CN108341851A - 一种花生肽螯合亚铁的制备方法 - Google Patents

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肖怀秋
李玉珍
姜明姣
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Hunan Chemical Industry Career Technical College (hunan Industrial Advanced Technical School)
Hunan Vocational College of Chemical Technology
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides

Abstract

本发明公开了一种花生肽螯合亚铁的制备方法，包括以下步骤：(1)将花生肽溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，将花生肽水溶液过滤滤除杂质；(2)将酸加入过滤后的花生肽水溶液，调节pH值，得到备用花生肽水溶液；(3)将备用花生肽水溶液加热，搅拌下加入亚铁盐；(4)升温，继续搅拌进行螯合反应，得到螯合液；(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，干燥得到干燥产品；(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，干燥得到花生肽螯合亚铁。本发明工艺简便、成本低廉，适宜于规模化工业生产。

Description

一种花生肽螯合亚铁的制备方法
技术领域
本发明涉及多肽螯合物技术领域，尤其涉及一种花生肽螯合亚铁的制备方法。
背景技术
铁元素是机体蛋白质和酶生物合成、生物氧化及能量代谢和生理免疫等重要的微量元素，严重缺铁会导致缺铁性贫血(IDA)、细胞色素和含铁酶活性降低、供氧不足、电子传递和能量代谢过程紊乱、机体免疫功能下降和生长发育迟缓等生理疾病。目前，临床上常以无机铁盐(如硫酸亚铁)作为缺铁性贫血的药物，但存在稳定性差、胃肠刺激大、易受到肠内容物干扰、生物利用率低和存在一定毒副作用等不足。在多肽一级结构中存在多个易与金属配位螯合的位点，如羧基氧原子、咪唑基氮原子以及巯基硫原子等，多肽结构中的N－端氨基、C－端羧基，分子结构中的羰基和亚氨基、以及氨基酸侧链的某些基团均可提供金属配位点，配位螯合后能有效影响多肽二级结构并调控其生物学活性。金属螯合肽可利用小肽配位体转运系统进行转运，具有转运耗能低、转运速度快和不易被饱和等优点，有利于促进金属元素吸收利用，金属螯合肽能抑制小肠刷状缘细胞中肽酶活性，有助于完整多肽作为金属元素配体通过小肽转运系统进入肠黏膜细胞，提高金属螯合肽的稳定性，并能减少金属元素间的拮抗作用。当前，亚铁蛋白多肽载体研究主要集中在猪血多肽、乌鸡肽、酪蛋白磷酸肽、米蛋白肽、鱼类蛋白肽等方面，以冷榨花生饼蛋白肽与亚铁螯合鲜有报道。
发明内容
鉴于上述现有技术中存在的缺陷，本发明的目的是提出一种花生肽螯合亚铁的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种花生肽螯合亚铁的制备方法，包括以下步骤：
(1)将花生肽溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，所述花生肽与去离子水的质量比为1∶5-1∶20，将所述花生肽水溶液过滤滤除杂质；
(2)将酸加入过滤后的所述花生肽水溶液，调节pH值为2-5，得到备用花生肽水溶液；
(3)将所述备用花生肽水溶液加热至30℃-60℃，搅拌下加入亚铁盐，所述亚铁盐的质量为所述花生肽质量的10％-20％；
(4)升温至40℃-70℃保温，继续搅拌1h-2h进行螯合反应，得到螯合液；
(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，在70℃-80℃干燥得到干燥产品；
(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，在70℃-80℃干燥得到所述花生肽螯合亚铁。
进一步的，所述步骤(4)中，所述螯合反应中用酸调节pH值为2-5，并用氮气保护，以避免亚铁离子发生氧化。
进一步的，所述酸为HCl或H2SO4。
进一步的，所述花生肽的相对分子质量≤1.0kD。
进一步的，所述亚铁盐为富马酸亚铁、硫酸亚铁、柠檬酸亚铁、乳酸亚铁、氯化亚铁、碳酸亚铁中的任意一种或多种。
本发明的突出效果为：本发明的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，实现了花生肽亚铁配位螯合制备营养强化剂，螯合率高达90％以上，产品纯度好，生产总收率为96％～99％。本发明工艺简便、成本低廉，适宜于规模化工业生产。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，包括以下步骤：
(1)将花生肽(相对分子质量0.8kD)溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，花生肽与去离子水的质量比为1∶5，将花生肽水溶液过滤滤除杂质；
(2)将HCl加入过滤后的花生肽水溶液，调节pH值为2，得到备用花生肽水溶液；
(3)将备用花生肽水溶液加热至30℃，搅拌下加入亚铁盐，亚铁盐的质量为花生肽质量的10％，亚铁盐为富马酸亚铁；
(4)升温至40℃保温，继续搅拌1h进行螯合反应，得到螯合液，螯合反应中用酸调节pH值为2，并用氮气保护，以避免亚铁离子发生氧化；
(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，在70℃干燥得到干燥产品；
(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，在70℃干燥得到花生肽螯合亚铁，收率96％。
实施例2
本实施例的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，包括以下步骤：
(1)将花生肽(相对分子质量0.9kD)溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，花生肽与去离子水的质量比为1∶20，将花生肽水溶液过滤滤除杂质；
(2)将H2SO4加入过滤后的花生肽水溶液，调节pH值为5，得到备用花生肽水溶液；
(3)将备用花生肽水溶液加热至60℃，搅拌下加入亚铁盐，亚铁盐的质量为花生肽质量的20％，亚铁盐为硫酸亚铁；
(4)升温至70℃保温，继续搅拌2h进行螯合反应，得到螯合液，螯合反应中用酸调节pH值为5，并用氮气保护，以避免亚铁离子发生氧化；
(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，在80℃干燥得到干燥产品；
(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，在80℃干燥得到花生肽螯合亚铁，收率97％。
实施例3
本实施例的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，包括以下步骤：
(1)将花生肽(相对分子质量1.0kD)溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，花生肽与去离子水的质量比为1∶10，将花生肽水溶液过滤滤除杂质；
(2)将H2SO4加入过滤后的花生肽水溶液，调节pH值为4，得到备用花生肽水溶液；
(3)将备用花生肽水溶液加热至50℃，搅拌下加入亚铁盐，亚铁盐的质量为花生肽质量的15％，亚铁盐为柠檬酸亚铁和碳酸亚铁；
(4)升温至60℃保温，继续搅拌2h进行螯合反应，得到螯合液，螯合反应中用酸调节pH值为4，并用氮气保护，以避免亚铁离子发生氧化；
(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，在80℃干燥得到干燥产品；
(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，在80℃干燥得到花生肽螯合亚铁，收率99％。
实验例
采用以下方法，对实施例1-3的花生肽亚铁的配位螯合率进行计算，结果见表1：
铁含量采取邻菲罗琳510nm比色法测定。亚铁螯合率＝M1/M0×100％，式中:M1为螯合物中铁质量，mg；M0为加入反应体系的铁质量，mg。
表1
实施例1 实施例2 实施例3
螯合率％ 91.35 91.83 92.12
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (5)

