CN108078880A - 一种包含薏苡仁发酵液的美白组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种包含薏苡仁发酵液的美白组合物，其包含如下重量百分比的有效活性组分：5.0％～50.0％的薏苡仁发酵液、0.1％～5.0％的蓝铜胜肽和0.1％～6.0％的大分子胶原蛋白，其中所述薏苡仁发酵液的制备方法参见本申请人申请号为201711165203.6的专利申请。本发明的美白组合物能提高皮肤中β‑葡萄糖脑苷酯酶的酶活力进而促进皮肤本身的神经酰胺形成，使肌肤亮白。在大分子胶原蛋白的缓释作用下，薏苡仁发酵液中的小分子活性物和蓝铜胜肽对皮肤的作用更持久，具有美白保湿、紧致肌肤的功效。

Description

一种包含薏苡仁发酵液的美白组合物

本申请要求申请号为201711165203.6(发明名称为“一种高γ-氨基丁酸含量的薏苡仁发酵液、其制备方法及其应用”，申请日期：2017年11月20日)的发明专利申请的优先权，该申请的内容通过引用完全并入本文中。

技术领域

本发明涉及化妆品领域。具体地，本发明涉及一种包含薏苡仁发酵液、蓝铜胜肽和大分子胶原蛋白作为活性成分的美白组合物。

背景技术

皮肤的主要功能是保护机体免受外界环境中不利因素的干扰。皮肤分为三层，即表皮、真皮以及皮下组织。皮肤最主要的屏障位于皮肤的最表层，即角质层。这种独特的角化细胞和脂质的结合体使角质层拥有了屏障功能，这层脂质的渗透力非常强，是一个亲水又亲脂的空心球，可以包裹水溶性和脂溶性的活性物质，当其整个细胞被吞噬后，活性成分在细胞内被吸收、释放，从而使得皮肤柔软、润滑、水分充足，补充细胞营养及促进细胞再生，有效的提高活性成分在细胞内的稳定性并延长作用时间，可以有效的破坏自由基形成，达到美白肌肤、延缓衰老的功效。

角质层的细胞间隙赋予皮肤屏障作用，在棘层和粒层中通过板层小体的细胞外水解酶作用而形成。这些水解酶催化脂质(如磷脂或葡糖脑苷脂)极性部分的水解，产生亲脂性强的分子实体，主要包括葡糖苷酶、神经鞘磷脂酶和磷脂酶等。神经酰胺长链与游离脂肪酸链、胆固醇和胆固醇硫酸酯形成板层状结构决定皮肤的通透性。葡糖苷酶中β-葡糖脑苷脂酶在表皮中起首要作用，它的天然底物β-葡糖脑苷脂水解为占细胞间脂质重量40％的神经酰胺，神经酰胺在皮肤中起美白、保湿和抗衰老的作用。

虽然皮肤具有产生神经酰胺的能力，但是这种能力并不充分，因而有添加神经酰胺或神经酰胺类似物从外部皮肤直接补充神经酰胺的方法。但是这种方法无法获得长期的美白作用功效，并且安全性较低。

如果能通过增强皮肤的自身作用，从而使得皮肤产生神经酰胺的含量增加，则无需外部再补充神经酰胺或神经酰胺类似物来美白皮肤。这样，由于美白物质是由皮肤自身产生，则不存在皮肤对外源物的适应性不好等不良的安全性问题。

因此，近年来，关于可促进皮肤角质层中自身神经酰胺产生的研究相当热门。作为可促进神经酰胺产生的物质，已报道的有灵芝、蜂花粉(Bee Pollen)、川穹、黑茶、岩茶、白芷、地黄、白术、甘草、大黄、白及、何首乌、桔梗、益母草和山药等的提取物以及唇形科、瑞香科以及菊科等植物的提取物为有效成分的神经酰胺产生促进剂(专利文献1～7)，然而这些植物原料价格高和/或提取操作耗费时间长，制造成本大。在专利文献8中，公开了一种能够提高皮肤内表皮细胞自身的神经酰胺合成量的神经酰胺合成促进剂，其以含有烟酸和/或烟酰胺的菌培养物为有效成分，该菌培养物可以是乳酸菌培养物、双歧杆菌培养物、香菇菌体培养物或者酵母菌体培养物。这种以烟酸和/或烟酰胺为原料的促进剂的制备成本仍然较高。另外，日本花王株式会社公开了在含有豆渣和糖类的培养基中培养微生物获得的上清液可作为神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂，该微生物有红酵母属、毕赫酵母属、乳杆菌属、芽孢杆菌属、隐球酵母属、明串珠菌属、裂殖酵母属、假丝酵母属、掷孢酵母属、亚罗酵母属、酒香酵母属、德巴利酵母属、地霉菌属、布勒掷孢酵母属、汉逊酵母属，这类神经酰胺产生促进剂虽安全，但由于美白作用单一，效果不够高。

