CN108218937A - 核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药化学领域，具体涉及一类核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物作为病毒感染性疾病治疗药物的用途，特别是作为病毒性肝炎治疗药物的用途。实验结果表明，本发明的化合物对丙肝病毒1b亚型和1a亚型表现出良好的抑制活性，同时对宿主细胞具有非常低的毒性，有效性高，安全性好，适合用于治疗和/或预防与HCV感染相关的疾病。

Description

核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体及其应用
技术领域
本发明属于医药化学领域，具体涉及一类核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物作为病毒感染性疾病治疗药物的用途，特别是作为病毒性肝炎治疗药物的用途。
背景技术
丙型肝炎病毒(HCV)感染是世界范围内流行的疾病，全球慢性感染者已超过2亿，埃及的慢性感染率为15％，巴基斯坦为4.8％，中国为3.2％，位列世界前三。丙型肝炎病毒感染的临床表现多样，轻至炎症，重至肝硬化、肝癌。慢性丙型肝炎还可以并发某些肝外表现，包括类风湿性关节炎、干燥性结膜角膜炎、扁平苔藓、肾小球肾炎、混合型冷球蛋白血症、B细胞淋巴瘤和迟发性皮肤卟啉症等，可能是机体异常免疫反应所致。且丙肝肝硬化失代偿期时，可以出现各种并发症，如腹水腹腔感染，上消化道出血，肝性脑病，肝肾综合征，肝衰竭等表现。
HCV属于黄病毒科肝病毒属病毒，其与黄病毒科中的另外两个属即瘟病毒属和黄病毒属的基因结构相似。目前，治疗HCV感染的标准方法有干扰素以及干扰素和利巴韦林联合疗法。不过，仅50％的治疗者对该方法有反应，且干扰素具有明显的副作用，例如流行性感冒样症状、体重减低以及疲乏无力，而干扰素和利巴韦林联合疗法则产生相当大的副作用，包括溶血、贫血症和疲乏等。
另外，已开发的用于治疗HCV感染的药物包括蛋白酶抑制剂、噻唑烷衍生物、噻唑烷和N-苯甲酰苯胺、菲醌、解旋酶抑制剂、核苷聚合酶抑制剂和胶霉毒素、反义硫代磷酸酯寡核苷酸、依赖于IRES的翻译的抑制剂、核酶以及核苷类似物等。目前，核苷磷酸酯类化合物用于治疗黄病毒科病毒尤其是HCV感染是本领域的重要研发方向。
CN104031104A公开了一种如式I所示的新型核苷氨基磷酸酯化合物，其化学名称为(2S)-2-((([1,1'-联苯基]-4-基氧基)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(以下简称“式I化合物”)，
CN104031104A报道了(2S)-2-((([1,1'-联苯]-4-基氧基)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯具有优异的抗病毒活性，对细胞的毒性小，可用于治疗黄病毒科病毒，尤其是丙型肝炎病毒感染。
不过，还没有进一步深入研究式I化合物的各种异构体以及异构体的成药性。大量文献数据表明，手性药物的异构体具有不同的药效学、药代动力学和毒理学性质，因此，合成式I化合物的光学异构体，并对它们进行生物活性、毒性和副作用的研究，对于该类化合物的成药性研究具有重要的指导意义。
发明内容
本发明的一个目的是提供式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，
本发明的另一个目的是提供制备本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法。
本发明的再一个目的是提供包含本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐和药效可接受的载体的组合物以及包含本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐和另一种抗病毒药的组合物。
本发明的还一个目的是提供本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐治疗和/或预防丙型肝炎病毒感染的方法以及本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐在制备用于治疗和/或预防丙型肝炎病毒感染的药物中的应用。
针对上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
第一方面，本发明提供式Ia、式Ib、式Ic或式Id的核苷氨基磷酸酯类化合物的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，
在一些实施方案中，本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物为基本上纯的光学异构体形式，光学异构体纯度为至少60％。在一些具体的实施方案中，本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物的光学异构体纯度分别为至少90％。在另一些具体的实施方案中，本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物的光学异构体纯度分别为至少98％。在一些优选的实施方案中，本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物的光学异构体纯度分别为至少99％。
另一方面，本发明提供式A、式B的中间体，
其中，式A化合物是式B化合物和式C化合物的混合物，R1为离去基团。
在一些优选的实施方案中，本发明提供式A、式B的中间体，其中：
R1选自卤素、甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基、乙酸酯基、三氟甲基乙酸酯基、樟脑磺酸酯基、2-硫代苯并[d]噻唑-3(2H)-基、芳氧基、芳硫基、被至少一个吸电子基团取代的芳氧基和被至少一个吸电子基团取代的芳硫基。
