CN108379247B - 硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 - Google Patents
硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108379247B CN108379247B CN201810190459.0A CN201810190459A CN108379247B CN 108379247 B CN108379247 B CN 108379247B CN 201810190459 A CN201810190459 A CN 201810190459A CN 108379247 B CN108379247 B CN 108379247B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pag
- hydrogen sulfide
- cse
- inhibitor
- ems
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 33
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 title claims abstract description 26
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title abstract description 10
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 title abstract description 4
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 title abstract description 4
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 108010045283 Cystathionine gamma-lyase Proteins 0.000 claims description 38
- NQRKYASMKDDGHT-UHFFFAOYSA-N (aminooxy)acetic acid Chemical compound NOCC(O)=O NQRKYASMKDDGHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- DGYHPLMPMRKMPD-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumylpent-4-ynoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC#C DGYHPLMPMRKMPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 102000020018 Cystathionine gamma-Lyase Human genes 0.000 claims 4
- DGYHPLMPMRKMPD-BYPYZUCNSA-N L-propargylglycine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC#C DGYHPLMPMRKMPD-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 3
- KBXIJIPYZKPDRU-UHFFFAOYSA-N (aminooxy)acetic acid hemihydrochloride Chemical compound Cl.NOCC(O)=O.NOCC(O)=O KBXIJIPYZKPDRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 abstract description 29
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 abstract description 17
- HYHCSLBZRBJJCH-UHFFFAOYSA-M sodium hydrosulfide Chemical compound [Na+].[SH-] HYHCSLBZRBJJCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 8
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 5
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 abstract description 4
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 25
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 7
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 210000002304 esc Anatomy 0.000 description 5
- 210000001703 glandular epithelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 201000002595 endometriosis of ovary Diseases 0.000 description 4
