CN108367288A - 通过密度梯度进行流体分离的装置和方法 - Google Patents

Abstract

一种用于离心容器、具体为管的装置，该装置用于分离具有所需密度范围的液体馏分，具体为发明应用于形成悬浮液的生物流体和/或液体，其特征在于，所述装置具有分隔件(7)，该分隔件(7)将容器(1)的内部分隔成竖直布置的至少两个室——上室(2)和下室(3)，并且具有分隔件(7)的装置具有可与引导件(12)对齐的孔(4)，在其上的液体、具体为流体样本可以从离心容器(1)的上室(3)向下流至下室(4)。本发明还包括用于通过使用根据本发明的装置从包含不同密度的馏分的样本中分离出具有所需密度范围的馏分的方法。

Description

通过密度梯度进行流体分离的装置和方法

技术领域

本发明涉及一种装置、具有该装置的容器以及借助密度梯度离心分离进行流体分离的方法。同时，本发明涉及一种执行该方法的套件。具体地，本发明用于分离诸如动物血液、人体血液的体液，以进行类似临床诊断或研究的进一步分析。本发明涉及实验室用的容器领域，具体地涉及专用离心管/容器。本发明的另一用途涉及与通过确定其化学、物理或生物特性进行的材料测试或分析，具体为液体生物材料、例如血液的分析相关联的的领域。

背景技术

包括血液的流体样本的采集、净化、分离成各种馏分和/或保存在医学诊断以及临床试验中都起着重要作用。在用于大规模采集血液样本的常规系统和方法的情况下，从患者获得的血液样本可以通过离心、过滤或淘析分离成不同的馏分，并存储以备后用或进一步测试。分离的血液成分通常包括红细胞、白细胞、血小板和血浆的馏分。血液分离成其馏分可以在血液采集期间连续进行，或者在血液采集后分阶段进行。对于许多治疗应用和临床试验用途而言，至关重要的是血液分离成其各种馏分在高度无菌条件下进行。

存在很多血液分离成其各种馏分的方法。现有技术的方法对于其正确操作来说，要求使用高质量的专业医疗设备以及训练有素的人员。

从国际专利申请WO8805331已知一种将红细胞(红血球)与白细胞(白血球)分离的技术。它涉及将血液样本与工作溶液混合，工作溶液接着使红细胞聚集，结果凝集的红细胞的沉降速度增加。分离流体的密度调节成使得白细胞的沉降过程仅稍微改变。这可以防止白细胞沉淀在容器底部，在分离之后，白细胞可以从分离的血液样本的上部收集，同时红细胞沉淀到容器底部。

还有另一种技术，其中红细胞聚集的工作溶液不与血液混合，血液样本被小心地分层到工作分离流体的表面上。结果，红细胞开始凝集或聚集在血液和分离液之间的界面表面上并沉降到管的底部。有几种众所周知的引起红细胞凝集的基于聚合物的化合物，例如FICOLL 400(瑞典Pharmacia精细化学公司)。血液的分离可以在重力的影响下或在离心的影响下进行。作为分离的效果，大部分白血细胞保留在液体界面处。然而，这种方法不能将白细胞分离成亚群，例如，分离成外周血单核细胞(PBMC)和多形核细胞(PMN)。最需要的方法将包括一步式过程，其中分离介质具有允许同时将白血细胞分离成亚群的密度。

为了分离白细胞亚群，已知的用于离析单核白血细胞(PBMC)的方法之一采用密度梯度离心分离。在该方法的第一步中，正在使用Isopaque-Ficoll(挪威Nyegaard&Co.公司)与作为主要成分的metrizoat的混合物。该方法的第二步使得能够采用葡聚糖或明胶从血液中离析出PMN馏分，这导致红细胞的沉淀增加。另一种方法使用不连续的密度梯度，其中两种或两种以上的工作流体被小心地分层在彼此之上。密度选择成使得非连续梯度处于最佳要求范围内——其根据分离物质的密度来选择。

