬震摇试验(悬浮搅拌)。分别称取约20mg的实施例1制备的式X化合物样品至5mL的EP管中，加入1mL下表中有机试剂，置于25℃，225r/min条件下15min，倾倒上清液，将固体置于室温条件下缓慢挥发过夜，收集所得固体并进行XRPD测试。试验结果如下表所示，25℃混悬震摇试验中得到晶型Ⅰ。
溶剂 震摇1天晶型 震摇7天晶型
甲醇 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
乙醇 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
乙腈 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
乙酸乙酯 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
甲基叔丁基醚 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
异丙醇 晶型Ⅰ 晶型Ⅰ
实施例5 式X化合物游离碱晶型Ⅱ的制备
采用不同的溶剂体系设置2个缓慢降温试验。分别称取约20mg的实施例1制备的式X化合物样品至玻璃小瓶中，在60℃水浴条件分别加入适量的下表中的溶剂，下搅拌使其溶解得到近饱和溶液，过滤后向澄清溶液中再加入200uL相应溶剂，关闭加热按钮，使其缓慢降温，待降至室温后，置于冰浴条件下继续降温至4℃左右，收集混悬液于12000r/min条件下离心15min，倾倒上清液，将固体置于室温条件下缓慢挥发过夜，收集所得固体并进行XRPD测试。试验结果下表所示，缓慢挥发试验中得到晶型Ⅱ。
溶剂 固体晶型 溶剂 固体晶型
甲醇 晶型Ⅱ 乙醇 晶型Ⅱ
实施例6 式X化合物游离碱晶型Ⅱ的制备
采用不同的溶剂体系设置6个50℃混悬震摇试验(悬浮搅拌)。分别称取约20mg的实施例2-4制备的晶型I和实施例5制备的晶型II的混合物至5mL的EP管中，加入1mL下表中有机试剂，置于50℃，225r/min条件下混悬震摇，1天后收集混悬液于12000r/min条件下离心15min，倾倒上清液，将固体置于室温条件下缓慢挥发过夜，收集所得固体并进行XRPD测试。晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图谱基本如图24所表征，TGA/DSC谱图如图25A所表征。试验结果如下表所示，混合物混悬震摇试验中得到晶型Ⅱ。
溶剂 晶型 溶剂 晶型
甲醇 晶型Ⅱ 乙腈 晶型Ⅱ
乙醇 晶型Ⅱ 乙酸乙酯 晶型Ⅱ
甲基叔丁基醚 晶型Ⅱ 异丙醇 晶型Ⅱ
实施例7 式X化合物晶型A的制备
称取200mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入3mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加盐酸溶液(1mol/L，536μL)，保温反应2h。2h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温2h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥过夜，即得固体产物，收率为64.3％。所得结晶的粉末X衍射图如图1所示(2θ角已标出)，HPLC如图2A中所示，TGA/DSC谱图如图2B所表征；酸碱摩尔比为1.05:1。在本申请中定义该晶型为晶型A。
实施例8 式X化合物晶型B-1的制备
称取200mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入3mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加硫酸溶液(0.5mol/L，536μL)，保温反应2h。2h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温2h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥过夜，即得固体产物，收率为84.8％。所得结晶的粉末X衍射图如图3所示(2θ角已标出)，HPLC如图4A中所示，TGA/DSC谱图如图4B所表征；酸碱摩尔比为0.47:1。在本申请中定义该晶型为晶型B-1。
实施例9 式X化合物晶型C的制备