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 208000030747 ovarian endometriosis Diseases 0.000 description 4
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 3
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 3
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 2
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 2
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 2
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 208000020053 Abnormal inflammatory response Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000000450 Pelvic Pain Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000012308 immunohistochemistry method Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
Abstract
本发明属医药技术领域，涉及硫化氢合成酶抑制剂PAG在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。本发明通过实验研究评估硫化氢合成酶抑制剂PAG在治疗EMS中的潜在价值，结果显示EMS患者异位内膜中硫化氢合成酶CSE的表达水平高于正常内膜，提示硫化氢参与内异症的疾病进展过程；硫氢化钠明显促进子宫内膜间质细胞(ESC)增殖，而硫化氢合成酶抑制剂PAG显著抑制异位灶的生长。上述结果表明：硫化氢合成酶抑制剂PAG可用于制备治疗子宫内膜异位症的药物。本发明提供硫化氢合成酶抑制剂PAG新的制药用途，为EMS的临床治疗提供新方法和新思路。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域，涉及硫化氢合成酶抑制剂PAG在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。经体外实验和体内动物试验显示，硫化氢供体硫氢化钠明显促进子宫内膜间质细胞(ESC)生长，而硫化氢合成酶抑制剂PAG显著抑制异位灶的生长，PAG可用于制备治疗子宫内膜异位症的药物。
背景技术
现有研究表明子宫内膜异位症(简称内异症，Endometriosis，EMS)一种复杂的炎症性雌激素依赖生长为特征的常见的慢性疾病，特征是子宫内膜在子宫腔以外的部位生长，影响6-10％的育龄妇女，症状包括慢性盆腔疼痛、痛经和不孕，严重影响女性的生活质量。起源于随经血逆流入腹腔的类固醇激素敏感的内膜细胞或组织，种植于腹膜表面形成子宫内膜异位症的异位病灶(简称异位灶)，进而引起炎症反应。而患有内异症的女性，可能存在着免疫应答及炎症反应的异常，干扰了机体损伤的清除。这些炎症应答常常伴随着血管生成，细胞粘附，纤维化，疤痕形成，神经元的浸润以及解剖学上的变异，从而导致疼痛和不孕。影响6％～15％的育龄女性，给患者带来高昂的医疗费用、极大心理负担。由于其发病机理不明确，目前大多数内异症病人并没有得到满意的治疗。多项研究表明子宫内膜异位症的发生及发展受遗传、生化、环境、免疫功能障碍等多因素影响。深入探究内异症的发病机制，有助于我们对内异症疾病。虽然子宫内膜异位症是一种良性疾病，但同时也表现出恶性肿瘤的特点，如对周围组织的侵袭，转移到远处和治疗后易复发等。深入探究内异症的发病机制，有助于我们对内异症疾病。
目前就子宫内膜异位症的发病机制理论众多，其中经血逆流种植学说被广泛接受，这一理论认为有活力的子宫内膜组织在月经期间通过输卵管进入腹膜腔随后植入腹膜组织或盆腔器官。然而，有76-90％的女性存在经血逆流现象，只有6-10％的妇女患子宫内膜异位症。起源于随经血逆流入腹腔的类固醇激素敏感的内膜细胞或组织，种植于腹膜表面进而引起炎症反应。而患有内异症的女性，可能存在着免疫应答及炎症反应的异常，干扰了机体损伤的清除。这些炎症应答常常伴随着血管生成，细胞粘附，纤维化，疤痕形成，神经元的浸润以及解剖学上的变异，从而导致疼痛和不孕。这说明了异常的炎症反应在内异症形成过程中起到了非常关键的作用。H2S是哺乳动物中重要的细胞生物学相关信号分子，其作为一种气体介质，和NO、CO气体类似，在细胞信号传导中扮演着重要的角色因此具有非常重要的调节细胞的功能，参与了多种细胞的炎症反应。最近的研究表明，H2S参与调节多种细胞的炎症反应，其促进炎症以及抑制炎症的效应都有被报道。这种可变的双面调节作用可能是剂量依赖导致的。在生理低剂量情况下，主要起到抗炎作用，而当达到病理高剂量时，其主要表现为促炎作用。这在之前已明确的NO和CO模式相同。CSE及CBS的表达变化调节着体内内源性H2S的水平，从而介导细胞炎症反应，动脉粥样硬化、糖尿病等疾病的形成。研究积累的证据表明，子宫内膜细胞或组织随经血逆流，种植于腹膜表面引起炎症反应，进而引发一系列病理生理反应最终形成内异症病灶。新近发现的气体介质，介导多种细胞炎症反应，并与肿瘤转移有关。这意味着硫化氢在内异症发生发展中可能起到重要作用。