1.一种花生肽螯合亚铁的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将花生肽溶解在去离子水中制成花生肽水溶液，所述花生肽与去离子水的质量比为1∶5-1∶20，将所述花生肽水溶液过滤滤除杂质；
(2)将酸加入过滤后的所述花生肽水溶液，调节pH值为2-5，得到备用花生肽水溶液；
(3)将所述备用花生肽水溶液加热至30℃-60℃，搅拌下加入亚铁盐，所述亚铁盐的质量为所述花生肽质量的10％-20％；
(4)升温至40℃-70℃保温，继续搅拌1h-2h进行螯合反应，得到螯合液；
(5)螯合反应完毕后冷却过滤，将得到的反应液置于真空干燥器中，在70℃-80℃干燥得到干燥产品；
(6)将干燥产品粉碎后加入到无水乙醇中析出沉淀，离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物置于真空干燥器中，在70℃-80℃干燥得到所述花生肽螯合亚铁。
2.根据权利要求1所述的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，所述螯合反应中用酸调节pH值为2-5，并用氮气保护，以避免亚铁离子发生氧化。
3.根据权利要求1所述的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，其特征在于：所述酸为HCl或H2SO4。
4.根据权利要求1所述的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，其特征在于：所述花生肽的相对分子质量≤1.0kD。
5.根据权利要求1所述的一种花生肽螯合亚铁的制备方法，其特征在于：所述亚铁盐为富马酸亚铁、硫酸亚铁、柠檬酸亚铁、乳酸亚铁、氯化亚铁、碳酸亚铁中的任意一种或多种。
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