CN108348523A - 包含pi3k抑制剂和hdac抑制剂的组合物 - Google Patents

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斯蒂芬·约瑟夫·沙特勒沃斯
安德鲁·大卫·惠尔
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Karus Therapeutics Ltd
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Abstract

本发明涉及药物组合物，所述药物组合物包含至少一种式I的PI3K抑制剂或其药物可接受的盐和至少一种HDAC抑制剂，例如式II化合物或其药物可接受的盐；或者至少一种PI3K抑制剂、例如式I化合物或其药物可接受的盐，和至少一种式II的HDAC抑制剂或其药物可接受的盐。

Description

包含PI3K抑制剂和HDAC抑制剂的组合物
发明领域
本发明涉及包含用作IA类磷酸肌醇3-激酶(PI3K-p110δ和PI3K-p110β)的抑制剂的化合物和用作组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的抑制剂的化合物的新组合。这种组合在治疗中，例如在癌症、免疫紊乱和炎性疾病的治疗是有用的。
发明背景
磷酸肌醇3-激酶(PI3K)构成了在控制一系列细胞过程的信号转导途径网络的调节中涉及的脂质激酶家族。基于其底物特异性，PI3K分为三个不同的亚家族，称为I类、II类和III类。IA类PI3K具有与三个调节亚基之一(p85α、p85β或p55δ)复合的p110α、p110β或p110δ催化亚基。IA类PI3K被受体酪氨酸激酶、抗原受体、G-蛋白偶联受体(GPCR)和细胞因子受体激活。IA类PI3K主要产生磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸盐(酯)(PI(3,4,5)P3)，其是激活下游靶标AKT的第二信使。AKT生物活化的结果包括肿瘤细胞进展、增殖、存活和生长，并且有明显的证据表明在许多的人类癌症中PI3K/AKT途径被异常调节。此外，PI3K活性已涉及内分泌学、心血管疾病、免疫紊乱及炎症。已经确定PI3K-p110δ在免疫细胞和炎性细胞的募集和活化中起着关键性作用。PI3K-p110δ还在许多的人类肿瘤中被上调，并且在肿瘤细胞增殖和存活中起着关键作用。
能够调节p110β和p110δ活性的化合物在癌症及免疫紊乱和炎性病症中具有重要的治疗潜力。
HDAC是催化乙酰化的赖氨酸残基水解的锌金属酶。在组蛋白中，这使赖氨酸返回至其质子化状态并且是真核转录控制的普遍机制，导致核小体中的DNA紧密包装。此外，对于非组蛋白蛋白质而言，可逆的赖氨酸乙酰化是重要的调节过程。因此，能够调节HDAC的化合物具有重要的治疗潜力。
例如，在WO2015054355中已经公开了HDAC抑制剂和PI3K抑制剂的组合。
发明概述
本发明部分涉及某些PI3K化合物(例如本文所公开的那些)和某些HDAC化合物(例如本文所公开的那些)的组合。这些组合可以是协同的，因此相对于单独的组分可以提供改进。例如，这些组合可以允许施用较低的剂量。本发明至少部分基于本文提及的数据。
本文公开的某些PI3K抑制剂还公开于PCT/GB2015/050396(其至2015年8月19日止还未公开，并且其内容通过引用并入本文)。相比于WO2011/021038(其也通过引用并入本文)中描述的化合物，它们可以具有增加的活性和/或生物利用度。
本文公开的某些HDAC抑制剂还公开于WO2014/181137，其通过引用并入本文。
因此，本发明部分涉及
a)药物组合物，其包含式I的PI3K抑制剂化合物：
或其药物可接受的盐，其中：
W为O、N-H、N-(C1-C10烷基)或S；
每次出现时各个X独立地选自CH、CR3或N；
R1为包含至少1个选自N或O的杂原子的5元至7元的饱和或不饱和的任选取代的杂环；
R2为L-Y；
各个L选自键、C1-C10亚烷基、C2-C10亚烯基和C2-C10亚炔基；
Y为任选取代的稠合的、桥接的或螺环的非芳香族杂环，其包含至多4个各自独立地选自N或O的杂原子(例如，一个杂原子、两个杂原子、三个杂原子或四个杂原子)，且其总计包含5至12个碳原子或杂原子；以及
各个R3独立地为H、C1-C10烷基、卤素、氟代C1-C10烷基、O-C1-C10烷基、-NH-C1-C10烷基、S-C1-C10烷基、O-氟代C1-C10烷基、NH-酰基、NH-C(O)-NH-C1-C10烷基、C(O)-NH-C1-C10烷基、芳基或杂芳基；
与HDAC抑制剂的组合，所述HDAC抑制剂例如式II化合物或其药物可接受的盐，
其中：
各个R/独立地选自H和QR1；
各个Q独立地选自键、CO、CO2、NH、S、SO、SO2或O；
各个R1独立地选自H、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、芳基、杂芳基、C1-C10环烷基、卤素、C1-C10烷基芳基、C1-C10烷基杂芳基或C1-C10杂环烷基；
各个L独立地选自5元至10元含氮的杂芳基；
W是锌结合基团；
各个R2独立地为氢或C1至C6烷基；并且
R3为芳基或杂芳基；
各个芳基或杂芳基可以被至多三个取代基取代，所述取代基选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟基烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基、C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰基氨基、C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰基氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、卤素、硝基、氰基、三氟甲基、羧基、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基；并且
各个烷基、烯基或炔基可以被卤素、NH2、NO2或羟基取代；或者
b)PI3K抑制剂、例如式I化合物或其药物盐，与式II的HDAC抑制剂或其药物可接受的盐的组合。
还提供了包含上述组合物的试剂盒和方法。
优选实施方案的描述
定义
如本文所使用，“烷基”意指C1-C10烷基，其可以是直链的或支链的。优选地，其为C1-C6烷基部分。更优选地，其为C1-C4烷基部分。实例包括甲基、乙基、正丙基和叔丁基。其可以是二价的，例如亚丙基。
如本文所使用，“烯基”意指C2-C10烯基。优选地，其为C2-C6烯基。更优选地，其为C2-C4烯基。所述烯基可以是单饱和的或双饱和的，更优选为单饱和的。实例包括乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、异丙烯基和1-丁烯基。其可以是二价的，例如亚丙烯基。
如本文所使用，“炔基”为C2-C10炔基，其可以是直链或支链的。优选地，其为C2-C4炔基或部分。其可以是二价的。
C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的每一个可以被彼此任选取代，即，C1-C10烷基被C2-C10烯基任选取代。它们也可以被芳基、环烷基(优选为C3-C10)、芳基或杂芳基任选取代。它们也可以被卤素(例如F、Cl)、NH2、NO2或羟基取代。优选地，它们可以被至多10个卤素原子或更优选为至多5个卤素原子取代。例如，它们可以被1个卤素原子、2个卤素原子、3个卤素原子、4个卤素原子或5个卤素原子取代。优选地，所述卤素为氟。例如，它们可以被CF3、CHF2、CH2CF3、CH2CHF2、CF2CF3或OCF3、OCHF2、OCH2CF3、OCH2CHF2或OCF2CF3取代。
如本文所使用，术语“氟代C1-C10烷基”意指被一个或多个氟原子取代的C1-C10烷基。优选地，一个氟原子、两个氟原子、三个氟原子、四个氟原子或五个氟原子。“氟代C1-C10烷基”的实例为CF3、CHF2、CH2F、CH2CF3、CH2CHF2或CF2CF3。
如本文所使用，“芳基”意指单环、双环或三环的一价或二价(视情况而定)的芳香族基团，例如苯基、联苯基、萘基、蒽基，其可以被至多五个取代基任选取代，所述取代基优选地选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟烷基、C1-C3烷氧基，C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基，C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰氨基，C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、卤素、硝基、氰基、三氟甲基、羧基、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基。
如本文所使用，“杂芳基”意指单环、双环或三环的一价或二价(视情况而定)的芳香族基团，其包含至多四个选自氧、氮和硫的杂原子，例如，噻唑基、异噻唑基、四唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻吩基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基，所述基团被至多三个取代基任选取代，所述取代基优选地选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基、C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰氨基、C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、卤素、硝基、氰基、三氟甲基、羧基、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基。
在本发明的化合物中，某些杂芳基(即L和R3)连接于R’。然而，它们仍然可以被至多三个选自以上定义的基团的另外的取代基取代。优选地，R’是唯一的取代基。
如本文所使用，术语“杂环”或“杂环烷基”为含有至多4个选自氧、氮和硫的杂原子的一价或二价的碳环基团。优选地，其包含一个或两个杂原子。优选地，至少一个杂原子为氮。其可以是单环或双环。其优选地是饱和的。杂环的实例为哌啶、哌嗪、硫代吗啉、吗啉、氮杂环丁烷或氧杂环丁烷。更优选地，所述杂环为吗啉。
所述杂环可以是单不饱和的或双不饱和的。所述基团可以被至多三个取代基任选取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基、C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰氨基、C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、卤素(例如F)、硝基、氰基、羧基、C1-C3-卤代烷基(例如CF3)、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基。
如本文所使用，以上基团可以具有前缀“亚……”。这意指该基团是二价的，即连接基团。
如本文所使用，“硫醇保护基团”通常是：
(a)形成硫醚以保护硫醇基的保护基团，例如苄基，其被C1-C6烷氧基(例如甲氧基)、C1-C6酰氧基(例如乙酰氧基)、羟基和硝基、吡啶甲基、吡啶甲基-N-氧化物、蒽基甲基、二苯基甲基、苯基、叔丁基、金刚烷基、C1-C6酰氧基甲基(例如，新戊酰氧基甲基、叔丁氧基羰基氧基甲基)任选取代；
(b)形成一硫代、二硫代或氨基硫代缩醛以保护硫醇基的保护基团，例如C1-C6烷氧基甲基(例如甲氧基甲基、异丁氧基甲基)、四氢吡喃基、苄硫基甲基、苯硫基甲基、噻唑烷、乙酰胺甲基、苯甲酰氨基甲基；
(c)形成硫酯以保护硫醇基的保护基团，例如叔丁氧基羰基(BOC)、乙酰基及其衍生物、苯甲酰基及其衍生物；或
(d)形成氨基甲酸硫酯以保护硫醇基的保护基团，例如氨基甲酰基、苯基氨基甲酰基、C1-C6烷基氨基甲酰基(例如甲基氨基甲酰基和乙基氨基甲酰基)。
总之，以上定义的各个基团，即，烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环、杂环烷基，可以被至多三个取代基任选取代，所述取代基优选地选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基、C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰氨基、C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、酰基、卤素(例如氟)、硝基、氰基、三氟甲基、羧基、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基。
应注意，-NH-C1-C10烷基、NH-酰基、NH-C(O)-NH-C1-C10烷基和C(O)-NH-C1-C10烷基也可以写成-N-C1-C10烷基、N-酰基、N-C(O)-N-C1-C10烷基和C(O)-N-C1-C10烷基。
如本文所使用，以上基团可以具有前缀“亚……”。这意指所述基团为二价，即连接基团。
如本文所使用，术语“稠合的”旨在采取其在有机化学领域中的通常含义。稠合体系，例如稠合双环体系，是其中两个环共用两个原子且只共用两个原子的那些。
如本文所使用，术语“桥接的”旨在采取其在有机化学领域中的通常含义。桥接的化合物为包含联锁环的化合物。根据本发明，桥接的非芳香族基团中形成桥头的原子是叔碳原子(当其余的原子为氢时)或季碳原子(当其余的原子不为氢时)。桥可以被认为是原子的链(例如，烷基)或连接两个桥头的单个原子(例如，O、S、N、C)。
如本文所使用，术语“螺环的”旨在采取其在有机化学领域中的通常含义。例如，螺环化合物是其中环仅通过一个原子(被称为螺原子)连接的双环。所述环可以大小不同，或者它们可以大小相同。优选地，根据本发明，经相同原子连接的两个环为非芳香族杂环，优选为杂环烷基。例如，式I的螺环非芳香族基团可以是其中两个环均为杂环烷基并且通过相同的原子(优选碳原子)连接的双环。
由于存在不对称原子或转动限制，本发明涉及的化合物可以以一个或多个立体异构形式存在，其可以作为在各个手性中心具有R或S立体化学的多个立体异构体存在，或者作为在各个手性轴具有R或S立体化学的阻转异构体存在。本发明包括所有此类对映异构体和非对映异构体及它们的混合物。
本发明的优选组-PI3K抑制剂和HDAC抑制剂
在一些实施方案中，PI3K抑制剂是式I化合物或其药物可接受的盐，或Pictilisib、Dactolisib(达托利塞)、阿吡利塞(Alpelisib)、Voxtalisib、吉达利塞(Gedatolisib)、库潘尼西(Copanlisib)、渥曼青霉素(Wortmannin)、Apitolisib、艾代拉里斯(Idelalisib)、Buparlisib、Duvelisib、Pilaralisib、LY294002、GSK-2636771、AZD6482、PF-4989216、GS-9820、AMG319、SAR260301、MLN1117、PX-866、CH5132799、AZD8186、RP6530、GNE-317、PI-103、NU7441、HS-173、VS-5584、CZC24832、TG100-115、ZSTK474、AS-252424、AS-604850、NVP-BGT226、XL765、GDC-0032、A66、CAY10505、PF04691502、PIK-75、PIK-93、AS-605240、BGT226、CUDC-907、IC-87114、CH5132799、PKI-420、TGX-221或PIK-90。优选地，PI3K抑制剂是式I化合物或其药物可接受的盐。优选的是，本发明的PI3K抑制剂是PI3K-p110δ抑制剂(即，它们是δ选择性的)。可选地，它们可以是PI3K-p110β和PI3K-p110δ选择性的(即，它们是β和δ选择性的)。
在一些实施方案中，HDAC抑制剂是式II化合物或其药物可接受的盐，或伏立诺他、恩替诺特、帕比司他、莫塞替诺特(Mocetinostat)、贝利司他、Ricolinostat、罗米地辛、吉维诺特(Givinostat)、达西司特(Dacinostat)、Quisinostat(奎西诺他)、Pracinostat、Resminostat(瑞米司他)、Droxinostat、Abexinostat、RGFP966、AR-42、PCI34051、曲古抑菌素A、SB939、CI994、CUDC-907、Tubacin、西达本胺、RG2833、M344、MC1568、Tubastatin A、Scriptaid、丙戊酸、苯丁酸钠、他喹莫德、Kevetrin、HPOB、4SC-202、TMP269、CAY10603、BRD73954、BG45、LMK-235、Nexturastat A、CG200745、CHR2845或CHR3996。优选地，HDAC抑制剂是式II化合物或其药物可接受的盐。优选的是，本发明的HDAC抑制剂是HDAC6选择性的。例如，相比于HDAC1，它们对HDAC6是有选择性的。
本发明的优选组-式I化合物
优选地，式I化合物如权利要求1中所定义，但此外可以是其中至少一个R3为NH2的化合物。
优选地，R1由下列结构的任一个表示：
最优选地，R1为吗啉。
在式I化合物的优选实施方案中，W为氧或硫，优选为氧。
优选地，X为CH。
优选地，R3为H、C1-C10烷基、卤素或氟代C1-C10烷基。更优选地，R3为H。
优选地，式I中的6,5-环体系为吲哚。换言之，R3为氢且X为CH。
如通式I所述，可以将R2与芳基上的任何合适的原子连接。然而，优选地，将R2连接于吡啶环的间位。例如，如果将吡啶的氮原子标记为原子编号1，那么R2连接在3-位。
R2为LY。优选地，L为C1-C10亚烷基，优选为亚甲基。
优选地，Y为任选取代的桥接的或螺环的杂环烷基，其包含至多4个选自N或O的杂原子，且总计包含5至12个原子。
优选地，Y包含一个或两个杂原子，优选地包含两个杂原子。更优选地，如在以下优选的Y基团中所述，至少一个杂原子为氮且Y通过该氮原子与L键合：
其中：
A选自O、S、NR4、任选取代的C1-C3亚烷基、C2-C3亚烯基和C2-C3亚炔基；
B选自NR4、O和CH2；
其中R4选自H、任选取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基和C1-C3卤代氟烷基；
p选自0、1或2；
各个m独立地选自0、1或2；并且
各个n独立地选自1、2或3。
优选地，A为O或C1-C3亚烷基，最优选为亚甲基。
优选地，B为O或CH2，最优选为O。
当R4存在时，其优选为H、C1-C3烷基或C1-C3卤代氟烷基。更优选地，R4为H。
优选地，选择各个m及各个n以便形成5元、6元或7元的含氮的杂环烷基。优选地，p为1。具体地，当A为O、S或NR4时，p为1。
优选地，Y为双环，更优选为桥接的双环或螺环双环。
甚至更优选地，Y选自以下基团之一：
在某些实施方案中，本文提供了以下表示的化合物：
其中Y和R3如上文所定义。
在另一实施方案中，本文提供了以下表示的化合物：
及其药物可接受的盐，其中：
每次出现时R33独立地选自H、卤素、NH-C1-3烷基、NH2、C1-6烷基和-O-C1-6烷基(其中每次出现时C1-6烷基被选自卤素和羟基的一个、两个或三个取代基任选取代)；
R34选自H或C1-3烷基；
R44和R45，当与和它们所连接的氮一起时，形成7元-10元双环螺环或桥接杂环，所述双环螺环或桥接杂环各自具有另外的选自O、S或NR55的杂原子，其中R55为H或C1-3烷基。
例如，R44和R45，当与和它们所连接的氮一起时，可以形成以下表示的7元-8元的双环桥接杂环：
其中D为O、S或NR55；E为O或(CH2)r，其中r为1或2，且V为O或NR55，其中R55为H或C1-3烷基。
在另一示例性实施方案中，R44和R45，当与和它们所连接的氮一起时，形成7元-10元螺环，所述螺环具有一个另外的选自O或NR55的杂原子，其中R55为H或C1-3烷基。可选地，R44和R45，与和它们所连接的氮一起可以是如上所述的Y取代基。
体现式I的结构的实例为：
本发明的优选组-式II化合物
优选地，至少一个R2是H。优选地，两个R2基团是H。
基团W是锌-螯合残基，即，能够与HDAC的活性位点中的锌结合的亲金属性试剂(metallophile)。合适的亲金属性试剂是本领域技术人员所已知的。
在优选实施方案中，W选自：
其中R1如权利要求1中所定义，Pr2为H或硫醇保护基团，Z选自O、S或NH并且T为N或CH。
当W为COOR1时，优选地R1不是卤素。更优选地，当W为COOR1时，R1为H或C1-C10烷基。
优选地，W为-COOH、-CONHOH、CONHSO2CH3、-CONHNHSO2CH3、-CONHNH2、-CONH(2-吡啶基)、-NHCONHOH、四唑、羟基吡啶-2-硫酮或羟基吡啶-2-酮。优选地，W不是COOR1。更优选地，W是COOMe、-CONHOH、CONHSO2CH3、-CONHNHSO2CH3、-CONHNH2、-CONH(2-吡啶基)、-NHCONHOH、四唑、羟基吡啶-2-硫酮或羟基吡啶-2-酮。甚至更优选地，W是-CONHOH、四唑、羟基吡啶-2-硫酮或羟基吡啶-2-酮。最优选地，W是-CONHOH。
在优选实施方案中，在至少一个L基团、优选两个L基团中，直接与X键合的原子是碳，并且至少一个氮原子直接与所述碳键合。
在实施方案中，至少一个L基团是5元杂芳基。优选地，至少一个L基团是6元杂芳基。甚至更优选地，两个L基团是6元杂芳基。
优选地，至少一个L基团是吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、噁二唑基、吡唑基、噻二唑基、吡嗪基、苯并稠合噻唑基、苯并稠合噁唑基或苯并稠合咪唑基。更优选地，至少一个L基团是吡啶基或吡嗪基。最优选地，一个L是吡嗪基并且一个L是吡啶基。优选地，当L是吡啶基时，其被杂芳基取代。优选地，所述杂芳基是任选取代的(优选被取代的)吡啶。
优选地，至少一个L基团是吡啶基、噁二唑基、吡唑基、噻二唑基、吡嗪基、苯并稠合噻唑基、苯并稠合噁唑基或苯并稠合咪唑基。
优选地，至少一个L基团是5元或6元杂芳基，其任选地与苯稠合。
优选地，Q是键或O。
优选地，R3是芳基。更优选地，R3是亚苯基或被卤素取代的亚苯基。
优选地，至少一个R2、优选两个R2是H。
在优选实施方案，至少一个R’是H、卤素、CF3、C1-C6烷基、被卤素任选取代的芳基或被卤素任选取代的杂芳基。优选地，烷基被至少一个卤素(优选为氟)取代。
在优选实施方案中，与R3连接的R’是氢或卤素。优选地，R3是氢或氟。更优选地，与R3连接的R’是氢。在优选实施方案中，至少一个R’，并且优选地，与L连接的R’中的至少一个是H、C1-C10烷基或O-(C1-C10烷基)。优选地，至少一个R/是取代或未取代的芳基或O-(取代或未取代的芳基)。优选地，至少一个R/是芳基或O-芳基，各自可以被卤素、氨基或C1-C10烷基取代。芳基可以在任何位置被取代。芳基可以是单取代的、双取代的或三取代的。
在优选实施方案中，至少一个R’，并且优选地，与L连接的R’中的至少一个是H、C1-C10烷基或O-(C1-C10烷基)、卤素、C1-C10杂环烷基、芳基(优选为任选取代的苯基)、三氟甲基或杂芳基，优选为杂芳基。优选地，当R’为杂芳基时，其是任选取代的吡啶基，优选为取代的吡啶基。
在一个实施方案中，至少一个与L连接的R’是OCH3或CH3。优选地，与L连接的R’中的至少一个是杂环烷基。优选地，杂环烷基是吗啉基。
在优选实施方案中，当Q是化学键时，R1是H、C1-C10烷基或O-(C1-C10烷基)、卤素(优选F)、C1-C10杂环烷基(优选吗啉基)、芳基(优选任选取代的苯基)、三氟甲基或杂芳基，优选为杂芳基。优选地，当R1是杂芳基时，其是任选取代的吡啶基，优选取代的吡啶基。
在优选实施方案中，R1是C1-C10烷基、C2-C10烯基或C2-C10炔基，优选地这些基团被卤素、NH2、NO2或羟基取代。更优选地，当R/或R1是C1-C10烷基时，其可以被卤素(优选为氟)取代。C1-C10烷基可以被至多10个卤素原子取代，或优选地，被至多5个卤素原子取代，即，1个、2个、3个、4个或5个卤素原子。例如，R/或R1可以是CF3、CHF2、CH2CF3、CH2CHF2或CF2CF3或OCF3、OCHF2、OCH2CF3、OCH2CHF2或OCF2CF3。
可以将R/取代至L基团的任意环原子上或R2基团的任意环原子上。
优选地，L和R3基团不具有除R’之外的其他取代。
优选地，Q是化学键。
优选地，除了N原子，L含有在杂芳基环中的至少一个选自N、O或S的其他杂原子。
在优选实施方案中，L是：
在优选实施方案中，L是氢键受体，并且优选地也不是氢键供体。优选地，L不具有与电负性原子例如N或O连接的氢原子。
氢键受体/供体的定义对于本领域技术人员而言是已知的。例如，氢键供体具有与电负性原子例如N或O连接的氢。例如，氢键受体具有N或O，其具有游离的孤对电子。
优选地，L的与权利要求1的式中的N原子直接键合的原子是碳，并且至少一个氮原子直接与所述碳(优选地通过双键)键合。更优选地，所述氮原子是氢键受体。
一般描述-组合物(组合)
本发明的药物组合物包含如上文定义的化合物和药物可接受的载体或稀释剂。本发明的药物组合物通常含有至多85wt％的本发明的化合物。更通常地，其含有至多50wt％的本发明的化合物。优选的药物组合物为无菌的且无热原的。此外，本发明提供的药物组合物通常含有为基本上纯的光学异构体的本发明的化合物。优选地，所述药物组合物包含本发明的化合物的药物可接受的盐形式。例如，包含所公开的化合物及药物可接受的赋形剂的药物可接受的组合物涵盖于本文中。
如本文所使用，药物可接受的盐为与药物可接受的酸或碱的盐。药物可接受的酸包括：无机酸，例如盐酸、硫酸、磷酸、焦磷酸、氢溴酸或硝酸；以及有机酸，例如柠檬酸、富马酸、马来酸、苹果酸、抗坏血酸、琥珀酸、酒石酸、苯甲酸、醋酸、甲磺酸、乙磺酸、水杨酸、硬脂酸、苯磺酸或对甲苯磺酸。药物可接受的碱包括：碱金属(例如钠或钾)氢氧化物和碱土金属(例如钙或镁)氢氧化物，以及诸如烷基胺、芳基胺或杂环胺的有机碱。
为避免产生疑义，本发明还包括前药，其在体内发生反应以产生本发明的化合物。
可以通过例如基于实施例，对本领域技术人员而言显而易见的合成路线来制备本发明的化合物。
可以以多种剂型施用本发明的化合物及包含该化合物的组合物。在一个实施方案中，可以将包含本发明的化合物的药物组合物配制成适于口服给药、直肠给药、肠胃外给药、鼻内给药或经皮给药或通过吸入或通过栓剂给药的形式。典型的给药途径为肠胃外给药、鼻内给药或经皮给药或者通过吸入给药。
可以口服施用本发明的化合物，例如以片剂、糖锭剂、锭剂、水性悬浮液或油性悬浮液、可分散的粉末剂或颗粒剂的形式。优选的本发明的药物组合物为适于口服给药的组合物，例如片剂和胶囊剂。在一些实施方案中，与具有非螺环或非桥接的杂环部分(例如在上述R2处)的化合物相比，所公开的化合物可以具有显著较高的口服生物利用度。
也可以肠胃外施用本发明的化合物，不论是皮下、静脉内、肌内、胸骨内、透皮或通过输注技术施用。还可以以栓剂的形式施用化合物。
还可以通过吸入施用本发明的化合物。与经口服途径摄取的许多药物相比，吸入药物的优势在于其直接递送至血液供给丰富的区域。因此，由于肺泡具有巨大的表面积和丰富的血液供给且绕开了首过代谢，因此吸收非常快速。另一个优势可以是治疗肺部系统的疾病，使得通过吸入递送药物，将它们递送至需要治疗的细胞的附近。
本发明还提供了含有此类药物组合物的吸入装置。通常，所述装置为定量吸入器(MDI)，其含有药物可接受的化学推进剂以将药物推出吸入器。
还可以通过鼻内给药来施用本发明的化合物。鼻腔的高渗透性组织非常易于接受药物并快速且有效地吸收药物，这胜过片剂形式的药物。与注射相比，经鼻递送药物具有较少的疼痛和侵入性，在患者中产生较少的焦虑。通过该方法，吸收非常快速且通常绕开了首过代谢，因此降低了患者之间的变异性。此外，本发明还提供含有此类药物组合物的鼻内装置。
还可以通过透皮给药来施用本发明的化合物。因此，本发明还提供了含有本发明的化合物的透皮贴剂。
还可以通过舌下给药来施用本发明的化合物。因此，本发明还提供包含本发明的化合物的舌下片剂。
还可以将本发明的化合物与降低物质通过除了患者的正常代谢之外的其它过程进行降解的试剂一起配制，所述试剂例如为抗菌剂或者蛋白酶抑制剂，所述蛋白酶可能存在于患者内或者存在于在患者体表上或患者体内生活的共生生物或寄生生物中，并且能够降解化合物。
用于口服给药的液体分散剂可以是糖浆、乳剂和悬浮剂。
悬浮剂和乳剂可以含有载体，例如天然胶、琼脂、海藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。用于肌内注射的悬浮剂或溶液可以含有与活性化合物一起的药物可接受的载体，例如无菌水、橄榄油、油酸乙酯、二醇(例如丙二醇)，并且若需要，含有适量的盐酸利多卡因。
用于注射或输注的溶液可以含有载体，例如，无菌水，或优选地，它们可以是无菌、水性、等渗盐水溶液的形式。
在本发明的试剂盒和/或方法提供多于一种药物的给药的情况下，所述药物可以同时、依序或分别施用。不必将它们包装在一起(但这是本发明的一个实施方案)。也不必将它们同时施用或者它们也不必在同一剂型中。如本文所使用的，“分别”施用意指将药物作为同一整体给药方案的一部分(其可以包含多天)进行施用，但是优选在同一天施用。如本文所使用，“同时”意指一起摄取药物或将药物配制成单一组合物。如本文所使用，“依序”意指在大约相同的时间施用药物，并且优选地彼此在约1小时内施用。
在一些实施方案中，当与HDAC抑制剂(例如，HDAC6特异性抑制剂)组合时，可以以某些剂量(例如，低于单药治疗的剂量)施用所公开的PI3K抑制剂，但是可以是治疗有效的。例如，HDAC抑制剂和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂的组合可以在有需要的个体的治疗中获得协同效应，其中所述组合以这样的剂量进行施用，即，当单独施用一种或两种化合物时该剂量不是有效的，但是当组合时该量是有效的。
一般公开内容-使用方法
本发明的组合物或化合物可以用于治疗和预防癌症，并且可以用于本发明的组合治疗中或用于其他组合中。当用于其他组合治疗时，通常将本发明的化合物与诸如铂复合物的小的化合物、抗代谢物、DNA拓扑异构酶抑制剂、辐射、基于抗体的治疗(例如赫赛汀和利妥昔单抗)、抗癌疫苗、基因治疗、细胞治疗、激素治疗或细胞因子治疗一起使用。
在本发明的一个实施方案中，在癌症治疗中将本发明的组合物进一步与另外的化学治疗剂或抗肿瘤剂组合使用。此类其他化学治疗剂或抗肿瘤剂的实例包括：包括顺铂和卡铂在内的铂复合物、米托蒽醌、诸如长春新碱和长春花碱的长春花生物碱、诸如道诺霉素和阿霉素的蒽环类抗生素、诸如苯丁酸氮芥和美法仑的烷化试剂、诸如紫杉醇的紫杉烷类、诸如甲氨蝶呤和雷替曲塞的抗叶酸剂、诸如依托泊苷的表鬼臼毒素、诸如伊立替康及其活性代谢物SN38的喜树碱类、以及DNA甲基化抑制剂，例如在WO02/085400中公开的DNA甲基化抑制剂。
因此，根据本发明，提供了含有本发明的组合物和另外的化学治疗剂或抗肿瘤剂的产品作为联合制剂，以同时、分别或依序地用于缓解癌症。根据本发明，还提供了本发明的化合物在制备通过与另外的化学治疗剂或抗肿瘤剂共同给药来缓解癌症的药物中的用途。可以以任意的顺序施用本发明的化合物和所述其他试剂。在这些情况下，本发明的化合物与其他试剂可以一起施用，或者如果分别施用，则以由医师确定的任意顺序施用。
还可以将本文公开的化合物组合用来治疗由于在人类患者的手术期间对身体组织的损害而引起的异常细胞增殖。这些损害可以由于诸如关节手术、肠道手术和瘢痕瘤疤痕(cheloid scarring)的各种手术程序引起。可以使用本发明的组合治疗的产生纤维化组织的疾病包括肺气肿。可以使用本发明治疗的反复性运动障碍包括腕管综合征。可以使用本发明治疗的细胞增殖病症的实例是骨肿瘤。
可以使用本发明的组合治疗的与器官移植相关的增殖反应包括引起潜在的器官排斥或相关并发症的增殖反应。具体而言，这些增殖反应可以在心脏、肺、肝、肾和其他身体器官或器官系统的移植期间发生。
可以使用本发明治疗的异常血管生成包括那些伴随有以下病症的异常血管生成：类风湿性关节炎、与缺血性再灌注相关的脑水肿和脑损伤、皮质缺血、卵巢增生和血管增多、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位、银屑病、糖尿病视网膜病变和其他眼部血管生成疾病，如早产儿视网膜病变(晶状体后纤维形成)，黄斑变性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼和Osler-Weber-Rendu综合征。
