CN107860784A - 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法 - Google Patents

一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107860784A
CN107860784A CN201711170036.4A CN201711170036A CN107860784A CN 107860784 A CN107860784 A CN 107860784A CN 201711170036 A CN201711170036 A CN 201711170036A CN 107860784 A CN107860784 A CN 107860784A
Authority
CN
China
Prior art keywords
henan
china
rhiizoma dioscoreae
freeze
dioscorea opposita
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201711170036.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107860784B (zh
Inventor
吴绪金
安莉
吴家锴
马婧玮
汪红
张军锋
李通
周娟
李萌
马欢
杨国华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henan LianJian pharmaceutical analysis Co.,Ltd.
Original Assignee
Institute Of Agricultural Quality Standards And Testing Technology Henan Academy Of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute Of Agricultural Quality Standards And Testing Technology Henan Academy Of Agricultural Sciences filed Critical Institute Of Agricultural Quality Standards And Testing Technology Henan Academy Of Agricultural Sciences
Priority to CN201711170036.4A priority Critical patent/CN107860784B/zh
Publication of CN107860784A publication Critical patent/CN107860784A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107860784B publication Critical patent/CN107860784B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N24/00—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects
    • G01N24/08—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects by using nuclear magnetic resonance

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • High Energy & Nuclear Physics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提出了一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，建立了铁棍山药样本的制备，营养成分的提取、测定、识别，营养成分的分布解析。本发明样品预处理仅为500‑700 mg山药冻干粉，就可以获得提取物的结构信息，具有较好的重现性，建立了1H‑NMR指纹图谱，利用偏最小二乘法判别分析OPLS‑DA对铁棍山药带皮组和去皮组进行分析，最终确定怀山药营养成分在怀山药肉或是怀山药皮中的分布情况。本发明的测定和识别采用核磁共振技术，具有灵敏性、无损性以及能够根据特征峰定性的探测代谢物成分等优点。