基于现有技术的现状，本发明拟通过实验研究评估硫化氢合成酶抑制剂CSE抑制剂PAG在治疗EMS中的潜在价值，提供CSE抑制剂PAG用于制备治疗子宫内膜异位症(内异症)药物组合物中的用途，为EMS的临床治疗提供新方法和新思路。
发明内容
本发明的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供硫化氢合成酶抑制剂PAG新的制药用途，具体涉及硫化氢合成酶抑制剂PAG在制备治疗子宫内膜异位症(内异症)的药物中的应用。
本发明的第二个目的是针对现有技术中的不足，提供一种治疗子宫内膜异位症的药物组合物。
为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：
硫化氢合成酶抑制剂PAG在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。所述硫化氢合成酶抑制剂PAG抑制子宫内膜异位症异位灶的生长。
实验结果显示，EMS患者异位内膜中硫化氢合成酶CSE的表达水平高于正常内膜，提示硫化氢可能参与内异症的疾病进展过程。体外实验和体内动物试验结果显示：硫氢化钠明显促进子宫内膜间质细胞(ESC)增殖，而硫化氢合成酶抑制剂PAG显著抑制异位灶的生长，PAG可用于制备治疗子宫内膜异位症的药物。
具体地，本发明提供如下技术方案：收集正常子宫内膜组织及EMS患者异位病灶组织，做成石蜡切片，通过免疫组化法检测CBS及CSE表达水平，同时分离正常子宫内膜组织及EMS患者异位病灶ESC结果通过免疫细胞化学法检测CBS及CSE表达水平,如图1-2所示。结果如下：CBS和CSE均表达于胞浆，腺上皮细胞表达水平高于基质细胞；在组织水平、细胞水平，较正常子宫内膜相比，内异症异位病灶硫化氢合成酶CBS和CSE的表达均增加。
体外试验显示，NaHS(300μmol/ml，Sigma公司)明显促进ESC的增殖(如图3所示)，进一步，构建EMS小鼠模型(如图4所示)，腹腔注射AOAA(AOAA 30mg/kg/d，Sigma公司)和或PAG(50mg/kg/d，Sigma公司)。结果显示，与对照组比较，硫化氢合成酶CBS抑制剂AOAA组和CSE抑制剂PAG组及联合应用组内异症病灶的重量及数量均明显减少(图5、图6)；同时予动物模型AOAA和PAG组内异症模型，较PAG组及AOAA组相比，病灶质量及数量无显著差异。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
CBS抑制剂AOAA和CSE抑制剂PAG联合在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用。
作为本发明的一个优选实施方案，所述药物可以单独使用或者以药物组合物的形式使用，所述药物组合物包含治疗有效量的CBS抑制剂AOAA、CSE抑制剂PAG，以及药学上可接受的载体。
所述药学上可接受的载体包括：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、稀释剂等。药物制剂与给药方式相匹配，例如，本发明的硫化氢合成酶抑制剂PAG可以以注射剂的形式使用，注射剂采用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。
所述治疗有效量，是指PAG施加量足以达到治疗预期目的量，其根据治疗前所期望的治疗效果实现。治疗有效量的确定是本领域技术人员的常规技术手段，有效量取决于多种因素，例如接受治疗个体的体型和/或个体所患疾病或不希望有的病症的发展程度。有效量也取决于药效化合物是否以单一剂量及用药频率。
本发明提供了硫化氢合成酶抑制剂CSE抑制剂PAG用于制备治疗EMS药物的用途；尤其是经体外实验和动物实验证实，应用硫化氢合成酶抑制剂CBS抑制剂AOAA及CSE抑制剂PAG均显著抑制ESC生长和侵袭及其异位灶大小。进一步，所述的硫化氢合成酶抑制剂CBS抑制剂AOAA及CSE抑制剂PAG可用于制备治疗子宫内膜异位症(内异症)药物组合物。
附图说明
附图1为CSE在正常子宫内膜组织和卵巢子宫内膜异位组织的表达。图1a正常内膜组织阴性对照；图1c正常内膜组织CSE的表达；图1e正常内膜组织Vimentin的表达；图1b卵巢内异症组织阴性对照；图1d卵巢内异症组织CSE的表达；图1f卵巢内异症组织Vimentin的表达；其中：红色箭头表示CSE在卵巢内异症组织及正常内膜腺上皮细胞的表达；黑色箭头表示CSE在卵巢内异症组织及正常内膜基质细胞的表达；放大倍数×400。
附图2为CSE在正常子宫内膜和卵巢子宫内膜异位基质细胞的表达。图2a正常子宫内膜基质细胞阴性对照；图2c正常子宫内膜基质细胞CSE的表达；图2e正常子宫内膜基质细胞Vimentin的表达；图2b异位内膜基质细胞阴性对照；图2d卵巢内异症基质细胞CSE的表达；图2f异位内膜基质细胞Vimentin的表达；其中：红色箭头表示CSE在正常内膜间质细胞的表达；黑箭头表示CSE在异位内膜基质细胞的表达；放大倍数×400。
图3为NaHS促进子宫内膜间质细胞的增殖。细胞增殖通过CCK8法检测在450nm处的OD值。子宫内膜基质细胞用不同浓度的NaHS(50,100,150,200,300,500,1000uM/L)处理24h。图表用the mean±SEM表示。与对照组相比，*p<0.05,**p<0.01。纵坐标为细胞增殖活力能力：处理组/对照组；CON代表对照组；硫氢化钠代表H2S供体。
