CN108066740A - 牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的药物和食物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的药物和食物中的应用，特别适用于绝经后妇女。本发明通过构建骨质疏松动物模型，发现了牛骨肽的新应用，牛骨肽制备治疗和预防骨质疏松的药物和食物，比激素更为安全、有效，可靠。

Description

牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的药物和食物中的应用

技术领域

本发明涉及领域保健食品领域，尤其涉及牛骨肽的应用。

背景技术

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是由于多种原因导致骨密度下降，骨微结构破坏，造成骨脆性增加，从而容易发生骨折的全身性骨病。雌激素水平降低等可能导致骨质疏松发生，骨重建过程中骨吸收作用大于骨形成作用致使骨质流失，最终使骨量减少、骨组织微结构破坏、骨强度下降和骨脆性增加，因此极易发生骨折。

据世界卫生组织(WHO)的统计资料显示，骨质疏松症已经成为全球性健康问题，目前，全世界约2亿人患有骨质疏松，骨质疏松发病率在慢性病中己跃居第七位，其中60岁以上女性骨质疏松率高达40％。随着人口老龄化程度的逐渐增大，骨质疏松渐渐成为威胁人类尤其是绝经后女性健康生活的一大关键因素。目前对绝经后女性骨质疏松的治疗主要采用雌激素和孕激素为主的激素补充疗法，但长期使用激素存在一定的不良反应，例如，增加了乳腺癌、静脉血栓、中风以及心肌梗死的发生率。

据IOF(国际骨质疏松基金会)统计，2010年，我国骨质疏松性骨折患者达233万例次，为此医疗支出94.5亿美元，据预测，2050年，我国骨质疏松性骨折患者将达599万例次，需相应的医疗支出高达254亿美元，所以急性骨折和骨折康复护理等将给个人以及医疗系统造成巨大的经济压力与负担。研究表明骨折的发生是可预防、诊断和治疗的，长期规律的治疗是增加骨密度、降低骨折风险的重要保障。因此对于骨质疏松预防与治疗的研究显得极为重要。

因此，研究除雌激素和孕激素外，对于防治骨质疏松有显著作用的药物显得极为重要。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了牛骨肽在制备预防骨质疏松的药物和食物中的应用。

本发明第一方面，提供牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的药物中的应用。

上述药物适用于普通人群。优选的，上述药物适用人群为绝经后妇女。

本发明第二方面，提供牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的食物中的应用。

上述食物适用于普通人群。优选的，上述食物适用人群为绝经后妇女。

牛骨肽的优点是，不是激素类物质，因此可以长期使用，毒副作用小，更为安全有效，克服了激素类药物长期小剂量或短期大剂量使用可致机体的免疫功能低下,引起更严重的疾病的问题。

研究报道去卵巢后雌性大鼠能成功复制出与人类绝经后骨量丢失相似特征的骨质疏松症，如高转换型骨丢失，骨密度下降，骨微结构破坏，骨生物力学性能下降，骨丢失迅速，补充雌激素能有效防止骨丢失等。Jast和Jasiuk用高分辨率micro-CT扫描仪，对3周、12周、32周、42周、60周、72周雌性SD大鼠股骨皮质骨三维结构扫描，结果显示随着周龄增加，其胫骨骨微结构的变化逐步停滞，说明3月龄大鼠胫骨的骨微结构已经发育成熟，适合用于建立骨质疏松模型，所以我们采用3月龄未孕雌性SD大鼠来构建模型。常见的骨质疏松动物模型的制备方法有：雌性手术双侧卵巢切除法、糖皮质激素诱导法、维甲酸诱导法、慢性过度饮酒性OP模型等。摘除双侧卵巢手术建立大鼠绝经后骨质疏松模型是骨质疏松基础研究最常采用的方法。摘除双侧卵巢手术的方式主要有背侧部双切口与腹部正中切口两种，两种手术操作的建模效果方面目前没有较为系统的报道，有实验表明背侧部双切口卵巢去除手术的操作更为简便、用时少，并且在手术过程中减少对输卵管的牵拉，不会改变腹腔正常解剖结构，降低术后腹膜粘连机会。因此在本实验中我们采用背侧部双切口对雌性SD大鼠进行摘除双侧卵巢手术来构建骨质疏松模型。