又一美国专利申请No.US4824560A公开了具有至少两个相邻室的管状容器的旋转方法和装置，所述室通过狭窄的毛细管状开口相互连接。工作原理如下：工作流体放置在下室中，待分离成各馏分的流体施加在上室中。不需要任何特殊的预防措施来避免液体在离心分离前混合。与上述手动方法相比，该方法具有几个优点。它也具有缺点，因为即使在离心期间，两个室之间的狭窄开口也阻止血细胞在两个室之间的有效通过，结果血液分离的效率降低。

上述手动分离方法中的重大困难主要在于样本制备，具体地用于分离不同密度的流体样本、例如血液的工作流体的分层。对于这种方法来说，必不可少的是，不同密度的液体不会相互混合，并且通过它们之间清晰的界面来分离。为了正确地实现这些条件，已经开发了各种技术。用于血液分离的液体的充分且仔细的制备和一个在另一个之上的分层是其中之一，主要通过非常小心地将液体移入容器中以借助离心进一步分离成各馏分来完成(以获得密度梯度)。不幸地，所有这些程序都很麻烦，难以执行，会引起随机人为错误的可能性，并且此外还需要高素质的人员，这带来了高维护成本，降低了程序的可重复性并且使得不可能进行大规模分离。

本发明的实施例的目的是提供一种用于将流体快速且部分自动地分离成各种密度的馏分的工具，如在包括血液的生物流体的情况下，其也可以允许生物样本净化、离析和保存。

定义

以下术语将用于本发明的说明书和权利要求书的文本中：

“容器”包括用于采集液体的任何容器，其适于用于离心机中，例如离心管。

“引导件”是控制流体流动速度和方向同时通过分隔盘中的开口从上室流向下室的装置的一部分，其中引导件应具有足够的尺寸以允许在下室中的另一种液体上面的来自上室的一种液体、具体为已经位于容器底部的分离流体/介质上的流体样本流动和分层。根据本发明的引导件可以是容器壁或容器内的其它结构，例如，螺旋细长套管等。

发明内容

本发明涉及一种用于离心容器、具体为管的装置，该装置用于分离具有所需密度范围的液体馏分，具体为本发明适用于形成悬浮液的生物流体和/或液体，其特征在于，该装置具有分隔件，该分隔件将容器的内部分隔成竖直布置的至少两个室——上室和下室，并且具有分隔件的装置具有可与引导件对齐的孔，在其上的液体、具体为流体样本可以从离心容器的上室向下流至下室。

在本发明的优选实施例中，引导件是离心容器的内壁、螺旋状元件、漏斗状元件或细长圆筒状的竖直元件。

优选地，分隔盘包括具有孔的两个相邻表面，具体地呈配装于具有类似于轮子的横截面的容器的扁平盘的形状，其中表面相对于彼此可移动并且其相对于彼此的定位可以调节以允许关闭经由分隔孔的连通。

优选地，上室附加地具有将其分隔成子室的竖直分隔件或多个竖直分隔件，子室中的每个都具有孔。

另一方面，本发明涉及一种用于离心分离的容器，其包括用于离心容器、具体为管的装置，该装置用于分离具有所需密度范围的液体样本，具体为形成悬浮液或生物流体的液体，该装置具有分隔件，该分隔件将容器的内部分隔成上室和下室，并且分隔件具有孔，并且在该孔附近具有引导件，液体的向下流动沿该引导件发生，特别是分离液体流至离心容器的下室。