进一步优选地，R1选自2-硝基苯氧基、4-硝基苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、五氟苯氧基、2-氯-4-硝基苯氧基、2,4-氯苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、2-硝基苯硫基、4-硝基苯硫基、2,4-二硝基苯硫基、五氟苯硫基、2-氯-4-硝基苯硫基、2,4-氯苯硫基和2,4,6-三氯苯硫基。
第三方面，本发明提供本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法。
在一个具体的实施方案中，本发明提供式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液制得，其中，R1为离去基团。优选地，根据本发明提供式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其通过选自反相色谱法(使用例如乙腈-水流动相)、超临界流体色谱法(SFC，使用二氧化碳作为主要溶剂和醇例如甲醇作为改性剂，优选地使用适当的手性介质例如Daicel Chiralpack IA)和模拟移动床色谱法(SMB，使用混合溶剂例如己烷/异丙醇或单一溶剂例如乙酸乙酯，优选地使用适当的手性介质例如DaicelChiralPack IA)的制备方法制得。
在一个具体的实施方案中，本发明提供式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式B的化合物反应制得，其中，R1为离去基团。根据本发明的制备式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，其原料及试剂易得，价格较低，方法简单，成品收率和纯度较高，适于工业规模生产。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述的碱选自本发明术语说明中所述的碱；优选地，所述的碱选自有机锂试剂、有机铜锂试剂、氢化钠和格氏试剂；进一步优选地，所述的碱为格式试剂；更进一步优选地，所述的碱为叔丁基氯化镁和叔丁基溴化镁。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中叔丁基氯化镁的摩尔量是1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮摩尔量的1～4倍，优选为2～3倍。
在一些优选的实施方案中，根据本发明的式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述反应在惰性气体的保护下进行，优选地，所述的惰性气体选自氮气和氩气。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中反应温度为约-20℃～约30℃。优选为约-10℃～约10℃。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中反应完成后，在约-10℃～约20℃下用盐酸溶液淬灭反应，优选地，在约0℃～约10℃下用盐酸溶液淬灭反应。
在一些实施方案中，本发明的中间体1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮的制备方法包括如下步骤：
a)(2'R)-N-苯甲酰基-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基胞苷-3',5'-二苯甲酸酯在乙酸水溶液中反应，制得(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯；和
b)(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯在碱性条件下经反应制得1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮的制备方法，其中步骤a)中乙酸水溶液的浓度选自约30％～约95％。优选为约80％。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮的制备方法，其中步骤b)中所述的碱性条件通过加入碱来实现，优选地，所述碱选自甲醇钠、碳酸钠、氨水和氨甲醇，进一步优选地，所述碱为甲醇钠。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮的制备方法，其中步骤b)中甲醇钠的摩尔量为(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯摩尔量的约0.5倍～约4.0倍，进一步优选为约1.2倍～约2.0倍。
本发明的式B所示的化合物的制备方法包括如下步骤：
a)式(1)的化合物在非亲核碱的作用下与三氯氧磷、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、H-R反应得到式A的中间体；和
b)式A的中间体在非亲核碱的作用下，转构型得到式B的中间体，
其中，R1为离去基团。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式B的化合物的制备方法，其中步骤a)和步骤b)中的非亲核碱选自碳酸钾、碳酸铯、二异丙胺、二异丙基乙胺、三乙胺、奎宁环、萘-1,8-二胺、2,2,6,6-四甲基哌啶、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯、4-二甲基氨基吡啶、吡啶、2,6-二C1-6烷基吡啶、2,4,6-三C1-6烷基吡啶和其混合物。进一步优选地，非亲核碱选自三乙胺和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯。再进一步优选地，非亲核碱为三乙胺。
在一些具体的实施方案中，本发明提供式(3)所示的(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的制备方法，其包括如下步骤：
a)式(1)的化合物在非亲核碱的作用下与三氯氧磷、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、五氟苯酚反应得到式(2)的中间体；和
b)式(2)的中间体在非亲核碱的作用下，转构型得到式(3)的中间体。
在一些具体的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤a)和步骤b)中的非亲核碱选自碳酸钾、碳酸铯、二异丙胺、二异丙基乙胺、三乙胺、奎宁环、萘-1,8-二胺、2,2,6,6-四甲基哌啶、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯、4-二甲基氨基吡啶、吡啶、2,6-二C1-6烷基吡啶、2,4,6-三C1-6烷基吡啶和其混合物。进一步优选地，非亲核碱选自三乙胺和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯。再进一步优选地，非亲核碱为三乙胺。
意料不到地，本发明的发明人发现，本发明的式(3)的化合物的制备方法中，步骤a)中各反应物的投料顺序对终产物中杂质的含量有较大的影响。式(1)的化合物、碱、三氯氧磷、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐和五氟苯酚的加入顺序的改变影响反应物中的杂质含量，其中三氯氧磷与式(1)的化合物在碱的作用下的反应对整个反应的结果具有重大的影响。对式(1)的化合物、三氯氧磷及碱例如三乙胺的投料顺序进行研究，发现先投入三氯氧磷，再投入式(1)的化合物，最后加入碱，例如三乙胺，会产生15％的杂质；先投入三氯氧磷，然后再同时投入式(1)的化合物和碱，例如三乙胺，会产生10％的杂质；而先投入三氯氧磷，再投入碱，例如三乙胺，最后加入式(1)的化合物则具有更好的反应选择性，几乎不产生杂质。另外，步骤a)中L-丙氨酸异丙酯盐酸盐和五氟苯酚的加入顺序也对反应结果有影响，前一步骤的结果好坏直接决定了后一步骤结果的好坏。在一些优选的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤a)中先加入三氯氧磷，再加入三乙胺，然后加入式(1)的化合物。在另一些优选的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤a)中L-丙氨酸异丙酯盐酸盐和五氟苯酚的加入是依次进行的。在一个具体的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤a)中依次加入三氯氧磷、三乙胺、式(1)的化合物、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐和五氟苯酚。
在一些优选的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤b)中加入五氟苯酚及使用惰性气体如氮气、氩气进行保护，以降低杂质含量。
在一些优选的实施方案中，根据本发明的式(3)的化合物的制备方法，其中步骤b)中的反应溶剂选自甲基叔丁基醚、甲醇、异丙醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸异丙酯、四氢呋喃、正己烷和正庚烷中的一种或几种，进一步优选地，反应溶剂选自正己烷、甲基叔丁基醚和正庚烷中的一种或几种。
在一个优选的实施方案中，本发明提供式Ia的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述方法包括如下步骤：
a)(2'R)-N-苯甲酰基-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基胞苷-3',5'-二苯甲酸酯在80％乙酸水溶液的作用下反应制得(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯；
b)(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯在甲醇钠作用下制得1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮；
c)在约-50℃～约20℃下，在反应瓶中加入三氯氧磷，再加入三乙胺，然后加入式(1)的化合物，再依次加入L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、五氟苯酚，反应得到式(2)的中间体；
d)式(2)的中间体在氮气保护下，加入五氟苯酚，在碱性条件中转构型得到式(3)的中间体；和
e)在约-10℃～约10℃下，1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮在叔丁基氯化镁的作用下，与式(3)的中间体反应，得到式Ia的目标化合物。
在一个具体的实施方案中，本发明提供式Ib的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液制得，其中，R1为离去基团。优选地，通过选自反相色谱法、超临界流体色谱法和模拟移动床色谱法的方法分离反应液制得。在一些优选的实施方案中，根据本发明的式Ib化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述反应在惰性气体的保护下进行；优选地，所述的惰性气体选自氮气和氩气。其中所述的碱选自本发明术语说明中所述的碱；优选地，所述的碱选自有机锂试剂、有机铜锂试剂、氢化钠和格氏试剂；进一步优选地，所述的碱为格式试剂；更进一步优选地，所述的碱为叔丁基氯化镁和叔丁基溴化镁。