附图说明

图1为服用牛骨肽2周时骶骨CT扫描结果

A.生理盐水(假手术组)大鼠；

B.生理盐水(手术组)大鼠；

C.硫酸软骨素50mg/kg用药组大鼠；

D.牛骨肽25mg/kg用药组大鼠；

E.牛骨肽50mg/kg用药组大鼠；

F.牛骨肽100mg/kg用药组大鼠；；

图2为服用牛骨肽11周时骶骨CT扫描结果。(各组同图1)

图3为服用牛骨肽2周时股骨CT扫描结果。(各组同图1)

图4为服用牛骨肽11周时股骨CT扫描结果。(各组同图1)

图5为服用牛骨肽11周时肱骨扫描电镜结果。

A1为生理盐水(假手术组)大鼠肱骨头50倍电镜图像，A2为A1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

B1为生理盐水(手术组)大鼠肱骨头50倍电镜图像，B2为B1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

C1为硫酸软骨素50mg/kg组大鼠肱骨头50倍电镜图像，C2为C1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

D1为牛骨肽25mg/kg组大鼠肱骨头50倍电镜图像，D2为D1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

E1为牛骨肽50mg/kg组大鼠肱骨头50倍电镜图像，E2为E1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

F1为牛骨肽100mg/kg组大鼠肱骨头50倍电镜图像，F2为F1中小方框内骨小梁的1000倍局部放大；

图6为服用牛骨肽11周时大鼠股骨头病理切片结果(各组同图1)

图7为服用牛骨肽5周时尿钙含量(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图8为服用牛骨肽5周时血浆中碱性磷酸酶酶活(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图9为服用牛骨肽5周时抗酒石酸酸性磷酸酶活性(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图10为服用牛骨肽5周时血清中血钙含量(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图11为服用牛骨肽5周时血磷含量(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图12为服用牛骨肽5周时骨钙素含量(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

图13为建模三个月内体重变化趋势。

图14为服用牛骨肽11周时股骨骨折时最大载荷(从左到右依次为图1中A/B/C/D/E/F组)

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明的原理和构思作进一步说明：

实施例1骨质疏松动物模型的构建及口服给药实验

2.1.实验试剂和仪器

牛骨肽(湖北瑞邦生物科技有限公司提供)；硫酸软骨素(湖北瑞邦生物科技有限公司提供)；正电子发射断层显像/X线计算机体层成像仪器(型号Inveon PET/CT)；扫描电镜(型号JEOL6390LV)；Zwick材料试验机(型号B22.5/TS1S,生产于德国Zwick/Roell集团)；电子天平(型号YP1201N)；碱性磷酸酶活性测定试剂盒(购于碧云天公司)；抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒(购于碧云天公司)；血钙试剂盒(购于齐一生物科技有限公司)；血磷试剂盒(购于齐一生物科技有限公司)；Osteocalcin ELISA试剂盒(购于Cloud-Clone Corp company)

2.2.骨质疏松动物模型的构建及用药方案

大鼠腹腔注射剂量为350mg/kg水合氯醛麻醉后，俯卧位固定于手术台上，于背部后正中线旁开1.5cm，双侧肋缘下1.5cm处为中心，半径为1.5cm用剃毛刀将其毛发剃除并喷洒酒精消毒，在背部距肋后缘下1.5cm、后正中线旁1.5cm处用手术剪剪开长约1-1.5cm纵向切口，依次切开皮肤、皮下组织，切开腹膜，进入腹腔，拨开周围脂肪组织，用镊子将卵巢牵出，在卵巢与子宫交界处结扎后摘除卵巢，检查止血是否完全，之后将其送回腹腔中，先缝合腹膜，再缝合皮肤。假手术组仅在暴露卵巢后，切除卵巢周围似卵巢大小的脂肪组织，在卵巢与子宫角交界处不结扎，不切除卵巢，其余手术操作与摘除双侧卵巢手术操作相同。手术后3天每天通过腹腔注射给与青霉素钠预防感染。获得骨质疏松动物模型。

