CN107892915A - 一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法及其应用方法 - Google Patents

一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法及其应用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，包括以下步骤：（1）将1g吖啶黄溶于48‑52ml水中，超声后制得吖啶黄水溶液；（2）将步骤（1）所制得的吖啶黄水溶液在180‑210℃下反应后冷却至室温，制得碳纳米点水溶液；（3）将步骤（2）中所制得的碳纳米点水溶液离心除去杂质，制得提纯碳纳米点水溶液；（4）将步骤（3）中所制得的提纯碳纳米点水溶液转移至渗析容器中渗析，收集渗析液；（5）将步骤（4）中所制得的渗析液旋蒸至干，收集固体真空干燥，制得纳米碳成品；本发明中提供的碳纳米点的制备方法，原料易得，步骤少，方法简单便于操作。本发明还同时提供碳纳米点在检测腺嘌呤浓度时的应用方法。

Description

一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法及其应用 方法
技术领域
本发明涉及一种碳纳米点，具体涉及一种能有效检测腺嘌呤浓度的碳纳米点。
背景技术
腺嘌呤是构成DNA的重要碱基。腺嘌呤作为腺苷的代谢产物，以ATP的形式参与代谢途径中细胞内能量转移，对冠状动脉的血液循环和脑循环有重要影响，能控制血液流动，防止心律失常，抑制神经递质的释放。腺嘌呤浓度的异常可以作为诊断艾滋病和心肌梗塞等疾病的重要指标。因此，高效、灵敏地检测腺嘌呤浓度具有非常重要的意义。
腺嘌呤的测定方法有共振光散射法、电化学法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等, 这些方法大多数需要对样品进行预处理，或所需仪器试剂昂贵、运行时间长，灵敏度不高。而荧光方法具有操作简便、检测灵敏度高等优点，但是传统的基于有机小分子的荧光染料存在易分解和抗漂白性差等缺点。
因此需要一种能有效检测腺嘌呤浓度的小分子，能应用与荧光方法以检测腺嘌呤浓度。
发明内容
本发明目的是：提供一种能有效检测腺嘌呤浓度的碳纳米点。
本发明的技术方案是：一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，包括以下步骤：
（1）将1g吖啶黄溶于48-52ml水中，超声后制得吖啶黄水溶液；
（2）将步骤（1）所制得的吖啶黄水溶液在180-210℃下反应后冷却至室温，制得碳纳米点水溶液；
（3）将步骤（2）中所制得的碳纳米点水溶液离心除去杂质，制得提纯碳纳米点水溶液；
（4）将步骤（3）中所制得的提纯碳纳米点水溶液转移至渗析容器中渗析，收集渗析液；
（5）将步骤（4）中所制得的渗析液旋蒸至干，收集固体真空干燥，制得纳米碳成品。
进一步的：所述步骤（1）中超声的时间为15-20min。
进一步的：所述步骤（2）中反应的时间为11.5-12.5小时。
进一步的：所述步骤（3）中离心转速为10000rpm,离心时间为15-20min。
进一步的：所述步骤（4）中所述渗析容器为渗析袋，且所述渗析袋为1000分子量渗析袋，所述渗析的时间为45-50h。
进一步的：所述步骤（5）中旋蒸的温度为100℃，压力为90.01MPa,旋蒸时间为0.1h。
本发明还提供了一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的应用方法，包括以下步骤：
步骤a：碳纳米点溶液的配置；
步骤b：腺嘌呤标准溶液的配置；
步骤c：从步骤a中所制得的碳纳米点溶液中分出取出1/5，逐次加入等体积的腺嘌呤标准溶液，分别测量溶液的荧光强度，得到荧光曲线；
步骤d：根据步骤c中所得的荧光曲线计算腺嘌呤浓度。
进一步的：所述步骤a中纳米碳点溶液浓度为0.1mg/mL，所述步骤b中腺嘌呤标准溶液浓度为500ug/mL。
进一步的：所述步骤c中所述碳纳米点溶液与逐次加入的等体积的腺嘌呤标准溶液的体积比为20:1。
本发明的优点是：
1．本发明中提供的碳纳米点的制备方法，原料易得，步骤少，方法简单便于操作。
本发明中提供的碳纳米点检测腺嘌呤浓度的方法，兼具了荧光检测法的高效灵敏以及纳米点的稳定性好、发光强度大等优点，在腺嘌呤检测领域具有广阔的应用前景。
附图说明
下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：
图1为荧光曲线图；
图2为所制得的碳纳米点的TEM图；
图3为碳纳米点的吸收光谱图；
图4为碳纳米点的激发光谱；
