CN108374034A - 一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，包括以下步骤：S1.将蒜渣与纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47～55℃条件下调节蒜渣料液的pH为8.0～8.5，加入复合蛋白酶酶解后灭酶处理得到蒜渣酶解产物，固液分离得到第一固体产物和第一液体产物；S2.向第一液体产物中加入絮凝剂并分离得到第二液体产物，第二液体产物经有机膜分离得到透过液和截留液，截留液干燥得到大蒜多糖；S3.透过液经脱色处理得到精制液，精制液浓缩、干燥后得到大蒜低聚肽；S4.第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。本发明采用集成提取的工艺，一次投料即可提取蒜渣中的大蒜多糖、大蒜低聚肽和无臭蒜粉，工艺简单，经济环保，实现了蒜渣的充分利用。

Description

一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法
技术领域
本发明涉及生物化学集成提取领域，更具体地，涉及一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法。
背景技术
大蒜是我国传统的食用植物，富含各种营养成分，此外，现代医学研究表明大蒜还具有多种药理作用，例如抑菌、杀菌、杀病毒、预防铅中毒、调节血脂、抗凝、预防动脉硬化和脑梗死、保护肝脏，防治肝炎、抑制肿瘤、降血糖、提高机体对葡萄糖的耐受量等。因其具有极高的医用及食用价值，被广泛应用于药品、食品、化妆品及保健品等行业。
目前大蒜集成提取的技术鲜见报道，并且提取大蒜精油产生的大蒜渣大部分被废弃，其中仍含有大量的活性成分未被利用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，通过对生产大蒜油后蒜渣的集成加工，充分提取蒜渣中的生物活性成分，避免资源浪费。
为实现上述目的，本发明提供了一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，包括以下步骤：
S1.将蒜渣与纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47～55℃条件下调节所述蒜渣料液的pH为8.0～8.5，并加入复合蛋白酶酶解4～6h，灭酶处理得到蒜渣酶解产物，将所述蒜渣酶解产物固液分离得到第一固体产物和第一液体产物；
S2.向所述第一液体产物中加入絮凝剂处理后进行固液分离得到第二液体产物，所述第二液体产物经有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液干燥得到大蒜多糖；
S3.所述透过液经脱色处理得到精制液，所述精制液浓缩、干燥后得到大蒜低聚肽
S4.所述第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
本发明提供的集成提取方法具有如下所述的优点：
(1)采用集成提取的工艺，一次投料即可提取蒜渣中的多种生物活性成分，包括大蒜多糖、大蒜低聚肽和无臭蒜粉，工艺简单，经济环保，实现了蒜渣的充分利用；
(2)以液体中蛋白质为指标进行复合蛋白酶的精准投放，保证酶解条件最适，降低运行成本、保证工艺的稳定。
附图说明
图1是本发明的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法流程示意图。
具体实施方式
下面结合附图，对本发明的具体实施方式作进一步的详细说明。
在以下本发明的具体实施方式中，请参阅图1，图1是本发明的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法的流程示意图。
如图1所示，本发明提供了一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，包括以下步骤：
S1.将蒜渣与纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47～55℃条件下调节所述蒜渣料液的pH为8.0～8.5，并加入复合蛋白酶酶解4～6h，灭酶处理得到蒜渣酶解产物，将所述蒜渣酶解产物固液分离得到第一固体产物和第一液体产物；
S2.向所述第一液体产物中加入絮凝剂处理后进行固液分离得到第二液体产物，所述第二液体产物经有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液干燥得到大蒜多糖；
S3.所述透过液经脱色处理得到精制液，所述精制液浓缩、干燥后得到大蒜低聚肽；
S4.所述第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
本发明提供的集成提取方法具有如下所述的优点：
(1)采用集成提取的工艺，一次投料即可提取蒜渣中的多种生物活性成分，包括大蒜多糖、大蒜低聚肽和无臭蒜粉，工艺简单，经济环保，实现了蒜渣的充分利用；
(2)以液体中蛋白质为指标进行复合蛋白酶的精准投放，保证酶解条件最适，降低运行成本、保证工艺的稳定。
其中，所述蒜渣为生产大蒜精油后的废渣。