Description

一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法
技术领域
本发明涉及植物代谢组学领域，特别是指一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法。
背景技术
代谢组学(metabonomics或metabolomics)是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想，对生物体内所有代谢物进行定量分析，并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式，是系统生物学的组成部分。其研究对象大都是相对分子质量1000以内的小分子物质。先进分析检测技术结合模式识别和专家系统等计算分析方法是代谢组学研究的基本方法。代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后新近发展起来的一门学科，是系统生物学的重要组成部分。之后得到迅速发展并渗透到多项领域，比如疾病诊断、医药研制开发、营养食品科学、毒理学、环境学，植物学等与人类健康护理密切相关的领域。其样品主要是动植物的细胞和组织的提取液。主要技术手段是核磁共振（NMR），质谱（MS），色谱（HPLC，GC）及色谱质谱联用技术。核磁共振（NMR）由于其灵敏性、无损性以及能够根据特征峰定性的探测代谢物成分等优点，已发展为代谢组学中最常用的化学分析检测技术。核磁测定样品是非破坏性的，且只要很少的样品预处理，就可以获得提取物的结构信息，具有较好的重现性。
怀山药（Dioscoreaop posita Thunb）是薯蓣科(Dioscorea L.)薯蓣属植物，药食兼优，为我国著名的“四大怀药”之一。主产于河南温县、武陟、博爱、沁阳等地，在我国有着悠久的药用历史和广泛的栽培，为河南道地药材，质量居全国之首，以其质坚、粉足、色白而闻名海内外。怀山药性平、味甘，据《神农本草经》记载其具有“主治伤中、补虚赢、除寒邪热、补中益气力，长肌肉、久服耳目聪明、轻身不饥、延年”之功效，怀山药营养丰富，含有多种活性成分。目前，怀山药中化学成分的研究多用传统的HPLC、GC-MS等色谱方法，在检测过程中均需要一个分离过程，一些微量成分可能会损失，且研究者仅仅是测定怀山药中的化学成分，对于化学成分是分布在去皮怀山药中还是在怀山药皮中没有进行分析。张敏等（食品工程，2014年第4期）报道了基于NMR代谢组学的技术，分别对生怀山药饮片、麸炒怀山药及食用怀山药的化学成分进行研究，仅检测出30多种化合物，没有对怀山药中的营养成分分布进行分析。
发明内容
本发明提出一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，本发明创新性运用基于1H-NMR的代谢组学技术，首次检测了怀山药去皮组和带皮组中的化学成分，建立了1H-NMR指纹图谱，利用偏最小二乘法判别分析OPLS-DA对铁棍怀山药带皮组和去皮组进行分析，最终确定怀山药营养成分在怀山药肉或是怀山药皮中的分布情况。对道地怀山药的代谢网络分析及调控、品种鉴定、道地真假辨别、精准膳食等提供基础数据和科学依据。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，包括如下步骤：
S1怀山药样本的制备：将怀山药样品清洗干净、晾干，同一根怀山药纵向分为两部分，怀山药带皮组和怀山药去皮组，将两组分别切成薄片，薄片经冷冻干燥后，粉碎得怀山药带皮组冻干粉和怀山药去皮组冻干粉，以待后续分析；
S2怀山药营养成分的提取：分别称取怀山药带皮组冻干粉和怀山药去皮组冻干粉，置于不同的离心管中，加入甲醇溶液后，经震荡、提取、离心后，取上清Ⅰ经真空浓缩蒸干得到残渣，然后向残渣中加入氘代甲醇和0.2M的磷酸缓冲溶，混匀后置于离心管中使残渣充分溶解，离心后取上清Ⅱ待测定；
S3怀山药营养成分的测定：分别称取两组的上清Ⅱ置于测定仪器中，测定仪器采用布鲁克AV-600 MHz核磁共振光谱仪，5 mm多核宽带观测探头，观测频率为600.13 MHz，脉冲序列采用NOESYPR1D实现残余水峰的压制，观测频率为600.13 MHz；
S4怀山药营养成分的分析：利用偏最小二乘法判别分析OPLS-DA对怀山药带皮组和去皮组进行分析。
所述步骤S1中薄片的厚度为2-3mm，冷冻干燥处理为先将薄片置于-80℃环境中过夜冷冻，取出后迅速于冷冻干燥机内-90℃真空低温冷冻干燥72小时。