可以根据本发明治疗的与不受控制的血管生成相关的疾病的实例包括但不限于，视网膜/脉络膜新生血管和角膜新生血管形成。包括视网膜/脉络膜新生血管形成的一些成分的疾病的实例包括但不限于，Best氏病、近视、视盘先天性小凹(optic pits)、Stargart氏病、Paget氏病、静脉阻塞、动脉阻塞、镰状细胞性贫血、肉样瘤、梅毒、弹力纤维性假黄瘤颈动脉apo阻塞性疾病(pseudoxanthoma elasticum carotid apo structive diseases)、慢性葡萄膜炎/玻璃体炎、分枝杆菌感染、莱姆氏病、系统性红斑狼疮、早产儿视网膜病变、Eale氏病、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、Bechet氏病、引起视网膜炎或脉络膜炎的感染、拟眼组织胞浆菌病、睫状体扁平部炎、慢性视网膜脱落、高粘滞综合征、弓形体病、创伤并发症和激光后并发症、与红变相关的疾病(角度(angle)的新血管形成)、以及由纤维血管组织或纤维组织的异常增生引起的疾病，包括所有形式的增生性玻璃体视网膜病变。角膜新生血管形成的实例包括但不限于：流行性角膜结膜炎、维生素A缺乏症、接触透镜过度疲劳、过敏性角膜炎、上缘角膜炎、翼状胬肉干燥性角膜炎(pterygium keratitis sicca)、干燥综合征(sjogrens)、酒糟鼻(acne rosacea)、小水疱病(phylectenulosis)、糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变、角膜移植排斥、蚕蚀性角膜溃疡、Terrien氏角膜边缘变性、边缘性角质层分离、多动脉炎、Wegener结节病、巩膜炎、类天疱疮的放射状角膜切开术(periphigoidradial keratotomy)、新生血管性青光眼及晶状体后纤维组织形成、梅毒、分枝杆菌感染、脂质变性、化学灼伤、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯性疱疹感染、带状疱疹感染、原生动物感染和卡波西肉瘤。
还可以使用本发明的组合治疗与不受控制的血管生成相关的慢性炎性疾病。慢性炎症依赖毛细血管肉芽的持续形成以维持炎性细胞的流入。炎性细胞的流入和存在产生肉芽肿，并因此维持慢性炎性状态。单独使用本发明的组合或者与其他抗炎剂相组合地使用本发明的组合来抑制血管生成可以阻止肉芽肿的形成，并因此缓解疾病。慢性炎性疾病的实例包括但不限于：诸如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎的炎性肠病、银屑病、结节病和类风湿性关节炎。
诸如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎的炎性肠病是以胃肠道中多个位点的慢性炎症和血管生成为特征的。例如，克罗恩氏病作为慢性透壁性炎性疾病出现，其最常影响回肠末端和结肠，但也可以出现在从口腔至肛门的胃肠道的任何部位及肛周区域。患有克罗恩氏病的患者通常患有与腹痛相关的慢性腹泻、发烧、厌食、体重减轻和腹胀。溃疡性结肠炎也是出现在结肠粘膜中的慢性、非特异性、炎性和溃疡性疾病，并且其特征为存在出血性腹泻。这些炎性肠病通常由遍及胃肠道的慢性肉芽肿性炎症引起的，其包括由炎性细胞的圆柱状体包围的新毛细血管芽。通过这些抑制剂抑制血管生成可抑制肉芽的形成并阻止肉芽肿的形成。炎性肠病还表现出肠道以外的临床表现，例如皮肤病灶。此类病灶的特征为炎症和血管生成，并且可以发生在胃肠道之外的许多位点。通过本发明的组合抑制血管生成可以减少炎性细胞的流入并防止病灶形成。
结节病是特征为多系统性肉芽肿性病症的另一种慢性炎性疾病。该疾病的肉芽肿可以在身体的任何部位形成。因此，其症状取决于肉芽肿的位点以及所述疾病是否是活动性的。肉芽肿是由提供了恒定的炎性细胞供应的血管生成性毛细血管芽产生。通过使用本发明的组合抑制血管生成，可以抑制此类肉芽肿形成。银屑病也是慢性且复发性的炎性疾病，其特征为各种尺寸的丘疹和斑块。单独使用这些抑制剂或者结合其他抗炎剂使用这些抑制剂的治疗可阻止了维持特征性病变所必要的新血管的形成，并为患者提供症状的缓解。
类风湿性关节炎(RA)也是以外周关节的非特异性炎症为特征的慢性炎性疾病。认为关节的滑膜衬里中的血管经历了血管生成。除了形成新的血管网络之外，内皮细胞还释放了导致血管翳生长和软骨破坏的因子和活性氧物质。参与血管生成的因子可以有效地促进并帮助维持类风湿性关节炎的慢性发炎状态。单独使用本发明的组合或结合其他抗-RA剂使用本发明的组合的治疗可以阻止维持慢性炎症所必要的新血管的形成。
优选地，所述疾病状态为癌症、特别是包括慢性骨髓性白血病和急性骨髓性白血病在内的白血病、淋巴瘤、实体瘤，以及包括PTEN-阴性的血癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、皮肤癌、脑癌和前列腺癌在内的PTEN-阴性肿瘤和/或PTEN-缺陷性肿瘤(其中PTEN是指“在染色体10上删除的磷酸酶和张力蛋白同源体”)。更优选地，通过施用有效量的所公开的化合物在有需要的患者中待治疗的疾病状态是选自以下的病症：类风湿性关节炎、哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、多发性硬化、银屑病和其他炎性皮肤病症、系统性红斑狼疮、炎性肠病和器官移植排斥。例如，本文提供了治疗患有选自以下病症的患者的方法：白血病(包括，例如，慢性骨髓性白血病和急性骨髓性白血病)；淋巴瘤；诸如乳腺癌、肺癌或前列腺癌等实体瘤癌症；包括PTEN-阴性的血癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、皮肤癌、脑癌和前列腺癌在内的PTEN-阴性肿瘤(其中PTEN是指“在染色体10上删除的磷酸酶和张力蛋白同源体”)，所述方法包括施用有效量的所公开的化合物。
认为HDAC促成数种不同疾病的病理学和/或症状学，因此通过抑制HDAC来降低个体中HDAC的活性，可用于在治疗上解决这些疾病状态。本文描述了可以使用本发明的HDAC抑制剂与本发明的PI3K抑制剂联合治疗的各种疾病的实例。
可以使用本发明的组合治疗的一组适应症是涉及不期望的或不受控制的细胞增殖的那些适应症。此类适应症包括良性肿瘤、诸如原发性肿瘤和肿瘤转移的各种类型的癌症、再狭窄(例如冠状动脉、颈动脉和脑损伤)、内皮细胞的异常刺激(动脉粥样硬化)、由于手术对身体组织的损害、异常的伤口愈合、异常的血管生成、产生组织纤维化的疾病、反复性运动障碍、未高度血管化的组织的病症以及与器官移植相关的增殖反应。本发明的组合可用的更具体的适应症包括但不限于，前列腺癌、肺癌、急性白血病、多发性骨髓瘤、膀胱癌、肾癌、乳腺癌、结肠直肠癌、成神经细胞瘤和黑色素瘤。
在一个实施方案中，提供了用于治疗与不期望的和不受控制的细胞增殖相关的疾病的方法。该方法包括向患有不受控制的细胞增殖的个体施用治疗有效量的本发明的HDAC抑制剂与PI3K抑制剂的组合，使得所述不受控制的细胞增殖减少。待使用的抑制剂的具体剂量将取决于疾病状态的严重程度、给药途径和可由主治医生确定的相关因素。通常，可接受的且有效的日剂量是足以有效减缓或消除不受控制的细胞增殖的量。
本发明的组合还可以与其他试剂结合使用以抑制不期望的和不受控制的细胞增殖。可以与本发明的组合结合使用的其他抗细胞增殖剂的实例包括但不限于，视黄酸及其衍生物、2-甲氧基雌二醇、AngiostatinTM蛋白、EndostatinTM蛋白、苏拉明、角鲨胺、金属蛋白酶-I的组织抑制剂、金属蛋白酶-2的组织抑制剂、纤溶酶原激活物抑制剂-1、纤溶酶原激活物抑制剂-2、软骨源抑制剂、紫杉醇、血小板因子4、硫酸鱼精蛋白(鲱精蛋白)、硫酸化甲壳质衍生物(由后蟹壳制备)、硫酸化多糖肽聚糖复合物(sp-pg)、星孢菌素、基质代谢的调节剂，包括例如脯氨酸类似物((1-氮杂环丁烷-2-羧酸(LACA)、顺式羟基脯氨酸、d,l-3,4-脱氢脯氨酸、硫杂脯氨酸)、β-氨基丙腈富马酸酯、4-丙基-5-(4-吡啶基)-2(3H)-噁唑酮；甲氨蝶呤、米托蒽醌、肝素、干扰素、2巨球蛋白血清、chimp-3、胰凝乳蛋白酶抑制剂、β-环糊精十四硫酸酯、eponemycin；烟曲霉素、硫代苹果酸金钠、d-青霉胺(CDPT)、β-1-抗胶原酶血清、α-2-抗纤维蛋白溶酶、比生群、氯苯扎利二钠、n-(2-羧基苯基-4-氯代anthronilicacid二钠或"CCA"、沙利度胺；血管生成抑制胆固醇、羧基氨基咪唑；金属蛋白酶抑制剂例如BB94。其他可以使用的抗血管生成剂包括抗体，优选针对以下这些血管生成生长因子的单克隆抗体：bFGF、aFGF、FGF-5、VEGF同种型、VEGF-C、HGF/SF和Ang-1/Ang-2。Ferrara N.和Alitalo,K.“Clinical application of angiogenic growth factors and theirinhibitors”(1999)Nature Medicine5:1359-1364。
通常，良性肿瘤中的细胞保持其分化特征，并且不以完全不受控制的方式分裂。良性肿瘤通常是局部的且是非转移性的。可以使用本发明的组合治疗的具体类型的良性肿瘤包括血管瘤、肝细胞腺瘤、海绵状血管瘤、局灶性结节性增生、听神经瘤、神经纤维瘤、胆管腺瘤、胆管囊腺瘤(cystanoma)、纤维瘤、脂肪瘤、平滑肌瘤、间皮瘤、畸胎瘤、粘液瘤、结节性再生性增生、沙眼和化脓性肉芽肿。
在恶性肿瘤的情况下，细胞变成未分化的，不响应于身体的生长控制信号，并且以不受控制的方式繁殖。恶性肿瘤是侵入性的并且能够散布到远位(转移)。通常将恶性肿瘤分为两类：原发性和继发性。原发性肿瘤直接起因于其所在的组织。继发性肿瘤或转移瘤是源自身体中的其他部位，但现在已散布至远端器官的肿瘤。转移的常见途径是直接生长至邻近结构内，通过血管系统或淋巴系统散布，并沿着组织界面和体间隙(腹膜液、脑脊髓液等)行进。
可以使用所公开的本发明的HDAC抑制剂和PI3K抑制剂的组合治疗的具体类型的癌症或恶性肿瘤(原发性或继发性)包括但不限于，白血病、乳腺癌、皮肤癌、骨癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、脑癌、喉癌、胆囊癌、胰腺癌、直肠癌、甲状旁腺癌、甲状腺癌、肾上腺癌、神经组织癌、头颈癌、结肠癌、胃癌、支气管癌、肾癌、基底细胞癌、溃疡型和乳头型的鳞状细胞癌、转移性皮肤癌、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、网状细胞肉瘤(veticulum cell sarcoma)、骨髓瘤、巨细胞瘤、小细胞肺肿瘤、胆结石、胰岛细胞瘤、原发性脑肿瘤、急性和慢性的淋巴细胞瘤和粒细胞肿瘤、毛细胞瘤、腺瘤、增生、髓样癌、嗜铬细胞瘤、粘膜神经瘤、肠神经节瘤(intestinal ganglloneuromas)、增生性角膜神经瘤、马方样体质肿瘤(marfanoidhabitus tumour)、Wilms氏肿瘤、精原细胞瘤、卵巢瘤、平滑肌肿瘤(leiomyomatertumour)、宫颈非典型增生和原位癌、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、软组织肉瘤、恶性类癌、局部皮肤损害、蕈状霉菌病、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤、骨原性肉瘤和其他肉瘤、恶性高钙血症、肾细胞肿瘤、真性红细胞增多症、腺癌、多形性胶质母细胞瘤、白血病、淋巴瘤、恶性黑素瘤、表皮样癌和其他癌和肉瘤。
本发明的组合还可用于治疗由于在手术期间对身体组织的损害而引起的异常细胞增殖。这些损害可以由于诸如关节手术、肠道手术和瘢痕瘤疤痕(cheloid scarring)的各种手术程序引起。可以使用本发明的组合治疗的产生纤维化组织的疾病包括肺气肿。可以使用本发明治疗的反复性运动障碍包括腕管综合征。可以使用本发明治疗的细胞增殖病症的实例是骨肿瘤。
可以使用本发明的组合治疗的与器官移植相关的增殖反应包括引起潜在的器官排斥或相关并发症的增殖反应。具体而言，这些增殖反应可以在心脏、肺、肝、肾和其他身体器官或器官系统的移植期间发生。
结节病是特征为多系统性肉芽肿性病症的另一种慢性炎性疾病。该疾病的肉芽肿可以在身体的任何部位形成。因此，其症状取决于肉芽肿的位点以及所述疾病是否是活动性的。肉芽肿是由提供了恒定的炎性细胞供应的血管生成性毛细血管芽产生。通过使用本发明的组合抑制血管生成，可以抑制此类肉芽肿形成。银屑病也是慢性且复发性的炎性疾病，其特征为各种尺寸的丘疹和斑块。单独使用这些抑制剂或者结合其他抗炎剂使用这些抑制剂的治疗可阻止了维持特征性病变所必要的新血管的形成，并为患者提供症状的缓解。
类风湿性关节炎(RA)也是以外周关节的非特异性炎症为特征的慢性炎性疾病。认为关节的滑膜衬里中的血管经历了血管生成。除了形成新的血管网络之外，内皮细胞还释放了导致血管翳生长和软骨破坏的因子和活性氧物质。参与血管生成的因子可以有效地促进并帮助。单独的本发明的组合或结合其他抗-RA剂的本发明的组合可以阻止维持慢性炎症所必要的新血管的形成。
本发明的化合物还可用于治疗心脏/脉管系统疾病，如肥大、高血压、心肌梗死、再灌注、缺血性心脏病、心绞痛、心律不齐、高胆固醇血症、动脉粥样硬化和卒中。所述化合物还可用于治疗神经变性病症/CNS病症，如急性和慢性神经疾病，包括卒中、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩性侧索硬化症和阿尔茨海默氏病。
本发明的化合物还可用作抗微生物剂，例如抗细菌剂。因此，本发明还提供了用于治疗细菌性感染的化合物。本发明的化合物可用作对抗病毒、细菌、真菌和寄生虫感染的抗感染化合物。感染的实例包括原生动物性寄生虫感染(包括疟原虫、微小隐孢子虫、刚地弓形虫、神经肉孢子虫和艾美球虫属(Eimeria sp.))。
本发明的化合物特别适用于治疗不期望的或不受控制的细胞增殖，优选地适用于治疗良性肿瘤/增生和恶性肿瘤，更优选地适用于治疗恶性肿瘤，并且最优选地适用于治疗慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、T-细胞淋巴瘤。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物用于缓解癌症、心脏肥厚、慢性心力衰竭、炎性疾病状态、心血管疾病、血红蛋白病、地中海贫血、镰状细胞疾病、CNS病症、自身免疫疾病、器官移植排斥、糖尿病、骨质疏松症、MDS、良性前列腺增生症、口腔黏膜白斑、遗传相关的代谢紊乱、感染、Rubens-Taybi、脆性X综合征或α-1抗胰蛋白酶缺乏症或用于加速伤口愈合、用于保护毛囊或用作免疫抑制剂。
通常，所述炎性疾病状态为皮肤炎性疾病状态(例如银屑病、痤疮和湿疹)、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、类风湿性关节炎(RA)、炎性肠病(IBD)、克罗恩氏病或结肠炎。
通常，所述癌症为慢性淋巴细胞性白血病、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤或T-细胞淋巴瘤。
通常，所述心血管疾病为高血压、心肌梗死(MI)、缺血性心脏病(IHD)(再灌注)、心绞痛、心律不齐、高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、卒中、心肌炎、充血性心力衰竭、原发性和继发性即扩张型(充血性)心肌病、肥厚型心肌病、限制型心肌病、外周性血管疾病、心动过速、高血压或血栓形成。
通常，所述遗传相关的代谢紊乱为囊性纤维化(CF)、过氧化物酶体生物合成障碍或肾上腺脑白质营养不良。
通常，本发明的化合物用作器官移植后的免疫抑制剂。
通常，所述感染为病毒、细菌、真菌或寄生虫感染，特别地感染由金黄色葡萄球菌(S aureus)、痤疮丙酸杆菌(P.acne)、念珠菌(candida)或曲霉菌(aspergillus)引起。
通常，所述CNS病症为亨廷顿舞蹈病、阿尔茨海默氏病、多发性硬化症或肌萎缩性侧索硬化症。
在该实施方案中，本发明的化合物可用于缓解癌症、心脏肥厚、慢性心力衰竭、炎性疾病状态、心血管疾病、血红蛋白病、地中海贫血、镰状细胞疾病、CNS病症、自身免疫疾病、糖尿病或骨质疏松症，或用作免疫抑制剂。
本发明的化合物还可用于缓解慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、T-细胞淋巴瘤、心脏肥厚、慢性心力衰竭或皮肤炎性疾病状态，特别是银屑病、痤疮或湿疹。
本发明的化合物可用于治疗动物，优选地用于治疗哺乳动物并且更优选地用于治疗人。
在适当情况下，本发明的化合物可预防性地用于降低这类疾病状态的发病率。
在使用中，向患者施用治疗有效量的本发明的化合物。根据具体化合物的活性、待治疗的个体的年龄、体重和状态、疾病的类型和严重程度以及给药频率和给药途径，典型剂量为约0.001至50mg/kg体重。
现将通过以下实施例来例示本发明。
实施例-式I化合物
中间体X(式I化合物的前体)的合成
试剂和条件：1)K2CO3、乙醇酸乙酯、DMF，115℃；2)(i)氯磺酰基异氰酸酯、CH2Cl2，0-10℃然后室温(ii)水，75℃(iii)NaOH，最高温度40℃；3)POCl3、N,N-二甲基苯胺，107℃；4)吗啉、MeOH，室温；5)N,N,-二甲基丙烯酰胺、PdCl2(PPh3)2、NaOAc、DMF，110℃；6)NaIO4、OsO4、THF、水，室温；7)吲哚-4-硼酸频哪醇酯、PdCl2(PPh3)2、碳酸钠、二噁烷、水，102℃。
i.3-氨基-5-溴呋喃并[2,3-b]吡啶-2-羧酸乙酯
在N2(g)下，向10L烧瓶中添加5-溴-2-氯吡啶-3-甲腈(435g，2.0mol，1当量)、DMF(2790mL)和碳酸钾(553g，4.0mol，2当量)。接着添加乙醇酸乙酯(208.2mL，2.2mol，1.1当量)。将反应混合物加热至115℃过夜。一经完成，将反应混合物冷却至室温并加入水(13.1L)，这导致形成沉淀物。将混合物搅拌20min，然后过滤。将所得棕色固体在50℃下干燥，在Et2O:庚烷(9:1，2.8L)中打浆，并过滤以得到405.6g。使用TBME(4.5L)经索氏萃取法进行进一步纯化，产生黄色固体状的产物(186g,34％)。该工序重复两次。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δH：8.53(d,J＝2.0Hz,1H),8.07(d,J＝2.0Hz,1H),5.00(br.s.,2H),4.44(q,J＝7.0Hz,2H),1.44(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS(ES+)309(100％,[M+Na]+),307(100％,[M+Na]+)。
ii.12-溴-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),10,12-四烯-4,6-二酮
在0-10℃下，向溶于CH2Cl2(5.5L)中的3-氨基-5-溴呋喃并[2,3-b]吡啶-2-羧酸乙酯(239.0g，0.84mol，1当量)中滴加氯磺酰基异氰酸酯(87.6mL,1.0mol,1.2当量)。将所得到的反应搅拌30min，汽提至干燥并将所得到的固体研磨成细粉。将水(5.5L)添加至所述固体中并将悬浮液在75℃下加热1h。在冷却至室温之后，添加固体NaOH(335g,8.4mol,10当量)使得反应放热(最高温度40℃)。将反应冷却至0-10℃并使用5M HCl(～1L)将pH调节至5-6。将反应搅拌30mins，然后过滤。用水(2.3L)洗涤固体并吸干。在40℃的真空烘箱中进一步干燥，产生褐色固体状的产物(193g,76％)。该工序重复两次。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δH：12.01(br.s.,1H),11.58(br.s,1H),8.72(d,J＝2.0Hz,1H),8.59(d,J＝2.0Hz,1H)。
MS(ES-)282(100％,[M+H]+)。
iii.12-溴-4,6-二氯-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯
向12-溴-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),10,12-四烯-4,6-二酮(387g,1.27mol,1当量)中添加POCl3(6070mL)和N,N-二甲基苯胺(348mL,2.8mol,2.2当量)。将混合物在107℃下加热10h。一旦冷却至室温，在真空下用甲苯(3×3.9L)共沸去除溶剂。将所得到的残余物在CH2Cl2(12.76L)和水(3.9L)之间分配，并将相分离。用水(2×3.9L)洗涤有机相。将合并的水相用CH2Cl2(7.7L)反萃取，并将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并汽提，以产生棕色固体状产物(429g,～定量)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δH：8.78(d,J＝2.5Hz,1H),8.72(d,J＝2.5Hz,1H)。
iv.12-溴-4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯
在室温下，向12-溴-4,6-二氯-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯(419.3g,1.32mol,1当量)的MeOH(8588mL)中添加吗啉(259mL,2.90mol,2.2当量)。在搅拌2h后，添加水(0.8L)。然后冷却至0-5℃并再搅拌30min。将所得到的固体过滤，用水(5.2L)洗涤并吸干。通过硅胶柱色谱法，使用CH2Cl2/EtOAc(1:0-9:1)进一步纯化，产生期望的产物(419g,84％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δH:8.66(d,J＝2.0Hz,1H),8.62(d,J＝2.0Hz,1H),4.07-4.21(m,4H),3.85-3.91(m,4H)。
MS(ES+)393(100％,[M+Na]+),391(80％,[M+Na]+)。
v.(2E)-3-[4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯-12-基]-N,N-二甲基丙-2-烯酰胺
向12-溴-4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯(60g,0.15mol,1当量)中添加在DMF(1.2L)中的N,N-二甲基丙烯酰胺(16.7mL,0.15mol,1当量)、PdCl2(PPh3)2(3.4g,4.5mmol,0.03当量)和NaOAc(40g,0.45mol,3当量)。将反应在110℃下加热7h。该过程重复3次并合并所有批次。一旦冷却至室温，在真空中去除溶剂并将所得到的残余物在CH2Cl2(6.5L)和水(5.5L)之间分配。将相分离并用CH2Cl2(2×4L)萃取水相。将合并的有机相用盐水(2×4L)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并汽提。将所得到的固体在EtOAc/庚烷(1:1,0.8L)中打浆30min，过滤，洗涤并用EtOAc/庚烷(1:1、2×450mL)洗涤。在40℃的真空烘箱中进一步干燥，产生橙色固体状的期望产物(203.0g,86％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δH:8.70(s,2H),7.82(d,J＝15.6Hz,1H),7.07(d,J＝15.6Hz,1H),4.11-4.19(m,4H),3.85-3.93(m,4H),3.22(s,3H),3.11(s,3H)。
MS(ES+)388(100％,[M+H]+)。
vi.4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯-12-甲醛
在65℃下，将(2E)-3-[4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯-12-基]-N,N-二甲基丙-2-烯酰胺(124.0g,0.39mol,1当量)溶于THF(12.4L)中。一旦冷却至35℃，添加水(4.1L)、NaIO4(205.4g,1.17mol,3当量)和OsO4(2.5wt％在tBuOH中,80.3mL,2％)。将反应在室温下搅拌60h。将反应冷却至0-5℃，搅拌30min然后过滤。将固体用水(545mL)洗涤并吸干。将粗产物与另外两个批次(2×118.3g规模)合并，并在室温下在水(6.3L)中打浆30min。将固体过滤，用水(1.6L)洗涤并吸干。在真空烘箱中进一步干燥，产生粉色固体状的期望产物(260g,88％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3:MeOD,9:1)δH:10.13(s,1H),9.04(d,J＝2.0Hz,1H),8.91(d,J＝2.0Hz,1H),3.99-4.13(m,4H),3.73-3.84(m,4H)。
MS(ES+)351(100％,[M+MeOH+H]+)。
vii.4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02 ,7]十三碳-1(9),2,4,6,10,12-六烯-12-甲醛
向4-氯-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(9),2(7),3,5,10,12-六烯-12-甲醛(164.4g,0.52mol,1当量)中添加在二噁烷(16.4L)/水(5.8L)中的吲哚-4-硼酸频哪醇酯(376.0g,1.55mol,3当量)、PdCl2(PPh3)2(72.0g,0.10mol,2当量)和碳酸钠(110.2g,1.04mol,2当量)。将反应混合物回流1h。然后将其冷却至60℃-70℃。添加水(9.8L)、盐水(4.9L)和EtOAc(9.5L)。将相分离，并在60℃-65℃下用EtOAc(3×9.5L)萃取水相。将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并汽提。将所得到的固体在CH2Cl2(4.75L)中打浆30min，过滤，用CH2Cl2(3×238mL)洗涤并吸干。在40℃下的真空烘箱中进一步干燥，产生黄色固体状的中间体X(135.7g,66％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:11.27(br.s,1H),10.26(s,1H),9.16(d,J＝2.3Hz,1H),9.11(d,J＝2.3Hz,1H),8.18(d,J＝7.5Hz,1H),7.58-7.67(m,2H),7.49(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(t,J＝7.7Hz,1H),4.08-4.16(m,4H),3.83-3.90(m,4H)。
MS(ES+)432.0(100％,[M+MeOH+H]+)。
本发明所用的式(i)化合物的实施例的合成
实施例A：
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基甲基]-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(7.00g,17.53mmol,1当量)、(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(7.13g,52.58mmol,3当量)和NaOAc(4.31g,52.58mmol,3当量)的无水CH2Cl2(150mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(7.43g,35.06mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1N NaOH(100mL)分配并用CH2Cl2(3×200mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，然后经MgSO4干燥，在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，使用EtOAc/MeOH(1:0-7:1)进行纯化，产生白色固体状的产物A(6.02g,71％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:8.65(d,J＝2.1Hz,1H),8.58(d,J＝2.1Hz,1H),8.37(br.s.,1H),8.24(dd,J＝7.5,0.9Hz,1H),7.62(td,J＝2.6,0.8Hz,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.37-7.41(m,1H),7.31-7.37(m,1H),4.47(s,1H),4.22-4.30(m,4H),4.18(d,J＝8.1Hz,1H),3.98(d,J＝2.3Hz,2H),3.91-3.97(m,4H),3.70(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),3.53(s,1H),2.94(dd,J＝10.0,1.5Hz,1H),2.64(d,J＝10.2Hz,1H),1.97(dd,J＝9.8,1.9Hz,1H),1.80(dt,J＝9.8,1.1Hz,1H)。
MS(ES+)483.1(100％,[M+H]+)。
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基甲基]-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯；甲磺酸
将A(5.98g,12.38mmol,1当量)溶于热的EtOAc(1L)和THF(200mL)中。一旦冷却至室温，缓慢添加MsOH(884μL,13.6mmol,1.1当量)的EtOAc(5mL)溶液。立即形成黄色沉淀物。将悬浮液剧烈振荡10s，然后在室温下静置过夜。随着固体沉降，倾倒出过量的上清液(200mL)，然后添加EtOAc(200mL)。再次振荡悬浮液并静置1h。将该操作重复两次，然后在真空中去除溶剂。获得黄色固体状的A的盐形式(6.50g,91％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δH:11.33(br.s.,1H),9.69-10.24(m,1H),9.05(d,J＝2.1Hz,1H),8.79-8.93(m,1H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),7.54-7.62(m,2H),7.50(t,J＝2.7Hz,1H),7.24(t,J＝7.7Hz,1H),4.64-4.89(m,2H),4.47-4.61(m,2H),4.14(m,4H),3.94-4.00(m,2H),3.83-3.91(m,4H),3.72-3.83(m,1H),3.29-3.46(m,2H),2.33(s,4H),2.02-2.15(m,1H)。
MS(ES+)483.1(100％,[M-MsOH+H]+)。
实施例B:
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-{2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基甲基}-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(3.108g,7.78mmol 1当量)、2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷半草酸盐(4.02g,23.3mmol,3当量)和NaOAc(1.91g,23.3mmol,3当量)的无水CH2Cl2(280mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(3.30g,15.6mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1N NaOH(150mL)分配并用CH2Cl2(2×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用50％盐水(100mL)洗涤，然后经MgSO4干燥，并在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，用EtOAc/MeOH(1:0-8:1)进行纯化，产生灰白色固体状的产物B(3.154g,79％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:8.59(d,J＝2.1Hz,1H),8.53(d,J＝1.9Hz,1H),8.41(br.s.,1H),8.24(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.3Hz,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.37-7.41(m,1H),7.34(t,J＝7.9Hz,1H),4.43(s,4H),4.22-4.30(m,4H),3.86-4.00(m,4H),3.68(s,2H),2.23-2.59(m,4H),1.83-2.00(m,4H)。
MS(ES+)511.1(100％,[M+H]+)。
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-{2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基甲基}-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯；甲磺酸