优选地，步骤S1中，所述复合蛋白酶至少包括AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶；以所述蒜渣料液中大蒜蛋白的总重量为100％计，所述复合蛋白酶的用量为1.0～5.0％，根据蒜渣料液中大蒜蛋白的总量精准的投放复合蛋白酶，避免了蛋白酶的浪费，节约了企业的成本，同时还具有良好的酶解效果。
优选地，所述AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活比为1：(0.3.2～4)：(0.48～9)；更优选地，AS1.398中性蛋白酶比活力为1×105U/g,2709碱性蛋白酶的比活力为2×105U/g,木瓜蛋白酶的比活力为6×105U/g，AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为1：(0.16～2)：(0.08～1.5)。所述复合蛋白酶经单酶筛选和优化组合，按照上述比例配置的复合蛋白酶，避免了蛋白酶之间相互影响，提高了酶解的效率和产品的收率。
优选地，为了进一步使蒜渣充分分散于纯水中，步骤S1中，所述蒜渣料液中蒜渣与纯水的重量比为1：(6～20)。
优选地，步骤S1中，所述灭酶处理包括加入HCl溶液调节pH为6.0～7.0，然后于70～85℃保温20～30min。
优选地，为了进一步提高第一液体产物的沉淀的效果，步骤S2中，所述絮凝剂选自羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖和壳聚糖中的至少一种。
优选地，为了提高产品的收率并且减少产品中的杂质，步骤S2中，所述有机膜孔径为2000～5000Da；更优选地，所述有机膜的孔径为4000Da。
优选地，步骤S3中，所述脱色处理包括依次使用活性炭柱、陶瓷膜过滤所述透过液。
优选地，为了浓缩大蒜低聚肽并且减少低聚肽中的杂质，步骤S3中，所述精制液浓缩处理包括使用孔径50～100Da的有机膜浓缩和减压蒸发浓缩；更优选地，所述有机膜的孔径为100Da。
下面通过实施例进一步详细说明本发明。
实施例1
将80kg蒜渣(生产大蒜精油的废渣)与800L纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47℃加入20％NaOH溶液调节所述蒜渣料液的pH为8.0；以所述蒜渣料液中大蒜蛋白的总重量为100％计，向所述蒜渣料液中加入3重量％的复合蛋白酶酶解6h得到酶解后的蒜渣料液；其中所述复合蛋白酶中AS1.398中性蛋白酶(1×105U/g)、2709碱性蛋白酶(2×105U/g)和木瓜蛋白酶(6×105U/g)的重量比为1：0.16：0.08。向所述酶解后的蒜渣料液中加入浓度为3M的HCl溶液调节pH为6.0并升温至75℃灭酶30min得到蒜渣酶解产物，离心所述蒜渣酶解产物，分离得到第一固体产物和第一液体产物。
以第一液体产物的体积为100％计，向所述第一液体产物中加入5体积％的羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖溶液(浓度1％)搅拌均匀，再加入5体积％的壳聚糖溶液(浓度2％)搅拌均匀；静置后固液分离得到第二液体产物；将所述第二液体产物经孔径4000Da有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液于60℃干燥得到大蒜多糖。
所述透过液依次经活性炭柱、孔径4000Da的陶瓷滤膜过滤得到精制液，所述精制液经孔径为100Da的有机膜浓缩，再经减压蒸发浓缩至固含量35％，喷雾干燥得大蒜低聚肽。
第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
本实施例制备得到大蒜多糖12.5kg、3.5kg大蒜低聚肽和5.7kg无臭蒜粉，收率分别为15.63％、4.38％和7.13％。
实施例2
将200kg蒜渣(生产大蒜精油的废渣)与3000L纯水混合均匀得到蒜渣料液，于52℃加入20％NaOH溶液调节所述蒜渣料液的pH为8.5；以所述蒜渣料液中大蒜蛋白的总重量为100％计，向所述蒜渣料液中加入1重量％的复合蛋白酶酶解4h得到酶解后的蒜渣料液；其中所述复合蛋白酶中AS1.398中性蛋白酶(1×105U/g)、2709碱性蛋白酶(2×105U/g)和木瓜蛋白酶(6×105U/g)的重量比为1：2：1.5。向所述酶解后的蒜渣料液中加入浓度唔3M的HCl溶液调节pH为7.0并升温至85℃灭酶20min得到蒜渣酶解产物，离心所述蒜渣酶解产物，分离得到第一固体产物和第一液体产物。
以第一液体产物的体积为100％计，向所述第一液体产物中加入5体积％的羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖溶液(浓度1％)搅拌均匀，再加入5体积％的壳聚糖溶液(浓度2％)搅拌均匀；静置后固液分离得到第二液体产物；将所述第二液体产物经孔径4000Da有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液于65℃干燥得到大蒜多糖。
所述透过液依次经活性炭柱、孔径4000Da的陶瓷滤膜过滤得到精制液，所述精制液经孔径为100Da的有机膜浓缩，再经减压蒸发浓缩至固含量35％，喷雾干燥得大蒜低聚肽。
第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
本实施例制备得到大蒜多糖31.14kg、9.1kg大蒜低聚肽和14.45kg无臭蒜粉，收率分别为15.57％、4.55％和7.23％。