该分隔件具有孔，在该孔附近放置有引导件，液体的向下流动沿该引导件发生，特别是分离液体流至离心容器的下室。

本发明还包括用于从包含不同密度的馏分的样本、特别是从生物样本中分离出具有所需密度范围的馏分的方法，该方法包括：

a)提供具有用于离心容器、具体为管的装置的容器，该装置用于通过密度梯度离心分离将液体样本分离成具有所需密度范围的馏分，具体地，液体是悬浮液或生物流体，

b)使用于密度梯度分离的介质填充容器的下室，或者容器上室填充有介质，该介质接着通过分隔件中的孔在引导件上向下流至下室；

c)通过填充上室或至少一个上子室或通过将上室附接到装置分隔件来将流体样本(指定成分离成不同密度的馏分)倾注到下室中，使得流体样本可以通过装置分隔件中的孔并接着沿引导件向下流至下室，并且在已经存在于下室中的分离液体的表面上分层(保持液体之间的界面)；

d)对分离容器进行离心，直到样本分离成不同密度的馏分。

优选地，步骤(b)之后是(b)的一个或多个附加步骤，其需要添加用于密度梯度分离的附加介质，附加介质以从最高密度到最低密度的顺序添加。

又优选地，在步骤(d)之后，从分离的液体样本选择的不同密度的馏分可以进行研究、测试和分析，这些馏分也可以通过冷冻来保存。

优选地，在将血液分离成不同密度的馏分的情况下，每个分离馏分(各自具有不同的密度)包含不同的血液成分，包括：白细胞(淋巴细胞和粒细胞)、血小板、红细胞、骨髓细胞(巨核细胞、成红血细胞)、包括内皮细胞、神经元、真菌、病毒的悬浮于匀浆中的细胞、包括外来体、细胞碎片的微粒、包括细胞核、线粒体、叶绿体的细胞器。

本发明还涉及一种套件，包括：

用于离心容器、具体为管的装置，该装置用于通过密度离心分离来将液体样本、具体为形成悬浮液或生物流体的液体分离成不同密度的馏分，然而该装置具有将容器的内部分隔成上室和下室的分隔件，其中，分隔件具有孔、孔的引导件，流体、具体为液体样本沿该引导件向下流至离心容器的下室，

至少一种用于密度梯度分离的介质。

附图说明

为了更好理解，附图示出了本发明的若干实施例。附图并未示出本发明的所有可能的实施例，因此本发明不能限于附图所示的解决方案。附图示出：

图1示出了用于采集流体、尤其是生物材料的呈离心管形状的容器，其还示出了根据本发明的与容器一起用于密度梯度液体分离的装置-该装置使得容器中的液体在离心之前能够在保持它们之间的清晰的界面的情况下一个在另一个上面地分层；