在一个具体的实施方案中，本发明提供式Ic的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：在碱的作用下，使1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式B的化合物反应制得，其中，R1为离去基团。在一些优选的实施方案中，根据本发明的式Ic化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述反应在惰性气体的保护下进行。优选地，所述的惰性气体选自氮气和氩气。其中所述的碱选自本发明术语说明中所述的碱；优选地，所述的碱选自有机锂试剂、有机铜锂试剂、氢化钠和格氏试剂；进一步优选地，所述的碱为格式试剂；更进一步优选地，所述的碱为叔丁基氯化镁和叔丁基溴化镁。
在一个具体的实施方案中，本发明提供式Id的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，包括如下步骤：在碱的作用下，使1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液制得，其中，R1为离去基团。优选地，通过选自反相色谱法、超临界流体色谱法和模拟移动床色谱法的方法分离反应液制得。在一些优选的实施方案中，根据本发明的式Id的化合物或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的制备方法，其中所述反应在惰性气体的保护下进行。优选地，所述的惰性气体选自氮气和氩气。其中所述的碱选自本发明术语说明中所述的碱；优选地，所述的碱选自有机锂试剂、有机铜锂试剂、氢化钠和格氏试剂；进一步优选地，所述的碱为格式试剂；更进一步优选地，所述的碱为叔丁基氯化镁和叔丁基溴化镁。
第四方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐和药学可接受的载体。
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，还包含选自下列组成的一种或多种另外的抗HCV治疗剂：HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B RNA依赖性RNA聚合酶抑制剂、核苷类似物、干扰素α、聚乙二醇化的干扰素、利巴韦林、左旋韦林、韦拉米啶、TLR7激动剂、TLR9激动剂、亲环蛋白抑制剂、α葡萄糖苷酶抑制剂、NS5A抑制剂和NS3解螺旋酶抑制剂。
第五方面，本发明提供本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐或本发明的药物组合物治疗黄病毒科病毒感染的受治疗者的方法，包括向所述受治疗者施用式Ia、式Ib、式Ic或式Id的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐或者包含式Ia、式Ib、式Ic或式Id的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的药物组合物，以有效减少所述受治疗者中所述病毒的病毒载量的量施用。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防RNA病毒例如黄病毒科病毒感染的方法，包括向需要此治疗的个体给予本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物、其光学异构体、盐、水合物、溶剂合物或结晶或其药物组合物。在另一个实施方案中，本发明提供抑制RNA病毒例如黄病毒科病毒感染的方法，包括使所述病毒与治疗有效量的本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id的化合物、其光学异构体、盐、水合物、溶剂合物或结晶或其药物组合物接触。
“黄病毒科病毒”是指黄病毒科的任何病毒，包括感染人和非人动物的那些病毒，例如黄病毒、鼠疫病毒和丙型肝炎病毒。本发明的化合物和组合物可特别用于治疗或预防性治疗HCV。
另一方面，本发明提供本发明的式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐用于预防或治疗病毒性感染，尤其是黄病毒感染疾病的应用，以及在制备预防和/或治疗病毒性感染疾病的药物中的应用，特别是在制备预防和/或治疗HCV病毒感染，如HCV病毒性肝炎疾病的药物中的应用。该类疾病的实例有急性丙型肝炎、慢性丙型肝炎以及丙型肝炎和乙型肝炎或丁型肝炎的混合感染。
术语定义
除非另外定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。
本发明“光学异构体”是指分子结构完全相同，物理化学性质相近，但旋光性不同的物质。对于给定的化学结构，不同的光学活性化合物被称为光学异构体，除了彼此互为镜像之外，它们是相同的。在光学活性化合物的描述中，前缀D和L或R和S用于表示与分子的手性中心有关的绝对构型。前缀(+)和(-)或d和l用于指定化合物引起的平面偏振光的旋转方向。用(-)或l表示化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们能使平面偏振光的平面旋转。
在本发明中，当特定异构体在混合物的组成中超过50％时，外消旋混合物“富含”该特定异构体。“基本上不含”是指当使用本领域技术人员常规使用的传统分析方法确定时，该化合物包括少于大约10％不需要的异构体，例如不需要的异构体的量可以少于10％，例如，9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或甚至更少。含有大约95％或更多的所需异构体的富含异构体的化合物在此被称为“基本上纯的”异构体。含有大约99％或更多的所需异构体的富含异构体的化合物在此被称为“纯的”光学异构体。任何“光学异构体的纯度”可以使用传统的分析方法来确认，如可容易地通过本领域所建立的和公知的适当方法(例如手性高压液相色谱法(HPLC)、手性气相色谱法(GC)、使用手性位移试剂的核磁共振(NMR)等)将光学异构体与其对映异构体或非对映异构体完全分离，通过面积归一化法计算得到。
