CN108294981B - 一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用 - Google Patents

一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及日化技术领域，尤其涉及一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用。本发明将红花、赤芍、牡丹皮和甘草进行复配，组合物经提取后能够促进COX‑2基因表达、抑制ET‑1蛋白表达、提高经皮氧分压从而产生改善肤色的作用，实验表明，本发明提供组合物对COX‑2基因表达的促进效果、对ET‑1蛋白表达的抑制效果以及对经皮氧分压的提高效果皆显著优于缺方的对照组，p<0.05；也优于含有其他组分的组合物。说明本发明提供的组合物中，各组分起到了良好的增效协同作用，四个组分缺一不可。

Description

一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用
技术领域
本发明涉及日化技术领域，尤其涉及一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用。
背景技术
肤色是指人类皮肤表皮层因黑色素、原血红素、叶红素等色素沉着所反映出的皮肤颜色。皮肤中的血红蛋白有两种，一种为氧合血红蛋白，一种为游离血红蛋白，其中氧合血红蛋白呈红色，游离血红蛋白呈蓝色。当微血管中氧合血红蛋白数量多时，皮肤呈现“透红”的健康状态，当微血管中游离血红蛋白数量多时，皮肤则无法“透红”。而氧气、二氧化碳交换速度决定了微血管中氧合血红蛋白的数量，故此氧气-二氧化碳交换速率提高，能够改善皮肤的“透红”效果。
影响氧气-二氧化碳交换速率的因素有很多，血流速度、全血粘度、红细胞变形能力等，其中内皮素1、环氧合酶2能够影响血流速度从而影响氧气-二氧化碳交换速率。内皮素1(ET-1)为最强血管收缩因子，其在皮肤中存在，ET-1的释放会导致血管的收缩。环氧合酶2(COX-2)能够激活细胞中花生四烯酸产生PGI1，而PGI1为机体主要的舒血管调节因子。
目前的护肤产品大多只关注美白的功效，即仅关注如何让皮肤从黑变白，围绕黑素合成和迁移的作用途径，通过破坏黑素细胞活性，瓦解黑色素，从而改变固有肤色，使肤色变浅。并未针对如何让皮肤更加“透红”来进行研究。因此，进一步研究如何使皮肤“透红”从而达到改善肤色的目的十分重要。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种组合物及其在制备改善肤色的产品中的应用。
本发明提供的组合物由红花、赤芍、牡丹皮和甘草组成。
本发明提供的组合物中红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为(1～3)：(1～3)：(1～2)：(1～2)。
一些实施例中，本发明提供的组合物中红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为(2～3)：(1～3)：1：(1.5～2)。
一些具体实施例中，组合物中红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为2：1：1：2。
一些具体实施例中，组合物中红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为3：3：1：1.5。
红花为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。现代药理研究表明，其具有抗凝、抗血栓、活血、保护血管内皮细胞、抗氧化等作用。
赤芍本品为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeoniaveitchii Lynch的干燥根。现代药理研究表明，其具有活血化瘀、抗血栓、抗氧化等功效。
牡丹皮别名丹皮、粉丹皮、洛阳花、条丹皮，为毛茛科植物牡丹Paeoniasuffruticosa Andr.的干燥根皮。现代药理研究表明，其具有镇痛、镇静、抗病原微生物作用、抗炎作用、调节免疫等作用。
甘草为豆科植物乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflataBat.或光果甘草Glycyrrhiza glabraL.的干燥根及根茎。主要功效有：益气补中、祛痰止咳、缓急止痛、缓和药性和清热解毒。
本发明将红花、赤芍、牡丹皮和甘草进行复配，组合物经提取后能够促进COX-2基因表达、抑制ET-1蛋白表达、提高经皮氧分压从而产生改善肤色的作用，实验表明，本发明提供组合物经提取后，改善肤色的效果显著优于现有产品，p<0.05。其对COX-2基因表达的促进效果、对ET-1蛋白表达的抑制效果以及对经皮氧分压的提高效果皆显著优于缺方的对照组，p<0.05。说明本发明提供的组合物中，各组分起到了良好的增效协同作用，共同起到改善肤色的作用，四个组分缺一不可。
本发明还提供了一种提取物，其由本发明提供的组合物经醇提制得。
所述提取物的制备方法中，醇为95vol％的乙醇水溶液；提取采用加热回流提取的方法。
本发明提供的提取物的制备方法，为以95vol％乙醇水溶液对本发明提供的组合物进行回流提取，提取液经浓缩获得提取物。
本发明中，所述95vol％乙醇水溶液的质量为组合物质量的15～35倍。
一些实施例中，所述95vol％乙醇水溶液的质量为组合物质量的20～30倍。
一些具体实施例中，所述95vol％乙醇水溶液的质量为组合物质量的20倍。
本发明中，所述的目的是挥去乙醇。具体的浓缩的倍数为15～35倍，优选浓缩20倍。
本发明中，所述回流提取的温度为50℃～90℃，时间为0.5h～2.5h。
一些实施例中，所述回流提取的温度为60℃～80℃，时间为0.5h～1h。
一些具体实施例中，所述回流提取的温度为60℃，时间为0.5h。
另一些具体实施例中，所述回流提取的温度为80℃，时间为1h。
本发明提供的制备方法工艺简单，通过加热回流提取，能够对组合物种的有效成分进行充分的提取，提取的周期短，效率高。
本发明的组合物或提取物在制备促进COX-2基因表达和/或抑制ET-1蛋白表达的产品中的应用。
本发明以人角质形成细胞为受试样品，经UVB辐射后，未经处理的阴性对照的COX-2基因表达受限，ET-1蛋白表达升高。而给予本发明提供的提取物的细胞经UVB辐射，COX-2基因的表达得到促进，而ET-1蛋白的表达收到抑制。且本发明提取物的效果显著优于缺方组或配比不佳的组合物，p<0.05。
本发明的组合物或提取物在制备提高经皮氧分压的产品中的应用。
经人体实验证明，使用含本发明提供的提取物的化妆品能够使皮肤氧气分压呈梯度上升趋势，其效果在第4周、第6周呈现显著变化，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为49％，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为42.7％，。表明本发明提取物能够提高皮肤氧气分压，能够提高微血管氧气-二氧化碳交换速率。
本发明的组合物或提取物在制备改善肤色的产品中的应用。
本发明还提供了一种改善肤色的产品，包括本发明所述的提取物和1,3-丁二醇。
本发明提供的改善肤色的产品中，所述提取物与1,3-丁二醇的质量比为5:100。
本发明提供的改善肤色的产品中，所述提取物与1，3-丁二醇的质量之和占总产品质量的0.25％。
本发明提供的改善肤色的产品中，还包括膏霜基质。
所述膏霜基质包括聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯、聚二甲基硅氧烷、氢化聚异丁烯、霍霍巴(SIMMONDSIACHINENSIS)籽油丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、鲸蜡硬脂醇、丁二醇、甘油和水。
所述改善肤色的产品为化妆品，所述化妆品的种类为面霜、水、乳液、眼霜或面膜。本发明实施例中，制备的产品为面霜。
本发明改善肤色产品的制备方法为提取物与1,3-丁二醇混合后，进行精滤、灭菌。
所述灭菌采用高温灭菌，时间为40min。
本发明将红花、赤芍、牡丹皮和甘草进行复配，组合物经提取后能够促进COX-2基因表达、抑制ET-1蛋白表达、提高经皮氧分压从而产生改善肤色的作用，实验表明，本发明提供组合物对COX-2基因表达的促进效果、对ET-1蛋白表达的抑制效果以及对经皮氧分压的提高效果皆显著优于缺方的对照组，p<0.05；也优于含有其他组分的组合物。说明本发明提供的组合物中，各组分起到了良好的增效协同作用，四个组分缺一不可。
附图说明
图1示激光多普勒测试结果；其中图1-a示测试的平均值(n＝35)；图1-b示相对初始值的总体均值变化率(％)(n＝35)；
图2示激光多普勒测试结果图；其中，图2-a-1～图2-a-4依次示1号受试者第0周、第2周、第4周、第6周的激光多普勒测试图；图2-b-1～图2-b-4依次示2号受试者第0周、第2周、第4周、第6周的激光多普勒测试图；图2-c-1～图2-c-4依次示3号受试者第0周、第2周、第4周、第6周的激光多普勒测试图；图2-d-1～图2-d-4依次示4号受试者第0周、第2周、第4周、第6周的激光多普勒测试图；图2-e-1～图2-e-4依次示5号受试者第0周、第2周、第4周、第6周的激光多普勒测试图。
具体实施方式
本发明提供了一种组合物及其在制备改善肤色的化妆品中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
