CN107849056A - Bace1抑制剂2‑氨基‑7a‑苯基‑3,4,4a,5,7,7a‑六氢呋喃并[3,4‑b]吡啶 - Google Patents

Bace1抑制剂2‑氨基‑7a‑苯基‑3,4,4a,5,7,7a‑六氢呋喃并[3,4‑b]吡啶 Download PDF

Info

Publication number
CN107849056A
CN107849056A CN201680045232.6A CN201680045232A CN107849056A CN 107849056 A CN107849056 A CN 107849056A CN 201680045232 A CN201680045232 A CN 201680045232A CN 107849056 A CN107849056 A CN 107849056A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pyridine
fluoro
amino
compound
methyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201680045232.6A
Other languages
English (en)
Inventor
K·朱尔
L·塔摩斯
M·马里戈
A·皮施尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
H Lundbeck AS
Original Assignee
H Lundbeck AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by H Lundbeck AS filed Critical H Lundbeck AS
Publication of CN107849056A publication Critical patent/CN107849056A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

提供了具有式I的化合物，这些化合物是BACE1的抑制剂。

Description

BACE1抑制剂2-氨基-7A-苯基-3,4,4A,5,7,7A-六氢呋喃并 [3,4-B]吡啶
技术领域
本发明提供了为BACE1抑制剂的化合物。本发明的单独方面针对包括所述化合物的药物组合物以及这些化合物治疗神经变性和认知障碍的用途。
背景技术
痴呆是临床综合征，其特征在于无法通过正常衰老解释的多个认知区缺陷、功能显著下降和无谵妄。另外，经常存在神经精神病学症状和病灶性神经发现。基于病因学，将痴呆进一步分类。阿尔茨海默病(AD)是痴呆的最常见原因，其次是混合型AD和血管性痴呆、路易体痴呆(DLB)和额颞叶痴呆。
β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结被认为是与AD相关的主要病理性特征，该AD的特征在于记忆、认知、推理、判断和定向丧失。随着疾病进展，还受影响的是运动、感觉和语言能力，直到出现多种认知功能的整体损害。β-淀粉样沉积物主要是Aβ肽的凝集体，该凝集体进而作为β-成淀粉样途径的一部分是淀粉样前体蛋白(APP)蛋白水解的产物。Aβ肽产生自由一种或多种γ-分泌酶在C-末端和由β-分泌酶1(BACE1)在N-末端切割APP，该β-分泌酶1还被称为天冬氨酰蛋白酶2。BACE1活性与从APP生成Aβ肽直接相关。
研究表明BACE1的抑制妨碍Aβ肽的产生。此外，BACE1与其底物APP共定位于高尔基体和胞吞区室中(Willem M等人，Semin.Cell Dev.Biol[细胞与发育生物学研讨会]，2009，20，175-182)。小鼠敲除研究已经证实了当这些动物是健康且能育的时候，不存在淀粉样蛋白肽形成(Ohno M等人，Neurobiol.Dis.[疾病神经生物学]，2007，26，134-145)。在过量表达APP的小鼠中BACE1的遗传消融已经证实了斑块形成的不存在和认知缺陷的逆转(Ohno M等人，Neuron[神经元]；2004，41，27-33)。在散发性AD患者的脑中评估BACE1水平(Hampel和Shen，Scand.J.Clin.Lab.Invest.[斯堪的纳维亚临床与实验室研究杂志]2009，69，8-12)。
这些汇聚的发现表明，BACE1的抑制可以作为用于治疗AD，以及Aβ沉积的减少对其而言有益的神经变性或认知障碍的治疗靶标。
阿斯利康公司(AstraZeneca)于2012年10月宣布了AZD3839的发现，AZD3839是一种用于治疗AD的有效的BACE1抑制剂临床候选物(Jeppsson,F.等人，J.Biol.Chem.[生物化学杂志]，2012，287，41245-41257)。导致发现AZD3839的努力被进一步描述于Ginman,T.等人，J.Med.Chem.[药物化学杂志]，2013，56，4181-4205中。Ginman的出版物描述了克服与AZD3839的发现与鉴定有关的问题。这些问题涉及这些化合物的弱的血脑屏障穿透性和P-糖蛋白介导的外排，从而导致缺乏脑暴露。
Ginman原稿假定脑暴露的差异在很大程度上归因于核心结构并且提供了结构活性关系数据，其中根据核心亚型，在四个表中给出了报道的化合物的体外特性。在表4中，描述了一系列含脒化合物，这些化合物从活性视角被认为是令人感兴趣的。然而，数据暗示含脒核心未展示出有利的血脑屏障穿透曲线。
来自豪夫迈·罗氏公司(Hoffmann-La Roche)和锡耶纳生物技术公司(SienaBiotech)的研究人员也报道了含脒化合物的发现(Woltering,T.J.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有机化学与药物化学通讯]2013，23，4239-4243)。发现这些化合物(该论文中的化合物17和18)不具有任何体内作用(野生型小鼠脑中没有Aβ40减少)。
与Ginman等人和Woltering,T.J.等人的教导相反，本发明的诸位发明人已经发现了一系列脒化合物，这些脒化合物是脑穿透性的。因此，本发明涉及具有BACE1抑制活性的新颖化合物，涉及其制备，涉及其医疗用途并且涉及包括它们的药物。
发明内容
本发明的目的是提供抑制BACE1的化合物。因此，本发明涉及具有式I的化合物。
其中Ar选自下组，该组由以下各项组成：苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基和异噁唑基，并且其中Ar任选地被选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下各项组成：卤素、CN、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6氟烷基和C1-C6烷氧基；
R1选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
R2选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
R3选自氢或卤素；
R4选自C1-C3烷基或C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
在一个实施例中，本发明提供了用于在疗法中使用的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明进一步提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗神经变性或认知障碍的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗神经变性或认知障碍的方法中使用。
本发明提供了治疗神经变性或认知障碍的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
具体实施方式
在一个实施例中，本发明提供了具有式Ia的化合物，其中R1-R4和Ar是如上所定义的。
在本发明的一个实施例中，其中本发明的化合物由式I或式Ia表示，R1是F，并且特别地R1是F并且R2是氢。
在本发明的一个实施例中，特别地当本发明的化合物由式Ia表示时，R1和R2两者都是F。
在本发明的一个实施例中，R3选自氟或氢。
在本发明的一个实施例中，R4选自甲基或氟甲基。
在本发明的一个实施例中，如果R3是氢，那么R4是C1-C3氟烷基。
在本发明的一个实施例中，Ar被选自F、Cl、C1-C3烷氧基或C1-C3氟烷基的取代基取代。
在本发明的一个实施例中，Ar是苯基。
在本发明的一个实施例中，Ar是吡啶基。
在本发明的一个实施例中，Ar是嘧啶基。
在本发明的一个实施例中，Ar是吡嗪基。
在本发明的一个实施例中，Ar是咪唑基。
在本发明的一个实施例中，Ar是吡唑基。
在本发明的一个实施例中，Ar是噻唑基。
在本发明的一个实施例中，Ar是噁唑基。
在本发明的一个实施例中，Ar是异噁唑基。
在本发明的一个实施例中，本发明的化合物选自下组，该组由以下各项组成：N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-4-甲基噻唑-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-2-甲基噁唑-4-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺、
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺、
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺，和
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺，
或其药学上可接受的盐。
如在此所使用，术语“C1-C6烷基”是指具有从一个至六个(包含端值)碳原子的直链或支链饱和烃。C1-C6烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丙基、正戊基和正己基。类似地，术语“C1-C3烷基”是指具有从一个至三个(包含端值)碳原子的直链或支链饱和烃。此类取代基的实例包括但不限于甲基、乙基和正丙基。
同样地，术语“C1-C6烷氧基”是指具有从一个至六个(包含端值)碳原子并且开放原子价在氧上的直链或支链饱和烷氧基基团。C1-C6烷氧基的实例包括但不限于，甲氧基、乙氧基、正丁氧基、叔丁氧基和正己氧基。“C1-C6烷氧基”任选地被一个或多个氟原子取代。
如在此所使用，术语“C1-C6氟烷基”是指具有从一个至六个(包含端值)碳原子的被一个或多个氟原子取代的直链或支链饱和烃。C1-C6氟烷基的实例包括但不限于三氟甲基、五氟乙基、1-氟乙基、单氟甲基、二氟甲基、1,2-二氟乙基和3,4-二氟己基。类似地，术语“C1-C3氟烷基”是指具有从一个至三个(包含端值)碳原子、每个碳原子被一个或多个氟原子取代的直链或支链饱和烃。
术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
术语“C2-C6烯基”是指具有从两个至六个碳原子和一个双键的支链或非支链烯基基团，包括但不限于乙烯基、丙烯基和丁烯基。
术语“C2-C6炔基”应意指具有从两个至六个碳原子和一个三键的支链或非支链炔基基团，包括但不限于乙炔基、丙炔基和丁炔基。
当应用于本发明的化合物时，短语“治疗有效量”旨在表示化合物足以改善、减轻、稳定、逆转、减慢或延缓障碍或疾病状态的进展、或者该障碍或疾病的症状的进展的量。在一个实施例中，本发明提供了给予化合物组合的方法。在此类情况下，“治疗有效量”是组合中的本发明的化合物足以引起预期的生物效应的量。
如在此所使用，术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”意指改善或逆转疾病或障碍的进展或严重性、或者改善或逆转这种疾病或障碍的一种或多种症状或副作用。如在此所使用，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”还意指抑制或阻断，如延迟、阻止、限制、阻碍或妨碍疾病或障碍的系统、病症或状态的进展。出于本发明的目的，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”进一步意指一种用于获得有益的或希望的临床结果的方法，其中“有益的或希望的临床结果”包括但不限于症状的缓解、障碍或疾病程度的减小、稳定的(即没有恶化的)疾病或障碍状态、疾病或障碍状态的延缓或减慢、疾病或障碍状态的改善或减轻、以及疾病或障碍的缓解，不论是部分地或全部地。
本发明是基于以下发现：具有式I的化合物是BACE1的抑制剂，并且正因为如此，可用于治疗障碍(例如神经变性或认知障碍)，这些障碍的病理学特征包括β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结。
如上所讨论，本发明的化合物，由于它们对β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结的作用，预期在治疗阿尔茨海默病中有用。这包括家族性阿尔茨海默病，其中患者的特定基因上携带突变，这些基因与Aβ肽的产生密切相关。然而，重要的是注意到，Aβ肽的凝集体不限于家族性阿尔茨海默病，而是类似地，更普遍的散发性阿尔茨海默病的一个重要的病理生理特征[Mol Cell Neurosci[分子细胞神经科学]，66，3-11，2015]。
还认为本发明的化合物在治疗早期阿尔茨海默病中有用，即生物学和结构改变已经开始，但是该疾病的临床表现还未变得明显或未很好地发展的疾病阶段。事实上，早期阿尔茨海默病可以在该疾病的任何临床表现变得明显之前开始多年。早期阿尔茨海默病包括前驱阿尔茨海默病(prodromal Alzheimer’s disease)、临床前阿尔茨海默病和轻度认知损害。尽管轻度认知损害可能与阿尔茨海默病无关，但它通常是阿尔茨海默病的过渡阶段或是因阿尔茨海默病而产生的。临床前和前驱阿尔茨海默病是无症状期，并且典型地它们通过阿尔茨海默病相关的生物标记的存在而诊断出来。在此背景下，认为本发明的化合物在减缓早期阿尔茨海默病的进展(例如，轻度认知损害到阿尔茨海默病)中有用。还认为本发明的化合物在治疗记忆丧失、注意力缺陷以及与阿尔茨海默病相关的痴呆中有用。
除了阿尔茨海默病的连续体之外，其他疾病的特征在于β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结。这包括例如21三体综合征，又称为唐氏综合征。罹患唐氏综合征的患者具有一条额外的21号染色体，该染色体包含淀粉样前体蛋白(APP)的基因。这条额外的21号染色体导致APP的过度表达，由此导致增高的Aβ肽水平，最终引起发展阿尔茨海默病的风险显著增加(见于唐氏综合征患者中)[Alzheimer’s&Dementia[阿尔茨海默病和痴呆]，11，700-709，201]。大脑淀粉样血管病的特征也在于中枢神经系统血管中β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结[Pharmacol Reports[药理学报告]，67，195-203，2015]，并且正因为如此，预期也可用本发明的化合物进行治疗。
在一个实施例中，本发明提供了治疗疾病的方法，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征和大脑淀粉样血管病，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明进一步提供了抑制患者的BACE1的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了抑制淀粉样前体蛋白的β-分泌酶介导的切割的方法，该方法包括向对这样的治疗有需要的患者给予治疗有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在另外的实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗疾病的药物的用途，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征或大脑淀粉样血管病。
本发明还提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于抑制BACE1的药物中的用途。本发明进一步提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于抑制Aβ肽的产生或积累的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了在治疗疾病的方法中使用的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征或大脑淀粉样血管病。
在一个实施例中，本发明涉及在抑制BACE1的方法中或在抑制Aβ肽的产生或积累的方法中使用的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的化合物如在实例中展示的是BACE1的有效抑制剂，并且能够降低大鼠脑和血浆中的Aβ肽的水平，并且因此认为所述化合物在治疗神经变性和认知障碍(例如像阿尔茨海默病)中有用，这些障碍的病理学特征包括Aβ沉积物和神经原纤维缠结。将本发明的化合物与在治疗此类疾病(例如阿尔茨海默病)中有用的另一治疗范例组合可能是有益的。
τ蛋白在神经元中是丰富的。τ蛋白是可溶的并且高度磷酸化不稳定的，并且结合微管蛋白，提供微管蛋白组件的调节和调制，即最终提供微管结构和稳定性。在最脱磷酸化状态中，τ蛋白可以仅与微管蛋白缔合，并且磷酸化/脱磷酸化充当控制微管蛋白缔合的开关。磷酸化的τ构成为阿尔茨海默病的标志之一的神经原纤维缠结的重要部分。所谓的τ假设表明靶向这些病理学缠结(其主要成分是磷酸化的τ蛋白)作为阿尔茨海默病的治疗范例。具体地，免疫疗法(主动的和被动的二者)已经表明作为用来靶向τ神经原纤维缠结的方式。在主动免疫疗法中，将病原性抗原注射入患者中，并且先天免疫系统引发免疫应答。这触发了B细胞的成熟，产生针对给予的抗原的高亲和力抗体。在被动免疫疗法中，通过输注针对抗原的特异性抗体来避免触发先天免疫系统。建议固有清除系统然后去除结合抗体的配体。存在关于靶向磷酸化τ蛋白作为治疗阿尔茨海默病的主动和被动免疫疗法二者的功效的实质证据[Alzheimer’s & Dementia[阿尔茨海默病和痴呆]，7(4，增刊)S480-481；JNeurosci[神经科学杂志]30，16559-16556，2010；J Neurosci[神经科学杂志]，27，9115-9129，2007]。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)在主动或被动τ免疫疗法中有用的化合物。所述在被动τ免疫疗法中有用的化合物可以是针对磷酸化τ蛋白的抗体。所述在主动τ免疫疗法中有用的化合物可以是τ蛋白氨基酸序列的片段，当注射进患者体内时，该片段在所述患者体内引起针对磷酸化τ蛋白的抗体。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动τ免疫疗法中有用的化合物在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动τ免疫疗法中有用的化合物，用于在治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法中使用。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动τ免疫疗法中有用的化合物以及药学上可接受的载体。
用来治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的另一范例是靶向Aβ肽。已经表明，可以通过靶向Aβ肽的被动或主动免疫疗法实现这一点[J Neurosci[神经科学杂志]，34，11621-11630，2014；J Neurosci[神经科学杂志]33，4923-4934，2013]。与本发明的化合物组合，这将尝试经由两种不同途径靶向相同病理学机制。抗Aβ抗体(直接注射进患者体内，或者作为主动免疫疗法的结果在患者体内产生)清除在脑中的Aβ沉积物，同时Aβ肽的进一步积累被本发明的化合物阻断或减少。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)在主动或被动τ免疫疗法中有用的化合物。所述在被动Aβ肽免疫疗法中有用的化合物可以是抗Aβ肽抗体，例如gantenerumab、茄尼醇单抗(solanezumab)、aducanumab或克瑞珠单抗(crenezumab)。所述在主动Aβ肽免疫疗法中有用的化合物可以是当注射进患者体内时，在所述患者体内引起抗Aβ肽抗体的Aβ肽氨基酸序列的片段。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动Aβ肽免疫疗法中有用的化合物在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动Aβ肽免疫疗法中有用的化合物，用于在治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法中使用。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和在主动或被动Aβ肽免疫疗法中有用的化合物以及药学上可接受的载体。
NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体拮抗剂美金刚和乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐、卡巴拉汀和加兰他敏是批准用于治疗阿尔茨海默病的药物。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)NMDA受体拮抗剂或乙酰胆碱酯酶抑制剂。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和NMDA受体拮抗剂或乙酰胆碱酯酶抑制剂在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和NMDA受体拮抗剂或乙酰胆碱酯酶抑制剂用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和NMDA受体拮抗剂或乙酰胆碱酯酶抑制剂以及药学上可接受的载体。