图2和图3分别示出了呈离心管形状的容器的纵向剖视图和侧视图，其中，为了更好地理解本发明，由分隔件构成的盘间隔开；

图4和图5分别示出了管状容器的侧视图和纵向截面，其中管的内径可视变窄并且壁厚增加；

图6示出了在没有竖直分隔件的实施例中穿过容器状管的横截面，并且示出了装置分隔件中的空气管道；

图7a和图7b分别示出了呈不完全竖直分隔件的盘形式的装置的上部的侧视图和横截面；

图8a和图8b分别示出了呈具有矩形形状的竖直分隔件的盘形式的装置的上部的侧视图和横截面；

图9a和图9b分别示出了具有由三个矩形构成的竖直分隔件的装置的上部的侧视图和横截面；

图10a和图10b分别示出了具有由形成十字形形状的两个相交矩形构成的竖直分隔件的装置的上部的侧视图和横截面；

图11a和11b示出了具有缺口的分隔盘的剖视图和侧视图；

图12示出了本发明的一个实施例，其中，装置配装到离心容器上；

图13和图13a示出了该装置的剖视侧视图和俯视图，该装置允许将单独的上室配装在具有呈细长圆筒体的形式的引导件的装置上方；

图14和图14a示出了具有呈八个细长圆筒体形式的引导件的装置的剖视侧视图和俯视图；

图15和图15a示出了装配有呈螺旋形式的引导件的插入件的剖视侧视图和俯视图；

图16和图16a示出了装配有呈漏斗形式的引导件的插入件的剖视侧视图和俯视图。

具体实施方式

实施例1

如图1所示，在本发明的第一实施例中，呈离心管形式的离心容器的装置6由紧密配装到管分隔件的内壁的扁平圆盘7和另一个圆盘8以及附接到盘8的全竖直分隔件11构成，圆盘7和8都构成装置分隔件。在本发明的这个实施例中，装置放置在离心容器1内，离心容器1是直径为0.23英寸的离心管。在该实施例中，装置6由塑料制成，但也可以由其它材料制成。如图12所示，装置6可以放置在另一容器中，该另一容器可以配装到离心容器1，在这种情况下，装置在离心容器1之外。

在该实施例中，离心容器1的内壁同时是引导件12并且离心容器壁变厚，离心容器的内径朝其底部逐渐减小。在本发明的这个实施例中，容器1的内壁是引导件12，其引导液体从上室2经由孔4向下流动至下室3。液体(具体为被分离成馏分的生物流体)在引导件12(在该实施例中为容器1的内壁)上并沿引导件12向下流至容器1的底部并且液体在容器1的底部一个在另一个上面地分层。液体沿引导件12或在引导件12上的向下流动防止了液体的混合，否则液体的混合会损害这些液体的分离。

在本发明的这个实施例中，分隔件7具有圆盘的形状，其横截面具有圆形(fi，11a，图11b)的形状并且其形状与容器1上的横截面紧密相配，因此，与底侧相比，分隔件的直径在顶侧上更长，并且其纵向截面与扁平倒梯形的形状非常相似。分隔件7将容器1分隔成上室2和下室3。在该实施例中，分隔件具有孔4，孔4是类似半圆形的缺口。

如图8a和8b所示，竖直分隔件11可以具有矩形形状，其紧紧地附着于容器1的内壁上，由此附接到盘8的竖直分隔件11将呈管状的容器1的上室2分隔成两个子室10a、10b。在由竖直分隔件11成形的盘8的每个半部中都有一个呈缺口形状的孔5，该孔5可以通过盘8关闭。在本发明的这个实施例中，盘8中的呈缺口状的孔5呈半圆形形状。在本发明的其它实施例中，能够使用具有不同形状的孔5的盘8。孔4、5的形状及其彼此之间的定位确定了流体从上室向下流至下室的速度。

在本发明的这个实施例中，孔4、5呈半径为0.115英寸的半圆形缺口的形状，并具有相同的形状。在本发明的不同实施例中，孔4、5可以具有各种形状，并且形状可以彼此不同，然而它们的直径不应该大于0.1英寸。在分隔件7和盘8的这种布置中，孔4、5不重叠，上室2和下室3之间的液体向下流动被阻断，并且液体流动不能发生。

在本发明的这个实施例中，容器1装配有盖9。在本发明的一个实施例中，盖9具有间隙，装置6的竖直分隔件11的上部从该间隙突出。竖直分隔件11的这种位置使得能够通过转动竖直分隔件11的突出部分和同时盖9的可移动部分来改变盘8相对于盘7的位置。容器1和盖9具有螺纹并且是螺母。可替代地，可以使用没有间隙91的盖，其中装置的竖直分隔件11调节成容器1的长度，使得在拧紧盖9后，竖直分隔件11紧密地附着于盖9的内侧。盖9可由聚合物制成并可具有转动/旋拧盖9的标准刻度。在离心容器1上和在盖9上可以存在标签，以便于正确调节/布置孔4、5彼此之间的位置。

可替代地，在本发明的不同实施例中，竖直分隔件11的形状和位置不同。如图7a和7b所示，垂直分隔件11不必附着于容器1的内壁，在这种情况下，放置在盘8上的垂直分隔件11将管仅分隔成两个室-上室2和下室3，并且上室2不被进一步分成另外的子室。在本发明的这个实施例中，盘8装配有呈缺口形状的孔5，在本发明的其它实施例中，盘8的形状可以限制成能够关闭盘7中的孔4的尺寸。

