CN108358987A

CN108358987A - 一种高含量曲克芦丁的制备方法

Info

Publication number: CN108358987A
Application number: CN201810308308.0A
Authority: CN
Inventors: 姜玉钦; 李阳; 李言言; 张玮玮; 李星; 徐桂清; 李伟
Original assignee: Henan Normal University
Current assignee: Henan Normal University
Priority date: 2018-04-08
Filing date: 2018-04-08
Publication date: 2018-08-03
Anticipated expiration: 2038-04-08
Also published as: CN108358987B

Abstract

本发明公开了一种高含量曲克芦丁的制备方法，属于药物化学技术领域。本发明的技术方案要点为：一种高含量曲克芦丁的制备方法，将原料粗品芦丁进行乙酰化纯化后再水解得到含量高于99.0%的高含量芦丁；将高含量芦丁在催化剂3代PAMAM树枝状聚合物的催化作用下反应制备三羟乙基芦丁；将三羟乙基芦丁进行纯化得到含量高于99.0%的高含量曲克芦丁。本发明采用高品质芦丁（含量达到99.0%以上）为原料，从而得到高含量的曲克芦丁原料药，具有成本低廉、含量可达99.0%以上、步骤简便、经济环保和适用于工业化生产等优点。

Description

一种高含量曲克芦丁的制备方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种高含量曲克芦丁的制备方法。

背景技术

曲克芦丁(Troxerutin)即7,3′,4′-三羟乙基芦丁，本品呈浅黄色或浅黄绿色粉末，分子式为C₃₃H₄₂O₁₉，CAS号7085-55-4，分子量为742.68，熔点为168-176℃，其结构式如下：

曲克芦丁是一类抗凝血药及溶栓药，它能够抑制血小板的凝集，有防止血栓形成的作用，同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水肿，对急性缺血性脑损伤有显著的保护作用。

曲克芦丁的制备是以芦丁和环氧乙烷为原料，在碱性条件下发生Williamson醚化亲核取代反应而制得，其反应路线见如下方程式。由于芦丁具有多羟基的结构，故反应产物是一羟乙基芦丁、二羟乙基芦丁、三羟乙基芦丁和四羟乙基芦丁的混合物，其中，主要成分为7,3′,4′-三羟乙基芦丁，即曲克芦丁。

目前市场上曲克芦丁产品中主要成分三羟乙基芦丁的含量一般为80.0％(供口服用)和88.0％(供注射用)。而注射用曲克芦丁中尚有12.0％的杂质，存在的杂质给临床用药带来较大的隐患，其中已报道的曲克芦丁注射液引起的不良反应以过敏反应居多。因此提高曲克芦丁原料药的纯度，具有重要的现实意义。

由于芦丁的黄酮结构上有四个活性羟基，在碱性条件下，四个羟基均会与环氧乙烷发生Williamson醚化亲核取代反应，虽然四个羟基活性不同，但其差异较小，故在反应中很难得到单一的三羟乙基芦丁。

文献中报道的高含量曲克芦丁的制备方法有：(1)申请号为200610065718.4的专利中，在常压下，采用水作溶剂，氢氧化钠为催化剂，环氧乙烷为醚化试剂，反应过程中用树脂调控反应液终点的pH值为9.5-10.3，得到的产品含量大于85.0％；(2)申请号为201210443466.X的专利中，高压下，采用甲醇做溶剂，氢氧化钠为催化剂，环氧乙烷为醚化试剂，得到的产品含量为88.0-93.0％；(3)申请号为201310028281.7的专利中，以水或水醇混合物为溶剂，氢氧化钠或氢氧化钾为催化剂，环氧乙烷为醚化试剂，反应分两个阶段进行，第一阶段生成主要以二羟乙基芦丁和三羟乙基芦丁的产物，第二阶段加入硼砂保护C₅-OH，减少四羟乙基芦丁的比例，得到的曲克芦丁含量达90.0％以上；(4)江正祥等以含量81％的曲克芦丁为原料，采用优先结晶法纯化曲克芦丁，将曲克芦丁粗品在高于65℃的条件下溶解到体积比为27:1的甲醇与异丙醇的混合溶剂中，然后降温到20-25℃，得到的曲克芦丁含量达95％以上；(5)申请号为200310104132.0的专利中，采用甲醇为溶剂，吡啶为催化剂，得到的粗品曲克芦丁用有机溶剂(甲醇、乙醇)精制，最终得到的产品含量达90.0％；(6)李军等采用C₁₈柱，水-乙腈(体积比为83:17)为流动相，利用制备型HPLC对曲克芦丁原料进行分离纯化制得曲克芦丁对照品，纯度达99.0％；(7)公开号为CN104177461A的专利中，先将芦丁制备成7-单羟乙基芦丁，然后对7-单羟乙基芦丁进行羟乙基化，将得到的粗品曲克芦丁进行精制，最终得到含量为98.0％的曲克芦丁，该方法获得含量高于98.0％的三羟乙基芦丁，成本在2000-3000元/公斤。