惊厥或癫痫活动还与阿尔茨海默病(包括阿尔茨海默病的早期阶段)相关，并且所述癫痫活动的治疗(其争取使海马活动过度正常化)可以形成阿尔茨海默病治疗范例的一部分[JAMA Neurol[JAMA神经病学]，70，1158-1166，2013；J Neurosci Res[神经科学研究杂志]，93，454，465，2015；Neuron[神经元]，74，647-474，2012；Neurepsychpharm[神经精神病药物学]，35，1016-1025，2010；CNS Neurosci Ther[CNS神经科学和治疗学]，19，871-881，2013]。有用的抗癫痫药包括NMDA受体拮抗剂和离子通道调制剂，例如托吡酯、左乙拉西坦和拉莫三嗪。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)抗癫痫药。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗癫痫药在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗癫痫药在治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法中使用。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗癫痫药以及药学上可接受的载体。
不断出现的证据表明，炎症在阿尔茨海默病发病机制中具有因果作用，并且神经炎症并不是由不断出现的β-淀粉样沉积物和神经原纤维缠结激活的被动系统，而是有助于发病机制自身[Lancet Neurol[柳叶刀神经病学]，14，388-405，2015；J Alz Dis[阿尔茨海默病杂志]，44，385-396，2015；Neurol[神经病学]，84，2161-2168，2015]。由此得出，抗炎药(例如NSAID(非甾体类抗炎药))、TNFα抑制剂(例如依那西普)和p38MAP激酶抑制剂(例如VX-745(5-(2,6-二氯苯基)-2-((2,4-二氟苯基)硫代)-6H-嘧啶并[1,6-b]哒嗪-6-酮))可以在治疗阿尔茨海默病中有用。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)抗炎药。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗炎药在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗炎药，其用于在治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法中使用。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和抗炎药以及药学上可接受的载体。
此外，已经证明τ蛋白聚集抑制剂例如TRX-0237(也称为亚甲蓝)和SSRI(选择性羟色胺再摄取抑制剂)例如西酞普兰在治疗阿尔茨海默病中的功效[BehavPharmacol[行为药理学]，26，353-368，2015；Sci Transl Med[科学转化医学]，6(236re4)，2014]。
在一个实施例中，本发明提供了用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的两种组分：(1)具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和(2)τ蛋白聚集抑制剂或SSRI。根据本发明的这一实施例的给予可以是同时的，或在两种组分的给予之间可以存在时间间隔。
在一个实施例中，本发明涉及具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和τ蛋白聚集抑制剂或SSRI在制造用于治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的药物中的用途。
在一个实施例中，本发明提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和τ蛋白聚集抑制剂或SSRI药，其用于在治疗神经变性或认知障碍(例如阿尔茨海默病)的方法中使用。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括具有式I的化合物或其药学上可接受的盐和τ蛋白聚集抑制剂或SSRI药以及药学上可接受的载体。
在一个实施例中，哺乳动物是人类。
在一个实施例中，患者是人类患者。
药学上可接受的盐
本发明还包括本发明化合物的盐，典型地是药学上可接受的盐。此类盐包括药学上可接受的酸加成盐。酸加成盐包括无机酸和有机酸的盐。
具有式I的化合物的药学上可接受的盐例如以常规方式通过用摩尔当量的药学上可接受的酸处理具有式I的游离碱的溶液或悬浮液来制备。合适的有机酸和无机酸的代表性实例描述于下文。
合适的无机酸的代表性实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸等。合适的有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、乙醇酸、衣康酸、乳酸、甲磺酸(methanesulfonic acid)、马来酸、苹果酸、丙二酸、苯乙醇酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、丁二酸、甲磺酸(methane sulfonicacid)、乙烷磺酸、酒石酸、抗坏血酸、双羟萘酸、双亚甲基水杨酸、乙烷二磺酸、葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、茶碱乙酸以及8-卤代茶碱(例如，8-溴茶碱及类似物)。药学上可接受的无机或有机酸加成盐的另外的实例包括在S.M.Berge等人，J.Pharm.Sci.[药物科学杂志]，1977，66，2中列出的药学上可接受的盐。
此外，本发明的化合物能以未溶剂化形式存在以及以与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心并且意图在于，作为分离的、纯的或部分纯化的光学异构体的任何光学异构体(即对映异构体或非对映异构体)及其任何混合物(包括外消旋混合物)(即立体异构体的混合物)都被包括在本发明的范围内。
本发明的化合物可以以两种立体形式存在，即这两种形式都是本发明的一部分。
在此背景下，应该理解的是，当指明对映异构体形式时，则该化合物处于对映异构体过量，例如基本处于纯的形式。因此，本发明的一个实施例涉及具有至少60％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少96％、优选至少98％的对映异构体过量的本发明的化合物。
可以通过已知方法将外消旋形式拆分为旋光对映体，例如通过用光学活性酸分离其非对映异构盐并且通过用碱处理来离析光学活性胺化合物。可以例如通过分步结晶来实现此类非对映异构体盐的分离。适合于此目的的光学活性酸可以包括但不限于d-酒石酸或l-酒石酸、扁桃酸或樟脑磺酸。用于将外消旋体拆分为旋光对映体的另一种方法是基于在光学活性基质上的层析。本发明的化合物还可以通过从手性衍生化试剂(例如，手性烷基化或酰基化试剂)形成并层析分离非对映异构体衍生物，随后切割手性助剂来拆分。以上方法中的任一种都可以应用于拆分本发明的化合物的旋光对映体自身或应用于拆分合成的中间体的旋光对映体，然后可以通过在此描述的方法将其转化为光学拆分的终产物，该终产物是本发明的化合物。
在本发明的一个方面中，本发明的化合物以外消旋形式存在。
可以使用本领域的普通技术人员已知的用于拆分光学异构体的另外的方法。此类方法包括由J.Jaques、A.Collet和S.Wilen在“Enantiomers,Racemates,and Resolutions[对映异构体、外消旋体与拆分]”，John Wiley and Sons[约翰威利父子公司]，纽约，1981中讨论的那些。光学活性化合物还可以从光学活性起始材料制备。
药物组合物
本发明还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。本发明还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含在实验部分中披露的具体化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
本发明的化合物能以单剂量或多剂量形式单独给予或与药学上可接受的载体或赋形剂组合给予。根据本发明的药物组合物可以用药学上可接受的载体或稀释剂以及任何其他已知的佐剂和赋形剂根据常规技术配制，这些常规技术是例如在以下中披露的技术：Remington:The Science and Practice of Pharmacy[雷明顿：药学科学与实践]，第22版，Gennaro编，Mack Publishing Co.[马克出版公司]，伊斯顿，宾夕法尼亚州，2013。
用于口服给予的药物组合物包括固体剂型，例如胶囊、片剂、糖衣丸、丸剂、锭剂、粉剂和颗粒剂。适当时，根据本领域中熟知的方法，这些组合物可以制备为具有包衣，例如肠溶衣，或者它们可以被配制以提供活性成分的控制释放，例如持续或长久释放。用于口服给予的液体剂型包括溶液、乳液、悬浮液、糖浆和酏剂。用于肠胃外给予的药物组合物包括无菌水性和非水性可注射溶液、分散液、悬浮液或乳液以及欲在使用之前在无菌可注射溶液或分散液中重构的无菌粉剂。其他合适的给予形式包括但不限于栓剂、喷雾剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、吸入剂、皮肤贴片和植入物。
典型的口服剂量范围从每日约0.01mg/kg体重至约100mg/kg体重。
合适的药物载体包括惰性固体稀释剂或填料、无菌水性溶液和各种有机溶剂。固体载体的实例包括乳糖、石膏粉、蔗糖、环糊精、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁、硬脂酸和纤维素的低级烷基醚。液体载体的实例包括但不限于糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧化乙烯和水。类似地，载体或稀释剂可以包括单独或与蜡混合的本领域中已知的任何持续释放物质，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。通过组合具有式I的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体而形成的药物组合物以多种适合于所披露的给予途径的剂型容易地给予。这些配制品可以方便地通过药学领域已知的方法以单位剂型呈现。
若将固体载体用于口服给予，则该制剂可以被压片、以粉剂或丸粒形式置于硬明胶胶囊中或它可呈糖锭或锭剂形式。固体载体的量将广泛变化，但将在每剂量单位从约25mg至约1g的范围。若使用液体载体，则该制剂可以呈糖浆、乳液、软明胶胶囊或无菌可注射液体(例如水性或非水性液体悬浮液或溶液)的形式。
实例
可以通过在以下反应方案1-6和实例中所概述的方法制备本发明的具有通式I的化合物(其中R1、R2、R3、R4和Ar如上所定义)。在所描述的方法中，使用其本身为本领域的熟练化学师已知或对本领域的普通技术人员而言可以是显而易见的变体或修饰是可能的。此外，根据以下反应方案和实例，用于制备本发明的化合物的其他方法对本领域的普通技术人员而言将是容易显而易见的。
例如，方案2描述了在合成本发明的化合物的过程中使用选择性保护基团。本领域的普通技术人员将能够选择用于具体反应的适当保护基团。此外，可能有必要在下文描述的合成方法中掺入针对例如氨基、酰胺基、酮基及羟基基团等取代基的保护和脱保护策略以合成具有式I的化合物。此类基团的保护和脱保护的方法在本领域是熟知的，并且可以发现于T.Green等人，Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基团]，1991，第2版，John Wiley&Sons[约翰威利父子公司]，纽约中。
对于能以两种或更多种互变异构体的混合物或两种或更多种互变异构体之间的平衡状态存在的化合物而言，在方案中仅体现了一种互变异构体，尽管它可能不是最稳定的互变异构体。对于能以对映异构体、立体异构体或几何异构体形式存在的化合物而言，指明了其几何构型；否则的话，该结构表示立体异构体的混合物。
使用以下方法获得分析性LC-MS数据。
方法A：
在沃特斯(Waters)Aquity UPLC-MS上运行LC-MS，其由以下组成：包括柱管理器的沃特斯Aquity、二元溶剂管理器、样品组织器、PDA检测器(在254nM下操作)、ELS检测器以及配备有以正离子模式操作的APPI源的SQ-MS。
LC-条件：柱是Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1×150mm，在60℃下用0.6mL/min的二元梯度操作，该二元梯度由水+0.05％三氟乙酸(A)和乙腈+5％水+0.03％三氟乙酸(B)组成。梯度：0.00min：10％B；3.00min：99.9％B；3.01min：10％B；3.60min：10％B。总运行时间：3.60min。
方法B：
在沃特斯(Waters)Acquity UPLC-MS上运行LC-MS，其由以下组成：包括柱管理器的沃特斯Aquity、二元溶剂管理器、样品组织器、PDA检测器(在254nm下操作)、ELS检测器以及配备有以正离子模式操作的APPI源的TQ-MS。
LC-条件：柱是Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1×50mm，在60℃下用1.2mL/min的二元梯度操作，该二元梯度由水+0.05％三氟乙酸(A)和乙腈+5％水+0.05％三氟乙酸(B)组成。梯度：0.00min：10％B；1.00min：100％B；1.01min：10％B；1.15min：10％B。总运行时间：1.15min。
方法C：
使用具有ELS检测器的安捷伦(Agilent)1200LCMS系统。柱：安捷伦TC-C185μm；2.1×50mm；柱温：50℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝99:1至0:100(在4.0分钟内)并且流速为0.8mL/min。
方法D：
使用具有ELS检测器的安捷伦(Agilent)1200LCMS系统。柱：XBridgeShieldRP18，5μm，50×2.1mm；柱温：40℃；溶剂系统：A＝水/浓NH3(水溶液)(99.95:0.05)和B＝乙腈；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝95:5至0:100(在3.4分钟内)并且流速为0.8mL/min。
方法E：
使用安捷伦(Agilent)6100LCMS系统。柱：Xbrige Shield RP-18，5um，2.1*50mm；柱温：30℃；溶剂系统：A＝水(1L)/浓NH3(水溶液)(0.5mL)和B＝乙腈；方法：线性梯度洗脱，其中B％＝10％(在0min时)、80％(在2min时)、80％(在2.48min时)、10％(在2.49min时)、10％(在3min时)，并且流速为1mL/min。方法F：
使用安捷伦(Agilent)6100LCMS系统。柱：MERCK，RP-18e 25-2mm；柱温：50℃；溶剂系统：A：水(4L)+TFA(1.5mL)，和B：乙腈(4L)+TFA(0.75mL)；方法：线性梯度洗脱，其中B％＝5％(在0min时)、95％(在0.7min时)、95％(在1.1min时)、5％(在1.1min时)、5％(在1.5min时)，并且流速为1.5mL/min。
在Bruker Avance AV-III-600仪器上在600MHz下或在Bruker Avance AV-III-400仪器或Varian 400仪器上在400MHz下记录1H NMR波谱。以相对ppm值表示化学位移值。以下缩写用于NMR信号的多重性：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，dd＝双二重峰，ddd＝双双二重峰，dt＝双三重峰，br＝宽峰，并且m＝多重峰。
可以如在方案1中所示制备具有通式VIa和VIb的化合物。
方案1
其中R1和R2是如在式I下所定义的。
可以通过使具有通式II的化合物与Weinreb酰胺III反应来制备具有通式IV的化合物(方案1)。具有通式IV的化合物与羟胺之间的缩合反应给出具有通式V的化合物。具有通式V的化合物的分子内环加成反应给出具有通式(±)-VI的化合物的外消旋混合物，该外消旋混合物可以通过具有光学纯手性固定相的色谱方法(例如SFC(超临界流体色谱))分离成两种对映异构体VIa和VIb。
具有通式VIII的化合物可以如方案2中所示制备。
方案2
其中R1和R2是如在式I下所定义的，并且R6是胺保护基团，例如叔丁氧基羰基基团或苄氧基羰基基团。
可以通过用还原剂(例如氢化铝锂)还原具有通式VIa的化合物的N-O键来制备具有通式VII的化合物(方案2)。然后可以用胺保护基团(例如叔丁氧基羰基基团或苄氧基羰基基团)来保护胺部分以给出具有通式VIII的化合物。
可以如在方案3中所示制备具有通式XXa和XXb的化合物。
方案3
其中R1、R2和R4是如在式I下所定义的，并且R6是胺保护基团，例如苄氧基羰基基团，R7是保护基团，例如叔丁氧基羰基基团，并且R8是保护基团，例如叔丁氧基羰基基团。
可以通过用氧化剂(例如DMP(戴斯-马丁过碘烷))氧化具有通式VIII的化合物来制备具有通式IX的化合物(方案3)。具有通式X的化合物可以使用催化剂例如(S)-2-(双(3,5-双(三氟甲基)苯基)((三甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷、和氟化剂例如NFSi(N-氟-N-(苯基磺酰基)苯磺酰胺)通过有机催化氟化反应来制备。然后具有通式XII的化合物可以在碱(例如三乙胺和氯化锂)的存在下，通过具有通式X的化合物与2-(二乙氧基磷酰基)-2-氟乙酸乙酯XI之间的霍纳沃兹沃思埃蒙斯(Horner Wadsworth Emmons)反应来制备。在催化剂(例如钯碳)存在下，在氢气气氛下，具有通式XII的化合物的双键的还原也除去氮保护基团(当该氮保护基团为苄氧基羰基基团时)以给出具有通式XIII的化合物。具有通式XIII的化合物可以通过用甲醇和碱(例如碳酸钾)进行处理来闭环以给出具有通式XIV的化合物。在用保护基团(例如叔丁氧基羰基基团)保护该酰胺基团之后，具有通式XV的化合物可以通过用强碱(例如LiHMDS(双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂))进行处理来烷基化，接着用具有通式XVI的化合物进行处理，以形成作为非对映异构体混合物的具有通式XVII的化合物。用硫酸和硝酸处理具有通式XVII的化合物导致除去酰胺保护基团和硝化，以给出具有通式XVIII的化合物。具有通式XVIII的化合物的硝基部分的还原给出具有通式XIX的化合物，在其氨基部分保护后给出作为非对映异构体混合物的具有通式XX的化合物。非对映异构体的混合物可以在这个阶段分离，以给出具有通式XXa的化合物和具有通式XXb的化合物。
可以如在方案4中所示制备具有通式XXIIa和XXIIb的化合物。
方案4
其中R1、R2和R4是如在式I下所定义的，并且R8是胺保护基团(例如叔丁氧基羰基基团)。
可以通过用试剂例如劳氏试剂(Lawesson’s reagent，2,4-双(4-甲氧基苯基)-1,3,2,4-二噻二磷杂丁环-2,4-二硫化物)处理具有通式XXa的化合物来获得具有通式XXIa的化合物(方案4)。具有通式XIXa的化合物的胺部分的脱保护给出具有通式XXIIa的化合物。具有通式XXIIb的化合物可以按类似的方式从具有通式XXb的化合物获得。
可以如在方案5中所示制备具有通式XXIIc和XXIId的化合物。
方案5
其中R1和R2是如在式I下所定义的，R6是胺保护基团，例如叔丁氧基羰基基团，并且R7是烷基基团，例如甲基或乙基。
可以通过氧化具有通式VIII的化合物来制备具有通式XXIII的化合物(方案5)。具有通式XXV的化合物可以通过在偶联剂(例如EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺))存在下，具有通式XXIII的化合物与麦德鲁姆酸(Meldrum’s acid)(XXIV)进行反应来制备。用还原剂(例如在乙酸中的硼氢化钠)还原具有通式XXV的化合物给出具有通式XXVI的化合物。用在醇溶剂(例如甲醇或乙醇)中的酸(例如盐酸)处理具有通式XXVI的化合物，接着用碱(例如三乙胺)进行处理，给出具有通式XXVII的化合物。具有通式XXVII的化合物可以用试剂(例如NFSi(N-氟苯磺酰亚胺))氟化，以给出具有通式XXVIII的化合物，其在用试剂(例如硼氢化钠)还原后给出具有通式XXIX的化合物。在碱(例如三乙胺)存在下，用试剂(例如NfF(1,1,2,2,3,3,4,4,4-壬氟丁烷-1-磺酰氟))活化具有通式XXIX的化合物的醇部分，接着与试剂(例如TBAF(四丁基氟化铵))进行取代反应，给出具有通式XXX的化合物。用硫酸和硝酸处理具有通式XXX的化合物导致硝化，以给出具有通式XXXI的化合物。具有通式XXXII的化合物可以通过用试剂例如劳氏试剂(Lawesson’s reagent，2,4-双(4-甲氧基苯基)-1,3,2,4-二噻二磷杂丁环-2,4-二硫化物)处理具有通式XXXI的化合物来获得。还原具有通式XXXII的化合物的硝基部分，接着分离具有通式XXXIII的化合物的两个非对映异构体，给出具有通式XXIIc和XXIId的化合物。
具有通式I的化合物可以如方案6中所示制备。
方案6
其中R1、R2、R3、R4和Ar是如在式I下所定义的。