如图9a和9b所示，竖直分隔件11可以由呈矩形形状的三个元件构成，这三个元件通过较长的边缘彼此连接，其它边缘紧密附着于容器1的内壁，在本实施例中，放置在盘8上的竖直分隔件11将呈管状的容器1的上室2分成三个子室。在该实施例中，盘8具有三个缺口5，子室中的每一个中有一个缺口5。

如图10a和10b所示，竖直分隔件11可以由四个相互连接的矩形构成，其边缘紧密附着于容器1的内壁，在本实施例中，放置在盘8上的竖直分隔件11将呈管状的容器1的上室2分成四个子室。在该实施例中，盘8具有四个缺口5，子室中的每一个中有一个缺口5。

装置6也可以用于不同于本发明实施例的该示例中提出的离心管成形的容器1中，然而必须有允许离心该容器的方法。

实施例2

图13和13a示出了本发明的另一个实施例，其中装置6具有隔板7，隔板7不具有上室但允许通过管(参见部分16)向下连接到具有分离介质或分离液的呈容器(例如，试管、小袋、包袋)形式的上分隔件。随后，分隔件装配有呈细长圆筒形式的引导件12，该引导件12附接到分隔件7并且位于与孔4相距一定距离处。这允许流体从上室16流经管，接着流经分隔件中的孔沿引导件流至下室3。在该实施例中，细长圆筒形成引导件12，并且其长度设置成使得测试材料在用于梯度分离方法中的离心介质的表面上平缓地展开并且不会对分离介质造成显著的干扰。

实施例3

图14和14a示出了本发明的另一个实施例，其中插入件6具有分隔件7，分隔件7装配有呈八个细长辊形式的导向件12，这些细长辊锚固到分隔件7并且位于距孔4这样的距离处，这允许液体从上室通过分隔件中的孔沿引导件流至下室3。在该实施例中，细长辊的引导件12的长度设置成使得测试材料在用于梯度分离方法中的离心介质的表面上平缓地展开并且其不会对分离介质造成显著的干扰。

实施例4

另一方面，图15和15a示出了本发明的又一实施例，其中装置6具有装配有螺旋形状的引导件12的分隔件7。类似于示例2，线圈的长度应设置成使得测试材料在用于梯度分离方法中的离心介质的表面上平缓地展开并且其不会对分离介质造成显著的干扰。

实施例5

另一方面，图16、16a和16b示出了本发明的又一实施例，其中插入件6具有设置有呈漏斗状的引导件12的分隔件7。其中分隔件7中的四个孔引导来自上室的流体，以顺着漏斗的外表面向下翻滚至下室3的底部。类似于示例2，线圈的长度应设置成使得测试材料在梯度离心分离的介质的表面上展开，由此不会对分离介质造成显著的副作用。

实施例6

根据本发明的用于从具有不同密度的馏分的流体样本中分离出给定密度的馏分的方法可以通过以下步骤实现：用用于密度梯度分离的两种介质填充上室2的两个子室10a、10b，第一介质具有1.119g/mL的密度，第二介质具有1.077g/mL的密度(分别为Histopaque 1.119和Histopaque 1.007Sigma Aldrich)，同时在盘7和盘8中分别为缺口的孔4、5不重叠并且保持在关闭位置。接着，通过转动盘8的位置来改变盘8的位置，孔4、5彼此重叠，使得介质能够从上室2向下流至下室3。向下流动在引导件12上并沿引导件12进行，引导件12在该实施例中是容器1的内壁。介质从最高密度开始到最低密度逐一添加，并且界面在不同密度的介质之间建立。在其中一个空子室10之后，在上室2和下室3之间向下流动关闭的情况下，流体或混合物指定成在密度梯度离心分离中被分离成不同密度的馏分，例如，原生血液或稀释血液。

