CN108041282B - 一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途 - Google Patents

一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途，所述小果油茶粕指小果油茶的果实经过压榨处理或浸出法处理去除油脂后得到的固体残渣，所述脱毒指脱除皂苷，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，均匀喷洒酸性水溶液后接种米根霉堆腐。优选地，所述酸性水溶液优选pH值为4‑5的甲酸水溶液，喷洒至油茶粕粉的含水量为60‑70％。本发明提供的脱毒方法可以有效脱除小果油茶粕中的皂苷，从而脱除其苦味，改善口感，进而可以用作饲料添加剂；尤其是，使用甲酸作为酸腐剂时，可以显著提高米根霉对小果油茶粕中皂苷的脱除效率；而且，本发明提供的脱毒方法简易可行，成本低，易于工业化生产和推广。

Description

一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途
技术领域
本发明属于畜牧领域，涉及一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途。
背景技术
小果油茶(Camellia meiocarpa Hu.)是我国山茶属中栽培面积和年产量仅次于普通油茶(Camellia oleifera Abel.)的主栽物种，主要分布于我国淮河、长江以南的福建、江西、广西、湖南、贵州等地。小果油茶又名江西子、小茶、鸡心子、小叶油茶、羊屎子等。果小、叶小、芽小，芽、苞片没有毛是其显著特征。
小果油茶粕是小果油茶提取油脂后得到的副产品。虽然，目前已有茶场将这些油茶粕脱毒(主要为皂苷，味苦且辛辣)后用作动物饲料，但是，由于工艺不成熟、脱毒成本高，绝大部分油茶粕仍然是当废料扔掉，或者堆腐后用作茶场的肥料，利用度低，附加值低。
申请人旨在提供一种经济、便捷、高效脱除小果油茶粕中皂苷毒性的方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种油茶粕的脱毒方法及脱毒油茶粕用作动物饲料的用途。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
一种小果油茶粕的脱毒方法，所述小果油茶粕指小果油茶的果实经过压榨处理或浸出法处理去除油脂后得到的固体残渣，所述脱毒指脱除皂苷，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，均匀喷洒酸性水溶液后接种米根霉堆腐。
优选地，所述酸为盐酸、甲酸或乙酸。
优选地，酸性水溶液pH值优选4-5。
优选地，以喷洒酸性水溶液后的油茶粕粉湿重计，米根霉的接种量为15％-25％(mL/g)，米根霉菌液浓度为107个单孢子/mL。
优选地，堆腐温度为28-32℃。
优选地，堆腐时间为24-72h。
优选地，酸性水溶液优选pH值为4-5的甲酸水溶液，喷洒至油茶粕粉的含水量为60-70％。
优选地，以喷洒酸性水溶液后的油茶粕粉湿重计，米根霉的接种量为20％(mL/g)，米根霉菌液浓度为107个单孢子/mL，30℃堆腐24h。
一种由上述脱毒方法制备的小果油茶粕。
上述小果油茶粕用作动物饲料的用途。
本发明的优点：
1、本发明提供的脱毒方法可以有效脱除小果油茶粕中的皂苷，从而脱除其苦味和辛辣味，改善口感，进而可以用作饲料添加剂；尤其是，使用甲酸作为酸腐剂时，可以显著提高米根霉对小果油茶粕中皂苷的脱除效率；
2、本发明提供的脱毒方法简易可行，成本低，易于工业化生产和推广。
附图说明
图1为实施例1-9堆腐24h后油茶粕粉中总皂苷脱除率比较。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
下述实施例中，以1982-1983年春定植在福建省闽侯桐口国有林场油茶种质资源收集圃的小果油茶(Camellia meiocarpa Hu.)为原材料，经压榨工艺去除油脂得小果油茶粕，备用。
实施例1：盐酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4.5的盐酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为65％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为20％(mL/g)；
步骤S4，于30℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例2：盐酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4的盐酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为60％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为15％(mL/g)；
步骤S4，于32℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例3：盐酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为5的盐酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为70％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为25％(mL/g)；
步骤S4，于28℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例4：甲酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4.5的甲酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为65％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为20％(mL/g)；