可以通过使用本领域的熟练化学家已知的程序，使具有通式XXIII的化合物与具有通式XXXIV的羧酸氯化物反应或通过与具有通式XXXV的羧酸反应来制备具有通式XXXVI的化合物(方案6)。具有通式XXXIV的羧酸氯化物和具有通式XXXV的羧酸是可商购的，或者可以通过文献中描述的方法合成。用氨处理具有通式XXXVI的化合物给出具有通式I的化合物。在一些情况下，添加氧化剂(例如叔丁基过氧化氢)可能是促进该反应所必需的。
中间体的制备
中间体I-1:2-(烯丙基氧基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺
将四丁基硫酸氢铵(9.41g，27.7mmol)添加到氢氧化钠(305mL，3296mmol，10.8摩尔，水)在水(100mL)和甲苯(280mL)中的溶液中。添加丙-2-烯-1-醇(16.09g，18.84mL，277mmol)。将反应混合物冷却至0℃。缓慢添加2-溴乙酸叔丁酯(80g，60.6mL，410mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加250mL水。将混合物用庚烷萃取。将有机相用盐水洗涤、经硫酸镁干燥并在真空中浓缩以给出2-(烯丙基氧基)乙酸叔丁酯(47.4g，99％产率)。不经进一步纯化用于下一步骤。
将在甲苯(87g，100mL，939mmol)中的2-(烯丙基氧基)乙酸叔丁酯(47.4g，275mmol)冷却至0℃。以一定速率添加甲酸(200mL)以保持内部温度<10℃。将反应混合物在55℃下搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩，随后与三份的甲苯(3×100mL)共沸除去残留甲酸，以给出2-(烯丙基氧基)乙酸(31.2g，97％产率)。不经进一步纯化用于下一步骤。
在0℃，按部分将N,N’-羰基二咪唑(47.8g，295mmol)添加至在二氯甲烷(170mL)中的2-(烯丙基氧基)乙酸(31.15g，268mmol)中。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时。按5部分添加N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(30.1g，309mmol)。允许将反应混合物温至室温并搅拌3小时。添加咪唑(4.57g，67.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。添加水(250mL)。将有机相用1NHCl水溶液(2×250mL)、盐水洗涤，并经硫酸镁干燥。将溶液通过硅胶(用乙酸乙酯/庚烷1:1进行洗脱)过滤并在真空中浓缩以给出2-(烯丙基氧基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(30.7g，72％产率)。不经进一步纯化用于下一步骤。
中间体I-2：2-(烯丙基氧基)-1-(2,3-二氟苯基)乙-1-酮
在-78℃，在N2下，伴随搅拌向1-溴-2,3-二氟苯(48.0g，249mmol)在THF(1.00L)中的溶液中逐滴添加乙基溴化镁(3M，83mL)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1h，并且然后在0℃逐滴添加在THF(50mL)中的2-烯丙基氧基-N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺(51.5g，323mmol)。将黄色溶液在0℃下搅拌1h。在0℃下通过添加饱和NH4Cl水溶液(200mL)来淬灭反应混合物，并且然后过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物用饱和NH4Cl水溶液(200mL)稀释并用EtOAc(200mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、过滤、在减压下浓缩并通过柱色谱法(硅胶，梯度洗脱：石油醚中的乙酸乙酯＝0％-5％)纯化，以提供2-(烯丙基氧基)-1-(2,3-二氟苯基)乙-1-酮(33.0g，62.5％产率)。
中间体I-3：2-(烯丙基氧基)-1-(2,3-二氟苯基)乙-1-酮肟
向I-2(33.0g，156mmol，1.00eq)在乙醇(500mL)中的溶液中添加NH2OH.HCl(13.0g，187mmol，1.20eq)和乙酸钠(19.1g，233mmol，1.50eq)。将黄色溶液在60℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至20℃并过滤；将滤液在减压下浓缩以除去乙醇。将残余物用水(100mL)稀释并用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并在减压下浓缩，以给出2-(烯丙基氧基)-1-(2,3-二氟苯基)乙-1-酮肟(36.09g，粗品)，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
中间体I-4：6a-(2,3-二氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑
向2-(烯丙基氧基)-1-(2,3-二氟苯基)乙-1-酮肟(36.1g，159mmol，1.00eq)在二甲苯(500mL)中的溶液中添加氢醌(3.60g，32.7mmol，0.21eq)。将黄色溶液在120℃下搅拌24小时。将混合物冷却至20℃并过滤。将滤液在真空下浓缩以除去二甲苯。将残余物用MTBE(20mL)洗涤、过滤、在真空下干燥，以提供呈白色固体的I-4(11.69g，32％产率)。1H NMR(CDCl3 400MHz TMS):δ7.67(bs,1H),7.15-7.06(m,2H),5.11(s,1H),4.54(bs,1H),4.20-4.14(m,1H),4.00(d,J＝9.6Hz,1H),3.93-3.85(m,2H),3.58(t,J＝8.0Hz,1H),3.43(q,J＝7.2Hz,1H)。
中间体I-5：6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑
使用与用于合成I-4相似的程序制备6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑，其具有对应于I-2和I-3的中间体。从1-溴-2-氟苯和I-1合成对应于I-2的中间体。
中间体I-6：(+)-(3aS,6aS)-6a-(2,3-二氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑
通过SFC(超临界流体色谱)分离I-4(±)6a-(2,3-二氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑(23.38g)的两种对映异构体。SFC分离条件：仪器：SFC-6。柱：AD(250mm×50mm，10um)。流动相：A：超临界CO2，B：碱-IPA，A:B＝75:25，以200mL/min。柱温：40℃。喷嘴压力：100巴。喷嘴温度：60℃。蒸发器温度：20℃。微调器温度：25℃。波长：220nm。
获得(+)-I-6：(3aS,6aS)-6a-(2,3-二氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑10.41g。1H NMR(DMSO-d6 400MHz TMS):δ7.62-7.52(m,1H),7.41-7.30(m,1H),7.24-7.12(m,1H),6.23(s,1H),4.31(bs,1H),4.01-3.84(m,4H),3.67(dd,J＝10.0,2.4Hz,1H),3.45(bs,1H)。SFC:tR＝1.40。[α]20,D+19.87(c＝0.20，乙醇)。
中间体I-7：(+)-(3aS,6aS)-6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑
通过SFC(超临界流体色谱)分离I-5(±)6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑(21.6g)的两种对映异构体。SFC分离条件：柱：AD(250mm×50mm，10um)。流动相：A：超临界CO2，B：中性-EtOH，A:B＝55:45，以200mL/min。柱温：38℃。喷嘴压力：100巴。喷嘴温度：60℃。蒸发器温度：20℃。微调器温度：25℃。波长：220nm。收集两个峰并将其浓缩以给出I-7(+)-(3aS,6aS)-6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑(9.53g，85％产率)和(-)-(3aR,6aR)-6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑(9.53g，84％产率)。
I-7(3aS,6aS)-6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑：1H NMR(DMSO-d6,400MHz,TMS):δ7.78(t,J＝7.7Hz,1H),7.38-7.28(m,1H),7.25-7.11(m,2H),6.13(s,1H),4.40-4.22(m,1H),4.01-3.89(m,2H),3.86(dd,J＝2.8,9.6Hz,1H),3.66(dd,J＝2.9,9.9Hz,1H),3.52-3.39(m,1H),3.32-3.24(m,1H)。SFC:tR＝3.02min。[α]20,D+29.14(589nm，c＝0.103，乙醇)。
中间体I-8a:((3R,4S)-4-氨基-4-(2-氟苯基)四氢呋喃-3-基)甲醇
将85mL在THF中的氢化铝锂(85mmol)添加至100mL THF中，并将混合物冷却至-5℃。逐滴添加在100mL THF中的I-7(+)-(3aS,6aS)-6a-(2-氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后在室温下搅拌30分钟。将反应混合物冷却至0℃，并通过添加6.5mL水淬灭。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。添加3.24mL 15％NaOH。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。添加16.2mL水。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。添加25g硫酸钠。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，通过硅藻土过滤并在真空中浓缩。不经进一步纯化用于下一步骤。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.53(td,J＝8.1,1.7Hz,1H),7.33–7.27(m,1H),7.19–7.14(m,1H),7.09(ddd,J＝12.4,8.2,1.3Hz,1H),4.14(dd,J＝9.1,0.9Hz,1H),4.07(t,J＝8.7Hz,1H),4.00–3.90(m,3H),3.83(dd,J＝11.8,6.5Hz,1H),2.89–2.81(m,1H)。
以类似方式从(+)-I-6(+)-(3aS,6aS)-6a-(2,3-二氟苯基)四氢-1H,3H-呋喃并[3,4-c]异噁唑制备I-8b((3R,4S)-4-氨基-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-基)甲醇。
中间体I-9:苄基((3S,4R)-3-(2-氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸酯
在0℃，将氯甲酸苄酯(7.69g，42.8mmol)添加至碳酸钠(4.54g，42.8mmol)和I-8a((3R,4S)-4-氨基-4-(2-氟苯基)四氢呋喃-3-基)甲醇(9.05g，42.8mmol)在THF(160mL)和水(16mL)中的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加饱和碳酸氢钠(水溶液):水的1:3混合物。将混合物用乙酸乙酯和THF进行萃取。将合并的有机相用盐水洗涤、经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗物质经由急骤色谱在硅胶上纯化，以给出I-9苄基((3S,4R)-3-(2-氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸酯(14.0g，94％产率)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.76(t,J＝7.9Hz,1H),7.39–7.27(m,6H),7.15(t,J＝7.5Hz,1H),7.04(ddd,J＝12.3,8.1,1.2Hz,1H),6.37(bs,1H),5.02(dd,J＝33.8,12.3Hz,2H),4.25(q,J＝9.7Hz,2H),4.05(t,J＝8.6Hz,1H),3.83–3.71(m,2H),3.59(t,J＝8.2Hz,1H),3.24–3.12(m,2H)。
中间体I-10：((3S,4S)-3-(2-氟苯基)-4-甲酰基四氢呋喃-3-基)氨基甲酸苄酯
将DMP(戴斯-马丁过碘烷)(27.5g，64.7mmol)添加至在二氯甲烷(67mL)中的I-9:苄基((3S,4R)-3-(2-氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸酯中。将反应混合物在室温下搅拌2 1/2小时。添加硫代硫酸钠(38g)和饱和碳酸氢钠(水溶液)。将反应混合物在室温下搅拌1 1/2小时。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤、经硫酸镁干燥并在真空中浓缩以给出I-10((3S,4S)-3-(2-氟苯基)-4-甲酰基四氢呋喃-3-基)氨基甲酸苄酯(15.4g)。不经任何进一步纯化而用于下一步骤中。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.88(s,1H),7.55–7.48(m,1H),7.39–7.23(m,6H),7.21–7.15(m,1H),7.09(dd,J＝11.9,8.4Hz,1H),5.89(s,1H),5.04–4.89(m,2H),4.41–4.33(m,2H),4.24(d,J＝7.9Hz,1H),4.16–4.07(m,1H),3.82–3.76(m,1H)。
中间体I-11:(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
将(S)-2-(双(3,5-双(三氟甲基)苯基)((三甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷(2.26g，3.79mmol)添加至在叔丁基甲基醚(125mL)中的((3S,4S)-3-(2-氟苯基)-4-甲酰基四氢呋喃-3-基)氨基甲酸苄酯(5.2g，15.14mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。添加NFSi(N-氟-N-(苯基磺酰基)苯磺酰胺)(6.69g，21.2mmol)并将反应混合物在40℃下搅拌6小时。然后添加(S)-2-(双(3,5-双(三氟甲基)苯基)((三甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷(1g，1.67mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加三乙胺(11.60mL,83mmol)、2-(二乙氧基磷酰基)-2-氟乙酸乙酯(8.19mL，36.3mmol，90％)、氯化锂(1.052g，24.82mmol)和乙腈(125mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并在真空中浓缩。通过急骤色谱在硅胶上纯化粗产物(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)。将中间体溶解于甲醇(70mL)中。添加碳载钯(10％，0.6g)，并将反应混合物在室温下在2.8巴氢压下搅拌过夜。将反应混合物过滤并添加碳酸钾(1.44g，10.4mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜并在真空中浓缩。添加水并将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过急骤色谱在硅胶上(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)纯化，以给出作为非对映异构体的混合物的(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(1.72g，41.9％产率)。LC-MS(m/z)272.1(MH+)；tR＝0.75(方法B)。
中间体I-12:(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
将二碳酸二叔丁酯(1.64g，7.51mmol)和DMAP(N,N-二甲基吡啶-4-胺)(0.039g，0.32mmol)添加至在乙腈(100mL)中的(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(1.72g，6.34mmol)中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜并在真空中浓缩。将粗产物通过急骤色谱在硅胶上(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)纯化，以给出作为非对映异构体混合物的(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(1.93g，82％产率)。LC-MS(m/z)272.1(MH+-Boc)；tR＝0.46(方法B)
中间体I-13：(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯和I-14：(3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在-78℃，将LiHMDS(双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂)(在THF中1M，28.5mL，28.5mmol)逐滴添加至在THF(100mL)中的I-12(4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(4.24g，11.4mmol)中。将反应混合物在-78℃下搅拌2小时。添加碘甲烷(3.7mL，60mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，并用饱和氯化铵(水溶液)淬灭。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过急骤色谱在硅胶上(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)纯化，以给出I-13：(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(1.86g，42％产率)。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.44(td,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.37(dddd,J＝7.4,6.8,4.9,1.6Hz,1H),7.23–7.18(m,1H),7.10(ddd,J＝12.3,8.2,1.2Hz,1H),5.08(d,J＝10.9Hz,1H),4.26–4.16(m,2H),4.09(ddd,J＝21.1,10.6,1.8Hz,1H),2.79–2.61(m,2H),1.78(dd,J＝23.0,0.9Hz,3H),1.23(s,9H)。
和I-14：(3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(0.95g，22％产率)。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.46(td,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.38–7.33(m,1H),7.21–7.17(m,1H),7.10(ddd,J＝12.3,8.2,1.2Hz,1H),5.06(dd,J＝10.7,0.9Hz,1H),4.22(dd,J＝10.8,0.9Hz,1H),4.07(dd,J＝16.3,9.8Hz,1H),3.96(t,J＝9.7Hz,1H),2.90–2.81(m,1H),2.53(ddd,J＝33.4,31.3,15.6Hz,1H),1.73(d,J＝22.1Hz,3H),1.28(s,J＝6.8Hz,9H)。
中间体I-15：(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟-5-硝基苯基)-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
