CN107980621A - 一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法 - Google Patents

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刘森银
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Abstract

本发明公开了一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，包括以下步骤：(1)长瓣兜兰种子低温处理；(2)长瓣兜兰种子消毒处理；(3)种子萌发培养：培养基为蔗糖+椰乳+活性炭+土豆+琼脂粉，PH5.5，暗培养30‑60天，培养温度25±1℃；(4)原球茎培养：培养基为蔗糖+土豆+香蕉+活性炭+琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照强度为1500‑1200LUX，培养温度25±1℃；(5)生根培养：培养基为蔗糖+土豆+香蕉+活性炭+琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照为1500‑1200LUX，培养温度25±1℃；(6)试管苗移栽。本发明在长瓣兜兰进行低温处理后进行组培育苗的各个阶段中，采用了适于长瓣兜兰组培的培养基，提高了长瓣兜兰种子发芽率和种苗生根率。

Description

一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法
技术领域
本发明涉及一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，属于组培苗的培育技术领域。
背景技术
长瓣兜兰（学名：Paphiopedilum concolor），兰科，兜兰属附生植物。叶基生；数枚至多枚，叶片带形、革质。花葶从叶丛中长出，花苞片非叶状；子房顶端常收狭成喙状；花大而艳丽，有种种色泽；中萼直立，花粉粉质或带粘性，退化雄蕊扁平；柱头肥厚，下弯，柱头面有乳突，果实为蒴果。7-9月开花，11月结果。长瓣兜兰姿态美观，花形优雅，为观赏花卉之上品，是中国仅有的几种多花性兜兰之一，属国家一级保护植物，也是育种专家作为杂交育种的优秀亲本之一。
由于长瓣兜兰花后结果率极低，所以长瓣兜兰的种子弥足珍贵，在采用其种子来进行组培育苗繁育时，由于采用的培养基配比参数很难掌控、甚至配比参数不合理，导致长瓣兜兰在组培过程中萌发率低，种苗生根率低，生长缓慢，成活率低，制约着长瓣兜兰的人工繁育。因此，提供一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法具有重要意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，以解决长瓣兜兰种子发芽率低、种苗生根率低、生长缓慢的问题，加快长瓣兜兰种苗的生长繁殖，满足大规模种植长瓣兜兰的需要。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，包括以下步骤：
（1）长瓣兜兰种子低温处理：在结果期，将采集的长瓣兜兰种子放在种子低温储藏柜中保存，保存温度4℃，保存3~4个月；
（2）长瓣兜兰种子消毒处理：将低温保存的长瓣兜兰种子进行消毒处理；
（3）种子萌发培养：将经过消毒处理的长瓣兜兰种子进行种子萌发培养，种植萌发采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+20ml/L椰乳+0.1mg/LKT+ 0.3mg/L活性炭+20g/L土豆+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，暗培养30-60天，培养温度25±1℃；
（4）原球茎培养：将种植萌发得到的原球茎进行培养，原球茎培养采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+ 6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照强度为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（5）生根培养：在生根培养阶段采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（6）试管苗移栽。
优选的，步骤（2）长瓣兜兰种子消毒处理的具体步骤为：A、先用0.1%升汞浸泡10分钟后，之后用无菌水冲洗；B、再用0.1%次氯酸纳浸泡5分钟后用无菌水冲洗。
优选的，步骤（6）试管苗移栽的条件为：生根培养60-90天后，再炼苗7-15天，用0.1%甲基托布津浸泡15钟后移栽，室温度10-28℃，湿度80%-89%，遮阴60-70%。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
长瓣兜兰种子经过低温贮藏，打破了种子休眠，使得种子内部激素类信号物质增加，可以促进种子萌发。在长瓣兜兰进行低温处理后进行组培育苗的各个阶段中，采用了适于长瓣兜兰组培的培养基，在所使用的培养基中添加有土豆以及活性炭成分，土豆成分可以为在对长瓣兜兰种子萌发提供丰富的淀粉、蛋白质、粗纤维等营养物质，提高了长瓣兜兰种子发芽率和种苗生根率，另外活性炭成分可以为长瓣兜兰种子萌发提供暗环境，吸附离体培养中的酚类物质等抑制物，使多酚氧化酶与过氧化物酶失活，防止褐变现象，同时活性炭对高质量浓度的IAA、NAA以及BA、KT等也产生吸附作用，从而可以长瓣兜兰发芽率高以及后续种苗生根率。另外，在种子萌发培养采用的培养基中含有椰乳成分，椰乳在对长瓣兜兰愈伤组织份分化率和芽高均有促进作用，可以使组培苗增粗变壮，提高了长瓣兜兰种子萌发率。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对发明进行进一步介绍：