称取200mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入3mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加马来酸溶液(1mol/L，536μL)，保温反应2h。2h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温2h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥过夜，即得固体产物，收率为89.6％。所得结晶的粉末X衍射图如图6所示(2θ角已标出)，结晶的HPLC如图7A中所示，TGA/DSC谱图如图7B所表征；晶型C的1HNMR谱如图7C所示，酸碱摩尔比为0.99:1，熔点为201.23℃-205.23℃。在本申请中定义该晶型为晶型C。
实施例10 式X化合物晶型D-2的制备
称取200mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入3mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加富马酸DMSO水溶液(0.25mol/L，2144μL)，其中溶液中DMSO与水体积比为1:1，保温反应2h。2h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温2h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥过夜，即得固体产物，收率为79.0％。所得结晶的粉末X衍射图如图9所示(2θ角已标出)，HPLC如图10A中所示，TGA/DSC谱图如图10B所表征；1HNMR谱如图10C所示，酸碱摩尔比为0.49:1，熔点为234.36℃-238.36℃。在本申请中定义该晶型为晶型D-2。
实施例11 式X化合物晶型E的制备
称取100mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入2mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加甲磺酸水溶液(1mol/L，268μL)，保温反应1h。1h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温1h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥4h，即得固体产物。所得结晶的粉末X衍射图如图11所示(2θ角已标出)，HPLC如图12A中所示，TGA/DSC谱图如图12B所表征；1HNMR谱如图12C所示，熔点为246.89℃-250.89℃。在本申请中定义该晶型为晶型E。
实施例12 式X化合物晶型F的制备
称取100mg游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入2mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加L-酒石酸水溶液(1mol/L，268μL)，保温反应1h。 1h后，缓慢降温至0℃，并在0℃恒温1h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥4h，即得固体产物。所得结晶的粉末X衍射图如图13所示(2θ角已标出)，HPLC如图14A中所示，TGA/DSC谱图如图14B所表征；1HNMR谱如图14C所示，熔点为195.84℃-199.84℃。在本申请中定义该晶型为晶型F。
实施例13 式X化合物盐的各类晶型的制备方法
称取800mg实施例1制备的式X化合物游离碱，加入16ml四氢呋喃，超声使溶解，配制成50mg/ml的溶液，取0.4ml加入到1.5ml样品瓶中，用氮吹仪吹干溶剂，按照酸和游离碱摩尔比1.2:1的比例加入相应的酸，后加入1ml相应溶剂，加热超声使澄清，50℃保温反应4h，后缓慢降温使析出固体，离心收集固体。澄清溶液通过反溶剂添加的方法诱导析晶。其中，富马酸溶液溶剂为DMSO与水(1:1，v/v)。各类酸相应的反应温度和时间以及各个盐的物理性质如下表所示：
N/A：未得到固体。
盐型 结晶度 失重(％) 吸热峰(℃) 酸碱摩尔比 纯度(％)
晶型A 较好 6.79 183.73 1.05 100
晶型B-1 较好 6.65 128.84 0.47 100
晶型C 较好 0.08 203.23 0.99 100
晶型D-2 较好 0.11 236.36 0.49 100
晶型E 较好 0.32 248.89 1 100
晶型F 较好 3.70 197.84 1 100