将I-13：(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟苯基)-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(1.86g，4.83mmol)悬浮于三氟乙酸(TFA)(9.3mL)中。将混合物冷却至0℃，并添加浓硫酸(2.0mL，37mmol，97％)。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟。逐滴添加硝酸(0.37mL，5.3mmol，在水中65％)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。逐滴添加硝酸(0.37mL，5.3mmol，在水中65％)。将反应混合物在室温下搅拌20分钟。逐滴添加硝酸(0.37mL，5.3mmol，在水中65％)。将反应混合物在室温下搅拌60分钟，倾倒在冰上并使用5MNaOH(水溶液)碱化至pH>11。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤、经硫酸镁干燥并在真空中浓缩以给出(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟-5-硝基苯基)-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(1.6g，定量的)。不经进一步纯化用于下一步骤。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.40(dd,J＝6.6,2.8Hz,1H),8.32(ddd,J＝8.9,4.0,2.8Hz,1H),7.33(dd,J＝11.0,9.0Hz,1H),6.77(bs,1H),4.74(dd,J＝10.0,1.4Hz,1H),4.46(dd,J＝27.3,11.0Hz,1H),4.24(dd,J＝25.7,11.2Hz,1H),4.15(dd,J＝10.0,1.5Hz,1H),2.78–2.69(m,1H),2.54(ddd,J＝28.6,15.3,13.1Hz,1H),1.63(d,J＝23.0Hz,3H),1.59(d,J＝7.3Hz,9H)。
中间体I-16：(3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟-5-硝基苯基)-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
与I-15类似从I-14开始制备I-16：(3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟-5-硝基苯基)-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.43(ddd,J＝6.6,2.7,1.7Hz,1H),8.28(ddd,J＝8.9,4.1,2.8Hz,1H),7.31–7.27(m,1H),6.55(bs,1H),4.53(d,J＝10.3Hz,1H),4.31–4.24(m,1H),4.19–4.10(m,2H),2.91(ddd,J＝20.8,15.7,12.7Hz,1H),2.42(ddd,J＝33.6,24.1,15.7Hz,1H),1.62(d,J＝22.9Hz,3H),1.59(s,9H)。
中间体I-18a：(3-((3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯
将碳酸钾(2.52g，18.26mmol)和连二亚硫酸钠(6.36g，36.5mmol)溶解于水(33mL)中。使溶液在冰/水浴上冷却。逐滴添加在乙醇(32.0mL)中的I-15(3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-7a-(2-氟-5-硝基苯基)-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(2.01g，6.09mmol)，温度保持在10℃-15℃之间。允许混合物温至室温并搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩。添加乙酸乙酯和THF。将混合物经硫酸钠干燥、过滤并在真空中浓缩以给出I-17。将I-17溶解于THF(40mL)中。添加二碳酸二叔丁酯(2.04g，9.32mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3天。添加二碳酸二叔丁酯(1.4g，6.4mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌90分钟。添加二碳酸二叔丁酯(1.4g，6.4mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩。添加盐水/水的1:1混合物。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过急骤色谱在硅胶上(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)纯化，以给出I-18：(3-((3R,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯(1.45g，54％产率)。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.46–7.35(m,2H),7.05(dd,J＝11.8,8.8Hz,1H),6.72(bs,1H),6.35(bs,1H),4.73(dd,J＝9.8,1.6Hz,1H),4.46(dd,J＝28.4,11.0Hz,1H),4.21(dd,J＝26.8,11.1Hz,1H),4.10(dd,J＝9.9,1.4Hz,1H),2.70–2.50(m,2H),1.67(d,J＝23.0Hz,3H),1.51(s,9H)。
中间体I-18b：(3-((3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯
与I-18a类似从I-16开始制备I-18b：(3-((3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),7.19(dd,J＝6.6,2.1Hz,1H),7.05(dt,J＝8.6,6.5Hz,1H),6.58(s,1H),6.13(d,J＝2.9Hz,1H),4.58(d,J＝10.1Hz,1H),4.23(ddd,J＝20.1,10.1,2.2Hz,1H),4.16–4.10(m,1H),4.02(dd,J＝10.0,3.6Hz,1H),2.86(ddd,J＝18.9,15.2,13.5Hz,1H),2.40(ddd,J＝28.7,23.2,15.3Hz,1H),1.64(d,J＝22.9Hz,3H),1.50(s,J＝3.4Hz,9H)。
中间体I-20b：(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮
将劳氏试剂(505mg，1.25mmol)添加至在甲苯(40mL)中的I-18b(3-((3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.25mmol)的溶液中，在70℃下搅拌4小时，然后在室温下搅拌过夜。添加劳氏试剂(50mg，0.13mmol)，并将反应混合物在70℃搅拌3小时。将混合物浓缩。将残余物通过硅胶急骤色谱(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷)纯化以给出I-19b(497mg)。将三氟乙酸(5mL)添加至在二氯甲烷(5mL)中的I-19b(497mg，1.193mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物用2M NaOH(水溶液)碱化并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过急骤色谱在硅胶上(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)纯化，以给出I-20b(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮(203mg，54％)。LC-MS(m/z)317.1(MH+)；tR＝0.38分钟(方法A)。
以类似的方式从I-18a：(3-((3S,4aR,7aS)-3,4a-二氟-3-甲基-2-氧代六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯制备I-20a(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮。
中间体I-21：((3S,4R)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯
将I-8b((3R,4S)-4-氨基-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-基)甲醇(11.93g，粗品)和Boc2O(12.50g，57.26mmol)在THF(45mL)中的溶液在60℃搅拌16h。将混合物浓缩。将残余物通过硅胶急骤色谱(0-50％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化，以给出((3S,4R)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(15.0g，45.6mmol，88％产率，经两个步骤)。LC-MS(m/z)274.0(MH+-t-Bu)；tR＝0.65分钟(方法B)。
中间体I-22：(3S,4S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-甲酸
将((3S,4R)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(26.00g，78.95mmol)、NaIO4(67.54g，315.78mmol)和RuCl3(164mg，0.789mmol)在CCl4(250mL)、MeCN(250mL)和水(375mL)中的混合物在15℃搅拌3h。将混合物用EtOAc(500mL)稀释并用盐水(3×200mL)洗涤，经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以给出(3S,4S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-甲酸(26.31g，粗品)，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS(m/z)278.1(M-H+)；tR＝0。745分钟(方法B)。
中间体I-22：((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-羰基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在10℃，向粗品(3S,4S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-甲酸(26g)、DMAP(13.88g，113.60mmol)和EDC(21.78g，113.6mmol)在THF(1.25L)中的溶液中添加(3S,4S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(2,3-二氟苯基)四氢呋喃-3-甲酸(14.19g，98.45mmol)。将混合物在10℃搅拌5h。将混合物过滤并浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷(600mL)中。将溶液用水(2×300mL)和盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以给出粗品((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-羰基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(36g)，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS(m/z)468.1(M-H+)；tR＝1.206分钟(方法E)
中间体I-24：((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-((2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在15℃，在2h期间，按6部分向粗品((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-羰基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(36g)在AcOH(200mL)中的溶液中添加NaBH4(14.49g，383.12mmol)。将混合物在15℃搅拌8h。将反应用水(800mL)淬灭并用二氯甲烷(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1000mL)洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以给出粗品((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-((2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(34.90g)，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS(m/z)454.2(M-H+)；tR＝1.08分钟(方法E)。
中间体I-25：(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯
将粗品((3S,4S)-3-(2,3-二氟苯基)-4-((2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(34.90g)在HCl/MeOH(250mL，4.0M)和MeOH(250mL)中的溶液在15℃搅拌3h。将混合物在真空中浓缩。将残余物溶于MeOH(500mL)和Et3N(38.8g，383mmol)中并在65℃在Ar下搅拌16小时。将混合物浓缩。向残余物中添加二氯甲烷(200mL)。将混合物过滤并浓缩。将残余物通过硅胶急骤色谱(0-100％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化以给出(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯(15.27g，49.06mmol)。LC-MS(m/z)312.1(MH+)；tR＝0.648分钟(方法F)
中间体I-26：(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯
在15℃，向(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯(3.00g，9.64mmol)在THF(40mL)中的溶液中添加NFSi(4.56g，14.46mmol)和DBU(2.20g，14.46mmol)。将反应在15℃下搅拌16小时。将混合物过滤并浓缩以给出粗品(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯(6.00g)，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。LC-MS(m/z)328.0(M-H+)；tR＝1.516分钟(方法E)。
中间体I-27：(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(羟基甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
在20℃，按部分向粗品(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-2-氧代八氢呋喃并[3,4-b]吡啶-3-甲酸甲酯(6.00g)在MeOH(100mL)中的溶液中添加NaBH4(6.89g，182.20mmol)。将反应在20℃下搅拌20小时。将另外的NaBH4(3.00g)按部分添加至反应中。将反应在20℃下搅拌20小时。将混合物浓缩。向混合物中添加水(150mL)。将混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并浓缩。将残余物与相同规模的另一批次通过硅胶急骤色谱(0-10％MeOH/二氯甲烷的洗脱液)纯化以给出(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(羟基甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(4.99g，16.6mmol)。
中间体I-28：(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
在15℃，向(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(羟基甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(4.50g，14.94mmol)和NfF(1,1,2,2,3,3,4,4,4-壬氟丁烷-1-磺酰氟)(36.10g，119.5mmol)在THF(100mL)中的溶液中添加Et3N(18.14g，179.2mmol)。将反应在15℃搅拌16小时。添加TBAF(1.0M，8.97mL)(1.0M，在THF中)，并将反应混合物在50℃搅拌20小时。向混合物中添加水(150mL)。将混合物用乙酸乙酯(4×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶急骤色谱(0-50％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化以给出(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(2.46g，8.11mmol，54％产率)。LC-MS(m/z)304.1(MH+)；tR＝0.657-0.706分钟(方法F)
中间体I-29：(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟-5-硝基苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮
在0℃，向(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(2.50g，8.24mmol)在TFA(20.68g，181.4mmol)中的溶液中逐滴添加H2SO4(6.23g，63.5mmol)和HNO3(60％，2.60g，24.7mmol)。将混合物在0℃搅拌2小时，然后温至15℃并搅拌20小时。将反应溶液倾倒入碎冰(300mL)中，并且对于上述混合物，用NaOH(5％水溶液)将pH调节至11。将混合物用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以给出粗品(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟-5-硝基苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(2.50g)。
中间体I-31：(4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮
将粗品(4aS,7aS)-7a-(2,3-二氟-5-硝基苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-酮(2.50g)和劳氏试剂(1.71g，4.23mmol)在甲苯(40mL)中的溶液在N2下在110℃搅拌2小时。将混合物浓缩。通过硅胶急骤色谱(0-30％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化残余物以给出I-30(2.6g)。将I-30(2.6g)、Fe粉(1.99g，35.6mmol)和NH4Cl(1.90g，35.6mmol)在EtOH(40mL)和水(10mL)中的混合物在25℃搅拌4小时。经硅藻土层过滤混合物。将滤液浓缩。向残余物中添加二氯甲烷(100mL)。将混合物过滤并将滤液浓缩。将残余物通过硅胶急骤色谱(0-50％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化以给出(4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮(1.80g，5.38mmol)。LC-MS(m/z)335.1(MH+)；tR＝0.689分钟，0.703分钟(方法F)
中间体I-32a和I-32b：(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮
将I-31(4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮(1.80g，5.38mmol)通过SFC(仪器：SFC 9，柱：AD(250mm×30mm，5μm，流动相：A：超临界CO2，B：EtOH(碱)，A:B＝60:40，以200mL/min，柱温：38℃；喷嘴压力：100巴，喷嘴温度：60℃，蒸发器温度：20℃，微调器温度：25℃，波长：220nm)纯化以给出(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮(1.03g，3.08mmol，57％产率)和(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮(520mg，1.56mmol，29％产率)。
