CN108309930A

CN108309930A - 一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液及其制备方法

Info

Publication number: CN108309930A
Application number: CN201810222532.8A
Authority: CN
Inventors: 罗亮; 黄丽萍; 孟凡玲
Original assignee: Wuhan Best Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Wuhan Best Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2018-03-19
Filing date: 2018-03-19
Publication date: 2018-07-24
Anticipated expiration: 2038-03-19
Also published as: CN108309930B

Abstract

本发明涉及一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液及其制备方法，由以下组分制备而成:0.12％至0.2％的氧氟沙星、20％至50％的至少一种中性脂质和/或生育酚、20％至50％的至少一种磷脂酰胆碱、0.2％至20％的非离子型表面活性剂、0.1％至10％的至少一种溶剂、0.28％至0.35％的至少一种增稠剂，其余为注射用水。本发明的液晶凝胶纳米粒粒径较小、均匀性好，有利于细胞的内吞和转运；利用液晶凝胶独特的粘附性以及液晶相结构，可延长药物活性成分在眼部的滞留时间，并有效控制包载物的释放，从而提高生物利用度。此外，本发明涉及的氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，工艺步骤简单、容易工业化大生产、生产成本低。

Description

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，特别涉及一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液及其制备方法。

背景技术

随着科学技术的发展，人们的生活中出现越来越多的电子产品，而长时间对着电子产品易引发干眼症、角膜炎等。大数据显示，角膜疾病致盲已成为我国主要致盲原因之一，其中居首位的为感染性角膜炎。

现如今，许多眼部疾病仍然依靠滴眼液或眼膏剂等传统的药物制剂治疗。但是由于眼睛生理构造的特殊性(如泪液膜的更新、角膜渗透性等因素影响)，使得眼部药物难以达到有效浓度，而且药物的生物利用度过低，以致治疗效果不尽人意。且传统的眼用药物制剂使用不便，有需频繁施用、易引起全身的毒副作用、易造成视力模糊等弊端，因此开发眼用药物尤其重要。

氧氟沙星为第三代喹诺酮类抗菌药，氟氧沙星滴眼液主要用于治疗眼脸炎、结膜炎等眼科疾病。氧氟沙星在空间结构上分为左旋和右旋两种形式，其中左旋氧氟沙星是氧氟沙星的有效活性成分，具有抗菌活性。普通的氧氟沙星滴眼液存在的问题是显而易见的，由于其主要的活性成分(即左氧氟沙星)水溶性非常好，滴入眼部后，首先接触的是疏水性高的角膜上皮，根据相似相溶的原理，活性成分的药物将被阻止向眼内移动并进入眼内，从而快速流出；为此有些患者为了达到更好的治疗效果，只好反复多次的大量使用滴眼液，造成的不良反应后果也比较严重，而且效果也不理想；本领域的技术人员试图通过在滴眼液中加入适量的增稠物质，增加溶液的粘度，从而间接增加药物在眼内的停留时间，但是效果不佳。

除滴眼液外，市场上的眼用制剂主要还有眼膏剂、普通眼用凝胶剂等。眼膏剂虽能长时间的保持一定的药物浓度，但一般只在晚上临睡前应用，因为患者涂上药膏后影响视物，看不清东西，而在晚上应用，涂上药膏后睡觉，不需要眼睛视物，这也是眼膏剂的缺点，白天应用极不方便；普通的眼用凝胶剂能较长时间的滞留在黏膜表面，提高生物利用度，但此类制剂的粘度大，存在生产工艺操作困难、临床使用剂量不准确等缺点。