其中，晶型B-2的X射线粉末衍射图谱基本如图5所表征；晶型D-1的X射线粉末衍射图谱基本如图8所表征；晶型G-1的X射线粉末衍射图谱基本如图15所表征；晶型G-2的X射线粉末衍射图谱基本如图16所表征；晶型G-3的X射线粉末衍射图谱基本如图17所表征； 晶型H-1的X射线粉末衍射图谱基本如图18所表征；晶型H-2的X射线粉末衍射图谱基本如图19所表征；晶型H-3的X射线粉末衍射图谱基本如图20所表征；晶型J的X射线粉末衍射图谱基本如图21所表征。
实施例14 式X化合物各类盐的制备方法
称取100mg实施例1制备的式X化合物游离碱样品加至20mL玻璃样品瓶中，加入2mL丙酮，超声溶解，形成黄色透明溶液。50℃条件下，边搅拌边缓慢滴加相应量酸，保温反应1h。1h后，缓慢降温至0℃，当温度降至25℃时，澄清溶液变浑浊，并在0℃恒温1h。真空抽滤，分离出固体，并用丙酮洗涤3-5次，60℃真空干燥过夜，即得固体产物。反应原来的投料以及各个盐的物理性质如下表所示。
实施例15 固态稳定性实验
分别称取5mg样品在60℃条件下密闭放置，同时将另一组样品在-20℃条件下密封保存作为对照，于7天和21天用HPLC对所有样品进行表征，检测纯度的变化。结果下表所示。
数据表明晶型A、晶型B-1、晶型C和晶型D-2在7天和21天稳定性较好，主成分和杂质变化较小；晶型D-2总的杂质稍偏大。
实施例16 引湿性实验
晶型A和晶型B-1的DVS测试结果分别如图26和图27所示，在25℃当湿度降低到10％RH后，样品失重速率明显增加，因此晶型A、晶型B-1略有吸湿性。
晶型C、晶型D-2、晶型E和晶型F的DVS测试结果如图28、图29、图30、图31所示， 在25℃当湿度升高到80％RH后，晶型C、晶型D-2、晶型E和晶型F分别吸收了0.17％、0.14％、0.12％、0.26％的水分，表明晶型C、晶型D-2、晶型E和晶型F几乎没有吸湿性。
晶型I和晶型Ⅱ的DVS测试结果如图23B和图25B所示，在25℃条件下当湿度增加到90％RH时，晶型I吸收了0.084％的水分，表明该晶型几乎没有吸湿性。
实施例17 溶解度实验
室温下对下面四种盐及游离碱样品在0.1M HCl、pH4.5、pH6.8的缓冲液及水中的溶解度进行测试。试验中，分别绘制了游离碱与四种盐的标曲。随后，分别称取3mg的游离碱及四种盐固体样品，分别加入1ml的溶媒，超声30min后离心，取上清液，过膜进样，测定溶解度，结果如下表所示。
与游离碱相比，晶型A、晶型B-1、晶型C在水中的溶解度明显提高，而晶型D-2在水中的溶解度略有提高，四种晶型在其他三种溶媒中溶解性与游离碱类似。
实施例18 溶解度实验
测试室温下晶型I在11种常用溶剂中的溶解度。试验中，将晶型I按下表以50％乙腈为溶剂配制不同浓度标准溶液，进HPLC仪器，记录峰面积，绘制标准曲线，得到曲线方程：y＝11.30762x，R2＝0.99998，其在4.9μg/ml～499μg/ml范围内具有良好的线性相关性。称取10-80mg晶型I于下表中的不同溶液0.5-10ml中，配制成饱和溶液，超声3-5min。使其分散均匀后取出，在离心机12000rpm下离心5min，吸取上清液按一定倍数稀释用HPLC进样，记录峰面积，计算样品浓度，并测定未稀释样品的pH值。
晶型I标准曲线
样品浓度(μg/ml) 峰面积
4.99 54.3
49.9 583.5
499 5640.6
晶型I的溶解度
实施例19 药物组合物
由以下组分制备晶型C的片剂：
按常规方法，将晶型C、淀粉混合过筛，再与上述其它组分混合均匀，直接压片。
实施例20 药物组合物
由以下组分制备晶型D-2的片剂：
按常规方法，将晶型D-2、淀粉混合过筛，再与上述其它组分混合均匀，直接压片。
实施例21 药物组合物
由以下组分制备晶型I的胶囊：
按常规方法，将晶型I、淀粉混合过筛，再与上述其它组分混合均匀，装入普通明胶胶囊。
测试例1：对PI3K激酶活性的测定
测试试剂及测试方法步骤。
本实验使用的PI3K激酶：p110α/p85α(Invitrogen PV4788)，p110β/p85α(Millipore 14-603)，p110δ/p85α(Millipore 14-604M)，p110γ(Invitrogen PV4786)。ADP transcreener激酶(3010-10k)试剂盒购自Bellbrook labs。
通过下述方法测定待测化合物对PI3K激酶活性的抑制，25μL酶反应体系中各组分的工作浓度为：p110α/p85α3ng(或p110β/p85α60ng，或p110δ/p85α90ng，或p110γ100ng)，ATP 10μM，PIP2:PS(Invitrogen PV5100)30μM，加入待测化合物后DMSO终浓度2％。