I-32a(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮1H NMR(CDCl3 400MHz):δ8.23(s,1H),6.48-6.45(m,1H),6.32(t,J＝2.6Hz,1H),5.15-5.02(m,1H),4.80-4.61(m,1H),4.22(t,J＝7.2Hz,1H),4.12(d,J＝3.2Hz,2H),3.93(d,J＝9.2Hz,1H),3.73(s,2H),3.2-3.19(m,1H),2.75-2.71(m,1H),2.02-1.18(m,1H)。
I-32b(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮1H NMR(CDCl3 400MHz):δ8.26(s,1H),6.52-6.48(m,1H),6.28(t,J＝2.6Hz,1H),4.91-4.76(m,1H),4.66-4.46(m,1H),4.29-4.21(m,2H),4.12(dd,J＝9.6,7.6Hz,2H),4.06(t,J＝7.6Hz,2H),3.79(s,2H),3.19-3.13(m,1H),2.44-2.33(m,2H)。
以类似的方式用作为中间体I-8a的((3R,4S)-4-氨基-4-(2-氟苯基)四氢呋喃-3-基)甲醇开始制备(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮。
中间体：5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸甲酯
在氩气下，将5-羟基吡啶甲酸甲酯(2.88g，18.8mmol)溶解于二甲基甲酰胺(108ml)中。添加碳酸钾(7.20g，52.1mmol)并将橙色悬浮液在室温下搅拌45分钟。添加碘代甲烷-d3(1.41ml，22.6mmol)。将反应混合物搅拌2小时。添加水。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩，并通过柱色谱在硅胶上(庚烷:乙酸乙酯)进行纯化以给出5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸甲酯。LC-MS(m/z)171.1(MH+)；tR＝0.35(方法B)
中间体：5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸
将5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸甲酯(200mg，1.175mmol)溶解于水(1.5ml)和1,4-二噁烷(3ml)中。添加氢氧化锂(70.4mg，2.94mmol)，并且将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物蒸发至约2ml，并且用乙醚萃取。将有机相用1M NaOH萃取，并且用6N HCl(水溶液)将合并的水相酸化至pH 2。在冰浴上冷却混合物，并且形成沉淀物。收集沉淀物以给出5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸。LC-MS(m/z)157.0(MH+)；tR＝0.20(方法B)
中间体：甲基-d3-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸酯
将钠(0.094g，4.10mmol)小部分地添加至甲醇-d4(2.94ml)，并将反应混合物进行搅拌直到所有钠已经反应。将溶液添加至甲基-5-氯吡嗪-2-甲酸酯(0.6g，3.48mmol)在甲醇-d4(0.98ml)中的另一溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物在真空中浓缩。添加2ml的水。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤、经MgSO4干燥、并在真空中浓缩以给出甲基-d3-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸酯。LC-MS(m/z)175.1(MH+)；tR＝0.49(方法A)
中间体：5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸
将甲基-d3-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸酯(424mg，2.43mmol)溶解于水(3ml)和1,4-二噁烷(3ml)中。添加氢氧化锂(146mg，6.09mmol)，并且将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物蒸发至约2ml，并且用乙醚萃取。将有机相用1M NaOH萃取，并且用6N HCl(水溶液)将合并的水相酸化至pH 2。将混合物在冰浴上冷却，并收集固体化合物以给出5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸。LC-MS(m/z)158.1(MH+)；tR＝0.27(方法A)
立体化学
中间体I-32a(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和I-32b(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的相对立体化学通过二维1H–19FHOESY(杂核核欧沃豪斯效应光谱(heteronuclear nuclear Overhauser effectspectroscopy))指定(图1)。对于I-32a，在F(A)(δ-154)和H(B)(δ3.2-3.19)之间以及在F(A)(δ-154)和H(D)(δ6.32)之间观察到nOe(核欧沃豪斯效应)信号。对于I-32b，在F(E)(δ-231)和H(B)(δ3.19-3.13)之间以及在F(E)(δ-231)和H(D)(δ6.28)之间观察到nOe(核欧沃豪斯效应)信号，并且在F(A)(δ-150)和H(C)(δ4.06)之间也观察到nOe信号。
图1.I-32a(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和I-32b(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的1H–19F HOESY中的nOe
通过类比指定中间体(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的相对立体化学。
中间体I-20a(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的相对立体化学通过2D ROESY(旋转坐标系核欧沃豪斯效应光谱(rotating frame nuclear Overhauser effect spectroscopy))指定(图2)。在H(A)(δ1.63)和H(B)(δ2.44)之间、在H(A)(δ1.63)和H(C)(δ6.49)之间以及在H(B)(δ2.44)和H(C)(δ6.49)之间观察到nOe信号。因此甲基基团和苯基环必须位于硫代内酰胺环的相同侧。其结果是，也能确认中间体I-20b：(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的相对立体化学。
图2.I-20a(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮的ROESY中的nOe
BACE抑制剂的制备
实例1N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺
将HATU(1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸酯)(313mg，0.822mmol)添加至在DMF(10ml)中的5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸(128mg，0.822mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌10分钟。添加I-20b(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮，接着添加DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)(0.55mL)，并将反应混合物在室温下搅拌3天。添加饱和的氯化铵(水溶液)。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。添加在甲醇(15mL，105mmol)中的7M氨，并且将反应混合物在密封小瓶中在55℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，并且将其在真空中浓缩。通过急骤色谱在硅胶上纯化粗产物(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯)。通过以下程序进一步纯化产物：将产物溶解于乙酸乙酯(50mL)中并用饱和NaHCO3水溶液/水(1/1)的溶液洗涤。将有机相共洗涤10次(每次使用10mL)。将有机相经MgSO4干燥、过滤并蒸发以给出N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.84(s,1H),8.27–8.25(m,1H),8.25–8.23(m,1H),7.85(ddd,J＝8.7,4.0,2.8Hz,1H),7.70(dd,J＝6.7,2.7Hz,1H),7.34(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.08(dd,J＝11.6,8.8Hz,1H),4.74(d,J＝9.0Hz,1H),4.22–4.09(m,2H),3.97(dd,J＝9.0,1.9Hz,1H),2.67–2.57(m,1H),2.41(dd,J＝12.7,3.3Hz,1H),1.82(d,J＝24.6Hz,3H)。LC-MS(m/z)437.438(MH+)；tR＝0.48(方法A)
以与实例1的化合物类似的方式制备以下化合物：
实例2N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺
从(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.70(s,1H),8.74(d,J＝2.9Hz,1H),8.23(dd,J＝8.7,4.6Hz,1H),7.99(td,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.91–7.88(m,2H),7.12(dd,J＝11.7,9.6Hz,1H),6.09(s,2H),4.50(d,J＝8.8Hz,1H),4.16(dt,J＝20.0,10.0Hz,1H),3.90(dd,J＝25.4,10.8Hz,1H),3.83(d,J＝9.7Hz,1H),2.58–2.51(m,2H),1.68(d,J＝24.2Hz,3H)。LC-MS(m/z)422.37(MH+)；tR＝0.5(方法A)。
实例3N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺
从(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.99(s,1H),9.40(d,J＝1.4Hz,1H),9.10(d,J＝0.9Hz,1H),7.95(dd,J＝7.1,2.6Hz,1H),7.92(ddd,J＝8.7,4.0,2.8Hz,1H),7.27(t,J＝54.0Hz,1H),7.16(dd,J＝11.8,8.8Hz,1H),6.12(s,2H),4.51(d,J＝8.9Hz,1H),4.17(dd,J＝17.2,10.7Hz,1H),3.91(dd,J＝25.2,10.7Hz,1H),3.84(dd,J＝8.8,1.3Hz,1H),2.61–2.52(m,2H),1.69(d,J＝24.2Hz,3H)。LC-MS(m/z)455.38(MH+)；tR＝0.47(方法A)。
实例4N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺
从(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.55(s,1H),8.40(dd,J＝2.9,0.5Hz,1H),8.14(dd,J＝8.7,0.5Hz,1H),7.92–7.87(m,2H),7.62(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),7.11(dd,J＝11.7,8.7Hz,1H),6.11(s,2H),4.52(d,J＝8.8Hz,1H),4.17(dd,J＝17.0,10.7Hz,1H),3.94(s,3H),3.95–3.87(m,1H),3.84(d,J＝8.5Hz,1H),2.58–2.51(m,2H),1.69(d,J＝24.2Hz,3H)。LC-MS(m/z)434.41(MH+)；tR＝0.49(方法A)。
实例5N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺
从(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.59(s,1H),8.90(d,J＝1.3Hz,1H),8.42(d,J＝1.3Hz,1H),7.90(dd,J＝7.1,2.6Hz,1H),7.87(ddd,J＝8.7,4.0,2.7Hz,1H),7.12(dd,J＝11.7,8.8Hz,1H),6.08(s,2H),4.50(d,J＝8.8Hz,1H),4.16(dd,J＝17.1,10.7Hz,1H),4.02(s,3H),3.90(dd,J＝25.4,10.8Hz,1H),3.83(d,J＝8.8Hz,1H),2.57–2.50(m,2H),1.68(d,J＝24.3Hz,3H)。LC-MS(m/z)435.4(MH+)；tR＝0.47(方法A)。
实例6N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺
从(3S,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氯吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.76(s,1H),8.79(dd,J＝2.4,0.7Hz,1H),8.20(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),8.16(dd,J＝8.4,0.7Hz,1H),7.93–7.89(m,2H),7.15–7.11(m,1H),6.11(s,2H),4.51(d,J＝8.9Hz,1H),4.17(dd,J＝17.0,10.7Hz,1H),3.91(dd,J＝25.3,10.8Hz,1H),3.86–3.81(m,1H),2.59–2.51(m,2H),1.69(d,J＝24.2Hz,3H)。LC-MS(m/z)438.83(MH+)；tR＝0.52(方法A)。
实例7N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.65(s,1H),8.88(d,J＝1.3Hz,1H),8.42(d,J＝1.3Hz,1H),7.83(dd,J＝7.1,2.6Hz,1H),7.82–7.78(m,1H),7.13(dd,J＝12.0,8.8Hz,1H),6.27(bs,2H),4.65(d,J＝7.5Hz,1H),4.11(dd,J＝28.0,10.7Hz,1H),4.02(s,3H),4.05–3.96(m,1H),3.89(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),2.49–2.41(m,1H),2.21(ddd,J＝27.9,14.9,12.7Hz,1H),1.66(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)435.4(MH+)；tR＝0.48(方法A)。
实例8N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.05(s,1H),9.39(d,J＝1.2Hz,1H),9.10(s,1H),7.91–7.82(m,2H),7.31(d,J＝54.0Hz,1H),7.18(dd,J＝11.8,8.8Hz,1H),6.31(bs,2H),4.66(d,J＝7.5Hz,1H),4.12(dd,J＝27.8,10.7Hz,1H),4.02(dd,J＝25.6,10.7Hz,1H),3.91(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),2.51(dt,J＝3.6,1.8Hz,1H),2.21(ddd,J＝14.8,13.9,9.5Hz,1H),1.68(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)455.38(MH+)；tR＝0.47(方法A)。
实例9N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-4-甲基噻唑-2-甲酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和4-甲基噻唑-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.88(s,1H),7.83–7.77(m,2H),7.70(d,J＝0.9Hz,1H),7.14(dd,J＝11.9,8.6Hz,1H),6.30(bs,2H),4.68–4.61(m,1H),4.11(dd,J＝28.1,10.7Hz,1H),4.01(dd,J＝25.7,10.7Hz,1H),3.90(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),2.51(s,3H),2.50–2.40(m,1H),2.19(ddd,J＝27.8,14.9,12.7Hz,1H),1.66(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)424.44(MH+)；tR＝0.48(方法A)。
实例10N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-2-甲基噁唑-4-甲酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和2-甲基噁唑-4-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.29(s,1H),8.65(s,1H),7.78(dd,J＝7.1,2.7Hz,1H),7.72(ddd,J＝8.7,3.9,2.8Hz,1H),7.11(dd,J＝12.0,8.8Hz,1H),6.29(bs,2H),4.65(dd,J＝8.3,1.1Hz,1H),4.11(dd,J＝28.6,10.7Hz,1H),4.01(dd,J＝25.8,10.7Hz,1H),3.90(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),2.52(s,3H),2.48–2.38(m,1H),2.26–2.12(m,1H),1.66(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)408.37(MH+)；tR＝0.41(方法A)。
实例11N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.61(s,1H),8.40(d,J＝2.8Hz,1H),8.13(d,J＝8.7Hz,1H),7.85(dd,J＝7.1,2.6Hz,1H),7.83–7.79(m,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.13(dd,J＝11.9,8.8Hz,1H),6.28(bs,2H),4.66(d,J＝7.8Hz,1H),4.11(dt,J＝27.0,9.1Hz,1H),4.01(dd,J＝25.8,10.7Hz,1H),3.94(s,3H),3.91(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),2.46(ddd,J＝14.7,10.6,3.3Hz,1H),2.23(ddd,J＝27.8,14.8,12.7Hz,1H),1.68(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)434.41(MH+)；tR＝0.49(方法A)。
实例12N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.78(s,1H),8.74(d,J＝2.8Hz,1H),8.23(dd,J＝8.8,4.6Hz,1H),7.98(td,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.85(t,J＝8.1Hz,2H),7.16(dd,J＝11.8,8.7Hz,1H),6.35(bs,2H),4.65(d,J＝7.6Hz,1H),4.12(dd,J＝27.1,10.7Hz,1H),4.01(dd,J＝25.4,10.7Hz,1H),3.97–3.90(m,1H),2.57–2.43(m,1H),2.33–2.17(m,1H),1.68(d,J＝22.9Hz,3H)。LC-MS(m/z)422.37(MH+)；tR＝0.5(方法A)。
实例13N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.65(s,1H),8.88(s,1H),8.41(d,J＝1.1Hz,1H),7.85–7.82(m,1H),7.82–7.79(m,1H),7.14(dd,J＝11.9,8.8Hz,1H),6.33(bs,2H),4.67–4.62(m,1H),4.15–4.07(m,1H),4.01(dd,J＝26.1,9.9Hz,1H),3.90(d,J＝8.2Hz,1H),2.50–2.40(m,1H),2.28–2.15(m,1H),1.66(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)438.42(MH+)；tR＝0.49(方法A)。
实例14N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺
从(3R,4aR,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3,4a-二氟-3-甲基六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氯吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.83(s,1H),8.79(d,J＝1.9Hz,1H),8.21–8.18(m,1H),8.16(d,J＝8.3Hz,1H),7.87–7.80(m,2H),7.15(dd,J＝11.9,8.6Hz,1H),6.29(bs,2H),4.66(d,J＝7.8Hz,1H),4.12(dd,J＝28.0,10.7Hz,1H),4.01(dd,J＝25.7,10.7Hz,1H),3.91(dd,J＝8.4,1.9Hz,1H),2.50–2.42(m,1H),2.22(ddd,J＝27.8,14.8,12.9Hz,1H),1.67(d,J＝22.8Hz,3H)。LC-MS(m/z)438.83(MH+)；tR＝0.53(方法A)。
实例15N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺
从(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.83(s,1H),8.26(dd,J＝2.8,0.5Hz,1H),8.22(dd,J＝8.7,0.5Hz,1H),7.91(ddd,J＝8.8,4.1,2.8Hz,1H),7.57(dd,J＝7.2,2.7Hz,1H),7.33(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.08(dd,J＝11.7,8.8Hz,1H),4.68–4.47(m,2H),4.34(dd,J＝9.1,1.6Hz,1H),4.19(dd,J＝8.3,7.1Hz,1H),4.00(dd,J＝9.1,1.8Hz,1H),3.94(s,3H),3.88(d,J＝6.2Hz,1H),2.90–2.83(m,1H),2.41–2.34(m,1H),2.18–2.08(m,1H)。LC-MS(m/z)434.412(MH+)；tR＝0.46(方法A)。
实例16N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺
从(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.80(s,1H),8.45(d,J＝2.7Hz,1H),8.32(dd,J＝8.7,4.5Hz,1H),7.90(ddd,J＝8.8,4.1,2.8Hz,1H),7.59(ddd,J＝9.2,7.4,2.7Hz,2H),7.10(dd,J＝11.7,8.8Hz,1H),4.68–4.48(m,2H),4.35(dd,J＝9.1,1.5Hz,1H),4.19(dd,J＝8.3,7.2Hz,1H),3.99(dd,J＝9.1,1.7Hz,1H),3.88(d,J＝7.6Hz,1H),2.90–2.82(m,1H),2.41–2.34(m,1H),2.13(ddd,J＝26.5,13.3,2.1Hz,1H)。LC-MS(m/z)422.376(MH+)；tR＝0.45(方法A)。
实例17N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺
从(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.87(s,1H),8.27-8.21(m,2H),8.04-8.00(m,1H),7.37(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.25-7.23(m,1H),4.68-4.45(m,2H),4.33(d,J＝9.6Hz,1H),4.20(t,J＝8.0Hz,1H),3.99(d,J＝9.2Hz,1H),3.95(s,3H),3.89(d,J＝8.4Hz,1H),2.85(d,J＝6.4Hz,1H),2.43-2.35(m,1H),2.13(q,J＝13.2Hz,1H)LC-MS(m/z)453.1(MH+)；tR＝1.95(方法C)。
实例18N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺
从(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.53(s,1H),9.01(s,1H),8.16(s,1H),8.03-7.98(m,1H),7.23-7.22(m,1H),4.70-4.46(m,2H),4.32(d,J＝9.2Hz,1H),4.19(t,J＝7.8Hz,1H),4.08(s,3H),3.98(d,J＝9.6Hz,1H),3.90(d,J＝8.0Hz,1H),2.84(d,J＝6.4Hz,1H),2.42-2.35(m,1H),2.14(q,J＝13.2Hz,1H)LC-MS(m/z)454.1(MH+)；tR＝1.92(方法C)。
实例19N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺
从(3S,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.87(s,1H),8.46(d,J＝2Hz 1H),8.33-8.30(m,1H),8.04-8.02(m,1H),7.61(td,J＝8.4,2.4Hz,1Hz),7.25(s,1H),4.67-4.55(m,2H),4.31(d,J＝9.2Hz,1H),4.21(t,J＝7.8Hz,1H),4.03(d,J＝9.2Hz,1H),3.90(d,J＝8.4Hz,1H),2.87(d,J＝6.8Hz,1H),2.44-2.37(m,1H),2.22-2.10(m,1H)LC-MS(m/z)444.1(MH+)；tR＝1.93(方法C)。
实例20N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.68(s,1H),8.74(d,J＝2.8Hz,1H),8.23(dd,J＝8.8,4.6Hz,1H),8.03–7.96(m,2H),7.91–7.86(m,1H),7.16(dd,J＝11.3,9.0Hz,1H),6.08(bs,2H),4.94(ddd,J＝48.8,17.2,11.2Hz,1H),4.73(ddd,J＝45.8,34.6,11.1Hz,1H),4.04(d,J＝8.7Hz,1H),3.93(t,J＝8.6Hz,1H),3.81(d,J＝7.2Hz,1H),3.72(d,J＝8.4Hz,1H),2.85(q,J＝8.7Hz,1H),2.36–2.25(m,1H),2.17–2.06(m,1H)。LC-MS(m/z)422.376(MH+)；tR＝0.48(方法B)。
实例21N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.53(s,1H),8.39(d,J＝2.9Hz,1H),8.13(d,J＝8.7Hz,1H),7.98(dd,J＝7.3,2.6Hz,1H),7.89(ddd,J＝8.7,4.0,2.8Hz,1H),7.62(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),7.14(dd,J＝11.5,8.9Hz,1H),6.08(bs,2H),4.94(ddd,J＝48.8,17.3,11.1Hz,1H),4.72(ddd,J＝46.0,34.6,11.1Hz,1H),4.06–4.01(m,1H),3.96–3.90(m,1H),3.93(s),3.84–3.78(m,1H),3.74–3.69(m,1H),2.88–2.82(m,1H),2.37–2.25(m,1H),2.17–2.07(m,1H)。LC-MS(m/z)434.41(MH+)；tR＝0.49(方法B)。
实例22N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-(甲氧基-d3)吡啶甲酸制备。1H NMR(600MHz,DMSO)δ10.56(s,1H),8.41–8.38(m,1H),8.14–8.11(m,1H),7.90–7.85(m,1H),7.76(dd,J＝7.3,2.4Hz,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.15(dd,J＝11.9,8.8Hz,1H),6.25(s,2H),4.83(ddd,J＝48.5,16.7,11.1Hz,1H),4.57(ddd,J＝46.2,31.6,11.0Hz,1H),4.23(d,J＝8.6Hz,1H),3.97(t,J＝8.0Hz,1H),3.85–3.80(m,1H),3.75–3.69(m,1H),2.83–2.76(m,1H),2.19–2.01(m,2H)LC-MS(m/z)438.1(MH+)；tR＝0.49(方法B)。
实例23N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-氟吡啶甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.86(s,1H),8.47(s,1H),8.35-8.32(m,1H),8.03(t,J＝8.6Hz,1H),7.63(t,J＝8.2Hz,1H),7.44(s,1H),5.06-4.76(m,2H),4.23-4.15(m,2H),3.91(t,J＝3.2Hz,2H),3.05(s,1H),2.46(d,J＝6.8Hz,1H),2.08-1.98(m,1H)LC-MS(m/z)444.1(MH+)；tR＝2.26(方法D)。
实例24N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡嗪-2-甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.54(s,1H),9.02(s,1H),8.16(s,1H),8.02(t,J＝8.2Hz,1H),7.42(s,1H),5.05-4.82(m,2H),4.22-4.14(m,2H),4.08(s,1H),3.91(t,J＝9.6Hz,2H),3.04(s,1H),2.45(d,J＝14.0Hz,1H),2.07-2.02(m,1H)LC-MS(m/z)454.1(MH+)；tR＝2.00(方法C)。
实例25N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺
从(3R,4aS,7aS)-7a-(5-氨基-2,3-二氟苯基)-3-氟-3-(氟甲基)六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2(1H)-硫酮和5-甲氧基吡啶甲酸制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.88(s,1H),8.27-8.23(m,2H),8.03(t,J＝9.6Hz,1H),7.42(s,1H),7.35(d,J＝8.8Hz,1H),5.06-4.06(m,2H),4.22-4.14(m,2H),3.95(s,3H),3.93-3.91(m,2H),3.04(s,1H),2.46(d,J＝13.6Hz,1H),2.08-2.00(m,1H)LC-MS(m/z)453.1(MH+)；tR＝2.04(方法C)
药理学测试
BACE1结合测定
如基于SPA的测定，使用从自由式HEK293细胞(Freestyle HEK293cell)重组表达并且随后纯化的、生物素化形式的人类BACE1进行结合测定。在白色清底384板(康宁公司(Corning)#3653)中于50mM乙酸钠缓冲液(pH 4.5)中运行结合测定，该缓冲液包含50mMNaCl和0.03％Tween-20。将10nM(终浓度)放射性配体([3H]-N-((1S,2R)-1-苄基-3-环丙基氨基-2-羟基-丙基)-5-(甲烷磺酰基-甲基-氨基)-N-((R)-1-苯基-乙基)-异酞酰胺)(购自GE医疗集团(GE Healthcare)的TRQ11569)与给定浓度的测试化合物、6nM(终浓度)人类BACE1和25μg链霉亲和素包衣的PVT核SPA珠粒(RPNQ0007，GE医疗集团生命科学部(GEHealthcare Life Sciences))混合，总体积为40μl。在测定中测试每种测试化合物的若干个浓度，用于确定IC50。将板在室温下孵育一小时并且在Wallac Trilux计数器中计数。分别使用缓冲液和1μM(终浓度)的高亲和力BACE1参比抑制剂(S)-6-[3-氯-5-(5-丙-1-炔基-吡啶-3-基)-噻吩-2-基]-2-亚氨基-3,6-二甲基-四氢-嘧啶-4-酮确定总的和非特异性的结合。对于每种测试化合物，IC50值(介导放射性配体的特异性结合的50％抑制的浓度)从浓度-反应曲线确定并用于从等式Ki＝IC50/(1+L/Kd)计算Ki，其中L和Kd分别是用于测定的放射性配体的终浓度和放射性配体的解离常数。放射性配体的Kd从饱和结合实验中确定。
表1：所选化合物的结合亲和力
BACE1功效测定
如基于FRET的测定，使用可商购的BACE1试剂盒(美国生命技术公司(LifeTechnologies)，P2985)进行功效测定。将2μl的10μM(终浓度)测试化合物和来自试剂盒的15μl BACE1酶(终浓度3nM)在室温下预孵育15分钟，之后添加来自该试剂盒的15μl底物(250nM终浓度)，并且在室温下再孵育90分钟。随后在Pherastar(Ex540/Em590)中对测定板进行读数。将在测试化合物存在下观察到的酶活性标准化为在缓冲液和10μM(终浓度)的高亲和力的BACE1参比抑制剂(S)-6-[3-氯-5(5-丙-1-炔基-吡啶-3-基)-噻吩-2-基]-2-亚氨基-3,6-二甲基-四氢嘧啶-4-酮存在下分别观察到的酶活性。测试化合物的功效在10μM(终浓度)下进行评估，并且被定义为酶活性的百分比抑制，其使用等式％抑制＝100％-以百分比计的标准化酶活性将。
表2：所选化合物的BACE1活性
BACE1抑制后，评价大鼠脑和血浆中的Aβ肽水平。
动物。
根据丹麦议会，所有大鼠护理和实验程序都被灵北(Lundbeck)兽医人员批准。将大鼠以12/12-h光暗循环养护在障碍设施中并且任意获取食物和水。
首试大鼠的处理。
大约250g重的年轻成年雄性斯普拉-道来(Sprague Dawley)大鼠购自查尔斯河公司(Charles River)并且仅通过口服灌胃(p.o)接受0-30mg/kg的运载体(10％HP βCD+1MMeSO4，pH 2.5)或测试化合物(溶解于运载体中)。以5ml/kg的体积给予化合物。对于每种处理条件，建立5-10只动物的组群。
由兽医人员密切监测经历处理的动物的任何中毒体征。监测参数包括体重、体态、皮毛(coat)外观的变化、无端行为的出现以及对外界刺激的迟钝或夸大反应。
组织收集。
在T＝初次给药后180分钟时，将动物打昏并用铡除刀断头。在将动物断头后，将躯干血取样于EDTA涂覆的管中。将血液在4℃下以2200G离心15分钟并收集血浆并且将其冷冻在-80℃下。将血液等分用于AβELISA和DMPK分析。处死后立即取出脑并将其分为两等份。将右半脑在干冰上快速冷冻并储存在-80℃下。将左半部分解剖；其中取额前脑用于进行AβELISA并且剩余部分用于进行DMPK分析。也将这些样品在干冰上快速冷冻并储存在-80℃下，直到分析使用。
组织加工。
在将皮层样品用速度设定为5的小容量分散仪(T10基础(basic)ULTRA-)均质化5-7sec之前，将其在湿冰上稍微解冻。将组织在其重量的10倍体积的缓冲液中加工，例如将100mg的组织在1000μL的均质化缓冲液中均质化。均质化缓冲液：50ml Milli Q水+50nM NaCl+0.2％二乙胺(DEA)+1片完全蛋白酶(Complete Protease)抑制剂混合物+1nM 4-(2-氨基乙基)苯磺酰氟盐酸盐不可逆丝氨酸蛋白酶抑制剂(AEBSF)。
均质化后，将样品的450μL等分试样收集在1.5ml埃彭道夫管(Eppendorf tube)中并放置在湿冰上，将0.5％NP-40(50ul)添加至所有样品中并且然后将其在冰上孵育30min。其后，使用具有20kHz匀声的超声匀浆器(SONOPLUS HD2070，班德林电子公司(BandelinElectronic))(10脉冲设定在12％-13％功率)超声处理所有样品以提取所有Aβ种类。然后，将样品在4℃下以20000G离心(Ole Dich 157MPRF微量离心机)20分钟。离心后，将285μL的上清液用移液管吸取到600μL微管中并用15μL的1M Tris-HCL缓冲液中和。
ELISA方案。
使用WAKO 294-62501人类/大鼠Aβ淀粉样蛋白(40)试剂盒进行所有ELISA分析。将如上所描述产生的30μL血浆样品或30μL的皮层上清液置于在湿冰上的600μL微管中。向其中添加30μL的8M脲(艾普力(AppliChem)A1049，9025)，以产生2倍稀释。将血浆和皮层上清液两者都在冰上孵育30min。从在试剂盒中提供的标准肽储备液和标准稀释液制备标准品行，该标准稀释液包含1.6M脲(200μL8M脲+800μL的标准稀释液)和0.8M脲(400μL 8M脲+3600μL标准稀释液)。制备从100pmol/ml至0pmol/L的Aβ40的连续2倍稀释用于进行测定。
在用脲孵育之后，通过添加5倍的来自试剂盒的标准稀释液进一步稀释所有样品。这通过将240μL标准稀释液添加至60μL样品/脲混合物中然后将其充分混合来进行。将100μL的每种稀释样品一式两份地用移液管吸取到ELISA板的指定孔中。然后将板覆盖并在4℃下孵育过夜。第二天，在使用之前使ELISA试剂盒回至室温。将孵育板用稀释于Milli Q水中的20x洗涤溶液洗涤5次。将100μL HRP-偶联物应用于每个孔中，并且将板覆盖且在4℃下孵育1hr。再次重复洗涤5次。将100μL 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)溶液施加至每个孔中并且将板覆盖并在室温下于黑暗中孵育30分钟。接下来，将100μL终止溶液施加至每个孔中，并且在将终止溶液添加至孔中的30min内，将板在分光光度计(实验室系统酶标仪(Labsystems Multiscan Ascent))中于450nm波长下进行读数。
基于从包含已知浓度的合成Aβ40的标准品生成的标准曲线来确定样品中的Aβ浓度。本领域的普通技术人员将理解的是，二乙胺(DEA)和脲萃取将分别释放可溶性Aβ和不可溶性Aβ。由于ELISA试剂盒是经过验证且广泛使用的，所以可接受的是只要对于每种测试化合物而言处理条件和测定条件相同，则测定应该针对测试的化合物产生一致的稳健数据并产生最小差异。
数据分析
为了确定样品中的Aβ40肽浓度，将装载在板上的样品的内插值乘以20以解释当DEA、脲和中和溶液的体积累加时产生的稀释。将值计算为与运载体处理的动物相比的Aβ40肽的百分比变化。
下面将如上所述在给药后3小时以及然后在暴露后收集的脑和血浆样品的、以10mg/kg和10mg/kg p.o.的剂量给予实例1、2、5、7和22的代表性化合物的结果制成表格。
表3：实例1的结果
表4：实例2的结果
表5：实例5的结果
表6：实例7的结果
表7：实例22的结果
如表3至表7中所示，本发明的化合物能够穿透血脑屏障并且显示在CNS中的功效。
MDCK-MDR1测定
在MDCK-MDR1细胞中评估测试化合物的渗透性，将这些细胞在96transwell板中培养至融汇(confluency)(4-6天)。用转运缓冲液(HBSS+1％BSA)将测试化合物稀释至0.5μM的浓度并应用于细胞单层的顶侧或基底外侧。在37℃和5％CO2与95％的相对湿度下，经60分钟的孵育时间，一式三份确定从A至B方向或从B至A方向的测试化合物的渗透。基于transwell板的受体孔和供体孔中分析物/IS的峰面积比，通过LC-MS/MS分析来量化测试化合物。
使用以下等式计算表观渗透性系数Papp(cm/s)：
Papp＝(dCr/dt)x Vr/(Ax C0)
其中dCr/dt是受体室中化合物的累积浓度作为时间的函数(μM/s)；Vr是受体室中的溶液体积(顶侧上0.05mL；基底外侧上0.25mL)；A是运输的表面面积，即针对单层的面积为0.0804cm2；C0是供体室中的初始浓度(μM)。
当外排比(Papp BA/Papp AB)是≥2时，将化合物归类为Pgp底物。
表7：所选化合物的外排比
如表7中所示，本发明的大部分示例性化合物具有低于2的MDCK-MDR1外排比并且因此可能能够穿过血脑屏障(E Kerns、L Di，Drug-like Properties:Concepts,StructureDesign and Methods[类药属性：概念、结构化设计和方法](2008)爱思唯尔公司(Elsevier))。

Claims (18)

1.一种具有式I的化合物
其中Ar选自下组，该组由以下各项组成：苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基和异噁唑基，并且其中Ar任选地被选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下各项组成：卤素、CN、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6氟烷基和C1-C6烷氧基；
R1选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
R2选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C1-C3烷基和C1-C3氟烷基；
R3选自氢或卤素；
R4选自C1-C3烷基或C1-C3氟烷基；
或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式Ia
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1是F并且R2是氢。
4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1和R2是F。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中R3选自氢或F。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R4选自甲基或氟甲基。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的化合物，其中R3是氢并且R4是C1-C3氟烷基。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中Ar被选自F、Cl、C1-C3烷氧基或C1-C3氟烷基的取代基取代。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中Ar是吡啶基。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中Ar是吡嗪基。
11.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中Ar是噻唑基。
12.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中Ar是噁唑基。
13.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自下组，该组由以下各项组成：
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(二氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-4-甲基噻唑-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-2-甲基噁唑-4-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(3-((3R,4aR,7aS)-2-氨基-3,4a-二氟-3-甲基-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氯吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺、
N-[3-[(3R,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-氟吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5,7,7a-六氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-甲氧基吡啶酰胺、
N-(3-((3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-3,4,4a,5-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基)-4-氟苯基)-5-(甲氧基-d3)吡啶酰胺、
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酰胺、
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲酰胺，和
N-[3-[(3S,4aS,7aS)-2-氨基-3-氟-3-(氟甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-b]吡啶-7a-基]-4,5-二氟-苯基]-5-甲氧基-吡啶-2-甲酰胺，
或其药学上可接受的盐。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物，用于在疗法中使用。
15.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-13中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
16.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物在制造用于治疗疾病的药物中的用途，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征和大脑淀粉样血管病。
17.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物，用于在治疗疾病的方法中使用，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征和大脑淀粉样血管病。
18.一种用于治疗疾病的方法，该疾病选自阿尔茨海默病(家族性或散发性)、临床前阿尔茨海默病、前驱阿尔茨海默病、轻度认知损害、唐氏综合征和大脑淀粉样血管病，该方法包括向对其有需要的患者给予治疗有效量的根据权利要求1-13中任一项所述的化合物。
CN201680045232.6A 2015-08-12 2016-08-10 Bace1抑制剂2‑氨基‑7a‑苯基‑3,4,4a,5,7,7a‑六氢呋喃并[3,4‑b]吡啶 Pending CN107849056A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA201500466 2015-08-12
DKPA201500466 2015-08-12
DKPA201500462 2015-08-12
DKPA201500462 2015-08-12
PCT/EP2016/069043 WO2017025565A1 (en) 2015-08-12 2016-08-10 2-amino-7a-phenyl-3,4,4a,5,7,7a-hexahydrofuro[3,4-b]pyridines as bace1 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107849056A true CN107849056A (zh) 2018-03-27

Family

ID=56694131

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680045232.6A Pending CN107849056A (zh) 2015-08-12 2016-08-10 Bace1抑制剂2‑氨基‑7a‑苯基‑3,4,4a,5,7,7a‑六氢呋喃并[3,4‑b]吡啶

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20180230160A1 (zh)
EP (1) EP3334738A1 (zh)
JP (1) JP2018527338A (zh)
CN (1) CN107849056A (zh)
HK (1) HK1254355A1 (zh)
MA (1) MA42604A (zh)
WO (1) WO2017025565A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3535271A1 (en) * 2016-11-04 2019-09-11 Janssen Pharmaceutica NV 4,4a,5,7-tetrahydro-3h-furo[3,4-b]pyridinyl compounds

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102471296A (zh) * 2009-07-09 2012-05-23 伊莱利利公司 Bace抑制剂
WO2014204730A1 (en) * 2013-06-18 2014-12-24 Eli Lilly And Company Bace inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102471296A (zh) * 2009-07-09 2012-05-23 伊莱利利公司 Bace抑制剂
WO2014204730A1 (en) * 2013-06-18 2014-12-24 Eli Lilly And Company Bace inhibitors

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DANIEL OEHLRICH，等: "The evolution of amidine-based brain penetrant BACE1 inhibitors", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *
HANS HILPERT，等: "β‑Secretase (BACE1) Inhibitors with High in Vivo Efficacy Suitable for Clinical Evaluation in Alzheimer’s Disease", 《J. MED. CHEM.》 *

Also Published As

Publication number Publication date
HK1254355A1 (zh) 2019-07-19
JP2018527338A (ja) 2018-09-20
US20180230160A1 (en) 2018-08-16
EP3334738A1 (en) 2018-06-20
MA42604A (fr) 2018-06-20
WO2017025565A1 (en) 2017-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI790704B (zh) 含腈之抗病毒化合物類
CN106029639B (zh) 治疗阿尔茨海默病的bace1抑制剂的2-氨基-3，5，5-三氟-3，4，5，6-四氢吡啶
CN107074809A (zh) 作为用于治疗阿尔茨海默病的bace1抑制剂的2‑氨基‑3,5‑二氟‑3,6‑二甲基‑6‑苯基‑3,4,5,6‑四氢吡啶
CN107849011A (zh) 作为bace1抑制剂的2‑氨基‑3‑氟‑3‑(氟甲基)‑6‑甲基‑6‑苯基‑3,4,5,6‑四氢吡啶
CN108137586B (zh) 作为LRRK2抑制剂的新颖咪唑并[4,5-c]喹啉和咪唑并[4,5-c][1,5]萘啶衍生物
JP7179015B2 (ja) Ｓｅｓｔｒｉｎ－ＧＡＴＯＲ２相互座用のモジュレーターおよびその使用
CN107257801B (zh) 选择性bace1抑制剂
CN107074810A (zh) 作为bace1抑制剂的2‑氨基‑5,5‑二氟‑6‑(氟甲基)‑6‑苯基‑3,4,5,6‑四氢吡啶
CN107074836A (zh) 作为bace1抑制剂的2‑氨基‑6‑(二氟甲基)‑5,5‑二氟‑6‑苯基‑3,4,5,6‑四氢吡啶
SK160996A3 (en) Inhibitors of interleukin-1&#39;beta&#39; converting enzyme, a method for their selection and pharmaceutical compositions containing them
CN109069869A (zh) 双环pad4抑制剂
JP2022000421A (ja) τリン酸化を阻害する方法
EP3630759A1 (fr) Composés inhibiteurs des canaux ioniques pour le traitement du cancer
BR112019018688A2 (pt) derivados de imidazo[4,5-c] quinolina como inibidores de lrrk2
CN108137608B (zh) Janus激酶1选择性抑制剂及其药物用途
CN107921138A (zh) 包括给予2‑氨基‑3,5,5‑三氟‑3,4,5,6‑四氢吡啶的联合治疗
US20230331679A1 (en) Naphthalene monoimide compounds and methods thereof
CN107849056A (zh) Bace1抑制剂2‑氨基‑7a‑苯基‑3,4,4a,5,7,7a‑六氢呋喃并[3,4‑b]吡啶
CA3205020A1 (en) Benzimidazole derivatives and their use as inhibitors of itk for the treatment of skin disease
CN108699051A (zh) Bace1抑制剂
WO2018114910A1 (en) 6-amino-5-fluoro-5-(fluoromethyl)-2,3,4,5-tetrahydropyridin-2-yl-phenyl-5-(methoxy-d3)-pyrazine-2-carboxamides and fluorinated derivatives thereof as bace1 inhibitors
TWI845093B (zh) 含腈之抗病毒化合物類
CN109121412A (zh) N-[3-[2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噁嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺及其(4aR,5S,7aS)异构体作为选择性BACE1抑制剂用于治疗如阿尔茨海默病的用途
CN117794896A (zh) 用于治疗冠状病毒感染的蛋白酶抑制剂
JP2021522290A (ja) １−イミダゾチアジアゾロ−２ｈ−ピロール−５−オン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180327