2.3.影像学检查，CT影像扫描

各组动物用药后2周及11周时分别进行PET/CT影像扫描。将实验大鼠用气体乙醚麻醉后以俯卧位放置于PET/CT仪器中，对大鼠骶骨及股骨进行扫描，采集图像。

2.4.病理学检查

2.4.1.扫描电镜观察

服用牛骨肽11周时，取肱骨，做扫描电镜观察骨小梁结构、数量。腹腔注射350mg/kg水合氯醛，将大鼠麻醉，取左侧前肢肱骨，去除软组织。用磷酸缓冲液清洗，而后固定于5％戊二醛溶液中4h或更久(放于4℃备用)，用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗3次，每次15min，1.0％锇酸固定液固定12h，用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗3次，每次15min。乙醇系列50％-70％-90％-10％逐级脱水，每一次换液浸泡15-20min，100％乙醇与醋酸异戊酯1:1溶液中浸泡30min，之后在醋酸异戊酯中浸泡30min完成脱水过程。用HITACHI HCP-2进行临界点干燥，喷金后在JEOL6390LV扫描电镜下观察并拍摄照片。

2.4.2.HE染色病理切片观察

服用牛骨肽11周时进行病理切片观察。腹腔注射350mg/kg水合氯醛将大鼠麻醉，取大鼠右侧后肢股骨，去除软组织，固定于4％多聚甲醛48h(放于4℃备用)，磷酸盐缓冲液充分漂洗，放于pH 7.4的4.13％EDTA-2Na脱钙液中脱钙一周(放于4℃备用)，隔天换液1次。脱钙完成后将右侧后肢股骨上1/3端沿正中矢状面剖开，进行苏木精－伊红染色(HE染色)、石蜡切片，使用显微镜观察骨小梁结构、数量。

2.5.尿钙含量测定

服用牛骨肽5周时将大鼠放置于代谢笼内，收集其尿液，离心去除所收集尿液中的杂质使其纯净，测定尿钙含量。

2.6.血液生化检验

2.6.1.血浆碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性测定

服用牛骨肽5周时，进行血浆ALP活性的测定。采用心脏穿刺取血，收集血液标本，3.8％枸橼酸钠(体积比1:9)抗凝，以3000rpm离心10min，收集血浆，进行ALP活性测定。根据试剂盒中所给标准品p-nitrophenol(对硝基苯酚)浓度与实验中所测定的相应的OD₄₀₅值，描绘出p-nitrophenol浓度-OD值标准曲线(R2≈1)，计算血浆样品中的p-nitrophenol浓度，p-nitrophenol浓度除以实验过程中样本的孵育时间即为ALP活性。

2.6.2.血浆抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)活性测定

服用牛骨肽5周时进行TRAP活性的测定。采用心脏穿刺取血，收集血液标本，3.8％枸橼酸钠(体积比1:9)抗凝，以3000rpm离心10min，收集血浆，进行TRAP活性测定。根据试剂盒中所给标准品p-nitrophenol浓度与实验中所测定的相应的OD₄₀₅值，描绘出p-nitrophenol浓度-OD值标准曲线(R2≈1)，计算血浆样品中的p-nitrophenol浓度，p-nitrophenol浓度除以实验过程中样本的孵育时间即为TRAP活性。

2.6.3.血钙含量测定

服用牛骨肽5周时进，行TRAP活性的测定。采用心脏穿刺取血，收集血液标本，3.8％枸橼酸钠(体积比1:9)抗凝，以3000rpm离心10min，收集血浆，进行血钙测定。按照血钙试剂盒中说明书操作，测定空白对照、标准液以及样本的OD₅₂₀值，并按照公式计算样本的血钙含量，血钙含量(u mol/dl血液)＝[C_标准液*(A_测定管-A_空白管)/(A_标准管-A_空白管)]*V_{样品总体积}

2.6.4.血磷含量测定

服用牛骨肽5周时进行血磷含量的测定。采用心脏穿刺取血，收集血液标本，3.8％枸橼酸钠(体积比1:9)抗凝，以3000rpm离心10min，收集血浆，进行血磷测定。按照血磷试剂盒中说明书操作，测定空白对照、标准液以及样本的OD₆₂₀值，并按照公式计算样本中血磷含量，血磷含量(m mol/dl)＝[C_标准液*(A_测定管-A_空白管)/(A_标准管-A_空白管)]*样品稀释倍数*V_{样品总体积}