本发明“药物组合物”是指包含任何一种本文所述的化合物，包括对应的异构体、前药、溶剂化物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种药学上可接受载体的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。所述组合物通常用于制备治疗和/或预防由一种或多种激酶介导的疾病的药物。
本发明“药学上可接受的载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含所有的溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。
本发明“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。
本发明“药学上可接受的盐”是指本发明所述的化合物与酸形成的药学上可接受的盐，所述的酸可选自：磷酸、硫酸、盐酸、氢溴酸、柠檬酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、琥珀酸、富马酸、醋酸、乳酸、硝酸、磺酸、对甲苯磺酸、苹果酸、甲烷磺酸或其类似物。
本发明“溶剂合物”是指通过与溶剂分子配位形成固态或液态的配合物的本发明化合物的形式。水合物是溶剂合物的特殊形式，其中与水发生配位。在本发明范围内，溶剂合物优选是水合物。
本发明“结晶”是指本发明所述的化合物形成的各种固体形态，包括晶型、无定形。
本发明“格式试剂”是指通式为R2MgX的试剂，其中R2选自脂肪基和芳香基，X为卤素。所述的格式试剂通过卤代烃和金属镁在无水乙醚或四氢呋喃中制取。
本发明“有机锂试剂”是指通式为R3-Li的试剂，其中R3选自脂肪基和芳香基。所述的有机锂试剂通过卤代烃和金属锂在无水乙醚或四氢呋喃中制取。
本发明“有机铜锂试剂”是指通式为(R4)2CuLi的试剂，其中R4选自脂肪基和芳香基。
本发明“卤代烃”是指卤代脂肪族化合物或卤代芳香族化合物。
本发明“脂肪基”是指直链或支链的饱和或不饱和的脂肪族基团，优选含1至6个碳原子的直链或支链基团，进一步优选含有1至3个碳原子的直链或支链基团，非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、乙烯基、乙炔基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明“芳香基”是指含有零个或多个杂原子的芳香族基团。所述的杂原子为O、S、N。合适的芳香族基团包括但不限于苯基、萘基、吡啶基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁二唑基、噻二唑基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基和三嗪基。
本发明“离去基团”具有对于本领域技术人员而言相同的意思(Advanced OrganicChemistry:reactions,mechanisms andstructure-第四版，由Jerry March,John Wiley和Sons编；1992，第351-357页)，且表示是底物分子的一部分并与之连接的基团；在底物分子进行取代反应的反应中(例如亲核试剂)，离去基团随后被取代。离去基团的实例包括但不限于：卤素、甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基、乙酸酯基、三氟甲基乙酸酯基、樟脑磺酸酯基、2-硫代苯并[d]噻唑-3(2H)-基、芳氧基、芳硫基、被至少一个吸电子基团取代的芳氧基和被至少一个吸电子基团取代的芳硫基。被至少一个吸电子基团取代的芳氧基的实例包括但不限于2-硝基苯氧基、4-硝基苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、五氟苯氧基、2-氯-4-硝基苯氧基、2,4-氯苯氧基、2,4,6-三氯苯氧基、2-硝基苯硫基、4-硝基苯硫基、2,4-二硝基苯硫基、五氟苯硫基、2-氯-4-硝基苯硫基、2,4-氯苯硫基和2,4,6-三氯苯硫基等。
本发明“吸电子基团”具有其通常意思，吸电子基团的实例包括但不限于卤素、-NO2、-CN、-C(O)(C1-6烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)O(C1-6烷基)、-C(O)O(芳基)等。
本发明“碱”意指能够使羟基或氨基去质子化的化合物。碱的实例包括但不限于，与醇溶剂组合的(C1-6烷基)氧化物((C1-6烷基)OM)，其中(C1-6烷基)氧化物包括但不限于MeO-、EtO-、n-PrO-、i-PrO-、t-BuO-、i-AmO-(异戊氧基)等，且其中M是碱金属阳离子，例如Li+、Na+、K+等。醇溶剂包括(C1-6烷基)OH，例如，诸如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、叔丁醇、异戊醇等。还可以使用非-烷氧基碱，例如氢化钠、六甲基二甲硅基胺钠、六甲基二甲硅基胺锂、二异丙基酰胺锂、氢化钙、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、DBU(1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯)、DBN(1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯)、格氏试剂例如(C1-6烷基)Mg(卤素)，其包括但不限于甲基氯化镁、甲基溴化镁、叔丁基氯化镁、叔丁基溴化镁等。
本发明“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
附图说明
图1为式Ia化合物正庚烷溶剂合物单晶的不对称结构单元示意图。
图2为式Ia化合物正庚烷溶剂合物单晶的单胞示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细阐述，但本发明不限于这些实施例。以下实施例中使用的材料如无特殊说明均为商购获得。