步骤S4，于30℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例5：甲酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4的甲酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为60％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为15％(mL/g)；
步骤S4，于32℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例6：甲酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为5的甲酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为70％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为25％(mL/g)；
步骤S4，于28℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例7：乙酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4.5的乙酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为65％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为20％(mL/g)；
步骤S4，于30℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例8：乙酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为4的乙酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为60％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为15％(mL/g)；
步骤S4，于32℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
实施例9：乙酸酸腐+米根霉转化
1、实验材料
菌种：米根霉(Rhizopus oryzae)AS3.866，购于广东省微生物菌种保藏中心。
斜面培养基：PDA培养基。
2、孢子液的制备
将米根霉接入斜面培养基，28℃下培养72h，待斜面长满孢子后，加入10mL无菌水将孢子洗下并用玻璃珠打散，制成浓度为107个单孢子/mL的孢子悬浮液。
3、脱毒方法
包括如下步骤：
步骤S1，将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，粒径为40-60目；
步骤S2，将油茶粕粉均匀喷洒pH值为5的乙酸水溶液，至油茶粕粉的含水量为70％；
步骤S3，接种浓度为107个单孢子/mL的米根霉孢子悬浮液，接种量为25％(mL/g)；
步骤S4，于28℃堆腐24-72h，分别于24、48、72h取适量粕粉提取、测定皂苷含量。
粕粉中总皂苷提取及含量测定方法
分别称取堆腐不同时间后的粕粉各3份(平行操作)，每份1g(以酸化前的油茶粕粉质量计)，置于100mL锥形瓶中，加入60％乙醇溶液30mL，超声提取30min，4000r/min离心5min，取上清液，残渣重复提取1次，合并上清液回收乙醇至无醇味，用水饱和的正丁醇萃取4次，每次10mL，合并萃取液，挥干溶剂，残渣用甲醇溶解，转移至50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液400μL，置于干燥的具塞试管中，60℃蒸干，取出放冷。依次加入5％香草醛冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL，摇匀，于60℃水浴中保温15min，取出，用冰水浴冷却10min，加入4mL冰醋酸，摇匀，测定480nm处的吸收值。同法测定酸化前的油茶粕粉提取液于480nm处的吸收值，计算总皂苷脱除率(％)：
总皂苷脱除率(％)＝(单位质量油茶粕粉酸化前吸收值-单位质量油茶粕粉堆腐后吸收值)/单位质量油茶粕粉酸化前吸收值×100％。
测定、计算结果如表1和图1所示。
表1实施例1-9堆腐24、48、72h后油茶粕粉中总皂苷脱除率比较
堆腐24h脱除率(％) 堆腐48h脱除率(％) 堆腐72h脱除率(％)
实施例1 59.5±3.4 83.7±4.1 96.5±4.7
实施例2 60.1±3.2 80.9±3.8 96.2±4.3
实施例3 58.7±3.7 81.8±3.9 96.8±4.5
实施例4 97.3±4.6 98.5±4.3 99.2±4.8
实施例5 96.5±4.5 97.2±4.6 97.9±4.5
实施例6 97.0±4.9 98.1±4.7 98.8±4.2
实施例7 66.8±3.1 86.1±4.5 95.9±5.0
实施例8 64.2±3.3 84.8±4.2 96.4±4.6
实施例9 65.7±3.0 84.6±4.4 95.6±4.3
由上可见，本发明提供的脱毒方法可以有效脱除小果油茶粕中的皂苷，从而脱除其苦味，改善口感，进而可以用作饲料添加剂；尤其是，使用甲酸作为酸腐剂时，可以显著提高米根霉对小果油茶粕中皂苷的脱除效率；而且，本发明提供的脱毒方法简易可行，成本低，易于工业化生产和推广。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

Claims (1)

1.一种小果油茶粕的脱毒方法，所述小果油茶粕指小果油茶的果实经过压榨处理去除油脂后得到的固体残渣，所述脱毒指脱除皂苷，其特征在于：将小果油茶粕粉碎成油茶粕粉，均匀喷洒酸性水溶液后接种米根霉堆腐；其中：所述酸性水溶液为pH值4-5的甲酸水溶液，喷洒至油茶粕粉的含水量为60%-70％；以喷洒酸性水溶液后的油茶粕粉湿重计，米根霉的接种量为20％，米根霉菌液浓度为107个单孢子/mL，30℃堆腐24h，所述20％指湿重100g的喷洒酸性水溶液后的油茶粕粉对应接种20mL米根霉菌液。
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