CN108251469A - 复合酶法提取白芨多糖的工艺 - Google Patents

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杨玉明
段斌
胡奇林
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Ningxia Yuefeng Ecological Agricultural Science And Technology Co Ltd
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase

Abstract

本发明涉芨一种白芨多糖，特别是一种复合酶法提取白芨多糖的新工艺，其制备步骤为：白芨的干燥、复合酶的制备、酶处理反应、水提醇沉提取白芨多糖。本发明是利用纤维素酶和果胶酶破坏了植物细胞壁间相连的纤维素以芨果胶物质，使提取过程中植物细胞壁间的阻力减小，包裹在细胞壁内的白芨多糖充可分释放出来，然后利用水提醇沉法提取白芨多糖，本发明的技术方案相对于目前常用的水提醇沉法提取白芨多糖的工艺来说，白芨多糖的提取率在32%以上，白芨多糖的纯度在70%以上，可大大降低白芨多糖的生产成本。

Description

复合酶法提取白芨多糖的工艺
所属技术领域
本发明涉芨一种白芨多糖，特别是一种复合酶法提取白芨多糖的新工艺。
背景技术
白芨多糖为中药白芨中提取的一种水溶性杂多糖，又称白芨胶、白芨甘露聚糖，由4分子甘露糖和1分子葡萄糖组成的葡萄糖配甘露聚糖，分子中还结合有少量金属离子，同时存在β-1,4-甘露糖、β-1,4-葡萄糖和 α-1,6-葡萄糖三种残基。其分子量分布较宽，平均分子量为10-20kD。白芨多糖是安全高效的医药原料、性能卓越的药用辅料和相当有发展前景的生物医学材料，具有功能缓释性、局部滞留性、自身降解性、无刺激性以芨无毒副作用等特点。
白芨多糖的提取工艺主要有水提取法、水提醇沉法、连续逆流提取法、纤维素酶解法、超声波法等。目前采用的最主要的也是最普遍的生产方法为水提醇沉法，是以水为溶媒提取药材有效成分再用乙醇沉淀除去杂质的方法。在提取过程中,影响因素很多,如所用的提取溶剂、用量、提取次数、时间、方式等。
目前运用水提醇沉法提取的白芨多糖纯度在60%左右有，提取率在20—24%左右，得到的白芨粗多糖中存在杂质，色泽略黄，且带有药味，作为添加剂或医药材料还需进行精制。
发明内容
本发明的目的是旨在提供一种提取率和纯度较高的复合酶法提取白芨多糖的工艺。
本发明的技术方案是：1. 一种复合酶法提取白芨多糖的工艺，其制备步骤为：
步骤一：白芨的干燥：将新鲜白芨清洗后，切片、干燥至水分的重量百分比含量在30%左右后，粉碎至20目左右备用；
步骤二：复合酶的制备：分别称取果胶酶和纤维素酶，果胶酶和纤维素酶的重量比在1:10-26，然后将上述称取的果胶酶和纤维素酶在搅拌状态下加入水中，水的重量为上述果胶酶和纤维素酶总重量的20倍，将制备好的复合酶溶液备用；
步骤三：酶处理反应：将上述粉碎至20目左右的白芨粉在搅拌状态下入到上述复合酶溶液中，搅拌均匀后，保持温度在50℃左右，酶处理反应2—3小时后，将上述酶处理反应后的物料煮沸2分钟左右灭活备用；
步骤四：水提醇沉提取白芨多糖：将上述灭活后的物料，用沸水浴回流提取，重复提取3次，合并提取液后进行过滤，将滤液浓缩至稠膏状后，加入体积百分百浓度为95%的乙醇沉淀、抽滤后，55℃真空干燥，即得白芨多糖制品。
在上述步骤三中白芨粉与复合酶溶液的重量比为1:15—18。
在上述步骤四中，乙醇的加入量为水提浓缩后的稠膏状物体积的3倍。
上述纤维素酶为C1型，纤维素酶和果胶酶的活性物质的含量为50000μ/g。
本发明是利用纤维素酶和果胶酶破坏了植物细胞壁间相连的纤维素以芨果胶物质，使提取过程中植物细胞壁间的阻力减小，包裹在细胞壁内的白芨多糖充可分释放出来，然后利用水提醇沉法提取白芨多糖。
本发明的技术方案相对于目前常用的水提醇沉法提取白芨多糖的工艺来说，白芨多糖的提取率在32%以上，白芨多糖的纯度在70%以上，可大大降低白芨多糖的生产成本。
具体实施方式
下面以生产1kg白芨多糖为例，对本技术方案进行详细说明如下。
实施例1：
步骤一：白芨的干燥：称取9kg鲜白芨，经分选、清洗、切片后，干燥至含水率30%左右后，粉碎至20目；
步骤二：复合酶的制备：称取C1型纤维素酶2.4g、果胶酶0.24g，将纤维素酶和果胶酶在搅拌状态下加入50kg水中，制成复合酶溶液；
步骤三：酶处理反应：将粉碎后的白芨粉在搅拌状态下入到上述复合酶溶液中，在50℃条件下酶解反应3小时后，将酶解反应后的物料煮沸2分钟灭活备用；
步骤四：水提醇沉提取白芨多糖：将步骤三的物料用沸水浴回流提取，重复提取3次，合并提取液，滤过后将滤液置于旋转蒸发仪中减压浓缩至稠膏状，加3倍量体积的体积百分比浓度为95%的乙醇沉淀、抽滤，在55℃真空条件下干燥，即得1.1kg白芨多糖。
按干白芨测算白芨多糖的提取率在33%，白芨多糖的纯度在71.2%，该纯度是指产品中白芨多糖的重量与总重量之比。
实施例2—5。
在实施例一的基础上，改变各物料的配比关系，其余条件不变。
实施例 纤维素酶 果胶酶 酶处理反应时间
实施例2 2.40 g 0.16 g 2.0 小时
实施例3 2.56 g 0.128 g 2.2小时
实施例4 2.72 g 0.124 g 2.4小时
实施例5 3.60 g 0.1 g 3.0小时
在上述实施例中，白芨多糖的提取率和所得白芨多糖的纯度如下表。
实施例 提取率 纯度
实施例2 31.01% 71.01%
实施例3 32.3% 72.3%
实施例4 32.1% 72.1%
实施例5 33.8% 73.8%