为了提升药物在人体中的吸收，进而提高药效强度，可将活性药物成分搭载在药物载体上来调控药物的释放速率和释放程度。

溶致液晶是一种新型脂质药物载体，因其独特的三维网络结构而具有良好的药物控释性能，近年来在国内外引起了药学界的研究兴趣。溶致液晶体是由两亲性脂质分散在水性环境中自发形成各种几何形态构成的一个中介相形态(Mesophase)，因其独特的三维网络结构而具有良好的药物控释性能，同时能够保护被包裹药物的稳定性。其三维网络结构主要由亲水域中的双连续水通道和亲脂域中的脂质双分子层构成的晶格单元在空间上延伸折叠，堆叠成具有三维、循环排列和最小表面积特点的紧密结构。难溶性药物具有较强的疏水性，与脂质结构极性相近，在亲脂域中具有较高的溶解度，因而倾向于以稳定的无定型的分子态分散在晶格单元的脂质双分子层。由Noyes-Whitney方程可知，药物颗粒大小，药物与溶出介质的接触面积，以及溶出层与介质之间的药物浓度差是影响难溶性药物溶出速率的关键参数。药物包载进液晶结构中后，药物由晶体颗粒转变成无定型的分子态，均匀分布于亲脂域中，双连续水通道与脂质双分子层的巨大交界面积显著增加了药物的溶出表面积。同时药物在亲脂域中有较大的溶解度，在溶出层和介质之间形成较大的药物浓度差，可进一步增大药物的溶出速率。

此外，研究表明液晶的晶格结构对包载的敏感药物具有很强的保护作用。溶致液晶的晶格结构由双连续的纳米水通道和脂质双分子层在三维空间交叉堆叠而成，具有强极性的亲水域，具有极性较弱的亲脂域和极性中等的亲水亲脂交界面，对亲水性，疏水性和两亲性的药物都有强的包载作用。将敏感性药物包载在液晶晶格结构内部，可以减少药物与外界破坏性因素(比如生物酶，液晶制备过程中高温、高能、机械剪切作用等)的接触，避免药物在溶媒介质或生物体内被水解而失去活性，隔离外界高温、高能、机械剪切作用对药物结构的破坏，有效保持药物结构稳定性以及相应的药理活性。

液晶载体的应用形式主要分为三种：前体溶液、凝胶和纳米粒。前体溶液尚未形成液晶晶格单元，凝胶和纳米粒因其独特三维结构特性而在增加难溶性药物的溶出度和保护易敏感药物的活性方面表现出显著优势，是液晶药物载体的重要应用形式。液晶纳米粒通常是由溶致液晶的大体积凝胶经高能高压或者机械力分散得到的纳米级粒子，具有更高的膜表面积并且仍然保持溶致液晶规则的晶格结构，因此其增溶效果显著优于液晶凝胶。液晶纳米粒兼具溶致液晶和纳米粒的载药特性，有增溶、包封、保护药物和促进药物吸收的作用，具有生物相容性和黏附性,且可生物降解而成为备受关注的药物传递系统。

CN 2016112279823公开了一种马来酸噻吗洛尔立方液晶纳米粒滴眼液及其制备方法，它主要由以下重量份的组分制备而成：马来酸噻吗洛尔0.4～1.0份、液晶材料1.0～18.0份、表面活性剂0.2～3.0份、水100份；所述液晶材料为甘油单油酸酯；所述表面活性剂为泊洛沙。该马来酸噻吗洛尔立方液晶纳米粒滴眼液可显著增加马来酸噻吗洛尔的角膜渗透量，可显著而平稳地降低眼内压，延长药物在眼部的保留时间，且不添加防腐剂，可有效地解决现有技术存在的马来酸噻吗洛尔滴眼剂在眼部保留时间短及长期使用带来的刺激性问题。但马来酸噻吗洛尔滴眼时，易被吸收而产生全身作用，不宜与其他β阻滞剂合用，且副作用较明显。

CN 2016107741507公开了一种盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液，它是以盐酸左氧氟沙星为药效原料，配以玻璃酸钠起增稠剂作用，再配以眼局部可以接受的药剂学上所说的金属离子络合剂、渗透压调节剂和pH调节剂，所制备成的眼用制剂，每100重量份成品制剂中盐酸左氧氟沙星的含量为0.30～1.00重量份；每100重量份成品制剂中玻璃酸钠的含量为0.1～1.00重量份。本发明药液黏度高，延长了药物在眼内滞留时间，增加了药物的吸收，提高了滴眼液的生物利用度。本发明不加入任何防腐剂，提高了滴眼液的生物安全性。但本发明公开的滴眼液黏度高，生物体感较差，仍需持续改善。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：

a)0.12％至0.2％的氧氟沙星，

b)20％至50％的至少一种中性脂质和/或生育酚，

c)20％至50％的至少一种磷脂酰胆碱，

d)0.2％至20％的非离子型表面活性剂，

e)0.1％至10％的至少一种溶剂，

f)0.28％至0.35％的至少一种增稠剂，

g)其余为注射用水。

所述中性脂质和/或生育酚、所述磷脂酰胆碱、所述表面活性剂在与水接触时，可形成一种溶致液晶的大体积凝胶，大体积液晶凝胶独特的粘附性及结构可使液晶相在眼部停留时间延长。液晶的晶格结构由双连续的纳米水通道和脂质双分子层在三维空间交叉堆叠而成，具有强极性的亲水域，具有极性较弱的亲脂域和极性中等的亲水亲脂交界面，对亲水性，疏水性和两亲性的药物都有强的包载作用。氧氟沙星难溶于水，具有较强的疏水性，与脂质结构极性相近，在亲脂域中具有较高的溶解度，因而倾向于与稳定的无定型的分子态分散在晶格单元的脂质双分子层，液晶相的双连续水通道与脂质双分子层的巨大交界面积显著增加了氧氟沙星的溶出表面积；同时氧氟沙星在亲脂域中有较大的溶解度，在溶出层和介质之间形成较大的药物浓度差，进一步增大药物的溶出速率。

液晶凝胶纳米粒的结构增加了活性成分氧氟沙星的溶解度与生物利用度，加之增稠剂使活性成分长时间停留于眼表，进一步提升了活性药物在生物体上的利用度，使治疗效果更佳，患者不适感减少。有效成分氧氟沙星在眼表长久、缓慢释放，提高了氧氟沙星的利用率，降低了多余氧氟沙星对人体的副作用。

优选地，一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：

a)0.16％的氧氟沙星，

b)25％至45％的至少一种中性脂质和/或生育酚，

c)25％至45％的至少一种磷脂酰胆碱，

d)5％至15％的非离子型表面活性剂，

e)2％至8％的至少一种溶剂，

f)0.32％的至少一种增稠剂，

g)其余为注射用水。

更优选地，一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：

a)0.16％的氧氟沙星，

b)35％的至少一种中性脂质和/或生育酚，

c)35％的至少一种磷脂酰胆碱，

d)10％的非离子型表面活性剂，

e)5％的至少一种溶剂，

f)0.32％的至少一种增稠剂，

g)其余为注射用水。

所述中性脂质为二酰基甘油，优选为甘油二油酸酯；所述磷脂酰胆碱为天然磷脂，优选为大豆磷脂酰胆碱；所述溶剂为生物相容性含氧的有机溶剂，优选乙醇、亚砜或酰胺中的一种或多种，首选乙醇或丙二醇中的一种或多种。

优选地，所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯80。聚山梨酯80广泛应用于食品、药品领域，其含量从不足1％～12％不等，常用作注射剂的增溶剂及其他剂型的乳化剂和分散剂。其作用主要表现为：(1)作为增溶剂提高澄明度和稳定性；(2)作为乳化剂配制乳浊型制剂；(3)作为稳定剂，利用药物被增溶在胶团之内，与氧隔绝以及胶团上的电荷排斥或胶团阻碍了促进水解的H+和OH-接近，而防止药物的氧化与水解；(4)作为分散剂，除杂质；(5)作为渗透剂，它可降低溶媒表面张力，增加细胞壁的渗透和解吸作用，利于有效成分的浸出，提高收率；(6)作为润湿剂，增加药物的生理活性，它可作用于吸收膜与药物互相作用，并可改善药物的理化性质；(7)用于剂型改进，提高药效。

优选地，所述增稠剂为透明质酸钠。透明质酸钠广泛存在于动物和人体的生理活性物质，在人皮肤、关节滑膜液、脐带、房水及眼玻璃体中均有分布。分子量为500000～730000道尔顿，其溶液具有高黏弹性及仿形性，为眼科手术的辅助剂。它可以在眼睛表面形成一种规则、稳定、长效的水分膜，不易被洗去，而且不会引起视力模糊并可长时间保护眼睛不会有干涩和刺激感。她还可以使治疗水平的活性药物在眼表停留时间延长，提高眼内生物利用度，显著减少给药次数，有助于增加患者的依从性和治疗成功率，且能减轻药物对眼的刺激，促进眼部创伤的愈合，缓解眼部不适症状。

进一步地，本发明提供了一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，包括以下步骤：

S1.称取所述磷脂酰胆碱、所述中性脂质和/或生育酚，分别加入所述表面活性剂和所述溶剂，搅拌均匀，得到油相；

S2.将S1中得到的所述油相滴入少量所述注射用水中，搅拌分散均匀；

S3.在S2的混合液中加入所述活性成份氧氟沙星，搅拌均匀，得到粗分散体；

S4.将S3中形成的所述粗分散体旋转混匀，并放置过夜；

S5.将S4的混合液和所述增稠剂加入余量的所述注射用水中，在超声探头作用下分散均匀；

S6.将S5所得的均匀混合液过微孔滤膜，即可得到所述氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液。

优选地，所述步骤S5中，所述超声探头的功率为40～60W,超声分散时间为5-10min,超声分散温度为75℃。

超声分散后可得到液晶凝胶纳米粒，纳米级粒子具有更高的膜表面积并且仍然保持溶致液晶规则的晶格结构，其增溶效果显著优于液晶凝胶。

优选地，所述步骤S6中，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

该氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，粒径较小且均匀性好，有利于细胞的内吞和转运；利用液晶凝胶独特的粘附性以及液晶相结构，可延长药物活性成分在眼部的滞留时间，并有效控制包载物的释放，从而提高生物利用度；增稠剂的使用，使得药物可以长时间存留于眼表，有利于眼组织对药物长久有效的吸收。

附图说明

图1为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒粗分散体的偏光显微镜图(a为空白溶剂，b为氧氟沙星液晶凝胶纳米粒粗分散体)；

图2为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的粒径分布图；

图3为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的电位分布图；

图4为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液体外释放曲线图；

图5为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液空白液晶凝胶纳米粒的细胞毒性试验结果；

图6为本发明氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液不同实施方式下的细胞毒性试验结果。

具体实施方式

下面将结合本发明中的附图，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例提供了一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.12％的氧氟沙星、20％的甘油二油酸酯、50％的大豆磷脂酰胆碱、8％的聚山梨酯80、5％的乙醇、0.35％的透明质酸钠、其余为注射用水。

本实施例提供的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，包括以下步骤：

S1.称取大豆磷脂酰胆碱、甘油二油酸酯，分别加入聚山梨酯80和乙醇，搅拌均匀，得到油相；

S2.将S1中得到的油相滴入少量注射用水中，搅拌分散均匀；

S3.在S2的混合液中加入活性成份氧氟沙星，搅拌均匀，得到粗分散体；

S4.将S3中形成的粗分散体旋转混匀，并放置过夜；

S5.将S4的混合液和透明质酸钠加入余量的注射用水中，在60W超声探头、75℃条件下，超声分散10min使混合液分散均匀；

S6.将S5所得的均匀混合液过0.22μm微孔滤膜，即可得到氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液。

实施例2

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于以下方面：

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.2％的氧氟沙星、50％的甘油二油酸酯、20％的大豆磷脂酰胆碱、5％的聚山梨酯80、7％的乙醇和丙二醇的混合物、0.28％的透明质酸钠、其余为注射用水。

实施例3

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于以下方面：

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.16％的氧氟沙星、25％的甘油二油酸酯、45％的大豆磷脂酰胆碱、10％的聚山梨酯80、6％的丙二醇、0.32％的透明质酸钠、其余为注射用水。

S5所用超声探头的功率为40W，超声分散时间为5min。

实施例4

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于以下方面：

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.16％的氧氟沙星、45％的甘油二油酸酯、25％的大豆磷脂酰胆碱、8％的聚山梨酯80、6％的乙醇和丙二醇的混合物、0.32％的透明质酸钠、其余为注射用水。

S5所用超声探头的功率为40W，超声分散时间为5min。

实施例5

本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于以下方面：

一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.16％的氧氟沙星、35％的甘油二油酸酯、35％的大豆磷脂酰胆碱、10％的聚山梨酯80、5％的乙醇、0.32％的透明质酸钠、其余为注射用水。

S5所用超声探头的功率为50W，超声分散时间为8min。

对比例1

本对比例与实施例5基本相同，不同之处在于以下方面：

本对比例提供的是空白对照组，不含有活性成分氧氟沙星。

对比例2

本对比例与实施例5基本相同，不同之处在于以下方面：

本对比例提供的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，不含有增稠剂透明质酸钠。

对比例3

本对比例与实施例5基本相同，不同之处在于以下方面：

本对比例提供的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，由以下组分制备而成：0.16％的氧氟沙星、10％的聚山梨酯80、5％的乙醇、0.32％的透明质酸钠、其余为注射用水。

对比例4

本对比例与实施例5基本相同，不同之处在于以下方面：

本对比例提供的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，含有0.2％的透明质酸钠。

对比例5

本对比例与实施例5基本相同，不同之处在于以下方面：

本对比例提供的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，含有0.5％的透明质酸钠。

试验例1氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的偏光效应

试验样品由实施例5制备得到。取适量乙醇或水，将制备步骤S4中放置过夜的液晶凝胶纳米粒粗分散体滴于载玻片上，用盖玻片盖住后置于偏光显微镜的观测区以观察液晶纳米粒粗分散体的状态。与空白溶液相比(图1a)，液晶凝胶纳米粒粗分散体在偏光显微镜下可见折射光(图1b)，可判断有液晶存在。

其余实施例制备的试验样品采用同样的方法均可判断液晶相的存在。

试验例2氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的粒径分布、电位分布

试验样品由实施例1～5、对比例1制备得到。将各实施例及对比例所得的液晶凝胶纳米粒稀释30倍，置于样品池中，用动态光散射仪测定其粒径、多分散系数及电位分布情况。其中，多分散系数(PDI)是反映粒子大小分布范围变化的指标，PDI越小表示粒子大小越均匀、集中分布，PDI越大表示粒子大小不均匀、差异显著。液晶凝胶纳米粒的测试数据见表1。

表1.液晶凝胶纳米粒的测试数据

其中，实施例5所得液晶凝胶纳米粒滴眼液的粒径、电位分布图分别见图2，图3。

由以上测试数据可知，液晶凝胶纳米粒载上活性成分氧氟沙星后，仍呈电中性。且实施例1～5所得液晶凝胶纳米粒粒径分布均匀、分散性和稳定性良好。

试验例3氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的体外释放情况

采用透析袋法对实施例1～5、对比例2～3制备的样品进行体外释放特性实验考察，释放介质为水。具体实验步骤为：将氧氟沙星液晶凝胶纳米粒样品用注射器加入透析袋中，两头用夹子夹住。接受介质为水，在特定温度和转速下于一定的时间间隔下取样1mL，每次再补入1mL相同条件下的水。取出的样过0.22μm微孔滤膜，HPLC测定氧氟沙星浓度。计算各时间点的累计释放率(Q)。

Q＝(Cn+∑C_iV_i)/Q₀×100％

式中Q₀为接受池氧氟沙星总量；Cn为第n次取样实测质量浓度，V_i为第i次取样体积，C_i为第i次取样实测质量浓度。

实验结果显示(图4)，氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的体外释放，只有对比例3制备的样品可见氧氟沙星突释现象，说明对比例1～5及对比例2制备的样品中氧氟沙星活性成分被包裹在液晶凝胶纳米粒的晶格内；其中，实施例5与对比例2所得氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，氧氟沙星活性成分释放率相当且释放的最快。

试验例4氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的细胞毒性

海拉细胞，是一种人工培养，具有无限增殖能力的细胞，诞生至2017年已经整整66年了。在医学界，海拉细胞被广泛应用于肿瘤研究、生物实验或者细胞培养，已经成为医学研究中非常重要的工具。这种细胞是现有来自人体的组织培养中最早的分离细胞，在世界各地的研究室继续培养，广泛被用作分析细胞营养要求、细胞增殖和各种细胞化学的研究材料。对脊髓灰质炎病毒、腺病毒等的病毒有敏感性，并显示有明显的细胞变性，在病毒研究方面的利用价值颇大。