可以通过调节盘7和盘8相对于彼此的位置控制由分别为盘7和盘8的缺口的孔4、5形成的间隙的大小。竖直分隔件11的上部以及随后的盘8的缓慢转动致使向下流动的速度逐渐增加直至获得液体从上室2向下室3向下流动的预期速度的时刻。通过调节盘7和盘8彼此之间的位置，可以控制液体的向下流动，以获得在离心容器1的内壁12上和沿离心容器1的内壁12的液体的稳定层流。根据本发明的盘7和盘8的构造确保液体从离心容器1的上室2到离心容器1的下室3非常柔和的向下流动，使得液体的表面完整并且从上室2向下流动的随后添加的液体不与已经存在于下室3中的液体混合。

在用于密度梯度分离的两种液体的分层向下流动之后，由于密度不同，这些液体一个在另一个上面地分层，添加分析样本(在这种情况下为血液)，尽管能够使用包括原生或稀释的生物样本的不同类型的分离液体。血液首先放置在子室10a中，并且接着在转动装置6的盘8之后，使得盘7的孔4至少部分地与装置6的盘8中的相应孔5重叠并且使血液能够在容器1的内壁12上并沿容器1的内壁12从子室10a向下流至下室3，从而使其在先前放置的分离介质的表面上分层。由于装置6的构造，不需要非常精确和谨慎地将生物材料放置在容器1中。

接下来容器1的下室3中的血液根据本领域已知的方法进行离心分离。在离心分离过程中，两种液体的定向流动在由下室3中的不同密度的分离液体形成的不同隔室内发生，在离心分离结束时连续密度梯度建立，其中，红细胞沉淀至底部以形成最低放置层，上层是密度为1.119g/mL的液体，上层是多形核细胞层，上层是1.077g/mL密度的液体，上层是外周血单层细胞层，上层是最高的血浆层。在插入件移除之后，每层细胞/或流体可以通过使用移液管抽吸或通过倾析移除。

实施例7

本发明的插入件和方法例如用于分离血液细胞的所需子集。在这个实施例中，十个血液样品(20ml静脉血)从健康志愿者中抽取到具有乙二胺四乙酸的市售管(EDTA)(Becton Dickinson公司的EDTA管)中。在该实验中，本发明的基本原则为50ml的离心管1的体积也用于分离两种不同密度的介质(Sigma Aldrich的Histopaque 1119和Histopaque1077)。用于分离的流体具有中性pH，对体液是等渗的，第一分离介质具有1.119g/ml的密度，而第二分离介质具有1.077g/mL的密度。

然后提供用于分离子室10a中的密度为1.119g/ml的10ml的介质进入设置有本发明的装置6的离心容器1的上室2中。密度为1.077克/毫升、体积为10毫升的第二流体放置在上室2的子室10b中，并且然后借助上述发明的插入件6由第一介质强加层压。在实验中，分隔件具有0.08英寸的厚度，并且切口4、5、7和隔板盘8具有0.115英寸的半径。然后，采集的血液是在室2的上子室10a中提供的乙二胺四乙酸(EDTA)。每个血液样本通过上述发明的插入件6施加到表面层介质分离。

在进一步的步骤中，所有管在室温下以700g(以最小加速度和无主动制动)进行离心分离30分钟。在密度离心分离的过程中，血液被分成四个馏分：血浆、单核白血细胞(PBMC)、具有分节核的白血细胞(PMN)和Czerwonki细胞。PBMC和PMN的纯度馏分通过流式细胞术确认。馏分中的PBMC和PMN纯度是95％和92％。PBMC和PMN在血浆馏分中检测不到。析离的血浆、PBMC和PMN适合进一步分析，包括但不限于aPatryk分析：细胞的RNA、微RNA、线粒体DNA、核DNA、蛋白质和表型。

Claims (10)