实施例1(S)-2-[[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯
步骤1(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯的合成
将(2'R)-N-苯甲酰基-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基胞苷-3',5'-二苯甲酸酯(8.0kg,14.0mol)，乙酸(64L)及纯化水(16L)加入100L反应釜中，开启搅拌，升温至120～140℃，剧烈回流，反应完全后，离心，所得滤饼用纯化水(24.0L)搅洗，离心，所得滤饼用甲醇(8.0L)搅洗，离心，干燥，得到标题化合物5.6kg，收率85.41％。
步骤2 1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮的合成
将步骤1中制得的(2'R)-2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷-3',5'-二苯甲酸酯(5.60kg,11.95mol)和无水甲醇(28.0L)加至50L反应釜中，氮气保护下，降温，待体系温度降为-10℃以下，向反应釜中滴加甲醇钠的甲醇溶液(3.66L,30％wt,17.93mol)，滴加完毕后，升温至室温，2h后，降温。待体系温度降为-10℃以下，向反应釜中滴加浓硫酸(5.60L,10.03mol)的甲醇溶液(体积比1:9)，反应完全后，硅藻土助滤，甲醇洗涤滤饼，合并滤液。滤液减压浓缩，待析出大量白色沉淀，向旋蒸瓶中加入二氯甲烷(8.0L)，过滤，干燥滤饼，得到标题化合物1.84kg，收率59.15％。
步骤3(S)-2-[[(1,1'-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的合成
于50L玻璃反应釜中，氮气保护下，加入三氯氧磷(1.53kg,10mol)和二氯甲烷(10L)，搅拌，降温至-30℃以下。滴加三乙胺(1.01kg,10mol)的二氯甲烷(5L)溶液，滴加过程，保持内温低于-30℃。滴加完毕，缓慢滴加4-羟基联苯(1.7kg,10mol)的四氢呋喃(3.4L)溶液，滴毕搅拌30min。控制内温低于-30℃，加入L-丙氨酸异丙酯盐酸盐(1.68kg,10mol)，滴加三乙胺(2.02kg,20mol)的二氯甲烷(8.0L)溶液，搅拌30min。升温至0℃左右，滴加五氟苯酚(1.84kg,10mol)，三乙胺(1.01kg,10mol)的二氯甲烷(7.0L)溶液，滴加过程中，反应放热升温，滴加完毕，內温升至室温，反应完全后，过滤，滤饼用二氯甲烷(2.5L×4)洗涤，合并滤液，将滤液用纯化水(25L)洗涤，分液，有机相减压浓缩，加入庚烷(5L×2)带溶剂，离心，真空干燥，称重，得类白色固体状标题化合物3.71kg，收率70.13％。
步骤4(S)-2-[[(S)-(1,1'-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的合成
于30L反应釜中，氮气保护下，加入(S)-2-[[(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯(3.70kg,7.0mol)，甲基叔丁基醚(2.40kg)，正庚烷(9.0kg)，三乙胺(77g,0.7mol)，五氟苯酚(43g,0.21mol)，加热至40℃，强力机械搅拌。反应完全后，离心，真空干燥，得(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯粗品3.5kg，收率94.59％。
步骤5(S)-2-[[(S)-(1,1'-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的精制
于100L玻璃反应釜中，加入(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯粗品(4.50kg)，异丙醇(81.0L)，搅拌，升温至回流，溶清。氮气保护下，降温。离心，真空干燥，得类白色固体状标题化合物3.40kg，收率75.56％。
步骤6(S)-2-[[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的合成
于50L玻璃反应釜中，加入1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮成品(1.30kg,5.0mol)，四氢呋喃(15.6L)，搅拌，氮气保护，降温至-10℃以下。滴加叔丁基氯化镁溶液(8.0L,8.0mol)，滴毕，0～5℃继续反应1h。加入(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯成品(2.12kg,4.0mol)，滴加完毕，5～10℃反应，10～11h后取样，HPLC监控，反应完全后，降温至0℃以下，向反应液中加入2N盐酸(4.0L,8.0mol)淬灭反应。淬灭过程控制温度在0～10℃。滴加完毕，搅拌10min。减压浓缩，蒸干得固液残余物，加入乙酸乙酯(40.0L)，和纯化水(20.0L)，分液。向有机相中加入5％碳酸钠水溶液(10.0L)洗涤，然后水洗，过滤，旋干，再次加入二氯甲烷7.0L，浓缩，得油状发泡物，向油状发泡物中加入乙酸异丙酯(15.0L)，溶清后，降温，析出大量白色沉淀。降温，过滤，干燥滤饼，得类白色固体状标题化合物1.98kg，收率81.72％。
步骤7(S)-2-[[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的精制
