CN108164468B

CN108164468B - 一种parp抑制剂、其药物组合物、制备方法及应用

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Publication number: CN108164468B
Application number: CN201810134916.4A
Authority: CN
Inventors: 谢军; 李恵; 翁勤杰
Original assignee: Shanghai Weicen Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Shanghai Weicen Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2018-02-09
Filing date: 2018-02-09
Publication date: 2021-02-02
Anticipated expiration: 2038-02-09
Also published as: CN108164468A

Abstract

本发明提供了一种PARP抑制剂、其药物组合物、制备方法及应用，属于药物领域。该PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药的结构如式(I)所示。其制备方法包括：在惰性溶剂中，将式(a)化合物和式(b)化合物在缩合剂和碱性试剂的存在下，进行反应，得到所述式(Ⅰ)化合物。此外还公开了一种如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药在制备预防或治疗肿瘤药物中的应用。本发明提供的这种PARP抑制剂具有优异的抗PARP的活性，可用于制备多种抗肿瘤药物制剂

Description

一种PARP抑制剂、其药物组合物、制备方法及应用

技术领域

本发明涉及制药领域，具体而言，涉及一种PARP抑制剂、其药物组合物、制备方法及应用。

背景技术

聚腺苷二酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase，PARP]在细胞DNA损伤修复中起着关键作用。PARP识别并结合断裂的DNA链，然后募集烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide，NAD)依赖的ADP核糖单位、组蛋白以及各种DNA修复相关酶，通过一系列的催化调节反应，完成DNA修复过程。PARP在细胞中的作用不仅是参与DNA的损伤修复，同时也参与DNA的甲基化修饰和转录、细胞信号转导、细胞周期调控。与DNA结合活化的PARP能够利用DNA在多种核靶蛋白质上合成聚(ADP-核糖)，包括拓扑异构酶、组蛋白和PARP本身。聚(ADP-核糖)化作用也与多种恶性转化有关。

肿瘤细胞对化疗药物耐药是导致化疗失败的重要原因。肿瘤细胞DNA修复基因的过表达引起DNA损伤后修复并最终导致了耐药性的产生。PARP是具有碱基切除修复功能的DNA单链损伤修复酶，由于其在肿瘤细胞内过表达并在肿瘤细胞DNA损伤修复过程中发挥着重要作用，被认为是肿瘤靶向治疗领域的重要靶点。已有研究数据显示，PARP抑制剂在放射敏感的低氧肿瘤细胞中有治疗效果。

21世纪以来，PARP抑制剂在抗癌药物的研发中取得了突破性的进展。PARP抑制剂的抗癌机制主要包括：(1)阻滞DNA损伤修复，造成DNA损伤累积，最终杀死肿瘤细胞；(2)增加细胞对其他内外源DNA损伤因子的敏感性；(3)抑制血管生成；(4)增强正常细胞的免疫力，从而抵抗癌细胞的入侵。

发明内容

本发明的目的在于提供一种PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药，组合物，制备方法及其应用。本发明提供的这种PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药具有较强的抗肿瘤活性。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药：

其中，

X包括卤素；

Y包括O、S、-SO₂、-SO、-NH、-NR¹组成的群组中选择的至少一个；

R¹包括C_1～6烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基、环烷基、杂环烷基或芳基；

C₁代表CO、CH₂或CH；

C₂代表CH或CH₂；

n代表0～2；

m代表0～2；

k代表0～2；

并且，如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药不为如下任一化合物：

1-(环丙甲酰基)-4-[5-[(3,4-二氢-4-氧代-1-酞嗪基)甲基]-2-氟苯甲酰]哌嗪。

1-(环丙甲酰基)-4-[5-[(3,4-二氢-4-氧代-1-酞嗪基)甲基]-2-氟苯甲酰]哌嗪；

4-[3-([1,4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-4-氟苯基]-2H-酞嗪-1-酮；

4-[4-氟-3-(哌嗪-1-羰基)苄基]-2H-酞嗪-1-酮；

4-(4-氟-3-(4-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-羰基)苯基)酞嗪-1(2H)-酮；

4-(2-氟-5-(3,4-二氢-4-氧代-1-酞嗪基)甲基)苯甲酰基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯；