现有技术专利：

专利文献1：日本特开2004-161648号公报

专利文献2：日本特开2005-194240号公报

专利文献3：日本特开2010-70499号公报

专利文献4：日本特开2010-150237号公报

专利文献5：CN201410337201.0，发明名称：神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺促进剂或保湿剂

专利文献6：CN200910118746.1，发明名称：神经酰胺产生促进剂

专利文献7：CN200910118747.6，发明名称：神经酰胺产生促进剂

专利文献8：日本特开平9-194383号公报

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供了一种可平衡成本与功效的美白组合物，该组合物除本身具备美白功效外，最重要的是，它还能通过提高皮肤细胞内的β-葡萄糖脑苷脂酶的活性进而提高皮肤中的神经酰胺含量，达到高效、安全的双重美白效果。

本发明人为了解决上述技术问题进行了研究，结果发现：含有薏苡仁发酵液、蓝铜胜肽和大分子胶原蛋白的美白组合物不仅具有抑制酪氨酸酶活性，同时还能有效提高皮肤细胞中的β-葡萄糖脑苷脂酶的活性。本发明人在此基础上进行了进一步的研究，完成了本发明。

此处，需要说明的是，本申请人已于2017年11月20日提交了发明名称为“一种高γ-氨基丁酸含量的薏苡仁发酵液、其制备方法及其应用”的发明专利申请，其申请号为201711165203.6。本申请要求该在先申请作为优先权，本发明是在该优先权申请的基础上完成的发明。除非另外说明，本申请中的“薏苡仁发酵液”是按照优先权申请的制备方法制备的。

本发明的目的是提供一种包含薏苡仁发酵液的美白组合物，其包含薏苡仁发酵液、蓝铜胜肽和大分子胶原蛋白作为有效活性组分。其中，所述薏苡仁发酵液的重量百分比为5.0％～50.0％；所述蓝铜胜肽的重量百分比为0.1％～5.0％；所述大分子胶原蛋白的重量百分比为0.1％～6.0％。余量一般可以是水。另外，本领域技术人员应该理解，可以根据实际需要选用适当的辅料添加在所述美白组合物中。

在一个优选的实施方案中，本发明的包含薏苡仁发酵液的美白组合物包含如下重量百分比(即，重量％)的有效活性组分：20.0％～40.0％的薏苡仁发酵液；0.5％～3.0％的蓝铜胜肽；0.3％～3.0％的大分子胶原蛋白。

在一个更优选的实施方案中，本发明的包含薏苡仁发酵液的美白组合物包含如下重量百分比(即，重量％)的有效活性组分：33.0％的薏苡仁发酵液；1.0％的蓝铜胜肽；0.5％的大分子胶原蛋白。

根据优先权申请的记载，用于本发明的薏苡仁发酵液是一种高γ-氨基丁酸含量的薏苡仁发酵液，其包含5.0m妙mL以上的γ-氨基丁酸，并且按照下述方法制备：

(1)粉碎薏苡仁；

(2)将脱脂奶粉与水混合，加入混合菌种，密封培养发酵，直至形成凝乳且散发出酸奶味，制得发酵剂；

(3)将步骤(1)所得薏苡仁粉与水混合，再添加液化酶和糖化酶，于61～63℃对薏苡仁粉糖化处理2～4h；

(4)添加谷氨酸钠到步骤(3)所得的糖化醪中，装入密封罐内，再接种步骤(2)所得的发酵剂，混匀后，37～42℃密封发酵至终点；

(5)将步骤(4)所得的发酵物用无水乙醇洗涤，过滤后，旋蒸除去乙醇，再过滤即得到所述薏苡仁发酵液，

其中在经步骤(5)得到的薏苡仁发酵液中，所述γ-氨基丁酸的含量为5.0mg/mL以上。

上述制备方法中，步骤(1)优选将薏苡仁粉碎成20～100目或更细的粉末，但并不总限制于此范围。

上述制备方法中，步骤(2)所述脱脂奶粉与水混合的比例为1∶2～1∶15(w/v)；所述混合菌种加入量的重量百分比为0.1％～2.0％。

上述方法中，所述混合菌种至少包含嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌两种菌，还可以另外再添加嗜酸乳杆菌、双歧杆菌或干酪乳杆菌中的一种或更多种菌。优选地，所用的混合菌种由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌组成，两种菌的混合比例对最终发酵效果影响不大，因此可不限制。

上述方法中，在步骤(3)中，所述薏苡仁粉与水混合的比例为1∶3～1∶15(w/v)；所述液化酶的添加量为100U/g粉～300U/g粉；所述糖化酶的添加量为100U/g粉～300U/g粉。所用的液化酶和糖化酶可商购得到。本领域技术人员可以选择适当的可商购的液化酶和糖化酶用于本发明。

上述方法中，在步骤(4)中，所述谷氨酸钠的添加量为0.5重量％～2.0重量％；所述薏苡仁糖化后，薏苡仁发酵体系的pH值为5.0～7.0；所述接种步骤(2)所得发酵剂的接种量为1重量％～6重量％，优选2重量％；所述密封发酵的终点为pH 3.5～4.5。

上述方法中，步骤(5)中的无水乙醇的终浓度为30重量％～60重量％，但并不总限制于此范围内。

上述方法中，步骤(5)除去乙醇后得到薏苡仁发酵液，此次过滤为通过0.22～0.45μm的滤膜过滤，以除去残留的薏苡仁粉末和发酵生物。

用于本发明的美白组合物的大分子胶原蛋白的分子量可以在10万～30万道尔顿的范围内，并且可以是以动物的腱、骨或皮肤等为原料制备的胶原蛋白，也可以是商购获得的胶原蛋白。

用于本发明的美白组合物的蓝铜胜肽是一种由三个氨基酸(GHK)和一个铜离子所组成的复合物，又称铜胜肽，简称GHK-Cu，由美国人Loren Pickart于1973年在人体的血清中发现，GHK-Cu可促进细胞的分裂、分化，具有延缓皮肤老化的功效，可通过商业购买的方式获得，目前已开始应用于化妆品及护肤品中。

在上述美白组合物中，所述大分子胶原蛋白具有交联性能，可形成网状结构，有利于缓释薏苡仁发酵液中的小分子有效活性物质和蓝铜胜肽。

在上述美白组合物中，所述美白组合物具有较高的对酪氨酸酶活性的抑制率，具有美白功效。

在上述美白组合物中，所述美白组合物可提高皮肤中β-葡萄糖脑苷脂酶的活性。

上述美白组合物应用于化妆品中，具有美白保湿、紧致肌肤功效。

本发明提供的包含薏苡仁发酵液的美白组合物，其中还含有蓝铜胜肽和大分子胶原蛋白，在大分子胶原蛋白的交联作用下可交织形成网状结构进而缓释两者(即，薏苡仁发酵液中的小分子有效活性物质和蓝铜胜肽)的有效活性物质。此美白组合物具有抑制酪氨酸酶活性的作用，进而阻断黑色素的合成，达到美白皮肤的功效。另外，通过测定皮肤成纤维细胞中的β-葡萄糖脑苷脂酶的活性确认，此美白组合物能有效提高此酶的活性，而β-葡萄糖脑苷脂酶可将皮肤中的β-葡萄糖脑苷脂水解为占细胞间脂质重量40％的神经酰胺，众所周知，神经酰胺除具有保湿作用外，还具有美白功效。在黑色素形成受抑制和自身美白物质神经酰胺合成增加的双重作用下，美白效果增加。