于30L反应釜中，加入(S)-2-[[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯粗品(4.80kg)，乙酸异丙酯(24.0L)，搅拌，加热溶清。加入活性炭(144g)，搅拌30min，趁热过滤，降温，过滤，干燥滤饼，得白色固体4.40kg，收率：91.67％，纯度大于98％。ESI-MS m/z:604.2[M+H]-。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:11.48(s,1H),7.67(d,2H),7.64-7.62(m,2H),7.59(d,1H),7.47(t,2H),7.37(t,1H),7.33(d,2H),6.04(d,1H),6.02(d,1H),5.83(d,1H),5.57(d,1H),4.89-4.84(m,1H),4.42-4.39(m,1H),4.29-4.24(m,1H),4.05-4.02(m,1H),3.88-3.82(m,2H),1.29-1.24(m,6H),1.16-1.15(m,6H)。31P NMR(300MHz,DMSO-d6):δ4.07ppm。
实施例2：(S)-2-[[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯的构型确证
称取实施例1制备的化合物(15mg)于3mL小瓶中，加入二氯甲烷/正庚烷(5mL，体积比为2:1)的混合溶剂体系中，震荡得到的澄清溶液，用封口膜盖住小瓶并在上面扎孔，室温下放置6天，得到单晶。绝对构型通过单晶X-射线衍射图谱确定，检测仪器为Agilent Super单晶衍射仪，测试条件为铜靶、管压40kv、管流40mA，晶体结构解析方法为直接法(SHELXTL和OLEX2)，测得的单晶结构数据表见表1，单晶衍射图谱见图1、2。
表1单晶结构信息表
实施例3(S)-2-[[[(R)-(1,1’-联苯基-4-氧基)]-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-
基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯
制备方法同实施例1的制备方法，不同的是用原料(S)-2-[[(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯代替(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯，及后处理方式是将反应液通过制备液相分离制得标题化合物，纯度为99.69％(HPLC)。ESI-MS m/z:606.2[M+H]+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:11.46(1H,s),7.67-7.65(2H,m),7.63-7.62(2H,m),7.58-7.56(1H,d),7.46-7.43(2H,m),7.36-7.33(1H,m),7.29-7.28(2H,m),6.03(1H,d),6.07(1H,d),5.88-5.86(1H,bs),5.66-5.65(1H,d),4.89-4.85(1H,m),4.48-4.46(1H,m),4.34-4.32(1H,m),4.11-4.10(1H,m),3.87-3.85(1H,m),3.82-3.79(1H,m),1.28-1.24(6H,m),1.17-1.15(6H,t).31P NMR(300MHz,DMSO-d6):δ3.86ppm。
实施例4(S)-2-[[[(S)-1,1’-联苯基-4-氧基]-[((2R,3R,4R,5S)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯
取(2R,3R,4R)-3-苯甲酰氧基-4-氟-4-甲基-5-氧代-2-苯甲酰氧甲基四氢呋喃(30g)，加入二氯甲烷，降温至-10℃以下，滴加制备好的三氟乙醇改良的二氢双(2-甲氧乙氧基)铝酸钠还原试剂，滴加完毕，升温至室温，反应完全后，后处理，将所得物溶于二氯甲烷，加入二氯亚砜，50℃下加热至回流。TLC监控，反应结束后，反应液浓缩，将浓缩物溶于乙腈中，降温至-5℃，加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(TMSTof)，30分钟后，向反应液中滴加三甲基硅保护的尿嘧啶，升温至80℃，反应。待反应结束后，后处理，将所得物溶于无水甲醇中，降温至-5℃，滴加甲醇钠溶液，滴毕，升至室温，LC-MS监控，待反应完全，后处理，得到1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮。以1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与(S)-2-[[(S)-(1,1'-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯为原料，参照实施例1步骤3的方法制备得到目标化合物。纯度：98.86％(HPLC)。ESI-MS m/z:606.2[M+H]+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:11.42(1H,s),7.66-7.64(2H,m),7.64-7.62(2H,m),7.50-7.47(1H,d),7.46-7.44(2H,m),7.37-7.35(1H,m),7.31-7.30(2H,m),6.12-6.08(1H,d),6.03-5.98(1H,d),5.87(1H,bs),5.65-5.63(1H,d),4.90-4.85(1H,m),4.31-4.26(1H,m),4.13-4.08(1H,m),4.05-3.98(1H,m),3.85-3.80(1H,m),1.37-1.33(3H,d),1.27-1.26(3H,d),1.15-1.17(6H,dd).31P NMR(300MHz,DMSO-d6):δ3.80ppm。
实施例5(S)-2-[[[(S)-1,1’-联苯基-4-氧基]-[((2R,3R,4R,5S)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]磷酰基]氨基]丙酸异丙酯