4-(4-氟-3-(4-甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-羰基)苄基)-2H-酞嗪-1-酮；

4-(2-氟-5-(3,4-二氢-4-氧代-1-酞嗪基)甲基)苯甲酰基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯；

4-(4-氟-3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基)2H-酞嗪-1-酮；

4-(4-氟-3-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-羰基)苯基)2H-酞嗪-1-酮；

4-(4-氟-3-(4-异丙基-1,4-二氮杂环庚烷-1-羰基)苄基)-2H-酞嗪-1-酮。

优选的，如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药中：

X包括卤素；

R¹包括C_1～6烷基、环烷基、杂环烷基、-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基、环烷基或杂环烷基；

C₁代表CO、CH₂或CH；

C₂代表CH或CH₂；

n代表1或2；

m代表1或2；

k代表0或1。

在上述优选的如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药中进一步优选：

X包括卤素；

R¹包括C_1～6烷基、环烷基、-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基或环烷基；

C₁代表CO、CH₂或CH；

C₂代表CH或CH₂；

n代表1或2；

m代表1或2；

k代表0或1。

X包括卤素；

Y包括O、S、-SO₂、-NH、-NR¹组成的群组中选择的至少一个；

R¹包括-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基或环烷基；

C₁代表CO、CH₂或CH；

C₂代表CH或CH₂；

n代表1或2；

m代表1或2；

k代表0或1。

进一步的，如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药中：

当C1和C2均代表CH₂时，所述Y代表O、S、-SO₂或-SO；

当C1为CH，且C2为CO时，所述Y代表-NH或-NR¹，所述R¹包括-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基、环烷基或杂环烷基；

当n＝1，m＝2，k＝0时，所述Y代表O、S；

当n＝1，m＝1，k＝1时，所述Y代表O、S；

当n＝2，m＝1，k＝0时，所述Y代表-NH、-NHR¹，所述R¹包括-C_1～6烷烃-OR²、-C_1～6烷烃-CO₂R³组成的群组中选择的至少一个；R²和R³独立的代表H、C_1～6烷基。

更进一步的，如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药为如下编号PARP 01～04中的任一化合物：

本发明中，如式(I)所示的PARP抑制剂药学上可接受的盐可包括药学上可接受的无机酸盐或有机酸盐。所述的无机酸盐优选硫酸盐、亚硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐或高氯酸盐。所述的有机酸盐优选醋酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、对甲苯磺酸盐、酒石酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、庚酸盐、草酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、顺丁烯二酸盐、羟基丁酸盐、枸橼酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、乳酸盐或扁桃酸盐。

本发明中，如式(I)所示的PARP抑制剂中具有一个或多个手性碳原子，因此其也可以有外消旋物、非对映体混合物和纯对映体存在，所有这些异构体均属本发明范围之内。

本发明中，使用以下定义：

“C_1～6烷基”是指1～6个饱和和/或不饱和碳原子和氢原子组成的直链或支链一价残基，例如甲基(Me)、乙基(Et)、丙基、异丙基、丁基(Bu)、异丁基、叔丁基(t-Bu)、乙烯基、戊烯基、丙烯基、丁烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等，其可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自如下定义的取代基所取代。

“环烷基”是指非芳族的含有3，4，5，6，7，8，9，10，11，12、13或14个碳原子的一价单环、双环或三环残基，每种都可以是饱和或不饱和的，并且可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自本发明定义的取代基所取代。

“杂环烷基”是指非芳族的含有3，4，5，6，7，8，9，10，11，12、13或14个碳原子的一价单环、双环或三环残基，其包括1，2，3，4，5或6个选自氮、氧和硫的相同或不相同的杂原子。每种都可以是饱和或不饱和的，并且可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自本发明定义的取代基所取代。

“芳基”是指苯基和萘基。可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自如下定义的取代基所取代，并且可以与一个环烷基、杂环烷基或5-6元芳杂环稠合，所述的环烷基、杂环烷基或5-6元芳杂环本身可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自本发明定义的取代基所取代。