1.一种用于离心容器、具体为管的装置，所述装置用于分离具有所需密度范围的液体馏分，具体为发明应用于形成悬浮液的生物流体和/或液体，其特征在于，所述装置具有分隔件(7)，所述分隔件(7)将所述容器(1)的内部分隔成竖直布置的至少两个室——上室(2)和下室(3)，并且具有所述分隔件(7)的所述装置具有可与所述引导件(12)对齐的孔(4)，在其上的液体、具体为流体样本可以从所述离心容器(1)的上室(3)向下流至下室(4)。

2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述引导件(12)是离心容器(1)的内壁、螺旋状元件、漏斗状元件或细长圆筒状的竖直元件。

3.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，分隔盘(7)包括具有孔的两个相邻表面，具体地呈配装于具有类似于轮子的横截面的容器(1)的扁平盘的形状，其中所述表面相对于彼此可移动并且其相对于彼此的定位可以调节以允许关闭经由分隔孔(4)的连通。

4.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述上室(2)附加地具有将其分隔成子室(10)的竖直分隔件(11)或多个竖直分隔件(11)，所述子室(10)中的每个都具有孔(4、5)。

5.离心容器(1)，包括用于所述离心容器(1)、具体为管的装置(6)，所述装置用于分离具有所需密度范围的液体样本、具体为形成悬浮液或生物流体的液体，所述装置具有分隔件，所述分隔件将所述容器(1)的内部分隔成上室(2)和下室(3)，并且所述分隔件(7)具有孔(4)，并且在所述孔(4)附近具有引导件(7)，液体的向下流动沿所述引导件发生，特别是分离液体流至所述离心容器(1)的所述下室(3)。

6.用于从包含不同密度的馏分的样本、特别是从生物样本中分离出具有所需密度范围的馏分的方法，所述方法包括：

a)提供具有用于离心容器、具体为管的装置(6)的容器(1)，所述装置用于通过密度梯度离心分离将液体样本分离成具有所需密度范围的馏分，具体地，液体是悬浮液或生物流体，

b)将用于密度梯度分离的介质填充所述容器(1)的所述下室(3)，或者所述容器(1)的所述上室(2)填充有所述介质，所述介质接着通过所述分隔件中的孔在所述引导件(12)上向下流至所述下室；

c)通过填充所述上室(2)或至少一个上子室(10a、10b)或通过将所述上室(2)附接到所述装置分隔件将指定成分离成不同密度的馏分的所述流体样本倾注到所述下室(3)中，使得流体样本可以通过所述装置分隔件中的所述孔(4)并接着沿所述引导件(12)向下流至所述下室，并且在已经存在于所述下室(3)中的分离液体表面上分层，从而保持液体之间的界面；

d)对所述分离容器(1)进行离心，直到所述样本分离成不同密度的馏分。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(b)之后是(b)的一个或多个附加步骤，其需要添加用于密度梯度分离的附加介质，所述附加介质以从最高密度到最低密度的顺序添加。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤(d)之后，可以研究、测试和分析从分离的液体样本选择的不同密度的馏分，这些馏分也可以通过冷冻来保存。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在将血液分离成不同密度的馏分的情况下，每个分离馏分(各自具有不同的密度)包含不同的血液成分，包括：白细胞(淋巴细胞和粒细胞)、血小板、红细胞、骨髓细胞(巨核细胞、成红血细胞)、包括内皮细胞、神经元、真菌、病毒的悬浮于匀浆中的细胞、包括外来体、细胞碎片的微粒、包括细胞核、线粒体、叶绿体的细胞器。

10.套件，包括：

a)用于离心容器(1)、具体为管的装置(6)，所述装置用于通过密度离心分离来将液体样本、具体为形成悬浮液或生物流体的液体分离成不同密度的馏分，然而装置具有将所述容器(1)的内部分隔成上室(2)和下室(3)的分隔件(7)，其中，所述分隔件(7)具有孔(4)、所述孔的引导件(12)，流体、具体为液体样本沿所述引导件(12)向下流至所述离心容器(1)的所述下室(3)，

b)至少一种用于密度梯度分离的介质。