测试时，待测化合物根据实验所需浓度溶解于二甲基亚砜，将待测化合物用10％DMSO进行3倍梯度稀释(0.00046～1μM，8个浓度点)，在96孔板(Greiner 675076)中每孔加入5μL待测化合物，双复孔。配制2.5×缓冲液，每800μL 2.5×缓冲液加1μL DTT(Millipore 20-265)。分别用2.5×缓冲液配制ATP/PIP2:PS酶/底物工作液和适当浓度的PI3K酶工作液。于96孔板中每孔分别加入10μL ATP/PIP2：PS、10μLPI3K酶工作液，震荡混匀后，于25℃孵育1小时。同时用缓冲液稀释ADP、ATP(0.01μM、0.02μM、0.04μM、0.06μM、0.08μM、0.1μM、0.25μM、0.5μM、1μM、2μM、5μM、10μM，12个浓度点)，设置标准曲线。酶反应结束后，加入25μL ADP检测溶液(1％100×ADP tracer，0.79％ADP抗体及10％10×反应终止液)，25℃孵育1小时后用Perkin Elmer Victor X5荧光酶标仪测定各孔荧光偏振值[mP]。根据测定的偏振值，从ADP/ATP标准曲线计算ADP浓度[ADP]，并用XLFit软件计算IC50值。测得的本发明化合物对PI3K激酶的抑制活性的IC50值见下表。
表1本发明化合物对PI3K激酶抑制活性IC50值
化合物编号 PI3K-α/nM PI3K-β/nM PI3K-γ/nM PI3K-δ/nM
式X化合物 4 28 114 84
对比化合物2 90 2161 ＞3000 2578
表2本发明化合物对PI3K-α激酶抑制活性IC50值
化合物编号 PI3K-α/nM 化合物编号 PI3K-α/nM
式X化合物 4 对比化合物3 >1000
由表1可知，式X化合物对PI3K激酶(ΡΙ3Κ-α、PI3K-β、PI3K-γ、PI3K-δ)均具有明显的抑制作用，并具有一定的ΡΙ3Κ-α选择抑制性。
由表2可知，式X化合物对ΡΙ3Κ-α激酶具有较强的抑制作用，研究表明将嘧啶环4位取代基换成苯基后，对ΡΙ3Κ-α激酶抑制作用明显降低。
此外，式X化合物对ΡΙ3Κ-α激酶的抑制活性相对于阳性化合物BKM-120(IC50＝57)，提高了约10倍。
测试例2：对PC-3细胞P-AKt磷酸化水平的抑制
本实验用细胞水平荧光图像处理方法检测。
一、试剂和溶液
Triton X-100：配制10％的Triton X-100(Sigma T8787-100mL)水溶液，储存于4℃。1:100稀释为0.1％Triton X-100水溶液用于实验。
碘化丙啶(Prodium Iodide，PI)：用PBS配制1mg/mL(1.5mM)PI(Sigma P4170)存储液，避光储存于-25℃。使用时，用PBS将PI存储液1:1000稀释至1.5μM，避光使用。
二、PC-3细胞
2.1：PC-3细胞处理
取对数生长期PC-3细胞，0.25％EDTA胰酶消化处理，以3000细胞/90μL铺种于96孔板中(BD 356692)，于37℃，5％CO2条件下培养，待细胞贴壁后，加入10μL3倍梯度稀释的待测化合物(0.0046～10μM，8个浓度点，双复孔)处理2小时，随后加入100μL 4％多聚甲醛(鼎国AR-0211)，室温孵育45分钟后取出，再加入100μL 0.1％Triton X-100溶液，继续孵育30分钟。
2.2：检测步骤
去除Triton X-100溶液，用200μL PBS清洗两次(300rpm震荡1分钟)，加入封闭液(1％BSA PBS溶液)(Genview FA016-100G)，室温孵育2小时后取出，PBS清洗一次(300rpm，1分钟)，加入30μL Ser473-p-Akt抗体(cell signaling 4060L)0.1％BSA稀释液，4℃孵育过夜。取出Ser473-p-Akt抗体，PBS清洗两次(300rpm，1分钟)，加入35μL Alexa Flour 488驴抗兔IgG(Invitrogen A21206)，室温孵育1.5小时。PBS清洗两次(300rpm，1分钟)，加入35μL 1.5μM PI，室温孵育0.5小时后，用Acumen eX3(TTP LabTech)检测各荧光强度。
2.3：数据分析
10μM BEZ235(Selleck S1009)处理组为阴性对照，DMSO处理组为阳性对照。
抑制率％＝[1-(待测化合物荧光强度平均值–阴性对照组的荧光强度平均值)/(阳性对照组的荧光强度平均值–阴性对照组的荧光强度平均值)]×100％
2.4：将计算得到的抑制率用XLFIT 5.0软件计算出IC50值，参见表3。
表3本发明化合物对PC-3细胞活性测定IC50值