5～6元芳杂环是指环中除碳原子以外还含有其他原子的五元或六元芳香杂环化合物，其含有1，2，3或4个选自氮、氧和硫的相同或不相同的杂原子。可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自如下定义的取代基所取代，并且可以与一个环烷基、杂环烷基、芳基或5-6元芳杂环稠合，所述的环烷基、杂环烷基、芳基或5-6元芳杂环本身可以是未取代的或被一个或多个相同或不同的选自本发明定义的取代基所取代。

“取代基”为卤素、羧基、酯基、C_1～6烷基、烷氧基、酰基、酰氨基、磺酰基、巯基、烷硫基、环烷基、杂环烷基、氨基、烷氨基、二烷氨基、氰基、二氟甲基、三氟甲基或带上述基团的C_1～4的烷基。

第二方面，本发明提供一种如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药的制备方法，其包括：

在惰性溶剂中，将式(a)化合物和式(b)化合物在缩合剂和碱性试剂的存在下，进行反应，得到所述式(Ⅰ)化合物；

其中，R包括H、卤素、C_1～6烷基组成的群组中选择的至少一个。

进一步的，上述反应所用的惰性溶剂包括但不限于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAc)、氮甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基亚砜(DMSO)、四氢呋喃(THF)、二氯甲烷、丙酮、甲基丁酮、甲基异丁酮、氯苯、二氯苯、甲苯，优选N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；

进一步的，上述反应所用的缩合剂包括但不限PCC、DCC、HATU、HBTU、HCTU、HPAT、HOBT、DMC、CDI、DIC、EDCI，优选HBTU；

进一步的，上述所用的的碱包括但不限于TEA、DIPEA、DBU、DMAP、二甲胺、二乙胺、正丁胺、苯胺、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化锂，优选DIPEA；

进一步的，上述反应的温度为0～60℃，或者5～50℃，或者10～40℃，或者10～40℃，或者20～30℃。

进一步的，上述反应中式(a)化合物和式(b)化合物的投料比为1.0～3.0eq，或者1.0～2.5eq，或者1.0～2.0eq，或者1.0～1.5eq，或者1.1～1.3eq；

第三方面，本发明提供一种式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药在制备预防或治疗肿瘤药物中的应用。

第四方面，本发明提供药物组合物，其包含如式(I)所示的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药，以及药学上可接受的添加剂。

所述的药物组合物含有药学上各种常用添加剂(如稀释剂和赋形剂等)，以制成药物制剂。根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、丸剂、粉剂、液体、混悬剂、乳液、颗粒剂、硬胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液，一般为注射剂)等。

为了使片剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。例如，载体，如乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素和硅酸等；粘合剂，如水、乙醇、丙醇、普通糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明教溶液，羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素和磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干淀粉、藻酸钠、琼脂粉和海带粉，碳酸氢钠、碳酸钙、聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘酯、淀粉和乳糖等；崩解抑制剂，如白糖、甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油；吸附促进剂，如季胺碱和十二烷基硫酸钠等；润湿剂，如甘油、淀粉等；吸附剂，如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土和胶体硅酸等；以及润滑剂，如纯净的滑石，硬脂酸盐、硼酸粉和聚乙二醇等。如果需要的话，还可以用通常的涂渍材料使片剂作为糖衣片剂、涂明胶膜片剂、肠衣片剂、涂膜片剂、双层膜片剂及多层片剂。

为了使丸剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋性剂，例如，载体，如乳糖，淀粉，椰子油，硬化植物油，高岭土和滑石等；粘合剂，如阿拉伯树胶粉，黄著胶粉，明胶和乙醇等；崩解剂，如琼脂和海带粉等。

为了使栓剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知并广泛使用的赋性剂，例如，聚乙二醇，椰子油，高级醇，高级醇的酯，明胶和半合成的甘油酯等。

为了制备针剂形式的药物组合物，可将溶液和悬浮液消毒，并最好加入适量的氯化钠，葡萄糖或甘油等，制成与血液等渗压的针剂。在制备针剂时，也可使用本领域内任何常用的载体。例如，水，乙醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂醇，聚氧基化的异硬脂醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外，还可加入通常的溶解剂、缓冲剂和止痛剂等。根据需要，在治疗精神分裂症期间，也可加入着色剂、防腐剂、香料、调味剂、香化剂和其它药物等。