与现有技术相比，本发明的美白组合物一方面含有抑制酪氨酸活性的发酵活性物，直接阻断了黑色素的合成路径；另一方面，本发明的美白组合物可刺激皮肤细胞内β-葡萄糖脑苷脂酶的酶活性，利于皮肤自身美白物质神经酰胺的形成。另外，本发明的组合物含有可促进肌肤自身胶原蛋白合成的蓝铜胜肽，在大分子胶原蛋白的缓释作用下，薏苡仁发酵液中的小分子有效活性物质和蓝铜胜肽对皮肤的作用更持久。在不同的美白机理同时作用下，本发明的美白组合物的美白作用安全高效。

附图说明

图1显示本发明实施例2配方制得的美白冻干粉在扫描电子显微镜(SEM)下观察的表面形态照片。

图2显示本发明实施例2制得的美白冻干粉可以缓释γ-氨基丁酸。

具体实施方式

下面参照具体的实施例进一步描述本发明，但是本领域技术人员应该理解，本发明并不限于这些具体的实施例。

实施例1薏苡仁发酵液的制备

按照优先权申请201711165203.6中记载的制备方法制备高γ-氨基丁酸含量的薏苡仁发酵液：

步骤1，称取15～25g脱脂奶粉加入到100～250mL温开水中，搅拌分散均匀，待温度冷至40℃以下后，加入0.5～1.0g酸奶发酵菌粉(含有嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌，购自北京川秀科技有限公司)，搅拌分散均匀，密封培养发酵，直至形成凝乳且散发出酸奶味，至此薏苡仁发酵剂制成；

步骤2，用水将薏苡仁淘洗干净并干燥，然后粉碎过20～100目筛；称取150～200g薏苡仁粉加入到1.0L去离子水中，搅拌分散，加入液化酶(购自安琪酵母股份有限公司)和糖化酶(购自安琪酵母股份有限公司)，在61～63℃处理2～4h，然后再在121℃高温条件下灭菌；冷却后，接种2重量％～4重量％的步骤1的薏苡仁发酵剂，混匀后，于42℃密封发酵至pH为3.5～4.5；加入1.0L无水乙醇洗涤，然后过滤取滤液，旋蒸除去乙醇后，再过0.22μm滤膜除菌后，得到薏苡仁发酵液，4℃贮存备用。

按照该方法制备的薏苡仁发酵液包含5.0mg/mL以上的γ-氨基丁酸。

实施例2美白冻干粉的制备

本实施例制备包含薏苡仁发酵液、蓝铜胜肽和胶原蛋白的美白冻干粉。

制备方法如下：

取蓝铜胜肽(购自济肽生物，生产批号20170620)0.03g，再加入1.0g实施例1制备的薏苡仁发酵液和0.015g大分子胶原蛋白(购自广州翔博生物科技有限公司，分子量10万～30万道尔顿)，再加水补足至3.0g，混匀后，装于西林瓶中，低温冷冻干燥，制成美白冻干粉。

实施例3美白冻干粉美白能力测试

参照文献的方法(严航，唐婷，桂卉等.薏苡仁提取物对酪氨酸酶抑制作用.中成药，2013，35(4)：696-699)，通过检测美白冻干粉(本发明实施例2制备)对体外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用，根据溶液褪色程度与酶抑制化学计量关系，用分光光度法进行定量分析。

方法：分别取0.5mL含量为30mg/mL的美白冻干粉水溶液和30mg/mL的熊果苷水溶液(作为阳性对照)与200U蘑菇酪氨酸酶混合，用PBS缓冲液补足至2.5mL，37℃孵育10min，加入0.5mL L-酪氨酸(购自Sigma)，37℃孵育15min，立即在475nm处检测吸光度。实验中阴性对照用PBS缓冲液代替。实验结果见表1。

表1美白冻干粉对体外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制率(n＝3，)

测试样	抑制率/％
		熊果苷水溶液	80.16±1.26
本发明实施例2的美白冻干粉的水溶液	61.30±1.17

表1的结果说明本发明实施例2制备的美白冻干粉美白作用较强，但略低于同浓度条件下熊果苷的美白能力，这可能是由于本发明的美白冻干粉的美白功效在短时间内没有得到即时释放的缘故。