在已有的报道中，曲克芦丁的含量达98.0％以上的方法，仅有色谱法，操作繁琐，成本过高，并且不适合产业化推广应用。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种高含量曲克芦丁的制备方法即含量达98.0％以上的三羟乙基芦丁的制备方法，该方法的关键在于采用高品质芦丁(含量达到99.0％以上)为原料，从而得到高含量的曲克芦丁原料药，具有成本低廉、含量可达99.0％以上、步骤简便、经济环保和适用于工业化生产等优点。本发明外标99.0以上曲克芦丁成本价格为240-320元/公斤。

本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于具体步骤为：

(1)将原料粗品芦丁进行乙酰化纯化后再水解得到含量高于99.0％的高含量芦丁；

(2)将高含量芦丁在催化剂3代PAMAM树枝状聚合物的催化作用下反应制备三羟乙基芦丁；

(3)将三羟乙基芦丁进行纯化得到含量高于99.0％的高含量曲克芦丁。

进一步优选，步骤(1)的具体过程为：将粗品芦丁溶于碱性溶液中，溶解后在冰水浴条件下滴加乙酰化试剂，加热至回流，充分反应后将反应液加入到冰水溶液中析晶，抽滤得到乙酰化芦丁，将乙酰化芦丁加热溶于溶剂，加入重量比为1:1的硼酸和活性炭混合物，过滤，然后降温静置析晶或滴加到溶剂中降温析晶得到纯化后的乙酰化芦丁。在室温下将纯化后的乙酰化芦丁溶于甲醇中，再滴加碱的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，有大量黄色沉淀析出，再用酸性溶液调节混合体系的pH值为5-6，抽滤得到高含量芦丁。

进一步优选，所述的粗品芦丁为市售普通芦丁，其HPLC含量为92％，所述的碱性溶液为氢氧化钠溶液、吡啶、三乙胺、乙酸钠溶液、DMAP或DMSO中一种或多种，所述的乙酰化试剂为乙酰氯、冰醋酸或醋酐，所述的粗品芦丁、碱性溶液与乙酰化试剂的投料配比为1mol:3-4L:12mol。

进一步优选，所述的溶剂为异丙醇、甲醇、乙醇、水、乙酸乙酯或石油醚中的一种或多种，所述的硼酸和活性炭混合物的重量为粗品芦丁重量的5％-10％。所述的碱的甲醇溶液中碱为甲醇钠、氨或咪唑，其中碱与粗品芦丁的摩尔比为10-15:1，所述的酸性溶液为盐酸、硫酸、硝酸或醋酸中的一种或多种。

进一步优选，所述的冰水溶液与粗品芦丁的投料配比为60-150L:1Kg。

进一步优选，步骤(2)的具体过程为：以高含量芦丁和环氧乙烷为反应原料，以无水甲醇为反应溶剂，以3代PAMAM树枝状聚合物为催化剂，在自吸式搅拌的高压反应釜中于60-90℃反应，反应结束后用盐酸调节反应液的pH值为5-6，静置析晶得到三羟乙基芦丁。

进一步优选，所述的高含量芦丁、环氧乙烷、3代PAMAM树枝状聚合物与无水甲醇的质量比为1:0.3-0.6:0.02-0.05:2-5。

进一步优选，步骤(3)的具体过程为：将三羟乙基芦丁经过溶解、吸附、析晶和过滤得到含量高于98.0％的高含量曲克芦丁，其中溶解过程采用的溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇中的一种或多种。

进一步优选，所述的溶剂与三羟乙基芦丁的投料配比为15-20mL:1g，溶解温度为回流温度，吸附过程中采用针用活性炭吸附，活性炭的用量为三羟乙基芦丁质量的3％-5％，吸附时间为0.5-1h。