图4为小鼠内异症模型病灶展示图。图中黑色箭头指示为内异症病灶。
图5为不同处理组内异症动物模型内异症病灶。
图6为不同处理组动物模型内异症病灶重量及数量统计数据。与NaCl组相较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，**表示P＜0.001；与PAG相较，#表示P＜0.05。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1分析正常子宫内膜及EMS患者异位病灶组织CBS及CSE表达水平
收集正常子宫内膜组织及EMS患者异位病灶组织，做成石蜡切片，通过免疫组化法检测CBS及CSE表达水平。结果显示，正常内膜的基质细胞和腺上皮细胞均未见明显的CBS表达；而在卵巢子宫内膜异位组织中，基质细胞和腺上皮细胞均有CBS的较高表达。正常内膜和卵巢子宫内膜异位组织的基质细胞和腺上皮细胞均有CSE的表达；而在卵巢子宫内膜异位组织中，基质细胞和腺上皮细胞CSE表达水平较高(图1)。
实施例2分析正常子宫内膜基质细胞及异位内膜基质细胞CBS及CSE表达水平
收集对照内膜组织、EMS患者异位灶内膜组织，通过IV胶原酶(Sigma)消化并原代分离培养ESC，然后将细胞悬液种在盛有载玻片的六孔板，待细胞长至约70％，予4％多聚甲醛固定后，lX-triton100、3％过氧化氢处理，封闭、抗体孵育、染色。结果显示，正常内膜的基质细胞及卵巢子宫内膜异位症基质细胞CBS均有表达，卵巢子宫内膜异位症基质细胞CBS的表达较正常内膜基质细胞表达高。正常内膜的基质细胞及卵巢子宫内膜异位症基质细胞CSE均有表达，卵巢子宫内膜异位症基质细胞CSE的表达较正常内膜基质细胞表达高(图2)。
实施例3分析NaHS对ESC增殖的促进作用
分离培养ESC，然后用NaHS刺激24小时，CCK8(东仁化学公司)法检测ESC的细胞增殖活力(如图3所示)。结果显示，NaHS能够在一定范围内促进正常子宫内膜基质细胞的增殖。
实施例4应用硫化氢合成酶抑制剂CBS抑制剂AOAA及CSE抑制剂PAG显著抑制EMS小鼠异位灶生长动物实验
(1)构建EMS小鼠模型：健康7周龄雌性C57B/L6小鼠(上海斯莱克实验动物有限公司)，术前一周用雌激素肌肉注射诱导2次(第一天、第三天)，然后麻醉下开腹取自体双侧子宫，剪成子宫内膜碎片，均分为2份，腹腔注射于2只受体小鼠，术后14天常规处理小鼠，显示EMS小鼠模型建立成功(如图4所示)。
(2)EMS小鼠建模后4天，实验组分别予以抑制剂CBS抑制剂AOAA、CSE抑制剂PAG、或两药联合应用(药物浓度：AOAA组：AOAA 30mg/kg/d；PAG组：PAG 50mg/kg/d；PAG+AOAA组：PAG 50mg/kg/d,AOAA20mg/kg/d；)，造模成功术后第四天、第六天、第八天、第十天、第十二天分别给药，均为腹腔注射，共计5次；对照组给予溶媒(生理盐水)处理；同样建模后14天常规处理小鼠，取异位灶。结果显示，较对照组相比，硫化氢合成酶CBS抑制剂AOAA组、CSE抑制剂PAG组及联合应用组内异症病灶的重量及数量均明显减少(图5、图6)；同时予动物模型AOAA和PAG组内异症模型，较PAG组及AOAA组相比，病灶质量及数量无显著差异。
本发明经体外和体内试验结果证实，硫化氢供体硫氢化钠明显促进子宫内膜间质细胞(ESC)生长，而硫化氢合成酶抑制剂PAG显著抑制异位灶的生长，因此PAG可用于制备治疗子宫内膜异位症的药物。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.硫化氢合成酶抑制剂D,L-炔丙基甘氨酸（PAG）在制备抑制子宫内膜异位症子宫内膜异位病灶的生长的药物中的应用。
2.胱硫醚-β-合成酶（CBS）抑制剂O-(羧甲基)羟胺半盐酸盐（AOAA）和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制剂D,L-炔丙基甘氨酸（PAG）联合在制备抑制子宫内膜异位症子宫内膜异位病灶的生长的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物可以单独使用或者以药物组合物的形式使用，所述药物组合物包含治疗有效量的胱硫醚-β-合成酶（CBS）抑制剂O-(羧甲基)羟胺半盐酸盐（AOAA）、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制剂D,L-炔丙基甘氨酸（PAG），以及药学上可接受的载体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810190459.0A CN108379247B (zh) | 2018-03-08 | 2018-03-08 | 硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810190459.0A CN108379247B (zh) | 2018-03-08 | 2018-03-08 | 硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108379247A CN108379247A (zh) | 2018-08-10 |
| CN108379247B true CN108379247B (zh) | 2020-11-24 |
Family