所述步骤S2的具体操作为分别称取500-700 mg怀山药带皮冻干粉和怀山药去皮冻干粉，置于不同的50 mL离心管中，加入8-15 mL 70 %的甲醇溶液，涡旋振荡器上震荡10-15 min，超声提取30-45 min，4500 rp/m离心8-10分钟，将两组的上清Ⅰ移至25 mL的圆底玻璃烧瓶中，真空浓缩蒸干得到两组残渣，分别向两组蒸干后的残渣中加入560-700 μL氘代甲醇和240-300 μL 0.2M的磷酸缓冲溶液，混匀后吸出并置于5 mL 离心管中，涡旋2-5min，超声2-5 min，使提取残渣充分溶解，以12000 rp/m离心10-15 m in，分别移取500-700μL两组的上清Ⅱ至5 mm的核磁管中以待测定。
所述步骤S2中磷酸缓冲溶液由纯重水配置，pH为7.4，含0.05%TSP内标。
所述步骤S2中每个怀山药冻干粉平行制备6-10份。
所述步骤S3中核磁共振光谱仪的实验参数为SW为20.0 ppm，O1P为6. 175 ppm，FIDRES为0.183 Hz，NS为64。
本技术方案能产生的有益效果：
1.本发明对怀山药的代谢网络分析及调控、品种鉴定、道地真假辨别、精准膳食等提供基础数据和科学依据。该法操作简单快速、结果准确可靠。
2.本发明建立了铁棍怀山药样本的制备，营养成分的提取、测定、识别，营养成分的分布解析。本发明样品预处理仅为500-700 mg怀山药冻干粉，就可以获得提取物的结构信息，具有较好的重现性。本发明的测定和识别采用核磁共振技术，具有灵敏性、无损性以及能够根据特征峰定性的探测代谢物成分等优点。
3.本发明建立了1H-NMR指纹图谱，利用偏最小二乘法判别（OPLS-DA）对铁棍怀山药带皮组和去皮组进行分析，最终确定怀山药营养成分在怀山药肉或是怀山药皮中的分布情况。
附图说明
图1为带皮铁棍怀山药典型600 M NMR指纹图谱。
图2为去皮铁棍怀山药和带皮铁棍怀山药中营养成分的识别。
图3为铁棍怀山药去皮组和带皮组营养成分的OPLS-DA得分图。
图4为铁棍怀山药去皮组和带皮组营养成分分布的的Bioplot图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种基于NMR代谢组学技术解析道地怀山药营养成分分布的方法，包括如下步骤：
S1铁棍怀山药样本的制备：将铁棍怀山药清洗干净，晾干，同一根铁棍怀山药纵向分为两部分，一部分带皮，另一部分将皮去除，去皮或带皮的铁棍怀山药用切药机切成2-3mm厚的薄片，把铁棍怀山药薄片置于-80℃环境中过夜冷冻，取出后迅速于冷冻干燥机内-90℃真空低温冷冻干燥72小时，待完全干燥后投入粉碎机中粉碎成铁棍怀山药冻干粉以待后续分析。
铁棍怀山药营养成分的提取：分别称取600 mg铁棍怀山药冻干粉（带皮或去皮），置于50 mL离心管中，加入10 mL 70 %的甲醇溶液，涡旋振荡器上震荡10 min，超声提取40min，4500 rp/m离心10分钟，将上清Ⅰ移至25 mL的圆底玻璃烧瓶中，真空浓缩蒸干得到残渣，在残渣中加入 700 μL氘代甲醇和 300 μL 0.2M的磷酸缓冲溶液（由纯重水配置，pH=7.4，含0.05%TSP内标），混匀后吸出并置于5 mL 离心管中，涡旋2 min，超声2 min，使提取的残渣充分溶解，以12000 rp/m离心10 min，移取600 μL上清Ⅱ至5 mm的核磁管中以待测定。每批铁棍怀山药样品平行制备8份。
铁棍怀山药营养成分的测定：测定仪器使用布鲁克AV-600 MHz核磁共振光谱仪，5mm多核宽带观测（BBO）探头，观测频率为600.13 MHz，脉冲序列采用 NOESYPR1D（RD-90˚-t1-90˚-tm-90˚-ACQUIRE）实现残余水峰的压制，观测频率 600.13 MHz，详细实验参数如下：SW为20.0 ppm，O1P为6. 175 ppm，FIDRES为0.183 Hz，NS为64。
铁棍怀山药营养成分的识别：如图2所示，其中1. 脱氢表雄酮，2. 异亮氨酸，3.缬氨酸，4. 苏氨酸，5. 丙氨酸，6. 亮氨酸，7. 精氨酸，8. 谷氨酸，9. γ-氨基丁酸，10.苹果酸，11. 柠檬酸，12. 天冬氨酸，13. 天冬酰胺，14. 牛磺酸，15.甲醇，16. 甘氨酸，17.1, 5- 柠檬酸双甲酯，18. 葡萄糖，19. β-果糖，20. 甘露糖，21. 葫芦巴碱，22. 半乳糖，23. 尿囊素，24. 蔗糖，25. 腺苷，26. 延胡索酸酯，27. 富马酸，28. 怀山药素，29. 环-（苯丙氨酸-酪氨酸），30. 酪氨酸，31. 组氨酸，32. 苯丙氨酸，33. 甲酸。
铁棍怀山药带皮和去皮时营养成分分布：利用偏最小二乘法判别分析OPLS-DA对铁棍怀山药带皮组和去皮组进行分析，如图3所示，可以看到去皮组和带皮组两组明显分开，去皮组全部聚集在OPLS-DA得分图左侧，而带皮组则全部聚集在右侧。