由表3可知，式X化合物在PC-3细胞中对Akt磷酸化均具有较好的抑制活性。与阳性化合物BKM-120以及对比化合物1和2相比，式X化合物在PC-3细胞中对Akt磷酸化明显具有更强的抑制活性。
测试例4：MTT方法检测细胞抑制活性
MTT测试方法步骤采用本领域技术人员熟知的方法进行，方法中所用试剂均可市购得到。
取对数生长期细胞，用0.25％EDTA胰酶(Gibco，25200-056)消化处理后，重悬于新鲜培养基。以适当的细胞密度，取90μL细胞悬液接种于96孔细胞培养板(BD Faclon 353072)中，于37℃5％CO2条件下培养。待细胞贴壁后，加入10μL不同浓度(0.0046～10μM，8个浓度点)的测试化合物，继续培养72h后，加入10μLMTT(5mg/mL PBS溶液)(Sigma，M5655)反应4h，在Thermo Scientific Multiskan MK3酶标仪上，于492nm波长下检测其吸光度。使用XLFIT 5.0软件(英国IDBS公司)计算IC50。
T47D细胞培养基为：RPMI-1640培养基(Hyclone SH30809.01B)+10％FBS(Gibco 10099-141)
MCF-7细胞培养基为：DMEM培养基(Hyclone SH30243.01B+10％FBS(Gibco 10099-141)
NIH3T3细胞培养基为：DMEM培养基(Hyclone SH30243.01B+10％FBS(Gibco 10099-141)
表4本发明化合物对T47D细胞生长抑制的IC50值
表5本发明化合物对MCF-7细胞生长抑制的IC50值
由表4、表5可知，式X化合物对乳腺癌细胞株T47D和MCF-7均有明显的增殖抑制活性。与对比化合物1和2相比，式X化合物对以上两种细胞株的增殖抑制活性明显更强。
研究表明，吗啉环在嘧啶环上的取代位置对细胞株的抑制活性影响很大，吗啉环在4或6位取代时，其对细胞株的抑制活性比在2-位取代时有明显的降低。
测试例5：代谢稳定性测试
1.缓冲液的配制
缓冲液A：配制1L含有1mM EDTA(Sigma，V900157-100G)，100mM的磷酸二氢钾溶液。缓冲液B：配制1L含有1mM EDTA，100mM的磷酸氢二钾溶液。缓冲液C：取700mL缓冲液B,用缓冲液A滴定，调至PH为7.4即可。
2.待测化合物和阳性对照药(酮色林(Sigma S006-10MG))的配制
2.1取10mM待测化合物和10mM酮色林各10uL，再各加190uL的纯乙腈，分别配成500uM待测化合物和酮色林溶液。
2.2取20uL(20mg/mL)肝微粒体(XENOTECH，H0610)储存液加入到513.4uL的缓冲液 C，在湿冰上操作。配制得到0.75mg/mL肝微粒体溶液。
2.3各取1.5uL上述待测化合物和酮色林溶液，分别加入到498.5uL(0.75mg/mL)的肝微粒体溶液中，在湿冰上操作。配制得到1.5uM待测化合物混合液和酮色林混合液。
2.4按照时间点0、5、15、30、45、60min，每孔30uL，分别将待测化合物混合液和酮色林混合液分装到反应板上，在湿冰上操作。
2.5称取5mg还原型辅酶Ⅱ(Roche，10621706001)，溶于1mL缓冲液C中。配制成6mM还原型辅酶Ⅱ溶液。将还原型辅酶Ⅱ溶液分装到反应板中。
2.6将丙米嗪溶成10mM的溶液，取100mL空白乙腈，加入10uL丙米嗪溶液。配成内标。
2.7在0min，每孔加入135uL含有内标的冰乙腈(Merck，UN1648)，再加入15uL缓冲液C。
2.8将反应板放入37度水浴恒温箱内预热5min。在反应板中，每孔加15uL还原型辅酶Ⅱ溶液开始反应并计时。在5、15、30、45、60min时间点，每孔加入135uL含有内标的冰乙腈终止反应。
2.9将反应板用铝膜封好，放在震荡混合器上，500rpm，5min。再将反应板放在离心机中离心，15min，3750rp。
2.10取样品和纯水按照1:1比例稀释，LC/MS检测。将得到的数值按照以下公式计算得到如表7所示的清除率。
半衰期：0.693/K(孵化时间与浓度对数值作图出来的斜率)
清除率：(0.693/半衰期)*(1/蛋白质浓度(0.5mg\mL))*(比例因子)
其中K值和比例因子为本领域技术人员根据现有方法以及肝微粒体产品说明书记载的方法计算得到的。
表7小鼠肝微粒体代谢实验的清除率
从表7可以看出，与阳性化合物BKM-120相比，式X化合物其代谢稳定性得到了改善。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

  1. 一种结构如式X所示的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物:
  2. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、L-乳酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、L-苹果酸盐、己二酸盐、L-酒石酸盐、马尿酸盐、柠檬酸盐、粘酸盐、乙醇酸盐、D-葡萄糖醛酸盐、苯甲酸盐、龙胆酸盐、烟酸盐、乙二磺酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐和氢溴酸盐。
  3. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物为无水形式、水合物形式或溶剂合物形式。
  4. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，所述的多晶型物为式X化合物的多晶型物或式X化合物药学上可接受的盐的多晶型物，且所述的药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐。
  5. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，所述的多晶型物选自下组：
    (1)式X化合物盐酸盐的A型结晶，即晶型A，其X射线粉末衍射图包含下组A1的衍射角2θ(°)值：5.57±0.10、8.87±0.10、20.77±0.10、22.09±0.10、24.15±0.10、28.27±0.10；
    (2)式X化合物硫酸盐的B-1型结晶，即晶型B-1，其X射线粉末衍射图包含下组B1的衍射角2θ(°)值：9.83±0.10、18.51±0.10、21.11±0.10、21.75±0.10、27.29±0.10；
    (3)式X化合物硫酸盐的B-2型结晶，即晶型B-2，其X射线粉末衍射图包含下组B1,的衍射角2θ(°)值：16.42±0.10、20.17±0.10、22.25±0.10、23.00±0.10、23.97±0.10、25.30±0.10、27.98±0.10；
    (4)式X化合物马来酸盐的C型结晶，即晶型C，其X射线粉末衍射图包含下组C1的衍射角2θ(°)值：8.35±0.10、8.92±0.10、16.91±0.10、20.35±0.10、21.40±0.10、23.70±0.10、24.98±0.10、25.47±0.10；
    (5)式X化合物富马酸盐的D-1型结晶，即晶型D-1，其X射线粉末衍射图包含下 组D1的衍射角2θ(°)值：9.07±0.10、12.48±0.10、16.85±0.10、18.93±0.10、20.07±0.10、21.21±0.10、22.96±0.10、25.56±0.10、27.50±0.10、30.72±0.10、31.45±0.10、32.69±0.10；
    (6)式X化合物富马酸盐的D-2型结晶，即晶型D-2，其X射线粉末衍射图包含下组D1,的衍射角2θ(°)值：14.76±0.10、19.74±0.10、26.69±0.10；
    (7)式X化合物甲磺酸盐的E型结晶，即晶型E，其X射线粉末衍射图包含下组E1的衍射角2θ(°)值：7.92±0.10、16.07±0.10、18.74±0.10、20.25±0.10、20.61±0.10、22.08±0.10、24.30±0.10、31.04±0.10；
    (8)式X化合物的L-酒石酸盐F晶型，即晶型F，其X射线粉末衍射图包含下组F1的衍射角2θ(°)值：11.22±0.10、19.80±0.10、20.35±0.10、20.66±0.10、23.44±0.10；
    (9)式X化合物的磷酸盐G-1型结晶，即晶型G-1，其X射线粉末衍射图包含下组G1的衍射角2θ(°)值：9.43±0.10、17.30±0.10、18.82±0.10、19.41±0.10、20.91±0.10、22.40±0.10、27.44±0.10、29.43±0.10；
    (10)式X化合物的磷酸盐G-2型结晶，即晶型G-2，其X射线粉末衍射图包含下组G1,的衍射角2θ(°)值：19.26±0.10、21.00±0.10、24.15±0.10；
    (11)式X化合物的磷酸盐G-3型结晶，即晶型G-3，其X射线粉末衍射图包含下组G1”的衍射角2θ(°)值：15.11±0.10、16.16±0.10、18.84±0.10、19.90±0.10、21.32±0.10、23.40±0.10、24.21±0.10、24.75±0.10、26.16±0.10、30.55±0.10；