实施例4β-葡萄糖脑苷脂酶活性测定

本实施例利用人工合成基质4-甲基-伞形酮-β-D-葡萄糖苷(购自Melford公司)，采用荧光酶学手段测定皮肤成纤维细胞中的β-葡萄糖脑苷脂酶活性。该方法的原理是用4-甲基-伞形酮-β-D-葡萄糖苷作为底物，经β-葡萄糖脑苷酯酶作用，专一的分解成4-甲基伞形酮，利用伞形酮与4-甲基伞形酮具强烈荧光的特点，通过测定酶解游离出的4-甲基伞形酮的荧光强度来计算酶的活性。另外，皮肤成纤维细胞中的β-葡萄糖脑苷脂酶可将存在于皮肤中的、其天然底物β-葡萄糖脑苷脂水解为具有美白、保湿功效的神经酰胺，因此，检测细胞中β-葡萄糖脑苷脂酶活性的大小，可获知皮肤自身美白物质产生的多少。

具体方法为：将正常人皮肤成纤维细胞(购自中国科学院上海细胞库)在包含体积分数为10％胎牛血清、体积分数为5％抗生素(含200IU青霉素、200ug/mL链霉素)的DMEM培养基(购自Sigma公司)中在37℃培养，其中，一组加入实施例2的美白冻干粉为实验组，另一组作空白对照，在第三组用质量分数3％的熊果苷作阳性对照，均于CO₂培养箱中培养，细胞生长至80％融合时，收集并裂解细胞，离心，取上清液，先用Lowry法测定其蛋白质浓度。然后再取上清液10uL，加入20uL 6mmol/L4-甲基-伞形酮-β-D-葡萄糖苷(购自Melford公司)底物液(用0.1mol/L磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH4.5)配制)混匀，在37℃水浴中温浴60min，然后加入0.2mol/L的碳酸盐缓冲液(pH 10.7)终止反应，用荧光分光光度计检测荧光强度(激发波长360nm，发射波长460nm)，以4-甲基伞形酮(购自Sigma公司)为标准品制备标准曲线，计算β-葡萄糖脑苷脂酶的比活，其单位为umol/h/g。实验结果见表2。

表2β-葡萄糖脑苷脂酶活性测定(n＝3，)

表2的数据中，空白对照与含有熊果苷的阳性对照效果几乎差不多，而含本发明实施例2制备的美白冻干粉的实验组中β-葡萄糖脑苷脂酶的活性有了明显提高，说明本发明的美白冻干粉可有效提高皮肤成纤维细胞中β-葡萄糖脑苷脂酶的酶活力，皮肤自身产生美白物质神经酰胺的能力增强。

实施例5美白冻干粉的美白功效评价

美白冻干粉的美白功效是通过测定B16细胞内黑色素合成的抑制率和细胞内酪氨酸酶活性抑制率的方法进行评价。

(1)黑色素合成抑制率检测

B16细胞(购自中国科学院上海细胞库)用10％1640培养液培养，当细胞处于对数生长期状态良好的时候，用胰酶消化后计数，调整B16细胞密度，以5×10⁵个/孔接种于六孔板，24h后分别加入2mL实施例2制得的美白冻干粉的溶液，浓度分别为2mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL(用培养基配制)，作为样品组，对照组加入空白培养基，阳性对照组加入熊果苷浓度为2mg/mL的培养液。放入5％CO₂，37℃的培养箱培养72h，中间换液一次。72h后，弃去培养液，每孔加入0.25％胰酶0.5mL于室温下消化5min，加入1mL培养液中止消化，吹打成单细胞悬液，取20μL作细胞计数，其余细胞悬液1500r/min离心5min，弃上清液，用PBS洗脱2次，最后的沉淀加入1mL 1mol/L的NaOH(含10％DMSO)溶液，震荡5min，80℃水浴加热30min后，转移至96孔板，每孔加150μL，选择492nm波长，以空白孔调零，在酶标仪上测吸光度值，每一实验重复3次。按下式计算黑色素合成抑制率(％)：