制备方法同实施例4的制备方法，不同的是用原料(S)-2-[[(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯代替(S)-2-[[(S)-(1,1’-联苯基-4-氧基)(五氟苯氧基)磷酰基]氨基]丙酸异丙酯，及后处理方式是将反应液通过制备液相分离制得标题化合物，纯度为99.66％(HPLC)。ESI-MS m/z:606.2[M+H]+。
实验例1本发明的化合物的抗HCV-1b复制子活性检测
参照中国专利申请CN105985355A公开的方法检测本发明的化合物抗HCV-1b复制子的活性。具体测试步骤见CN105985355A的实施例1，该篇专利申请以其全部内容引入本文作为参考。
如CN105985355A中所述，HCV 1b复制子细胞，即稳定转入HCV基因型1b复制子的Huh7细胞系，由药明康德(上海)新药开发有限公司提供。
以上实施例制备的本发明的化合物，每个化合物用100％DMSO配制成10mM母液后，用含0.5％DMSO的完全培养液稀释至10μM，然后依次3倍稀释，共10个浓度。HCV-1b复制子细胞每孔接种8X103个细胞，在37℃，5％CO2培养箱中培养3天。实验重复三次。
实验结果显示，本发明的式Ia化合物对HCV 1b复制子的EC50值为0.036μM，明显优于式I化合物的EC50值0.120μM。在测定浓度范围内，本发明的式Ia化合物没有显示出细胞毒性，CC50值大于最高检测浓度10μM。
实验例2本发明的化合物的抗HCV-1a复制子活性检测
参照中国专利申请CN105985355A实施例2的方法检测本发明的化合物抗HCV-1a复制子的活性。
如CN105985355A中所述，HCV 1a复制子细胞，即稳定转入HCV基因型1a复制子的Huh7细胞系，由药明康德(上海)新药开发有限公司提供。
以上实施例制备的本发明的化合物，每个化合物用100％DMSO配制成10mM母液后，用含0.5％DMSO的完全培养液稀释至10μM，然后依次3倍稀释，共10个浓度。HCV-1a复制子细胞每孔接种8X103个细胞，在37℃，5％CO2培养箱中培养3天。实验重复三次。
实验结果显示，本发明的式Ia化合物对HCV 1a复制子的EC50值为0.01μM，明显优于式I化合物的EC50值0.05μM。在测定浓度范围内，本发明的式Ia化合物没有显示出细胞毒性，其对HCV 1a复制子的CC50值＞10μM。
从以上实验可以看出，本发明的化合物对丙肝病毒1b亚型和1a亚型表现出良好的抑制活性，同时对宿主细胞具有非常低的毒性，有效性高，安全性好，适合用于治疗和/或预防与HCV感染相关的疾病。
尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

Claims (10)

1.式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐：
2.根据权利要求1所述的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐，其中所述式Ia、式Ib、式Ic或式Id的光学异构体纯度为至少60％，优选90％，更优选99％。
3.制备式Ia所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，
包括在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液得到，其中，R1为离去基团。
4.制备Ia所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，
包括在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式B的化合物反应制得，其中，R1为离去基团。
5.制备式Ib所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，
包括在碱的作用下，使1-[(2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液制得，其中，R1为离去基团。
6.制备式Ic所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，
包括在碱的作用下，使1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式B的化合物反应制得，其中，R1为离去基团。
7.制备式Id所示的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐的方法，
包括在碱的作用下，使1-[(2S,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基]嘧啶-2,4-(1H,3H)-二酮与式A的化合物反应，然后分离反应液制得，其中，R1为离去基团。
8.根据权利要求3-7之任一项所述的方法，其中所述的离去基团选自卤素、甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基、乙酸酯基、三氟甲基乙酸酯基、樟脑磺酸酯基、2-硫代苯并[d]噻唑-3(2H)-基、芳氧基、芳硫基、被至少一个吸电子基团取代的芳氧基和被至少一个吸电子基团取代的芳硫基。
9.一种药物组合物，其包含权利要求1或2所述的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐和药学可接受的载体。
10.根据权利要求1或2所述的光学异构体或其水合物、溶剂合物、结晶或药学上可接受的盐或者根据权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗病毒感染性疾病，尤其是丙型肝炎病毒感染性疾病的药物中的用途。
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