    (12)式X化合物的柠檬酸盐H-1型结晶，即晶型H-1，其X射线粉末衍射图包含下组H1的衍射角2θ(°)值：14.01±0.10、21.04±0.10、28.26±0.10、35.54±0.10；
    (13)式X化合物的柠檬酸盐H-2型结晶，即晶型H-2，其X射线粉末衍射图包含下组H1,的衍射角2θ(°)值：17.75±0.10、20.15±0.10、22.25±0.10、26.28±0.10、30.04±0.10；
    (14)式X化合物的柠檬酸盐H-3型结晶，即晶型H-3，其X射线粉末衍射图包含下组H1”的衍射角2θ(°)值：15.62±0.10、19.67±0.10、20.01±0.10、23.01±0.10、26.82±0.10、27.65±0.10；
    (15)式X化合物的氢溴酸盐J型结晶，即晶型J，其X射线粉末衍射图包含下组J1的衍射角2θ(°)值：20.71±0.10、22.07±0.10、22.84±0.10、24.13±0.10、25.00±0.10、26.85±0.10、28.26±0.10、31.38±0.10。
  6. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，所述的多晶型物选自下组：
    (16)式X化合物游离碱的I型结晶，即晶型I，其X射线粉末衍射图包含下组I1的衍射角2θ(°)值：12.37±0.10、14.99±0.10、16.11±0.10、21.03±0.10、22.65±0.10、24.30±0.10；
    (17)式X化合物游离碱的Ⅱ型结晶，即晶型Ⅱ，其X射线粉末衍射图包含下组Ⅱ1的衍射角2θ(°)值：15.34±0.10、16.57±0.10、16.86±0.10、17.33±0.10、22.68±0.10、24.36±0.10、24.95±0.10、25.51±0.10、26.53±0.10。
  7. 如权利要求5或6所述的化合物或其药学上可接受的盐、或其多晶型物，其特征在于，
    所述晶型A的X射线粉末衍射图谱基本如图1所表征；
    所述晶型B-1的X射线粉末衍射图谱基本如图3所表征；
    所述晶型B-2的X射线粉末衍射图谱基本如图5所表征；
    所述晶型C的X射线粉末衍射图谱基本如图6所表征；
    所述晶型D-1的X射线粉末衍射图谱基本如图8所表征；
    所述晶型D-2的X射线粉末衍射图谱基本如图9所表征；
    所述晶型E的X射线粉末衍射图谱基本如图11所表征；
    所述晶型F的X射线粉末衍射图谱基本如图13所表征；
    所述晶型G-1的X射线粉末衍射图谱基本如图15所表征；
    所述晶型G-2的X射线粉末衍射图谱基本如图16所表征；
    所述晶型G-3的X射线粉末衍射图谱基本如图17所表征；
    所述晶型H-1的X射线粉末衍射图谱基本如图18所表征；
    所述晶型H-2的X射线粉末衍射图谱基本如图19所表征；
    所述晶型H-3的X射线粉末衍射图谱基本如图20所表征；
    所述晶型J的X射线粉末衍射图谱基本如图21所表征；
    所述晶型I的X射线粉末衍射图谱基本如图22所表征；和/或
    所述晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图谱基本如图24所表征。
  8. 一种制备权利要求1所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物的方法，其特征在于，包括步骤：
    (1)在惰性溶剂中，将化合物X-e与化合物X-f进行反应，从而形成式X化合物；
    (2)任选地将式X化合物与酸进行成盐反应，从而形成式X化合物药学上可接受的盐；和
    (3)任选地将步骤(1)所形成的式X化合物或步骤(2)所形成的式X化合物药学上可接受的盐进行结晶处理，从而获得式X化合物的多晶型物或式X化合物药学上可接受的 盐的多晶型物。
  9. 一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括：(a)权利要求1-7中任一所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物；以及(b)药学可接受的载体。
  10. 权利要求1-7中任一所述的式X化合物或其药学上可接受盐、或其多晶型物，或权利要求9所述药物组合物的用途，其特征在于，用于制备治疗蛋白酪氨酸激酶介导的疾病的药物。
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