具体实施方式。
实施例：一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，包括以下步骤：
（1）将1g吖啶黄溶于50ml水中，超声15min后制得吖啶黄水溶液；
（2）将步骤（1）所制得的吖啶黄水溶液在200℃下反应12h后冷却至室温，制得碳纳米点水溶液；
（3）将步骤（2）中所制得的碳纳米点水溶液在10000rpm下离心15min，离心除去杂质，制得提纯碳纳米点水溶液；
（4）将步骤（3）中所制得的提纯碳纳米点水溶液转移至1000分子量渗析袋中渗析48h，收集渗析液；
（5）将步骤（4）中所制得的渗析液100℃， 90.01MPa下旋蒸0.1h，旋蒸至干，收集固体真空干燥，制得纳米碳成品。
如图2所示，所制得的纳米碳成品从透射电子显微镜（TEM）分析可以看出，碳纳米点的粒径分布为4-6 nm，如图3所示，从吸收光谱（如图2）可以看出，碳纳米点在350-580nm范围内具有全吸收性质，在460nm处有一个明显的吸收峰。如图4所示，该碳纳米点的最佳激发波长为470nm，最大发射波长在510nm处。
一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点检测腺嘌呤浓度的方法，包括以下步骤：
步骤a：10mL、0.1mg/mL碳纳米点溶液的配置；
步骤b：10mL、500ug/mL腺嘌呤标准溶液的配置；
步骤c：从步骤a中所制得的碳纳米点溶液中分出取出1/5即2mL，逐次加入100uL的腺嘌呤标准溶液，分别测量溶液的荧光强度，得到荧光曲线；
步骤d：根据步骤c中所得的荧光曲线计算腺嘌呤浓度的检测限，由图1可得随着腺嘌呤浓度的增加，碳纳米点溶液的荧光强度逐渐增强，直至在加入25份100uL的腺嘌呤之后，溶液的荧光强度趋于稳定，同时计算所得该碳纳米点对腺嘌呤浓度的检测限为2×10-6 g/L。
当然上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明主要技术方案的精神实质所做的修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）将1g吖啶黄溶于48-52ml水中，超声后制得吖啶黄水溶液；
（2）将步骤（1）所制得的吖啶黄水溶液在180-210℃下反应后冷却至室温，制得碳纳米点水溶液；
（3）将步骤（2）中所制得的碳纳米点水溶液离心除去杂质，制得提纯碳纳米点水溶液；
（4）将步骤（3）中所制得的提纯碳纳米点水溶液转移至渗析容器中渗析，收集渗析液；
（5）将步骤（4）中所制得的渗析液旋蒸至干，收集固体真空干燥，制得纳米碳成品。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中超声的时间为15-20min。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中反应的时间为11.5-12.5小时。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中离心转速为10000rpm,离心时间为15-20min。
5.根据权利要求1所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中所述渗析容器为渗析袋，且所述渗析袋为1000分子量渗析袋，所述渗析的时间为45-50h。
6.根据权利要求1所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中旋蒸的温度为100℃，压力为90.01MPa,旋蒸时间为0.1h。
7.如权利要求1-6中任意一项所述碳纳米点在腺嘌呤浓度检测中的应用方法，其特征在于：
包括以下步骤：
步骤a：碳纳米点溶液的配置；
步骤b：腺嘌呤标准溶液的配置；
步骤c：从步骤a中所制得的碳纳米点溶液中分出取出1/5，逐次加入等体积的腺嘌呤标准溶液，分别测量溶液的荧光强度，得到荧光曲线；
步骤d：根据步骤c中所得的荧光曲线计算腺嘌呤浓度。
8.根据权利要求7所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点检测腺嘌呤浓度的方法，其特征在于：所述步骤a中纳米碳点溶液浓度为0.1mg/mL，所述步骤b中腺嘌呤标准溶液浓度为500ug/mL。
9.根据根据权利要求7所述的一种用于检测腺嘌呤浓度的碳纳米点检测腺嘌呤浓度的方法，其特征在于：所述步骤c中所述碳纳米点溶液与逐次加入的等体积的腺嘌呤标准溶液的体积比为20:1。
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