本发明的如式(I)所示的化合物及其药学上可接受的盐在药物组合物中的含量无特殊限制，可在很宽的范围内进行选择，通常可为质量百分比0.1～99.9％，较佳的为质量百分比1～70％，更佳的为质量百分比1～30％。

本发明中，所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状，选择各种剂型的制剂给药。例如，片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊是口服给药；针剂可以单独给药，或者和注射用输送液(如葡萄糖溶液及氨基酸溶液)混合进行静脉注射，如有必要可以单纯用针剂进行肌肉、皮内、皮下或腹内注射；栓剂为给药到直肠。

本发明中，可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。通常的给药剂量可为：约0.1～300mg药物活性成分/kg体重/天。一般来说，每个给药单位剂型可含1～200mg的药物活性成分。

所述的注射剂中优选含有1％(W/V)如式(I)所示的化合物及100％(W/V)生理盐水。所述的注射剂还可包括抗氧化剂或金属螯合剂。所述的抗氧化剂与金属螯合剂可为制剂领域中常用的抗氧化剂与金属螯合剂，其含量可按照此领域的常规用量进行选择。

所述的注射剂的制备方法可为本领域常规的制备方法，优选包括下列步骤：将如式(I)所示的化合物与生理盐水混合，调节pH至4～8，过滤灭菌，即可。所述的调节pH可采用的试剂为稀酸、稀碱或缓冲盐。所述的注射剂的制备方法还可包括在无菌条件下，填充于无菌安瓶中。所述的灭菌可为注射剂制备中常规的灭菌，其操作步骤和条件均可按照常规方式进行选择。所述的稀酸、稀碱或缓冲盐可为本领域常用的稀酸、稀碱或缓冲盐。

在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

除另有说明，本发明中公开的术语和缩写具有它们标准的含义。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本发明提供的PARP抑制剂、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、代谢前体或前药，具有优异的抑制PARP的活性，适用于制备多种抗肿瘤药物制剂。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述：

实施例1.4-(4-氟-3-(吗啉-4-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮的合成

向250ml的三口烧瓶中加入2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸10.0g(33.5mol)，吗啉3.5g(40.2mmol)，HBTU 15.0g(40.2mmol)，DIPEA 6.5g(50.3mmol)，DMF 100ml，室温搅拌1h，逐渐有固体析出，LCMS跟踪反应，直至2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸反应完全，过滤，滤饼依次用DMF 100ml，水100ml，丙酮100ml，淋洗。于45℃真空干燥得4-(4-氟-3-(吗啉-4-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮8.6g，收率：69.85％，mp:253.2～254.7℃。

LC-MS(m/z):368[M+H⁺]。

核磁数据：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.54(s，1H，酞嗪3位质子)，8.23(d，1H，J＝7.7Hz，酞嗪苯环质子)，7.94(d，1H，J＝7.9Hz，酞嗪苯环质子)，7.83(dt，2H，J＝24.3、7.2Hz，酞嗪苯环质子)，7.41(s，1H，氟苄基苯环质子)，7.33(d，1H，J＝6.1Hz，氟苄基苯环质子)，7.20(t，1H，J＝9.0Hz，氟苄基苯环质子)，4.32(s，2H，苄基亚甲基质子),3.61(s，4H，吗啉环氧邻位质子)，3.47(s，2H，吗啉环氮邻位质子)，3.16(s，2H，吗啉环氮邻位质子)；

红外数据(IR)：3432.2cm^-1(苯环吸收峰)，3163.9cm^-1(苯环吸收峰)，3106.0cm^-1(酞嗪内酰胺吸收峰)，2901.9cm^-1(酞嗪内酰胺吸收峰)，1665.8cm^-1(羰基吸收峰)，1464.0cm^-1(羰基吸收峰)。