黑色素合成抑制率(％)＝[1-(样品组OD值/样品组细胞密度)/(对照组OD值/对照组细胞密度)]×100％。

结果见表3。

(2)酪氨酸酶活性抑制率检测

B16细胞以浓度为5.0×10⁵/孔，接种于6孔板中，铺板过夜，吸去培养液，分别加入实施例2制得的美白冻干粉的溶液，浓度分别为2mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL(用培养基配制)，作为样品组，每个浓度设置3个复孔，对照组加入新鲜培养液，阳性对照组加入熊果苷浓度为2mg/mL的培养液，培养72h，中间换药一次。72h后，小心吸去培养液，用PBS洗脱2次，然后加入600u11％Triton X-100溶液裂解细胞，收集细胞裂解液，BCA试剂盒(购自Thermo Scientific)检测蛋白浓度，将所有组别裂解液浓度调整到最低浓度，然后依次加入96孔板中，100uL/孔，设3个复孔。每孔加入0.1％L-多巴(购自Sigma)50uL，放置37℃培养箱孵育20分钟。置于酶标仪上，以空白孔调零，450nm测吸光度值，每一实验重复3次。按下式计算酪氨酸酶活性抑制率(％)：

酪氨酸酶活性抑制率(％)＝(1-样品组平均吸光度值/对照组平均吸光度值)×100％。

结果见表4。

表3美白冻干粉对B16细胞内黑色素合成的抑制率(n＝3，)

表4美白冻干粉对B16细胞内酪氨酸酶的活性抑制率(n＝3，)

表3和表4的数据说明，本发明的美白组合物具有较强的细胞内酪氨酸酶活性抑制作用，且随着质量浓度升高抑制作用增强。由此可见，本发明的美白组合物可降低酪氨酸酶的催化活性进而抑制黑色素形成。值得注意的是，本发明的美白组合物对B16细胞内酪氨酸酶活性的抑制作用与对体外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用结果(见本发明实施例3)存在差异。这可能是因为细胞内存在其它复杂的氧化还原体系，影响了细胞内酪氨酸酶的催化活性。

实施例6美白冻干粉的表观性能检测

按实施例2的配方将美白冻干粉溶液加入12孔板中，1mL/孔，低温冷冻干燥制成片状，用镊子小心取下片状物，贴在有导电胶的样品台上，将其喷金后，用扫描电子显微镜观察冻干粉的表面形态，结果见图1。

冻干后的美白冻干粉呈疏松海绵状，表面呈线丝状结构，弹性好。由图1的扫描电子显微镜照片结果可知，扫描电镜下观察，按实施例2的配方制备的冻干后的美白冻干粉为网状多孔结构，孔径大小不一，其中，最大孔径可达300um左右，最小孔径为50um左右，排列不规则。这种网状多孔结构由胶原蛋白交联形成，有利于有效成分(即，薏苡仁发酵液中的小分子有效活性物质和蓝铜胜肽)的吸收和缓释。

实施例7美白冻干粉的缓释性能测定

按照实施例2的方法制备含有薏苡仁发酵液、蓝铜胜肽和大分子胶原蛋白的美白冻干粉，再利用高效液相法，以γ-氨基丁酸为代表药物对美白冻干粉的缓释性能进行检测。

测定方法：准确称取适量γ-氨基丁酸(购自Sigma)于烧杯中，用0.1mol/L HCl溶解并定容，保存于4℃冰箱中，以0.1mol/L HCl稀释γ-氨基丁酸贮备液，得到系列浓度标准液，按照样品衍生步骤进行柱前衍生，并用HPLC测定，以峰面积对浓度绘制标准曲线，标准曲线方程为y＝9×10⁶-80204，R2＝0.997(标准曲线数据未显示)。用3.0mL水将实施例2制得的1瓶美白冻干粉溶解。取室温下放置2h、8h、12h、18h、24h、30h、38h、48h、54h的美白冻干粉溶液100uL，分别用300uL邻苯二甲酚试剂衍生后，经0.22um滤膜过滤，再经HPLC上样测定其γ-氨基丁酸。为了保持美白冻干粉溶液的体积不变，每次取样前先加入100uL水到美白冻干粉中。最后对比标准曲线计算出不同时间美白冻干粉中的γ-氨基丁酸含量，结果见图2。