一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，包括以下步骤：
（1）长瓣兜兰种子低温处理：在结果期，将采集的长瓣兜兰种子放在种子低温储藏柜中保存，保存温度4℃，保存3~4个月；
（2）长瓣兜兰种子消毒处理：将低温保存的长瓣兜兰种子进行消毒处理；
（3）种子萌发培养：将经过消毒处理的长瓣兜兰种子进行种子萌发培养，种植萌发采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+20ml/L椰乳+0.1mg/LKT+ 0.3mg/L活性炭+20g/L土豆+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，暗培养30-60天，培养温度25±1℃；
（4）原球茎培养：将种植萌发得到的原球茎进行培养，原球茎培养采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+ 6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照强度为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（5）生根培养：在生根培养阶段采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（6）试管苗移栽。
在本实施例中，步骤（2）长瓣兜兰种子消毒处理的具体步骤为：A、先用0.1%升汞浸泡10分钟后，之后用无菌水冲洗；B、再用0.1%次氯酸纳浸泡5分钟后用无菌水冲洗。
在本实施例中，步骤（6）试管苗移栽的条件为：生根培养60-90天后，再炼苗7-15天，用0.1%甲基托布津浸泡15钟后移栽，室温度10-28℃，湿度80%-89%，遮阴60-70%。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）长瓣兜兰种子低温处理：在结果期，将采集的长瓣兜兰种子放在种子低温储藏柜中保存，保存温度4℃，保存3~4个月；
（2）长瓣兜兰种子消毒处理：将低温保存的长瓣兜兰种子进行消毒处理；
（3）种子萌发培养：将经过消毒处理的长瓣兜兰种子进行种子萌发培养，种植萌发采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+20ml/L椰乳+0.1mg/LKT+ 0.3mg/L活性炭+20g/L土豆+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，暗培养30-60天，培养温度25±1℃；
（4）原球茎培养：将种植萌发得到的原球茎进行培养，原球茎培养采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+ 6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照强度为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（5）生根培养：在生根培养阶段采用的培养基为1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+6-7g/L琼脂粉，PH5.5，光照培养12hr/d，光照为1500-1200LUX，培养温度25±1℃；
（6）试管苗移栽。
2.根据权利要求1所述的一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，其特征在于：步骤（2）长瓣兜兰种子消毒处理的具体步骤为：A、先用0.1%升汞浸泡10分钟后，之后用无菌水冲洗；B、再用0.1%次氯酸纳浸泡5分钟后用无菌水冲洗。
3.根据权利要求1所述的一种长瓣兜兰种子低温处理后的组培育苗方法，其特征在于：步骤（6）试管苗移栽的条件为：生根培养60-90天后，再炼苗7-15天，用0.1%甲基托布津浸泡15钟后移栽，室温度10-28℃，湿度80%-89%，遮阴60-70%。
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CN112931202A (zh) * 2021-02-04 2021-06-11 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 一种德氏兜兰种子非共生萌发的方法

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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112931202A (zh) * 2021-02-04 2021-06-11 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 一种德氏兜兰种子非共生萌发的方法
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