紫外数据(UV)：最大吸收波长为206nm。

实施例2.4-(4-氟-3-(硫代吗啉-4-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮的合成

向250ml的三口瓶中加入2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸10.0g(33.5mmol)，硫代吗啉氧化物盐酸盐6.9g(40.2mmol)，HBTU 15.0g(40.2mmol)，DIPEA6.5g(50.3mmol)，DMF 100ml，室温搅拌1h，逐渐有固体析出，LCMS跟踪反应，直至2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸完全反应，过滤，滤饼依次用DMF 100ml，水100ml，丙酮100ml，淋洗。于45℃真空干燥得4-(4-氟代-3-(硫代吗啉-4-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮8.0g,收率：62.23％，mp：250.4～252.2℃。

LC-MS(m/z)：384[M+H⁺]；

核磁数据¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ12.55(s,1H，酞嗪3位质子)，8.24(d,1H，J＝7.7Hz,酞嗪苯环质子)，7.92(d,1H,J＝7.9Hz,酞嗪苯环质子)，7.87(t,1H，J＝7.4Hz,酞嗪苯环质子)，7.81(t,1H,J＝7.4Hz,酞嗪苯环质子)，7.49(d,1H，J＝6.3Hz,氟苄基苯环质子)，7.44(dd,1H,J＝8.0,5.4Hz,氟苄基苯环质子)，7.23(t,1H，J＝9.0Hz,氟苄基苯环质子)，4.32(s,2H，苄基亚甲基质子)，3.57(s,2H，吗啉环硫邻位质子)，3.33(s,2H，吗啉环硫邻位质子)，3.26(s,2H，吗啉环氮邻位质子)，3.09(s,2H，吗啉环氮邻位质子)。

红外数据(IR)：3426.5cm^-1(苯环吸收峰)，3162.6cm^-1(苯环吸收峰)，2900.2cm^-1(酞嗪内酰胺吸收峰)，1664.7cm^-1(羰基吸收峰)。

紫外数据(UV)：最大吸收波长为207nm。

实施例3.4-(3-(1,1-二氧硫代吗啉-4-羰基)-4-氟苄基)酞嗪-1(2H)-酮的合成

向250ml的三口瓶中加入2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸10.0g(33.5mmol)，硫代吗啉1,1-二氧化物盐酸盐4.5g(40.2mmol)，HBTU 15.0g(40.2mmol)，DIPEA 6.5g(50.3mmol)，DMF 100ml，室温搅拌1h，逐渐有固体析出，LCMS跟踪反应，直至2-氟代-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酸反应完全，过滤，滤饼依次用DMF 100ml，水100ml，丙酮100ml，淋洗。于45℃真空干燥得4-(3-(1,1-二氧代硫代吗啉-4-羰基)-4-氟苄基)酞嗪-1(2H)-酮10.5g，收率：75.39％。

LC-MS(m/z)：416[M+H⁺]；

核磁数据¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.55(s,1H，酞嗪3位质子),8.24(d,1H,J＝7.7Hz,酞嗪苯环质子),7.92(d,1H，J＝7.9Hz,酞嗪苯环质子),7.87(t,1H,J＝7.4Hz,酞嗪苯环质子),7.81(t,1H，J＝7.4Hz,酞嗪苯环质子),7.49(d,1H,J＝6.3Hz,氟苄基苯环质子),7.44(dd,1H，J＝8.0,5.4Hz,氟苄基苯环质子),7.23(t,1H，J＝9.0Hz,氟苄基苯环质子),4.32(s,2H，氧代吗啉环氮邻位质子),3.57(s,2H，氧代吗啉环氮邻位质子),3.33(s,2H，吗啉环硫邻位质子),3.26(s,2H，吗啉环硫邻位质子),3.09(s,2H，苄位亚甲基质子)。

红外数据(IR)：3435.4cm^-1(苯环吸收峰)，3162.8cm^-1(苯环吸收峰)，3010.7cm^-1(酞嗪内酰胺吸收峰)，2929.4cm^-1(酞嗪内酰胺吸收峰)，1659.9cm^-1(羰基吸收峰)，1125.9cm^-1(砜基吸收峰)。

紫外数据(UV)：最大吸收波长为207nm。

药效实施例1 PARP-03对PARP同工酶的作用

受试化合物对PARP同工酶的抑制活性用半抑制浓度IC₅₀值来表示。其测定方法为：将一系列梯度浓度的化合物，按照试剂盒方法在室温条件下与特定浓度的酶溶液共同孵育相应的时间，通过荧光微孔板检测仪进行检测荧光强度，测定特定化合物浓度下的酶活力，并计算不同浓度的化合物对酶活力的抑制活性，之后根据参数方程，对不同浓度化合物下酶活力的抑制活性进行拟合，计算出IC₅₀值。

本实施例以PARP-03为受试药物，并采用AZD2281(奥拉帕尼)为阳性对照品。其二者对PARP同工酶的IC₅₀值如表1示：

表1PARP-03对PARP同工酶和AZD2281的作用

注：*PARP03抑制其它PARP酶的IC₅₀与抑制PARP1的IC50的比值。

由表1可见，PARP-03和AZD2281均显著抑制PARP1和PARP2酶活性，而对PARP3、TNKS1、TNKS1和PARP6酶的抑制作用较弱。其中PARP-03的抑制活性较AZD2281强，选择性同AZD2281相当。

药效实施例2 PARP-03的体外抗肿瘤作用

将对数生长期的不同细胞株的细胞消化后，欢打成单细胞悬液，接种于96孔培养板；5×10³细胞孔，每孔培养基200μl，37℃、5％CO₂培养箱中培养过夜；待细胞贴壁后，加入梯度浓度的受试药物或阳性对照药，在培养箱中再培养3天。10％三氯醋酸固定1h，用双蒸水洗涤，干燥后，每孔加入70μl SRB溶液(4mg/mL)，室温染色20分钟，1％醋酸洗涂，干燥；每孔加入100μl 10mMTris-Base溶液使溶解。酶标仪检测各OD孔值(检测波长540nm)：记录结果；按下列公式计算抑制率：生存率(％)＝(OD给药/OD对照)×100％，并计算IC₅₀。

本实施例以PARP-03为受试药物，并采用AZD2281(奥拉帕尼)为阳性对照品；其二者对BRCA缺陷的人肿瘤细胞的增殖抑制作用如表2示：

表2 PARP-03对BRCA缺陷的人肿瘤细胞的增殖抑制作用

由表2可知，PARP-03、AZD2281对5株BRCA1或BRCA2缺陷的人肿瘤细胞增殖生长具有明显的抑制作用，IC₅₀分别为0.0002-18.03μM、0.01-25.7μM。由此可见，PARP-03的活性是AZD2281的43.8倍(平均值)

药效实施例3 PARP-03的体内抗肿瘤作用

将1×10⁷个人乳腺癌MDA-MB-436细胞注射入裸小鼠腋下，传三代后，剖取MDA-MB-436种鼠瘤块，放入盛有生理盐水的玻璃皿内，剥弃表面血管，切开去除坏死区域后，将瘤块切成1～2mm³，用套管针接入瘤块于裸小鼠左腋下。待肿瘤生长至平均体积100～300mm³后，将动物按瘤体积随机分组后给药。在给药过程中，根据老鼠状态及肿瘤生长情况对两种化合物的给药剂量进行调整，每周称重和测量肿瘤体积2次，给药周期21天，于第22天称量体重，测量肿瘤体积，处死裸小鼠取瘤块称重，计算相对肿瘤体积(RTV)、相对肿瘤增值率(T/C)，并用SPSS 19.0进行统计学分析。

本实施例以PARP-03为受试药物，并采用AZD2281(奥拉帕尼)为阳性对照品。实验结果表明，此类新型化合物具有一定的抑制肿瘤生长的作用，且动物尚未出现明显的毒性作用。其二者对人胃癌MDA-MB-436裸小鼠移植瘤体重及肿瘤体积影响如表3示：

表3 PARP-03对人胃癌MDA-MB-436裸小鼠移植瘤体重及肿瘤体积影响

注：t-test，与Control相比，***：P<0.001，**：P<0.01，*：P<0.05。

PARP-03的T/C为56.23％，AZD2281组T/C为73.05％，结果表明，此类新型化合物具有一定的抑制肿瘤生长的作用，且抑制作用优于AZD2281。

另外，将其它实施例提供的编号为PARP-01和PARP-02的化合物用于进行上述实验，所得的试验结果基本与PARP-03一致，暂不赘述。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。