在室温下，向B(2.987g,5.854mmol,1当量)的EtOAc(1.2L,加热至70℃并持续5min以溶解)溶液中添加MsOH(590μL,6.14mmol,1.05当量)的EtOAc(16mL)溶液。立即形成黄色沉淀物。将悬浮液剧烈振荡20s，然后在室温下静置过夜。倾倒出过量的上清液(600mL)，然后添加EtOAc(500mL)。再次振荡悬浮液并静置1h，然后再倾倒出500mL过量的上清液。在真空中去除溶剂，得到黄色固体状的F的盐形式(3.230g,91％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δH:11.33(br.s.,1H),9.45(br.s.,1H),8.90(d,J＝1.9Hz,1H),8.72(d,J＝1.9Hz,1H),8.19(d,J＝7.3Hz,1H),7.41-7.69(m,3H),7.23(t,J＝7.8Hz,1H),4.58(d,J＝3.8Hz,2H),4.39(s,2H),4.29(s,2H),4.03-4.22(m,4H),3.81-3.97(m,4H),3.40(d,J＝12.1Hz,2H),2.88-3.13(m,2H),2.33(s,3H),2.26(d,J＝13.9Hz,2H),1.69-1.91(m,2H)。
MS(ES+)511.1(100％,[M-MsOH+H]+)。
实施例C：
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-{8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基甲基}-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(100mg,0.25mmol,1当量)、8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷盐酸盐(112mg,0.75mmol,3当量)和NaOAc(62mg,0.75mmol,3当量)的无水CH2Cl2(10mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(106mg,0.50mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1NNaOH(10mL)分配，用CH2Cl2(3×10mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，然后经MgSO4干燥，并在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，用EtOAc/MeOH(1:0-49:1)进行纯化，产生灰白色固体状的产物C(116mg,93％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:8.56(d,J＝3.6Hz,2H),8.35(br.s.,1H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),7.58-7.66(m,1H),7.51-7.57(m,1H),7.31-7.44(m,2H),4.30-4.38(m,2H),4.23-4.30(m,4H),3.89-4.01(m,4H),3.68(s,2H),2.61(d,J＝10.7Hz,2H),2.40-2.52(m,2H),1.96-2.09(m,2H),1.83-1.95(m,2H)。
MS(ES+)497.1(100％,[M+H]+)。
实施例D：
4-(1H-吲哚-4-基)-12-({2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基}甲基)-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(1.02g,2.55mmol,1当量)、2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐(1.46g,7.66mmol,3当量)和NaOAc(628mg,7.66mmol,3当量)的无水CH2Cl2(100mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(1.08g,5.1mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1N NaOH(30mL)分配，并用CH2Cl2(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，然后经MgSO4干燥并在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，用CH2Cl2/MeOH(0:1-4:1)进行纯化，产生白色固体状的产物D(890mg,65％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:8.60(d,J＝2.1Hz,1H),8.54(d,J＝2.1Hz,1H),8.39(br.s.,1H),8.24(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),7.62(t,J＝2.3Hz,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.38(t,J＝2.8Hz,1H),7.30-7.37(m,1H),4.21-4.31(m,4H),3.89-3.99(m,4H),3.69(s,2H),2.59(t,J＝6.8Hz,2H),2.38-2.50(m,5H),2.35(s,3H),1.54-1.73(m,7H)。
MS(ES+)538.2(100％,[M+H]+)。
4-(1H-吲哚-4-基)-12-({2-甲基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基}甲基)-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯；双(甲磺酸)
将化合物D(821mg,1.52mmol,1当量)溶于热EtOAc(400mL)中。一旦冷却至室温，缓慢添加MsOH(218μL,3.36mmol,2.2当量)的EtOAc(5mL)溶液。立即形成黄色沉淀物。将悬浮液剧烈振荡10s，然后在室温下静置过夜。随着固体沉降，倾倒出过量的上清液(200mL)，然后添加EtOAc(200mL)。再次振荡悬浮液并静置1h。将该操作重复两次，然后在真空中去除溶剂。获得黄色固体状的D的盐形式(1.037g,93％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δH:11.32(br.s.,1H),9.46-10.03(m,2H),8.93(d,J＝2.1Hz,1H),8.76(d,J＝1.7Hz,1H),8.19(dd,J＝7.4,0.7Hz,1H),7.53-7.60(m,2H),7.50(t,J＝2.6Hz,1H),7.24(t,J＝7.8Hz,1H),4.63(br.s.,2H),4.10-4.20(m,4H),3.82-3.91(m,5H),3.54-3.77(m,2H),3.36-3.51(m,2H),3.05-3.25(m,3H),2.89-3.03(m,1H),2.80-2.89(m,3H),2.36(s,6H),2.02-2.17(m,1H),1.65-1.95(m,4H)。
MS(ES+)538.2(100％,[M-2MsOH+H]+)。
实施例E：
4-(1H-吲哚-4-基)-12-({7-甲基-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基}甲基)-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(250mg,0.63mmol,1当量)、2-甲基-2,7-二氮杂螺[4,4]壬烷二盐酸盐(400mg,1.87mmol,3当量)和NaOAc(305mg,3.70mmol,6当量)的无水CH2Cl2(20mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(265mg,1.25mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1N NaOH(10mL)分配，用CH2Cl2(3×10mL)和EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，然后经MgSO4干燥并在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，用CH2Cl2/MeOH(0:1-4:1)进行纯化，产生白色固体状的产物E(169mg,52％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δH:8.58(d,J＝2.1Hz,1H),8.53(d,J＝2.1Hz,1H),8.48(br.s.,1H),8.23(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),7.63(t,J＝2.2Hz,1H),7.53(d,J＝7.9Hz,1H),7.39(t,J＝2.7Hz,1H),7.29-7.36(m,1H),4.21-4.30(m,4H),3.89-3.99(m,4H),3.72-3.85(m,2H),2.49-2.83(m,8H),2.45(s,3H),1.81-2.06(m,4H)。
MS(ES+)524.1(100％,[M+H]+)。
4-(1H-吲哚-4-基)-12-({7-甲基-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基}甲基)-6-(吗啉-4-基)-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯；双(甲磺酸)
将化合物E(129mg,0.25mmol,1当量)溶于热EtOAc(50mL)中。一旦冷却至室温，缓慢添加MsOH(35μL,0.54mmol,2.2当量)的EtOAc(2mL)溶液。立即形成黄色沉淀物。将悬浮液剧烈振荡10s，然后在室温下静置过夜。随着固体沉降，倾倒出过量的上清液(20mL)，然后添加EtOAc(20mL)。再次振荡悬浮液并静置1h。将该操作重复两次，然后在真空中去除溶剂。获得黄色固体状的E的盐形式(173mg,98％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δH:11.33(br.s.,1H),10.39(br.s.,1H),9.72-10.12(m,1H),8.73-9.09(m,2H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),7.41-7.63(m,3H),7.24(t,J＝7.8Hz,1H),4.53-4.87(m,2H),4.10-4.22(m,4H),3.79-3.93(m,4H),3.32-3.77(m,6H),2.99-3.29(m,2H),2.78-2.89(m,3H),2.36(s,6H),1.87-2.22(m,3H)。
MS(ES+)524.5(100％,[M-2MsOH+H]+)。
实施例F：
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-[(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基甲基]-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
向中间体X(200mg,0.50mmol,1当量)、(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(204mg,1.50mmol,3当量)和NaOAc(123mg,1.5mmol,3当量)的无水CH2Cl2(10mL)悬浮液中添加NaBH(OAc)3(160mg,0.76mmol,2当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其用1N NaOH(20mL)分配，并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。使合并的有机萃取物通过相分离器，并在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法，用EtOAc/MeOH(1:0-9:1)进行纯化，产生白色固体状的产物F(141.1mg,59％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δH:8.64(d,J＝2.1Hz,1H),8.57(d,J＝2.1Hz,1H),8.35(br.s.,1H),8.23(dd,J＝7.5,0.9Hz,1H),7.62(m,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.36-7.39(m,1H),7.31-7.36(m,1H),4.46(s,1H),4.25(m,4H),4.18(d,J＝8.1Hz,1H),3.97(d,J＝2.3Hz,2H),3.93-3.97(m,4H),3.68(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),3.53(s,1H),2.93(dd,J＝10.0,1.5Hz,1H),2.62(d,J＝10.2Hz,1H),1.95(dd,J＝9.8,1.9Hz,1H),1.79(dt,J＝9.8,1.1Hz,1H)。
MS(ES+)483.1(100％,[M+H]+)。
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-[(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基甲基]-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯；甲磺酸
将化合物F(141mg,0.29mmol,1当量)溶于热EtOAc(100mL)中，然后在剧烈涡旋下用0.87ml的0.308M MsOH的EtOAc溶液处理。将混合物静置过夜。倾去过量的上清液(使用小的巴斯德移液管(Pasteur pipette))，并添加更多的EtOAc(50ml)。将悬浮液再次剧烈振荡，然后在室温下静置过夜。再一次倾去过量的上清液，并在真空中去除溶剂。将所得到的固体在40℃的真空烘箱中干燥。获得黄色固体状的F的盐形式(160mg,95％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δH:11.33(br.s.,1H),9.65-10.16(m,1H),9.05(d,J＝2.0Hz,1H),8.83-8.90(m,1H),8.20(d,J＝7.3Hz,1H),7.58-7.61(m,1H),7.56(d,J＝7.8Hz,1H),7.51(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(t,J＝7.7Hz,1H),4.82(dd,J＝13.1,4.5Hz,1H),4.65-4.76(m,1H),4.50-4.59(m,2H),4.11-4.19(m,4H),3.99(d,J＝9.6Hz,1H),3.88(t,J＝4.5Hz,4H),3.78(dd,J＝9.5,1.4Hz,1H),3.31-3.38(m,2H),2.52-2.57(m,1H),2.30(s,3H),2.02-2.18(m,1H)。
MS(ES+)483.2(100％,[M-MsOH+H]+)。
实施例G
4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-{6-氧杂-1-氮杂螺[3.3]庚-1-基甲基}-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯
在室温下，将中间体X(125mg,0.31mmol)、6-氧杂-1-氮杂螺[3.3]庚烷半草酸盐(134mg,0.93mmol,3当量)和NaOAc(76mg,0.93mmol,3当量)悬浮于CH2Cl2(16mL)中。将混合物搅拌15min，然后添加NaBH(OAc)3(131mg,0.62mmol,2当量)。将所得到的悬浮液在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用0.5N NaOH(8mL)分配，并用CH2Cl2(2×10mL)萃取。将合并的有机相用50％盐水(5mL)洗涤，然后经MgSO4干燥并在真空中去除溶剂。将残余物溶于DMSO(2mL)中，并通过基本的制备型LCMS纯化，产生白色固体状的G(48mg,32％)。
1H NMR(DMSO-d6)δH:11.30(br s,1H),8.62(s,2H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.51-7.58(m,2H),7.46-7.51(m,1H),7.22(t,J＝7.7Hz,1H),4.89(d,J＝7.6Hz,2H),4.55(d,J＝7.3Hz,2H),4.08-4.17(m,4H),4.03(s,2H),3.81-3.91(m,4H),3.03(t,J＝6.7Hz,2H),2.32(t,J＝6.7Hz,2H)。
MS(ES+)483.3(100％,[M+H]+)。
实施例-式II化合物
通用方法
i.合成仲胺的通用程序
方法A(使用BINAP):将4,6-二甲基吡啶-2-胺(200mg,1.63mmol)、2-溴-5-氟吡啶(317mg,1.8mmol)、叔丁醇钾(236mg,2.45mmol)和(±)-BINAP(40mg,0.06mmol)在甲苯(4mL)中搅拌，并且用Ar(g)脱气30min。然后添加Pd2(dba)3(45mg,0.049mmol)，并将反应混合物在Ar(g)下在90℃搅拌12h。通过TLC监控该反应。在起始材料被完全消耗之后，用CH2Cl2(20mL)稀释该反应混合物并添加二氧化硅。在真空中去除溶剂，并通过硅胶柱色谱法，用己烷/EtOAc(4:1-1:1)纯化所得的干燥的负载材料，以提供N-(5-氟吡啶-2-基)-4,6-二甲基吡啶-2-胺。
方法B(使用SPhos):将2-溴吡啶(200mg,1.26mmol)、5-甲基吡啶-2-胺(150mg,1.38mmol)、叔丁醇钾(182mg,1.89mmol)及2-二环己基膦-2’,6’-二甲氧基联苯(SPhos)(20mg,0.05mmol)在甲苯(4mL)中搅拌，并且该反应混合物用Ar(g)脱气30min。然后添加Pd2(dba)3(34mg,0.037mmol)，并将反应混合物在Ar(g)中在90℃搅拌12h。通过TLC监控该反应。在起始材料被完全消耗之后，用CH2Cl2(20mL)稀释该反应混合物并添加二氧化硅。在真空中去除溶剂，并通过硅胶柱色谱法，用己烷/EtOAc(4:1-1:1)纯化所得的干燥的负载材料，以提供N-(吡啶-2-基)-5-甲基吡啶-2胺。
a)3-甲氧基-N-(5-甲基吡啶-2-基)吡啶-2-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.44(d,J＝8.6Hz,1H),8.02-8.13(m,1H),7.73-7.93(m,2H),7.48(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),6.99(dd,J＝7.8,1.5Hz,1H),6.83-6.71(m,1H),3.89(s,3H),2.27(s,3H)。
b)5-甲氧基-N-(5-甲基吡啶-2-基)吡啶-2-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.04(d,J＝2.5Hz,1H),7.95(d,J＝3.0Hz,1H),7.50(d,J＝9.0Hz,1H),7.40(dd,J＝8.4,2.6Hz,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.22(dd,J＝9.0,3.1Hz,1H),3.87(m,3H),2.25(s,3H)。
c)3-甲氧基-N-(5-吗啉基吡啶-2-基)吡啶-2-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.45(d,J＝9.1Hz,1H),7.94(d,J＝3.0Hz,1H),7.83(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),7.31(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),6.98(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),6.73(dd,J＝7.8,5.1Hz,1H),3.76-3.98(m,7H),3.06-3.16(m,4H)。
d)5-甲氧基-N-(5-吗啉基吡啶-2-基)吡啶-2-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:7.90(dd,J＝15.8,3.0Hz,2H),7.43(d,J＝9.0Hz,2H),7.19-7.30(m,2H),3.87(t,J＝4.8Hz,4H),3.82(s,3H),3.00-3.16(m,4H)。
e)N-(吡啶-2-基)噻吩并[3,2-c]吡啶-4-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.58(d,J＝8.4Hz,1H),8.26(dd,J＝5.1,2.0Hz,1H),8.12(d,J＝5.7Hz,1H),7.72(ddd,J＝8.8,7.1,1.9Hz,1H),7.51(d,J＝5.9Hz,1H),7.46(d,J＝5.4Hz,1H),7.38(d,J＝5.7Hz,1H),6.93(ddd,J＝7.1,4.8,1.0Hz,1H)。
f)6-甲基-N-(5-吗啉基吡啶-2-基)吡啶-2-胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:7.94(d,J＝3.0Hz,1H),7.40-7.59(m,2H),7.24(d,J＝8.1Hz,2H),6.66(d,J＝7.3Hz,1H),3.80-3.96(m,4H),3.01-3.17(m,4H),2.45(s,3H)。
g)N-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-c]吡啶-4-胺
根据通用程序中的方法A(使用BINAP)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.82(d,J＝8.5Hz,1H),8.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.83(dd,J＝18.3,10.3Hz,2H),7.51(s,1H),7.44(d,J＝5.7Hz,1H),7.29(d,J＝7.4Hz,1H)。
h)N5-(2-甲氧基乙基)-N5-甲基-N2-(4-(三氟甲基)吡啶-2-基)吡啶-2,5-二胺
根据通用程序中的方法A(使用BINAP)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.32(d,J＝5.2Hz,1H),7.87(d,J＝3.1Hz,1H),7.70-7.78(m,1H),7.29-7.37(m,1H),7.15(dd,J＝9.0,3.1Hz,1H),6.88-6.98(m,1H),3.54-3.59(m,2H),3.48(t,J＝5.5Hz,2H),3.37(s,3H),2.98(s,3H)。
i)N5-(2-甲氧基乙基)-N2-(3-甲氧基吡啶-2-基)-N5-甲基吡啶-2,5-二胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:8.37(d,J＝9.1Hz,1H),7.81(q,J＝1.7Hz,2H),7.19(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),6.96(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),6.70(dd,J＝7.8,5.1Hz,1H),3.88(s,3H),3.56(t,J＝5.8Hz,2H),3.45(t,J＝5.8Hz,2H),3.36(s,3H),2.96(s,3H)。
j)N5-(2-甲氧基乙基)-N2-(5-甲氧基吡啶-2-基)-N5-甲基吡啶-2,5-二胺
根据通用程序中的方法B(使用SPhos)合成。
1H NMR(400MHz,氯仿-d),δH ppm:7.89(d,J＝3.0Hz,1H),7.74(d,J＝3.1Hz,1H),7.45(d,J＝9.1Hz,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),7.19(ddd,J＝12.0,9.0,3.1Hz,2H),3.82(s,3H),3.55(t,J＝5.8Hz,2H),3.43(t,J＝5.8Hz,2H),3.36(s,3H),2.94(s,3H)。
iii.烷基化和异羟肟酸形成的通用程序
在0℃下，在Ar(g)中将NaH(12mg,0.5mmol,2当量)分批加入到在DMF(2mL)中的仲胺(50mg,0.25mmol,1当量)中。添加之后，将反应混合物搅拌20min，然后加入4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(57mg,0.25mmol,1当量)。在室温下在Ar(g)中将反应混合物搅拌2h，并通过TLC监控该反应。在起始材料被完全消耗之后，将反应混合物倾入盐水(25mL)中，用EtOAc(3×25mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法，用己烷/EtOAc(19:1-3:1)纯化所得的粗产物，以提供粘性的淡黄色固体状的所期望的甲酯。
在0℃下，在惰性气氛中向甲酯(70mg,0.20mmol)在MeOH/CH2Cl2(3:1,4mL)中的搅拌溶液中添加50％羟胺水溶液(2.5mL)，并将所得的反应混合物搅拌20min。然后将氢氧化钠溶液(54mg在1mL水中,1.35mmol)添加至反应混合物中；随后搅拌30min，然后将混合物升温至室温并搅拌2h。通过TLC监控该反应。在起始材料被完全消耗之后，在真空中浓缩挥发物。用乙酸将残余物酸化至pH～6。用CH2Cl2/MeOH(9:1)(3×20mL)萃取该化合物；将合并的有机萃取物在真空中浓缩以获得粗产物，通过硅胶柱色谱法(1-10％MeOH/CH2Cl2)纯化该粗产物，获得粘性的淡黄色固体状的期望产物。
具体实施例
实施例A
4-{[双(吡啶-2-基)氨基]甲基}-N-羟基苯甲酰胺
在室温下，将NaH(83mg,2.18mmol)加入到在DMF(5mL)中的2,2’-联吡啶胺(2)(373mg,2.18mmol)。15min后，添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(1)(500mg,2.18mmol)，并且随后在90℃下在Ar(g)中将反应混合物搅拌1h。一旦冷却至室温，将反应混合物倾入盐水(50mL)中并用EtOAc(2×25mL)萃取两次。合并有机相，经MgSO4干燥，过滤，随后在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法，用己烷/EtOAc(4:1)纯化所得的残余物，提供白色固体状的3(429mg,62％)。
LCMS(ES):实测值319.9[M+H]+。
在0℃下，将新鲜制备的NH2OH的MeOH溶液(0.4M,20mL)添加至4-{[双(吡啶-2-基)氨基]甲基}苯甲酸酯(3)(100mg,0.3mmol)，随后添加溶于MeOH中的KOH(0.8M,4mL)。然后在室温下将该反应混合物搅拌18h，随后在真空中浓缩(大约5mL)并倾入水(50mL)中。首先将碱性的水相用EtOAc(25mL)萃取，并将相分离。然后将水相用2N HCl中和，并再次用EtOAc(25mL)萃取。所得的有机相经MgSO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩，提供白色固体状的实施例A(51mg,51％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:6.69-6.76(m,2H),6.07-6.15(m,4H),5.91(d,J＝8.6Hz,2H),5.65(d,J＝8.1Hz,2H),5.44(dd,J＝6.6,5.1Hz,2H),3.97(s,2H)。
LCMS(ES):实测值321.1[M+H]+。
实施例B
4-{[双(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基]甲基}-2氟-N-羟基苯甲酰胺
将NaH(60％，在油中)(50mg)添加至3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(1)(115mg,1mmol)的NMP(2mL)溶液中。10min之后，添加5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(2)(140mg,1.05mmol)并将所得的混合物在45℃下在N2(g)中搅拌。在4h后，将反应混合物用EtOAc稀释并用饱和的碳酸氢盐溶液萃取(×3)。分析表明，所有的期望产物都在水相中。将合并的水相浓缩至干；将所得的残余物用MeCN(2×100mL)打浆并过滤。浓缩滤液以油/NMP溶液形式提供(3)(700mg)。
LCMS(ES):实测值214.0[M+H]+。
将碳酸钾(360mg)和4-(溴甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(4)(160mg,0.65mmol)添加至3-甲基-N-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(<1mmol)的MeCN(10mL)溶液中，并且在N2(g)中、在50℃下加热并搅拌反应混合物。在2h后，将反应混合物冷却，用EtOAc稀释并依次用水、饱和碳酸氢盐溶液和饱和盐水溶液萃取，然后经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用CH2Cl2/MeOH(1:0-97:3)在二氧化硅上纯化，产生固体状的(5)(180mg,73％)。
LCMS(ES):实测值380.0[M+H]+。
将50％的羟胺水溶液(2mL)添加至4-{[双(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基]甲基}-2-氟苯甲酸甲酯(5)(180mg,0.47mmol)的MeOH(8mL)溶液中。将溶液在45℃下搅拌7天，在瓶中密封。所得的反应混合物变为多相的；冷却后，通过过滤收集白色固体，用冷的甲醇洗涤并在真空中干燥，提供标题产物，即固体状的实施例B(50mg,28％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:10.90(br.s.,1H),9.17(br.s.,1H),7.51(t,J＝7.6Hz,1H),7.27(d,J＝10.8Hz,1H),7.16(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),5.57(s,2H),2.50(s,6H)。
LCMS(ES):实测值381.0[M+H]+。
实施例C
2-氟-N-羟基-4-{[(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
将NaH(60％，在油中)(50mg)添加至3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-胺(1)(100mg,1mmol)的NMP(2mL)溶液中。在10min后，添加5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(2)(150mg,1.1mmol)，并将所得的混合物在45℃下在N2(g)中搅拌。18h后，通过LCMS进行分析。
LCMS(ES):实测值198.0[M+H]+。