2.6.5.骨钙素(Osteocalcin,OC)含量测定

服用牛骨肽5周时进行OC含量的测定。采用心脏穿刺取血，收集血液标本，3.8％枸橼酸钠(体积比1:9)抗凝，以3000rpm离心10min，收集血浆，进行OC含量测定。利用Osteocalcin ELISA试剂盒测定OC含量。根据试剂盒中所给溶液的浓度和实验所测定的相应OD₄₅₀值，描绘出浓度—OD值标准曲线(R2≈1)，计算OC浓度。

2.7.体重变化测定

在实验过程中每周用电子天平对大鼠体重称量一次，记录整个实验过程中大鼠体重的变化并构建体重变化趋势图，对体重变化趋势进行分析。

2.8.机械实验骨应力测定

服用牛骨肽11周时进行骨应力测定。腹腔注射350mg/kg水合氯醛将大鼠麻醉，取大鼠左侧后肢股骨，去除软组织，实验前浸泡于生理盐水中(放于4^°C冰箱)。使用Zwick材料试验机对左侧后肢股骨进行三点弯曲法测定最大载荷。将股骨样本平放于跨距26mm的试验机支架上，在垂直于股骨的方向上向股骨中部施加压力，压力加载速度为1mm/min，直到股骨骨折结束。记录股骨骨折过程中的压力与位移变化，以及股骨骨折时的最大载荷，用牛顿(N)表示。

实施例2分组实验结果

18只大鼠随机分为6组，每组3只，见表1。腹腔注射剂量为350mg/kg水合氯醛麻醉后，俯卧位固定于手术台上，于背部后正中线旁开1.5cm，双侧肋缘下1.5cm处为中心，半径为1.5cm用剃毛刀将其毛发剃除并喷洒酒精消毒，在背部距肋后缘下1.5cm、后正中线旁1.5cm处用手术剪剪开长约1-1.5cm纵向切口，依次切开皮肤、皮下组织，切开腹膜，进入腹腔，拨开周围脂肪组织，用镊子将卵巢牵出，在卵巢与子宫交界处结扎后摘除卵巢，检查止血是否完全，之后将其送回腹腔中，先缝合腹膜，再缝合皮肤。假手术组仅在暴露卵巢后，切除卵巢周围似卵巢大小的脂肪组织，在卵巢与子宫角交界处不结扎，不切除卵巢，其余手术操作与摘除双侧卵巢手术操作相同。手术后3天每天通过腹腔注射给与青霉素钠预防感染。

在摘除卵巢2周后，开始灌胃给药，每天一次。各组用药方案和给药剂量如表1所示。

表1：每组给药方案及用药剂量

实验结果

1.CT扫描

1.1.服用牛骨肽2周时骶骨扫描结果

服用牛骨肽2周时用气体乙醚将大鼠深度麻醉，放于CT仪器中进行骶骨扫描，扫描结果如图图1，图中箭头所指位置为骶岬。生理盐水(假手术组)大鼠图图A中蓝色箭头所示的骶岬部位CT扫描显示高亮，表明生理盐水(假手术组)大鼠骶岬骨密度没有显著变化。图图1A与图1B相比，生理盐水(手术组)大鼠骶岬骨密度降低，表明大鼠骨质疏松模型构建成功。牛骨肽100mg/kg用药组大鼠图1F中箭头所示的骶岬部位CT扫描结果与生理盐水(手术组)大鼠结果相比，相同部位区域高亮，表明摘除卵巢大鼠服用牛骨肽以后，骶岬骨密度未见显著降低，未出现骨质酥松。

1.2.服用牛骨肽11周时骶骨扫描结果

服用牛骨肽11周时用气体乙醚将大鼠深度麻醉，放于CT仪器中进行骶骨扫描，扫描结果如图图2，图中蓝色箭头所指位置为骶岬。生理盐水(假手术组)大鼠图2A中蓝色箭头所示骶岬部位CT扫描显示高亮，表明生理盐水(假手术组)大鼠骶岬骨密度没有显著变化；生理盐水(手术组)图2B中蓝色箭头所示骶岬部位CT扫描结果显示较暗，表明生理盐水(手术组)大鼠骶岬骨密度降低。牛骨肽100mg/kg用药组大鼠图2F中蓝色箭头所示骶岬部位CT扫描结果与生理盐水(手术组)大鼠相比，相同部位区域高亮，表明摘除卵巢大鼠连续服用牛骨肽以后，骶岬骨密度未见显著降低，未出现骨质酥松。

1.3.服用牛骨肽2周时股骨扫描结果

服用牛骨肽2周时用气体乙醚将大鼠深度麻醉，放于CT仪器中进行股骨扫描，结果如图图3，图中蓝色箭头所指位置是股骨远端。生理盐水(假手术组)大鼠图3A中蓝色箭头所示股骨颈CT扫描显示高亮，表明生理盐水(假手术组)大鼠股骨远端骨密度没有显著变化；生理盐水(手术组)大鼠图3B中蓝色箭头所示股骨颈CT扫描显示较暗，表明生理盐水(手术组)大鼠股骨颈骨密度低。图3A与图3B相比，结果表明已成功构建大鼠骨质疏松模型。牛骨肽100mg/kg用药组大鼠图3F中箭头所示股骨颈CT扫描结果与生理盐水(手术组)大鼠相比，表明摘除卵巢大鼠服用牛骨肽，骨密度未见变化。

1.4.服用牛骨肽11周时股骨扫描结果

服用牛骨肽11周时用气体乙醚将大鼠深度麻醉，放于CT仪器中进行股骨扫描，结果如图图4，图中蓝色箭头所指位置是股骨颈部位。生理盐水(假手术组)大鼠图4A中蓝色箭头所示股骨颈CT扫描结果显示高亮，即生理盐水(假手术组)大鼠股骨远端骨密度未见变化；生理盐水(手术组)大鼠图4B中蓝色箭头所示股骨颈CT扫描结果显示较暗，即生理盐水(手术组)大鼠股骨颈处骨密度降低。牛骨肽100mg/kg用药组大鼠图4F中蓝色箭头所指向的股骨远端CT扫描结果与生理盐水(手术组)大鼠Fig 4B中，蓝色箭头所示股骨颈CT扫描结果与生理盐水(手术组)大鼠相比，表明摘除卵巢大鼠服用牛骨肽，骨密度未见变化。

2.扫描电镜观察

服用牛骨肽11周时用350mg/kg水合氯醛将大鼠麻醉，取下其左侧前肢肱骨，去除软组织。在JEOL6390LV扫描电镜下观察结果如图图5。图中红色箭头所示为骨小梁结构，绿色长方形为局部放大。生理盐水(假手术组)大鼠(图5A1；图5A2)骨小梁数量多，结构紧密，均匀，连续性好，骨小梁表面光滑；生理盐水(手术组)(图5B1；图5B2)骨小梁结构稀疏，断裂不连续，表面粗糙有凹槽，出现空洞；生理盐水(假手术组)大鼠骨小梁与生理盐水(手术组)大鼠骨小梁相比，结果表明已成功构建大鼠骨质疏松模型。牛骨肽100mg/kg用药组大鼠(图5F1；图5F2)骨小梁与生理盐水(手术组)骨小梁大鼠相比，骨小梁结构紧密性，数量未见显著减少，连续性好，表面光滑。

3.病理观察

服用牛骨肽11周时用350mg/kg水合氯醛将大鼠麻醉，取其右侧后肢股骨，去除软骨组织，作病理分析，如图6所示。生理盐水(假手术组)(图6A)大鼠骨小梁结构致密，均匀，骨小梁数量多，排列规则；生理盐水(手术组)(图6B)大鼠骨小梁结构稀疏，数量少，排列不规则，出现面积较大的无骨小梁骨髓区；牛骨肽100mg/kg组(图6F)大鼠骨小梁与生理盐水(手术组)大鼠骨小梁相比，数量未见显著变化。

4.尿钙测定结果

服用牛骨肽5周时，将大鼠转移至代谢笼中饲养，收集大鼠尿液，检测尿液中钙离子的含量，结果如图图7。与生理盐水(手术组)大鼠尿钙含量相比，硫酸软骨素50mg/kg用药组大鼠尿钙含量明显降低(P＜0.5)，牛骨肽50mg/kg用药组大鼠尿钙含量也有显著降低(P＜0.5)。

5.血液生化分析

5.1.血浆中碱性磷酸酶活性测定结果

服用牛骨肽5周时通过心脏取血，离心分离血浆，测定ALP活性，结果如图图8。与生理盐水(手术组)大鼠血浆中碱性磷酸酶活性相比，生理盐水(假手术组)大鼠血浆中碱性磷酸酶活性表现出显著性差异(P＜0.01)，其他组大鼠血浆中碱性磷酸酶活性没有表现出显著性差异。

5.2.抗酒石酸酸性磷酸酶活性测定结果

服用牛骨肽5周时通过心脏取血，离心分离血浆，测定TRAP活性，结果如图图9。与生理盐水(手术组)大鼠血浆TRAP活性相比，生理盐水(假手术组)大鼠血浆TRAP活性偏高(P＜0.1)，硫酸软骨素50mg/kg用药组及牛骨肽50mg/kg用药组大鼠血浆TRAP活性也有所升高。其它各组大鼠血浆TRAp活性与生理盐水(手术组)大鼠相比没有表现出明显的差异。

5.3.血钙测定结果

服用牛骨肽5周时通过心脏取血，离心取血浆，测定血钙含量，结果如图图10。各组内个体间差异较大。各组大鼠血钙含量与生理盐水(手术组)大鼠相比没有表现出显著性差异。

5.4.血磷测定结果

服用牛骨肽5周时通过心脏取血，离心分离血浆，测定血磷含量，结果如图图11。与生理盐水(手术组)大鼠血磷含量相比，生理盐水(假手术组)大鼠血浆中血磷含量有降低(P＜0.5)，牛骨肽三个剂量组大鼠血浆中血磷含量都具有显著的降低(P＜0.5)。

5.5.骨钙素含量测定结果

服用牛骨肽5周时通过心脏取血，离心分离血浆，测定血浆骨钙素含量，结果如图图12。与生理盐水(手术组)大鼠血浆中骨钙素含量相比，生理盐水(假手术组)大鼠血浆中骨钙素含量显著降低(P＜0.1)，牛骨肽25mg/kg用药组大鼠血浆中骨钙素含量也有所降低(P＜0.5)。

6.体重变化趋势结果

自大鼠构建模型开始到大鼠解剖取样之间，每周用电子天平对大鼠称重一次，每组大鼠体重变化趋势结果如图图13。与生理盐水(手术组)大鼠体重变化趋势相比，牛骨肽50mg/kg用药组大鼠体重变化趋势存在明显的差异，牛骨肽50mg/kg用药组大鼠体重变化趋势表现为增长较快，其它各组大鼠的体重变化趋势与生理盐水(手术组)大鼠体重变化趋势相比没有明显差异。

7.股骨应力实验结果

分离股骨，施加压力测定股骨骨折时载荷，结果如图14。结果显示与生理盐水(手术组)大鼠股骨骨折时最大载荷相比，牛骨肽各剂量用药组大鼠未表现出非常明显的差异。

本项研究中，利用摘除双侧卵巢的方法制备大鼠骨质疏松动物模型，研究了牛骨肽对骨质疏松预防的药效学作用。实验大鼠骶骨、股骨的PET/CT扫描结果、肱骨头扫描电镜结果以及股骨头病理切片结果均显示出牛骨肽用药组大鼠与生理盐水(手术组)大鼠之间较为明显的差异，说明牛骨肽对骨质疏松具有预防作用。

牛骨肽对摘除卵巢的雌性SD大鼠有预防骨质疏松的作用，由于大鼠与人类具有较近的亲缘关系，因此我们推测牛骨肽具有预防骨质疏松的作用，适用于人群，对绝经后的妇女效果更好，可以用于制备治疗和预防骨质疏松的药物，也可以用于制备治疗和预防骨质疏松的食物。

硫酸软骨素具有促进软骨再生的作用，在一定程度上改善骨骼质量，减少骨骼硬化，使骨骼呈现年轻状态。本项研究结果显示：未见硫酸软骨素预防大鼠骨质酥松的药效学作用。

Claims (4)

1.牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的药物中的应用。

2.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物除普通人群外，也适用绝经后妇女。

3.牛骨肽在制备治疗和预防骨质疏松的食物中的人群应用。

4.如权利要求3所述应用，其特征在于，所述食物除普通人群外，也适用绝经后妇女。