本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

1、本发明通过对原料粗品芦丁进行乙酰化纯化后再水解得到的芦丁纯度可达到99.0％以上，该方法所得芦丁收率较高，稳定保持在95％-97％，生产芦丁的成本远远低于已经报道的专利及文献中高含量芦丁的生产成本，适于产业化应用；

2、制备三羟乙基芦丁时采用3代PAMAM树枝状聚合物及适宜的反应条件，使反应达到最佳水平，得到的产品只需进行简单纯化即可得到含量高于99.0％的高含量曲克芦丁原料药。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入305g(3mol)醋酐，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L异丙醇加热至溶解，加入15.2g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加160g(3mol)甲醇钠的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用冰乙酸调节混合体系的pH值为5.0，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率95.4％，纯度99.7％；

(2)取(1)中所得的145g芦丁和7.2g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到580g无水甲醇中，再通入58g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至80℃后，保温反应5.0h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，用盐酸调节反应液的pH值为5.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到晶体133g，收率91.7％；

(3)向(2)中所得的晶体133g加入2.5L无水甲醇，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭4.0g，继续回流1.0h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁108g，收率81.2％，总收率74.5％，含量99.2％。

实施例2

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入305g(3mol)醋酐，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L乙酸乙酯加热至溶解，加入12.5g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再滴入2.5L石油醚中缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加160g(3mol)甲醇钠的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用冰乙酸调节混合体系的pH值为5.8，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率95.4％，纯度99.5％；

(2)取(1)中所得的145g芦丁和2.9g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到725g无水甲醇中，再通入58g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至70℃后，保温反应8.0h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为6.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体132g，收率91.0％；

(3)向(2)中所得的固体132g加入2L无水甲醇和异丙醇的混合溶液(无水甲醇与异丙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭5.0g，继续回流1.0h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁112g，收率84.8％，总收率77.2％，含量99.1％。

实施例3

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL三乙胺中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入235g(3mol)的乙酰氯，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L乙酸乙酯加热至溶解，加入15.2g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加160g(3mol)甲醇钠的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用稀盐酸调节混合体系的pH值为6.0，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率97.3％，纯度99.0％；

(2)取(1)中所得的148g芦丁和6.0g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到600g无水甲醇中，再通入74g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至60℃后，保温反应5.5h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为5.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体137g，收率92.6％；

(3)向(2)中所得的固体137g加入2.2L无水甲醇和异丙醇的混合溶液(无水甲醇与异丙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭7.0g，继续回流0.5h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁116g，收率84.6％，总收率78.4％，含量99.3％。

实施例4

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴调价下缓慢滴入235g(3mol)的乙酰氯，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L乙醇加热至溶解，加入15.2g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加160g(3mol)甲醇钠的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用冰乙酸调节混合体系的pH值为5.5，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率96.0％，纯度99.8％；

(2)取(1)中所得的146g芦丁和5.9g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到295g无水甲醇中，再通入59g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至90℃后，保温反应4h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为6.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体137g，收率93.8％；

(3)向(2)中所得的固体137g加入2.4L无水甲醇和异丙醇的混合溶液(无水甲醇与异丙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭6.0g，继续回流0.5h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁113g，收率82.5％，总收率77.4％，含量99.6％。

实施例5

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入305g(3mol)醋酐，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L异丙醇加热至溶解，加入7.6g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加75g(1.1mol)咪唑和30g(1.75mol)氨的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用稀盐酸调节混合体系的pH值为5.0，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率97.4％，纯度99.3％；

(2)取(1)中所得的148g芦丁和6.0g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到740g无水甲醇中，再通入44g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至80℃后，保温反应6.5h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为6.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体132g，收率89.2％；

(3)向(2)中所得的固体132g加入2.6L无水甲醇和乙醇的混合溶液(无水甲醇与乙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭7.0g，继续回流0.5h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁109g，收率82.6％，总收率73.7％，含量99.7％。

实施例6

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入235g(3mol)的乙酰氯，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L乙醇加热溶解，加入15.2g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再滴入5L水中析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加205g(3mol)咪唑的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用冰乙酸调节混合溶液的pH值为5.6，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率96.0％，纯度99.5％；

(2)取(1)中所得的146g芦丁和7.3g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到436g无水甲醇中，再通入44g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至90℃后，保温反应6.0h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为5.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体137g，收率93.8％；