由图2可看出，实施例2制得的美白冻干粉中γ-氨基丁酸的总含量为7.2mg。曲线中有两个数据很重要：一是达到7.2mg所需的时间；二是最终能达到的总γ-氨基丁酸的含量。前者反映了大分子胶原蛋白控制γ-氨基丁酸释放速度的能力；后者反映了大分子胶原蛋白控制γ-氨基丁酸释放强度的能力。图2的结果显示，8min时γ-氨基丁酸的累积释放率为12.50％，24min时累积释放率为66.67％，30min时累积释放率为81.94％，至48min时累积释放率达到94.44％。完全释放7.2mg γ-氨基丁酸需要52min。可见在本发明的美白冻干粉中，大分子胶原蛋白的存在获得良好的γ-氨基丁酸的缓释性能。

实施例8喷雾干燥法制备含薏苡仁发酵液的美白粉

称取甘露醇5.0g、柠檬酸0.2g、蓝铜胜肽(购自济肽生物，生产批号20170620)2.0g、大分子胶原蛋白(购自广州翔博生物科技有限公司，分子量10万～30万道尔顿)1.0g，加入50.0mL水，搅拌溶解完全，再加入30.0mL实施例1制备的薏苡仁发酵液，再加水至100.0g，搅拌混匀后，以进口气流温度120℃，出口气流温度70℃，雾化器转速18,000r/min，送料速度2.5mL/min喷雾干燥，制得含薏苡仁发酵液的美白粉。在此配方中，柠檬酸对产品具有护色作用。

应该理解，尽管参考其示例性的实施方案，已经对本发明进行具体地显示和描述，但是本领域的普通技术人员应该理解，在不背离由后附的权利要求所定义的本发明的精神和范围的条件下，可以在其中进行各种形式和细节的变化，可以进行各种实施方案的任意组合。

Claims (9)

1.一种包含薏苡仁发酵液的美白组合物，所述美白组合物包含如下重量百分比的有效活性组分：5.0％～50.0％的薏苡仁发酵液；0.1％～5.0％的蓝铜胜肽；和0.1％～6.0％的大分子胶原蛋白。

2.权利要求1所述的美白组合物，其包含有如下重量百分比的有效活性组分：20.0％～40.0％的薏苡仁发酵液；0.5％～3.0％的蓝铜胜肽；和0.3％～3.0％的大分子胶原蛋白。

3.权利要求1所述的美白组合物，其包含33.0％的薏苡仁发酵液，1.0％的蓝铜胜肽和0.5％的大分子胶原蛋白。

4.权利要求1所述的美白组合物，其中所述薏苡仁发酵液按照下述方法制备：

(1)粉碎薏苡仁；

(2)将脱脂奶粉与水混合，加入混合菌种，密封培养发酵，直至形成凝乳且散发出酸奶味，制得发酵剂；

(3)将步骤(1)所得的薏苡仁粉与水混合，再添加液化酶和糖化酶，于61～63℃对薏苡仁粉糖化处理2～4h；

(4)添加谷氨酸钠到步骤(3)所得的糖化醪中，装入密封罐内，再接种步骤(2)所得的发酵剂，混匀后，37～42℃密封发酵至终点；

(5)将步骤(4)所得的发酵物用无水乙醇洗涤，过滤后，旋蒸除去乙醇，再过滤除菌即得到所述薏苡仁发酵液，

其中步骤(2)所用的混合菌种至少包含嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌两种菌，或另外再添加嗜酸乳杆菌、双歧杆菌或干酪乳杆菌中的一种或多种菌，

在经步骤(5)得到的薏苡仁发酵液中，所述γ-氨基丁酸的含量为5.0mg/mL以上。

5.权利要求4所述的美白组合物，其中步骤(2)所用的混合菌种由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌组成。

6.权利要求1所述的美白组合物，其中所述大分子胶原蛋白是以动物的腱、骨或皮等为原料制备的胶原蛋白。

7.权利要求1所述的美白组合物，其中所述大分子胶原蛋白的分子量为10万-30万道尔顿。

8.权利要求1所述的美白组合物，其中所述蓝铜胜肽为GHK-Cu。

9.一种美白化妆品，其包含有效量的权利要求1-8中任一项所述的美白组合物。