实施例3
将80kg蒜渣(生产大蒜精油的废渣)与800L纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47℃加入20％NaOH溶液调节所述蒜渣料液的pH为8.0；以所述蒜渣料液中大蒜蛋白的总重量为100％计，向所述蒜渣料液中加入3重量％的复合蛋白酶酶解6h得到酶解后的蒜渣料液；其中所述复合蛋白酶中AS1.398中性蛋白酶(1×105U/g)、2709碱性蛋白酶(2×105U/g)和木瓜蛋白酶(6×105U/g)的重量比为1：0.16：2。向所述酶解后的蒜渣料液中加入浓度为3M的HCl溶液调节pH为6.0并升温至75℃灭酶30min得到蒜渣酶解产物，离心所述蒜渣酶解产物，分离得到第一固体产物和第一液体产物。
以第一液体产物的体积为100％计，向所述第一液体产物中加入5体积％的羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖溶液(浓度1％)搅拌均匀，再加入5体积％的壳聚糖溶液(浓度2％)搅拌均匀；静置后固液分离得到第二液体产物；将所述第二液体产物经孔径4000Da有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液于60℃干燥得到大蒜多糖。
所述透过液依次经活性炭柱、孔径4000Da的陶瓷滤膜过滤得到精制液，所述精制液经孔径为100Da的有机膜浓缩，再经减压蒸发浓缩至固含量35％，喷雾干燥得大蒜低聚肽。
第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
本实施例制备得到大蒜多糖12kg、2.8kg大蒜低聚肽和5.2kg无臭蒜粉，收率分别为15％、3.5％和6.5％。
通过实施例1～3可以看出,本发明提供的集成提取方法具有如下所述的优点：
(1)采用集成提取的工艺，一次投料即可提取生产大蒜油后蒜渣中的多种生物活性成分，包括大蒜多糖、大蒜低聚肽和无臭蒜粉，工艺简单，经济环保，实现了蒜渣的充分利用；
(2)以液体中蛋白质为指标进行复合蛋白酶的精准投放，保证酶解条件最适，降低运行成本、保证工艺的稳定。
其中，实施例1与实施例3比较可以看出，在本发明的保护范围中当AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活比为1：(0.3.2～4)：(0.48～9)，大蒜低聚肽的收率更高。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将蒜渣与纯水混合均匀得到蒜渣料液，于47～55℃条件下调节所述蒜渣料液的pH为8.0～8.5，并加入复合蛋白酶酶解4～6h，灭酶处理得到蒜渣酶解产物，将所述蒜渣酶解产物固液分离得到第一固体产物和第一液体产物；
S2.向所述第一液体产物中加入絮凝剂处理后进行固液分离得到第二液体产物，所述第二液体产物经有机膜分离得到透过液和截留液，所述截留液干燥得到大蒜多糖；
S3.所述透过液经脱色处理得到精制液，所述精制液浓缩、干燥后得到大蒜低聚肽；
S4.所述第一固体产物干燥、粉碎后得到无臭蒜粉。
2.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S1中，所述复合蛋白酶至少包括AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶；以所述蒜渣料液中大蒜蛋白的总重量为100％计，所述复合蛋白酶的用量为1.0～5.0％。
3.根据权利要求2中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，所述AS1.398中性蛋白酶、2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活比为1：(0.32～4)：(0.48～9)。
4.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S1中，所述蒜渣料液中蒜渣与纯水的重量比为1：(6～20)。
5.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S1中，所述灭酶处理包括加入HCl溶液调节pH为6.0～7.0，然后于70～85℃保温20～30min。
6.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S2中，所述絮凝剂选自羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖和壳聚糖中的至少一种。
7.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S2中，所述有机膜孔径为2000～5000Da。
8.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S3中，所述脱色处理包括依次使用活性炭柱、陶瓷膜过滤所述透过液。
9.根据权利要求1中所述的一种蒜渣中多种生物活性成分集成提取的方法，其特征在于，步骤S3中，所述精制液浓缩处理包括使用孔径50～100Da的有机膜浓缩和减压蒸发浓缩。
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