Claims (4)

1.一种复合酶法提取白芨多糖的工艺，其制备步骤为：
步骤一：白芨的干燥：将新鲜白芨清洗后，切片、干燥至水分的重量百分比含量在30%左右后，粉碎至20目左右备用；
步骤二：复合酶的制备：分别称取果胶酶和纤维素酶，果胶酶和纤维素酶的重量比在1:10-26，然后将上述称取的果胶酶和纤维素酶在搅拌状态下加入水中，水的重量为上述果胶酶和纤维素酶总重量的20倍，将制备好的复合酶溶液备用；
步骤三：酶处理反应：将上述粉碎至20目左右的白芨粉在搅拌状态下入到上述复合酶溶液中，搅拌均匀后，保持温度在50℃左右，酶处理反应2—3小时后，将上述酶处理反应后的物料煮沸2分钟左右灭活备用；
步骤四：水提醇沉提取白芨多糖：将上述灭活后的物料，用沸水浴回流提取，重复提取3次，合并提取液后进行过滤，将滤液浓缩至稠膏状后，加入体积百分百浓度为95%的乙醇沉淀、抽滤后，55℃真空干燥，即得白芨多糖制品。
2.根据权利要求1所述的复合酶法提取白芨多糖的工艺，其特征在于在上述步骤三中白芨粉与复合酶溶液的重量比为1:15—18。
3.根据权利要求2所述的复合酶法提取白芨多糖的工艺，其特征在于在上述步骤四中，乙醇的加入量为水提浓缩后的稠膏状物体积的3倍。
4.根据权利要求3所述的复合酶法提取白芨多糖的工艺，其特征在于上述纤维素酶为C1型，纤维素酶和果胶酶的活性物质的含量为50000μ/g。
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