铁棍怀山药去皮组和带皮组的Bioplot图如图4显示，相对去皮组铁棍怀山药，带皮组铁棍怀山药中牛磺酸、甘氨酸、1,5-柠檬酸双甲酯、蔗糖、富马酸及怀山药素等营养成分含量较高，而脱氢表雄酮、异亮氨酸、 缬氨酸、苏氨酸、丙氨酸、 亮氨酸、精氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、苹果酸、柠檬酸、 天冬氨酸、葡萄糖、葫芦巴碱、尿囊素等营养成分含量则相对较低。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1怀山药样本的制备：将怀山药样品清洗干净、晾干，同一根怀山药纵向分为两部分，怀山药带皮组和怀山药去皮组，将两组分别切成薄片，薄片经冷冻干燥后，粉碎得怀山药带皮组冻干粉和怀山药去皮组冻干粉，以待后续分析；
S2怀山药营养成分的提取：分别称取怀山药带皮组冻干粉和怀山药去皮组冻干粉，置于不同的离心管中，加入甲醇溶液后，经震荡、提取、离心后，取上清Ⅰ经真空浓缩蒸干得到残渣，然后向残渣中加入氘代甲醇和0.2M的磷酸缓冲溶，混匀后置于离心管中使残渣充分溶解，离心后取上清Ⅱ待测定；
S3怀山药营养成分的测定：分别称取两组的上清Ⅱ置于测定仪器中，测定仪器采用布鲁克AV-600 MHz核磁共振光谱仪，5 mm多核宽带观测探头，观测频率为600.13 MHz，脉冲序列采用NOESYPR1D实现残余水峰的压制，观测频率为600.13 MHz；
S4怀山药营养成分的分析：利用偏最小二乘法判别分析OPLS-DA对怀山药带皮组和去皮组进行分析。
2.如权利要求1所述的基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于：所述步骤S1中薄片的厚度为2-3mm，冷冻干燥处理为先将薄片置于-80℃环境中过夜冷冻，取出后迅速于冷冻干燥机内-90℃真空低温冷冻干燥72小时。
3.如权利要求1所述的基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于：所述步骤S2的具体操作为分别称取500-700 mg怀山药带皮冻干粉和怀山药去皮冻干粉，置于不同的50 mL离心管中，加入8-15 mL 70 %的甲醇溶液，涡旋振荡器上震荡10-15min，超声提取30-45 min，4500 rp/m离心8-10分钟，将两组的上清Ⅰ移至25 mL的圆底玻璃烧瓶中，真空浓缩蒸干得到两组残渣，分别向两组蒸干后的残渣中加入 560-700 μL氘代甲醇和240-300 μL 0.2M的磷酸缓冲溶液，混匀后吸出并置于5 mL 离心管中，涡旋2-5 min，超声2-5 min，使提取残渣充分溶解，以12000 rp/m离心10-15 m in，分别移取500-700 μL两组的上清Ⅱ至5 mm的核磁管中以待测定。
4.如权利要求1所述的基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于：所述步骤S2中磷酸缓冲溶液由纯重水配置，pH为7.4，含0.05%TSP内标。
5.如权利要求1所述的基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于：所述步骤S2中每个怀山药冻干粉平行制备6-10份。
6.如权利要求1所述的基于NMR代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法，其特征在于：所述步骤S3中核磁共振光谱仪的实验参数为SW为20.0 ppm，O1P为6. 175 ppm，FIDRES为0.183 Hz，NS为64。
CN201711170036.4A 2017-11-22 2017-11-22 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法 Active CN107860784B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711170036.4A CN107860784B (zh) 2017-11-22 2017-11-22 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711170036.4A CN107860784B (zh) 2017-11-22 2017-11-22 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107860784A true CN107860784A (zh) 2018-03-30
CN107860784B CN107860784B (zh) 2020-02-07