将NaH(60％，在油中)(70mg)和4-(溴甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(4)(200mg,0.81mmol)添加至上述反应混合物中并在45℃下在N2(g)中继续加热。3h后，添加更多量的(4)(90mg,0.36mmol)。再经过2h之后，将反应混合物冷却，用EtOAc稀释，并依次用水、饱和碳酸氢盐溶液萃取(×2)，然后经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法，用CH2Cl2/MeOH(1:0-97:3)进行纯化，产生残留物(5)(350mg,96％，经2个步骤)。
LCMS(ES):实测值364.0[M+H]+。
将50％羟胺水溶液(1mL)添加至4-{[双(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基]甲基}-2-氟苯甲酸甲酯(5)(350mg,0.96mmol)的甲醇(5mL)粗制溶液中。将所得的溶液在45℃-50℃下搅拌5天，在瓶中密封。反应混合物转变成多相的，并且在冷却后，滤处白色固体并浓缩所得的滤液。将滤液通过RP-HPLC在Xterra上用10％-70％MeCN/水+0.1％甲酸纯化，提供标题化合物，即实施例C(30mg,8％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.69(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.22(m,2H),5.48(s,2H),2.44(s,3H),2.32(s,3H)。
LCMS(ES):实测值365.0[M+H]+。
实施例D
N-羟基-4-(((3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.32mmol)、3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-胺(2)(0.940g,9.49mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(Xantphos)(0.366g,0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g,12.64mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后将Pd2(dba)3(0.28g,0.31mmol)添加至反应混合物中，并在90℃下加热30h。然后将其倾倒入脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供白色固体状的3-甲基-N-(吡啶-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-胺(3)(0.7g,63％)。
LCMS(ES):实测值177.1[M+H]+。
在5℃下在Ar(g)中，将NaH(60％)(52.5mg,1.31mmol)分批添加至在DMF(5mL)中的3-甲基-N-(吡啶-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-胺(3)(220mg,1.25mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(372mg,1.62mmol)，并在80℃下在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供白色固体状的4-(((3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(130mg,40％)。
LCMS(ES):实测值325.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(10mL)中的KOH(0.91g,16.3mmol)添加至在MeOH(10mL)中的NH2OH.HCl(1.12g,16.3mmol)中]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(105.5mg,0.3mmol)中，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(181mg,3.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(15mL/35mL)中并用CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(10:90)进行纯化，提供浅黄色固体状的N-羟基-8-((3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)(吡啶-2-基)氨基)辛酰胺，即实施例D(12.2mg,40％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.14(br.s.,1H),9.01(br.s.,1H),8.42(dd,J＝4.8,1.1Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(ddd,J＝8.5,7.4,2.0Hz,1H),7.66(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(d,J＝8.3Hz,2H),7.23(ddd,J＝7.3,4.9,0.8Hz,1H),5.48(s,2H),2.23(s,3H)。
LCMS(ES):实测值326.1[M+H]+。
实施例E
N-羟基-4-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-胺(2)(0.79g,8.2mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.37g,0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g,12.6mmol)混合。然后该反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。添加Pd2(dba)3(0.29g,0.31mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒入脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(0.75g,68％)。
LCMS(ES):实测值175.2[M+H]+。
在5℃下在Ar(g)中，将NaH(60％)(60.4mg,1.5mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(250mg,1.4mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(428mg,1.8mmol)，并在70℃下在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(440mg,82％)。
LCMS(ES):实测值323.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(3.83g,68.3mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(4.74g,68.3mmol)中]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸酯(4)(440mg,1.3mmol)中，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(766mg,13.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅棕色液体状的N-羟基-4-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)(吡唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例E(50mg,11％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.09(ddd,J＝5.0,1.9,0.8Hz,1H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.52(d,J＝2.3Hz,1H),7.49(ddd,J＝8.7,7.0,1.9Hz,1H),7.40(d,J＝8.4Hz,2H),6.91(d,J＝8.6Hz,1H),6.73(ddd,J＝7.1,5.1,0.7Hz,1H),6.10(d,J＝2.4Hz,1H),5.26(s,2H),3.81(s,3H)。
LCMS(ES):实测值324.4[M+H]+。
实施例F
N-羟基-4-((吡啶-2-基(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、1,3,4-噻二唑-2-胺(2)(0.64g,6.3mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.37g,0.63mmol)和Cs2CO3(3.1g,9.4mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.29g,0.31mmol)，然后将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(吡啶-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(3)(0.33g,30％)。
LCMS(ES):实测值179.0[M+H]+。
在5℃下在Ar(g)中，将NaH(60％)(53mg,1.3mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的N-(吡啶-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(3)(225mg,1.26mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(336mg,1.6mmol)，并在70℃下在Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-((吡啶-2-基(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(118mg,33％)。
LCMS(ES):实测值327.3[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(1.01g,18.1mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(1.26g,18.1mmol)中]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((吡啶-2-基(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(118mg,0.36mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(203mg,3.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅棕色液体状的N-羟基-4-((吡啶-2-基(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例F(15mg,13％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.96(s,1H),8.44(dd,J＝5.0,1.1Hz,1H),7.72-7.78(m,1H),7.69(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(d,J＝8.2Hz,2H),7.06-7.11(m,2H),5.79(s,2H)。
LCMS(ES):实测值328.1[M+H]+。
实施例G
N-羟基-4-((吡嗪-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的甲苯(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、吡嗪-2-胺(2)(0.67g,6.9mmol)、BINAP(0.12g,0.18mmol)和t-BuOK(0.99g,8.8mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。添加Pd2(dba)3(0.11g,0.12mmol)，并将混合物在90℃下加热3h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中，并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1进行纯化，提供黄色固体状的N-(吡啶-2-基)吡嗪-2-胺(3)(0.9g,83％)。
LCMS(ES):实测值173.1[M+H]+。
在5℃下在Ar(g)中，将NaH(60％)(61mg,1.52mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(吡啶-2-基)吡嗪-2-胺(3)(250mg,1.45mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(432mg,1.88mmol)，并在70℃下在Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-((吡嗪-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(380mg,81％)。
LCMS(ES):实测值321.3[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(3.33g,59.0mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(4.1g,59.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((吡嗪-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(380mg,1.1mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(666mg,11.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，以提供浅色膏状固体状的N-羟基-4-((吡嗪-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例G(20mg,5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.10(br.s.,1H),8.99(br.s.,1H),8.65(d,J＝1.4Hz,1H),8.32(ddd,J＝4.9,1.9,0.8Hz,1H),8.27(dd,J＝2.7,1.5Hz,1H),8.10(d,J＝2.6Hz,1H),7.74(ddd,J＝8.4,7.3,2.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.06(ddd,J＝7.3,4.9,0.8Hz,1H),5.45(s,2H)。
LCMS(ES):实测值322.3[M+H]+。
实施例H
N-羟基-4-(((5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-胺(2)(0.947g,8.2mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.366g,0.63mmol)和Cs2CO3(3.09g,9.4mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.289g,0.31mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的5-甲基-N-(吡啶-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(3)(0.22g,18％)。
LCMS(ES):实测值193.2[M+H]+。
在5℃下在Ar(g)中，将NaH(60％)(109.3mg,1.3mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的5-甲基-N-(吡啶-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(3)(500mg,2.6mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(775mg,3.3mmol)，并在70℃下在Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中，并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:3)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(134mg,39％)。
LCMS(ES):实测值341.4[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(1.0g,19.7mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(1.36g,19.7mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(134mg,0.39mmol)中，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(221mg,3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅棕色液体状的N-羟基-4-(((5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例H(15mg,11％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.42(dd,J＝4.9,1.1Hz,1H),7.73(ddd,J＝8.6,7.2,1.8Hz,1H),7.69(d,J＝8.3Hz,2H),7.33(d,J＝8.2Hz,2H),7.02-7.09(m,2H),5.72(s,2H),2.65(s,3H)。
LCMS(ES):实测值342.1[M+H]+。
实施例I
4-((苯并[d]噁唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、苯并[d]噁唑-2-胺(2)(0.871g,6.4mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.37g,0.63mmol)和Cs2CO3(3.09g,9.4mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.289g,0.31mmol)并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(吡啶-2-基)苯并[d]噁唑-2-胺(3)(0.8g,60％)。
LCMS(ES):实测值212.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(53mg,1.3mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的N-(吡啶-2-基)苯并[d]噁唑-2-胺(3)(265mg,1.28mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(380mg,1.66mmol)，并在70℃下在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-((苯并[d]噁唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(220mg,48％)。
LCMS(ES):实测值360.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.75g,31.0mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(2.16g,31.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((苯并[d]噁唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(220mg,0.62mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(348mg,6.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅橙色固体状的4-((苯并[d]噁唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例I(50mg,23％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.12(br.s.,1H),9.00(br.s.,1H),8.40(dd,J＝4.7,1.8Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,1H),7.88-7.94(m,1H),7.65(d,J＝8.2Hz,2H),7.47-7.55(m,2H),7.41(d,J＝8.2Hz,2H),7.26(t,J＝7.8Hz,1H),7.14-7.22(m,2H),5.59(s,2H)。
LCMS(ES):实测值361.1[M+H]+。
实施例J
N-羟基-4-(((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-胺(2)(1.21g,6.9mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.37g,0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g,12.6mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.29g,0.31mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的1-甲基-N-(吡啶-2基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(3)(0.35g,25％)。
LCMS(ES):实测值225.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(32.8mg,0.82mmol)分批添加至在DMF(5mL)中的1-甲基-N-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(3)(175mg,0.78mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(232mg,1.01mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(42mg,16％)。
LCMS(ES):实测值373.2[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(10mL)中的KOH(1.07g,19.0mmol)添加至在MeOH(10mL)中的NH2OH.HCl(530mg,19.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(142mg,0.38mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(214mg,3.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(10:90)进行纯化，提供灰白色固体状的N-羟基-4-(((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例J(9mg,7％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.23(dd,J＝5.0,1.1Hz,1H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.58-7.63(m,2H),7.52(d,J＝8.2Hz,2H),7.41(dd,J＝6.8,1.9Hz,1H),7.24-7.32(m,2H),6.92(dd,J＝6.8,5.1Hz,1H),6.56(d,J＝8.4Hz,1H),5.37(s,2H),3.37-3.42(m,3H)。
LCMS(ES):实测值374.3[M+H]+。
实施例K
N-羟基-4-((吡啶-2-基(1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴吡啶(1)(1.0g,6.3mmol)、1,2,4-噻二唑-5-胺(2)(0.830g,8.22mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.366g,0.63mmol)和Cs2CO3(3.09g,9.4mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.29g,0.31mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(吡啶-2-基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(0.188g,16％)。
LCMS(ES):实测值179.0[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(49mg,1.23mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的N-(吡啶-2-基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(210mg,1.19mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(351mg,1.5mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-((吡啶-2-基(1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(110mg,28％)。
LCMS(ES):实测值327.4[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(10mL)中的KOH(949mg,16.9mmol)添加至在MeOH(10mL)中的NH2OH.HCl(1.17g,16.9mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((吡啶-2-基(1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(110mg,0.33mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(185mg,3.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅橙色固体状的N-羟基-4-((吡啶-2-基(1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例K(11mg,10％)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.54(d,J＝4.3Hz,1H),8.22-8.31(m,1H),7.81(br.s.,1H),7.65-7.76(m,2H),7.08-7.38(m,4H),5.82(s,2H)。
LCMS(ES):实测值328.0[M+H]+。
实施例L
4-(((5-氟吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴-5-氟吡啶(1)(1.0g,5.71mmol)、吡嗪-2-胺(2)(543mg,5.71mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.330g,0.57mmol)和Cs2CO3(2.79g,8.56mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。添加Pd2(dba)3(0.26g,0.28mmol)，然后将反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)吡嗪-2-胺(3)(0.56g,51％)。
LCMS(ES):实测值191.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(39mg,0.99mmol)分批添加至在DMF(5mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)吡嗪-2-胺(3)(180mg,0.94mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(281mg,1.23mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(190mg,59％)。
LCMS(ES):实测值339.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.57g,28.1mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(1.95g,28.1mmol)]。将该反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(190mg,0.56mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)的KOH(315mg,5.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空下浓缩，倾倒入盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空下浓缩。通过快速色谱法，用MeOH/CH2Cl2(1:9)纯化所得的残余物，提供呈奶油状固体的4-(((5-氟吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即，实施例L(40mg,21％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.08(br.s,1H),8.84-9.09(m,1H),8.54(d,J＝1.4Hz,1H),8.34(d,J＝3.1Hz,1H),8.24(dd,J＝2.7,1.5Hz,1H),8.09(d,J＝2.7Hz,1H),7.72(ddd,J＝9.0,8.2,3.1Hz,1H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.46(dd,J＝9.1,3.7Hz,1H),7.37(d,J＝8.3Hz,2H),5.42(s,2H)。
LCMS(ES):实测值340.1[M+H]+。
实施例M
4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴-5-氟吡啶(1)(1.0g,5.71mmol)、3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-胺(2)(566mg,5.71mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.330g,0.57mmol)和Cs2CO3(2.79g,8.56mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.261g,0.28mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-胺(3)(0.70g,63％)。
LCMS(ES):实测值195.0[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(56mg,1.4mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-胺(3)(260mg,1.34mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(398mg,1.7mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(170mg,37％)。
LCMS(ES):实测值343.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.39g,24.8mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(1.72g,24.8mmol)中]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(170mg,0.49mmol)中，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(278mg,4.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空下浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅橙色固体状的4-(((5-氟吡啶-2基)(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例M(20mg,12％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.11(br.s.,1H),9.01(br.s.,1H),8.43(d,J＝3.0Hz,1H),8.11(dd,J＝9.2,3.8Hz,1H),7.89(td,J＝8.6,3.1Hz,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),5.43(s,2H),2.22(s,4H)。
LCMS(ES):实测值344.1[M+H]+。
实施例N
4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴-5-氟吡啶(1)(1.0g,5.71mmol)、1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(2)(840mg,5.71mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.330g,0.57mmol)和Cs2CO3(2.79g,8.56mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.26g,0.28mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并且随后在真空下浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(3)(0.56g,41％)。
LCMS(ES):实测值243.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(27mg,0.66mmol)分批添加至在DMF(5mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(3)(154mg,0.63mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(189mg,0.82mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并且随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(165mg,66％)。
LCMS(ES):实测值391.2[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.20g,21.4mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(1.48g,21.4mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(165mg,0.40mmol)中，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(240mg,4.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并且随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅橙色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例N(20mg,12％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.19(d,J＝2.9Hz,1H),7.66(d,J＝8.2Hz,1H),7.55-7.63(m,3H),7.42-7.54(m,3H),7.15-7.27(m,2H),6.74(dd,J＝9.2,3.4Hz,1H),5.22-5.31(m,2H),3.42(s,3H)。
LCMS(ES):实测值392.25[M+H]+。
实施例O
4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴-5-氟吡啶(1)(1.0g,5.71mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-胺(2)(554mg,5.71mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.330g,0.57mmol)和Cs2CO3(2.79g,8.56mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.261g,0.28mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并且随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的5-氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(0.65g,61％)。
LCMS(ES):实测值193.0[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(50mg,1.25mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的5-氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(230mg,1.19mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(356mg,1.55mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(312mg,76％)。
LCMS(ES):实测值341.1[M+H]+.
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(2.57g,45.8mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(3.18g,45.8mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(312mg,0.91mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(512mg,9.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供呈膏状固体的4-(((5-氟吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例O(65mg,20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.11(br.s,1H),8.96(br.s,1H),8.10(d,J＝3.1Hz,1H),7.59-7.66(m,3H),7.51(ddd,J＝9.3,8.2,3.1Hz,1H),7.31(d,J＝8.1Hz,2H),7.19(dd,J＝9.4,3.7Hz,1H),6.13(d,J＝2.3Hz,1H),5.21(s,2H),3.76(s,3H)。
LCMS(ES):实测值342.1[M+H]+。
实施例P
4-((苯并[d]噁唑-2-基(5-氟吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-溴-5-氟吡啶(1)(1.0g,5.71mmol)、苯并[d]噁唑-2-胺(2)(766mg,5.71mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.33g,0.57mmol)和Cs2CO3(2.79g,8.56mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.261g,0.28mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)苯并[d]噁唑-2-胺(3)(0.6g,46％)。
LCMS(ES):实测值230.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(36mg,0.91mmol)分批添加至在DMF(8mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)苯并[d]噁唑-2-胺(3)(200mg,0.87mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(259mg,1.13mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-((苯并[d]噁唑-2-基(5-氟吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(144mg,43％)。
LCMS(ES):实测值378.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.07g,19.0mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(1.33g,19.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((苯并[d]噁唑-2-基(5-氟吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(144mg,0.38mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(214mg,3.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供橙色固体状的4-((苯并[d]噁唑-2-基(5-氟吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例P(30mg,20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.13(br.s,1H),9.01(br.s.,1H),8.41(d,J＝3.1Hz,1H),8.25(dd,J＝9.2,3.8Hz,1H),7.89(ddd,J＝9.2,8.1,3.1Hz,1H),7.66(d,J＝8.3Hz,2H),7.47-7.54(m,2H),7.41(d,J＝8.2Hz,2H),7.26(td,J＝7.7,1.1Hz,1H),7.13-7.20(m,1H),5.54(s,2H)。
LCMS(ES):实测值379.1[M+H]+。
实施例Q
4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-氯-4-(4-氟苯基)吡啶(1)(1.0g,4.8mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-胺(2)(470mg,4.8mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.28g,0.48mmol)和Cs2CO3(2.35g,7.24mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.22g,0.24mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的4-(4-氟苯基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(1.0g,71％)。
LCMS(ES):实测值269.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(37mg,0.93mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的4-(4-氟苯基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-胺(3)(250mg,0.93mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(277mg,1.2mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中继续避光搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供浅黄色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(267mg,68％)。
LCMS(ES):实测值417.4[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(1.79g,32.0mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(2.23g,32.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(267mg,0.64mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(359mg,6.41mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供灰白色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例Q(30mg,11％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.11(br.s,1H),9.00(br.s,1H),8.19(d,J＝5.3Hz,1H),7.59-7.71(m,5H),7.24-7.39(m,5H),6.98-7.05(m,1H),6.26(d,J＝2.2Hz,1H),5.30(s,2H),3.74-3.79(m,3H)。
LCMS(ES):实测值418.2[M+H]+。
实施例R
4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将5-氟吡啶-2-胺(1)(1.0g,8.9mmol)、5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(2)(1.19g,8.9mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.52g,0.89mmol)和Cs2CO3(4.35g,13.3mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.41g,0.44mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(1.2g,67％)。
LCMS(ES):实测值211.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(59mg,1.49mmol)分批添加至在DMF(7mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(300mg,1.42mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(425mg,1.85mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中避光下继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(480mg,90％)。
LCMS(ES):实测值359.3[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(4.63g,67.0mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(3.76g,67.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(480mg,1.3mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(750mg,1.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供橙色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例R(90mg,19％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.16(br.s.,1H),9.03(br.s.,1H),8.60(d,J＝2.9Hz,1H),7.86(td,J＝8.7,2.8Hz,1H),7.64-7.76(m,2H),7.19-7.34(m,3H),5.77(s,2H),2.39(s,3H)。
LCMS(ES):实测值359.8[M+H]+。
实施例S
4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将2-氯-4-(4-氟苯基)吡啶(1)(1.0g,4.8mmol)、3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(2)(0.56g,4.8mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.279g,0.48mmol)和Cs2CO3(2.35g,7.24mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.22g,0.24mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(1.1g,80％)。
LCMS(ES):实测值287.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(42mg,1.05mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(300mg,1.05mmol)中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(312mg,1.36mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(325mg,74％)。
LCMS(ES):实测值421.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(10mL)中的KOH(1.96g,35mmol)添加至在MeOH(10mL)中的NH2OH.HCl(2.43g,35mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(319mg,0.69mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(392mg,7.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供灰白色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例S(58mg,19％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.13(br.s.,1H),9.02(br.s.,1H),8.59(d,J＝5.3Hz,1H),7.82(dd,J＝8.7,5.3Hz,2H),7.67(d,J＝8.2Hz,2H),7.43-7.51(m,2H),7.27-7.40(m,4H),5.92(s,2H),2.40(s,3H)。
LCMS(ES):实测值436.4[M+H]+。
实施例T
4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将5-氟吡啶-2-胺(1)(1.0g,8.9mmol)、5-氯-3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑(2)(1.68g,8.9mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.52g,0.89mmol)和Cs2CO3(4.35g,13.3mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.41g,0.44mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-(三氟甲基)-l,2,4-噻二唑-5-胺(3)(900mg,38％)。
LCMS(ES):实测值265.1[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(61mg,1.51mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(5-氟吡啶-2-基)-3-(三氟甲基)-l,2,4-噻二唑-5-胺(3)(400mg,1.51mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(451mg,1.85mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中避光下继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(3)(535mg,82％)。
LCMS(ES):实测值413.3[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(3.63g,64.0mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(4.47g,64.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(3)(535mg,1.2mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(720mg,13.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供橙色固体状的4-(((5-氟吡啶-2-基)(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例T(90mg,17％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.18(br.s.,1H),9.06(br.s.,1H),8.73(d,J＝2.7Hz,1H),7.97(td,J＝8.6,2.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.2Hz,2H),7.46(dd,J＝9.0,2.8Hz,1H),7.31(d,J＝7.8Hz,2H),5.80(br.s.,2H),5.72-5.87(m,1H)。
LCMS(ES):实测值414.3[M+H]+。
实施例U
4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(47mg,1.19mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)吡嗪-2-胺(3)(使用按照上述实施例的条件而制备)(300mg,1.13mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(337mg,1.47mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(220mg,46％)。
LCMS(ES):实测值414.4[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(10mL)中的KOH(1.49g,26.9mmol)添加至在MeOH(10mL)中的NH2OH.HCl(1.86g,26.9mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(220mg,0.53mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(298mg,5.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供灰白色固体状的4-(((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例U(35mg,16％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.10(br.s.,1H),8.99(br.s.,1H),8.69(d,J＝1.4Hz,1H),8.36(d,J＝5.3Hz,1H),8.28(dd,J＝2.7,1.5Hz,1H),8.11(d,J＝2.7Hz,1H),7.76-7.86(m,2H),7.64(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.38(dd,J＝5.3,1.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.9Hz,2H),5.53(s,2H)。
LCMS(ES):实测值416.1[M+H]+。
实施例V
4-((苯并[d]噻唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(75mg,1.8mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺(3)(使用按照上述实施例的条件制备)(430mg,1.8mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(563mg,2.4mmol)，并在70℃下，在Ar(g)中继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-((苯并[d]噻唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(300mg,42％)。
LCMS(ES):实测值376.1[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(15mL)中的KOH(2.24g,40.0mmol)添加至在MeOH(15mL)中的NH2OH.HCl(2.78g,40.0mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((苯并[d]噻唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(300mg,0.8mmol)，随后添加溶于MeOH(5mL)中的KOH(449mg,8.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供浅橙色固体状的4-((苯并[d]噻唑-2-基(吡啶-2-基)氨基)甲基)-N-羟基苯甲酰胺，即实施例V(60mg,20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.15(br.s,1H),8.99(br.s,1H),8.50(dd,J＝4.8,1.4Hz,1H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.78-7.86(m,1H),7.68(d,J＝8.2Hz,2H),7.64(d,J＝7.9Hz,1H),7.33-7.39(m,1H),7.21-7.31(m,3H),7.11-7.20(m,2H),5.82(s,2H)。
LCMS(ES):实测值377.1[M+H]+。
实施例W
N-羟基-4-((吡啶-2-基(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
在干燥的1,4-二噁烷(15mL)中将吡啶-2-胺(1)(1.0g,10.6mmol)、5-氯-3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑(2)(1.82g,10.6mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.61g,1.06mmol)和Cs2CO3(5.18g,15.9mmol)混合。将反应混合物用N2(g)脱气并置于真空下10min。然后添加Pd2(dba)3(0.49g,0.53mmol)，并将所得的反应混合物在90℃下加热30h。然后将其倾倒至脱矿物质水(200mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(1:1)进行纯化，提供黄色固体状的N-(吡啶-2-基)-3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(1.4g,57％)。
LCMS(ES):实测值247.2[M+H]+。
在5℃下，在Ar(g)中将NaH(60％)(49mg,1.21mmol)分批添加至在DMF(10mL)中的N-(吡啶-2-基)-3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-胺(3)(300mg,1.21mmol)。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(363mg,1.58mmol)，并在70℃下，于Ar(g)中避光下继续搅拌1h。然后将反应混合物倾倒至脱矿物质水(100mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用EtOAc/己烷(3:7)进行纯化，提供黄色固体状的4-((吡啶-2-基(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(450mg,90％)。
LCMS(ES):实测值395.3[M+H]+。
制备NH2OH的新鲜MeOH溶液：[在0℃下，将在MeOH(20mL)中的KOH(3.56g,63.4mmol)添加至在MeOH(20mL)中的NH2OH.HCl(4.41g,63.4mmol)]。将反应混合物在0℃下搅拌20min，然后过滤以去除盐；然后将其添加至4-((吡啶-2-基(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4)(500mg,1.2mmol)，随后添加溶于MeOH(10mL)中的KOH(712mg,12.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌21h，然后在真空中浓缩，倾倒至盐水/H2O(30mL/70mL)中并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤并随后在真空中浓缩。将所得的残余物通过快速色谱法用MeOH/CH2Cl2(1:9)进行纯化，提供灰白色固体状的N-羟基-4-((吡啶-2-基(3-(三氟甲基)-1,2,4-噻二唑-5-基)氨基)甲基)苯甲酰胺，即实施例W(20mg,4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.15(br.s.,1H),9.03(br.s.,1H),8.63-8.68(m,J＝5.0,0.9Hz,1H),7.97(ddd,J＝8.7,7.2,1.8Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.6Hz,1H),7.32(d,J＝8.3Hz,2H),7.28(dd,J＝7.0,5.3Hz,1H),5.80(s,2H)。
LCMS(ES):实测值396.3[M+H]+。
实施例X
N-羟基-4-(((3-甲氧基吡啶-2-基)-(5-甲基吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.97(d,J＝4.9Hz,1H),7.89(d,J＝2.3Hz,1H),7.61(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(t,J＝7.5Hz,3H),7.33(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.22(dd,J＝8.2,4.8Hz,1H),6.41(d,J＝8.5Hz,1H),5.31(s,2H),3.73(s,3H),2.20(s,3H)。
LCMS(ES):实测值365.0[M+H]+。
实施例Y
N-羟基-4-(((5-甲氧基吡啶-2-基)(5-甲基吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.99(dd,J＝4.8,2.6Hz,2H),7.62(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(dd,J＝8.2,4.9Hz,3H),7.31(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),7.14(d,J＝8.9Hz,1H),6.84(d,J＝8.5Hz,1H),5.36(s,2H),3.83(s,3H),2.22(s,3H)。
LCMS(ES):实测值365.0[M+H]+。
实施例Z
N-羟基-4-(((3-甲氧基吡啶-2-基)(5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.94(dd,J＝4.8,1.5Hz,1H),7.78(d,J＝3.0Hz,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,2H),7.38-7.51(m,3H),7.27(dd,J＝9.0,3.1Hz,1H),7.17(dd,J＝8.1,4.8Hz,1H),6.51(d,J＝9.0Hz,1H),5.31(s,2H),3.77-3.89(m,4H),3.72(s,3H),2.97-3.08(m,4H)。
LCMS(ES):实测值436.0[M+H]+。
实施例AA
N-羟基-4-(((5-甲氧基吡啶-2-基)(5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.88-7.95(m,2H),7.58-7.66(m,2H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(dd,J＝9.0,3.1Hz,1H),7.26(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),6.99(dd,J＝9.0,4.5Hz,2H),5.34(s,2H),3.71-3.94(m,7H),3.04-3.15(m,4H)。
LCMS(ES):实测值436.0[M+H]+。
实施例BB
N-羟基-4-((吡啶-2-基(噻吩并[3,2-c]吡啶-4-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.97-8.10(m,1H),7.76(dd,J＝9.3,7.1Hz,3H),7.33-7.69(m,5H),7.14(d,J＝5.4Hz,1H),6.98(d,J＝9.1Hz,1H),6.64(t,J＝6.8Hz,1H),5.56(s,2H)。
LCMS(ES):实测值377.0[M+H]+。
实施例CC
N-羟基-4-(((6-甲基吡啶-2-基)(5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲酰胺
1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δH ppm:7.99(d,J＝3.0Hz,1H),7.62(d,J＝7.8Hz,2H),7.42(d,J＝8.1Hz,2H),7.34-7.39(m,2H),7.14(d,J＝8.9Hz,1H),6.64(dd,J＝8.1,7.8Hz,2H),5.39(s,2H),3.79-3.86(m,4H),3.14(dd,J＝6.1,3.6Hz,4H),2.37(s,3H)。
LCMS(ES):实测值420.0[M+H]+。
实施例DD
N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)(嘧啶-4-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
将2-碘吡嗪(1)(1.2g,5.83mmol)、嘧啶-4-胺(2)(609mg,6.41mmol)、Cs2CO3(3.80g,11.65mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(148mg,0.26mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的溶液用N2(g)吹扫10min。添加Pd2(dba)3(107mg,0.12mmol)，并将混合物加热至90℃并持续3h。将反应冷却至室温并在水(300mL)和EtOAc(3×100mL)之间分配。将合并的有机相用水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/MeOH(1:0-9:1)进行纯化，产生(3)(678mg,66％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:9.06(d,J＝1.3Hz,1H),8.74(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.34(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.19(d,J＝2.7Hz,1H),7.72(dd,J＝6.0,1.0Hz,1H)。
LCMS(ES):实测值174.0[M+H]+。
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,48.5mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(344mg,1.5mmol)，在70℃下继续搅拌1h。将反应冷却至室温并倾倒至水(100mL)中。添加盐水(25mL)，并用EtOAc(2×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(187mg,50％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.85(d,J＝1.4Hz,1H),8.77-8.80(m,1H),8.34-8.38(m,2H),8.29(d,J＝2.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝8.4Hz,2H),6.91(dd,J＝6.0,1.2Hz,1H),5.49(s,2H),3.87(s,3H)。
LCMS(ES):实测值322.0[M+H]+。
将(4)(0.09mL,0.58mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌40h。在真空中去除溶剂，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例DD(30mg,15％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.89(d,J＝1.4Hz,1H),8.69(s,1H),8.47(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),8.25-8.37(m,2H),7.68(d,J＝8.3Hz,2H),7.38(d,J＝8.3Hz,2H),7.08(dd,J＝6.2,1.2Hz,1H),5.51(s,2H)。
LCMS(ES):实测值323.0[M+H]+。
实施例EE
N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)(嘧啶-4-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,48.5mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加4-(溴甲基)3-氟苯甲酸甲酯(371mg,1.5mmol)。在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(100mL)中。添加盐水(25mL)，并用EtOAc(2×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法，用EtOAc/CH2Cl2(0:1-1:0)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(158mg,40％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.87(d,J＝1.4Hz,1H),8.76-8.78(m,1H),8.36-8.40(m,2H),8.31(d,J＝2.6Hz,1H),7.69(d,J＝9.2Hz,2H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),6.92(dd,J＝6.1,1.2Hz,1H),5.50(s,2H),3.87(s,3H)。
LCMS(ES):实测值340.0[M+H]+。
将(4)(0.08mL,0.47mmol)在0.85M羟胺的MeOH溶液(10mL)中的溶液在室温下搅拌18h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过中性pH反相HPLC纯化，产生实施例EE(25mg,15％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.91(d,J＝1.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.48(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),8.31-8.38(m,2H),7.43-7.50(m,2H),7.35(t,J＝7.9Hz,1H),7.09(dd,J＝6.2,1.2Hz,1H),5.53(s,2H)。
LCMS(ES):实测值341.0[M+H]+。
实施例FF
N-羟基-6-{[(吡嗪-2-基)(嘧啶-4-基)氨基]甲基}吡啶-3-甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,48.5mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加6-(溴甲基)吡啶-3-羧酸甲酯(345mg,1.5mmol)。在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(100mL)中。添加盐水(25mL)，并用EtOAc(2×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用CH2Cl2/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(116mg,27％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:9.11(d,J＝1.6Hz,1H),8.97(d,J＝1.4Hz,1H),8.70-8.77(m,1H),8.34-8.40(m,2H),8.31(d,J＝2.6Hz,1H),8.18(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),7.36(d,J＝8.2Hz,1H),7.01(dd,J＝6.1,1.2Hz,1H),5.56(s,2H),3.90(s,3H)。
LCMS(ES):实测值322.9[M+H]+。
将(4)(0.06mL,0.31mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌18h。将反应混合物浓缩至干。将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例FF(25.7mg,26％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.99(d,J＝4.9Hz,1H),8.64-8.76(m,2H),8.32-8.51(m,3H),7.82-7.93(m,1H),7.03-7.30(m,2H),5.45(m,2H)。
LCMS(ES):实测值324.1[M+H]+。
实施例GG
4-{[双(吡嗪-2-基)氨基]甲基}-N-羟基苯甲酰胺
将2-碘吡嗪(1)(1.2g,5.83mmol)、吡嗪-2-胺(2)(609mg,6.4mmol)、Cs2CO3(3.80g,11.7mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(148mg,0.26mmol)在二噁烷(25mL)中的溶液用N2(g)吹扫10min。添加Pd2(dba)3(107mg,0.12mmol)，并将混合物加热至90℃并持续3h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(200mL)中，用EtOAc(2×150mL)和CH2Cl2-IPA(150mL,4:1)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法，用庚烷/EtOAc(4:1-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-3:1)，产生灰白色固体状的(3)(210mg,51％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.99(d,J＝1.4Hz,2H),8.30(dd,J＝2.6,1.5Hz,2H),8.11(d,J＝2.7Hz,2H)。
LCMS(ES):实测值174.1[M+H]+。
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,48.5mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(344mg,1.5mmol)。在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(100mL)中。添加盐水(25mL)并用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)纯化残余物，产生(4)(196mg,53％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.59-8.65(m,2H),8.23-8.26(m,2H),8.16(d,J＝2.5Hz,2H),7.94(d,J＝8.3Hz,2H),7.38(d,J＝8.2Hz,2H),5.50(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值321.9[M+H]+。
将(4)(0.09mL,0.61mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例GG(23mg,12％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.66(d,J＝1.3Hz,2H),8.28-8.36(m,2H),8.16(d,J＝2.6Hz,2H),7.67(d,J＝8.2Hz,2H),7.45(d,J＝8.2Hz,2H),5.56(s,2H)。
LCMS(ES):实测值323.1[M+H]+。
实施例HH
4-{[双(吡嗪-2-基)氨基]甲基}-3-氟-N-羟基苯甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,49mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加4-(溴甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(371mg,1.5mmol)。在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒入水(100mL)中。添加盐水(25mL)，并用EtOAc(2×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(195mg,50％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.65(d,J＝1.4Hz,2H),8.25(dd,J＝2.5,1.5Hz,2H),8.18(d,J＝2.6Hz,2H),7.65-7.72(m,2H),7.31(t,J＝7.8Hz,1H),5.53(s,2H),3.87(s,3H)。
LCMS(ES):实测值339.9[M+H]+。
将(4)(0.09mL,0.57mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌18h。将溶剂在真空中浓缩，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例HH(81mg,41％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.76(d,J＝1.4Hz,2H),8.34(dd,J＝2.5,1.5Hz,2H),8.25(d,J＝2.6Hz,2H),7.51(dd,J＝11.1,1.3Hz,1H),7.45(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.34(t,J＝7.8Hz,1H),5.50(s,2H)。
LCMS(ES):实测值341.1[M+H]+。
实施例II
6-{[双(吡嗪-2-基)氨基]甲基}-N-羟基吡啶-3-甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,48.5mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后以DMF(3mL)溶液的形式添加6-(溴甲基)吡啶-3-羧酸甲酯(345mg,1.5mmol)。在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(100mL)中。添加盐水(25mL)，并用EtOAc(2×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(129mg,35％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:9.04-9.13(m,1H),8.70(s,2H),8.19(s,2H),8.13(dd,J＝5.6,2.3Hz,3H),7.32(d,J＝8.2Hz,1H),5.55(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值322.9[M+H]+。
将(4)(0.06mL,0.4mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌18h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例II(37mg,28％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.75(d,J＝1.3Hz,3H),8.31(dd,J＝2.6,1.5Hz,2H),8.21(d,J＝2.6Hz,2H),7.89(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),7.18(d,J＝8.1Hz,1H),5.47(s,2H)。
LCMS(ES):实测值324.1[M+H]+。
实施例JJ
N-羟基-4-{[(3-甲氧基吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
将吡嗪-2-胺(2)(557mg,5.85mmol)、2-溴-3-甲氧基吡啶(1)(1.0g,5.32mmol)、Cs2CO3(3.47g,10.64mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(135mg,0.23mmol)在二噁烷(15mL)中的溶液用N2(g)吹扫10min。添加Pd2(dba)3(97.4mg,0.11mmol)，并将混合物加热至90℃并持续3h。将反应物冷却至室温，在水(200mL)和EtOAc(200mL)之间分配。将相分离并用EtOAc(200+100+50mL)洗涤水层。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)梯度洗脱进行纯化，产生(3)(1.0g,88％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:9.91(d,J＝1.2Hz,1H),8.11-8.20(m,2H),7.91(dd,J＝5.0,1.4Hz,1H),7.80(s,1H),7.06(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),6.85(dd,J＝7.9,5.0Hz,1H),3.92(s,3H)。
LCMS(ES):实测值203.2[M+H]+。
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,41.5mg,1.04mmol)添加至(3)(200mg,0.99mmol)的DMF(10mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(294mg,1.29mmol)。在N2(g)中，在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(150mL)和盐水(50mL)中，用EtOAc(3×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(251mg,73％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.06-8.10(m,2H),7.87-7.92(m,3H),7.78(d,J＝1.5Hz,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.15(dd,J＝8.1,4.7Hz,1H),5.42(s,2H),3.85(s,3H),3.73(s,3H)。
LCMS(ES):实测值350.9[M+H]+。
将(4)(251mg,0.72mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生米色固体状的实施例JJ(101mg,40％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.11(dd,J＝2.6,1.6Hz,1H),8.07(dd,J＝4.7,1.3Hz,1H),7.93(d,J＝2.7Hz,1H),7.79(d,J＝1.4Hz,1H),7.61(d,J＝8.2Hz,2H),7.58(dd,J＝8.2,1.2Hz,1H),7.38(d,J＝8.2Hz,2H),7.32(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),5.30(s,2H),3.76(s,3H)。
LCMS(ES):实测值352.1[M+H]+。
实施例KK
3-氟-N-羟基-4-{[(3-甲氧基吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,41.5mg,1.04mmol)添加至(3)(200mg,0.99mmol)的DMF(10mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后添加4-(溴甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(318mg,1.29mmol)。在N2(g)中，在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(150mL)和盐水(50mL)中，用EtOAc(3×100mL)萃取该水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法，用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(269mg,74％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.09(dd,J＝4.7,1.4Hz,1H),8.06(dd,J＝2.6,1.6Hz,1H),7.90(d,J＝2.7Hz,1H),7.80(d,J＝1.3Hz,1H),7.68(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.62(dd,J＝10.5,1.4Hz,1H),7.56(t,J＝7.7Hz,1H),7.27(dd,J＝8.3,1.5Hz,1H),7.18(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),5.43(s,2H),3.86(s,3H),3.77(s,3H)。
LCMS(ES):实测值368.9[M+H]+。
将(4)(269mg,0.73mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。将溶剂浓缩至干并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例KK(93mg,35％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.13(dd,J＝2.6,1.6Hz,1H),8.08(dd,J＝4.7,1.3Hz,1H),7.95(d,J＝2.7Hz,1H),7.80(d,J＝1.3Hz,1H),7.61(dd,J＝8.3,1.2Hz,1H),7.48-7.43(m,3H),7.35(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),5.32(s,2H),3.78(s,3H)。
LCMS(ES):实测值370.1[M+H]+。
实施例LL
N-羟基-6-{[(3-甲氧基吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基]甲基}吡啶-3-甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,41.5mg,1.04mmol)添加至(3)(200mg,0.99mmol)的DMF(10mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后添加6-(溴甲基)吡啶-3-羧酸甲酯(296mg,1.29mmol)。在N2(g)中，在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(150mL)和盐水(50mL)中，并用EtOAc(3×100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(4)(191mg,55％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:9.07(d,J＝1.9Hz,1H),8.12(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),8.06(dd,J＝4.7,1.4Hz,1H),8.01(dd,J＝2.6,1.6Hz,1H),7.88(d,J＝2.7Hz,1H),7.84(d,J＝1.4Hz,1H),7.54(d,J＝8.2Hz,1H),7.27(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.17(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),5.46(s,2H),3.86(s,3H),3.76(s,3H)。
LCMS(ES):实测值352.0[M+H]+。
将(4)(191mg,0.54mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。这段时间之后，将溶剂浓缩至干并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例LL(35mg,19％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.72(d,J＝1.8Hz,1H),8.12-8.08(m,1H),8.06(dd,J＝4.7,1.3Hz,1H),7.93(d,J＝2.7Hz,1H),7.81-7.87(m,2H),7.56-7.61(m,1H),7.32(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),7.25(d,J＝8.1Hz,1H),5.29(s,2H),3.77(s,3H)。
LCMS(ES):实测值353.1[M+H]+。
实施例MM
N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)(哒嗪-3-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
将2-碘吡嗪(1)(2.40g,11.65mmol)、哒嗪-3-胺(2)(1.2g,12.82mmol)、Cs2CO3(7.6g,23.3mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(297mg,0.51mmol)在二噁烷(45mL)中的溶液用N2(g)吹扫10min。添加在二噁烷(5mL)中的Pd2(dba)3(214mg,0.23mmol)，并将混合物加热至90℃并持续3h。将反应物冷却至室温并在水(200mL)和EtOAc(200mL)之间分配。过滤不溶固体并存储备用。将相分离并用EtOAc(200mL)、然后用CH2Cl2-IPA(200mL,4:1)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生(3)。用水(100mL)洗涤固体(得自过滤)，并用热的MeOH(3×100mL)将其研磨并过滤。浓缩滤液以产生第二批(3)。用水(100mL)进一步洗涤该固体，并将其吸干以产生第三批(3)。合并所有的三批，产生(3)(1.63g,80％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:10.49(s,1H),9.00(d,J＝1.2Hz,1H),8.83(dd,J＝4.6,1.2Hz,1H),8.27(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),8.16(d,J＝2.7Hz,1H),8.06(dd,J＝9.1,1.2Hz,1H),7.60(dd,J＝9.1,4.6Hz,1H)。
LCMS(ES):实测值174.2[M+H]+。
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,49mg,1.21mmol)添加至(3)(200mg,1.15mmol)的DMF(8mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后添加在DMF(2mL)中的4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(344mg,1.5mmol)的。在N2(g)中，在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(200mL)和盐水(50mL)中，并用EtOAc(2×150mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用庚烷/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生棕色油状的(4)(119mg,32％)。
1H NMR(250MHz,氯仿-d),δH ppm:8.85(dd,J＝4.6,1.4Hz,1H),8.56(d,J＝1.4Hz,1H),8.25(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.17(d,J＝2.6Hz,1H),7.89-7.97(m,2H),7.48(dd,J＝9.1,1.4Hz,1H),7.42(d,J＝8.5Hz,2H),7.33(dd,J＝9.1,4.6Hz,1H),5.64(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值321.0[M+H]+。
将(4)(119mg,0.37mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。在这段时间之后，将溶剂浓缩至干并将残余物通过反相HPLC纯化，产生米色固体状的实施例MM(24mg,20％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.81(dd,J＝4.6,1.2Hz,1H),8.65(d,J＝1.4Hz,1H),8.33(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.16(d,J＝2.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,3H),7.56(dd,J＝9.1,4.6Hz,1H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),5.57(s,2H)。
LCMS(ES):实测值322.2[M+H]+。
实施例NN
3-氟-N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)(哒嗪-3-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
在5℃下，在N2(g)中将NaH(60％,73mg,1.82mmol)添加至(3)(300mg,1.73mmol)的DMF(11mL)溶液中。将反应混合物搅拌20min，然后添加在DMF(4mL)中的4-(溴甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(556mg,2.25mmol)。在N2(g)中，在70℃下继续搅拌1h。将反应物冷却至室温并倾倒至水(150mL)和盐水(25mL)中，并用EtOAc(150+100mL)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-4:1)进行纯化，产生棕色油状的(4)(141mg,24％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.85(dd,J＝4.6,1.3Hz,1H),8.59(d,J＝1.4Hz,1H),8.23(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.18(d,J＝2.6Hz,1H),7.61-7.71(m,2H),7.50(dd,J＝9.1,1.3Hz,1H),7.32-7.42(m,2H),5.64(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值339.9[M+H]+。
将(4)(141mg,0.42mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌18h。将溶剂浓缩至干并将残余物通过反相HPLC纯化，产生米色固体状的实施例NN(51mg,36％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.83(dd,J＝4.6,1.1Hz,1H),8.67(d,J＝1.3Hz,1H),8.34(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),8.18(d,J＝2.6Hz,1H),7.70(dd,J＝9.1,1.2Hz,1H),7.59(dd,J＝9.1,4.6Hz,1H),7.47(d,J＝11.7Hz,2H),7.32(t,J＝8.0Hz,1H),5.60(s,2H)。
LCMS(ES):实测值341.0[M+H]+。
实施例OO
N-羟基-4-{[(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)(吡嗪-2-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
在N2(g)中，将NaH(60％,120mg,3.3mmol)添加至(2)(140mg,1.47mmol)的THF(10mL)溶液中。将反应混合物搅拌10min，然后添加5-氯-3-甲基-1,2,4-噻二唑(1)(190mg,1.41mmol)。在N2(g)中，在50℃下将混合物加热24h。
LCMS(ES):实测值194.0[M+H]+。
向该混合物添加MeCN(10mL)、4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(400mg,1.74mmol)和碳酸钾(350mg,1.65mmol)。然后在50℃下继续加热2h。一旦冷却，就将混合物在H2O(10mL)和EtOAc(3×20mL)之间分配。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用汽油/EtOAc(1:0-1:1)进行纯化，产生白色固体状的(4)(300mg，60％，经2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.55-8.77(m,2H),8.41(s,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,2H),7.39(d,J＝7.9Hz,2H),5.92(s,2H),3.82(s,3H),2.42(s,3H)。
LCMS(ES):实测值342.0[M+H]+。
将(4)(174mg,0.51mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在70℃下搅拌8h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例OO(44mg,25％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δH ppm:
11.45-10.94(m,1H),9.43-8.80(m,1H),8.70(d,J＝1.3Hz,1H),8.61(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.40(d,J＝2.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.5Hz,2H),7.31(d,J＝8.3Hz,2H),5.88(s,2H),2.43(s,3H)。
LCMS(ES):实测值343.0[M+H]+。
实施例PP
N-羟基-4-{[(4-甲氧基吡啶-2-基)(吡嗪-2-基)氨基]甲基}苯甲酰胺
将2-碘吡嗪(1)(1.34g,6.51mmol)、4-甲氧基吡啶-2-胺(2)(0.85g,6.83mmol)、Cs2CO3(4.24g,13.01mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.17g,0.29mmol)在二噁烷(22mL)中的溶液用N2(g)吹扫10min，然后添加Pd2(dba)3(0.12g,0.13mmol)，再吹扫～5min，并将反应物加热至90℃并持续4h。一旦冷却至室温，就将混合物在水(150mL)和EtOAc(3×120mL)之间分配。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(9:1-0:1)进行纯化，产生黄色固体状的(3)(809mg,61％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.70(d,J＝1.3Hz,1H),8.11-8.22(m,3H),8.08(d,J＝2.7Hz,1H),7.43(d,J＝2.2Hz,1H),6.52(dd,J＝5.8,2.3Hz,1H),3.88(s,3H)。
LCMS(ES):实测值203.2[M+H]+。
在室温下，在N2(g)中将NaH(60％,42mg,1.04mmol)添加至(3)(200mg,0.99mmol)的DMF(7mL)溶液中。将反应混合物搅拌30min，然后添加在DMF(2mL)中的4-(溴甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(249mg,1.09mmol)。在N2(g)中，将反应物加热至70℃并持续2h，然后在室温下过夜。将反应物冷却至室温并在水(150mL)和EtOAc(2×100mL)之间分配。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用CH2Cl2/EtOAc(1:0-0:1)进行纯化，产生粘性油状的(4)(173mg,50％)。
1H NMR(300MHz,氯仿-d),δH ppm:8.63(dd,J＝1.4Hz,1H),8.14-8.22(m,2H),8.01(d,J＝2.6Hz,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),6.61(d,J＝2.1Hz,1H),6.54(dd,J＝5.8,2.2Hz,1H),5.46(s,2H),3.85(s,3H),3.75(s,3H)。
LCMS(ES):实测值350.9[M+H]+。
将(4)(173mg,0.49mmol)在0.85M羟胺的MeOH(10mL)溶液中的溶液在室温下搅拌72h。将溶剂浓缩至干，并将残余物通过反相HPLC纯化，产生实施例PP(15mg,9％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.46(d,J＝1.4Hz,1H),8.24(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.14(d,J＝5.9Hz,1H),8.00(d,J＝2.7Hz,1H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.42(d,J＝8.3Hz,2H),6.79(d,J＝2.2Hz,1H),6.73(dd,J＝5.9,2.2Hz,1H),5.45(s,2H),3.82(s,3H)。
LCMS(ES):实测值352.0[M+H]+。
实施例QQ
N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)[6-(三氟甲基)吡嗪-2-基]氨基]甲基}苯甲酰胺
在Ar(g)中，向4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(1.47g,7.3mmol)的DMSO(14mL)溶液中添加2-碘吡嗪(1g,4.9mmol)，随后添加K2CO3(1.7g,12.1mmol)。在剧烈搅拌2min后，添加CuI(46mg,0.2mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在EtOAc(150mL)和50％盐水(50mL)之间分配，并分离有机层，用EtOAc(2×15mL)萃取水相，然后将合并的有机相用50％盐水(15mL)洗涤、干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用己烷/EtOAc(7:3-0:1)进行纯化，产生白色固体状的(3)(670mg,57％)。
1H NMR(300MHz,氯仿-d)δH ppm:7.76-8.11(m,5H),7.43(d,J＝8.5Hz,2H),5.01-5.16(m,1H),4.66(d,J＝5.8Hz,2H),3.92(s,3H)。
LCMS(ES):实测值352.0[M+H]+。
在Ar(g)中，向化合物(2)(60mg,0.25mmol)、Pd2(dba)3(11mg,0.01mmol)、(±)-BINAP(15mg,0.025mmol)和Cs2CO3(241mg,0.74mmol)中添加2-氯-6-(三氟甲基)吡嗪(90mg,0.49mmol)的二噁烷(2mL)溶液。将反应混合物在90℃下加热4h，然后使其冷却至室温过夜。然后添加EtOAc(15mL)、水(4mL)和盐水(2mL)，并分离有机相，用EtOAc(10mL)萃取水相。将合并的有机相干燥(MgSO4)并在真空下浓缩，产生粗制残余物(153mg)。将残余物通过溶于CH2Cl2/MeOH(1:1,10mL)中、随后添加MP-TMT(370mg,0.68mmol/g)来净化。将混合物搅动24h，然后滤除树脂，用CH2Cl2/MeOH(1:1,2×5mL)洗涤。然后将滤液在真空中浓缩，产生棕色固体状的粗品(3)(132mg)，其直接用于下一步骤。
向粗品(3)(总共132mg，最多含有0.25mmol)的THF/MeOH(1:1,4mL)溶液中添加NH2OH溶液(50％wt.H2O,306mL,5mmol)，随后添加NaOH(6M,83mL,0.5mmol)。在室温下搅拌50min后，添加KHSO4(1M,2mL)、水(5mL)和CH2Cl2(6mL)。分离有机相并用CH2Cl2(2×5mL)萃取水相。将合并的有机相干燥(MgSO4)并在真空中浓缩，产生黄色固体。通过反相C-18色谱法用MeCN/H2O(19:1-1:1)进行纯化，产生浅棕色固体状的实施例QQ(81mg，83％，经2个步骤)。
1H NMR(DMSO-d6)δH ppm:8.93(s,1H),8.88(d,J＝1.7Hz,1H),8.62(s,1H),8.42(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.34(d,J＝2.6Hz,1H),7.62(d,J＝8.3Hz,2H),7.27(d,J＝8.3Hz,2H),5.46(s,2H)。
LCMS(ES):实测值391.1[M+H]+。
实施例RR
4-({[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-2-基](吡嗪-2-基)氨基}甲基)-N-羟基苯甲酰胺
将2,4-二溴吡啶(1)(5.0g,21.1mmol)、吡嗪-2-胺(2)(2.21g,23.22mmol)、Cs2CO3(15.1g,46.4mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(611mg,1.05mmol)的混合物悬浮于二噁烷(50mL)中。将混合物用N2(g)冲洗1min，然后添加Pd2(dba)3(386mg,0.422mmol)。再用N2(g)冲洗混合物并将其加热至90℃并过夜。一旦冷却，就将混合物在H2O(150mL)和EtOAc(3×150mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法用庚烷/EtOAc(9:1-2:3)进行纯化，产生淡黄色固体状的(3)(2.6g,49％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.74(d,J＝1.3Hz,1H),8.22(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.15(d,J＝2.7Hz,1H),8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.07(d,J＝1.5Hz,1H),7.63(s,1H),7.10(dd,J＝5.4,1.6Hz,1H)。
LCMS(ES):实测值251.0-253.0[M+H]+。
在N2(g)中，向冷却至0℃的(3)(1.08g,4.3mmol)的DMF(15mL)溶液中添加NaH(60％,206mg,5.16mmol)。将混合物搅拌30min。然后，添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(1.08g,4.73mmol)的DMF(5mL)溶液，并将混合物加热至50℃并持续1.5h。一旦冷却，就将反应物在H2O(150mL)和EtOAc(3×150mL)之间分配。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱法用庚烷/EtOAc(9:1-2:3)进行纯化，产生白色固体状的(4)(915mg,53％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d),δH ppm:8.66(d,J＝1.4Hz,1H),8.25(dd,J＝2.5,1.6Hz,1H),8.15(d,J＝5.3Hz,1H),8.13(d,J＝2.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.39(d,J＝8.3Hz,2H),7.33(d,J＝1.4Hz,1H),7.10(dd,J＝5.3,1.5Hz,1H),5.49(s,2H),3.88(s,3H)。
LCMS(ES):实测值399.0-401.0[M+H]+。
向(4)(200mg,0.50mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(132.3mg,0.6mmol)和Cs2CO3(326mg,1.0mmol)在DMF(4mL)和H2O(1mL)中的悬浮液中添加Pd(PPh3)4(58mg,0.05mmol)。用N2(g)冲洗混合物，然后将其加热至90℃并持续2h。一旦冷却，就添加H2O(20mL)并将沉淀物在室温下静置72h。
过滤后，用H2O(2mL)洗涤并干燥，获得了棕色固体状的(5)(219mg,定量)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.54(s,1H),8.31(d,J＝5.3Hz,1H),8.25-8.28(m,1H),8.23(d,J＝2.3Hz,1H),8.02(d,J＝2.6Hz,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.77(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.50(s,1H),7.48(d,J＝5.5Hz,2H),7.32(d,J＝5.4Hz,1H),6.65(d,J＝8.8Hz,1H),5.55(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值413.0[M+H]+。
将(5)(219mg,0.53mmol)在0.85M NH2OH的MeOH(5mL)溶液中的溶液在室温下搅拌过夜。然后在真空中去除挥发物并将残余物通过反相制备型HPLC纯化，产生淡黄色固体状的实施例RR(19mg,8％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.63(d,J＝1.4Hz,1H),8.35(d,J＝2.3Hz,1H),8.27-8.28(m,1H),8.26-8.27(m,1H),8.07(d,J＝2.6Hz,1H),7.76(d,J＝2.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,2H),7.51(s,1H),7.30(dd,J＝5.3,1.5Hz,1H),7.26(d,J＝8.2Hz,2H),6.52(d,J＝8.7Hz,1H),6.36(s,2H),5.45(s,2H)。
LCMS(ES):实测值414.0[M+H]+。
实施例SS
4-({[5-(2-氨基吡啶-4-基)吡啶-2-基](吡嗪-2-基)氨基}甲基)-N-羟基苯甲酰胺
向(4)(200mg,0.50mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(132.3mg,0.6mmol)和Cs2CO3(326mg,1.0mmol)在DMF(4mL)和H2O(1mL)中的悬浮液中添加Pd(PPh3)4(58mg,0.05mmol)。用N2(g)冲洗混合物，然后将其加热至90℃并持续2h。一旦冷却，就添加H2O(20mL)，并将沉淀物在室温下静置3h。
过滤后，用H2O(2mL)洗涤并干燥，获得淡橙色的固体，将其通过快速柱色谱法用庚烷/EtOAc(4:1-0:1)、然后用EtOAc/MeOH(1:0-7:3)进行纯化，产生黄色固体状的(5)(82mg,40％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.60(s,1H),8.41(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(d,J＝1.3Hz,1H),8.06(d,J＝2.5Hz,1H),7.97(d,J＝5.4Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.53(s,1H),7.49(d,J＝8.1Hz,2H),7.34(d,J＝5.2Hz,1H),6.81-6.84(m,1H),6.81(s,1H),5.58(s,2H),3.86(s,3H)。
LCMS(ES):实测值413.0[M+H]+。
将(5)(82mg,0.20mmol)在0.85M NH2OH的MeOH(5mL)溶液中的溶液在室温下搅拌过夜。然后在真空中去除挥发物，并将残余物通过反相制备型HPLC纯化，产生白色固体状的实施例SS(19mg,8％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:8.59(d,J＝1.4Hz,1H),8.39(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(dd,J＝2.7,1.5Hz,1H),8.05(d,J＝2.7Hz,1H),7.97(d,J＝5.5Hz,1H),7.66(d,J＝8.3Hz,2H),7.49(s,1H),7.45(d,J＝8.2Hz,2H),7.32(dd,J＝5.2,1.2Hz,1H),6.82(dd,J＝5.5,1.3Hz,1H),6.78(s,1H),5.55(s,2H)。
LCMS(ES):实测值414.0[M+H]+。
实施例TT
N-羟基-4-[({5-[2-(甲基氨基)吡啶-4-基]吡啶-2-基}(吡嗪-2-基)氨基)甲基]苯甲酰胺
向(4)(120mg,0.3mmol)、N-甲基-4-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(84mg,0.36mmol)和Cs2CO3(196mg,0.6mmol)在DMF(2mL)和H2O(0.5mL)中的悬浮液中添加Pd(PPh3)4(58mg,0.05mmol)。用N2(g)冲洗混合物，然后将其加热至90℃并持续4h。一旦冷却，就添加H2O(10mL)并将反应物搅拌20min。
过滤后，用MeCN(2mL)洗涤并干燥，获得黑色固体，其通过制备型HPLC纯化，产生白色固体状的(5)(80mg,59％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:8.70(d,J＝1.4Hz,1H),8.39(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(dd,J＝2.6,1.5Hz,1H),8.14(d,J＝2.6Hz,1H),8.07(d,J＝5.3Hz,1H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),7.54-7.56(m,1H),7.50(d,J＝8.3Hz,2H),7.32(dd,J＝5.2,1.4Hz,1H),6.77(dd,J＝5.3,1.5Hz,1H),6.65-6.67(m,1H),6.61(d,J＝5.2Hz,1H),5.56(s,2H),3.80(s,3H),2.80(d,J＝4.9Hz,3H)。
LCMS(ES):实测值427.5[M+H]+。
向(5)(80mg,0.20mmol)的MeOH/THF(1:1,2mL)溶液中添加羟胺(50％w/w在H2O中；0.11mL，3.75mmol)，随后添加6N NaOH(63mL,0.38mmol)。将混合物在室温下搅拌3h。然后添加1M KHSO4(2mL)，随后添加H2O(6mL)。用IPA/氯仿(1:2,3×20mL)对其进行萃取。
将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化，产生淡橙色固体状的实施例TT(21mg,25％)。
1H NMR(500MHz,甲醇-d4),δH ppm:11.08(br.s.,1H),8.69(dd,J＝6.3,1.4Hz,1H),8.39(dd,J＝5.0,1.4Hz),8.28-8.32(m,1H),8.13(dd,J＝6.0,2.6Hz,1H),8.07(dd,J＝5.2,3.3Hz,1H),7.63-7.67(m,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.53(m,1H),7.42(d,J＝8.4Hz,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(ddd,J＝8.5,5.3,1.4,1H),6.65(ddd,J＝8.5,5.4,1.5Hz),6.66(d,J＝9.1Hz,1H),6.58-6.63(m,1H),5.51(m,1H),2.80(dd,J＝4.8,2.9Hz,3H)。
LCMS(ES):实测值428.2[M+H]+。
实施例UU
N-羟基-4-{[(吡嗪-2-基)[5-(吡啶-4-基)吡啶-2-基]氨基]甲基}苯甲酰胺
向(4)(120mg,0.3mmol)、(吡啶-4-基)硼酸(49mg,0.36mmol)和Cs2CO3(196mg,0.6mmol)在DMF(2mL)和H2O(0.5mL)中的悬浮液中添加Pd(PPh3)4(35mg,0.03mmol)。用N2(g)冲洗混合物，然后将其加热至90℃并持续4h。一旦冷却，就添加H2O(10mL)，并将反应物搅拌20min.
过滤后，获得胶状物，其通过制备型HPLC、然后通过SCX柱纯化，产生无色油状的(5)(82mg,65％)。
LCMS(ES):实测值398.5[M+H]+。
向(5)(82mg,0.21mmol)的MeOH/THF(1:1,2mL)溶液中添加羟胺(50％w/w，在H2O中；0.15mL,0.42mmol)，随后添加6N NaOH(80mL,0.42mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。
然后在真空中去除挥发物，并将残余物通过反相制备型HPLC纯化以产生白色固体状的实施例UU(39mg,48％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6),δH ppm:11.05(br.s.,1H),8.95(br.s.,1H),8.68-8.71(m,3H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.28-8.31(m,1H),8.14(d,J＝2.6Hz,1H),7.72-7.78(m,3H),7.64(d,J＝8.2Hz,2H),7.47(dd,J＝5.2,1.4Hz,1H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),5.55(s,2H)。
LCMS(ES):实测值399.4[M+H]+。
生物化学测定及数据-式I化合物
以下列出了使用在Reaction Biology Corp.实施的HTRF生物化学测定所确定的对I类PI3K同种型的倍数形式的选择性抑制数据。
注解：*＝≥10x≥50x；**＝>50x
啮齿类动物药代动力学比较数据
所公开的化合物具有增加的生物利用度和降低的清除率(以下为针对小鼠的数据)。
实施例A
使用以下方案来测定口服生物利用度和清除率，并且结果显示如下：
●物种＝雄性小鼠；
●品系＝CD1；
●n＝3只雄性小鼠/时间点/途径；
●8个时间点(5min、10、min、0.5h、1h、3h、6h、8h和24h)的末梢血液取样；
●血浆的收集、生物分析及药代动力学参数报告。
配制物：10％DMSO，90％盐水
给药：口服10mg/kg和静脉内注射5mg/kg。
血浆PK总结：
参数-静脉内注射,5mg/kg 数值-甲磺酸盐
t1/2(h) 1.3
Tmax(h) 0.08
Cmax(ng/mL) 2640
AUClast(h*ng.mL) 3905
AUCall(h*ng/mL) 3905
AUCinf(h*ng/mL) 3946
清除率(mL/h/Kg) 1267
Vd(mL/Kg) 2441
参数-口服,10mg/kg 数值-甲磺酸盐
t1/2(h) 1.3
Tmax(h) 1.00
Cmax(ng/mL) 1973
AUClast(h*ng/mL) 5625
AUCall(h*ng/mL) 5625
AUCinf(h*ng/mL) 5822
F 73.77％
实施例A
口服生物利用度(F)＝74％
清除率＝21mL/min/kg
实施例B
使用以下方案来测定口服生物利用度和清除率，并且结果显示如下：
●物种＝雄性小鼠；
●品系＝Balb/c；
●将18只雄性小鼠分成两组：组1(3mg/kg；静脉内注射)，组2(10mg/kg；口服)，并且每组包含9只小鼠；
●在轻度异氟烷麻醉下，从眶后血管丛(retro orbital plexus)中收集血液样品(大约60μL)，以便在给药前、0.08h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h和24h(静脉内注射)以及在给药前、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h和24h(口服)获得样品；
●在各个时间点，从一组的三只小鼠中收集血液样品，并置于含有K2EDTA作为抗凝剂的经标记的微量离心管中；
●通过离心全血来分离血浆样品并将其贮存在-70℃以下直至进行生物分析；
●将所有样品通过使用乙腈(ACN)进行蛋白质沉淀来处理以用于分析，并用符合目的的LC/MS/MS方法(LLOQ:2.02ng/mL)进行分析；
●使用Phoenix WinNonlin的非房室模型分析工具(Version 6.3)计算药代动力学参数。
配制物：
经尾静脉以3mg/kg的剂量对组1中的动物静脉内施用实施例B在20％丙二醇、50％PEG 400和30％的(20％HPβCD，于水中)中的溶液配制物。
以10mg/kg的剂量对组2中的动物施用实施例B在20％丙二醇、50％PEG 400和30％的(20％HPβCD，于水中)中的口服溶液配制物；
给药：口服10mg/kg和静脉内注射3mg/kg；
血浆PK总结：
实施例B
口服生物利用度(F)＝74％
清除率＝33mL/min/kg
实施例G
使用以下方案来测定口服生物利用度和清除率，并且结果显示如下：
●物种＝雄性小鼠；
●品系＝Balb/c；
●将18只雄性小鼠分成两组：组1(3mg/kg；静脉内注射)，组2(10mg/kg；口服)，并且每组包含9只小鼠；
●在轻度异氟烷麻醉下，从眶后血管丛中收集血液样品(大约60μL)，以便在给药前、0.08h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h和24h(静脉内注射)获得样品以及在给药前、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h和24h(口服)获得样品；
●在各个时间点，从一组的三只小鼠中收集血液样品至含有K2EDTA作为抗凝剂的经标记的微量离心管中；
●通过离心全血来分离血浆样品，并将其贮存在-70℃以下直至进行生物分析；
●将所有样品通过使用乙腈(ACN)进行蛋白质沉淀来处理以用于分析，并用符合目的的LC/MS/MS方法(LLOQ:2.47ng/mL)进行分析；
●使用Phoenix WinNonlin的非房室模型分析工具(Version 6.3)计算药代动力学参数.
配制物：
以3mg/kg剂量对组1中的动物静脉内施用实施例G在5％NMP、含5％solutol HS-15的90％HPβCD溶液(20％HPβCD，在RO水中)中的溶液配制物。
对组2中的动物口服施用实施例G在5％NMP、含5％solutol HS-15的90％HPβCD溶液(20％HPβCD，在RO水中)中的10mg/kg溶液配制物。
给药：口服10mg/kg和静脉内注射3mg/kg
血浆PK总结：
参数-静脉内注射，3mg/kg 数值-甲磺酸盐
t1/2(h) 0.59
Cmax(ng/mL) 2205.80
AUClast(h*ng.mL) 1918.37
AUCinf(h*ng/mL) 1935.24
清除率(mL/h/Kg) 1550.4
Vss(L/Kg) 1.25
参数-口服，10mg/kg 数值-甲磺酸盐
Tmax(h) 0.25
Cmax(ng/mL) 833.35
AUClast(h*ng/mL) 1892.53
AUCinf(h*ng/mL) 2144.97
F 30％
实施例G
口服生物利用度(F)＝30％
清除率＝26mL/min/kg
比较例(在WO2011/021038中的实施例I)
使用以下方案来测定口服生物利用度和清除率，并且结果显示如下：
●物种＝雄性小鼠；
●品系＝CD1；
●n＝3只雄性小鼠/时间点/途径；
●在8个时间点(5min、10min、0.5h、1h、3h、6h、8h和24h)末梢血液取样；
●血浆的收集、生物分析及药代动力学参数的报告。
配制物：10％DMSO，90％盐水
给药：口服10mg/kg和静脉内注射5mg/kg
血浆PK总结：
参数-静脉内注射，5mg/kg 数值-甲磺酸盐 数值-HCl盐
t1/2(h) 1.6 7.6
Tmax(h) 0.08 0.08
Cmax(ng/mL) 1618 1712
AUClast(h*ng.mL) 1245 1479
AUCall(h*ng/mL) 1245 1479
AUCinf(h*ng/mL) 1261 1515
清除率(mL/h/Kg) 3966 3300
Vd(mL/Kg) 4601 10063
在WO2011/021038中的实施例I(比较例)–甲磺酸盐形式
口服生物利用度(F)＝28％
清除率＝66mL/min/kg
总结
生物化学测定及数据-式II化合物
1)测定
i.生物化学测定描述
通过使用乙酰化的AMC-标记的肽底物评估对所有的锌-依赖性HDAC 1至11的活性。将底物RHKKAc用于所有的I类HDAC和IIb类HDAC；对于HDAC8，所使用的底物为RHKAcKAc。使用IIa类-特异性底物，即，乙酰基-Lys(三氟乙酰基)-AMC来测定对IIa类HDAC(HDAC 4、HDAC5、HDAC7、HDAC9)的活性(Lahm等人,2007,PNAS,104,17335-17340)。所有测定均基于AMC-标记的底物和显影剂组合。
该方案涉及两步反应：首先，将具有乙酰化的赖氨酸侧链的底物与含有HDAC活性的样品一起孵育，以产生脱去乙酰基的产物，然后该脱去乙酰基的产物在第二步骤中通过添加显影剂而被消化以产生与脱去乙酰基的底物的量成比例的荧光信号。
ii.酶
人HDAC1(基因库登录号为NM_004964)，具有C末端His标签和C末端FLAG标签的全长，MW＝56kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC2(基因库登录号为NM_001527)，具有C末端His标签的全长，MW＝56kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC3(基因库登录号为NM_003883)，具有C末端His标签的全长，MW＝49.7kDa，和人NCOR2(氨基酸395-489)(基因库登录号为NM_006312)，N末端GST标签,MW＝37.6kDa的复合物，在杆状病毒表达系统中共表达。
人HDAC4(基因库登录号为NM_006037)，具有N末端GST标签的氨基酸627-1085，MW＝75.2kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC5(基因库登录号为NM_005474)，具有N末端GST标签的全长，MW＝150kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
重组人HDAC6(基因库登录号为BC069243)，全长，MW＝180kDa，使用N末端GST标签通过杆状病毒在Sf9昆虫细胞中表达。
人HDAC7(基因库登录号为AY302468)，具有N末端GST标签的(a.a.518-末端)，MW＝78kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC8(基因库登录号为NM_018486)，具有C末端His标签的全长，MW＝46.4kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC9(基因库登录号为NM_178423)，具有C末端His标签的氨基酸604-1066，MW＝50.7kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC10(a.a.1-481)，基因库登录号为NM_032019，具有N末端GST标签和C末端His标签，MW＝78kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
人HDAC11(全长)(基因库登录号为NM_024827)，具有N末端GST标签，MW＝66kDa，在杆状病毒表达系统中表达。
iii.反应条件
测定缓冲液：50mM Tris-HCI，pH8.0，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2。在使用之前，添加1mg/mL BSA和DMSO。
HDAC1：2.68nM HDAC1和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC2：3.33nM HDAC2和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC3：1.13nM HDAC3和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC6：0.56nM HDAC6和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC8：46.4nM HDAC8和50mM HDAC8底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC10：96.15nM HDAC10和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
HDAC11：227.27nM HDAC11和50mM HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在30℃孵育2小时。
对于IIa类HDAC，测定缓冲液是相同的。
其他反应条件如下：
HDAC4：0.03nM HDAC4和50mM IIa类HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在室温下孵育30分钟。
HDAC5：0.67nM HDAC5和50mM IIa类HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在室温下孵育30分钟。
HDAC7：0.26nM HDAC7和50mM IIa类HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在室温下孵育30分钟。
HDAC9：2.37nM HDAC9和50mM IIa类HDAC底物在具有1％DMSO终浓度的反应缓冲液中。在室温下孵育30分钟。
对照抑制剂：曲古抑菌素A(TSA)
荧光的脱去乙酰基标准物：Biomol，目录#KI-142；
对于标准对照，将化合物以测试浓度添加至2.5μM荧光的脱去乙酰基标准物中；在6μL中10个剂量。
对于荧光背景对照，将化合物以测试浓度添加至50mM HDAC底物中；在6μL中10个剂量。
然后从化合物数据信号中减去荧光背景信号。
转化％必须为5％至15％以获得最佳结果。
iv.测定程序
阶段1：通过HDAC酶与化合物的孵育而对底物进行脱乙酰化；
阶段2：通过添加显影剂以消化脱去乙酰基的底物并产生荧光色而显影；检测：360/460Ex/Em 2)
HDAC酶的抑制
注解:
****≥10uM
***≤10uM≥1uM
**≤1uM≥500nM
*≤500nM
组合数据
组合研究1
引言
下文提供两种体外组合研究的数据。
测试了单独的HDAC6选择性抑制剂(式II化合物的实施例GG(在该实验部分中简称为“化合物GG”)，其为4-{[双(吡嗪-2-基)氨基]甲基}-N-羟基苯甲酰胺)或其与PI3K-p110β/δ抑制剂(式I化合物的实施例A(在该实验部分简称为“化合物A”)，其为4-(1H-吲哚-4-基)-6-(吗啉-4-基)-12-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基甲基]-8-氧杂-3,5,10-三氮杂三环[7.4.0.02,7]十三碳-1(13),2(7),3,5,9,11-六烯)的组合对癌细胞生长的作用：
i.在一组94个癌细胞系中，并存在化合物A的固定组合(增强作用研究#2015030003)或
ii.在一组21个癌细胞系中，具有7×7矩阵的不同化合物浓度的化合物GG或化合物A(浓度矩阵研究#2015030004)。
材料及方法
增殖测定
在研究2015030003中，平行测试94个细胞系(5637、A204、A2780、A431、A549、A673、ACHN、ASPC1、BT20、BXPC3、C33A、CACO2、CAKI1、CALU6、CASKI、CLS439、COLO205、COLO678、EFO21、HCT116、HCT15、HEK293、HELA、HEPG2、HL-60、HS578T、HS729、HT1080、HT29、IGROV1、IMR90、J82、JAR、JEG3、JIMT1、K-562、LOVO、MCF7、M14、MDAMB436、MG63、MHHES1、MIAPACA2、MT3、MV4-11、NCIH292、NCIH358M、NCIH460、NCIH82、OVCAR3、OVCAR4、PANC1005、PLC-PRF-5、RD、RAMOS、RDES、SAOS2、SF295、SKBR3、SKHEP1、SKLMS1、SKMEL5、SKNAS、SKNSH、SKOV3、SNB75、SU-DHL-10、SW620、T24、TE671、THP-1、U2OS、 和人外周血单个核细胞PBMC)。
用标记的细胞系也在#2015030004研究中进行测试。
在96孔微量滴定板(Greiner Bio-one，德国)中进行细胞生长和处理。通过胰蛋白酶消化从指数期培养物中收获细胞，并以最佳接种密度接种于190μL的培养基中。48小时后，用10μL的含有20X最终浓度的化合物(导致最终DMSO浓度为0.1％)的培养基处理细胞。使细胞在37℃下生长72小时。此外，在48小时后(时间零点，Tz)分析具有未暴露于化合物的细胞的对照板。使用磺酰罗丹明B(SRB)总蛋白染色试验测定细胞活力。简而言之，在化合物处理后，吸出培养基并通过添加10％TCA固定细胞。在4℃下孵育一小时后，将板用400μL去离子水洗涤两次并干燥。然后，将细胞用100μL的0.04％wt/v SRB进行染色。将板在室温下孵育至少30min并用1％乙酸洗涤六次以去除未结合的染色剂。将板在室温下放置干燥，并用100μL的10mM Tris碱溶解经结合的SRB。通过使用Victor-2板读取器(Perkin Elmer)在492nm、520nm和560nm下进行光密度的测量。
数据分析
从来自所有对照细胞和经处理细胞的光密度值中减去平均背景光密度(来自含有培养基但不含细胞的板和孔中)。使用Oncolead开发的算法和可视化工具进行非线性曲线拟合计算。计算包括具有最佳逼近直线的剂量反应曲线，50％效应(IC50)的95％置信区间，产生为50％的％T/C值或50％生长抑制(IC50)的测试试剂的浓度，以及产生为10％的％T/C值或90％生长抑制(IC90)的测试试剂的浓度。自动计算IC50、IC90、GI50、GI90和TGI值。将所有值进行log10转化用于z-分数分析，使用在Oncolead开发的集成为数据库分析工具的专有软件实施z-分数分析。该筛选被设计为使用CI、Bliss和最高单一试剂(HSA)指数化来鉴定出潜在的协同组合。数据被绘制为Loewe相加性(Loewe additivity)等效线图解法或Bliss独立性(Bliss independence)或HAS计算(HSA calculation)。
结果
增强作用研究#2015030003
在一组表达不同谱系和癌症突变状态的94个癌细胞系中，测试单独情况下或存在100nM的PI3K-p110β/δ抑制剂化合物A的情况下HDAC6选择性抑制剂化合物GG对癌细胞生长的作用。化合物GG在这些细胞系中抑制细胞活力，对于单个细胞系，其GI50值为4.7μM至33μM，在整个组中平均(±s.e.m)的GI50值为17.3μM±0.67。在存在100nM化合物A的情况下，化合物GG在这些细胞系中抑制细胞活力，对于单个细胞系，其GI50值为1.7μM至35μM，在整个组中平均(±s.e.m)的GI50值为14.1μM±0.7。化合物A的存在似乎以细胞系特异性方式增强了化合物GG的药理学活性，尤其是(但并非仅仅)在源自患有套细胞淋巴瘤(MINO)、结肠直肠腺癌(LoVo)和前列腺腺癌(PC-3)的患者的细胞系中。增强作用表现为在化合物A的存在下化合物GG GI50的偏移、在z-分数分析和/或HSA分析中相对于平均灵敏度的灵敏度偏移。
浓度矩阵研究#2015030004
在矩阵剂量反应研究中，在一组21个癌细胞系中进一步测试了单独的HDAC6选择性抑制剂化合物GG或其与PI3K-p110β/δ抑制剂化合物A的组合对癌细胞生长的作用。平均的Bliss独立性(在所有的测试浓度下)表明，当化合物GG和化合物A组合时，对UO31、MINO、PANC1、SU-DHL-6、DLD1、DU145和PC-3细胞的生长抑制具有协同效应。在所测试的其他细胞系中未观察到协同或潜在的拮抗作用。
组合研究2
在体内的组合治疗:化合物A和化合物GG
每日口服给药后的肿瘤生长抑制
与每日给予化合物A相比，在涉及每日经口共同施用化合物A和化合物GG的体内组合研究揭示出该组合的肿瘤生长抑制。
在乳腺癌的4T1同基因小鼠模型中，将化合物A以50mg/kg给药，QD(每天一次)、PO(口服)。在另外的治疗组中，化合物A(50mg/kg，QD、PO)与化合物GG(在一个组中为50mg/kg,QD、PO，以及在单独的组中为100mg/kg,QD、PO)组合。每天给药，持续18天，随后测定抗肿瘤活性。
在媒介物处理的对照中肿瘤生长符合预期，所有肿瘤在整个治疗期间稳定生长(图1，如下)。来自药物治疗组的动物在治疗10天后表现出对肿瘤生长的显著控制；这在整个研究过程中维持不变。在研究结束时，用化合物A和化合物GG的组合治疗的动物表现出最小的肿瘤。

Claims (40)

1.药物组合物，包含：
a)至少一种式I的PI3K抑制剂或其药物可接受的盐和至少一种HDAC抑制剂，例如式II化合物或其药物可接受的盐；或者
b)至少一种PI3K抑制剂，例如式I化合物或其药物可接受的盐，和至少一种式II的HDAC抑制剂或其药物可接受的盐：
式I
其中：
W为O、N-H、N-(C1-C10烷基)或S；
各个X独立地为CH或N；
R1为含有至少1个选自N或O的杂原子的5元至7元的饱和或不饱和的、任选取代的杂环；
R2为LY；
各个L为键、C1-C10亚烷基、C2-C10亚烯基或C2-C10亚炔基；
Y为含有至多4个选自N或O的杂原子的任选取代的稠合的、桥接的或螺环的非芳香族5元至12元杂环；并且
各个R3独立地为H、C1-C10烷基、卤素、氟代C1-C10烷基、O-C1-C10烷基、NH-C1-C10烷基、S-C1-C10烷基、O-氟代C1-C10烷基、NH-酰基、NH-C(O)-NH-C1-C10烷基、C(O)-NH-C1-C10烷基、芳基或杂芳基；
并且
式II
或其药物可接受的盐，其中：
各个R/独立地选自H和QR1；
各个Q独立地选自键、CO、CO2、NH、S、SO、SO2或O；
各个R1独立地选自H、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、芳基、杂芳基、C1-C10环烷基、卤素、C1-C10烷基芳基、C1-C10烷基杂芳基或C1-C10杂环烷基；
各个L独立地选自5元至10元含氮的杂芳基；
W为锌-结合基团；
各个R2独立地为氢或C1至C6烷基；并且
R3为芳基或杂芳基；
各个芳基或杂芳基可以被至多三个取代基取代，所述取代基选自C1-C6烷基、羟基、C1-C3羟基烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷氧基、氨基、C1-C3单烷基氨基、C1-C3双烷基氨基、C1-C3酰基氨基、C1-C3氨基烷基、单(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、双(C1-C3烷基)氨基C1-C3烷基、C1-C3-酰基氨基、C1-C3烷基磺酰基氨基、卤素、硝基、氰基、三氟甲基、羧基、C1-C3烷氧基羰基、氨基羰基、单C1-C3烷基氨基羰基、双C1-C3烷基氨基羰基、-SO3H、C1-C3烷基磺酰基、氨基磺酰基、单C1-C3烷基氨基磺酰基和双C1-C3-烷基氨基磺酰基；并且
各个烷基、烯基或炔基可以被卤素、NH2、NO2或羟基取代。
2.试剂盒，包含：
a)至少一种式I的PI3K抑制剂或其药物可接受的盐和至少一种HDAC抑制剂，例如式II化合物或其药物可接受的盐；或者
b)至少一种PI3K抑制剂，例如式I化合物或其药物可接受的盐，和至少一种式II化合物或其药物可接受的盐，
作为组合制剂用于在治疗中同时、依序或分别使用。
3.治疗或预防患者的疾病状态的方法，包括向所述患者施用治疗有效量的：
a)至少一种式I化合物或其药物可接受的盐和HDAC抑制剂，例如式II化合物或其药物可接受的盐；或者
b)PI3K抑制剂，例如式I化合物或其药物可接受的盐，和至少一种式II化合物或其药物可接受的盐。
4.如权利要求1所述的组合物，其中所述PI3K抑制剂选自式I化合物或其药物可接受的盐、或Pictilisib、Dactolisib、阿吡利塞、Voxtalisib、吉达利塞、库潘尼西、渥曼青霉素、Apitolisib、艾代拉里斯、Buparlisib、Duvelisib、Pilaralisib、LY294002、GSK-2636771、AZD6482、PF-4989216、GS-9820、AMG319、SAR260301、MLN1117、PX-866、CH5132799、AZD8186、RP6530、GNE-317、PI-103、NU7441、HS-173、VS-5584、CZC24832、TG100-115、ZSTK474、AS-252424、AS-604850、NVP-BGT226、XL765、GDC-0032、A66、CAY10505、PF04691502、PIK-75、PIK-93、AS-605240、BGT226、CUDC-907、IC-87114、CH5132799、PKI-420、TGX-221、PIK-90；和/或其中所述HDAC抑制剂选自式II化合物或其药物可接受的盐、或伏立诺他、恩替诺特、帕比司他、莫塞替诺特、贝利司他、Ricolinostat、罗米地辛、吉维诺特、达西司特、Quisinostat、Pracinostat、Resminostat、Droxinostat、Abexinostat、RGFP966、AR-42、PCI34051、曲古抑菌素A、SB939、CI994、CUDC-907、Tubacin、西达本胺、RG2833、M344、MC1568、Tubastatin A、Scriptaid、丙戊酸、苯丁酸钠、他喹莫德、Kevetrin、HPOB、4SC-202、TMP269、CAY10603、BRD73954、BG45、LMK-235、Nexturastat A、CG200745、CHR2845、CHR3996。
5.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述PI3K抑制剂是式I化合物或其药物可接受的盐，并且所述HDAC抑制剂是式II化合物或其药物可接受的盐。
6.如权利要求3所述的方法，其中所述施用是分别的、依序的或同时的。
7.如任一前述权利要求所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的R1由以下结构中的任意结构表示：
8.如任一前述权利要求所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的R1为吗啉。
9.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的W为O或S。
10.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的W为O。
11.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的X为CH。
12.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的R3为H。
13.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的L为C1-C10亚烷基，优选为亚甲基。
14.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的Y含有一个或两个杂原子，优选两个杂原子。
15.如前述权利要求中任一项所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的Y选自：
其中：
A选自O、S、NR4或任选取代的C1-C3亚烷基、C2-C3亚烯基或C2-C3亚炔基；
B为NR4、O或CH2；
其中R4为H或任选取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基或C2-C10炔基；
p选自0或1；
各个m独立地选自0、1或2；并且
各个n独立地选自1、2或3。
16.如任一前述权利要求所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的A为O或C1-C3亚烷基，优选亚甲基。
17.如任一前述权利要求所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I中的B为O或CH2，优选O。
18.如任一前述权利要求所述的组合物、方法或试剂盒，其中式I化合物由以下结构中的任一个例示：
19.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的W选自：
其中R1如权利要求1中所定义，Pr2为H或硫醇保护基团，Z选自O、S或NH并且T为N或CH。
20.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的W为-CONHOH。
21.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的各个L独立地选自5元或6元含氮的杂芳基，其任选地与苯稠合。
22.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中在式II中的至少一个、优选两个L基团中，直接与N键合的原子是碳，并且至少一个氮原子直接与所述碳键合。
23.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的L独立地选自吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、噁二唑基、吡唑基、噻二唑基、吡嗪基、苯并稠合噻唑基、苯并稠合噁唑基或苯并稠合咪唑基，优选地L独立地选自吡啶基和吡嗪基。
24.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的至少一个L基团是吡啶基、噁二唑基、吡唑基、噻二唑基、吡嗪基、苯并稠合噻唑基、苯并稠合噁唑基或苯并稠合咪唑基，优选地至少一个L基团是吡啶基或吡嗪基。
25.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的R3是亚苯基或被卤素取代的亚苯基。
26.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的至少一个、优选两个R2为H。
27.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的与L连接的R’独立地选自H、C1-C10烷基或O-(C1-C10烷基)、卤素、C1-C10杂环烷基、芳基、三氟甲基或杂芳基。
28.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的至少一个R’为H、卤素、CF3、C1-C6烷基、被卤素任选取代的芳基、被卤素任选取代的杂芳基或杂环烷基。
29.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的与L连接的R’中的至少一个为杂环烷基。
30.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的与R3连接的R’为氢或卤素。
31.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的至少一个R’为被卤素、NH2、NO2或羟基任选取代的C1-C6烷基。
32.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II中的至少一个R’为被卤素任选取代的C1-C6烷基。
33.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中式II如本文所例示。
34.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述式I化合物为
或其药物可接受的盐，
和/或
所述式II化合物为
或其药物可接受的盐。
35.药物组合物，其包含任一前述权利要求中定义的组合物和药物可接受的赋形剂。
36.如任一前述权利要求所述的组合物或试剂盒，其用于治疗。
37.如任一前述权利要求所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述治疗是癌症、免疫紊乱或炎性病症的治疗。
38.如权利要求37所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述癌症是白血病或PTEN-阴性实体瘤。
39.如权利要求36或37所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述治疗是类风湿性关节炎的治疗。
40.如权利要求36或37所述的组合物、试剂盒或方法，用于器官移植之后的抗排斥治疗。
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