(3)向(2)中所得的固体137g加入2.1L无水甲醇和异丙醇的混合溶液(无水甲醇与异丙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭6.5g，继续回流0.5h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁111g，收率81.0％，总收率76.0％，含量99.2％。

实施例7

(1)向152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入175mL(3mol)的冰醋酸，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水溶液中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L异丙醇加热至溶解，加入7.6g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加160g(3mol)甲醇钠的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用冰乙酸调节混合体系的pH值为5.0，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率96.2％，纯度99.7％。

(2)取(1)中所得的146g芦丁和7.3g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到295g无水甲醇中，再通入73g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至70℃后，保温反应4.0h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为6.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体130g，收率89.0％；

(3)向(2)中所得的固体130g加入2.2L无水甲醇和乙醇的混合溶液(无水甲醇与乙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭5.5g，继续回流0.5h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁105g，收率80.8％，总收率71.9％，含量99.8％。

实施例8

(1)将152g(0.25mol)粗品芦丁加入到750mL吡啶中，搅拌至溶解，在冰水浴条件下缓慢滴入175mL(3mol)的冰醋酸，70℃下搅拌12h后，将反应液滴入15L冰水中，有乳白色颗粒析出，室温下静置析晶4h后，抽滤；将滤饼用2.5L异丙醇加热至溶解，加入15.2g等质量硼酸和活性炭混合物，趁热抽滤，再缓慢降温析晶，抽滤；将滤饼溶于1L甲醇中，再向其中缓慢滴加75g(1.1mol)咪唑和30g(1.75mol)氨的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，用稀盐酸调节混合体系的pH值为5.5，有大量黄色沉淀析出，室温下静置，抽滤得到高含量芦丁，收率97.4％，纯度99.6％；

(2)取(1)中所得的148g芦丁和7.4g 3代PAMAM树枝状聚合物加入到740g无水甲醇中，再通入85g环氧乙烷，密封高压釜，开始加热及搅拌，加热至60℃后，保温反应5.5h，HPLC检测三羟乙基芦丁比例达86％时，迅速降温，终止反应，加入盐酸调节反应液的pH值为5.0，静置析晶12h后，抽滤、干燥得到固体138g，收率93.2％；

(3)向(2)中所得的固体138g加入2.5L无水甲醇和异丙醇的混合溶液(无水甲醇与异丙醇的体积比为1:1)，加热回流至完全溶解，加入针用活性炭4.3g，继续回流1.0h后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶12h后，抽滤、干燥得到产品曲克芦丁113g，收率81.9％，总收率76.3％，含量99.5％。

十乙酰化芦丁核磁¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96(dd,J＝8.6,2.1Hz,1H),7.91(d,J＝2.1Hz,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,1H),7.31(d,J＝2.2Hz,1H),6.83(d,J＝2.2Hz,1H),5.43(d,J＝7.8Hz,1H),5.28(t,J＝9.5Hz,1H),5.17(dd,J＝9.7,7.9Hz,1H),5.09(s,1H),5.07(d,J＝3.5Hz,1H),4.95(t,J＝9.6Hz,2H),4.52(s,1H),3.65(dq,J＝12.6,6.3Hz,1H),3.55(ddd,J＝20.5,10.0,3.1Hz,2H),3.27(dd,J＝11.0,5.6Hz,1H),2.44(s,3H),2.34(d,J＝3.1Hz,6H),2.30(s,3H),2.14(s,3H),2.09(s,3H),2.02(s,6H),1.95(d,J＝6.4Hz,6H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H).

芦丁核磁¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.60(s,1H,C5-H),10.84(s,1H,C7-H),9.69(s,1H,C4’-H),9.20(s,1H,C3’-H),7.55(d,J＝2.1Hz,1H,C6’-H),7.53(s,1H,C2’-H),6.84(d,J＝8.3Hz,1H,C5’-H),6.38(d,J＝2.0Hz,1H,C8-H),6.19(d,J＝2.0Hz,1H,C6-H),5.34(d,J＝7.3Hz,1H),5.30(d,J＝4.1Hz,1H),5.13(d,J＝4.2Hz,1H),5.09(d,J＝5.8Hz,1H),4.55(d,J＝5.1Hz,1H),4.42(d,J＝5.8Hz,1H),4.37(d,J＝3.9Hz,2H),3.70(d,J＝10.2Hz,1H),3.10–3.00(m,2H),0.99(d,J＝6.2Hz,3H,CH₃-).