Family

ID=61702515

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711170036.4A Active CN107860784B (zh) 2017-11-22 2017-11-22 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107860784B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108680596A (zh) * 2018-08-30 2018-10-19 河南省科学院高新技术研究中心 一种鉴别温县铁棍山药的方法
CN110596175A (zh) * 2019-09-29 2019-12-20 河南省人口和计划生育科学技术研究院 一种基于1hnmr代谢组学技术对比和区分温县铁棍山药和其他品种山药的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002012872A1 (en) * 2000-08-04 2002-02-14 High Value Horticulture Limited Quality control and standardisation of tobacco by means of nmr and pattern recognition
CN1625982A (zh) * 2003-12-09 2005-06-15 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种海参超细粉体的制备方法
CN101129146A (zh) * 2007-09-18 2008-02-27 华南农业大学 一种脱水果蔬的加工方法
JP2011085564A (ja) * 2008-11-25 2011-04-28 Mitsubishi Rayon Co Ltd 共重合体の定量方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002012872A1 (en) * 2000-08-04 2002-02-14 High Value Horticulture Limited Quality control and standardisation of tobacco by means of nmr and pattern recognition
CN1625982A (zh) * 2003-12-09 2005-06-15 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种海参超细粉体的制备方法
CN101129146A (zh) * 2007-09-18 2008-02-27 华南农业大学 一种脱水果蔬的加工方法
JP2011085564A (ja) * 2008-11-25 2011-04-28 Mitsubishi Rayon Co Ltd 共重合体の定量方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张敏等: "基于NMR代谢组学技术对山药化学成分的研究", 《食品工程》 *
董泰山 等: "《基于核磁共振的山药与麸炒山药化学成分比较》", 《中国现代中药》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108680596A (zh) * 2018-08-30 2018-10-19 河南省科学院高新技术研究中心 一种鉴别温县铁棍山药的方法
CN110596175A (zh) * 2019-09-29 2019-12-20 河南省人口和计划生育科学技术研究院 一种基于1hnmr代谢组学技术对比和区分温县铁棍山药和其他品种山药的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107860784B (zh) 2020-02-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Novoa-Carballal et al. NMR methods for unravelling the spectra of complex mixtures
EP2676671B1 (en) Method for preparing pharmaceutical composition for enhancing immunity and pharmaceutical composition prepared according to the method
Gurfinkel et al. Determination of saponins in legumes by direct densitometry
Zhang et al. Phenolic profiles and cellular antioxidant activity of longan pulp of 24 representative Chinese cultivars
Zhang et al. Potential use of low-field nuclear magnetic resonance to determine the drying characteristics and quality of Arctium lappa L. in hot-blast air
CN104181186A (zh) 一种黄芪注射液1h- nmr指纹图谱的构建方法
CN107860784A (zh) 一种基于nmr代谢组学技术解析怀山药营养成分分布的方法
CN110498785A (zh) 一种黑枸杞花青素及其制备方法
CN104101674B (zh) 一种筛选茵陈蒿汤药效物质基础的方法
CN106974943A (zh) 一种槐耳醇提物的用途及制备方法
CN109738552A (zh) 一种筛选山茱萸降糖活性成分的方法
WO2011082148A1 (en) Extract of toona sinensis from supercritical fluid extraction for treating diabetes and metabolic diseases, the preparation method and the use thereof
CN113777183B (zh) 女贞子药材及其炮制品的特征图谱构建方法、多指标成分含量检测方法
CN103920012A (zh) 石斛纯微粉含片及其制备方法
CN117214340B (zh) 一种包含花椒的中药组合物的质量控制方法及其应用
Sha et al. Comparative chemical characters of Pseudostellaria heterophylla from geographical origins of China
AU2020102474A4 (en) Method for accurately determining moisture conversion point for hot air-microwave drying process of edible fungus based on low-field nuclear magnetic resonance
CN102798672A (zh) 一种检测血中gcdcs和gcdca的试剂盒
CN106236865B (zh) 一种酒黄连的炮制方法
CN110638990B (zh) 一种桂枝芍药知母处方制剂提取物的提取工艺
CN107884431B (zh) 基于1h-nmr的代谢组学鉴别鲜鹿茸与热炸茸的方法
CN111067094A (zh) 一种抑制肝糖异生的非苦味苦瓜三萜组合物及其应用
CN104181269A (zh) 基于山奈酚3-O-β-D-葡萄糖-(2→1)-β-D-葡萄糖苷鉴别蜂花粉的方法
JP2011037800A (ja) アピオス花を用いた血糖値上昇抑制物質および糖尿病予防用食品素材
CN110057958A (zh) 通过检测当归药材中具有钙拮抗功效的有效成分含量评价质量等级的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20201228

Address after: 463000 3rd floor, No.2 standard workshop, Southeast of the intersection of Xingye Avenue and Ruhe Avenue, Zhumadian City, Henan Province

Patentee after: Henan LianJian pharmaceutical analysis Co.,Ltd.

Address before: No.116 Huayuan Road, Jinshui District, Zhengzhou City, Henan Province

Patentee before: INSTITUTE OF AGRICULTURAL QUALITY STANDARDS AND TESTING TECHNOLOGY, HENAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES