CN107858394B - 乳清蛋白水解产物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出了制备乳清蛋白水解产物的方法，该方法包括：利用肽酶对乳清蛋白进行消化处理，以便得到所述乳清蛋白水解产物；其中，所述肽酶是以肽酶的水溶液的形式提供的，浓度为0.01％～1.5％；所述消化处理是在温度为35℃～60℃的条件下进行2～10h。该方法制备乳清蛋白水解产物的效率更高，能降低乳清蛋白的致敏性，提高乳清蛋白水解产物中多肽及氨基酸的含量，得到的乳清蛋白水解产物可以达到快速吸收、缓解运动疲劳等功能作用，且没有苦味肽产生，口感更佳。

Description

乳清蛋白水解产物的制备方法

技术领域

本发明涉及食品领域，具体地，本发明涉及制备乳清蛋白水解产物的方法。

背景技术

乳清蛋白是从牛奶中提取的一种蛋白质，具有营养价值高、易消化吸收、含有多种活性成分等特点，被称为蛋白之王，是公认的人体优质蛋白质补充剂之一。乳清蛋白属于优质的完全蛋白质，服用方便，吸引利用率高，能减少肠胃负担，是人体补充蛋白质的首选。

乳清蛋白是指pH为4.6沉淀酪蛋白后乳清中剩余蛋白质的总称，约占牛乳总蛋白的20％，主要有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白。乳清蛋白以其纯度高、吸收率高、氨基酸组成最合理等诸多优势被推为“蛋白之王”。乳清蛋白不但容易消化，而且还具有高生物价、高效率化、高蛋白质功效比和高利用率，是蛋白质中的精品等特点，是公认的人体优质蛋白质补充剂之一。

乳清蛋白适度水解，可以降低分子量，产生功能性的多肽和少量游离氨基酸，有利于消化和吸收，降低婴幼儿的致敏性。

然而，目前乳清蛋白水解的方法仍有待开发和改进。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

发明人发现，目前乳清蛋白水解的方法存在着效率较低，水解不充分，人体不易吸收且容易产生苦味肽等问题。基于上述问题的发现，发明人开发了制备乳清蛋白水解产物的方法，该方法制备乳清蛋白水解产物的效率更高，能降低乳清蛋白的致敏性，提高乳清蛋白水解产物中多肽及氨基酸的含量，得到的乳清蛋白水解产物可以达到快速吸收、缓解运动疲劳等功能作用，且没有苦味肽，口感更佳。

如无特殊说明，本发明中的百分数均表示质量体积比，单位为g/mL。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种制备乳清蛋白水解产物的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括利用肽酶对乳清蛋白进行消化处理，以便得到所述乳清蛋白水解产物，其中，所述肽酶是以肽酶的水溶液的形式提供的，浓度为0.01％～1.5％，所述消化处理是在温度为35℃～60℃的条件下进行2～10h。发明人发现，根据肽酶的不同，选择配置成不同的溶度，不同的肽酶在水溶液中浓度为0.01％～1.5％时能最大程度活化，并且在温度为35℃～60℃的条件下对乳清蛋白进行消化进行2～10h，能最大程度保证肽酶的活性的同时最大程度地消化乳清蛋白，如果消化处理时间小于2h，则对乳清蛋白的消化会不彻底，如果消化处理时间大于10h，则肽酶会失活的同时也会降低肽酶的特异性消化，产生多种非特异性酶切片段。根据本发明实施例的方法制备乳清蛋白水解产物的效率更高，能降低乳清蛋白的致敏性，提高乳清蛋白水解产物中多肽及氨基酸的含量，得到的乳清蛋白水解产物可以达到快速吸收、缓解运动疲劳等功能作用，且没有苦味肽产生，口感更佳。

根据本发明的实施例，上述方法进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述肽酶包括选自内肽酶以及任选的外肽酶。发明人发现，肽酶能特异性地切割乳清蛋白，内肽酶水解蛋白质中间部分的肽键，外肽酶则自蛋白质的氨基或羧基末端逐步降解氨基酸残基。

根据本发明的实施例，所述肽酶在消化体系中的浓度为0.01％～0.1％。发明人发现，根据肽酶的不同，调整加入肽酶的水溶液的体积不同，加入肽酶在消化体系的浓度为0.01％～0.1％时，肽酶能最大限度地消化乳清蛋白，加入肽酶溶液太少时，乳清蛋白消化不完全，而加入肽酶溶液太多时，会产生非特异性酶切片段，苦味肽增多。酶是具有生物活性的物质，控制其浓度及温度可以影响水解速度及水解产物。

根据本发明的实施例，所述乳清蛋白来源于选自乳清蛋白粉、浓缩乳清蛋白以及脱盐乳清蛋白的至少二种。

根据本发明的实施例，所述乳清蛋白来源于乳清蛋白粉WPC30和乳清蛋白粉WPC80，所述WPC30和WPC80的质量比为3:1。其中，乳清蛋白粉WPC30是指蛋白含量为30％的浓缩乳清蛋白粉，乳清蛋白粉WPC80是指蛋白含量为80％的浓缩乳清蛋白粉。发明人发现，这两种来源的乳清蛋白粉以质量比为3:1混合，其水解速度快，水解产物浓度高。

根据本发明的实施例，所述乳清蛋白来源于脱盐乳清和浓缩乳清蛋白，所述脱盐乳清和浓缩乳清蛋白的质量比为1:6。发明人发现，这两种来源的乳清蛋白氨基酸比例更为接近人体需求，以质量比为1:6混合，会提高水解率。

根据本发明的实施例，所述肽酶进一步包括活化剂或辅助因子。发明人发现，根据肽酶的不同选择在肽酶溶液中加入活化剂或者辅助因子能将乳清蛋白溶液pH调整到肽酶的最适pH范围内，能提高肽酶的活性。

根据本发明的实施例，所述活化剂或辅助因子包括选自氯化钙、磷酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸铁钠的至少一种。发明人发现，根据肽酶的不同选择在肽酶溶液中加入氯化钙、磷酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸铁钠的至少一种的活化剂或辅助因子能将乳清蛋白溶液pH调整到肽酶的最适pH范围内，能提高肽酶的活性。

根据本发明的实施例，在进行所述消化处理之前，进一步包括如下步骤：将乳清蛋白进行溶解处理，所述溶解处理是在温度为50℃条件下进行的，以便得到水合乳清蛋白溶液；对水合乳清蛋白溶液进行杀菌处理；以及将经过杀菌处理的水合乳清蛋白溶液的pH调节至5.0～9.0。发明人发现，乳清蛋白在温度为50℃条件下能很好地溶解于水中。

根据本发明的实施例，所述杀菌处理是在温度为105℃～115℃的条件下进行1～2min的。发明人发现，在温度为105℃～115℃的条件下进行1～2min的杀菌能有效杀死微生物及酶，保证达到上述消化处理要求的同时可以使乳清蛋白展开其空间构型，使原来折叠部分的肽链松散，容易受肽酶的作用，上述的消化处理更彻底。

根据本发明的实施例，所述pH调节剂包括选自柠檬酸、乳酸、磷酸以及磷酸盐的至少之一。发明人发现，根据肽酶的不同选择在肽酶溶液中加入柠檬酸、乳酸、磷酸以及磷酸盐的至少之一的pH调节剂能将乳清蛋白溶液pH调整到肽酶的最适pH范围内，提高肽酶的活性。

根据本发明的实施例，所述消化处理是在温度为45℃～50℃的条件下进行6～8h。发明人发现，根据肽酶的不同选择在不同的温度下消化不同的时间，但是不同肽酶在温度为45℃～50℃的条件下进行6～8h，能最大程度保证肽酶的活性的同时最大程度地消化乳清蛋白，提高水解产物的产出率，且不会产生非特异性酶片段及苦味肽。

根据本发明的实施例，所述消化处理之后进一步包括酶失活处理。

根据本发明的实施例，所述酶失活处理是在温度为85℃～95℃的条件下进行5～10min。发明人发现，在温度为85℃～95℃的条件下进行5～10min的酶失活处理，能使得肽酶失活，同时不会破坏乳清蛋白水解产物的结构。

根据本发明的实施例，所述酶失活处理是在温度为95℃的条件下进行5min。发明人发现，在温度为95℃的条件下进行5min的酶失活处理，能使得肽酶失活，同时不会破坏乳清蛋白水解产物的结构。

根据本发明的实施例，所述酶失活处理是在温度为85℃的条件下进行10min。发明人发现，在温度为85℃的条件下进行10min的酶失活处理，能使得肽酶失活，同时不会破坏乳清蛋白水解产物的结构。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备乳清蛋白水解产物的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：1)乳清蛋白粉、浓缩乳清蛋白以及脱盐乳清蛋白的至少二种按比例进行混合，得到乳清混合粉，2)加热纯净水或去离子水至50～60℃，在搅拌状态下加入乳清混合粉，搅拌至完全溶解得到混合液，保持搅拌的时间为30min，之后停止搅拌，静置至少30min，得到乳清液，3)将乳清液进行适当杀菌处理，4)用pH调节剂调节经过杀菌处理的乳清液的pH至5.0～9.0，5)用纯净水或去离子水溶解粉状肽酶配置成溶液，得到肽酶溶液，所述肽酶溶液的浓度为0.01％～1.5％，优选地，所述肽酶溶液的浓度为0.40％，6)往步骤4)中得到的乳清液加入肽酶溶液，慢速搅拌，保持在35℃～60℃温度下2～10h，进行酶解，优选地，所述酶解是在温度为45℃～50℃的条件下进行6～8h的，7)将酶解结束后的溶液在温度为85℃～105℃的条件下进行1～10min的酶失活处理，其中，所述杀菌处理是在温度为105℃～115℃的条件下进行1～2min的，所述肽酶进一步包括选自内肽酶以及任选的外肽酶，所述肽酶进一步包括活化剂或辅助因子，所述活化剂或辅助因子包括选自氯化钙、磷酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸铁钠的至少一种，所述pH调节剂包括选自柠檬酸、乳酸、磷酸以及磷酸盐的至少之一，所述酶失活处理在温度为95℃的条件下进行5min。根据本发明实施例的方法制备乳清蛋白水解产物的效率更高，能降低乳清蛋白的致敏性，提高乳清蛋白水解产物中多肽及氨基酸的含量，得到的乳清蛋白水解产物可以达到快速吸收、缓解运动疲劳等功能作用，且没有苦味肽产生，口感更佳。

根据本发明的实施例，上述方法进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述酶失活处理是在温度为85℃的条件下进行10min。发明人发现，在温度为85℃的条件下进行10min的酶失活处理，能使得肽酶失活，同时不会破坏乳清蛋白水解产物的结构。

在本发明的第三方面，本发明提出了一种乳清蛋白水解产物。根据本发明的实施例，所述乳清蛋白水解产物包括前面所述的方法制备得到的水解产物。根据本发明的实施例的乳清蛋白水解产物，能被人体快速吸收，具有缓解运动疲劳等运动后不适感觉的作用，且没有苦味肽，口感更佳。

根据本发明的实施例，上述乳清蛋白水解产物进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述的乳清蛋白水解产物包括乳清蛋白，以及乳清蛋白水解后的多肽、氨基酸等。根据本发明的实施例的乳清蛋白水解产物，能被人体快速吸收，具有缓解运动疲劳等运动后不适感觉的作用，且没有苦味肽，口感更佳。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

实施例1

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3:1进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5)将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.05％中性蛋白酶溶液200ml，慢速搅拌，保持温度35℃～40℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

实施例2

1)将脱盐乳清粉与浓缩乳清蛋白按照1:6的比例进行混合，二者的总体质量为150g；

2)纯净水780mL升温到55℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌15min，之后静置40min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为115℃的条件下进行1min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入0.5g的磷酸盐调整pH到8.5。

5)将米曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为1.3％，添加0.2g乙二胺四乙酸铁钠作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的1.3％中性蛋白酶溶液60mL，慢速搅拌，保持温度55℃～60℃的条件下消化3～4h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行3min的酶失活处理。

对比实施例1(所用的酶为真菌蛋白酶)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照3:1的比例进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水700mL升温到55℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为110℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入4g的磷酸盐调整pH到7.5。

5)将真菌蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.5％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.5％真菌蛋白酶溶液100mL，慢速搅拌，保持温度55～60℃的条件下消化2～4h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行3min的酶失活处理。

对比实施例2(所用的酶为木瓜中性蛋白酶)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照3:1的比例进行混合，二者的总体质量为150g；

2)纯净水700mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入0.2g的磷酸盐调整pH到5.5。

5)将木瓜中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05％，添加0.1g氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.05％中性蛋白酶溶液100mL，慢速搅拌，保持温度35℃～40℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例3(肽酶的水溶液在消化体系中的体积比不在0.01～0.1％的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照3:1的比例进行混合，二者的总体质量为100g；

2)纯净水为800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入0.3g的磷酸盐调整pH到5.5。

5)将中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05％，添加0.1g氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.05％中性蛋白酶溶液80mL，慢速搅拌，保持温度35℃～40℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例4(肽酶的水溶液在消化体系中的体积比不在0.01～0.1％的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照3:1的比例进行混合，二者的总体质量为160g；

2)纯净水为750mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入的0.5g磷酸盐调整pH到5.5。

5)将中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为1.5，添加0.2g氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的1.5％中性蛋白酶溶液250mL，慢速搅拌，保持温度60℃～70℃的条件下消化10～12h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例5(肽酶溶液的浓度为0.005％，不在0.01～1.5％的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3:1进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5)将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.005％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.005％中性蛋白酶溶液200ml，慢速搅拌，保持温度35℃～40℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例6(肽酶溶液的浓度为2.0％，不在0.01～1.5％的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3:1进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5)将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为2.0％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的2.0％中性蛋白酶溶液200ml，慢速搅拌，保持温度35℃～40℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例7(消化的温度不在35℃～60℃的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3:1进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5)将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.05％中性蛋白酶溶液200ml，慢速搅拌，保持温度25℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

对比实施例8(消化的温度不在35℃～60℃的范围内)

1)将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3:1进行混合，二者的总体质量为180g；

2)纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1)中混合好的乳清粉，维持搅拌30min，之后静置30min使其充分水合；

3)水合完毕后的乳清粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4)往步骤3)中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5)将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05％，添加0.1g(0.01％)氯化钙作为活化剂；

6)往步骤4)得到的溶液中加入步骤5)得到的0.05％中性蛋白酶溶液200ml，慢速搅拌，保持温度80℃的条件下消化7～9h；

7)消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

关于乳清蛋白消化效果分析(如表1所示)：

表1：

实施例	蛋白水解度(OPA)	分子量
			实施例1	>23％	60％≤500道尔顿
实施例2	>25％	65％≤500道尔顿
			对比实施例1	<20％	30％≤500道尔顿
对比实施例2	<10％	15％≤500道尔顿
			对比实施例3	<20％	30％≤500道尔顿
对比实施例4	<5％	5％≤500道尔顿
			对比实施例5	<10％	15％≤500道尔顿
对比实施例6	<10％	15％≤500道尔顿
			对比实施例7	<20％	30％≤500道尔顿
对比实施例8	<20％	30％≤500道尔顿

由表1可知，示例方法所得到的乳清蛋白水解产物的水解度更高，且水解产物的分子量更小，由此可见，本发明的方法是水解乳清蛋白的效率更高，得到的乳清蛋白水解产物分子量小，可以达到快速吸收的效果。

关于乳清蛋白水解产物的口味分析：

蛋白质在消化过程中产生苦味，影响加工和应用。在酶解过程中，通过酶制剂的选择及工艺参数处理，可以有效降低酶解产物的苦味。

口感对比方法：

1、筛选评定人员

评定小组由30名随机选择的消费者组成，小组人员身体健康，无吸烟酗酒等不良嗜好，对色香味有较强的分辨力和较高的灵敏度。

2、样品制备

将乳清蛋白水解产物制备为5％水溶液，同时准备未水解样品作为标准样。所有样品均采用三位随机数编码，在室温条件下，光线柔和空气正常流通情况下进行品评。

3、感官评定参考标准(如表2所示)：

表2：

评级	苦味	口感
			优	未感受到苦味	对比标样，无异味，无涩感
良	略有苦味，感觉不清晰	对比标样，无明显异味，无涩感
			中	能感受到苦味，在可接受范围内	对比标样，异味或涩感不明显，可接受
较差	有明显苦味	对比标样，异味或涩感可感受到
			差	苦味非常明显，难以接受	对比标样，异味或涩感较强，不可接受

按照国标《GB/T 12315感官分析方法学排序法》中结果的表述和解释对感官评定结果进行分析与验证。

4、感官评定评分表(如表3所示)

表3：

由表3可知，示例方法所得到的乳清蛋白水解产物口感好、无异味，无涩感。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (2)

1.一种制备乳清蛋白水解产物的方法，其特征在于，包括：

1）将乳清蛋白粉WPC30与WPC80按照质量比为3: 1进行混合，二者的总体质量为180g；

2）纯净水800mL，升温到50℃，加入步骤1）中混合好的乳清蛋白粉，维持搅拌30 min，之后静置30 min使其充分水合；

3）水合完毕后的乳清蛋白粉溶液在温度为105℃的条件下进行2min的杀菌处理；

4）往步骤3）中得到的溶液中加入3g的磷酸盐调整pH到5.5；

5）将米曲霉和黄曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为0.05%，添加0.1g氯化钙作为活化剂；

6）往步骤4）得到的溶液中加入步骤5）得到的0.05%中性蛋白酶溶液200ml，搅拌，保持温度35℃~40℃的条件下消化7~9 h；

7）消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行1min的酶失活处理。

2.一种制备乳清蛋白水解产物的方法，其特征在于，包括：

1）将脱盐乳清粉与浓缩乳清蛋白按照1: 6的比例进行混合，得到混合乳清粉，二者的总体质量为150g；

2）纯净水780mL升温到55℃，加入步骤1）中混合好的混合乳清粉，维持搅拌15 min，之后静置40 min使其充分水合；

3）水合完毕后的乳清粉溶液在温度为115℃的条件下进行1 min的杀菌处理；

4）往步骤3）中得到的溶液中加入0.5g的磷酸盐调整pH到8.5；

5）将米曲霉来源的中性蛋白酶提前配置为溶液，浓度为1.3%，添加0.2g乙二胺四乙酸铁钠作为活化剂；

6）往步骤4）得到的溶液中加入步骤5）得到的1.3%中性蛋白酶溶液60mL，搅拌，保持温度55℃~60℃的条件下消化3~4 h；

7）消化得到的产物在温度为105℃的条件下进行3 min的酶失活处理。