将Hela细胞以1*104个/孔接种于96孔板中，37℃孵育24h后，吸去培养液，分别加入不同浓度的空白和载药LCNP溶液，继续孵育24h后。弃去药液，加入4℃的PBS洗一遍，加入无血清的培养基100μl，蓝光照射4min(2min/2min)后，继续孵育2h。取10μL四甲基偶氮唑蓝(MTT，5mg/mL)加入各孔内，继续孵育4h，弃去孔内液体，加入DMSO 100μL，振摇，使结晶充分溶解，在570nm波长下用酶标仪测定各样品的吸光值(ODsample)，相同方法测定空白组OD值(ODcontrol)，按下式计算细胞毒性和体外药效学评价。

Cell inhibition rate(％)＝(OD₃-OD₁)/(OD₂-OD₁)*100

其中OD₁为空白组OD值；OD₂为阴性对照组OD值；OD₃为样品组OD值

对比例1所得空白液晶凝胶纳米粒在0.1～50mg/ml的浓度下对Hela细胞的细胞毒性，见图5。结果显示，对比例1所得空白液晶凝胶纳米粒的浓度达到1mg/ml时，细胞存活率仍在80％以上；当浓度达到50mg/ml时，细胞存活率>60％，说明对比例1所得空白液晶凝胶纳米粒对Hela的细胞毒性较小，安全性较高。

与此同时，考察实施例1～5、对比例2～3所得氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的细胞毒性，见图6。结果显示，实施例5与对比例2所得氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的细胞存活率最低，杀菌作用最强，且实施例5与对比例2所得氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的杀菌效果相当；对比例3氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的细胞存活率较高、杀菌作用较弱，与活性成分无法长久有效释放、生物利用度低有关。这与氧氟沙星液晶凝胶纳米粒的体外释放情况一致，活性成分释放越快对细胞的杀伤力越强。

试验例5氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的兔眼刺激试验

取实施例5、对比例2、对比例4和对比例5制备的氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，选择健康新西兰兔，每只新西兰兔的左眼、右眼分别给不同的药物，左眼与右眼滴加相同量的滴眼液。在2h、6h、12h、24h、48h、72h，分别检测左眼、右眼中氧氟沙星的含量，试验结果如表1。

表1各个观察时间兔眼氧氟沙星的含量

试验结果显示，氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的有效成分氧氟沙星在生物体内的释放时间对比例5＞实施例5＞对比例4＞对比例2，但对比例5制得的氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液较为粘稠，滴加过程不顺畅；添加了透明质酸钠的氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，更有利于生物组织对药物的吸收。综合来说，实施例5制得的氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液在生物体内作用时间更长，也更能满足生物体的使用需求。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims

1.一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，其特征在于，由以下组分制备而成：

a)0.12％至0.2％的氧氟沙星，

b)20％至50％的至少一种中性脂质和/或生育酚，

c)20％至50％的至少一种磷脂酰胆碱，

d)0.2％至20％的非离子型表面活性剂，

e)0.1％至10％的至少一种溶剂，

f)0.28％至0.35％的至少一种增稠剂，

g)其余为注射用水。

2.根据权利要求1所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，其特征在于，由以下组分制备而成：

a)0.16％的氧氟沙星，

b)25％至45％的至少一种中性脂质和/或生育酚，

c)25％至45％的至少一种磷脂酰胆碱，

d)5％至15％的非离子型表面活性剂，

e)2％至8％的至少一种溶剂，

f)0.32％的至少一种增稠剂，

g)其余为注射用水。

3.根据权利要求1至2任一项所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，其特征在于，所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯80。

4.根据权利要求1至2任一项所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液，其特征在于，所述增稠剂为透明质酸钠。

5.一种权利要求1至2任一项所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.称取所述磷脂酰胆碱、所述中性脂质和/或生育酚，分别加入所述表面活性剂和所述溶剂，搅拌均匀,得到油相；

S4.将S3中形成的所述粗分散体旋转混匀，并放置过夜；

6.根据权利要求5所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中,所述超声探头的功率为40～60W,超声分散时间为5-10min,超声分散温度为75℃。

7.根据权利要求5所述的一种氧氟沙星液晶凝胶纳米粒滴眼液的制备方法，其特征在于，所述步骤S6中,所述微孔滤膜的孔径为0.22μm。