曲克芦丁核磁¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.52(s,1H,C5-H),7.84(d,J＝2.0Hz,1H,C6’-H),7.70(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H,C2’-H),7.13(d,J＝8.8Hz,1H,C5’-H),6.74(d,J＝2.2Hz,1H,C8-H),6.38(d,J＝2.2Hz,1H,C6-H),5.41(dd,J＝11.7,5.9Hz,2H),5.18(d,J＝4.6Hz,1H),5.13(d,J＝5.8Hz,1H),4.99–4.88(m,4H),4.54(d,J＝5.2Hz,1H),4.47–4.38(m,4H),4.11(t,J＝4.7Hz,5H),4.05(t,J＝4.8Hz,2H),3.80–3.69(m,8H),3.04(ddd,J＝12.0,8.6,3.7Hz,2H),0.96(d,J＝6.2Hz,3H,CH₃-).

以上实施例仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明保护范围之内。

Claims

1.一种高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于具体步骤为：

（1）将原料粗品芦丁进行乙酰化反应，纯化后再水解得到含量高于99.0%的高含量芦丁；

（2）将高含量芦丁在催化剂3代PAMAM树枝状聚合物的催化作用下反应制备三羟乙基芦丁；

（3）将三羟乙基芦丁进行纯化得到含量高于99.0%的高含量曲克芦丁。

2.根据权利要求1所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于步骤（1）的具体过程为：将粗品芦丁溶于碱性溶液中，溶解后在冰水浴条件下滴加乙酰化试剂，加热至回流，充分反应后将反应液加入到冰水溶液中析晶，抽滤得到乙酰化芦丁，将乙酰化芦丁加热溶于溶剂，加入重量比为1:1的硼酸和活性炭混合物，过滤，然后降温静置析晶或滴加到溶剂中降温析晶得到纯化后的乙酰化芦丁，在室温下将纯化后的乙酰化芦丁溶于甲醇中，再滴加碱的甲醇溶液，此时溶液变浑浊，有大量黄色沉淀析出，再用酸性溶液调节混合体系的pH值为5-6，抽滤得到高含量芦丁。

3.根据权利要求2所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于：所述的粗品芦丁为市售普通芦丁，其HPLC含量为92%，所述的碱性溶液为氢氧化钠溶液、吡啶、三乙胺、乙酸钠溶液、DMAP或DMSO中一种或多种，所述的乙酰化试剂为乙酰氯、冰醋酸或醋酐，所述的粗品芦丁、碱性溶液与乙酰化试剂的投料配比为1mol:3-4L:12mol。

4.根据权利要求2所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于：所述的溶剂为异丙醇、甲醇、乙醇、水、乙酸乙酯或石油醚中的一种或多种，所述的硼酸和活性炭混合物的重量为粗品芦丁重量的5%-10%，所述的碱的甲醇溶液中碱为甲醇钠、氨或咪唑，其中碱与粗品芦丁的摩尔比为10-15:1，所述的酸性溶液为盐酸、硫酸、硝酸或醋酸中的一种或多种。

5.根据权利要求2所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于：所述的冰水溶液与粗品芦丁的投料配比为60-150L:1Kg。

6.根据权利要求1所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于步骤（2）的具体过程为：以高含量芦丁和环氧乙烷为反应原料，以无水甲醇为反应溶剂，以3代PAMAM树枝状聚合物为催化剂，在自吸式搅拌的高压反应釜中于60-90℃反应，反应结束后用盐酸调节反应液的pH值为5-6，静置析晶得到三羟乙基芦丁。

7.根据权利要求6所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于：所述的高含量芦丁、环氧乙烷、3代PAMAM树枝状聚合物与无水甲醇的质量比为1:0.3-0.6:0.02-0.05:2-5。

8.根据权利要求1所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于步骤（3）的具体过程为：将三羟乙基芦丁经过溶解、吸附、析晶和过滤得到含量高于99.0%的高含量曲克芦丁，其中溶解过程采用的溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇中的一种或多种。

9.根据权利要求8所述的高含量曲克芦丁的制备方法，其特征在于：所述的溶剂与三羟乙基芦丁的投料配比为15-20mL:1g，溶解温度为回流温度，吸附过程中采用针用活性炭吸附，活性炭的用量为三羟乙基芦丁质量的3%-5%，吸附时间为0.5-1h。