CN107937463A - 用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法 - Google Patents

用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法 Download PDF

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    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
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Abstract

本发明涉及一种用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，属于生化技术领域。该方法包括以下步骤：1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油；2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解；3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解；4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。该方法可提高豆粕的经济价值，同时制得的谷氨酰胺结合肽的得率高，产品品质好。

Description

用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法
技术领域
本发明涉及生化技术领域，具有涉及一种用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法。
背景技术
豆粕是大豆提取豆油后得到的一种副产品，又称“大豆粕”。豆粕是棉籽粕、花生粕、菜籽粕等常见动植物油粕饲料产品中产量最大，用途最广的一种。作为一种高蛋白质物料，豆粕是制作牲畜与家禽饲料的主要原料，还可以用于制作糕点食品，健康食品以及化妆品和抗菌素原料。目前，绝大部分的豆粕被用于家禽和猪的饲养，被当成饲料的一部分组分而直接被食用。这样，不可避免的降低了豆粕的经济价值。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，可提高豆粕的经济价值，同时制得的谷氨酰胺结合肽的得率高，产品品质好。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，包括以下步骤：
1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油；
2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解；
3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解；
4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。
上述技术方案中：
步骤1)中，优选的，所述石油醚的用量为豆粕重量的1～10倍，浸泡时间为1～10h。此外，所述豆粕用石油醚浸泡后，还经过过滤然后将滤渣用清水冲洗5～10min的过程。
步骤2)中，所述酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，木瓜蛋白酶的添加量为底料重量的1％～5％，底料在溶液中的质量浓度为3％～6％；酶解的温度为50～60℃，酶解的时间为2～4h，酶解的pH为8～10。
步骤3)中，所述酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，胃蛋白酶的添加量为底料重量的0.5％～3.5％，底料在溶液中的质量浓度为3％～6％；酶解的温度为45～55℃，酶解的时间为1～3h，酶解的pH为1～4。
进一步的，用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解后的酶解液还经过灭活的过程，所述灭活的方法为加热至90～100℃并保持5～15min。
步骤4)中，优选的，所述活性炭的加入量为所加入滤液重量的1％～10％。优选的，所述真空冷冻干燥的温度为-20℃～-50℃，真空度为-0.07MPa～-0.09MPa。
本发明的有益效果为：
1)将豆粕经二次酶解反应来制备谷氨酰胺结合肽，优于单种酶解生产的常规方法，获得活性肽制品的得率可在62％以上，肽中谷氨酰胺的含量可在35％以上，得率高，产品品质高；
2)通过该方法，将豆粕加工成经济价值更高的谷氨酰胺结合肽，提高了经济效益；而且所用设备简单，步骤简单易控，投入成本低，可大量推广使用。
具体实施方式
下面结合具体实施例用于说明和解释本发明。
实施例1
用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，包括以下步骤：
1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油，过滤，滤渣用清水冲洗5min；
2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解，灭活；
3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解，灭活；
4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。
步骤1)中，所述石油醚的用量为豆粕重量的5倍，浸泡时间为10h。
步骤2)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，木瓜蛋白酶的添加量为底料重量的1％，底料在溶液中的质量浓度为4％；酶解的温度为60℃，酶解的时间为2h，酶解的pH为9。
步骤3)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，胃蛋白酶的添加量为底料重量的3.5％，底料在溶液中的质量浓度为3％；酶解的温度为48℃，酶解的时间为3h，酶解的pH为1。
步骤2)和步骤3)中，灭活的方法为加热至95℃并保持15min。
步骤4)中，活性炭的加入量为所加入滤液重量的1％。真空冷冻干燥的温度为-30℃，真空度为-0.09MPa。
最终获得的产品的得率为63.31％，肽中谷氨酰胺的含量为36.21％。
实施例2
用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，包括以下步骤：
1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油，过滤，滤渣用清水冲洗8min；
2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解，灭活；
3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解，灭活；
4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。
步骤1)中，所述石油醚的用量为豆粕重量的10倍，浸泡时间为1h。
步骤2)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，木瓜蛋白酶的添加量为底料重量的2.5％，底料在溶液中的质量浓度为6％；酶解的温度为50℃，酶解的时间为3.5h，酶解的pH为10。
步骤3)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，胃蛋白酶的添加量为底料重量的0.5％，底料在溶液中的质量浓度为4.6％；酶解的温度为55℃，酶解的时间为1h，酶解的pH为2。
步骤2)和步骤3)中，灭活的方法为加热至100℃并保持5min。
步骤4)中，活性炭的加入量为所加入滤液重量的5％。真空冷冻干燥的温度为-50℃，真空度为-0.07MPaMPa。
最终获得的产品的得率为62.11％，肽中谷氨酰胺的含量为34.21％。
实施例3
用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，包括以下步骤：
1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油，过滤，滤渣用清水冲洗10min；
2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解，灭活；
3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解，灭活；
4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。
步骤1)中，所述石油醚的用量为豆粕重量的1倍，浸泡时间为5h。
步骤2)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，木瓜蛋白酶的添加量为底料重量的5％，底料在溶液中的质量浓度为3％；酶解的温度为55℃，酶解的时间为4h，酶解的pH为8。
步骤3)中，酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，胃蛋白酶的添加量为底料重量的1.5％，底料在溶液中的质量浓度为6％；酶解的温度为45℃，酶解的时间为2h，酶解的pH为4。
步骤2)和步骤3)中，灭活的方法为加热至90℃并保持10min。
步骤4)中，活性炭的加入量为所加入滤液重量的10％。真空冷冻干燥的温度为-20℃，真空度为-0.08MPa。
最终获得的产品的得率为63.11％，肽中谷氨酰胺的含量为35.15％。

Claims (8)

1.用豆粕制取谷氨酰胺结合肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将豆粕原料用石油醚浸泡去除残油；
2)将去除残油后的豆粕，在碱性溶液中用木瓜蛋白酶进行酶解；
3)将带豆粕的酶解液调至酸性，用胃蛋白酶进行酶解；
4)将胃蛋白酶酶解后的酶解液过滤，滤液用活性炭脱色，过滤，滤液真空冷冻干燥得到产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述石油醚的用量为豆粕重量的1～10倍，浸泡时间为1～10h。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述豆粕用石油醚浸泡后，还经过过滤然后将滤渣用清水冲洗5～10min的过程。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，木瓜蛋白酶的添加量为底料重量的1％～5％，底料在溶液中的质量浓度为3％～6％；酶解的温度为50～60℃，酶解的时间为2～4h，酶解的pH为8～10。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述酶解的条件为：以去除残油后的豆粕为底料，胃蛋白酶的添加量为底料重量的0.5％～3.5％，底料在溶液中的质量浓度为3％～6％；酶解的温度为45～55℃，酶解的时间为1～3h，酶解的pH为1～4。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解后的酶解液还经过灭活的过程，所述灭活的方法为加热至90～100℃并保持5～15min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述活性炭的加入量为所加入滤液重量的1％～10％。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述真空冷冻干燥的温度为-20℃～-50℃，真空度为-0.07MPa～-0.09MPa。
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