ID=63066998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810190459.0A Active CN108379247B (zh) | 2018-03-08 | 2018-03-08 | 硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108379247B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112717380B (zh) * | 2019-03-19 | 2023-04-07 | Oppo广东移动通信有限公司 | 网络检测方法及相关装置 |
| CN112826927A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-05-25 | 南京医科大学 | 硫化氢合成酶cse的制药用途 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107281175A (zh) * | 2016-04-01 | 2017-10-24 | 复旦大学附属妇产科医院 | 硫化氢供体炔丙基半胱氨酸在制药中的用途 |
| CN107281215A (zh) * | 2016-04-01 | 2017-10-24 | 复旦大学附属妇产科医院 | 硫化氢供体硫氢化钠在制药中的用途 |
-
2018
- 2018-03-08 CN CN201810190459.0A patent/CN108379247B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108379247A (zh) | 2018-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110731955B (zh) | 衣康酸二甲酯在预防和治疗溃疡性结肠炎及其癌变中的应用 | |
| JP3951270B2 (ja) | 前立腺間質肥大モデル動物 | |
| EA016653B1 (ru) | Способы и композиции для ингибирования ангиогенеза | |
| CN108379247B (zh) | 硫化氢合成酶抑制剂pag在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 | |
| JP2022095884A (ja) | 単離ミトコンドリアを含む関節リウマチの予防または治療のための医薬組成物 | |
| TW200304829A (en) | Pharmaceutical composition comprising a C1C-2 channel opener | |
| Marsh et al. | Cyclophosphamide necrosis of bladder causing calcification, contracture and reflux; treated by colocystoplasty | |
| CN108403675B (zh) | 硫化氢合成酶抑制剂aoaa在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 | |
| WO2018099363A1 (zh) | 含胰岛素样生长因子-2的药物组合物及其应用 | |
| KR101617912B1 (ko) | 말초혈액 단핵세포를 유효성분으로 포함하는 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 | |
| Frontz et al. | Priapism of Unusual Etiology. Case Report | |
| CN113995753A (zh) | 一种中药分子槐果碱在制备治疗胶质母细胞瘤药物上的应用 | |
| CN114225011A (zh) | 一种用于预防和治疗gsm的复合制剂及其应用 | |
| CN114010764A (zh) | IL-1β赋能的MSC在制备治疗和/或预防CP/CPPS的药物中的应用 | |
| CROUGHS et al. | ACTH and calcitonin secreting medullary carcinoma of the thyroid | |
| CN113181155A (zh) | 内源性硫化氢供体在制备治疗类风湿性关节炎药物中的用途 | |
| JP2002500170A (ja) | サーラム（ｔｈｉｒａｍ）で構成される医薬品組成物 | |
| CN112076216A (zh) | 三氧化二砷在治疗胃肠道间质瘤中的应用 | |
| CN114712379B (zh) | 黄芪甲苷iv在制备预防和治疗腹膜透析肠道并发症药物中的应用 | |
| WO2021134935A1 (zh) | 大麻二酚在制备促进口腔黏膜愈合的药物中的应用 | |
| CN113577063B (zh) | 一种化合物在制备治疗炎性肠病的药物中的用途 | |
| CN116098884B (zh) | 一种n-乙酰-l-酪氨酸在制备治疗炎症性肠病药物中的应用 | |
| CN110403925B (zh) | 化学小分子4-氨基联苯在防治骨关节炎的应用 | |
| EP4349349A1 (en) | Fibroblast-containing pharmaceutical composition for treating kidney disease | |
| CN112656790B (zh) | 谷氨酰胺酶抑制剂bptes在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |