CN108272851B - 血人参在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了血人参提取物在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用，所述的血人参提取物这样制备：取血人参，粉碎至粗粉，加乙醇提取后，合并滤液，得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3，所余部分为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏，即得。本发明方法制备的血人参提取物对肿瘤及其并发症具有治疗效果，结合多指标结果来看血人参提取物效果好，具有开发利用价值。
Description
技术领域
本发明涉及血人参提取物的新用途，具体涉及血人参提取物在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用。
背景技术
肿瘤(tumour)是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物(neogrowth)，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物(neoplasm)。根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类，而癌症即为恶性肿瘤的总称。需要注意的是，癌症与癌是两个不同的概念，癌指的是上皮性的恶性肿瘤，如由大肠黏膜上皮形成的恶性肿瘤称为大肠黏膜上皮癌，简称大肠癌。由皮肤上皮形成的称皮肤上皮癌，简称皮肤癌等等。白血病是一种血液系统的恶性肿瘤，所以俗称血癌。它是由骨髓中某型未成熟的白细胞弥漫性恶性生长，取代正常骨髓组织并进入血液中形成的。因在患者的血液中出现大量的这种肿瘤性白细胞，以致血液呈现乳糜样颜色的特征，因此人们便称它为白血病，其实此病名未能反映出它的癌细胞的生物学分类特征。在极大多数病例中，血液白细胞数量明显增多，但有时也可正常甚至减少。按白血病细胞的类型，可分为粒细胞型、淋巴细胞型、单核细胞型等3种。良性肿瘤与恶性肿瘤的主要区别：良性肿瘤生长缓慢，有包膜，膨胀性生长，摸之有滑动，边界清楚，不转移，预后一般良好，有局部压迫症状，一般无全身症状，通常不会引起患者死亡；恶性肿瘤(癌)生长迅速，侵袭性生长，与周围组织粘连，摸之不能移动，边界不清，易发生转移，治疗后易复发，早期即可能有低热、食欲差、体重下降、晚期可出现严重消，瘦、贫血、发热等，如不及时治疗，常导致死亡。
因此，对肿瘤治疗药物的深入研究具有十分重要的意义并成为国内外的一个研究热点。
肿瘤已成为全球死亡率最高的疾病之一。越来越多的天然植物具有一定的抗肺癌肿瘤的作用，这是肺癌深入研究的方向和福音。血人参为豆科木蓝属植物茸毛木蓝(Indigofera stachyodes Lindl)的根，为贵州的苗族药物，又叫铁刷子、雪人参、山红花、红苦刺。味甘、微苦，性温。具有滋阴补虚，调经摄血，活血舒筋的功效。主治崩漏，体虚久痢，肠风下血，溃疡不敛，风湿痹通，跌打损伤，肝硬化，疳积等。是《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)收载品种。血人参是贵州苗族用药，具有活血、利湿、化痰、解表等功效。对苗药血人参的资源分布、育种、化学成分、薄层鉴别及黄酮提取工艺等方面有少数的研究。虽然，对苗药血人参的化学成分、药理活性都有研究，但关于肿瘤方面的研究未见相关资料报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供了血人参提取物在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用；
本发明采用如下技术方案实现：血人参提取物在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用。
前述的应用中，所述肿瘤包括肠癌、乳腺癌、肝癌、肺癌或胃癌。
前述的应用中，所述的血人参提取物这样制备：取血人参，粉碎至粗粉，加乙醇提取后，合并滤液，得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，所余部分为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏，即得。
前述的应用中，所述的血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加8-12倍量85-95％乙醇，提取2次，每次2-4h，然后用6-8倍量60％的乙醇提取2次，每次1.5-2.5h，合并滤液，回收乙醇至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏。
前述的应用中，所述的血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏。
血人参在制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物中的应用。
一种预防或治疗肿瘤及其并发症的药物，所述药物中包括血人参提取物或血人参。
前述的预防或治疗肿瘤及其并发症的药物，所述药物主要由血人参提取物或血人参制备而成。
申请人对血人参提取物抗肿瘤作用机制进行了实验研究。并通过以下实施来进一步阐述本发明。
实验例1：血人参不同提取部位对肿瘤细胞的作用研究
1实验方法
1.1实验试剂及试药的配置
1.1.1 PBS缓冲液的配置取购买PBS的粉末一袋，加入适量双蒸水，磁力横拌溶解后，定容至2000ml，其PH值为7.2-7.4，高压灭菌(120℃，30min后)，放入4℃冰箱中冷藏保存备用。
1.1.2 RPMI1640完全培养基的配置RPMI1640培养液90％，标准胎牛血清，混合均匀，4℃冰箱中冷藏保存备用。
1.1.3 0.25％胰酶消化液配置取胰酶溶液(100ml/瓶)，小剂量分装，分装为1ml，-20℃冰箱中冻存保存备用。
1.1.4 MTT溶液的配置取MTT 250mg，溶于50mlPBS缓冲液中，配成最终浓度为5mg/ml，磁力搅拌溶解后，用0.22μm的微孔滤膜过滤，小剂量分装，分装为2ml，-20℃冰箱中冻存保存备用。
1.1.5细胞冻存液的配置90％的胎牛血清，10％的DMSO混合均匀，4℃冰箱中冷藏保存备用。
1.1.6试药的配置分别在万分之一平上称取提取物，加入DMSO助溶，再用含10％胎牛血清的RPMI1640培养基配成浓度为800μg/ml的溶液，用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌，放入4℃冰箱中冷藏保存备用。
1.2血人参不同提取部位的制备取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次(所余部分即为水层)，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏。
1.3实验细胞培养
1.2.1实验细胞的培养细胞用含10％胎牛血清的RPMI-1640或DMEM培养基，在37℃，5％的CO2浓度，饱和湿度条件下常规培养，1-2天换液一次。
1.3.2实验细胞的传代
贴壁细泡铺满瓶底80％以上时需要消化传代。
(1)取出培养瓶，弃去瓶中培养液，PBS溶液冲洗两遍；
(2)加入适量消化液，旋动培养瓶使消化液覆盖细胞层；
(3)静置数分钟，倒置显微镜下观察，细胞收缩变圆，细胞间隙变大，弃去消化液；
(4)PBS溶液冲洗2次；
(5)加入适量培养液，用吸管将细胞从瓶壁上小心吹下，制成单细胞悬液，分装接种到新的灭菌细胞培养瓶内，置于37℃培养箱中培养。
1.3.3实验细胞的冻存：
(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25％胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，5分钟)。
(2)去上清液，加入冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×106～1×107/ml之间。
(3)将上述细胞分装于冻存管中，密闭，标记好细胞名称和冻存日期，放入冻存盒，程序降温后，置于超低温冰箱中。
1.3.4实验细胞的复苏：
(1)从液氮罐中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中，不时摇动令其在1分钟内完全融化；
(2)取出冻存管，用75％酒精擦拭消毒后拧开盖，用吸管吸出悬液，注入离心管中再补加适量培养液；
(3)低速离心1000r/min 5min，弃上清后加入培养液，重新离心，洗涤细胞2次；
(4)用含10％胎牛血清的培养液适当稀释后；接种培养瓶在CO2培养箱内培养，次日更换一次培养液，待细胞生长铺满瓶壁，再进行传代培养；取对数生长期细胞进行实验；
1.3.5实验分组：
分为试剂对照组、肿瘤细胞对照组和血人参提取物实验组，血人参石油醚(SYM)、乙酸乙酯(YSYZ)、正丁醇(ZDC)、水层(SC)、醇提(CT)实验组，设计为400μg/ml、200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml四个浓度，每组均设3个平行孔；重复3次。
1.3.6MTT法检测各药物对几种癌细胞细胞增殖的影响：
(1)取对数生长期细胞制备细胞悬液，细胞浓度为6×103/ml接种于96孔培养板内，每孔100μl；
(2)待细胞贴壁后，实验组加不同浓度药物100μl/孔；试剂对照组、肿瘤细胞对照组每孔培养液100μl；
(3)置5％CO2培养箱内分别培养24小时后，去除上清后，加入10％MTT培养液，每孔100μl；
(4)继续培养4小时后弃全部上清夜，每孔加DMSO 100μl，37℃震荡孵育10分钟；
(5)用酶标仪检测A570nm的OD值。
(6)计算细胞存活率及药物对细胞的抑制率：
细胞存活率(％)＝试验组OD值/对照组OD值×100％
细胞抑制率(％)＝(1-试验组OD值/对照组OD值)×100％
1.3.7伤口愈合实验检测各药物对几种癌细胞细胞增殖的影响
每孔加入1×105个细胞，生长至单层细胞。用20μL枪头在每孔中央垂直划出一横线划痕，用PBS洗细胞3次，去除划下的细胞，加入无血清培养基。药物设置4个浓度，依次为50、100、200和400μmol/ml，每个浓度设定2个复孔。对照孔加入药物溶剂DMSO不加药物孔(药物浓度0μmol/ml)，同样2个复孔。放入37℃、含5％CO2培养箱培养。0和24h，显微镜拍照记录。
2实验结果
数据处理采用Excel及SPSS进行统计于分析。数据方差齐时采用ANOVA，选择LDS、S-N-K、Dunnett方法处理：方差不齐时采用Dunnett’sT3处理。细胞抑制率以均数±标准差
表示，数据采用完全随机设计的多个样本均数比较(方差分析)，以P＜0.05为统计学差异有显著性。
2.1对细胞生长的影响
2.1.1药物对CT-26细胞生长的影响
结果显示，各组组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成依赖关系。采用GraPhPad Prism 5.0软件计算各组IC50值，SYM、YSYZ、ZDC、ST、CT层IC50值分别为50.66、44.76、99.75、82.87、205.3μg/ml。结果见表1。
表1 MTT法检测药物处理后对CT-26细胞的抑制率(％)
2.1.2对4T1细胞生长的影响
结果显示，各组组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成一定依赖关系。SYM、SC组抑制率低于50％，采用GraPhPad Prism 5.0软件计算各组IC50值，YSYZ、ZDC及CT IC50值分别为228.9、323.4、22.6μg/ml。结果见表2。
表2 MTT法检测药物处理后对4T1细胞生长的抑制率(％)
2.1.3对MDA-MB-231细胞生长的影响
结果显示，各组组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成依赖关系。采用GraPhPad Prism 5.0软件计算各组IC50值，SYM、YSYZ、ZDC、ST、CT IC50值分别为24.02、45.49、35.21、99.32、0.13μg/ml。
表3 MTT法检测药物处理后对MDA-MB-231细胞生长的抑制率(％)
2.1.4对MCF-7细胞生长的影响
结果显示，SYM、SC对MCF-7细胞生长无抑制作用；YSYZ、ZDC、CT各组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成依赖关系。采用GraPhPad Prism5.0软件计算各组IC 50值，IC50值分别为162.1、116.3、253.8μg/ml。
表4 MTT法检测药物对MCF-7细胞生长的抑制率(％)
2.1.5药物对BGC-823细胞生长的影响
结果显示，血人参各提取部位及芪胶升白胶囊对BGC-823细胞生长无抑制作用。
表5 MTT法检测药物对BGC-823细胞生长的抑制率(％)
2.1.6对BEL-7402细胞生长的影响
结果显示，血人参各提取部位对BEL-7402细胞生长无抑制作用。
表6 MTT法检测药物对BEL-7402细胞生长的抑制率(％)
2.1.7对A549细胞生长的影响
结果显示，SYM、SC 400μg/ml剂量对A549细胞生长有抑制作用；SYM、ZDC、CT各组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成依赖关系。采用GraPhPad Prism 5.0软件计算各组IC50值，IC50值分别为181.30、48.16、183.5μg/ml。
表7 MTT法检测药物对A549细胞生长的抑制率(％，)
2.2.1药物对CT-26细胞迁移的影响
划痕后加入无血清培养基培养24h，基本排除细胞增殖的影响。显微镜观察的结果清楚可见，与0h比较，经过血人参醇提取各萃取物(SYM、YSYZ、ZDC、SC、CT)作用24h的CT-26细胞均有不同程度的迁移，细胞迁移的数量和距离随剂量增大而减小。其中YSYZ部位抑制CT26细胞迁移效果最佳。结果见附图1-5。
2.2.2药物对MDA-MB-231细胞迁移的影响
划痕后加入无血清培养基培养24h，基本排除细胞增殖的影响。显微镜观察的结果清楚可见，与0h比较，经过血人参醇提取各萃取物作用24h后，SYM 50μg/ml组，SC及CT4个浓度组MDA-MB-231细胞有少量迁移，SYM 400、200、100μg/ml，ZDC 4个浓度组均能抑制MDA-MB-231细胞迁移。结果见附图6-10。
2.2.3药物对MCF-7细胞迁移的影响
划痕后加入无血清培养基培养24h，基本排除细胞增殖的影响。显微镜观察的结果清楚可见，与0h比较，经过血人参各提取物作用24h的MCF-7细胞均有少量迁移，细胞迁移的数量和距离随于剂量无依赖关系。结果见附图11-15。
2.2.4药物对BEL-7402细胞迁移的影响
划痕后加入无血清培养基培养24h，基本排除细胞增殖的影响。显微镜观察的结果清楚可见，与0h比较，经过血人参各提取物作用24h的BEL-7402细胞均有不同程度的迁移，细胞迁移的数量和距离随剂量增大而减小。结果见附图16-20。
2.2.5药物对hos细胞迁移的影响\
划痕后加入无血清培养基培养24h，基本排除细胞增殖的影响。显微镜观察的结果清楚可见，与0h比较，经过血人参醇提取物(SYM、YSYZ、ZDC、SC、CT)24h的hos细胞均有少量迁移。结果见附图20-25。
3结论
通过细胞毒性增殖实验，研究血人参SYM、YSYZ、ZDC、SC、CT部位对细胞的24h内增值情况，结果显示，细胞不同增殖有异。各组随着药物质量浓度的增加，OD值都逐渐减小，抑制率同药物质量浓度成依赖关系。采用GraPhPad Prism 5.0软件计算各组IC50值。SYM部位对CT-26、MDA-MB-231、A549细胞的生长具有抑制作用，抑制率与给药浓度成依赖关系，SYM部位400μg/ml对CT-26、MDA-MB-231、A549细胞生长抑制率大于80％，其IC 50值分别为50.66、24.02、181.30μg/ml。YSYZ部位对CT-26、4T1、MDA-MB-231、MCF-7的生长具有抑制作用，对CT-26、4T1、MCF-7细胞生长抑制率小于80％，对MDA-MB-231细胞生长抑制率大于80％，其IC50值为45.49μg/ml。ZDC部位对CT-26、4T1、MDA-MB-231、MCF-7、A549细胞的生长具有抑制作用，对CT-26、4T1、MCF-7、细胞生长抑制率小于80％，对MDA-MB-231、A549细胞生长抑制率大于80％，其IC 50值分别为35.21、48.16μg/ml。血人参各提取部位对BGC-823、BEL-7402细胞生长无抑制作用。根据美国国立癌症研究所公布的天然药物抗肿瘤作用标准，植物的粗提物对肿瘤细胞IC50＜30μg/mL或100μg/mL抑制率高于80％时，因此，其由抗肿瘤的研究价值。根据这一标准，血人参SYM部位作用CT-26、MDA-MB-231、A549细胞，YSYZ部位作用MDA-MB-231细胞，ZDC部位作用MDA-MB-231、A549细胞具有一定的研究价值。
通过细胞划痕实验，研究血人参SYM、YSYZ、ZDC、SC、CT部位对CT26、细胞作用24h的迁移情况。SYM、YSYZ、ZDC、SC、CT作用24h的CT-26、MDA-MB-231、MCF-7、BEL-7402、hos细胞均有不同程度的迁移，细胞迁移的数量和距离随剂量增大而减小。其中YSYZ部位抑制CT26细胞迁移效果最佳，其中对MDA-MB-231细胞的抑制作用最明显。
细胞毒性增殖实验和细胞划痕实验均为体外实验研究，体外实验具有快速、直观、经济等特点，但有缺乏整体性，故建立相应Balbc小鼠荷瘤模型，用于研究血人参各提取物体内外的抗肿瘤作用。
实验例2血人参提取物对荷CT-26瘤小鼠的免疫功能的影响
1实验材料与设备
1.1实验动物BALB/c-nu小鼠，18-22g，雌性。
1.2试剂RPMI1640、DMEM培养基、小牛血清、MTT、DMSO
1.3仪器二氧化碳培养箱、倒置显微镜、超净工作台、电子天平、细胞培养瓶
2实验方法
2.1血人参各提取部位的制备
制备方法与第一部分“1.2”项相同。
2.2小鼠实体瘤模型的建立取健康BALB/c小鼠，体重18-22g，雄性，CT-26，以PBS吹打洗涤3次后，用PBS调整细胞浓度为1×105，右侧腹股沟皮下注射0.2ml/只，建立CT-26实体瘤模型；BALB/c-nu，体重18-22g，雌性，CT-26细胞消化后，以PBS吹打洗涤3次后，用PBS调整细胞浓度为5×105，右侧腹股沟皮下注射0.2ml/只，建立CT-26荷瘤模型。
2.3实验小鼠分组和给药取小鼠，按体重随机分为正常对照组、模型组、顺铂组、血人参各提取物组高剂量组，芪胶升白高剂量组，每组5只。正常对照组：每日口服灌胃生理盐水，0.5ml/只；接种肿瘤细胞后，待肿瘤长出至53mm3时，再进行给药。模型组：每日腹腔注射生理盐水，0.2ml/只；顺铂组：隔日腹腔注射顺铂2mg/(kg·d)，血人参提取物组(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水层、总的醇提取物剂量分别为0.058、0.33、0.54、0.32、1.29g/kg)，以0.1ml/10g的体积给予相应药物，连续15d。于开始给药的0、3、6、9、12、15d称体重和测量肿瘤体积。
2.4对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用各组小鼠经15d连续给药后，在第16天，经测量全部小鼠的体重后颈椎脱臼处死并且解剖，分别剥离其瘤体，清除非肿瘤组织，称重量，计算平均重量，计算肿瘤生长抑制率。肿瘤生长抑制率＝(给药组平均瘤重-环磷酰胺组平均瘤重)/给药组平均瘤重×100％。
2.5对荷瘤小鼠免疫器官的影响各组小鼠经15d连续给药后，在第16天，经测量全部小鼠的体重后颈椎脱臼处死并且解剖，对小鼠的脾脏和胸腺进行称重，计算小鼠的脾脏指数及胸腺指数。
2.6对荷瘤小鼠血清IL-2的影响各组小鼠经15d连续给药后，在第16天小鼠眼球取血，于3000r/min，5min离心，制备小鼠血清，-80℃冷冻备用，ELISA按试剂盒说明进行检测。
3实验结果
数据处理采用Excel及SPSS进行统计于分析。数据方差齐时采用ANOVA，选择LDS、S-N-K、Dunnett方法处理：方差不齐时采用Dunnett’sT3处理。细胞抑制率以均数±标准差
表示，数据采用完全随机设计的多个样本均数比较(方差分析)，以P＜0.05为统计学差异有显著性。
3.1荷瘤小鼠一般生存状态
给药前各组小鼠体重无明显差异(P＞0.05)，前期各组荷瘤小鼠右侧腹股沟皮下无明显包块，与正常组小鼠一般状态差别不大：身形匀称，活动自如，对外界刺激反应正常，饮食、二便均正常。后期肿瘤生长迅速，右侧腹股沟处皮下能明显触及包块，质地变硬，表面凹凸不平，造模成功率90％。与正常组比较，模型组小鼠状态欠佳：反应迟鈍，活动迟缓，食量下降，体重减轻(P＜0.01)，皮毛稀疏且暗淡无光泽。体重增长情况见表8。
表8荷CT26肿瘤BALBLC-nu小鼠体重变化情况表
续表
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01.
3.2对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用
各组小鼠肿瘤持续生长，与模型组小鼠比较，各中药组及阳性药组小鼠肿瘤增长较缓慢，其DDP、SYM、YSYZ及ZDC组瘤体増长较为缓慢，差异具有统计学意义SYM、YSYZ(P＜0.01)，阳性药及ZDC组(P＜0.05)，SC、CT组肿瘤生长较快，差异无统计学意义(P＞0.05)，同时小鼠体质较好。与DDP组比较，SYM、YSYZ、SC及ZDC组肿瘤大小差异物统计学意义(P＞0.05)，CT、MD组肿瘤大，差异具有统计学意义(P＜0.01)，水层组肿瘤大，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表9。
表9荷CT26肿瘤BALBLC-nu小鼠肿瘤体积变化情况表
续表
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
3.3对荷瘤小鼠免疫器官及肿瘤生长的影响
实验结果显示，肿瘤模型组脾质量和脾指数与正常对照组比较明显增大，差异有统计学意义(P<0.05)。顺铂组脾指数明显减轻(P<0.05)，血人参YSYZ组小鼠的脾脏均明显增大，与正常对照组、肿瘤模型组相比，脾指数明显上升(P<0.05)。各给药组中除SC组肿瘤大于MD组外，其中SYM、YSYZ及ZDC组肿瘤肿瘤均小于MD组，DDP组肿瘤肿瘤也小于MD组，差异具有统计学意义(P<0.05)，CT组肿瘤均小于MD组，差异无统计学意义(P>0.05)。SYM、YSYZ及ZDC组肿瘤均小于DDP组，差异无统计学意义(P>0.05)，ST组肿瘤大于DDP组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表10。
表10荷CT26肿瘤BALBLC-nu小鼠脾指数、肿瘤重量
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01
3.4对荷瘤小鼠外周血血清IL-2的影响
与模型组比较，SC、CT、DDP及KB组血清IL-2含量下降，其中DDP及KB组差异具有统计学意义(P<0.05)；与DDP组比较，各实验组除KB组外，其余各实验组小鼠血清IL-2含量均较高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD组，差异具有统计学意义(P<0.05)；与KB组相比，各实验组小鼠IL-2含量均升高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD差异有统计学意义(P<0.01)。结果见表11。
表11荷CT26肿瘤ALBLC-nu小鼠IL-2含量
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01。
4结论
血人参各提取部位对肿瘤生长均具有抑制作用，其中SYM、YSYZ及ZDC组瘤体増长较为缓慢，与DDP组比较，SYM、YSYZ、SC及ZDC组肿瘤大小差异物统计学意义(P＞0.05)，SYM、YSYZ及ZDC组抑制肿瘤生长的同时，小鼠体重无快速减轻的趋势，DDP组小鼠体重体重下降迅速；SC、CT组肿瘤生长较快，差异无统计学意义(P＞0.05)，同时小鼠体质较好。
脾脏和胸腺都是机体重要的免疫器官，脾脏参与机体特异性和非特异性免疫反应，当机体体液免疫应答发生时，脾小结增多、增大，巨噬细胞大量增多，吞噬活动增加，脾内的淋巴细胞增多。通过测定脾指数不仅可以反映胸腺的功能，还可以间接反映机体的免疫功能。因此其脏器指数一定程度上反映着机体免疫功能的强弱[9-10]。肿瘤模型组脾质量和脾指数与正常对照组比较明显增大，差异有统计学意义(P<0.05)。这可能是由于小鼠接种肿瘤后，小鼠对肿瘤的排斥所产生的免疫功能增强，使得脾指数有所增加。顺铂组脾指数明显减轻(P<0.05)，血人参YSYZ组小鼠的脾脏指数明显增大，与正常对照组、肿瘤模型组相比，脾指数明显上升(P<0.05)。表明血人参YSYZ部位可通过提高脾指数的水平发挥抗肿瘤免疫作用。
肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能具有密切的关系，因此也是国内外专家多年来研究的重点。IL-2又被称为T细胞生长因子，能促进T细胞生长、增殖及分化，调节NK细胞并保持它的自然杀伤力，诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的增殖和产生。而CTL能在体外有效破坏肿瘤细胞，NK细胞可直接杀伤血液循环的肿瘤细胞及肿瘤组织。此外，IL-2还能诱导产生特异性杀伤肿瘤细胞的LAK细胞[12-17]。结果表明，与KB组相比，各实验组小鼠IL-2含量均升高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较，SC、CT、DDP及KB组血清IL-2含量下降，其中DDP及KB组差异具有统计学意义(P<0.05)；与DDP组比较，各实验组小鼠血清IL-2含量均较高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD组，差异具有统计学意义(P<0.05)。表明血人参SYM、YSYZ、ZDC组均可通过提高IL-2的水平发挥抗肿瘤免疫作用。
血人参作为我国民族传统用药，具有悠久的历史和潜在的开发价值，血人参YSYZ部位其在抑制肿瘤生长方面略不及阳性药顺铂，但却没有在抑制肿瘤生长的同时对机体正常免疫功能产生负面影响，血人参YSYZ部位具有独特的辅助抗肿瘤CT-26.WT细胞的优势。
实验例3血人参提取物对荷4T1瘤小鼠的免疫功能的影响
1实验材料与设备
1.1实验动物BALB/c小鼠，18-22g，雄性。
1.2试剂RPMI1640培养基、胎牛血清、PBS
1.3仪器二氧化碳培养箱、倒置显微镜、超净工作台、电子天平、细胞培养瓶
2实验方法
2.1血人参提取部位的制备
根据第一部分的实验结果，制备血人参相应提取部位。
2.2小鼠实体瘤模型的建立取健康BALB/c小鼠，体重18-22g，雄性，4T1细胞消化后，以PBS吹打洗涤3次后，用PBS调整细胞浓度为1×105，右侧腹股沟皮下注射0.2ml/只，建立4T1实体瘤模型。
2.3实验小鼠分组和给药取小鼠，按体重随机分为正常对照组、模型组、顺铂组、血人参各提取物组高剂量组，每组5只。正常对照组：每日口服灌胃生理盐水，0.5ml/只；接种肿瘤细胞后，待肿瘤长出至53mm3时，再进行给药。模型组：每日腹腔注射生理盐水，0.2ml/只；顺铂组：隔日腹腔注射顺铂2mg/(kg·d)，血人参提取物组(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水层、总的醇提取物剂量分别为0.058、0.33、0.54、0.32、1.29g/kg)，以0.1ml/10g的体积给予相应药物，连续15d。
2.4对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用各组小鼠经15d连续给药后，在第16天，经测量全部小鼠的体重后颈椎脱臼处死并且解剖，分别剥离其瘤体，清除非肿瘤组织，称重量，计算平均重量，计算肿瘤生长抑制率。肿瘤生长抑制率＝(给药组平均瘤重-环磷酰胺组平均瘤重)/给药组平均瘤重×100％。
2.5对荷瘤小鼠免疫器官的影响各组小鼠经15d连续给药后，在第16天，经测量全部小鼠的体重后颈椎脱臼处死并且解剖，对小鼠的脾脏和胸腺进行称重，计算小鼠的脾脏指数及胸腺指数。
2.6对荷瘤小鼠外周血血清IL-2各组小鼠经15d连续给药后，在第16天小鼠眼球取血，于3000r/min，5min离心，制备小鼠血清，-80℃冷冻备用，ELISA按试剂盒说明进行检测。
3实验结果
数据处理采用Excel及SPSS进行统计于分析。数据方差齐时采用ANOVA，选择LDS、S-N-K、Dunnett方法处理：方差不齐时采用Dunnett’sT3处理。细胞抑制率以均数±标准差
表示，数据采用完全随机设计的多个样本均数比较(方差分析)，以P<0.05为统计学差异有显著性。
3.1荷瘤小鼠一般生存状态
给药前各组小鼠体重无明显差异(P>0.05)，前期各组荷瘤小鼠右侧腹股沟皮下无明显包块，与正常组小鼠一般状态差别不大：身形匀称，活动自如，对外界刺激反应正常，皮毛浓密、色乳白有光泽，饮食、二便均正常。后期肿瘤生长迅速，右侧皮下能明显触及包块，质地变硬，表面凹凸不平，造模成功率90％。与正常组比较，模型组小鼠状态欠佳：反应迟鈍，活动迟缓，食量下降，体重减轻(P<0.01)，皮毛稀疏且暗淡无光泽。见表12。
表12荷4T1肿瘤小鼠体重变化情况
续表
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01
3.2对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用
与模型组小鼠比较，各中药组及阳性药组小鼠肿瘤增长较缓慢，其中阳性药组瘤体増长最为缓慢，给药15天后，各实验组肿瘤体积较小，差异有统计学意义(P<0.05)，与DDP组比较，各实验肿瘤体积较大，差异有统计学意义(P<0.01)。结果见表13。
表13 4T1肿瘤体积变化情况
续表
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
3.3对荷瘤小鼠免疫器官的影响
见表14，实验结果显示，与正常对照组比较，各实验组脾指数明显增大，SYM、ZDC、SC、CT及MD组差异有统计学意义(P<0.01)，DDP及YSYZ组，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，ZDC、DDP及KB组脾指数下降，差异有统计学意义(P<0.01)，CT组脾指数下降，差异于统计学意义(P<0.05)，YSYZ、CT组脾指数较大，差异无统计学意义(P>0.05)；与DDP组比较，各实验组除KB组脾指数较小，其余各实验组脾指数均较大，其中SYM、SC及MD组，差异有统计学意义(P<0.05)。
实验结果显示，与正常对照组比较，YSYZ、ZDC及DDP组胸腺指数减小，差异有统计学意义(P<0.01)，SC、CT及MD组胸腺指数减小，差异无统计学意义(P>0.05)，SYM组胸腺指数较大，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，各实验组胸腺指数差异有统计学意义(P<0.05)；与DDP组比较，SYM及KB组胸腺指数大，差异有统计学意义(P<0.01)。
与MD组比较，各组肿瘤均较小，差异有统计学意义(P<0.01)；与DDP组比较，各实验组均较大，MD组差异有统计学意义(P<0.01)；SYM、YSYZ、SC及CT组肿瘤重大，差异无统计学意义(P>0.05)。
表14荷4T1肿瘤小鼠胸腺指数、肿瘤重
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01。
3.4对荷4T1肿瘤小鼠外周血血清IL-2的影响
见表15，与正常组比较，各实验组小鼠血清IL-2含量均升高，其中SYM、YSYZ、ZDC、CT及MD组，差异有统计学意义(P<0.05)，SC组，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，SC、CT及KB组血清IL-2含量下降，差异有统计学意义(P<0.01)；与DDP组比较，各实验组小鼠血清IL-2含量均较高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果见表15。
表15荷4T1肿瘤小鼠IL-2含量表
注:与模型对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与顺铂组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；◎P＜0.05，◎◎P＜0.01。
4结论
血人参各提取部位对肿瘤生长均具有抑制作用，与模型组小鼠比较，各中药组及阳性药组小鼠肿瘤增长较缓慢，其中阳性药组瘤体増长最为缓慢，但小鼠体重体重下降迅速。给药15天后，各实验组肿瘤体积较小，差异有统计学意义(P<0.01)；与DDP组比较，各实验组肿瘤均较大，SYM、YSYZ、SC及CT组，差异无统计学意义(P>0.05)。
脾脏和胸腺都是机体重要的免疫器官，脾脏参与机体特异性和非特异性免疫反应，当机体体液免疫应答发生时，脾小结增多、增大，巨噬细胞大量增多，吞噬活动增加，脾内的淋巴细胞增多。胸腺是免疫系统的中心器官，参与细胞免疫。通过测定胸腺指数不仅可以反映胸腺的功能，还可以间接反映机体的免疫功能。因此其脏器指数一定程度上反映着机体免疫功能的强弱。实验结果显示，与正常对照组比较，各实验组脾指数明显增大，SYM、ZDC、SC、CT及MD组差异有统计学意义(P<0.01)，DDP及YSYZ组，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，ZDC、DDP及KB组脾指数下降，差异有统计学意义(P<0.01)，YSYZ、CT组脾指数下降，差异无统计学意义(P>0.05)；与DDP组比较，各实验组除KB组脾指数较小，其余各实验组脾指数均较大，其中SYM、SC及MD组，差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较，YSYZ、ZDC及DDP组胸腺指数减小，差异有统计学意义(P<0.01)，SC、CT及MD组胸腺指数减小，差异无统计学意义(P>0.05)，SYM组胸腺指数较大，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，各实验组胸腺指数差异有统计学意义(P<0.05)；与DDP组比较，SYM及KB组胸腺指数大，差异有统计学意义(P<0.01)。接种肿瘤后，机体自身免疫系统发生作用，给与血人参SYM、YSYZ、ZDC、SC及CT提取部位干预后，各部位对小鼠脾指数和胸腺指数的升高有一定作用，其中SYM部位具在升高小鼠脾指数和胸腺指数的作用较显著。
肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能具有密切的关系，因此也是国内外专家多年来研究的重点。IL-2又被称为T细胞生长因子，能促进T细胞生长、增殖及分化，调节NK细胞并保持它的自然杀伤力，诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的增殖和产生。而CTL能在体外有效破坏肿瘤细胞，NK细胞可直接杀伤血液循环的肿瘤细胞及肿瘤组织。此外，IL-2还能诱导产生特异性杀伤肿瘤细胞的LAK细胞。上述研究结果表明，与正常组比较，各实验组小鼠血清IL-2含量均升高，其中SYM、YSYZ、ZDC、CT及MD组，差异有统计学意义(P<0.05)，SC组，差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，SC、CT及KB组血清IL-2含量下降，差异有统计学意义(P<0.01)；与DDP组比较，各实验组小鼠血清IL-2含量均较高，其中SYM、YSYZ、ZDC及MD组，差异具有统计学意义(P<0.01)。表明血人参SYM、YSYZ、ZDC组均可通过提高IL-2的水平发挥抗肿瘤免疫作用。
血人参作为我国民族传统用药，具有悠久的历史和潜在的开发价值，血人参SYM部位其在抑制肿瘤生长方面略不及阳性药顺铂，但却没有在抑制肿瘤生长的同时对机体正常免疫功能产生负面影响，血人参SYM部位具有独特的抗肿瘤的优势。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1.本发明方法制备的血人参提取物对CT-26细胞、MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞、BEL-7402细胞和hos细胞的迁移具有抑制作用。
2.本发明方法制备的血人参提取物对肿瘤生长均具有抑制作用，可提高脾指数的水平发挥抗肿瘤免疫作用。
3.本发明方法制备的血人参提取物对肿瘤及其并发症具有治疗效果，结合多指标结果来看血人参提取物效果好，具有开发利用价值；
4.血人参提取物可用于制备预防或治疗肿瘤及其并发症的药物。
附图说明
图1是血人参醇提物SYM部位抑制CT-26细胞迁移作用图；其中，A1-A4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，a1-a4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图2是血人参醇提物YSYZ部位抑制CT-26细胞迁移作用图；其中，B1-B4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，b1-b4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图3是血人参醇提物ZDC部位抑制CT-26细胞迁移作用图；其中，C1-C4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，c1-c4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图4是血人参SC萃取部位抑制CT-26细胞迁移作用图；其中，D1-D4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，d1-d4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图5是血人参醇提取物(CT)抑制CT-26细胞迁移作用图；其中，E1-E4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，e1-e4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图6是血人参醇提物SYM部位对MDA-MB-231细胞迁移的影响；其中，A1-A4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，a1-a4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图7是血人参醇提物YSYZ部位对MDA-MB-231细胞迁移的影响；其中，B1-B4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，b1-b4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图8是血人参醇提物ZDC部位对MDA-MB-231细胞迁移的影响；其中，C1-C4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，c1-c4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图9是血人参SC萃取部位对MDA-MB-231细胞迁移的影响；其中，D1-D4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，d1-d4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图10是血人参醇提取物(CT)对MDA-MB-231细胞迁移的影响；其中，E1-E4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，e1-e4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图11是血人参醇提物SYM部位对MCF-7细胞迁移的影响；其中，A1-A4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，a1-a4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图12是血人参醇提物YSYZ部位对MCF-7细胞迁移的影响；其中，B1-B4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，b1-b4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图13是血人参醇提物ZDC部位对MCF-7细胞迁移的影响；其中，C1-C4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，c1-c4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图14是血人参SC萃取部位对MCF-7细胞迁移的影响；其中，D1-D4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，d1-d4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图15是血人参醇提取物(CT)对MCF-7细胞迁移的影响；其中，E1-E4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，e1-e4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图16是血人参醇提物SYM部位对BEL-7402细胞迁移的影响，其中，A1-A4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，a1-a4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图17是血人参醇提物YSYZ部位对BEL-7402细胞迁移的影响，其中，B1-B4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，b1-b4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图18是血人参醇提物ZDC部位对BEL-7402细胞迁移的影响，其中，C1-C4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，c1-c4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图19是血人参SC萃取部位对BEL-7402细胞迁移的影响，其中，D1-D4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，d1-d4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图20是血人参醇提取物(CT)对BEL-7402细胞迁移的影响，其中，E1-E4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，e1-e4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图21是血人参醇提物SYM部位对hos细胞迁移的影响，其中，A1-A4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，a1-a4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图22是血人参醇提物YSYZ部位对hos细胞迁移的影响，其中，B1-B4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，b1-b4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图23是血人参醇提物ZDC部位对hos细胞迁移的影响，其中，C1-C4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，c1-c4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图24是血人参SC萃取部位对hos细胞迁移的影响，其中，D1-D4：400、200、100、50μg/ml4个浓度作用0h，d1-d4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h；
图25是血人参醇提取物(CT)对hos细胞迁移的影响，其中，E1-E4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用0h，e1-e4：400、200、100、50μg/ml 4个浓度作用24h。
具体实施方式
实施例1。
工艺：取血人参提取物100g，与50g的淀粉和50g糊精粉混合，装入胶囊，制成1000粒，即得。
血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用60％的乙醇提取2次，第一次6倍量，第二次8倍量，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，用的石油醚萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏和水层浸膏，取石油醚层浸膏，备用，即得。
用法用量：口服，一日3次，每次2-3g。
功能与主治：对CT-26细胞、MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞、BEL-7402细胞和hos细胞的迁移具有抑制作用，可用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
实施例2：
工艺：取血人参提取物，加注射用水溶解并灌封于相应容器内，115℃热压灭菌30分钟，冷却后，抽滤，滤液加注射用水稀释，垂熔滤球过滤，灌封，115℃再热压灭菌30分钟，制备成注射液。
血人参提取物为市售。
用法用量：肌肉注射，静脉注射或静脉滴注，每日使用量2-4mL。
功能与主治：用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
实施例3：
工艺：取血人参提取物，加注射用水溶解，加入2％的甘露醇，干燥，制备成注射用冻干粉针剂。
血人参提取物这样制备：血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用7倍量60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，用的石油醚萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏和水层浸膏，取石油醚层浸膏，备用，即得。
用法用量：肌内注射、静脉注射或静脉滴注，每日使用量为2-4mL。
功能与主治：对肿瘤生长均具有抑制作用，可用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
实施例4：
工艺：取血人参提取物，与药物制成量7％的淀粉和5％的糊精粉混匀，制丸，干燥，包糖衣，即得丸剂。
血人参提取物这样制备：血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用8倍量60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，用乙酸乙酯萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得乙酸乙酯层浸膏和水层浸膏，取乙酸乙酯层浸备用，即得。
用法用量：口服，每日2次，每次使用剂量为2-3g。
功能与主治：对肿瘤生长均具有抑制作用，可用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
实施例5：
工艺：取血人参提取物，与药物制成量1％的硬脂酸镁和制成量10％的淀粉混匀，压片，包薄膜衣，即得片剂。
血人参提取物这样制备：血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用6倍量60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，用正丁醇萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得正丁醇层浸膏和水层浸膏，取正丁醇层浸膏，备用。
用法用量：口服，每日3次，每次使用剂量为2-3g。
功能与主治：对肿瘤生长均具有抑制作用，可用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
实施例6：
工艺：取蔗糖加入煮沸的水中使溶解均匀，过滤，制成单糖浆，将血人参提取物加入单糖浆中，加入苯甲酸钠，溶解，加水至1000mL，用氢氧化钠调PH至5.00-5.25，搅匀，滤过，灌封，即得口服液。
血人参提取物这样制备：血人参提取物这样制备：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90％乙醇，提取2次，每次3h，然后用8倍量60％的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，用石油醚萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏和水层浸膏，取石油醚层浸膏，备用，即得。
用法用量：口服，每日2次，每次使用剂量为100-200mL。
功能与主治：对肿瘤生长均具有抑制作用，可用于治疗肿瘤、肺癌或肝癌等症。
Claims (2)
1.血人参提取物在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用,其特征在于：所述肿瘤为结肠癌或乳腺癌；所述的血人参提取物的制备方法为：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90%乙醇，提取2次，每次3h，然后用60%的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏；当所述肿瘤为结肠癌时，血人参提取物为上述制备方法制得的石油醚层浸膏、乙酸乙酯层浸膏或正丁醇层浸膏；当所述肿瘤为乳腺癌时，血人参提取物为上述制备方法制得的石油醚层浸膏、乙酸乙酯层浸膏、正丁醇层浸膏或水层浸膏。
2.一种预防或治疗肿瘤的药物，其特征在于：所述肿瘤为结肠癌或乳腺癌；所述药物为血人参提取物，其制备方法为：取血人参药材，粉碎至粗粉，加10倍量90%乙醇，提取2次，每次3h，然后用60%的乙醇提取2次，每次2h，合并滤液得血人参总提取物，回收乙醇至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，所余部分即为水层，回收有机溶剂，浓缩后置水浴上挥干有机溶剂，得石油醚层浸膏，乙酸乙酯层浸膏，正丁醇层浸膏，水层浸膏；当所述肿瘤为结肠癌时，血人参提取物为上述制备方法制得的石油醚层浸膏、乙酸乙酯层浸膏或正丁醇层浸膏；当所述肿瘤为乳腺癌时，血人参提取物为上述制备方法制得的石油醚层浸膏、乙酸乙酯层浸膏、正丁醇层浸膏或水层浸膏。
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