红花2g、赤芍1g、牡丹皮1g、甘草2g，加入120g的95vol％乙醇水溶液，60℃加热回流提取0.5h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至6mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方1。
实施例2
红花3g、赤芍3g、牡丹皮1g、甘草1.5g，加入170g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至9mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方2。
对比例1
红花5g，加入100g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方3。
对比例2
赤芍5g，加入100g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方4。
对比例3
牡丹皮5g，加入100g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方5。
对比例4
甘草5g，加入100g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方6。
对比例5
红花3g、赤芍3g、牡丹皮1g，加入140g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至7mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方7。
对比例6
红花3g、赤芍3g、甘草1.5g，加入150g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至7.5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方8。
对比例7
红花3g、牡丹皮1g、甘草1.5g，加入110g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5.5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方9。
对比例8
赤芍3g、牡丹皮1g、甘草1.5g，加入110g的95vol％乙醇水溶液，80℃加热回流提取1h，提取液(体积记为m1)经冷却，精滤后，减压浓缩至5.5mL，即为提取物。
取5g提取物与100g 1,3-丁二醇混合，经冷却，精滤、高温灭菌40min，冷却后制得白里透红方10。
功效验证
一、细胞水平检测结果
1实验方法
实验样品：白里透红方(红花：赤芍：牡丹皮：甘草＝3:3:1:1.5)；Eclaline(具有“透红”功效的市售功效植物原料提取物)。
细胞系：人角质形成细胞。
实验模型：UVB-角质形成细胞模型。
组方对ET-1作用效果研究实验方法：ELISA(按照试剂盒操作说明进行)。
组方对COX-2作用效果研究实验方法：RT-PCR。
1.1组方对ET-1作用效果研究实验方法(ELISA)
①细胞培养：将细胞接种到6孔板中，37℃，CO2培养箱孵育过夜。
②溶液配制：采用DMSO对各实施例和对比例的白里透红方进行稀释，稀释至白里透红方的质量分数为0.5％；以质量分数为0.5％的Eclaline(来源于法国Silab公司为阳性对照组。
③给药：待6孔板铺板率达到40％～50％时，进行分组给药，每组设3个复孔。空白对照组(1‰DMSO，UVB-)、阴性对照组(1‰DMSO，UVB+)加入角质形成细胞培养基，阳性对照组和样品组加入含有相应浓度受试物的角质形成细胞培养液，37℃，5％CO2培养箱继续培养24h。
④UVB辐照：按照实验要求对阴性对照组、样品组进行UVB辐照，辐照剂量为300mJ/cm2，之后将所有组别的孔内液体更换为角质形成细胞培养液。37℃，5％CO2继续培养24h后收集上清液。
⑤采用ET-1的ELSIA检测试剂盒(博士德)进行测试，结果如表1。
表1 ET-1的表达量
Figure BDA0001576356130000081
结果表明：各白里透红方在0.5％的暴露剂量下，对UVB刺激产生的ET-1分泌均产生了一定的抑制作用。白里透红方1～2和7～10的效果较佳，与阴性对照、阳性对照皆产生了显著性的差异p<0.05；但是阳性对照组未显示与阴性对照组的差异，p>0.05。白里透红方3～10的效果不及白里透红方1～2，该差异存在统计学差异，p<0.05。并且，白里透红方2的效果显著优于白里透红方1，p<0.05。
1.2组方对COX-2作用效果研究实验方法(RT-PCR)
①细胞培养：将细胞接种到6孔板中，37℃，CO2培养箱孵育过夜。
②溶液配制：采用DMSO对样品进行稀释，配制成0.5％的白里透红方、0.5％的Eclaline。
③给药：待6孔板铺板率达到40％-50％时，进行分组给药，每组设3个复孔。空白对照组(1‰DMSO，UVB-)、阴性对照组(1‰DMSO，UVB+)加入角质形成细胞培养基，阳性对照组和样品组加入含有相应浓度受试物的角质形成细胞培养液，37℃，5％CO2培养箱继续培养24h。
④UVB辐照：按照实验要求对阴性对照组、样品组进行UVB辐照，辐照剂量为300mJ/cm2,之后将所有组别的孔内液体更换为角质形成细胞培养液。37℃，5％CO2继续培养24h后收集上清液。
⑤收样：弃掉培养液，每孔加入1mlTrizol，吹打裂解细胞后，收样。
⑥PCR检测：提取RNA，反转录至cDNA后，进行荧光定量PCR检测。
⑦分析：采用T-Test方法进行统计分析，结果如表2。
表2 COX-2的表达量
Figure BDA0001576356130000091
结果表明：各白里透红方在0.5％的暴露剂量下，对COX-2基因表达量均有一定的提升。白里透红方1～2和7～10的效果较佳，与阴性对照、阳性对照皆产生了显著性的差异p<0.05；但是阳性对照组未显示与阴性对照组的差异，p>0.05。白里透红方3～10的效果不及白里透红方1～2，该差异存在统计学差异，p<0.05。并且，白里透红方2的效果显著优于白里透红方1，p<0.05。
二、人体功效测试-皮肤微循环血流量
1、试验样品：5％白里透红方膏霜(红花：赤芍：牡丹皮：甘草＝3:3:1:1.5，其中基质为未添加任何功效成分的膏霜基质)。
仪器：激光多普勒血流测试仪PIM3(瑞典Perimed公司)
2、受试者：性别随机，年龄18～60岁。本次参与测试志愿者人数35人，有效志愿者人数30人。
符合下列所有条件的志愿者将被入选：1)正常受试者，年龄随机，性别随机2)无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者。3)无活动性过敏性疾病者。4)既往对护肤类化妆品无过敏史。5)近一月内未曾全身使用激素类药物及免疫抑制剂者。6)未参加其他临床试验者。7)志愿参加并能按试验要求完成规定内容者。
符合下列任一项者将被排除：1)妊娠或哺乳期妇女。2)室外工作为主、无法避免日晒者。3)试用期间全身应用激素类、免疫制剂类药物者。4)试用期间应用抗炎药物者。5)未按规定使用受试物或资料不全者。
受试部位为受试者面部。洗脱期1周，即测试前1周未使用相类似的化妆品。测试环境：温度(22±2)℃；相对湿度(50±5)％RH。
回访时间：使用样品第1周、第2周、第4周、第6周。
3测试指标
3.1皮肤微循环血流量
使用激光多普勒血流测试仪对皮肤微循环血流量测试进行测试。测试区域为面部2×2cm2区域，每个测试区测试1次，记为T0。
测试皮肤微循环速度，其结果通过数据与图片形式表征。数据值越大，表明微循环速度越快，反之，表明皮肤微循环速度慢；图片中红色部分面积越大，表明皮肤微循环速度越快，反之，表明皮肤微循环速度慢。结果如表3、图1～2：
表3激光多普勒测试结果
Figure BDA0001576356130000101
结果表明：在测试周期内，受试人群中未出现明显的全身不良反应或3级以上的皮肤刺激，无组间脱落，有效受试人数为35人。
结果显示，35名志愿者使用含5％白里透红方膏霜，皮肤微循环速度呈梯度上升趋势，其效果在第6周呈现显著变化，在第六周相对于初始值的总体均值变化率为23.1％，表明5％白里透红方膏霜能够改善皮肤微循环速率。
三、人体功效测试-提高皮肤氧分压效果
1实验方法
10名符合条件的志愿者参加测试，其中有效人数8人，受试者要求与皮肤微循环血流量测试相同。随机选择志愿者手臂4×4cm2区域进行测试。
测试时长2h，测定受试者0h，涂抹膏霜后1h、2h皮肤经皮氧分压变化情况。
2仪器
经皮氧分压检测仪(瑞典Perimed公司)
3样品
表4样品信息
编号 样品名称 状态 包装
1# 5wt％白里透红方1 淡黄色膏霜 未见异常
2# 5wt％白里透红方2 淡黄色膏霜 未见异常
3# 5wt％白里透红方3 淡黄色膏霜 未见异常
4# 5wt％白里透红方4 淡黄色膏霜 未见异常
5# 5wt％白里透红方5 淡黄色膏霜 未见异常
6# 5wt％白里透红方6 淡黄色膏霜 未见异常
7# 5wt％白里透红方7 淡黄色膏霜 未见异常
8# 5wt％白里透红方8 淡黄色膏霜 未见异常
9# 5wt％白里透红方9 淡黄色膏霜 未见异常
10# 5wt％白里透红方10 淡黄色膏霜 未见异常
ck 5wt％Eclaline 白色膏霜 未见异常
4、检测结果如表5
表5经皮氧分压测试结果
Figure BDA0001576356130000111
Figure BDA0001576356130000121
结果显示，涂抹5％白里透红方膏霜1、2后，在1h、2h，经皮氧分压呈整体上升趋势，该效果显著优于对比例组和ck组，p<0.05。且白里透红方2对经皮氧分压的改善效果显著优于1#白里透红方，p<0.05.
四、人体功效测试-长期人体测试结果
1实验方法
35名符合条件的志愿者参加测试，随机分为两组，分别使用5wt％白里透红方2和5wt％白里透红方5。
志愿者每天早晚各使用一次测试样品，涂抹量按个人习惯使用(测试期间志愿者面部不得使用与测试样品类似的化妆品)。
测试周期为6周，测试期间志愿者不改变日常使用洗面奶的品牌和使用习惯。
在产品使用前、产品使用2周、4周和6周后，对皮肤微循环血流量、皮肤经皮氧分压进行测试，并对面部VISIA图像进行采集。
在在进行回访期间，志愿者需将发放的测试样品带回进行称重。
皮肤微循环血流量的测试区为面部2×2cm2区域，每次每个测试区扫描并拍照1次。
皮肤经皮氧分压的测试区为面部2×2cm2区域。
2仪器
激光多普勒血流测试仪PIM3(瑞典Perimed公司)
经皮氧分压检测仪(瑞典Perimed公司)
3样品：5wt％白里透红方2，5wt％白里透红方5
4皮肤经皮氧分压测试实验结果如表6～7
表6 5wt％白里透红方2经皮氧分压测试结果
Figure BDA0001576356130000131
表7 5wt％白里透红方5经皮氧分压测试结果
Figure BDA0001576356130000132
结果显示，35名志愿者使用含5％白里透红方2和5wt％白里透红方5，皮肤氧气分压呈梯度上升趋势，其效果在第4周、第6周呈现显著变化，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为49％，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为42.7％。表明5％白里透红方膏霜能够提高皮肤氧气分压，能够提高微血管氧气-二氧化碳交换速率。受试者表示时候白里透红方后，肤色得到改善，呈现白皙、红润的效果。
五、人体功效测试-面部VISIA图像分析
35名符合条件的志愿者参加测试，使用面部图像分析仪VISIA-CR进行面部图像采集，并用图像分析软件对所获得的图片进行皮肤颜色和皮肤亮度分析。所得数据a*值越高，说明颜色越红，并可计算得到皮肤的ITA值，ITA值越高，皮肤颜色越浅。通常ITA值＞55，肤色非常浅亮，ITA值为41～55，肤色浅亮；ITA值为28～41，肤色中等；ITA值为10～28，肤色深暗，棕褐色；
表8白里透红组方VISIA相关志愿者数据表(原始值)
Figure BDA0001576356130000141
表9白里透红组方VISIA相关志愿者数据表(与初始值对比)
Figure BDA0001576356130000142
备注：“-”表示相对初始值，其变化率为负，故此未标注。
从面部VISIA图像可直观看出，使用5％白里透红方6周以后，志愿者皮肤肤色显著变白。从表8～9可以看出，志愿者使用含5％白里透红方的产品后，肤色得到改善。
综合上述，在测试周期6周内，受试者使用测试样品后：
面部皮肤微循环血流量呈正向变化，其效果在第6周呈现显著变化，在第六周相对于初始值的总体均值变化率为23.1％。
面部经皮氧分压呈正向变化，其效果在第4周开始呈现显著变化，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为49％，在第4周相对于初始值的总体均值变化率为42.7％。
从志愿者面部VISIA图像分析结果显示，使用6周后，志愿者面部肤色明显“白里透红”。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种组合物，其特征在于，由红花、赤芍、牡丹皮和甘草制成；所述红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为3：3：1：1.5；
所述组合物的制备方法为：
以95vol%乙醇水溶液对所述组合物进行回流提取，提取液经浓缩获得提取物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述95vol%乙醇水溶液的质量为组合物质量的15~35倍；所述浓缩的倍数为15~35倍。
3.一种提取物的制备方法，其特征在于，由权利要求1或2的组合物经提取制得，所述提取包括：以95vol%乙醇水溶液对红花、赤芍、牡丹皮和甘草进行回流提取，提取液经浓缩获得提取物；
所述红花、赤芍、牡丹皮和甘草的质量比为3：3：1：1.5。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述95vol%乙醇水溶液的质量为组合物质量的15~35倍；所述浓缩的倍数为15~35倍。
5.权利要求1或2所述的组合物或权利要求3或4所述制备方法制得的提取物在制备促进COX-2基因表达和/或抑制ET-1蛋白表达的产品中的应用。
6.权利要求1或2所述的组合物或权利要求3或4所述制备方法制得的提取物在制备提高经皮氧分压的产品中的应用。
7.权利要求1或2所述的组合物或权利要求3或4所述制备方法制得的提取物在制备改善肤色的产品中的应用。
8.一种改善肤色的产品，其特征在于，包括权利要求1或2所述的组合物或权利要求3或4所述制备方法制得的提取物和1,3-丁二醇。
9.权利要求8所述产品的制备方法，其特征在于，将权利要求1或2所述的组合物或权利要求3或4所述制备方法制得的提取物与1,3-丁二醇混合后，进行精滤、灭菌。
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